Diethyl pyrocarbonate
डाइइथाइल पायरोकार्बोनेट (डी. ई. पी. सी.), जिसे डाइइथाइल डाइकार्बोनेट (आई. यू. पी. ए. सी. नाम) भी कहा जाता है, का उपयोग प्रयोगशाला में पानी और प्रयोगशाला के बर्तनों में आर. एनज़ एंजाइमों को निष्क्रिय करने के लिए किया जाता है। यह हिस्टिडीन (सबसे प्रबल), लाइसिन, सिस्टीन और टायरोसिन अवशेषों के सहसंयोजक संशोधन द्वारा ऐसा करता है। डी. ई. पी. सी.-उपचारित (और इसलिए आर. एन. ए. मुक्त) पानी का उपयोग प्रयोगशाला में आर. एन. ए. के संचालन में किया जाता है ताकि आर. एन. ए. के आर. एन. ए. द्वारा अवक्रमित होने के जोखिम को कम किया जा सके। पानी को आमतौर पर 37 डिग्री सेल्सियस पर कम से कम 2 घंटे के लिए 0.1% वी/वी डी. ई. पी. सी. के साथ उपचारित किया जाता है और फिर डी. ई. पी. सी. के निशान को निष्क्रिय करने के लिए ऑटोक्लेव (कम से कम 15 मिनट) किया जाता है। इस तरह से डी. ई. पी. सी. के निष्क्रिय होने से कार्बन डाइऑक्साइड और इथेनॉल प्राप्त होता है। डी. ई. पी. सी. की उच्च सांद्रता बड़ी मात्रा में आर. एन. एज़. को निष्क्रिय करने में सक्षम होती है, लेकिन शेष निशान या उपोत्पाद इन विट्रो प्रतिलेखन जैसी आगे की जैव रासायनिक प्रतिक्रियाओं को रोक सकते हैं। इसके अलावा, डी. ई. पी. सी. या इसके उपोत्पादों के निशान मौजूद होने पर कार्बोक्सीमीथाइलेशन जैसे आर. एन. ए. का रासायनिक संशोधन संभव है, जिसके परिणामस्वरूप बफर एक्सचेंज (वर्षा के बाद) के बाद भी अक्षुण्ण आर. एन. ए. की खराब वसूली होती है। डी. ई. पी. सी. पानी में अस्थिर है और कार्बन डाइऑक्साइड और इथेनॉल के लिए अतिसंवेदनशील है, विशेष रूप से एक न्यूक्लियोफाइल की उपस्थिति में। इस कारण से, डी. ई. पी. सी. का उपयोग ट्रिस या एच. ई. पी. ई. एस. बफ़र्स के साथ नहीं किया जा सकता है। इसके विपरीत, इसका उपयोग फॉस्फेट-बफ़र्ड सेलाइन या एमओपीएस के साथ किया जा सकता है। एक आसान नियम यह है कि सक्रिय-ओः,-एनः या-एसः वाले एंजाइमों या रसायनों को डी. ई. पी. सी. के साथ आर. एनज़-मुक्त होने के लिए उपचारित नहीं किया जा सकता है, क्योंकि डी. ई. पी. सी. इन प्रजातियों के साथ प्रतिक्रिया करता है। इसके अलावा, डी. ई. पी. सी. क्षरण उत्पाद इन विट्रो प्रतिलेखन को रोक सकते हैं। हिस्टिडाइन के डी. ई. पी. सी. व्युत्पत्ति का उपयोग एंजाइमों में हिस्टिडाइल अवशेषों के महत्व का अध्ययन करने के लिए भी किया जाता है। डी. ई. पी. सी. द्वारा हिस्टिडीन के संशोधन के परिणामस्वरूप इमिडाज़ोल रिंग के एन-ओमेगा-2 नाइट्रोजन पर कार्बेथोक्सिलेटेड व्युत्पन्न होते हैं। हिस्टिडीन के डी. ई. पी. सी. संशोधन को तटस्थ पी. एच. पर 0.5 एम. हाइड्रॉक्सीलैमाइन के साथ उपचार द्वारा उलट दिया जा सकता है। डी. ई. पी. सी. का उपयोग डबल-स्ट्रैंडेड डी. एन. ए. की संरचना की जांच के लिए भी किया जा सकता है। डी. ई. सी. संदर्भ ओपनवेटवेयर में बाहरी लिंक डी. ई. पी. सी. जीवन वैज्ञानिक विकी आर. एन. एस. और डी. ई. पी. सी. उपचार कार्बोनेट एस्टर डाइकार्बोनेट एथिल एस्टर भी देखें।