TCEP
टी. सी. ई. पी. (ट्रिस (2-कार्बोक्सीथाइल) फॉस्फीन) एक कम करने वाला एजेंट है जिसका उपयोग अक्सर जैव रसायन और आणविक जीव विज्ञान अनुप्रयोगों में किया जाता है। यह अक्सर तैयार किया जाता है और 286.65 ग्राम/मोल के आणविक भार के साथ हाइड्रोक्लोराइड नमक (TCEP-HCl) के रूप में उपयोग किया जाता है। यह पानी में घुलनशील है और तटस्थ पीएच पर एक स्थिर समाधान के रूप में उपलब्ध है और कम करने वाले एजेंट को हटाने की सुविधा के लिए एक अगरोज समर्थन पर स्थिर है। अनुप्रयोग टी. सी. ई. पी. का उपयोग अक्सर जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस के लिए एक प्रारंभिक चरण के रूप में प्रोटीन के भीतर और बीच में डाइसल्फ़ाइड बंधन को तोड़ने के लिए एक कम करने वाले एजेंट के रूप में किया जाता है। इस उद्देश्य के लिए उपयोग किए जाने वाले अन्य दो सबसे आम एजेंटों (डाइथिओथ्रेटोल और β-मर्केप्टोइथेनॉल) की तुलना में, टी. सी. ई. पी. में गंधहीन होने के फायदे हैं, एक अधिक शक्तिशाली कम करने वाला एजेंट, एक अपरिवर्तनीय कम करने वाला एजेंट (इस अर्थ में कि टी. सी. ई. पी. पुनः उत्पन्न नहीं होता है-टी. सी. ई. पी.-मध्यस्थ डाइसल्फ़ाइड दरार का अंतिम उत्पाद वास्तव में दो मुक्त थियोल्स/सिस्टीन है), अधिक हाइड्रोफिलिक, और हवा में ऑक्सीकरण के लिए अधिक प्रतिरोधी है। यह स्थिर धातु आत्मीयता क्रोमैटोग्राफी में उपयोग की जाने वाली धातुओं को भी कम नहीं करता है। टी. सी. ई. पी. विशेष रूप से तब उपयोगी होता है जब सिस्टीन अवशेषों को मेलिमाइड्स के साथ लेबल किया जाता है। टी. सी. ई. पी. सिस्टीन को डाय-सल्फाइड बंधन बनाने से रोक सकता है और डाइथिओथ्रेइटोल और β-मर्केप्टोइथेनॉल के विपरीत, यह मैलिमाइड के साथ उतनी आसानी से प्रतिक्रिया नहीं करेगा। हालाँकि, टी. सी. ई. पी. को कुछ स्थितियों में मैलिमाइड के साथ प्रतिक्रिया करने के लिए बताया गया है। टी. सी. ई. पी. का उपयोग आर. एन. ए. पृथक्करण के लिए ऊतक समरूपीकरण प्रक्रिया में भी किया जाता है। पराबैंगनी-दृश्यमान स्पेक्ट्रोस्कोपी अनुप्रयोगों के लिए, टी. सी. ई. पी. तब उपयोगी होता है जब 250 से 285 नैनोमीटर तक के अवशोषण में हस्तक्षेप से बचना महत्वपूर्ण होता है जो डाइथिओथ्रेटोल के साथ हो सकता है। डिथिओथ्रेइटोल धीरे-धीरे समय के साथ इस स्पेक्ट्रम में अधिक से अधिक प्रकाश को अवशोषित करेगा क्योंकि विभिन्न रेडॉक्स प्रतिक्रियाएं होती हैं। इतिहास ट्रायलकाइफॉस्फीन के साथ जैव अणुओं की कमी पर दशकों तक बहुत कम ध्यान दिया गया क्योंकि ऐतिहासिक रूप से उपलब्ध फॉस्फीन बेहद खराब और/या पानी में अघुलनशील थे। 1969 में, टी. सी. ई. पी. को जैव रासायनिक उपयोग के लिए उपयुक्त एक ऑडरलेस और पानी में घुलनशील ट्राइअल्कीफॉस्फिन के रूप में बताया गया था, हालांकि जैव रासायनिक अनुप्रयोगों के लिए टी. सी. ई. पी. के संभावित उपयोग को दशकों तक लगभग पूरी तरह से नजरअंदाज कर दिया गया था। 1991 में, बर्न्स ने टी. सी. ई. पी. के लिए एक नई सुविधाजनक सिंथेटिक प्रक्रिया की सूचना दी, जिसने टी. सी. ई. पी. को अधिक व्यापक रूप से उपलब्ध होने दिया और जैव रासायनिक उपयोग के लिए एक "नए" कम करने वाले एजेंट के रूप में विपणन किया, और इस प्रकार टी. सी. ई. पी. पूरे 1990 के दशक में अधिक व्यापक उपयोग में आया। प्रतिक्रियाएँ कुछ अन्य दुष्प्रभाव भी बताए गए हैंः टी. सी. ई. पी. और गर्मी (90 डिग्री सेल्सियस) की उपस्थिति में सिस्टीन अवशेष का एलेनिन में रूपांतरण। धीमी (लेकिन महत्वपूर्ण, 40 प्रतिशत दरार 4 डिग्री सेल्सियस पर दो सप्ताह के भंडारण के लिए रिपोर्ट की गई) हल्की परिस्थितियों में सिस्टीन अवशेषों पर प्रोटीन रीढ़ की हड्डी दरार। जैविक अनुसंधान में उपयोग टी. सी. ई. पी. विभिन्न रासायनिक आपूर्तिकर्ताओं से हाइड्रोक्लोराइड नमक के रूप में उपलब्ध है। जब यह पानी में घुल जाता है, तो टी. सी. ई. पी.-एच. सी. एल. अम्लीय होता है। एक रिपोर्ट की गई तैयारी 0.5 एम टी. सी. ई. पी.-एच. सी. एल. जलीय स्टॉक घोल है जो पी. एच. को निकट-तटस्थ पी. एच. में समायोजित किया जाता है और-20 डिग्री सेल्सियस पर जमे हुए संग्रहीत किया जाता है। टी. सी. ई. पी. कथित तौर पर फॉस्फेट बफ़र्स में कम स्थिर है। 2-मेरकैप्टोइथेनॉल (बी. एम. ई.) डाइथिओथ्रेइटोल (डी. टी. टी.) डाइथिओब्युटिलामाइन (डी. टी. बी. ए.) संदर्भ कार्बोक्सिलिक एसिड तृतीयक फॉस्फीन कम करने वाले कारक भी देखें।