Anterograde tracing
तंत्रिका विज्ञान में, एंटेरोग्रेड ट्रेसिंग एक शोध विधि है जिसका उपयोग उनके स्रोत (कोशिका शरीर, या सोमा) से उनके समाप्ति बिंदु (सिनेप्स) तक अक्षतंतु प्रक्षेपणों का पता लगाने के लिए किया जाता है। एंटेरोग्रेड अनुरेखण की एक विशेषता प्रीसिनेप्टिक और पोस्टसिनेप्टिक न्यूरॉन (ओं) की लेबलिंग है। सिनैप्टिक दरार को पार करना एंटेरोग्रेड ट्रेसर और आकृति विज्ञान संबंधी पुनर्निर्माण के लिए उपयोग किए जाने वाले डाई फिलर के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर है। पूरक तकनीक प्रतिगामी अनुरेखण है, जिसका उपयोग तंत्रिका कनेक्शनों को उनकी समाप्ति से उनके स्रोत तक पता लगाने के लिए किया जाता है। कोशिका शरीर में सिनेप्स)। एंटेरोग्रेड और रेट्रोग्रेड ट्रेसिंग तकनीक दोनों अक्षतंतु परिवहन की जैविक प्रक्रिया के दृश्य पर आधारित हैं। एंटेरोग्रेड और रेट्रोग्रेड ट्रेसिंग तकनीक एक एकल न्यूरॉन या न्यूरॉन्स की एक परिभाषित आबादी से पूरे तंत्रिका तंत्र में उनके विभिन्न लक्ष्यों के लिए न्यूरोनल अनुमानों के विस्तृत विवरण की अनुमति देती है। ये तकनीकें किसी विशेष संरचना में न्यूरॉन्स के बीच संबंधों के "मानचित्रण" की अनुमति देती हैं (जैसे। आँख) और मस्तिष्क में लक्षित न्यूरॉन्स। वर्तमान में कनेक्शनल न्यूरोएनाटॉमी के बारे में जो कुछ भी ज्ञात है, उसकी खोज एंटेरोग्रेड और रेट्रोग्रेड ट्रेसिंग तकनीकों के उपयोग के माध्यम से की गई थी। तकनीक सोमा से उनके लक्षित क्षेत्रों की ओर उत्पन्न होने वाले अनुमानों का पता लगाने के लिए कई तरीके मौजूद हैं। ये तकनीकें शुरू में विभिन्न दृश्य ट्रेसर अणुओं के प्रत्यक्ष भौतिक इंजेक्शन पर निर्भर थीं (जैसे। हरे फ्लोरोसेंट प्रोटीन, लिपोफिलिक रंग या रेडियोधर्मी रूप से टैग किए गए एमिनो एसिड) मस्तिष्क में। इन अणुओं को विभिन्न न्यूरॉन्स के सोमा (कोशिका निकाय) द्वारा स्थानीय रूप से अवशोषित किया जाता है और अक्षतन्तु टर्मिनलों में ले जाया जाता है, या उन्हें अक्षतंतु द्वारा अवशोषित किया जाता है और न्यूरॉन के सोमा में ले जाया जाता है। अन्य ट्रेसर अणु ट्रेसर के संपर्क में आने वाले न्यूरॉन्स से फैले अक्षतंतु प्रक्षेपणों के बड़े नेटवर्क के दृश्य की अनुमति देते हैं। हाल के वर्षों में वायरल वैक्टर को विकसित किया गया है और न्यूरॉन्स को प्रक्षेपित करने के लक्षित क्षेत्रों की पहचान करने के लिए एंटेरोग्रेड ट्रेसर के रूप में लागू किया गया है। वैकल्पिक रूप से रणनीतियाँ ट्रांससिनेप्टिक एंटेरोग्रेड ट्रेसर हैं, जो एक मार्ग के भीतर कई न्यूरॉन्स को लेबल करते हुए सिनेप्टिक दरार को पार कर सकते हैं। वे आनुवंशिक या आणविक अनुरेखक भी हो सकते हैं। हाल ही में मैंगनीज-वर्धित चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एम. ई. एम. आर. आई.) का उपयोग जीवित मस्तिष्क में कार्यात्मक परिपथों का पता लगाने के लिए किया गया है, जैसा कि रस जैकब्स, रॉबिया पॉल्टलर, एलन कोरेटस्की और एलेन बियरर द्वारा अग्रणी किया गया है। एमएन2 + आयन टी1-भारित एमआरआई में एक अति तीव्र संकेत देता है और इस प्रकार एक विपरीत एजेंट के रूप में कार्य करता है। एमएन2 + वोल्टेज पर निर्भर कैल्शियम चैनलों के माध्यम से प्रवेश करता है, इंट्रासेल्युलर ऑर्गेनेल में ले जाया जाता है और दूर के स्थानों पर जमा होने वाले किनेसिन-1 सहित एंडोजेनस न्यूरोनल ट्रांसपोर्ट सिस्टम द्वारा ले जाया जाता है। टाइम-लैप्स छवियों में एमएन संचय का सांख्यिकीय पैरामीट्रिक मानचित्रण न केवल न्यूरोनल सर्किटरी के बारे में, बल्कि उनके भीतर परिवहन की गतिशीलता और दूरस्थ कनेक्शनों के स्थान के बारे में भी विस्तृत जानकारी प्रदान करता है। यह दृष्टिकोण जीवित जानवरों में पूरे मस्तिष्क में परिपथ के बारे में जानकारी प्रदान करता है। आनुवंशिक अनुरेखक (वायरल न्यूरोनल अनुरेखण भी देखें) एक विशिष्ट क्षेत्र या कोशिका से अनुमानों का पता लगाने के लिए, एक आनुवंशिक निर्माण, वायरस या प्रोटीन को स्थानीय रूप से इंजेक्ट किया जा सकता है, जिसके बाद इसे अंतर्वर्धित रूप से ले जाने की अनुमति दी जाती है। वायरल ट्रेसर सिनेप्स को पार कर सकते हैं, और इसका उपयोग कई सिनेप्स में मस्तिष्क क्षेत्रों के बीच संपर्क का पता लगाने के लिए किया जा सकता है। एंटेरोग्रेड अनुरेखण के लिए उपयोग किए जाने वाले वायरस के उदाहरणों का वर्णन कुइपर्स द्वारा किया गया है। सबसे प्रसिद्ध हर्पिस सिम्प्लेक्स वायरस टाइप 1 (एचएसवी) और रैबडोवायरस हैं। एचएसवी का उपयोग मस्तिष्क और पेट के बीच संबंधों का पता लगाने के लिए किया गया था, ताकि विसरो-संवेदी प्रसंस्करण में शामिल मस्तिष्क क्षेत्रों की जांच की जा सके। एक अन्य अध्ययन ने ऑप्टिकल मार्ग की जांच करने के लिए एचएसवी टाइप 1 और टाइप 2 का उपयोग कियाः वायरस को आंख में इंजेक्ट करके, रेटिना से मस्तिष्क में मार्ग की कल्पना की गई थी। वायरल ट्रेसर मेजबान कोशिका से जुड़ने के लिए एक रिसेप्टर का उपयोग करते हैं और फिर उन्हें एंडोसाइटोस किया जाता है। उदाहरण के लिए, एचएसवी नेक्टिन रिसेप्टर का उपयोग करता है और फिर एंडोसाइटोस किया जाता है। एंडोसाइटोसिस के बाद, पुटिका के अंदर कम पी. एच. विरियन के लिफाफे को काट देता है जिसके बाद वायरस कोशिका शरीर में ले जाने के लिए तैयार हो जाता है। यह दिखाया गया कि एच. एस. वी. के लिए कोशिका को संक्रमित करने के लिए पी. एच. और एंडोसाइटोसिस महत्वपूर्ण हैं। अक्षतन्तु के साथ वायरल कणों का परिवहन माइक्रोट्यूबुलर साइटोस्केलेटन पर निर्भर करता है। आणविक अनुरेखक अनुरेखक एकटा समूह सेहो होइत छैक जाहिमे प्रोटीन उत्पाद होइत छैक जकरा कोशिका द्वारा लऽ लेल जा सकैत छैक आ सिनेप्सक पार अगिला कोशिकामे पहुँचाओल जा सकैत छैक। व्हीट-जर्म एग्लूटिनिन (डब्ल्यू. जी. ए.) और फेजोलस वल्गारिस ल्यूकोआग्लूटिनिन सबसे प्रसिद्ध ट्रेसर हैं, हालांकि वे सख्त एंटेरोग्रेड ट्रेसर नहीं हैंः विशेष रूप से डब्ल्यू. जी. ए. को एंटेरोग्रैड के साथ-साथ प्रतिगामी रूप से ले जाने के लिए जाना जाता है। डब्ल्यू. जी. ए. ओलिगोसेकेराइड्स से जुड़कर कोशिका में प्रवेश करता है, और फिर एक कैविओले-निर्भर मार्ग के माध्यम से एंडोसाइटोसिस के माध्यम से लिया जाता है। न्यूरोएनाटॉमी में व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले अन्य एंटेरोग्रेड ट्रेसर बायोटिनिलेटेड डेक्स्ट्रान एमाइन (बीडीए) हैं, जिनका उपयोग प्रतिगामी अनुरेखण में भी किया जाता है। इस तकनीक का उपयोग करने वाले अध्ययनों की आंशिक सूची एंटेरोग्रेड ट्रेसिंग तकनीक अब एक व्यापक शोध तकनीक है। निम्नलिखित अध्ययनों की एक आंशिक सूची है जिसमें एंटेरोग्रेड ट्रेसिंग तकनीकों का उपयोग किया गया हैः ताले, एम., रिचमैन, ई. बी., स्नेल, एन. जे., हार्टमैन, जी. जी., फिशर, जे. डी., सोरकैक, ए., सैंटोयो, जे. एफ., चौ-फ्रीड, सी., नायर, एन., जॉनसन, एम., सिज़मैनस्की, जे. आर., और बार्निया, जी. (नवंबर 2017)। ट्रांस-टैंगो द्वारा मक्खियों में दूसरे क्रम के स्वाद वाले न्यूरॉन्स का ट्रांससिनेप्टिक मानचित्रण। न्यूरॉन, 96 (4), 783-795.e4। https://doi.org/10.1016/j.neuron.2017.10.011 रेट्रोग्रेड ट्रेसिंग वायरल न्यूरोनल ट्रेसिंग संदर्भ प्रयोगशाला तकनीक भी देखें।