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अनुवर्ती कोशिका संवर्धन एक प्रकार का कोशिका संवर्धन है जिसमें वृद्धि होने के लिए कोशिकाओं को सतह से जोड़ने की आवश्यकता होती है। अधिकांश कशेरुकी व्युत्पन्न कोशिकाओं (हेमेटोपोएटिक कोशिकाओं के अपवाद के साथ) को संवर्धित किया जा सकता है और कोशिका आसंजन और प्रसार को सुविधाजनक बनाने के लिए 2 आयामी मोनोलेयर की आवश्यकता होती है। कोशिका के नमूने ऊतक प्रत्यारोपण या कोशिका निलंबन संवर्धन से लिए जा सकते हैं। पोषक तत्व युक्त वृद्धि माध्यम की अधिकता के साथ अनुवर्ती कोशिका संवर्धन तब तक बढ़ते रहेंगे जब तक कि वे उपलब्ध सतह क्षेत्र को कवर नहीं करते। ट्रिप्सिन जैसे प्रोटीज का उपयोग आमतौर पर कोशिकाओं से फ्लास्क तक के आसंजन को तोड़ने के लिए किया जाता है। वैकल्पिक रूप से, सेल स्क्रैपर्स का उपयोग यंत्रवत रूप से आसंजन को तोड़ने के लिए किया जा सकता है यदि प्रोटीज पेश करने से सेल कल्चर को नुकसान हो सकता है। सस्पेंशन कल्चर के विपरीत, अन्य मुख्य प्रकार की कोशिका कल्चर, एडेरेंट कल्चर के लिए यांत्रिक या एंजाइमेटिक पृथक्करण का उपयोग करके नियमित रूप से पारित करने की आवश्यकता होती है। कल्चर को एक उल्टे सूक्ष्मदर्शी का उपयोग करके देखा जा सकता है, हालांकि पालन संस्कृतियों का विकास उपलब्ध सतह क्षेत्र पर निर्भर करता है। इस कारण से, अनुवर्ती कोशिका संवर्धन का उपयोग आमतौर पर कोशिकाओं की उच्च उपज प्राप्त करने के लिए नहीं किया जाता है, इसके बजाय निलंबन संवर्धन के उपयोग को प्राथमिकता दी जाती है। विधियाँ और रखरखाव कोशिकाओं को पृथक करना अनुवर्ती संवर्धनों के लिए उपयोग की जाने वाली प्राथमिक कोशिकाओं को एक विषय से अलग और उपचारित किया जाना चाहिए, या पहले से मौजूद कोशिका रेखाओं से स्थानांतरित किया जा सकता है। अनुवर्ती कोशिकाओं को पहले एक सतह से जुड़ी एक परत में स्थानांतरित किया जाना चाहिए, और उन्हें उनके रूपात्मक अंतरों द्वारा वर्गीकृत किया जाता है। फाइब्रोब्लास्ट जैसी अनुवर्ती कोशिकाओं में एक रैखिक और फैला हुआ आकार होता है, और मोनोलेयर से जुड़े होने पर स्थानांतरित हो जाते हैं। एपिथेलियल जैसी अनुवर्ती कोशिकाओं में एक व्यापक और बहुभुज आकार होता है, और मोनोलेयर से जुड़े होने पर वे स्थानांतरित नहीं होती हैं। एक बार जब कोशिकाएं अपने स्रोत से ठीक से अलग हो जाती हैं और मीडिया में स्थानांतरित हो जाती हैं, तो कोशिका मार्ग का संचालन किया जा सकता है। अनुवर्ती कोशिका संवर्धनों को पारित करते समय, प्रयोग किए गए मीडिया को बार-बार पाइप आउट किया जाना चाहिए और नए मीडिया के साथ प्रतिस्थापित किया जाना चाहिए। कल्चर पोत को बार-बार टैप भी किया जा सकता है, जिसे कोशिका अलगाव को सुविधाजनक बनाने के लिए यांत्रिक या एंजाइमेटिक तरीकों के साथ जोड़ा जाना चाहिए। कल्चर पोत को अपकेंद्रित भी किया जा सकता है, जिससे एक सुपरनेटेंट बनता है जिसे पिपेट का उपयोग करके निकाला जा सकता है। कोशिकाओं को प्रति सप्ताह 2 से 3 बार खिलाया जाना चाहिए, और इष्टतम कोशिका प्रसार सुनिश्चित करने के लिए उचित तापमान, आर्द्रता, प्रकाश और पीएच पर संवर्धित किया जाना चाहिए। पासिंग (सबकल्चरिंग) कोशिकाएँ जबकि पालन करने वाली संस्कृतियाँ सस्पेंशन संस्कृतियों के साथ समानताएँ साझा करती हैं, वे कैसे संवर्धित और पारित हैं, इसमें कई प्रमुख अंतर हैं। एडेरेंट कल्चर पासेजिंग के लिए, खर्च किए गए माध्यम को पहले अपशिष्ट उत्पाद के रूप में कोशिकाओं वाले फ्लास्क से बाहर निकाला जाता है। कोशिकाओं को मीडिया से चिपकाया जाता है जिसे एक संवर्धन पात्र में नहीं हटाया गया था, और कोशिकाओं को अलग करने के लिए धोने और ऊष्मायन चरणों की एक श्रृंखला आवश्यक होती है। धोने के चरणों के लिए, एक संतुलित नमक घोल को कोशिका संवर्धन के विपरीत दिशा में डाला जाता है, और फिर संतुलित नमक घोल को निकालने से पहले संवर्धन पात्र को हिलाया जाता है। ऊष्मायन चरणों के लिए संवर्धन वाहिका पर गर्मी लगाई जाती है, जिससे प्रोटीन विकृतीकरण होता है और कोशिकाओं को मीडिया से धीरे-धीरे अलग किया जाता है। इसी तरह सस्पेंशन कल्चर के लिए, कोशिकाओं की कुल संख्या की गणना एक हीमोसाइटोमीटर और ट्राइपन ब्लू का उपयोग करके की जा सकती है। वाणिज्यिक अनुप्रयोग और सीमाएं अनुवर्ती संस्कृतियों का उपयोग आमतौर पर कोशिका विज्ञान और छोटे पैमाने पर सेलुलर उत्पादों की कटाई के लिए किया जाता है। चूँकि उनका विकास 2डी तक सीमित है, इसलिए इन-विवो कोशिका संरचना और कार्य का अध्ययन करने के लिए अनुवर्ती संस्कृतियों का उपयोग करना मुश्किल है। इस सीमा से बचने और दवा परीक्षण के लिए अनुवर्ती कोशिका संवर्धन का उपयोग करने के लिए 3डी सूक्ष्म वाहक का उपयोग करके अनुवर्ती कोशिका संवर्धन को विकसित करने के लिए अनुसंधान किया जा रहा है। अनुवर्ती संस्कृतियों के व्यावसायिक अनुप्रयोगों में शामिल हैंः अनुवर्ती कोशिकाओं का उत्पादन जो टीके के विकास के लिए उपयोग किए जाने वाले रुचि के प्रोटीन बनाते हैं। कोशिका और जीन चिकित्सा के लिए वायरल वैक्टर के साथ संयोजन में उपयोग की जाने वाली अनुवर्ती कोशिकाएँ। विट्रो में अनुवर्ती कोशिकाओं को सूक्ष्म और नैनो प्रौद्योगिकी प्रदान करना। कैंसर कोशिका जांच के लिए अनुवर्ती कोशिका आकृति विज्ञान को समायोजित करना। संदर्भ कोशिका संस्कृति