Classical interference microscopy
शास्त्रीय हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी, जिसे मात्रात्मक हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी भी कहा जाता है, चरण विपरीत सूक्ष्मदर्शी या विभेदक हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी (डी. आई. सी.) की तुलना में बहुत अधिक पार्श्व पृथक्करण के साथ दो अलग-अलग प्रकाश किरणों का उपयोग करता है। हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी के विभिन्न रूपों में जहां वस्तु और संदर्भ किरण एक ही उद्देश्य से गुजरते हैं, प्रत्येक वस्तु की दो छवियां उत्पन्न होती हैं (एक "भूत छवि" है)। दोनों छवियों को या तो दृश्य क्षेत्र के भीतर या अलग-अलग फोकल प्लेन पर अलग किया जाता है, जैसा कि नियोजित ऑप्टिकल सिद्धांतों द्वारा निर्धारित किया जाता है। ये दोनों छवियाँ एक दूसरे को ओवरलैप करने पर एक उपद्रव हो सकती हैं, क्योंकि वे बड़े पैमाने पर मोटाई माप की सटीकता को गंभीर रूप से प्रभावित कर सकती हैं। इस प्रकार तैयारी का आवर्तन आवश्यक हो सकता है, जैसा कि डी. आई. सी. के मामले में होता है। पहले उपयोग करने योग्य हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी में से एक डायसन द्वारा डिजाइन किया गया था और कुक, ट्रोटन एंड सिम्स (बाद में विकर्स इंस्ट्रूमेंट्स), यॉर्क इंग्लैंड द्वारा निर्मित किया गया था। इस कुशल ऑप्टिकल प्रणाली ने बीम पथ में ध्रुवीकरण तत्वों की आवश्यकता के बिना हस्तक्षेप इमेजिंग हासिल की। ध्रुवीकरण तत्वों से जुड़े एक बाद के लोकप्रिय डिजाइन को स्मिथ द्वारा डिजाइन किया गया था और पहले सी. बेकर, लंदन द्वारा और बाद में अमेरिका में अमेरिकन ऑप्टिकल कंपनी द्वारा विपणन किया गया था। उपरोक्त सभी डिजाइनों के साथ आम तौर पर दोहरे चित्र की समस्या का सामना हॉर्न द्वारा लागू किए गए मैक-ज़ेन्डर इंटरफेरोमीटर डिजाइन में पूरी तरह से किया गया था, जो एक सबसे महंगा उपकरण है, जिसमें ध्रुवीकृत प्रकाश का उपयोग नहीं किया गया था, लेकिन सटीक रूप से मिलान किए गए डुप्लिकेट उद्देश्यों और कंडेनसर की आवश्यकता थी। इस डिजाइन (ई. लीट्ज द्वारा विपणन) के साथ सूक्ष्मदर्शी में 60 मिमी बीम पृथक्करण हासिल किया गया था, लेकिन यहां दो अलग-अलग सूक्ष्मदर्शी स्लाइड तैयारी (नमूना और डमी) की ऑप्टिकल मोटाई को संतुलित करने और लंबे अवलोकन के दौरान इस महत्वपूर्ण संतुलन को बनाए रखने में नई कठिनाई उत्पन्न हुई है। 37 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखी गई जीवित कोशिकाओं का समय-विराम अध्ययन, अन्यथा समय के साथ पृष्ठभूमि हस्तक्षेप रंग में क्रमिक परिवर्तन होता है। हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी मापन द्वारा प्रदान किया जाने वाला मुख्य लाभ जीवित कोशिकाओं के अनुमानित शुष्क द्रव्यमान को मापने की संभावना है, जिसका पहली बार एंड्रयू हक्सले द्वारा धारीदार मांसपेशी कोशिका संरचना और कार्य के अध्ययन में प्रभावी ढंग से उपयोग किया गया था, जिससे मांसपेशियों के संकुचन का स्लाइडिंग फिलामेंट मॉडल सामने आया। हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी की लोकप्रियता लगभग 1940-1970 s पर पहुंच गई और उसके बाद उपकरण की जटिलता और इसके उपयोग और छवि डेटा की व्याख्या दोनों में कठिनाइयों के कारण गिर गई। हाल के वर्षों में, शास्त्रीय हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी (विशेष रूप से मैक-ज़ेन्डर उपकरण) को जीवविज्ञानियों द्वारा "फिर से खोजा" गया है क्योंकि इसका मुख्य मूल नुकसान (अनुवादित हस्तक्षेप बैंड या जटिल रंगीन छवियों की कठिन व्याख्या) अब डिजिटल कैमरा छवि रिकॉर्डिंग के माध्यम से आसानी से पार किया जा सकता है, इसके बाद कंप्यूटर एल्गोरिदम का अनुप्रयोग जो संसाधित डेटा को तेजी से अनुमानित शुष्क द्रव्यमान की गलत-रंगीन छवियों के रूप में वितरित करता है। औद्योगिक निरीक्षण, अर्धचालक निरीक्षण और सतह संरचना विश्लेषण के लिए हस्तक्षेप सूक्ष्मदर्शी अत्यधिक विकसित है और व्यापक उपयोग में है। उपकरण इतिहास और निर्माताओं के नाम स्मिथ सिस्टम (सी. बेकर, लंदन, इंग्लैंड) डायसन (कुक ट्रोटन एंड सिम्स, यॉर्क, इंग्लैंड) जैमिन-लेबेडेफ (ई. लीट्ज़, वेटज़लर, और ज़ीस, जर्मनी) मैक-ज़ेन्डर (ई. लीट्ज़, वेटज़लर, जर्मनी) संदर्भ सूक्ष्मदर्शी