SEA Native Peptide Ligation
असुरक्षित पेप्टाइड खंडों के देशी पेप्टाइड बंधन द्वारा प्रोटीन रासायनिक संश्लेषण प्रोटीन के उत्पादन के लिए जीवित प्रणालियों के उपयोग के लिए एक दिलचस्प पूरक और संभावित विकल्प है। प्रोटीन के संश्लेषण के लिए कुशल देशी पेप्टाइड बंधन विधियों की आवश्यकता होती है, जो असुरक्षित पेप्टाइड खंडों के बीच जलीय घोल में देशी पेप्टाइड बंधन के कीमोसेलेक्टिव गठन को सक्षम बनाते हैं। प्रोटीन के संश्लेषण के लिए सबसे अधिक उपयोग की जाने वाली तकनीक देशी रासायनिक बंधन (एन. सी. एल.) है। हालाँकि, विकल्प उभर रहे हैं, जिनमें से एक एस. ई. ए. नेटिव पेप्टाइड लाइगेशन है। एस. ई. ए. समूह एन, एस-एसाइल शिफ्ट प्रणालियों से संबंधित है क्योंकि इसकी प्रतिक्रियाशीलता पेप्टाइड खंड के सी-टर्मिनल कार्बोनिल समूह पर एक एस. ई. ए. थियोल समूह के इंट्रामोलिकुलर न्यूक्लियोफिलिक जोड़ द्वारा निर्धारित की जाती है। इसके परिणामस्वरूप पेप्टाइड श्रृंखला नाइट्रोजन से सल्फर में स्थानांतरित हो जाती है। एस. ई. ए. देशी पेप्टाइड बंधन की समग्र प्रक्रिया में पहले एक एन, एस-एसाइल शिफ्ट शामिल है जो एक पेप्टाइड थियोएस्टर के इन सीटू गठन के लिए है, और बाद में, थियोल-थियोएस्टर एक्सचेंज के बाद, पेप्टाइड बंधन के गठन के लिए एक एस, एन-एसाइल शिफ्ट शामिल है। एस. ई. ए. अभिक्रिया का विवरण बिस (2-सल्फेनीलेथाइल) एमिडो (योजना 1) का संक्षिप्त नाम है। एस. ई. ए. बंधन में एक पेप्टाइड की प्रतिक्रिया शामिल है जिसमें एक सी-टर्मिनल बिस (2-सल्फेनीलेथाइल) एमिडो समूह के साथ एक सिस पेप्टाइड होता है। यह प्रतिक्रिया संभवतः एक क्षणिक थियोएस्टर मध्यवर्ती के गठन के माध्यम से आगे बढ़ती है, जो पेप्टाइड सी-टर्मिनल कार्बोनिल समूह पर एक एस. ई. ए. थियोल के इंट्रामोलिकुलर हमले से प्राप्त होती है जैसा कि योजना 1 में दिखाया गया है। फिर, थियोएस्टर थियोल-थियोएस्टर आदान-प्रदान की एक श्रृंखला से गुजरता है, जिसमें बंधन मिश्रण में मौजूद एक्सोजेनियस थियोल्स जैसे कि मर्केप्टोफिनाइल एसिटिक एसिड (एम. पी. ए. ए.) शामिल हैं। दूसरे पेप्टाइड खंड के सिस्टीन थियोल समूह के साथ आदान-प्रदान के परिणामस्वरूप एक क्षणिक थियोएस्टर मध्यवर्ती होता है, जो मूल रासायनिक बंधन के लिए, इंट्रामोलिकुलर एस, एन-एसाइल द्वारा पुनर्संयोजित होता है जो एक मूल पेप्टाइड बंधन में स्थानांतरण करता है। प्रकाशन एस. ई. ए. देशी पेप्टाइड बंधन का वर्णन करने वाला पहला सहकर्मी समीक्षा प्रकाशन मेलनिक, ओ. एट अल द्वारा ऑर्गेनिक लेटर्स में प्रकाशित किया गया था। (ओलिवियर, एन.; धियूर, जे.; मिडिया, आर.; ब्लैनपेन, ए.; मेलनिक, ओ., बिस (2-सल्फेनीलेथिल) एमिनो देशी पेप्टाइड बंधन। ऑर्ग. चलो। 2010, 12, (22), 5238-41; प्रकाशन तिथि (वेब): 21 अक्टूबर, 2010। कुछ हफ्तों बाद, वही प्रतिक्रिया लियू, सी. एफ. (हाउ, डब्ल्यू.; झांग, एक्स.; ली, एफ.; लियू, सी. एफ., पेप्टिडाइल एन, एन-बिस (2-मर्केप्टोइथाइल)-एमाइड्स द्वारा मूल रासायनिक बंधन के लिए थियोएस्टर प्रीकर्सर के रूप में प्रकाशित की गई थी। ऑर्ग. चलो। 2011, 13, 386-389; प्रकाशन तिथि (वेब): 22 दिसंबर, 2010)। एस. ई. ए. ऑन/ऑफ अवधारणा एस. ई. ए. ऑन/ऑफ अवधारणा एस. ई. ए. समूह के रेडॉक्स गुणों का फायदा उठाती है। एस. ई. ए. के ऑक्सीकरण के परिणामस्वरूप एक चक्रीय डाइसल्फ़ाइड बनता है जिसे एस. ई. ए. बंद कहा जाता है, जो एस. ई. ए. का एक स्व-संरक्षित रूप है। एस. ई. ए. बंद और एस. ई. ए. चालू को आसानी से कमी/ऑक्सीकरण द्वारा परिवर्तित किया जा सकता है जैसा कि योजना 2 में दिखाया गया है। संदर्भ पेप्टाइड्स रासायनिक प्रतिक्रियाएँ