Glucose phosphate broth
ग्लूकोज फॉस्फेट शोरबा मिथाइल रेड (एम. आर.) परीक्षण और वोग्स-प्रोस्कॉयर परीक्षण (वी. पी.) करने के लिए उपयोग किया जाता है। सामग्री ग्लूकोज-5 ग्राम/एल डाइपोटैशियम फॉस्फेट-5 ग्राम/एल प्रोटीज पेप्टोन-5 ग्राम/एल आसुत जल-1000 एमएल पीएच-6.9 मिथाइल लाल परीक्षण सिद्धांत इसका उपयोग ग्लूकोज के किण्वन द्वारा मिश्रित एसिड का उत्पादन करने की जीव की क्षमता को निर्धारित करने और माध्यम की बफरिंग क्षमता को दूर करने के लिए किया जाता है। प्रक्रिया परीक्षण जीव के शुद्ध संवर्धन के साथ मैककॉन्की (ग्लूकोज फॉस्फेट शोरबा) का टीकाकरण करें। 48-72 घंटों के लिए शोरबा को 35 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। इन्क्यूबेशन के बाद ट्यूब के किनारों के माध्यम से सीधे शोरबे में मिथाइल लाल की 5 बूंदें डालें। व्याख्या माध्यम की सतह में स्थिर लाल रंग का विकास पीएच को 4.4 तक कम करने के लिए पर्याप्त एसिड उत्पादन का संकेत देता है और एक सकारात्मक परीक्षण का गठन करता है। चूँकि अन्य जीव परीक्षण सब्सट्रेट से कम मात्रा में एसिड का उत्पादन कर सकते हैं, पीले और लाल के बीच एक मध्यवर्ती नारंगी रंग विकसित हो सकता है। यह सकारात्मक परीक्षण का संकेत नहीं देता है। नियंत्रण सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण प्रत्येक माध्यम की तैयारी के बाद चलाए जाने चाहिए। सकारात्मक नियंत्रणः एस्चेरिचिया कोलाई नकारात्मक नियंत्रणः क्लेबसिएला वोगेस प्रोस्कॉयर परीक्षण सिद्धांत इसका उपयोग कुछ जीवों की ग्लूकोज किण्वन से एक तटस्थ अंतिम उत्पाद, एसिटाइल मिथाइल कार्बिनोल (एसिटॉइन) का उत्पादन करने की क्षमता को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। क्लेबसिएला, एंटरोबैक्टर आदि जैसे सदस्यों द्वारा उत्पादित एक तटस्थ प्रतिक्रियाशील अंतिम उत्पाद एसीटॉइन का उत्पादन, ग्लूकोज चयापचय का मुख्य अंतिम उत्पाद है और मिश्रित एसिड की कम मात्रा बनाता है। वायुमंडलीय ऑक्सीजन और 40 प्रतिशत केओएच की उपस्थिति में, एसीटॉइन को डायसिटाइल में परिवर्तित किया जाता है और α-नेफ्थोल लाल रंग के परिसर को बाहर लाने के लिए उत्प्रेरक के रूप में कार्य करता है। मीडिया ग्लूकोज फॉस्फेट शोरबा अभिकर्मक एः α-नैफ्थोल-5 ग्राम एब्सोल्यूट एथिल अल्कोहल-100 एमएल-0.6 एमएल-3 भाग बीः केओएच-40 ग्राम आसुत जल-100 एमएल-0.2 एमएल-1 भाग प्रक्रिया ग्लूकोज फॉस्फेट शोरबा की एक नली को परीक्षण जीव के शुद्ध इनोकुलम के साथ इनोक्युलेट करें और 24 घंटे के लिए 35 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। इस शोरबे के 1 मिलीलीटर में 5 प्रतिशत α-नाफ्थोल का 0.6 मिलीलीटर और उसके बाद 40 प्रतिशत KOH का 0.2 मिलीलीटर डालें। वायुमंडलीय ऑक्सीजन के लिए माध्यम को उजागर करने के लिए ट्यूब को धीरे से हिलाएं और ट्यूब को 10-15 मिनटों के लिए अबाधित रहने दें। व्याख्या एक सकारात्मक परीक्षण अभिकर्मकों को जोड़ने के बाद 15 मिनट या उससे अधिक समय में लाल रंग के विकास द्वारा दर्शाया जाता है, जो एसिटॉइन के ऑक्सीकरण उत्पाद डायसिटाइल की उपस्थिति का संकेत देता है। 1 घंटे तक खड़े रहने के बाद परीक्षण लाल होना चाहिए क्योंकि नकारात्मक वी. पी. कल्चर तांबे जैसे रंग का उत्पादन कर सकते हैं जिसके परिणामस्वरूप संभावित रूप से एक गलत सकारात्मक व्याख्या हो सकती है, क्योंकि मिश्रित होने पर अभिकर्मकों की क्रिया के कारण भी। नियंत्रण सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण प्रत्येक माध्यम की तैयारी के बाद चलाए जाने चाहिए। सकारात्मक नियंत्रणः क्लेबसिएला नकारात्मक नियंत्रणः एस्चेरिचिया कोलाई संदर्भ पीएच संकेतक सूक्ष्म जीव विज्ञान तकनीक