CFTR inhibitory factor
सी. एफ. टी. आर. अवरोधक कारक (सी. आई. एफ.) एक प्रोटीन विषाणु कारक है जो ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया स्यूडोमोनास एरुगिनोसा और एसिनेटोबैक्टर नोसोकोमियालिस द्वारा स्रावित होता है। डार्टमाउथ मेडिकल स्कूल में खोजा गया, सी. आई. एफ. यूकेरियोटिक उपकला कोशिकाओं में चुनिंदा ए. बी. सी. ट्रांसपोर्टरों की तस्करी को बदलने में सक्षम है, जैसे कि सिस्टिक फाइब्रोसिस ट्रांसमेम्ब्रेन कंडक्टेंस रेगुलेटर (सी. एफ. टी. आर.), और पी-ग्लाइकोप्रोटीन मेजबान ड्यूबिक्विटेटिंग मशीनरी के साथ हस्तक्षेप करके। सी. एफ. टी. आर. के यूबीक्विटिन-मध्यस्थ क्षरण को बढ़ावा देकर, सी. आई. एफ. कोशिकीय स्तर पर सिस्टिक फाइब्रोसिस की फीनोकापी करने में सक्षम है। सी. आई. एफ. जीन को 3 जीन ऑपरॉन के हिस्से के रूप में लिखा जाता है, जिसकी अभिव्यक्ति सी. आई. एफ. आर., एक टी. टी. आर. परिवार दमनक द्वारा नकारात्मक रूप से नियंत्रित होती है। सी. आई. एफ. क्रिया के कोशिकीय तंत्र की खोज सबसे पहले मानव वायुमार्ग उपकला कोशिकाओं के साथ पी. एरुगिनोसा को सह-संवर्धित करके और एक ध्रुवीकृत एकल परत में क्लोराइड आयन प्रवाह पर परिणामी प्रभाव की निगरानी करके की गई थी। सह-संवर्धन के बाद, सी. एफ. टी. आर. विशिष्ट क्लोराइड आयन प्रवाह में भारी कमी पाई गई। यह इन कोशिकाओं की एपिकल सतह पर सी. एफ. टी. आर. के कम स्तर के कारण निर्धारित किया गया था। यह प्रभाव बाद में पी. एरुगिनोसा द्वारा उत्पादित एकल स्रावित प्रोटीन का परिणाम पाया गया, जिसे इस प्रारंभिक फेनोटाइप के लिए सी. एफ. टी. आर. अवरोधक कारक नाम दिया गया था। सी. आई. एफ. को पी. एरुगिनोसा पी. ए. 14 द्वारा घुलनशील प्रोटीन के रूप में स्रावित किया जाता है और साथ ही बाहरी झिल्ली पुटिकाओं (ओ. एम. वी.) में पैक किया जाता है। ओ. एम. वी. में लागू होने पर सी. आई. एफ. कहीं अधिक शक्तिशाली होता है, संभवतः वितरण की दक्षता के कारण। शुद्ध, पुनः संयोजक सी. आई. एफ. प्रोटीन को स्तनधारी कोशिकाओं के ध्रुवीकृत एकल परतों पर लगाया जा सकता है और एपिकल झिल्ली से सी. एफ. टी. आर. और पी-ग्लाइकोप्रोटीन को हटाने को बढ़ावा दिया जा सकता है। सी. आई. एफ. मेजबान ड्यूबिक्विटिलेशन प्रणाली में हस्तक्षेप करके इसे पूरा करता है। एपॉक्साइड हाइड्रोलेज एंजाइम तंत्र सी. आई. एफ. अद्वितीय सब्सट्रेट चयनात्मकता के साथ एक एपॉक्साइड हाइड्रोलेज (ई. एच.) है। सी. आई. एफ. विषाणु कारक के रूप में कार्य करने वाले ई. एच. का पहला उदाहरण है। संरचनात्मक तुलना के आधार पर, ऐसा प्रतीत होता है कि एंजाइम अवशेषों एएसपी129, जीएलयू153 और हिज297 के उत्प्रेरक त्रयी का उपयोग करता है, जिसमें सहायक अवशेष हिज177 और टायर239 रिंग खोलने के दौरान एपॉक्साइड ऑक्सीजन का समन्वय करते हैं। सी. आई. एफ. एक ई. एच. का पहला उदाहरण भी है जो कैनॉनिकल टायर-टायर जोड़ी के बजाय एक एपॉक्साइड सब्सट्रेट को समन्वित करने के लिए हिज-टायर जोड़ी का उपयोग करता है। प्रस्तावित एंजाइम तंत्र में, एएसपी129 न्यूक्लियोफिलिक रूप से एक सब्सट्रेट के एपॉक्साइड भाग के कार्बन पर हमला करता है, जिससे एक एस्टर से जुड़े एंजाइम-एसाइल मध्यवर्ती का निर्माण होता है। जिस वरीयता के लिए कार्बन पर हमला किया जाता है, वह सब्सट्रेट के आधार पर भिन्न होता है। प्रतिक्रिया के दूसरे चरण में, एक जल अणु चार्ज-रिले हिज297-ग्लू153 जोड़ी द्वारा सक्रिय होता है, और एस. पी. 129 के सी. जी. एम. पर न्यूक्लियोफिलिक हमले से गुजरता है। यह एस्टर समूह को हाइड्रोलाइज करता है, जिससे हाइड्रोलिसिस उत्पाद को विसिनल डायोल के रूप में मुक्त किया जाता है। संरचना सी. आई. एफ. प्रोटीन के α/β हाइड्रोलेज परिवार से संबंधित है। इसकी संरचना एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफी द्वारा निर्धारित की गई थी और इसमें एक कैप डोमेन के साथ कैनॉनिकल α/β हाइड्रोलेज फोल्ड होता है, जिसका उपयोग यह घोल में संवैधानिक रूप से होमो-डाइमराइज़ करने के लिए करता है। सक्रिय स्थल को α/β हाइड्रोलेज कोर और कैप के बीच इंटरफेस पर प्रोटीन के आंतरिक भाग में दफनाया जाता है। संदर्भ विषाणु कारक सिस्टिक फाइब्रोसिस