Anti-dsDNA antibodies
एंटी-डबल स्ट्रैंडेड डीएनए (एंटी-डी. एस. डी. एन. ए.) एंटीबॉडी एंटी-न्यूक्लियर एंटीबॉडी (ए. एन. ए.) का एक समूह है जिसका लक्ष्य एंटीजन डबल स्ट्रैंडेड डीएनए है। नैदानिक प्रयोगशालाओं में एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (ई. एल. आई. एस. ए.) और इम्यूनोफ्लोरेसेंस जैसे रक्त परीक्षण नियमित रूप से किए जाते हैं। वे प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस (एस. एल. ई.) के अत्यधिक नैदानिक हैं और ल्यूपस नेफ्राइटिस के रोगजनन में शामिल हैं। एंटीन्यूक्लियर एंटीबॉडी के लिए पहला प्रमाण 1948 में उत्पन्न हुआ जब हरग्रेव्स, रिचमंड और मॉर्टन ने एल. ई. कोशिका की खोज की। ये असामान्य कोशिकाएँ, जो एस. एल. ई. वाले व्यक्तियों के अस्थि मज्जा में पाई जाती हैं, उन्हें फागोसाइटोज्ड पूरे नाभिक के साथ बहुरूपी नाभिकीय ल्यूकोसाइट्स के रूप में वर्गीकृत किया जाता है। इसके बाद, 1957 में, डी. एस. डी. एन. ए. के प्रति प्रतिपिंड एस. एल. ई. वाले रोगियों में पहचाने जाने वाले पहले स्वप्रतिविष थे। एंटीबॉडी उत्पादन हालांकि डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी की पीढ़ी का सटीक तंत्र अभी भी अज्ञात है, यह संभावना है कि बाह्य कोशिकीय डी. एन. ए. डी. एस. डी. एन. ए. के खिलाफ प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का एक कारण है। इस विचार का समर्थन करने वाले बहुत सारे सबूत हैं कि मृत या मरती हुई कोशिकाएं इस बाह्य कोशिकीय डीएनए का एक प्रमुख स्रोत हैं। एपोप्टोसिस क्रमादेशित कोशिका मृत्यु की अत्यधिक संगठित प्रक्रिया है जिसमें कोशिका परमाणु डीएनए और फागोसाइटोसिस के संकेतों को कम करती है। एस. एल. ई. और अन्य ऑटोइम्यून विकारों वाले लोगों में इस प्रक्रिया को दोषपूर्ण माना जाता है, जिससे या तो कोशिका मृत्यु में वृद्धि होती है और/या मृत कोशिका निकासी की दर में कमी आती है। एस. एल. ई. वाले लोगों में एपोप्टोसिस की दर अधिक होती है और एपोप्टोसिस में दोषों में जीन और प्रोटीन में विभिन्न परिवर्तनों को शामिल किया गया है। इनमें घुलनशील एफ. ए. एस. और बी. सी. एल.-2 के बढ़े हुए स्तर और क्रमादेशित कोशिका मृत्यु 1 और रनट-संबंधित प्रतिलेखन कारक एक्स1 में बहुरूपता शामिल हैं। एपोप्टोटिक कोशिकाओं पर ब्लीब्स में एस. एल. ई. में पाए जाने वाले लगभग सभी ऑटोएंटिजन होते हैं, और फागोसाइट्स इन एपोप्टोटिक कोशिकाओं को बांधते हैं और उन्हें फागोसाइटोस करते हैं। यदि यह प्रक्रिया दोषपूर्ण है, तो इन ऑटोएंटिजन को परिसंचरण में छोड़ा जा सकता है जिससे प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया हो सकती है। सीरम एमाइलॉइड पी घटक एक प्रोटीन है जो एपोप्टोटिक कोशिकाओं द्वारा उत्पादित क्रोमैटिन की निकासी में सहायता करने के लिए सोचा जाता है और इस प्रोटीन में कमियों को (चूहों में) एएनए के सहज गठन का कारण दिखाया गया है। एपोप्टोटिक कोशिकाओं के धब्बों पर मौजूद ऑटोएंटिजन भी संशोधन के लिए प्रवण होते हैं, जो उनकी प्रतिरक्षा क्षमता को बढ़ा सकते हैं। नाभिकीय प्रोटीन और क्रोमैटिन के मुक्त होने पर, डेंड्राइटिक कोशिकाओं और मैक्रोफेज जैसी एंटीजन प्रस्तुत करने वाली कोशिकाएं इन एंटीजन को टी सहायक कोशिकाओं में प्रदर्शित करती हैं। हालाँकि इस प्रक्रिया का विवरण अभी भी विवादास्पद है, सबूत बताते हैं कि प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न करने के लिए, डी. एन. ए. को टाइप 1 इंटरफेरॉन का उत्पादन करने के लिए एक एंटीजन प्रस्तुत करने वाली कोशिका को सक्रिय करना चाहिए। यह साइटोकिन प्लाज्मासाइटॉइड डेंड्राइटिक कोशिकाओं (पी. डी. सी.) की परिपक्वता को प्रेरित करने का काम करता है ताकि वे टी सहायक कोशिकाओं को अपने एंटीजन प्रदर्शित कर सकें। जिस तंत्र में यूकेरियोटिक डी. एन. ए. इन कोशिकाओं को सक्रिय करता है, वह अभी तक स्पष्ट नहीं है; हालाँकि, प्रतिरक्षात्मक सी. पी. जी. अनुक्रम या तो पी. डी. सी. को सक्रिय करते हैं या यूकेरियोटिक डी. एन. ए. की प्रतिक्रिया में सहायक के रूप में कार्य करते हैं। सी. पी. जी. मोटिफ डी. एन. ए. पैटर्न रिकग्निशन रिसेप्टर, टोल जैसे रिसेप्टर 9 के माध्यम से कार्य करता है, जो पी. डी. सी. और बी कोशिकाओं में अत्यधिक व्यक्त किया जाता है। टी सहायक कोशिकाएं तब बी कोशिकाओं को सक्रिय करती हैं, जो इन एंटीजनों की उपस्थिति में भी होती हैं, जिससे ऑटो एंटीबॉडी का उत्पादन होता है। एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडीज को एक तंत्र के माध्यम से संक्रमण के माध्यम से भी उत्पादित किया जा सकता है जिसे आणविक नकल के रूप में जाना जाता है। न्यूमोकोकल पॉलीसेकेराइड्स के संपर्क में आने पर, ल्यूपस में डी. एस. डी. एन. ए. और न्यूमोकोकल पॉलीसेकेराइड्स के बीच क्रॉस रिएक्टिव एंटीबॉडी का उत्पादन होता है। एपस्टीन-बार वायरस को डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी को प्रेरित करने के लिए भी जाना जाता है, जैसा कि ई. बी. एन. ए.-1 एपिटोप वाले जानवरों के टीकाकरण के बाद देखा जाता है। न्यूक्लियोसोम के भीतर अन्य प्रोटीनों के लिए एंटीबॉडी के उत्पादन के लिए एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी भी माध्यमिक रूप से बनाए जा सकते हैं। जिन चूहों में टी कोशिकाएं न्यूक्लियोसोम की ओर निर्देशित होती हैं, वे एंटीजन स्प्रेडिंग के रूप में जाने जाने वाले तंत्र के माध्यम से डी. एस. डी. एन. ए. और हिस्टोन जैसे अन्य एंटीजनों के प्रति प्रतिक्रिया प्राप्त कर सकते हैं। यह प्रभाव तब भी हो सकता है जब एक संक्रमण नाभिक के भीतर अन्य संरचनाओं में ऑटोएंटिबॉडी के उत्पादन का कारण बनता है। एस. एल. ई. रोग में भूमिका एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी एस. एल. ई. के लिए अविश्वसनीय रूप से विशिष्ट हैं, अध्ययनों में लगभग 100% का हवाला दिया गया है, और इसलिए एस. एल. ई. के निदान में उपयोग किया जाता है। एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी के उच्च टाइटर्स एस. एल. ई. के अधिक सूचक होते हैं और निम्न टाइटर्स बिना बीमारी वाले लोगों में पाए जा सकते हैं। उच्च विशिष्टता के विपरीत, एस. एल. ई. में एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. की संवेदनशीलता के लिए 25-85% के अनुमान देखे गए हैं। इसलिए, एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी की उपस्थिति एस. एल. ई. का संकेत देती है, हालांकि एंटीबॉडी की अनुपस्थिति रोग से इंकार नहीं करती है। एस. एल. ई. में रोग गतिविधि के साथ परिसंचारी एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी के स्तर में उतार-चढ़ाव होता है। एंटीबॉडी के टाइटर्स में वृद्धि रोग गतिविधि की वृद्धि के साथ या उससे पहले भी हो सकती है। इस कारण से रोग की प्रगति का आकलन करने के लिए चिकित्सकों द्वारा टाइटर्स की क्रमिक रूप से निगरानी की जाती है। कम सक्रिय ल्यूपस की तुलना में अधिक सक्रिय ल्यूपस के मामलों में क्रमशः 1 से 3 महीने और 6-12 महीने के अंतराल पर टाइटर्स की अधिक बार निगरानी की जाती है। एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी एस. एल. ई. में ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस के साथ अत्यधिक जुड़े हुए हैं, हालांकि एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी के उच्च टाइटर्स वाले कुछ रोगियों में गुर्दे की बीमारी विकसित नहीं होती है। इसकी सबसे अधिक संभावना इस तथ्य के कारण है कि एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एक विषम आबादी है, जिनमें से कुछ रोगजनक नहीं पाए गए हैं। एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी सामान्य व्यक्तियों में मौजूद हो सकते हैं, हालांकि ये एंटीबॉडी आमतौर पर कम उत्साह वाले आई. जी. एम. आइसोटाइप होते हैं। इसके विपरीत, एस. एल. ई. में पाए जाने वाले रोगजनक एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी आमतौर पर आई. जी. जी. आइसोटाइप के होते हैं और डी. एस. डी. एन. ए. के लिए उच्च उत्साह दिखाते हैं। एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. और नेफ्राइटिस में उनकी भूमिका के लिए एक संभावित तंत्र प्रतिरक्षा परिसरों का गठन है जो डी. एन. ए. या न्यूक्लियोसोम से अप्रत्यक्ष रूप से जुड़ने से उत्पन्न होते हैं जो ग्लोमेरुलर बेसमेंट मेम्ब्रेन (जी. बी. एम.) से चिपके होते हैं। एक अन्य तंत्र सी1क्यू, न्यूक्लियोसोमल प्रोटीन, हेपरिन सल्फेट या लैमिनिन जैसे जी. बी. एम. एंटीजनों के लिए एंटीबॉडी का सीधा बंधन है, जो पूरक को सक्रिय करके एक सूजन प्रतिक्रिया शुरू कर सकते हैं। उन्हें जी. बी. एम. कोशिकाओं पर कुछ अणुओं द्वारा भी आंतरिक किया जा सकता है और सूजन कैस्केड, प्रसार और सेलुलर कार्यों में परिवर्तन का कारण बन सकता है। रुमेटीइड गठिया के रोगी डी. डी. एन. ए. विरोधी प्रतिरक्षी विकसित कर सकते हैं, हालांकि वे आमतौर पर उपचार से संबंधित होते हैं। एंटी-टी. एन. एफ. ए. जैविक उपचार, जैसे कि एडालिमिमैब, इन्फ्लिक्सिमैब और एटानेरसेप्ट, अक्सर एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी के उत्पादन को प्रेरित कर सकते हैं। वे आमतौर पर कम उत्साह वाले होते हैं और उपचार के बाद ही क्षणिक रूप से पता लगाए जा सकते हैं। इन एंटीबॉडी की उपस्थिति कुछ मामलों में ल्यूपस जैसे सिंड्रोम को प्रेरित कर सकती है। वायरल रोगजनकों के साथ वायरल संक्रमण संक्रमण अस्थायी रूप से एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी को प्रेरित कर सकता है। ह्यूमन इम्यूनोडेफिशिएंसी वायरस, पार्वोवायरस बी19 और बीके वायरस इन एंटीबॉडी को प्रेरित करने के लिए जाने जाते हैं। अन्य बीमारियाँ एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी और अन्य बीमारियों के बीच संबंध का समर्थन करने वाले बहुत कम प्रमाण हैं। कभी-कभी मायलोमा रोगियों द्वारा उत्पादित मोनोक्लोनल प्रोटीन एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. हो सकते हैं। इसके अलावा, टाइप 1 ऑटोइम्यून हेपेटाइटिस वाले कुछ रोगी एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं। डिटेक्शन एंड क्वांटिटेशन एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडीज का पता लगाने और उनकी मात्रा निर्धारित करने के लिए विभिन्न प्रकार के परख प्रारूपों का उपयोग किया जा सकता है, लेकिन नैदानिक उद्देश्यों के लिए कोई 'स्वर्ण मानक' नहीं है और विभिन्न परखों/विधियों के बीच सामंजस्य कम है। फार परख फार परख का उपयोग सीरम में एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी की मात्रा को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। अमोनियम सल्फेट का उपयोग एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों को अवक्षेपित करने के लिए किया जाता है जो तब बनते हैं जब सीरा में डी. एस. डी. एन. ए. के प्रति प्रतिपिंड होते हैं। इन एंटीबॉडी की मात्रा रेडियोधर्मी रूप से लेबल किए गए डी. एस. डी. एन. ए. का उपयोग करके निर्धारित की जाती है। हालाँकि यह परीक्षण बहुत विशिष्ट है, लेकिन इसकी श्रमसाध्यता और रेडियोधर्मी पदार्थों के उपयोग के कारण नियमित नैदानिक प्रयोगशालाओं में इसका बहुत कम उपयोग होता है। फार परख उपलब्ध एकमात्र परीक्षणों में से एक है जो उच्च एविडिटी एंटीबॉडी (क्रिथिडिया ल्यूसिलिया के साथ) का पता लगाता है और इसमें किसी भी आइसोटाइप के एंटीबॉडी का पता लगाने की क्षमता भी होती है। पी. ई. जी. पॉलीइथिलीन ग्लाइकोल (पी. ई. जी.) परख डी. एन. ए.-एंटीबॉडी परिसरों को अवक्षेपित करती है, जो फार परख के समान है। हालांकि, फर्र परख के विपरीत यह कम एविडिटी एंटीबॉडी परिसरों को अलग नहीं करता है, जिससे उच्च और निम्न एविडिटी एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी दोनों का पता लगाया जा सकता है। इम्यूनोफ्लोरेसेंस एनिमल टिश्यू एंटीन्यूक्लियर एंटीबॉडीज के इम्यूनोफ्लोरेसेंट डिटेक्शन के लिए पहला सब्सट्रेट था और 1950 के दशक के अंत से उपयोग में है। चूहों जैसे जानवरों के यकृत और गुर्दे के ऊतक वर्गों का उपयोग एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी की पहचान करने के लिए किया जाता है। इस सब्सट्रेट को काफी हद तक एच. ई. पी.-2 कोशिकाओं के उपयोग से हटा दिया गया है। एच. ई. पी.-2 हेप-2 कोशिकाएँ, जो मूल रूप से स्वरयंत्र कार्सिनोमा मूल की हैं, वास्तव में हेला कोशिकाओं का संदूषण हैं। नैदानिक प्रयोगशालाओं में ए. एन. ए. के निदान में इनका नियमित रूप से उपयोग किया जाता है। एच. ई. पी.-2 कोशिकाएँ बड़े नाभिक और कोशिका रेखा की उच्च माइटोटिक दर के कारण पशु वर्गों की तुलना में ए. एन. ए. के पैटर्न को अलग करने की अधिक क्षमता प्रदान करती हैं। एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी और फ्लोरोसेंट लेबल वाले सेकेंडरी एंटीबॉडी वाले सीरम के साथ ऊष्मायन पर, इंटरफ़ेज़ नाभिक का सजातीय धुंधलापन और माइटोटिक कोशिकाओं का संघनित गुणसूत्र धुंधलापन देखा जा सकता है। क्रिथिडिया क्रिथिडिया ल्यूसिलिया एक हिमोफ्लेजलेट प्रोटिस्ट है जिसमें एक ऑर्गेनेल होता है जिसे काइनेटोप्लास्ट के रूप में जाना जाता है। इस ऑर्गेनेल में गोलाकार डीएनए की उच्च सांद्रता होती है जिसमें कोई पहचानने योग्य परमाणु एंटीजन नहीं होते हैं, जिससे एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी का विश्वसनीय पता लगाया जा सकता है। काइनेटोप्लास्ट फ्लोरोसेंस तब होता है जब सीरम में उच्च एविडिटी एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी होते हैं। ई. आई. ए. की तुलना में इस परीक्षण की विशिष्टता अधिक है क्योंकि यह असंसाधित डी. एन. ए. का उपयोग करता है। संसाधित डी. एन. ए. में एस. एस. डी. एन. ए. के क्षेत्र हो सकते हैं, जिससे एंटी-एस. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है, जो गलत सकारात्मक परिणाम दे सकते हैं। ई. आई. ए. ई. आई. ए. (एंजाइम इम्यूनोएसे) डी. एन. ए.-लेपित पॉलीस्टीरिन माइक्रोटाइटर प्लेट का उपयोग करके एंटीबॉडी का पता लगाता है। इन परखों में उपयोग किया जाने वाला डी. एन. ए. अक्सर पुनः संयोजक डी. एस. डी. एन. ए. या बछड़े के थाइमस अर्क से होता है। एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी वाले सीरम के साथ ऊष्मायन पर, एंटीबॉडी डी. एन. ए. से जुड़ेंगे और फिर एंजाइम से जुड़े माध्यमिक एंटीबॉडी का उपयोग करके देखा जा सकता है। यह परख मात्रात्मक या अर्ध-मात्रात्मक हो सकती है, जिससे एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी के स्तर का अनुमान लगाया जा सकता है। यह परीक्षण विकृत डी. एस. डी. एन. ए. से एस. एस. डी. एन. ए. के संदूषण के कारण गलत सकारात्मक परिणाम उत्पन्न कर सकता है। ई. आई. ए. कम और उच्च एविडिटी एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी का पता लगाता है, इसकी संवेदनशीलता को बढ़ाता है और इसकी विशिष्टता को कम करता है। ए. एन. ए. का पता लगाने के लिए फ्लो साइटोमेट्री फ्लो साइटोमेट्री में एसएसए, एसएसबी, एस. एम., आर. एन. पी., एस. सी. एल.-70, जो-1, डी. एस. डी. एन. ए., सेंट्रोमियर बी और हिस्टोन जैसे कई स्वप्रतिजनकों के साथ लेपित मल्टीप्लेक्स पॉलीस्टीरिन मोतियों का उपयोग किया जाता है। सीरम को मोतियों के साथ इंक्यूबेट किया जाता है और एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी, या किसी अन्य ए. एन. ए. की उपस्थिति में, एंटीबॉडी बांधेंगे और पता लगाने के लिए फ्लोरोसेंट लेबल वाले सेकेंडरी एंटीबॉडी का उपयोग किया जाएगा। मोती एक प्रवाह कोशिका के माध्यम से चलाए जाते हैं जो प्रतिदीप्ति का पता लगाने के लिए एक लेजर का उपयोग करता है। मल्टीप्लेक्स इम्यूनोएसे (एम. आई. ए.) ए. एन. ए. का पता लगाने की फ्लो साइटोमेट्री विधि के समान, एम. आई. ए. ऑटोएंटिजन और एच. ई. पी.-2 एक्सट्रैक्ट लेपित मोतियों वाले कुओं का उपयोग करता है। बीड सेट विशिष्ट ऑटो एंटीजन के साथ लेपित होते हैं और विशेष ऑटो एंटीबॉडी की पहचान की अनुमति देने के लिए व्यक्तिगत रूप से पता लगाया जा सकता है। कुएँ के प्रतिदीप्ति का स्वचालित विश्लेषण ऑटो एंटीबॉडी का तेजी से पता लगाने की अनुमति देता है। माइक्रोएरे ए. एन. ए. का पता लगाने के लिए एक नई उभरती हुई विधि है। अलग-अलग ऑटोएंटिजन पॉलीस्टीरिन जैसी सतह पर बिंदुओं की एक श्रृंखला में जमा होते हैं। एक एकल सरणी में एक साथ कई ऑटोइम्यून रोगों की जांच के लिए सैकड़ों ऑटोएंटिजन शामिल हो सकते हैं। यदि एंटी-डी. एस. डी. एन. ए. एंटीबॉडी मौजूद हैं, तो सीरम और माइक्रोएरे का ऊष्मायन बंधन के लिए अनुमति देता है और फिर एक फ्लोरोसेंट लेबल एंटी-आई. जी. जी. एंटीबॉडी का उपयोग करके बिंदुओं को देखा जा सकता है। चिकित्साविज्ञान एंटीबॉडी की अत्यधिक विशिष्ट प्रकृति के परिणामस्वरूप, उन्हें प्रमुख रूपांकनों को लक्षित करने और बांधने के लिए इंजीनियर किया जा सकता है। ये रूपांकन विशेष रोगों के रोगजनन के भीतर प्रमुख विशेषताएँ हो सकती हैं, उदाहरण के लिए मानव पेपिलोमावायरस। संदर्भ ऑटोएंटिबॉडी