Surround optical-fiber immunoassay
सराउंड ऑप्टिकल-फाइबर इम्यूनोएसे (एस. ओ. एफ. आई. ए.) एक अतिसंवेदनशील, इन विट्रो डायग्नोस्टिक प्लेटफॉर्म है जिसमें एक सराउंड ऑप्टिकल-फाइबर असेंबली शामिल है जो एक पूरे नमूने से प्रतिदीप्ति उत्सर्जन को पकड़ती है। तकनीक की परिभाषित विशेषताएँ इसकी पहचान, संवेदनशीलता और गतिशील सीमा की अत्यधिक उच्च सीमा हैं। सोफिया की संवेदनशीलता को अटोग्राम स्तर (10−18 ग्राम) पर मापा जाता है, जिससे यह पारंपरिक नैदानिक तकनीकों की तुलना में लगभग एक अरब गुना अधिक संवेदनशील हो जाता है। अपनी बढ़ी हुई गतिशील सीमा के आधार पर, एस. ओ. एफ. आई. ए. सटीक अनुमापन की सुविधा प्रदान करते हुए परिमाण के 10 क्रम से अधिक के नमूने में विश्लेषण के स्तरों में भेदभाव करने में सक्षम है। एक नैदानिक मंच के रूप में, सोफिया के अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला है। कई अध्ययनों ने पहले ही रोग वाहकों के रक्त और मूत्र में प्राकृतिक रूप से होने वाले प्रियॉन का पता लगाने की सोफिया की अभूतपूर्व क्षमता का प्रदर्शन किया है। इससे वी. सी. जे. डी., बी. एस. ई., स्क्रैपी, सी. डब्ल्यू. डी. और अन्य पारगम्य स्पंजफॉर्म एन्सेफैलोपैथी के लिए पहला विश्वसनीय पूर्व-शव परीक्षण होने की उम्मीद है। तकनीक की अत्यधिक संवेदनशीलता को देखते हुए, अतिरिक्त अद्वितीय अनुप्रयोगों का अनुमान लगाया जाता है, जिसमें अल्जाइमर और पार्किंसंस रोग जैसे अन्य न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के लिए इन विट्रो परीक्षण शामिल हैं। सोफिया को लॉस एलामोस नेशनल लेबोरेटरी और स्टेट यूनिवर्सिटी ऑफ न्यूयॉर्क के बीच एक संयुक्त-सहयोगात्मक अनुसंधान परियोजना के परिणामस्वरूप विकसित किया गया था, और इसे रक्षा विभाग के राष्ट्रीय प्रियॉन अनुसंधान कार्यक्रम द्वारा समर्थित किया गया था। पृष्ठभूमि लेजर-प्रेरित प्रतिदीप्ति के साथ-साथ अन्य प्रकार के स्पेक्ट्रोस्कोपिक माप, जैसे इन्फ्रारेड, पराबैंगनी-दृश्यमान स्पेक्ट्रोस्कोपी, फॉस्फोरेसेन्स, आदि करने की पारंपरिक विधि, विश्लेषण किए जाने वाले नमूने को रखने के लिए एक छोटे पारदर्शी प्रयोगशाला पात्र, एक क्यूवेट का उपयोग करना है। एक माप करने के लिए, क्यूवेट को जांच किए जाने वाले तरल से भरा जाता है और फिर क्यूवेट के चेहरे में से एक के माध्यम से केंद्रित लेजर से प्रकाशित किया जाता है। लेजर-प्रेरित फ्लोरोसेंट प्रकाश को एकत्र करने के लिए इनपुट विंडो से 90° पर स्थित क्यूवेट के एक चेहरे के साथ एक लेंस रखा जाता है। केवल क्यूवेट की एक छोटी मात्रा वास्तव में लेजर द्वारा प्रकाशित होती है और एक पता लगाने योग्य स्पेक्ट्रोस्कोपिक उत्सर्जन का उत्पादन करती है। आउटपुट संकेत काफी कम हो जाता है क्योंकि लेंस ठोस कोण पर विचार करने के कारण स्पेक्ट्रोस्कोपिक उत्सर्जन का केवल 10 प्रतिशत ही उठाता है। इस तकनीक का उपयोग कम से कम 75 वर्षों से किया जा रहा है; लेजर के अस्तित्व से पहले भी, जब पारंपरिक प्रकाश स्रोतों का उपयोग प्रतिदीप्ति को उत्तेजित करने के लिए किया जाता था। सोफिया कम संग्रह दक्षता की समस्या को हल करता है, क्योंकि यह विश्लेषण किए जा रहे नमूने से उत्पादित लगभग सभी प्रतिदीप्ति प्रकाश को एकत्र करता है, जिससे प्रतिदीप्ति संकेत की मात्रा पारंपरिक उपकरण की तुलना में लगभग 10 के कारक से बढ़ जाती है। तकनीकी लाभ सोफिया एक नमूने में विश्लेषकों के स्पेक्ट्रोस्कोपिक पहचान को बढ़ाने के लिए बेहतर ऑप्टिकल ज्यामिति के लिए एक उपकरण और विधि है। आविष्कार ने पहले से ही प्रियॉन और अन्य निम्न-स्तरीय विश्लेषणों का अतिसंवेदनशील पता लगाने के लिए एक उपकरण और विधि के रूप में अपनी प्रूफ-ऑफ-कॉन्सेप्ट कार्यक्षमता का प्रदर्शन किया है। सोफिया एंटीजन पकड़ने के लिए मोनोक्लोनल एंटीबॉडी में निहित विशिष्टता को सराउंड ऑप्टिकल डिटेक्शन तकनीक की संवेदनशीलता के साथ जोड़ती है। बेहद कम संकेत स्तरों का पता लगाने के लिए, एक कम शोर, फोटोवोल्टिक डायोड का उपयोग सिस्टम के लिए डिटेक्टर के रूप में किया जाता है। सोफिया नमूना धारण करने वाली एक सूक्ष्म केशिका नली को रोशन करने के लिए एक लेजर का उपयोग करता है। फिर, नमूने से एकत्र प्रकाश को ऑप्टिकल फाइबर से प्रकाशिकी को स्थानांतरित करने के लिए निर्देशित किया जाता है। इसके बाद, प्रकाश को पता लगाने के लिए ऑप्टिकल रूप से फ़िल्टर किया जाता है, जिसे डिजिटल सिग्नल प्रोसेसिंग लॉक-इन एम्पलीफाइड द्वारा शोर के खिलाफ प्रवर्धित वर्तमान माप के रूप में किया जाता है। परिणाम डेटा अधिग्रहण के लिए डिज़ाइन किए गए कंप्यूटर और सॉफ्टवेयर पर प्रदर्शित किए जाते हैं। इस तरह की पहचान सरणी के कई फायदे हैं। मुख्य रूप से, यह कम सांद्रता पर बहुत छोटे नमूनों के उपयोग को लेजर-प्रेरित प्रतिदीप्ति तकनीक का उपयोग करके इष्टतम रूप से पूछताछ करने की अनुमति देता है। यह फाइबर-आधारित पहचान प्रणाली मौजूदा शॉर्ट-पल्स डिटेक्शन हार्डवेयर के अनुकूल है जिसे मूल रूप से एकल डीएनए अणुओं को अनुक्रमित करने के लिए विकसित किया गया था। ज्यामिति शॉर्ट-पल्स लेजर, एकल-अणु पहचान योजनाओं के लिए तैनाती के लिए भी उपयुक्त है। प्रणाली की बहु-पोर्ट ज्यामिति उपकरण की प्रत्येक भुजा से संकेतों के कुशल इलेक्ट्रॉनिक प्रसंस्करण की अनुमति देती है। अंत में, और शायद सबसे महत्वपूर्ण बात, फाइबर ऑप्टिक केबल अनिवार्य रूप से ऑप्टिकल संचरण में 100% कुशल होते हैं, जिनका क्षीणन 10 डीबी/किमी से कम होता है। इस प्रकार, एक बार किसी सुविधा में उपयोग के लिए तैनात होने के बाद, प्रतिदीप्ति जानकारी को फाइबरऑप्टिक रूप से एक दूरस्थ स्थान पर प्रेषित किया जा सकता है, जहां डेटा प्रसंस्करण और विश्लेषण किया जा सकता है। सोफिया सोफिया के घटकों में एक बहु-कुआँ प्लेट नमूना पात्र होता है, जो बहु-कुआँ प्लेट नमूना पात्र से नमूनों को एक नमूना धारक के भीतर निहित एक पारदर्शी केशिका तक क्रमिक रूप से ले जाने का एक स्वचालित साधन है, जो नमूने के साथ ऑप्टिकल संचार में एक उत्तेजना स्रोत है, जिसमें उत्तेजना स्रोत से विकिरण केशिका की लंबाई के साथ निर्देशित होता है, और जिसमें विकिरण एक संकेत को प्रेरित करता है जो नमूने से उत्सर्जित होता है, और, कम से कम एक रैखिक सरणी। सोफिया परख तैयारी में कदम लक्ष्य विश्लेषण को बढ़ाने और फिर केंद्रित करने के बाद, नमूनों को विशिष्टता के लिए एक एंटीबॉडी का उपयोग करके एक फ्लोरोसेंट डाई के साथ लेबल किया जाता है और फिर अंत में एक माइक्रोकेपिलरी ट्यूब में लोड किया जाता है। इस नली को एक विशेष रूप से निर्मित उपकरण में रखा जाता है ताकि लेजर का उपयोग करके डाई के उत्तेजित होने के बाद उत्सर्जित सभी प्रकाश को पकड़ने के लिए यह पूरी तरह से ऑप्टिकल फाइबर से घिरा हो। उपकरण प्रसंस्करण यह उपकरण एक स्पेक्ट्रोस्कोपिक (प्रकाश एकत्र करने) उपकरण है और एक नमूने में विश्लेषण का तेजी से पता लगाने और विश्लेषण करने के लिए संबंधित विधि है। नमूने के साथ ऑप्टिकल संचार में एक उत्तेजना स्रोत द्वारा नमूने को विकिरणित किया जाता है। उत्तेजना स्रोत में एक लेजर, एक फ्लैश लैंप, एक आर्क लैंप, एक प्रकाश उत्सर्जक डायोड, या इसी तरह शामिल हो सकते हैं, लेकिन यह सीमित नहीं है। चित्र 1 में सोफिया प्रणाली के वर्तमान संस्करण को दर्शाया गया है। चार रैखिक सरणियाँ (101) एक नमूना धारक (102) से विस्तारित होती हैं, जिसमें एक लंबा, पारदर्शी नमूना पात्र होता है जो दोनों सिरों पर खुला होता है, एक अंतिम बंदरगाह (103) तक। एंडपोर्ट (104) के दूरस्थ छोर को एंड पोर्ट असेंबली (200) में डाला जाता है। रैखिक सरणी (101) में ऑप्टिकल फाइबर की बहुलता होती है जिसका पहला छोर और दूसरा छोर होता है, ऑप्टिकल फाइबर की बहुलता वैकल्पिक रूप से एक सुरक्षात्मक और/या इन्सुलेटिंग म्यान से घिरी होती है। ऑप्टिकल फाइबर रैखिक रूप से व्यवस्थित होते हैं, जिसका अर्थ है कि वे एक दूसरे के संबंध में काफी हद तक सह-समतल होते हैं ताकि फाइबर की एक लंबी पंक्ति बनाई जा सके। अनुप्रयोग रुचि का विश्लेषण प्रकृति में जैविक या रासायनिक हो सकता है, और उदाहरण के लिए, केवल रासायनिक विकार (विषाक्त पदार्थ, चयापचय, दवाएं और दवा अवशेष), पेप्टाइड्स, प्रोटीन, सेलुलर घटक, वायरस और उनके संयोजन शामिल हो सकते हैं। रुचि का विश्लेषण या तो एक द्रव या एक सहायक माध्यम में हो सकता है, जैसे कि एक जेल। सोफिया ने अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला के साथ एक उपकरण के रूप में अपनी क्षमता का प्रदर्शन किया है। इनमें नैदानिक अनुप्रयोग शामिल हैं, जैसे कि रोगों का पता लगाना, रोगों की प्रवृत्ति की खोज करना, निदान स्थापित करना और निर्धारित उपचारों की प्रभावशीलता पर नज़र रखना, और गैर-नैदानिक अनुप्रयोग, जैसे कि मानव उपभोग के लिए लक्षित उत्पादों में विषाक्त पदार्थों और अन्य रोगजनक एजेंटों के प्रवेश को रोकनाः नैदानिक अनुप्रयोग-सोफिया का उपयोग बैक्टीरिया या वायरस का पता लगाने या पहचान करने के लिए दोनों गुणात्मक परीक्षण (या तो सकारात्मक या नकारात्मक परिणाम) करने के लिए किया जा सकता है, और जैविक स्थिरांक या मार्करों का पता लगाने या उनकी मात्रा निर्धारित करने के लिए मात्रात्मक परीक्षण (पदार्थों को मापने), जो एक संक्रामक बीमारी की उपस्थिति में शरीर द्वारा उत्पादित पदार्थ हैं (उदाहरण के लिए, एड्स चिकित्सा में, या दुरुपयोग का पता लगाने वाली दवाओं में विषाक्तता का स्तर)। गैर-नैदानिक अनुप्रयोग-एक प्रतिरक्षात्मक अध्ययन के रूप में, भोजन, फार्मास्यूटिकल्स, सौंदर्य प्रसाधन, या पानी के साथ-साथ सामान्य पर्यावरणीय मापदंडों और कृषि उत्पादों की गुणवत्ता की निगरानी के लिए व्यापक पैमाने पर सोफिया का उपयोग किया जा सकता है। उत्पादों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए बैक्टीरिया और विषाक्त पदार्थों का पता लगाने और उनकी जांच करने की क्षमता एक बढ़ती और अधिक जटिल आवश्यकता है, जिसका प्रमाण ई. कोलाई, साल्मोनेला, बी. एस. ई., एवियन इन्फ्लूएंजा आदि जैसे खाद्य और पशु जनित रोगों की बढ़ती घटनाओं से मिल सकता है। एस. ओ. एफ. आई. ए. का उपयोग रक्त या मूत्र जैसे शारीरिक तरल पदार्थों के नमूनों में प्रियॉन प्रोटीन (पी. आर. पी. एस. सी.) के असामान्य रूप का तेजी से पता लगाने के लिए किया गया है। पी. आर. पी. एस. सी. एक मार्कर प्रोटीन है जिसका उपयोग संचारी स्पंजफॉर्म एन्सेफैलोपैथी (टी. एस. ई.) के निदान में किया जाता है, जिसके उदाहरणों में मवेशियों में बोवाइन स्पंजफॉर्म एन्सेफैलोपैथी शामिल है। "पागल गाय" रोग), भेड़ में खरोंच, और मनुष्यों में क्रेट्ज़फेल्ट-जैकब रोग। वर्तमान में, पी. आर. पी. एस. सी. के पूर्व-शव परीक्षण का पता लगाने के लिए कोई त्वरित साधन मौजूद नहीं है जिसमें यह आमतौर पर शारीरिक तरल पदार्थों में दिखाई देता है। एस. ओ. एफ. आई. ए. के पास कम नमूना तैयार करने की आवश्यकता और इलेक्ट्रॉनिक नैदानिक उपकरणों को नियंत्रण क्षेत्र के बाहर रखने की अनुमति देने के फायदे हैं। पृष्ठभूमि टी. एस. ई., या प्रियॉन रोग, स्तनधारियों की संक्रामक न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारियाँ हैं जिनमें बोवाइन स्पंजफॉर्म एन्सेफैलोपैथी, हिरण और एल्क की पुरानी बर्बाद करने वाली बीमारी, भेड़ में खरोंच, और मनुष्यों में क्रेट्ज़फेल्ट-जैकब रोग (सी. जे. डी.) शामिल हैं। टी. एस. ई. संक्रमित ऊतकों के अंतर्ग्रहण या रक्त आधान द्वारा मेजबान से मेजबान में पारित किया जा सकता है। टी. एस. ई. के नैदानिक लक्षणों में मनुष्यों में गति और समन्वय और मनोभ्रंश का नुकसान शामिल है। उनके पास महीनों से लेकर वर्षों तक की ऊष्मायन अवधि होती है, लेकिन नैदानिक संकेतों के प्रकट होने के बाद, वे तेजी से आगे बढ़ते हैं, अनुपचारित होते हैं और हमेशा घातक होते हैं। टी. एस. ई. जोखिम-कमी के प्रयासों ने कृषि वस्तुओं, दवाओं, सौंदर्य प्रसाधनों, रक्त और ऊतक दान और जैव प्रौद्योगिकी उत्पादों के उत्पादन और व्यापार में महत्वपूर्ण बदलाव किए हैं। किसी जानवर या इंसान से मस्तिष्क के ऊतकों की पोस्टमॉर्टम न्यूरोपैथोलॉजिकल परीक्षा टी. एस. ई. निदान का 'स्वर्ण मानक' बना हुआ है और बहुत विशिष्ट है, लेकिन अन्य तकनीकों की तरह संवेदनशील नहीं है। खाद्य सुरक्षा में सुधार करने के लिए, सभी जानवरों की प्रियॉन रोगों के लिए प्री-मॉर्टम, प्रीक्लिनिकल परीक्षण, यानी लक्षणों की प्रस्तुति से पहले परीक्षण का उपयोग करके जांच करना फायदेमंद होगा। हालांकि, प्रीसिम्प्टोमैटिक होस्ट में पी. आर. पी. एस. सी. का स्तर बहुत कम होता है। इसके अलावा, पी. आर. पी. एस. सी. आम तौर पर शरीर के ऊतकों में असमान रूप से वितरित होते हैं, जिसमें तंत्रिका तंत्र के ऊतकों में लगातार उच्चतम सांद्रता पाई जाती है और रक्त या मूत्र जैसे आसानी से सुलभ शरीर के तरल पदार्थों में बहुत कम सांद्रता होती है। इसलिए, पी. आर. पी. की बहुत कम मात्रा का पता लगाने के लिए इस तरह के किसी भी परीक्षण की आवश्यकता होगी और पी. आर. पी. सी. और पी. आर. पी. एस. सी. में अंतर करना होगा। वर्तमान पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाने के तरीकों में समय लगता है और संदिग्ध जानवरों में बीमारी के एक या अधिक लक्षण प्रकट होने के बाद पोस्टमॉर्टम विश्लेषण का उपयोग किया जाता है। वर्तमान नैदानिक विधियाँ मुख्य रूप से पी. आर. पी. सी. और पी. आर. पी. एस. सी. के बीच भौतिक रासायनिक अंतरों का पता लगाने पर आधारित हैं, जो आज तक टी. एस. ई. के लिए एकमात्र विश्वसनीय मार्कर हैं। उदाहरण के लिए, सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले नैदानिक परीक्षण पी. आर. पी. एस. सी. के पी. के.-प्रतिरोधी हिस्से के एंटीबॉडी-आधारित पहचान के संयोजन में पी. आर. पी. सी. और पी. आर. पी. एस. सी. के बीच भेदभाव करने के लिए मस्तिष्क के नमूनों में पी. आर. पी. एस. सी. के सापेक्ष प्रोटीज प्रतिरोध का फायदा उठाते हैं। पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन, सीरोलॉजी या सेल कल्चर परख जैसे पारंपरिक तरीकों का उपयोग करके प्रियॉन रोगों का पता लगाना अभी तक संभव नहीं हुआ है। एक एजेंट-विशिष्ट न्यूक्लिक एसिड की अभी तक पहचान नहीं की गई है, और संक्रमित मेजबान एक एंटीबॉडी प्रतिक्रिया प्राप्त नहीं करता है। पी. आर. पी. सी. का संरचनात्मक रूप से परिवर्तित रूप पी. आर. पी. एस. सी. है। कुछ समूहों का मानना है कि टी. एस. ई. में पी. आर. पी. एस. सी. संक्रामक एजेंट (प्रियॉन एजेंट) है, जबकि अन्य समूह ऐसा नहीं करते हैं। पी. आर. पी. एस. सी. रोग प्रक्रिया का एक न्यूरोपैथोलॉजिकल उत्पाद, संक्रामक एजेंट का एक घटक, संक्रामक एजेंट स्वयं, या कुछ और हो सकता है। चाहे रोग की स्थिति में इसका वास्तविक कार्य कुछ भी हो, पी. आर. पी. एस. सी. स्पष्ट रूप से रोग प्रक्रिया से जुड़ा हुआ है, और इसका पता लगाना प्रियॉन रोग पैदा करने वाले एजेंट के साथ संक्रमण का संकेत देता है। एस. ओ. एफ. आई. ए. प्रियॉन रोगों के लिए एक पूर्व-शव परीक्षण के रूप में एस. ओ. एफ. आई. ए. अन्य बातों के अलावा, जैविक नमूनों में पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाकर प्रियॉन रोगों का निदान करने के तरीके प्रदान करता है। नमूने मस्तिष्क के ऊतक, तंत्रिका ऊतक, रक्त, मूत्र, लसीका द्रव, प्रमस्तिष्कमेरु द्रव, या उसका संयोजन हो सकते हैं। पी. आर. पी. एस. सी. की अनुपस्थिति विधियों की पहचान सीमा तक संक्रामक एजेंट के साथ कोई संक्रमण नहीं होने का संकेत देती है। पी. आर. पी. एस. सी. की उपस्थिति का पता लगाना प्रियॉन रोग से जुड़े संक्रामक एजेंट के साथ संक्रमण का संकेत देता है। प्रियॉन एजेंट के साथ संक्रमण का पता रोग की प्रगति के पूर्व-लक्षणात्मक और लक्षणात्मक दोनों चरणों में लगाया जा सकता है। सोफिया के साथ ये और अन्य सुधार हासिल किए गए हैं। सोफिया की संवेदनशीलता और विशिष्टता सामान्य और असामान्य पी. आर. पी. समरूपों के बीच अंतर करने के लिए पी. के. पाचन की आवश्यकता को समाप्त करती है। रक्त प्लाज्मा में पी. आर. पी. एस. सी. की आगे की पहचान को सीमित प्रोटीन मिसफोल्डिंग साइक्लिक एम्पलीफिकेशन (पी. एम. सी. ए.) और उसके बाद सोफिया द्वारा संबोधित किया गया है। सोफिया की संवेदनशीलता के कारण, पी. एम. सी. ए. चक्रों को कम किया जा सकता है, इस प्रकार सहज पी. आर. पी. एस. सी. गठन और गलत-सकारात्मक नमूनों का पता लगाने की संभावना कम हो जाती है। सोफिया अत्यधिक संवेदनशील उपकरण का उपयोग करके विश्लेषण के तरीके प्रदान करके मनुष्यों सहित पूर्व लक्षणात्मक और लक्षणात्मक टी. एस. ई. संक्रमित जानवरों दोनों में प्रियॉन रोगों का पता लगाने में बढ़ी हुई संवेदनशीलता की जरूरतों को पूरा करता है, जिसके लिए हाल ही में पी. आर. पी. के खिलाफ विकसित मैब्स के संयोजन में पहले वर्णित तरीकों की तुलना में कम नमूना तैयार करने की आवश्यकता होती है। सोफिया के वर्तमान संस्करण की विधि मस्तिष्क के ऊतकों में पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाने के लिए पर्याप्त संवेदनशीलता स्तर प्रदान करती है। जब सीमित एस. पी. एम. सी. ए. के साथ जोड़ा जाता है, तो वर्तमान आविष्कारों के तरीके रक्त प्लाज्मा, ऊतक और एकत्र किए गए अन्य तरल पदार्थों में पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाने के लिए पर्याप्त संवेदनशीलता स्तर प्रदान करते हैं। विधियाँ एंटीजन पकड़ने और एकाग्रता के लिए मैब्स की विशिष्टता को सराउंड ऑप्टिकल फाइबर डिटेक्शन तकनीक की संवेदनशीलता के साथ जोड़ती हैं। मस्तिष्क होमोजेनेट में पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाने के लिए पहले वर्णित तरीकों के विपरीत, इन तकनीकों का उपयोग जब मस्तिष्क होमोजेनेट का अध्ययन करने के लिए किया जाता है, तो बीजयुक्त पोलीमराइजेशन, प्रवर्धन या एंजाइमेटिक पाचन (उदाहरण के लिए, प्रोटीनेज के, या "पी. के". द्वारा) का उपयोग नहीं किया जाता है। यह महत्वपूर्ण है क्योंकि पिछली रिपोर्टों ने विभिन्न पी. के. संवेदनशीलता के साथ पी. आर. पी. एस. सी. समरूपों के अस्तित्व का संकेत दिया है, जो परख की विश्वसनीयता को कम करता है। इस परख की संवेदनशीलता इसे जैविक तरल पदार्थों में तेजी से प्रियॉन का पता लगाने वाले परख के लिए एक मंच के रूप में उपयुक्त बनाती है। प्रियॉन रोगों के अलावा, यह विधि संक्रमण और विकारों के एक विस्तृत स्पेक्ट्रम के लिए तेजी से, उच्च-थ्रूपुट परीक्षण के लिए एक साधन प्रदान कर सकती है। जबकि इम्यूनोप्रेसिपिटेशन के साथ एस. पी. एम. सी. ए. के लगभग 40 चक्र एलिसा या वेस्टर्न ब्लॉटिंग द्वारा प्लाज्मा में पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाने के लिए अपर्याप्त पाए गए, पी. आर. पी. एस. सी. को भी सोफिया विधियों द्वारा आसानी से मापा गया है। वर्तमान परख मंच के लिए आवश्यक चक्रों की सीमित संख्या पी. एम. सी. ए. से संबंधित गलत-सकारात्मक परिणाम प्राप्त करने की संभावना को लगभग समाप्त कर देती है जैसे कि पहले रिपोर्ट किए गए (थोर्न और टेरी, 2008)। अन्य नैदानिक अनुप्रयोग बायोमार्कर अनुसंधान के क्षेत्र में तेजी से विकास के साथ, कई संक्रमण और विकार जिनका इन विट्रो परीक्षण के माध्यम से निदान करना संभव नहीं है, तेजी से संभव हो रहे हैं। एस. ओ. एफ. आई. ए. के प्रियॉन रोगों के दायरे से परे संक्रमण और विकारों के लिए नैदानिक परख विकास में व्यापक उपयोग होने का अनुमान है। एक प्रमुख संभावित अनुप्रयोग अन्य प्रोटीन मिसफोल्डिंग रोगों के लिए है, विशेष रूप से अल्जाइमर के लिए। प्रकाशित शोध 2011 के एक अध्ययन में नैदानिक स्क्रैपी एजेंट के साथ प्राकृतिक और मौखिक रूप से संक्रमित भेड़ से मूत्र में प्रियॉन का पता लगाने और नैदानिक क्रोनिक वेस्टिंग डिजीज (सी. डब्ल्यू. डी.) के साथ मौखिक रूप से संक्रमित प्रीक्लिनिकल और संक्रमित सफेद पूंछ वाले हिरण का पता लगाने की सूचना दी गई। प्राकृतिक रूप से या प्रीक्लिनिकल प्रियॉन-रोग अंडाशय या गर्भाशय ग्रीवा के मूत्र से पी. आर. पी. एस. सी. के प्रियॉन का पता लगाने पर यह पहली रिपोर्ट है। 2010 के एक अध्ययन ने एक नई सोफिया पहचान योजना के साथ प्रोटीन मिसफोल्डिंग साइक्लिक एम्पलीफिकेशन (पीएमसीए) की एक मध्यम मात्रा का प्रदर्शन किया, जिसका उपयोग प्राकृतिक और प्रयोगात्मक संक्रमण के बाद प्रीक्लिनिकल और क्लिनिकल स्क्रैपी भेड़ से प्रोटीज-अनुपचारित प्लाज्मा में पी. आर. पी. एस. सी. और पुरानी बर्बाद करने वाली बीमारी के साथ सफेद पूंछ वाले हिरण का पता लगाने के लिए किया जा सकता है। प्रियॉन प्रोटीन (पी. आर. पी. सी.) के सामान्य (कोशिकीय) रूप के संरचनात्मक परिवर्तन के परिणामस्वरूप प्रियॉन प्रोटीन (पी. आर. पी. एस. सी.) का रोग से जुड़ा रूप, न्यूरोपैथोजेनेसिस के लिए केंद्रीय माना जाता है और प्रियॉन रोग निदान के लिए एकमात्र विश्वसनीय आणविक मार्कर के रूप में कार्य करता है। जबकि सी. एन. एस. में पी. आर. पी. एस. सी. के उच्चतम स्तर मौजूद होते हैं, एक उचित नैदानिक परख के विकास के लिए शरीर के तरल पदार्थों के उपयोग की आवश्यकता होती है जिसमें विशेष रूप से पी. आर. पी. एस. सी. का अत्यंत निम्न स्तर होता है। पी. एम. सी. ए. प्रौद्योगिकी के माध्यम से बीमार जानवरों के रक्त में पी. आर. पी. एस. सी. का पता चला है। हालांकि, कई दिनों तक बार-बार साइकिल चलाना, जो रक्त सामग्री के पी. एम. सी. ए. के लिए आवश्यक है, के परिणामस्वरूप विशिष्टता (गलत सकारात्मक) में कमी आई है। रक्त में पी. आर. पी. एस. सी. के लिए एक परख उत्पन्न करने के लिए जो अत्यधिक संवेदनशील और विशिष्ट दोनों है, शोधकर्ताओं ने सोफिया के साथ सीमित सीरियल पी. एम. सी. ए. (एस. पी. एम. सी. ए.) का उपयोग किया। उन्होंने पॉलीएडेनिलिक एसिड को जोड़ने के साथ एस. पी. एम. सी. ए. में कोई वृद्धि नहीं पाई, न ही कुशल प्रवर्धन के लिए पी. आर. पी. सी. और पी. आर. पी. एस. सी. स्रोतों के जीनोटाइप का मिलान करना आवश्यक था। 2009 के एक अध्ययन में पाया गया कि सोफिया, अपने वर्तमान प्रारूप में, हम्सटर, भेड़ और हिरण पुनर्संयोजक पी. आर. पी. के 10 से कम एटोग्राम (ए. जी.) का पता लगाने में सक्षम है। 263के-संक्रमित हैम्स्टर मस्तिष्क से पी. आर. पी. एस. सी. के लगभग 10 ए. जी. का पता पुरानी बर्बाद करने वाली बीमारी से संक्रमित खरोंच-संक्रमित भेड़ और हिरण के मस्तिष्क से पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाने की समान निचली सीमाओं के साथ लगाया जा सकता है। ये पहचान सीमाएँ प्रोटीज-उपचारित और अनुपचारित सामग्री को उस बिंदु से परे पतला करने की अनुमति देती हैं जहाँ पी. आर. पी. सी., गैर-विशिष्ट प्रोटीन या अन्य बाहरी सामग्री पी. आर. पी. एस. सी. संकेत का पता लगाने और/या विशिष्टता में हस्तक्षेप कर सकती है। यह न केवल पी. आर. पी. एस. सी. का पता लगाने की विशिष्टता के मुद्दे को समाप्त करता है, बल्कि संवेदनशीलता को भी बढ़ाता है, क्योंकि आंशिक पी. आर. पी. एस. सी. प्रोटीयोलिसिस की संभावना अब चिंता का विषय नहीं है। एस. ओ. एफ. आई. ए. संभवतः संचारी मस्तिष्क-विकृति के पूर्व-शव परीक्षण का शीघ्र पता लगाएगा और अतिरिक्त लक्ष्य प्रवर्धन प्रोटोकॉल के साथ उपयोग के लिए भी उपयुक्त है। सोफिया रोग रोगजनन और/या निदान में शामिल विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने के लिए एक संवेदनशील साधन का प्रतिनिधित्व करता है जो पारगम्य स्पंजफॉर्म एन्सेफैलोपैथी के दायरे से परे है। इम्यूनोऐसे संदर्भ भी देखें बाहरी लिंक बायोनोसिस सोफिया वीडियो परिचय इम्यूनोलॉजिक परीक्षण प्रोटीन विधियाँ आणविक जीव विज्ञान प्रयोगशाला तकनीक आणविक जीव विज्ञान तकनीक प्रियन्स