Phage display
फेज डिस्प्ले प्रोटीन-प्रोटीन, प्रोटीन-पेप्टाइड और प्रोटीन-डी. एन. ए. अंतःक्रियाओं के अध्ययन के लिए एक प्रयोगशाला तकनीक है जो प्रोटीन को आनुवंशिक जानकारी से जोड़ने के लिए बैक्टीरियोफेज (वायरस जो बैक्टीरिया को संक्रमित करते हैं) का उपयोग करता है जो उन्हें कूटबद्ध करता है। इस तकनीक में, एक जीन एन्कोडिंग एक रुचि के प्रोटीन को एक फेज कोट प्रोटीन जीन में डाला जाता है, जिससे फेज प्रोटीन को उसके बाहर "प्रदर्शित" करता है, जबकि उसके अंदर प्रोटीन के लिए जीन होता है, जिसके परिणामस्वरूप जीनोटाइप और फेनोटाइप के बीच संबंध होता है। जिन प्रोटीनों को फेज प्रदर्शित कर रहे हैं, उन्हें अन्य प्रोटीन, पेप्टाइड्स या डीएनए अनुक्रमों के खिलाफ जांचा जा सकता है, ताकि प्रदर्शित प्रोटीन और अन्य अणुओं के बीच बातचीत का पता लगाया जा सके। इस तरह, प्रोटीन के बड़े पुस्तकालयों को इन विट्रो चयन नामक प्रक्रिया में जांचा और प्रवर्धित किया जा सकता है, जो प्राकृतिक चयन के अनुरूप है। फेज डिस्प्ले में उपयोग किए जाने वाले सबसे आम बैक्टीरियोफेज एम13 और एफ. डी. फिलामेंटस फेज हैं, हालांकि टी4, टी7 और λ फेज का भी उपयोग किया गया है। इतिहास फेज प्रदर्शन का वर्णन पहली बार 1985 में जॉर्ज पी. स्मिथ द्वारा किया गया था, जब उन्होंने पेप्टाइड अनुक्रमों के संग्रह से एक पेप्टाइड में वायरस के कैप्सिड प्रोटीन को फ्यूज करके फिलामेंटस फेज (लंबे, पतले वायरस जो बैक्टीरिया को संक्रमित करते हैं) पर पेप्टाइड्स के प्रदर्शन का प्रदर्शन किया था। इसने वायरल क्लोन के संग्रह की बाहरी सतहों पर विभिन्न पेप्टाइड्स को प्रदर्शित किया, जहां प्रक्रिया के स्क्रीनिंग चरण ने पेप्टाइड्स को उच्चतम बाध्यकारी आत्मीयता के साथ अलग कर दिया। 1988 में, स्टीफन पार्मली और जॉर्ज स्मिथ ने आत्मीयता चयन के लिए बायोपैनिंग का वर्णन किया और प्रदर्शित किया कि चयन के पुनरावर्ती दौर एक अरब या उससे कम में 1 पर मौजूद क्लोन के लिए समृद्ध हो सकते हैं। 1990 में, जेमी स्कॉट और जॉर्ज स्मिथ ने फिलामेंटस फेज पर प्रदर्शित बड़े यादृच्छिक पेप्टाइड पुस्तकालयों के निर्माण का वर्णन किया। ग्रेग विंटर और जॉन मैककैफर्टी के साथ आणविक जीवविज्ञान की प्रयोगशाला, रिचर्ड लर्नर और कार्लोस बारबास के साथ द स्क्रिप्स रिसर्च इंस्टीट्यूट और फ्रैंक ब्रेटलिंग और स्टीफन ड्यूबेल के साथ जर्मन कैंसर रिसर्च सेंटर में समूहों द्वारा उपचारात्मक प्रोटीन इंजीनियरिंग के लिए एंटीबॉडी जैसे प्रोटीन के प्रदर्शन के लिए फेज डिस्प्ले तकनीक को और विकसित और सुधार किया गया था। स्मिथ और विंटर को फेज डिस्प्ले के विकास में उनके योगदान के लिए रसायन विज्ञान में 2018 के नोबेल पुरस्कार के आधे हिस्से से सम्मानित किया गया था। जॉर्ज पीजेनिक द्वारा 1985 से प्राथमिकता का दावा करने वाला एक पेटेंट भी पेप्टाइड पुस्तकालयों की पीढ़ी का वर्णन करता है। सिद्धांत दो-संकर प्रणाली की तरह, फेज प्रदर्शन का उपयोग प्रोटीन अंतःक्रियाओं की उच्च-थ्रूपुट जांच के लिए किया जाता है। एम13 फिलामेंटस फेज डिस्प्ले के मामले में, रुचि के प्रोटीन या पेप्टाइड को एन्कोडिंग करने वाले डी. एन. ए. को पी. आई. आई. या पी. वी. आई. आई. जीन में संलग्न किया जाता है, जो क्रमशः माइनर या मेजर कोट प्रोटीन को एन्कोडिंग करता है। कई क्लोनिंग साइटों का उपयोग कभी-कभी यह सुनिश्चित करने के लिए किया जाता है कि टुकड़ों को सभी तीन संभावित रीडिंग फ्रेम में डाला जाता है ताकि सी. डी. एन. ए. टुकड़े का उचित फ्रेम में अनुवाद किया जा सके। फेज जीन और इन्सर्ट डी. एन. ए. संकर को फिर ई. कोलाई जीवाणु कोशिकाओं जैसे टी. जी. 1, एस. एस. 320, ई. आर. 2738, या एक्स. एल. 1-ब्लू ई. कोलाई में डाला जाता है (एक प्रक्रिया जिसे "पारगमन" के रूप में जाना जाता है)। यदि एक "फेजेमिड" वेक्टर का उपयोग किया जाता है (एक सरलीकृत प्रदर्शन निर्माण वेक्टर) फेज कण ई. कोलाई कोशिकाओं से तब तक नहीं छोड़े जाएंगे जब तक कि वे सहायक फेज से संक्रमित नहीं हो जाते हैं, जो फेज डी. एन. ए. की पैकेजिंग और परिपक्व विरियन को प्रासंगिक प्रोटीन टुकड़े के साथ उनके बाहरी कोट के हिस्से के रूप में या तो माइनर (पी. आई. आई.) या मेजर (पी. वी. आई. आई.) कोट प्रोटीन पर इकट्ठा करने में सक्षम बनाता है। माइक्रोटाइटर प्लेट कुएँ की सतह पर एक प्रासंगिक डी. एन. ए. या प्रोटीन लक्ष्य (ओं) को स्थिर करके, एक फेज जो एक प्रोटीन प्रदर्शित करता है जो अपनी सतह पर उन लक्ष्यों में से एक से जुड़ता है, जबकि अन्य को धो कर हटा दिया जाता है। जो बचे हैं उन्हें अलग किया जा सकता है, अधिक फेज का उत्पादन करने के लिए उपयोग किया जा सकता है (सहायक फेज के साथ जीवाणु संक्रमण द्वारा) और एक फेज मिश्रण का उत्पादन करने के लिए जो प्रासंगिक (यानी। बाइंडिंग) फेज। अवांछनीय सामग्रियों को हटाकर सोने के नमूने के संवर्धन के संदर्भ में इन चरणों की बार-बार साइकिल चलाने को 'पैनिंग' कहा जाता है। अंतिम चरण में निकाले गए फेज का उपयोग एक उपयुक्त जीवाणु मेजबान को संक्रमित करने के लिए किया जा सकता है, जिससे फेजेमिड एकत्र किए जा सकते हैं और प्रासंगिक, परस्पर क्रिया करने वाले प्रोटीन या प्रोटीन के टुकड़ों की पहचान करने के लिए प्रासंगिक डीएनए अनुक्रम को अलग और अनुक्रमित किया जा सकता है। 'बैक्टीरियल पैकेजिंग सेल लाइन' तकनीक का उपयोग करके सहायक फेज के उपयोग को समाप्त किया जा सकता है। एल्यूशन को कम-पी. एच. एल्यूशन बफर को सोनिफिकेशन के साथ मिलाकर किया जा सकता है, जो पेप्टाइड-टारगेट इंटरैक्शन को ढीला करने के अलावा, लक्ष्य अणु को स्थिरीकरण सतह से अलग करने का भी काम करता है। यह अल्ट्रासाउंड-आधारित विधि उच्च-आकर्षण वाले पेप्टाइड के एकल-चरण चयन को सक्षम बनाती है। फेज प्रदर्शन प्रौद्योगिकी के अनुप्रयोगों में एक प्रोटीन के अंतःक्रिया भागीदारों का निर्धारण शामिल है (जिसका उपयोग एक कोशिका, ऊतक या जीव के सभी कोडिंग अनुक्रमों से युक्त डीएनए पुस्तकालय के साथ स्थिर फेज "चारा" के रूप में किया जाएगा) ताकि उस प्रोटीन के कार्य का कार्य या तंत्र निर्धारित किया जा सके। फेज डिस्प्ले इन विट्रो प्रोटीन विकास के लिए भी व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली विधि है (जिसे प्रोटीन इंजीनियरिंग भी कहा जाता है)। इस प्रकार, फेज डिस्प्ले दवा की खोज में एक उपयोगी उपकरण है। इसका उपयोग प्रोटीन को लक्षित करने के लिए नए लिगेंड (एंजाइम अवरोधक, रिसेप्टर एगोनिस्ट और विरोधी) खोजने के लिए किया जाता है। तकनीक का उपयोग ट्यूमर एंटीजन (निदान और चिकित्सीय लक्ष्यीकरण में उपयोग के लिए) को निर्धारित करने और यादृच्छिक खंडों के साथ विशेष रूप से निर्मित डीएनए पुस्तकालयों का उपयोग करके प्रोटीन-डीएनए इंटरैक्शन की खोज में भी किया जाता है। हाल ही में, कैंसर उपचार के संदर्भ में फेज डिस्प्ले का भी उपयोग किया गया है-जैसे कि दत्तक कोशिका स्थानांतरण दृष्टिकोण। इन मामलों में, फेज डिस्प्ले का उपयोग सिंथेटिक एंटीबॉडी बनाने और चुनने के लिए किया जाता है जो ट्यूमर सतह प्रोटीन को लक्षित करते हैं। इन्हें रोगी से एकत्र की गई टी-कोशिकाओं के लिए सिंथेटिक रिसेप्टर्स में बनाया जाता है जिनका उपयोग रोग से लड़ने के लिए किया जाता है। इन विट्रो प्रोटीन विकास के लिए प्रतिस्पर्धी तरीकों में खमीर प्रदर्शन, जीवाणु प्रदर्शन, राइबोसोम प्रदर्शन और एमआरएनए प्रदर्शन शामिल हैं। एंटीबॉडी फेज डिस्प्ले के आविष्कार ने एंटीबॉडी दवा की खोज में क्रांति ला दी। प्रारंभिक कार्य एम. आर. सी. लैबोरेटरी ऑफ मॉलिक्यूलर बायोलॉजी (ग्रेग विंटर और जॉन मैककैफर्टी), स्क्रिप्स रिसर्च इंस्टीट्यूट (रिचर्ड लर्नर और कार्लोस एफ. बारबास) और जर्मन कैंसर रिसर्च सेंटर (फ्रैंक ब्रेटलिंग और स्टीफन ड्यूबेल) की प्रयोगशालाओं द्वारा किया गया था। 1991 में, द स्क्रिप्स समूह ने फेज पर मानव एंटीबॉडी के पहले प्रदर्शन और चयन की सूचना दी। इस प्रारंभिक अध्ययन ने मानव एंटीबॉडी फैब के तेजी से अलगाव का वर्णन किया जो टेटनस विष को बांधता है और फिर इस विधि को टीके के डिजाइन और चिकित्सा के लिए मानव एंटी-एचआईवी-1 एंटीबॉडी को तेजी से क्लोन करने के लिए विस्तारित किया गया था। एंटीबॉडी पुस्तकालयों का फेज प्रदर्शन प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के अध्ययन के साथ-साथ चिकित्सा के लिए मानव एंटीबॉडी को तेजी से चुनने और विकसित करने दोनों के लिए एक शक्तिशाली तरीका बन गया है। एंटीबॉडी फेज डिस्प्ले का उपयोग बाद में द स्क्रिप्स रिसर्च इंस्टीट्यूट में कार्लोस एफ. बारबास द्वारा सिंथेटिक मानव एंटीबॉडी पुस्तकालय बनाने के लिए किया गया था, एक सिद्धांत जिसे पहली बार 1990 में ब्रेटलिंग और सहकर्मियों (पेटेंट सीए 2035384) द्वारा पेटेंट कराया गया था, जिससे मानव एंटीबॉडी को सिंथेटिक विविधता तत्वों से इन विट्रो बनाने की अनुमति मिली। फेज पर लाखों अलग-अलग एंटीबॉडी प्रदर्शित करने वाले एंटीबॉडी पुस्तकालयों का उपयोग अक्सर दवा उद्योग में अत्यधिक विशिष्ट चिकित्सीय एंटीबॉडी लीड को अलग करने के लिए किया जाता है, ताकि एंटीबॉडी दवाओं को मुख्य रूप से कैंसर-रोधी या सूजन-रोधी चिकित्सीय के रूप में विकसित किया जा सके। सबसे सफल में से एक एडालिमिमैब था, जिसे कैम्ब्रिज एंटीबॉडी टेक्नोलॉजी द्वारा डी2ई7 के रूप में खोजा गया था और एबॉट लैबोरेटरीज द्वारा विकसित और विपणन किया गया था। टी. एन. एफ. अल्फा के लिए एक एंटीबॉडी, अडालिमुमैब, 1 बिलियन डॉलर से अधिक की वार्षिक बिक्री हासिल करने वाला दुनिया का पहला पूरी तरह से मानव एंटीबॉडी था। सामान्य प्रोटोकॉल नीचे उन घटनाओं का क्रम है जिनका पालन फेज डिस्प्ले स्क्रीनिंग में किया जाता है ताकि पॉलीपेप्टाइड्स की पहचान की जा सके जो वांछित लक्ष्य प्रोटीन या डीएनए अनुक्रम के साथ उच्च आत्मीयता के साथ जुड़ते हैंः लक्ष्य प्रोटीन या डीएनए अनुक्रम एक माइक्रोटाइटर प्लेट के कुओं के लिए स्थिर होते हैं। कई आनुवंशिक अनुक्रम एक बैक्टीरियोफेज पुस्तकालय में बैक्टीरियोफेज कोट प्रोटीन के साथ संलयन के रूप में व्यक्त किए जाते हैं, ताकि वे वायरल कण की सतह पर प्रदर्शित हों। प्रदर्शित प्रोटीन फेज के भीतर आनुवंशिक अनुक्रम से मेल खाता है। इस फेज-डिस्प्ले लाइब्रेरी को डिश में जोड़ा जाता है और फेज को बांधने का समय देने के बाद, डिश को धोया जाता है। फेज-प्रदर्शित करने वाले प्रोटीन जो लक्षित अणुओं के साथ बातचीत करते हैं, वे डिश से जुड़े रहते हैं, जबकि अन्य सभी बह जाते हैं। संलग्न फेज को अलग किया जा सकता है और उपयुक्त जीवाणु मेजबानों के संक्रमण द्वारा अधिक फेज बनाने के लिए उपयोग किया जा सकता है। नया फेज एक समृद्ध मिश्रण का गठन करता है, जिसमें काफी कम अप्रासंगिक फेज होता है (यानी। गैर-बाध्यकारी) प्रारंभिक मिश्रण में मौजूद थे। चरण 3 से 5 को वैकल्पिक रूप से एक या अधिक बार दोहराया जाता है, जो प्रोटीन को बांधने में फेज लाइब्रेरी को और समृद्ध करता है। आगे जीवाणु-आधारित प्रवर्धन के बाद, परस्पर क्रिया करने वाले चरण के भीतर डीएनए को परस्पर क्रिया करने वाले प्रोटीन या प्रोटीन के टुकड़ों की पहचान करने के लिए अनुक्रमित किया जाता है। कोट प्रोटीन फिलामेंटस फेज पी. आई. आई. पी. आई. आई. आई. का चयन वह प्रोटीन है जो विरियन की संक्रामकता को निर्धारित करता है। पी. आई. आई. आई. तीन डोमेन (एन1, एन2 और सी. टी.) से बना है जो ग्लाइसिन-समृद्ध लिंकर्स द्वारा जुड़ा हुआ है। एन2 डोमेन एन1 डोमेन को मुक्त करते हुए विरियन संक्रमण के दौरान एफ पाइलस से जुड़ जाता है जो फिर बैक्टीरिया की सतह पर एक टोलए प्रोटीन के साथ बातचीत करता है। इस प्रोटीन के भीतर डालने को आमतौर पर स्थिति 249 (सीटी और एन2 के बीच एक लिंकर क्षेत्र के भीतर), स्थिति 198 (एन2 डोमेन के भीतर) और एन-टर्मिनस (एन-टर्मिनल स्राव अनुक्रम और पीIII के एन-टर्मिनस के बीच डाला जाता है) में जोड़ा जाता है। हालांकि, स्थिति 198 पर स्थित बामही साइट का उपयोग करते समय किसी को बिना जोड़े वाले सिस्टीन अवशेष (सी201) से सावधान रहना चाहिए जो फेज प्रदर्शन के दौरान समस्या पैदा कर सकता है यदि कोई पी. आई. आई. के गैर-संरेखित संस्करण का उपयोग कर रहा है। पी. वी. आई. आई. के बजाय पी. आई. आई. आई. का उपयोग करने का एक लाभ यह है कि पी. आई. आई. सहायक फेज के साथ संयुक्त रूप से फेजेमिड (एफ. एफ. फेज से प्राप्त प्लास्मिड) का उपयोग करते समय मोनोवेलेंट प्रदर्शन की अनुमति देता है। इसके अलावा, पी. आई. आई. आई. बड़े प्रोटीन अनुक्रमों (> 100 एमिनो एसिड) को डालने की अनुमति देता है और पी. वी. आई. आई. की तुलना में इसके प्रति अधिक सहिष्णु है। हालांकि, संलयन भागीदार के रूप में पी. आई. आई. आई. का उपयोग करने से फेज संक्रामकता में कमी आ सकती है जिससे फेज विकास दर में अंतर के कारण चयन पूर्वाग्रह या इससे भी बदतर, फेज की अपने मेजबान को संक्रमित करने में असमर्थता जैसी समस्याएं हो सकती हैं। एक फेजेमिड प्लास्मिड और एक सहायक फेज का उपयोग करके फेज संक्रामकता के नुकसान से बचा जा सकता है ताकि परिणामी फेज में जंगली प्रकार और संलयन पी. आई. आई. दोनों शामिल हों। सी. डी. एन. ए. का विश्लेषण पी. आई. आई. का उपयोग करके दो पूरक ल्यूसीन ज़िपर प्रणाली, डायरेक्ट इंटरेक्शन रेस्क्यू या सी-टर्मिनस पर सी. डी. एन. ए. और पी. आई. आई. के बीच एक एमिनो एसिड लिंकर जोड़कर भी किया गया है। पी. वी. आई. आई. पी. वी. आई. आई. एफ. फेज का मुख्य कोट प्रोटीन है। पेप्टाइड्स आमतौर पर पी. वी. आई. आई. के एन-टर्मिनस से जुड़े होते हैं। आमतौर पर पेप्टाइड्स जिन्हें पी. वी. आई. आई. से जोड़ा जा सकता है, वे 6-8 एमिनो एसिड लंबे होते हैं। ऐसा लगता है कि आकार प्रतिबंध का अतिरिक्त खंड के कारण होने वाली संरचनात्मक बाधा के साथ कम संबंध है और कोट प्रोटीन निर्यात के दौरान पी. आई. वी. के कारण होने वाले आकार बहिष्करण के साथ अधिक संबंध है। चूँकि एक विशिष्ट फेज पर प्रोटीन की लगभग 2700 प्रतियाँ होती हैं, इसलिए यह अधिक संभावना है कि यदि एक फेजमिड का उपयोग किया जाता है तो भी रुचि के प्रोटीन को बहुआयामी रूप से व्यक्त किया जाएगा। यह इस प्रोटीन के उपयोग को उच्च आत्मीयता बाध्यकारी भागीदारों की खोज के लिए प्रतिकूल बनाता है। पी. वी. आई. आई. की आकार समस्या को दूर करने के लिए, कृत्रिम कोट प्रोटीन तैयार किए गए हैं। एक उदाहरण वीस और सिद्धू का उल्टा कृत्रिम कोट प्रोटीन (एसीपी) है जो सी-टर्मिनस पर बड़े प्रोटीन के प्रदर्शन की अनुमति देता है। ए. सी. पी. 20के. डी. ए. का प्रोटीन प्रदर्शित कर सकता है, हालांकि, केवल निम्न स्तरों पर (ज्यादातर केवल एकल रूप से)। पी. वी. आई. पी. वी. आई. का व्यापक रूप से सी. डी. एन. ए. पुस्तकालयों के प्रदर्शन के लिए उपयोग किया गया है। फेज डिस्प्ले के माध्यम से सी. डी. एन. ए. पुस्तकालयों का प्रदर्शन अपनी उच्च थ्रूपुट क्षमता के कारण अंतःक्रियात्मक प्रोटीन और पेप्टाइड्स की खोज के लिए यीस्ट-2-हाइब्रिड विधि का एक आकर्षक विकल्प है। पी. वी. आई. का उपयोग सी. डी. एन. ए. पुस्तकालयों की अभिव्यक्ति के लिए पी. वी. आई. आई. और पी. आई. आई. आई. के लिए अधिमानतः किया गया है क्योंकि कोई भी फेज असेंबली में पी. वी. आई. की भूमिका को बहुत प्रभावित किए बिना पी. वी. आई. के सी-टर्मिनस में रुचि के प्रोटीन को जोड़ सकता है। इसका मतलब है कि सी. डी. एन. ए. में स्टॉप कोडन अब कोई मुद्दा नहीं है। हालांकि, सी. डी. एन. ए. का फेज प्रदर्शन हमेशा यूकेरियोटिक कोशिकाओं में मौजूद अनुवाद के बाद के संशोधनों के उत्पादन में अधिकांश प्रोकैरियोट्स की अक्षमता या बहु-डोमेन प्रोटीन के गलत मोड़ से सीमित होता है। जबकि पी. वी. आई. सी. डी. एन. ए. पुस्तकालयों के विश्लेषण के लिए उपयोगी रहा है, पी. आई. आई. और पी. वी. आई. आई. फेज प्रदर्शन के लिए सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले कोट प्रोटीन बने हुए हैं। पी. वी. आई. आई. और पी. आई. एक्स. 1995 में एक प्रयोग में, पी. वी. आई. आई. और पी. आई. एक्स. दोनों पर ग्लुटाथियोन एस-हस्तांतरण का प्रदर्शन करने का प्रयास किया गया और असफल रहा। हालांकि, एन-टर्मिनस पर एक पेरिप्लाज्मिक संकेत अनुक्रम (पेलबी या ओ. एम. पी. ए.) को जोड़ने के बाद इस प्रोटीन का फेज प्रदर्शन सफलतापूर्वक पूरा किया गया था। हाल के एक अध्ययन में, यह दिखाया गया है कि एवीटैग, एफ. एल. ए. जी. और हिज को संकेत अनुक्रम की आवश्यकता के बिना पी. वी. आई. आई. पर प्रदर्शित किया जा सकता है। फिर एकल श्रृंखला एफ. वी. (एस. सी. एफ. वी.) और एकल श्रृंखला टी कोशिका रिसेप्टर्स (एस. सी. टी. सी. आर.) की अभिव्यक्ति को संकेत अनुक्रम के साथ और उसके बिना दोनों व्यक्त किया गया। पी. एल. बी. (एक एमिनो एसिड संकेत अनुक्रम जो प्रोटीन को पेरिप्लाज्म तक लक्षित करता है जहां एक संकेत पेप्टिडेज़ फिर पी. एल. बी. को अलग कर देता है) संकेत अनुक्रम के बिना पी. वी. आई. आई. और पी. आई. एक्स. संलयन की तुलना में फेज प्रदर्शन स्तर में सुधार करता है। हालाँकि, इसने फेजेमिड जीनोम के बजाय अधिक सहायक फेज जीनोम को शामिल किया। सभी मामलों में, फेज प्रदर्शन का स्तर पी. आई. आई. संलयन का उपयोग करने की तुलना में कम था। हालांकि, कम प्रदर्शन वास्तविक मोनोवेलेंट प्रदर्शन के करीब होने के कारण बांधकों के चयन के लिए कम प्रदर्शन अधिक अनुकूल हो सकता है। छह में से पांच मौकों पर, पीएलबी के बिना पी. वी. आई. आई. और पी. आई. एक्स. संलयन आत्मीयता चयन परख में पी. आई. आई. आई. संलयन की तुलना में अधिक कुशल थे। पेपर में यह भी कहा गया है कि पी. वी. आई. आई. और पी. आई. एक्स. डिस्प्ले प्लेटफॉर्म लंबे समय में पी. आई. आई. से बेहतर प्रदर्शन कर सकते हैं। पी. आई. आई. के बजाय पी. वी. आई. आई. और पी. आई. एक्स. का उपयोग भी एक लाभ हो सकता है क्योंकि यदि पी. आई. आई. आई. का उपयोग जंगली प्रकार का है तो विरियन-एंटीजन बंधन को तोड़े बिना विरियन बचाव किया जा सकता है। इसके बजाय, मनका और प्रतिजन के बीच एक खंड में छेद किया जा सकता है। चूँकि पी. आई. आई. बरकरार है, इससे कोई फर्क नहीं पड़ता कि प्रतिजन फेज से बंधा रहता है या नहीं। टी7 फेज फेज प्रदर्शन के लिए एफ. एफ. फेज का उपयोग करने का मुद्दा यह है कि उन्हें फेज में इकट्ठा होने से पहले बैक्टीरिया की आंतरिक झिल्ली में स्थानांतरित करने के लिए रुचि के प्रोटीन की आवश्यकता होती है। कुछ प्रोटीन इस प्रक्रिया से नहीं गुजर सकते हैं और इसलिए एफ. एफ. फेज की सतह पर प्रदर्शित नहीं किए जा सकते हैं। इन मामलों में, इसके बजाय टी7 फेज डिस्प्ले का उपयोग किया जाता है। टी7 फेज डिस्प्ले में, प्रदर्शित होने वाला प्रोटीन टी7 के जीन 10 कैप्सिड प्रोटीन के सी-टर्मिनस से जुड़ा होता है। टी7 का उपयोग करने का नुकसान यह है कि सतह पर व्यक्त किए जा सकने वाले प्रोटीन का आकार छोटे पेप्टाइड्स तक सीमित है क्योंकि टी7 जीनोम में बड़े परिवर्तनों को एम13 की तरह समायोजित नहीं किया जा सकता है जहां फेज अपने कोट को अपने भीतर के बड़े जीनोम में फिट करने के लिए लंबा बनाता है। हालांकि, यह एससीएफवी चयन के लिए एक बड़े प्रोटीन पुस्तकालय के उत्पादन के लिए उपयोगी हो सकता है जहां एससीएफवी को एम13 फेज पर व्यक्त किया जाता है और एंटीजन को टी7 फेज की सतह पर व्यक्त किया जाता है। मिमोटोप के लिए जैव सूचना विज्ञान संसाधन और उपकरण डेटाबेस और कम्प्यूटेशनल उपकरण फेज प्रदर्शन अध्ययन का एक महत्वपूर्ण हिस्सा रहे हैं। लक्ष्य-असंबद्ध पेप्टाइड्स को बाहर करने, छोटे अणुओं-प्रोटीन अंतःक्रियाओं को चिह्नित करने और प्रोटीन-प्रोटीन अंतःक्रियाओं को मानचित्रित करने के लिए डेटाबेस, प्रोग्राम और वेब सर्वर का व्यापक रूप से उपयोग किया गया है। उपयोगकर्ता एक प्रोटीन की त्रि-आयामी संरचना और फेज प्रदर्शन प्रयोग से चुने गए पेप्टाइड्स का उपयोग संरचनात्मक एपिटोप को मैप करने के लिए कर सकते हैं। कुछ तेज़ और कुशल कम्प्यूटेशनल तरीके ऑनलाइन उपलब्ध हैं। निर्देशित विकास प्रोटीन-प्रोटीन अंतःक्रिया पेल्बी नेता अनुक्रम प्रतिस्पर्धा तकनीकः दो संकर प्रणाली एम. आर. एन. ए. प्रदर्शन राइबोसोम प्रदर्शन खमीर प्रदर्शन संदर्भ आगे पढ़ना रासायनिक इंजीनियरिंग में चयन बनाम डिजाइन ई. टी. एच.-2 मानव एंटीबॉडी फेज पुस्तकालय बाहरी लिंक आणविक जीव विज्ञान बैक्टीरियोफेज सूक्ष्म जीव विज्ञान प्रोटीन-प्रोटीन अंतःक्रिया परख प्रदर्शन तकनीक