Restriction landmark genomic scanning
रिस्ट्रिक्शन लैंडमार्क जीनोमिक स्कैनिंग (आर. एल. जी. एस.) हजारों स्थलों या प्रतिबंध स्थलों के तेजी से एक साथ दृश्य के लिए एक जीनोम विश्लेषण विधि है। प्रतिबंध एंजाइमों के संयोजन का उपयोग करके, जिनमें से कुछ डी. एन. ए. संशोधनों के लिए विशिष्ट हैं, तकनीक का उपयोग किसी दिए गए जीव के जीनोम में मिथाइलेशन स्तरों में अंतर को देखने के लिए किया जा सकता है। आर. एल. जी. एस. डी. एन. ए. के प्रत्यक्ष लेबलिंग को नियोजित करता है, जिसे पहले प्रतिबंध एंजाइमों की एक विशिष्ट श्रृंखला द्वारा काटा जाता है, और फिर एक रेडियोधर्मी समस्थानिक (आमतौर पर फॉस्फोरस-32) द्वारा लेबल किया जाता है। एक द्वि-आयामी इलेक्ट्रोफोरेसिस प्रक्रिया को तब नियोजित किया जाता है, जिससे उच्च-रिज़ॉल्यूशन परिणाम मिलते हैं। रेडियोधर्मी द्वितीय-आयाम जेल को फिर फिल्म की एक बड़ी चादर को उजागर करने की अनुमति दी जाती है। रेडियोधर्मी लेबलिंग द्वारा उत्पादित विकिरण इलेक्ट्रोफोरेसिस के दौरान जहां भी प्रतिबंध के टुकड़े स्थानांतरित हुए हैं, फिल्म को उजागर कर देगा। इसके बाद फिल्म को विकसित किया जाता है, जो एक ऑटोरैडियोग्राफ के रूप में परिणामों का एक दृश्य प्रतिनिधित्व देता है। प्रतिबंध एंजाइमों का एक ही संयोजन एक ही जीव के नमूनों से 'धब्बे' के एक ही पैटर्न का उत्पादन करेगा, लेकिन विभिन्न प्रकार के जीवों के लिए अलग-अलग पैटर्न। उदाहरण के लिए, जब एंजाइमों के एक ही संयोजन के साथ इलाज किया जाता है तो मानव और चूहे का डीएनए स्पष्ट रूप से अलग-अलग पैटर्न का उत्पादन करेगा। इन तैयार ऑटो-रेड की एक दूसरे के खिलाफ जांच की जा सकती है, जिससे जीन अभिव्यक्ति में किसी भी बदलाव का पता चलता है जो फिल्म में दृश्य अंतर पैदा करता है। प्रत्येक ऑटोरैडियोग्राफ में हजारों धब्बे होते हैं, जिनमें से प्रत्येक एक लेबल वाले डी. एन. ए. प्रतिबंध स्थलचिह्न के अनुरूप होता है। आर. एल. जी. एस. पूर्ण-जीनोम स्कैन करते समय उपयोगी हो जाता है, और एक बार में हजारों पॉलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रियाओं का काम प्रभावी ढंग से कर सकता है। यह आसानी से सामान्य से विचलित होने वाले परिवर्तनों का पता लगाता है, और इस प्रकार ट्यूमर में हाइपर/हाइपोमेथाइलेशन की पहचान करने, जीन को हटाने या बढ़ाने, या किसी जीव के विकास के दौरान जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन करने में असाधारण रूप से प्रभावी है। स्रोत http://www.informatics.jax.org/searches/accession_report.cgi?id=MGI: 71287 रोसवेल पार्क कॉम्प्रिहेंसिव कैंसर सेंटर से एक ऑटो-रेड की तस्वीर संदर्भ आणविक जीव विज्ञान प्रयोगशाला तकनीक जीनोमिक्स