Ovarian culture
डिम्बग्रंथि संवर्धन एक इन-विट्रो प्रक्रिया है जो अंडाशय के विकास, विष विज्ञान और विकृति विज्ञान की जांच की अनुमति देती है। इस तकनीक का उपयोग प्रजनन उपचार के संभावित अनुप्रयोगों का अध्ययन करने के लिए भी किया जा सकता है। आदिम डिम्बग्रंथि के रोम से अंडकोशिकाओं को अलग करना जिनका उपयोग निषेचन के लिए किया जा सकता है। चूहे के डिम्बग्रंथि ऊतक का उपयोग करके संवर्धन विधियाँ कई संवर्धन प्रणालियाँ हैं जिन्हें डिम्बग्रंथि और कूपिका वृद्धि और विकास की जांच करने के लिए नियोजित किया जा सकता है। संपूर्ण डिम्बग्रंथि संस्कृति अक्षुण्ण डिम्बग्रंथि की संस्कृति आदिम रोम के गठन और विकास का समर्थन करती है। अंडाशय को नवजात चूहे के पिल्लों से विच्छेदित किया जाता है और अंडाशय संवर्धन माध्यम में रखा जाता है जिसमें बोवाइन सीरम एल्बुमेन (बीएसए) होता है जो α-मिनिमल एसेंशियल मीडिया (αMEM) में घुल जाता है। कल्चर को 37 डिग्री सेल्सियस, 5 प्रतिशत कार्बन डाइऑक्साइड ऊष्मायन यंत्र में बनाए रखा जाता है और फिर आगे के अध्ययन की सुविधा के लिए अंडाशय को जमाया या स्थिर किया जाता है। फॉलिकल कल्चर इंडिविजुअल कल्चरिंग की यह विधि अंत में प्री-एंट्रल से लेकर प्री-ओवुलेटरी चरण तक व्यक्तिगत फॉलिकल्स के विकास का समर्थन करती है। यह प्रणाली कूप विकास और हार्मोन उत्पादन का अध्ययन करने की अनुमति देती है। युवा चूहों के अंडाशय (19-23 दिन) को हटा दिया जाता है और आधा कर दिया जाता है, और सूक्ष्मदर्शी के तहत रोम की पहचान की जाती है। देर से पूर्व-एंट्रल रोम को 180-200 माइक्रोन व्यास और ग्रैनुलोसा कोशिकाओं की 2-3 परतों के रूप में पहचाना जाता है। फॉलिकल्स को हाथ से विच्छेदित किया जाता है और फिर संवर्धन के लिए उपयुक्तता के लिए जांच की जाती है। फॉलिकल्स को कल्चर के लिए केवल तभी चुना जाता है जब वे स्वस्थ हों (व्यास 190 ± 10 माइक्रोन; पारभासी; बिना गहरे अट्रेटिक क्षेत्रों के; अक्षुण्ण बेसल लैमिना)। कूप संवर्धन माध्यम (α-न्यूनतम आवश्यक माध्यम, पुनः संयोजक मानव कूप उत्तेजक हार्मोन, एस्कॉर्बिक एसिड और वयस्क महिला माउस सीरम) वाले कुओं को निर्जंतुक सिलिकॉन तेल से आच्छादित किया जाता है, जो मध्यम वाष्पीकरण को रोकता है। प्रत्येक कुएँ के तल पर एक कूप रखा जाता है और 37 डिग्री सेल्सियस, 5 प्रतिशत कार्बन डाइऑक्साइड ऊष्मायनक में रखा जाता है, जिसे 6 दिनों तक ताजा माध्यम वाले कुएँ में ले जाया जाता है। यदि वृद्धि माप को नेत्रहीन रूप से लिया जा रहा है तो तेल परत के कारण होने वाली विकृति का हिसाब रखा जाना चाहिए। फॉलिकल्स जमे हुए या स्थिर होते हैं ताकि आगे का विश्लेषण किया जा सके। 2 रोम को निकटता में संवर्धित करके, रोम-रोम की अंतःक्रियाओं की जांच की जा सकती है। रोम एक साथ दो-रोम इकाई बनाने के लिए बढ़ सकते हैं। रोमछिद्रों को ऊपर के रूप में अंडाशय से विच्छेदित किया जाता है, फिर जोड़े में एक दूसरे के संपर्क में रखा जाता है, कूप संवर्धन माध्यम और निर्जंतुक सिलिकॉन तेल के साथ एक कुएं में। विभिन्न आनुवंशिक स्रोतों से फॉलिकल्स को सह-संवर्धित किया जा सकता है ताकि सह-संवर्धित के भीतर ऊतक की उत्पत्ति को अलग किया जा सके। माध्यम को हर 2 दिन में बदला जाता है और 6 दिनों के बाद आगे की प्रक्रिया के लिए संवर्धन को स्थिर या जमे हुए किया जाता है। फॉलिकल-अंडाशय सह-संवर्धन यह विधि फॉलिकल-अंडाशय अंतःक्रियाओं का अध्ययन करने की अनुमति देती है। अंडाशय और रोमछिद्रों को ऊपर की तरह विच्छेदित किया जाता है और फिर एक रोमछिद्र को एक प्लेट पर नवजात अंडाशय के एक खंभे के संपर्क में रखा जाता है। कूप-अंडाशय प्लेट को कूप संवर्धन माध्यम में 37 डिग्री सेल्सियस, 5 प्रतिशत कार्बन डाइऑक्साइड पर 5 दिनों तक संवर्धित किया जाता है। इस बिंदु पर आगे की प्रक्रिया से पहले सह-संवर्धन को जमाया या स्थिर किया जाता है। ऊतक उत्पत्ति के बीच अंतर को सुविधाजनक बनाने के लिए अंडाशय और कूप अलग-अलग आनुवंशिक स्रोतों से होना चाहिए। डिम्बग्रंथि संवर्धन तकनीकों के उपयोग विष विज्ञान अध्ययन वर्तमान में प्रजनन विष विज्ञान के क्षेत्र में अनुसंधान मुख्य रूप से विवो में किया जाता है, हालांकि डिम्बग्रंथि रोम को विट्रो में उगाने की अनुमति देने के उद्देश्य से नई संवर्धन विधियों का विकास किया गया है। ये नई विधियाँ हमें अलग-अलग डिम्बग्रंथि के रोम, भ्रूण, अंडाशय (पूरा अंग या ऊतक का केवल हिस्सा), और भ्रूण स्टेम कोशिकाओं को कल्चर करने की अनुमति देती हैं। डिम्बग्रंथि संस्कृतियाँ अनुसंधान के लिए उपयोगी हैं क्योंकि वे हमें अंडाशय और रोम और अंडकोशिकाओं की इसकी विशेष संरचनाओं को नुकसान का पता लगाने के लिए इन विट्रो डिम्बग्रंथि संस्कृतियों की मॉड्यूलेटेड संस्कृति conditions.The क्षमता के साथ एक वातावरण में व्यवस्थित कूप विकास, आवधिक अंडाशय और कूप एट्रेसिया को दोहराने की अनुमति दे सकते हैं, जो संभावित विकासात्मक और/या प्रजनन विषाक्त पदार्थों की तेजी से जांच करने की अनुमति देता है। इसलिए, प्रजनन जीव विज्ञान और विष विज्ञान में डिम्बग्रंथि संवर्धन प्रणालियों का व्यापक रूप से उपयोग किया जा रहा है। पूरे अंडाशय या डिम्बग्रंथि के टुकड़ों का संवर्धन नियंत्रित तरीके से विभिन्न मापदंडों के मूल्यांकन की अनुमति देता है और इसलिए, इसमें अधिक पूर्ण प्रजनन विषाक्तता अध्ययन की क्षमता है। डिम्बग्रंथि संवर्धन का एक बड़ा लाभ डिम्बग्रंथि के भंडार को बनाने वाले आदिम रोम के पूल पर दवाओं के प्रभाव का मूल्यांकन करने की क्षमता है। हालाँकि, यह रणनीति संवर्धन समय की अवधि के संबंध में प्रतिबंधित है, क्योंकि छोटी अवधि कूपिक विकास सुनिश्चित करने के लिए पर्याप्त नहीं हो सकती है। इसके विपरीत, लंबी अवधि के संवर्धन से कोशिकाएँ नकारात्मक रूप से प्रभावित हो सकती हैं। अधिकांश इन विट्रो टॉक्सिकोलॉजी अध्ययनों में मादा चूहे और चूहे के मॉडल का उपयोग किया जाता है। इन प्रजातियों को संभालने में आसानी और छोटे आकार के कारण प्रजनन कार्य और प्रजनन क्षमता पर दवाओं के प्रतिकूल प्रभावों का आकलन करने के लिए चुना गया है। इसके अतिरिक्त, इन प्रजातियों को शारीरिक, शारीरिक और आनुवंशिक रूप से अच्छी तरह से चित्रित किया गया है। उनके छोटे जीवन चक्र गर्भावस्था, स्तनपान और युवावस्था का आकलन करना सुविधाजनक बनाते हैं। विषम मानव आबादी में विषाक्त जोखिम मूल्यांकन के लिए पशु अध्ययन की प्रासंगिकता अनिश्चित बनी हुई है क्योंकि यह अज्ञात है कि प्राप्त परिणामों को मनुष्यों के लिए बहिर्वेशन किया जा सकता है या नहीं। प्रजनन उपचार डिम्बग्रंथि संवर्धन में इन विवो परिपक्वता का उपयोग पॉलीसिस्टिक अंडाशय सिंड्रोम (पीसीओएस) के रोगियों में आईवीएफ के दौरान डिम्बग्रंथि हाइपरस्टिमुलेशन सिंड्रोम के जोखिम को समाप्त कर देगा। पी. सी. ओ. एस. के बिना, इन विट्रो परिपक्वता के अभी भी फायदे हैं क्योंकि प्रक्रिया कम तीव्र है क्योंकि सुपरओव्यूलेशन की आवश्यकता नहीं है। डिम्बग्रंथि संवर्धन के सिद्धांतों को उन महिलाओं पर लागू किया जा सकता है जो एफ. एस. एच. या एस्ट्रोजन संवेदनशील ट्यूमर के प्रति प्रतिरोधी हैं। आई. वी. एफ. की तुलना में, इन विट्रो परिपक्वता में उपयोग की जाने वाली कोशिकाओं को छोटे आकार में काटा जाता है, अपरिपक्व और अर्धसूत्रण के मेटाफ़ेज़ I चरण में गिरफ्तार किया जाता है। एक बार प्रयोगशाला में वे मेटाफ़ेज़ II के लिए परिपक्वता से गुजरते हैं। प्रजनन क्षमता संरक्षण डिम्बग्रंथि के ऊतक को डिम्बग्रंथि के हानिकारक उपचार से पहले काटा जा सकता है और क्रायोप्रेज़र्वेशन का उपयोग करके बाद के चरण में फिर से प्रत्यारोपित किया जा सकता है। हालाँकि, यह विधि डिम्बग्रंथि के कैंसर और ल्यूकेमिया वाले लोगों में घातकता की पुनरावृत्ति से जुड़ी है। सिद्धांत रूप में, डिम्बग्रंथि ऊतक संवर्धन इन रोगियों में निषेचन के लिए परिपक्व अंडकोशिकाओं का उत्पादन करने का एक सुरक्षित तरीका है। संदर्भ बाहरी लिंक इन विट्रो निषेचन कोशिका संवर्धन प्रजनन प्रजनन चिकित्सा पर्यावरण विष विज्ञान