Dried blood spot
ड्राई ब्लड स्पॉट टेस्टिंग (डी. बी. एस.) बायोसैम्पलिंग का एक रूप है जहाँ रक्त के नमूनों को धब्बा लगाया जाता है और फ़िल्टर पेपर पर सुखाया जाता है। सूखे नमूनों को आसानी से एक विश्लेषणात्मक प्रयोगशाला में भेजा जा सकता है और डी. एन. ए. प्रवर्धन या एच. पी. एल. सी. जैसे विभिन्न तरीकों का उपयोग करके उनका विश्लेषण किया जा सकता है। इतिहास इवर बैंग ने पहली बार 1913 में डी. बी. एस. को एक असामान्य नमूना विधि के रूप में वर्णित किया। यह अवधारणा कि केशिका रक्त, एड़ी या उंगली को चुभाने से प्राप्त होता है और फ़िल्टर पेपर पर धब्बा लगाया जाता है, का उपयोग नवजात शिशुओं की बड़ी आबादी में चयापचय रोगों की जांच के लिए किया जा सकता है, स्कॉटलैंड में रॉबर्ट गुथरी द्वारा 1963 में पेश किया गया था। फीनाइलकेटोनुरिया के लिए नवजात जांच 1969-70 में राष्ट्रव्यापी हो गई। तब से, 20 से अधिक देशों में शिशुओं से गुथरी कार्ड के नमूने नियमित रूप से एकत्र किए गए हैं ताकि फेनिलकेटोनुरिया और हाल ही में जन्मजात हाइपोथायरायडिज्म, सिकल सेल विकारों और एचआईवी संक्रमण की जांच की जा सके। इतनी कम मात्रा में रक्त की जांच करते समय संवेदनशीलता और विशिष्टता की सीमाओं ने कई वर्षों तक सूखे रक्त धब्बों के उपयोग को प्रतिबंधित कर दिया। हालांकि, हाल की प्रगति जैसे कि मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उत्पादन, सिंथेटिक प्रोटीन की अभिव्यक्ति और पॉलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया की शुरुआत ने इनमें से कई समस्याओं को दूर कर दिया है। इस प्रकार का रक्त परीक्षण अब अमेरिका में उपभोक्ताओं द्वारा घर पर उपयोग के लिए उपलब्ध है। उपलब्ध रक्त परीक्षणों में विटामिन डी, एस्ट्रोजन, टेस्टोस्टेरोन, कोर्टिसोल, टीएसएच और लिपिड शामिल हैं। न्यूयॉर्क एकमात्र राज्य है जो घर पर रक्त परीक्षण को प्रतिबंधित करता है। प्रक्रिया सूखे रक्त धब्बे के नमूनों को विशेष रूप से निर्मित अवशोषक फिल्टर पेपर पर उंगली, एड़ी या पैर की अंगुली से लैंसेट द्वारा खींचे गए रक्त की कुछ बूंदों को लगाकर एकत्र किया जाता है। रक्त को कागज को पूरी तरह से संतृप्त करने के लिए छोड़ दिया जाता है और कई घंटों तक हवा में सुखाया जाता है। नमूनों को कम गैस-पारगम्यता वाले प्लास्टिक बैगों में संग्रहीत किया जाता है, जिसमें आर्द्रता को कम करने के लिए सुखाने वाला पदार्थ जोड़ा जाता है, और उष्णकटिबंधीय जलवायु में भी इसे परिवेश के तापमान पर रखा जा सकता है। एक बार प्रयोगशाला में, तकनीशियन एक स्वचालित या मैनुअल होल पंच का उपयोग करके शीट से संतृप्त कागज की एक छोटी डिस्क को अलग करते हैं, जिससे डिस्क को एक सपाट तल वाली माइक्रोटाइटर प्लेट में गिरा दिया जाता है। रक्त को फॉस्फेट बफर खारा में बाहर निकाला जाता है जिसमें 0.05% ट्विन 80 और 0.005% सोडियम एज़ाइड होता है, रात भर 4 डिग्री सेल्सियस पर। एलुएट्स वाली परिणामी प्लेट "मास्टर" बनाती है जिससे बाद के परीक्षण के लिए डाइलूशन किया जा सकता है। एक पेपर डिस्क को मुक्का मारने के विकल्प के रूप में, हाल के स्वचालन समाधान बिना मुक्का मारे फिल्टर के माध्यम से एक इल्यूएंट को फ्लश करके नमूना निकालते हैं। स्विस कंपनी CAMAG द्वारा एक आंतरिक मानक पूर्व निष्कर्षण के अनुप्रयोग सहित एक स्वचालन विकसित किया गया था। एच. आई. वी. संक्रमण के लिए सूखे रक्त स्थान परीक्षण यह तकनीक अन्य तरीकों की तुलना में प्रशीतन की कम आवश्यकता और परीक्षण की कम आक्रामक प्रकृति के साथ नमूनों के लंबे जीवनकाल के कारण संसाधन-गरीब सेटिंग्स में एच. आई. वी. संक्रमित शिशुओं के लिए नैदानिक सेवाओं का विस्तार करने का वादा करती है। रक्त में एच. आई. वी.-एंटीबॉडी के लिए एलिसा परीक्षण के विपरीत, जो गर्भावस्था में शिशुओं में वायरस से स्वतंत्र रूप से फैल सकता है, सूखे रक्त स्थान परीक्षण का उपयोग वास्तविक वायरस की आनुवंशिक सामग्री का पता लगाने के लिए किया जा सकता है, जिससे गलत सकारात्मक परिणाम की संभावना से बचा जा सकता है। एच. आई. वी. के लिए सूखे रक्त स्थान परीक्षण को नैदानिक परीक्षण के लिए पर्याप्त संवेदनशील नहीं माना जाता है, लेकिन निगरानी के माध्यम से एच. आई. वी. के प्रसार का अनुमान लगाने में उपयोगी हो सकता है। डी. बी. एस. नमूने भी संचालकों के लिए एक जैव-खतरे का कम जोखिम पैदा करते हैं, और तरल रक्त नमूनों की तुलना में परिवहन या भंडारण करना आसान होता है। बायोबैंक डी. बी. एस. के लिए ड्राई ब्लड स्पॉट अपनी कम लागत और उपयोग में आसान संग्रह और भंडारण के कारण बायोबैंक के लिए आकर्षक हैं। एक अध्ययन से पता चला है कि वे आसानी से दाताओं द्वारा बड़ी संख्या में सूखे रक्त के नमूने एकत्र कर सकते हैं। प्रोटीन के स्तर और अन्य रक्त बायोमार्कर का पता लगाने की उनकी क्षमता के कारण ऐसे बायोबैंक का संभावित चिकित्सा मूल्य बहुत अच्छा है। सिद्धांत डी. एन. ए., आर. एन. ए. या प्रोटीन की स्थिरता का कारण इस तथ्य को माना जा सकता है कि जैविक सामग्री फिल्टर पेपर के मैट्रिक्स से जुड़ती है और सुखाने की प्रक्रिया में पानी शामिल नहीं होता है जो प्रोटीज या न्यूक्लियस के कार्य करने के लिए आवश्यक एक महत्वपूर्ण कारक है। जैविक सामग्री का बंधन कई अवरोधकों को भी बांधता है जो विभिन्न न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन विधियों में हस्तक्षेप कर सकते हैं। पॉलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया एच. पी. एल. सी. संदर्भ रक्त परीक्षण जैविक नमूने भी देखें।