Magnetic-activated cell sorting
मैग्नेटिक-एक्टिवेटेड सेल सॉर्टिंग (एम. ए. सी. एस.) मिल्टेनी बायोटेक द्वारा आविष्कार किए गए सतह एंटीजन (सी. डी. अणु) के आधार पर विभिन्न कोशिका आबादी को अलग करने की एक विधि है। एम. ए. सी. एस. नाम कंपनी का पंजीकृत ट्रेडमार्क है। विधि को मिल्टेनी बायोटेक के एमएसीएस प्रणाली के साथ विकसित किया गया था, जो सुपरपैरामैग्नेटिक नैनोपार्टिकल्स और कॉलम का उपयोग करता है। सुपरपैरामैग्नेटिक नैनोपार्टिकल्स 100 एनएम के क्रम के होते हैं। इनका उपयोग लक्षित कोशिकाओं को टैग करने के लिए किया जाता है ताकि उन्हें कॉलम के अंदर पकड़ा जा सके। स्तंभ को स्थायी चुंबकों के बीच रखा जाता है ताकि जब चुंबकीय कण-कोशिका परिसर इसके माध्यम से गुजरता है, तो टैग की गई कोशिकाओं को पकड़ा जा सके। स्तम्भ में स्टील की ऊन होती है जो स्थायी चुंबकों के बीच स्तंभ को रखे जाने पर पृथक्करण दक्षता को अधिकतम करने के लिए चुंबकीय क्षेत्र ढाल को बढ़ाती है। चुंबकीय-सक्रिय कोशिका छँटाई प्रतिरक्षा विज्ञान, कैंसर अनुसंधान, तंत्रिका विज्ञान और स्टेम सेल अनुसंधान जैसे क्षेत्रों में आमतौर पर उपयोग की जाने वाली विधि है। मिल्टेनी माइक्रोबाइड बेचता है जो एंटीबॉडी के लिए संयुग्मित चुंबकीय नैनोकण होते हैं जिनका उपयोग विशिष्ट कोशिकाओं को लक्षित करने के लिए किया जा सकता है। प्रक्रिया एम. ए. सी. एस. विधि कोशिकाओं को एक विशेष सतह प्रतिजन के खिलाफ एंटीबॉडी के साथ लेपित चुंबकीय नैनोकणों का उपयोग करके अलग करने की अनुमति देती है। यह इस प्रतिजन को व्यक्त करने वाली कोशिकाओं को चुंबकीय नैनोकणों से जुड़ने का कारण बनता है। मोती और कोशिकाओं को इनक्यूबेट करने के बाद, घोल को एक मजबूत चुंबकीय क्षेत्र में एक स्तंभ में स्थानांतरित कर दिया जाता है। इस चरण में, नैनोकणों से जुड़ी कोशिकाएं (प्रतिजन को व्यक्त करने वाली) स्तंभ पर रहती हैं, जबकि अन्य कोशिकाएं (प्रतिजन को व्यक्त नहीं करने वाली) प्रवाहित होती हैं। इस विधि के साथ, कोशिकाओं को विशेष प्रतिजन (ओं) के संबंध में सकारात्मक या नकारात्मक रूप से अलग किया जा सकता है। सकारात्मक और नकारात्मक चयन सकारात्मक चयन के साथ, रुचि के प्रतिजन (ओं) को व्यक्त करने वाली कोशिकाएं, जो चुंबकीय स्तंभ से जुड़ी होती हैं, चुंबकीय क्षेत्र से स्तंभ को हटाने के बाद एक अलग पात्र में बह जाती हैं। यह विधि एक विशेष प्रकार की कोशिका के अलगाव के लिए उपयोगी है, उदाहरण के लिए सीडी4 लिम्फोसाइट्स। इसके अलावा, यह शुक्राणु का जल्दी पता लगाने में सक्षम बनाता है जो एपोप्टोसिस शुरू करता है, हालांकि वे पर्याप्त रूप और गतिशीलता दिखा सकते हैं। एक चुंबकीय-लेबल वाला रिसेप्टर जो एनेक्सिन से जुड़ता है, शुक्राणु में जोड़ा जाता है। सामान्य कोशिकाओं के अंदर, फॉस्फेटिडिलसेरिन अणु कोशिका झिल्ली के भीतर कोशिका द्रव्य की ओर स्थित होते हैं। फिर भी, उन कोशिकाओं में जो एपोप्टोटिक प्रक्रिया शुरू करते हैं, फॉस्फेटिडिलसेरिन इसके बजाय कोशिका झिल्ली के बाहरी हिस्से का सामना करता है, जो एनेक्सिन संयुग्म से जुड़ता है। इसलिए, सामान्य शुक्राणु लेबल किए गए रिसेप्टर से बंधे बिना स्तंभ से गुजरेंगे। दूसरी ओर, प्रोएपोप्टोटिक शुक्राणु फंसे रहेंगे, जो चुंबकीय-लेबल वाले एंटीबॉडी की बदौलत शुक्राणु चयन प्रक्रिया के रूप में सामने आता है। अंत में, इस तकनीक ने अपनी प्रभावकारिता दिखाई है, भले ही यह सीमित बनी हुई है। नकारात्मक चयन के साथ, उपयोग की जाने वाली एंटीबॉडी सतह एंटीजन (ओं) के खिलाफ होती है जो उन कोशिकाओं पर मौजूद होने के लिए जानी जाती हैं जो रुचि की नहीं होती हैं। कोशिकाओं/चुंबकीय नैनोकणों के विलयन को स्तंभ पर डालने के बाद इन प्रतिजनों को व्यक्त करने वाली कोशिकाएं स्तंभ से जुड़ती हैं और जो अंश गुजरता है उसे एकत्र किया जाता है, क्योंकि इसमें इन अवांछित प्रतिजनों के साथ लगभग कोई कोशिका नहीं होती है। संशोधन रुचि के प्रतिजन के खिलाफ एंटीबॉडी में संयुग्मित चुंबकीय नैनोपार्टिकल्स हमेशा उपलब्ध नहीं होते हैं, लेकिन इसे दरकिनार करने का एक तरीका है। चूंकि फ्लोरोफोर-संयुग्मित एंटीबॉडी बहुत अधिक प्रचलित हैं, इसलिए एंटी-फ्लूरोक्रोम एंटीबॉडी के साथ लेपित चुंबकीय नैनोपार्टिकल्स का उपयोग करना संभव है। वे रुचि के प्रतिजन के खिलाफ फ्लोरोसेंट-लेबल वाले एंटीबॉडी के साथ इनक्यूबेट किए जाते हैं और इस प्रकार प्रतिजन के संबंध में कोशिका पृथक्करण के लिए काम कर सकते हैं। फ्लो साइटोमेट्री डायनेबीड्स क्लस्टर्स ऑफ डिफ्रेंटिएशन आणविक जीवविज्ञान संदर्भ एस. मिल्टेनी, डब्ल्यू. मुलर, डब्ल्यू. वीचेल और ए. रेडब्रुक, "हाई ग्रेडिएंट मैग्नेटिक सेल सेपरेशन विद एमएसीएस", साइटोमेट्री, वॉल्यूम भी देखें। 11, नहीं। 2, पीपी। 231-238,1990।