MHC multimer
एम. एच. सी. मल्टीमर्स एम. एच. सी. अणुओं के ऑलिगोमेरिक रूप हैं, जिन्हें असंबंधित टी-कोशिकाओं के एक बड़े समूह के बीच विशिष्ट प्रतिजनों के प्रति उच्च आत्मीयता वाली टी-कोशिकाओं की पहचान करने और उन्हें अलग करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। मल्टीमर आम तौर पर आकार में डाइमर से लेकर ऑक्टेमर तक होते हैं; हालाँकि, कुछ कंपनियां प्रति मल्टीमर एम. एच. सी. की और भी अधिक मात्रा का उपयोग करती हैं। मल्टीमर का उपयोग वर्ग 1 एम. एच. सी., वर्ग 2 एम. एच. सी., या गैर-शास्त्रीय अणुओं को प्रदर्शित करने के लिए किया जा सकता है। सीडी1डी) बंदरों, चूहों और मनुष्यों जैसी प्रजातियों से। पृष्ठभूमि चूंकि टी-कोशिका रिसेप्टर्स का अपने एम. एच. सी. समकक्षों के लिए कम लगाव होता है, इसलिए एकल एम. एच. सी.-टी.-कोशिका अंतःक्रियाओं का प्रभावी ढंग से उपयोग करके टी कोशिकाओं को लेबल करना ऐतिहासिक रूप से समस्याग्रस्त था। हालाँकि, 1996 में जॉन ऑल्टमैन ने संबंधित टी-कोशिकाओं के बीच अधिक स्थिर बंधन बनाने के लिए कई एम. एच. सी अणुओं के एक परिसर का उपयोग करने का प्रस्ताव रखा था। उत्पादन सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले एम. एच. सी. मल्टीमर टेट्रामर हैं। ये आम तौर पर बायोटिनिलेटिंग घुलनशील एम. एच. सी. मोनोमर्स द्वारा उत्पादित होते हैं, जो आम तौर पर यूकेरियोटिक या बैक्टीरियल कोशिकाओं में पुनर्संयोजित रूप से उत्पादित होते हैं। ये मोनोमर्स फिर एक रीढ़ की हड्डी से जुड़ते हैं, जैसे कि स्ट्रेप्टाविडिन या एविडिन, जिससे एक टेट्रावेलेंट संरचना बनती है। इन रीढ़ की हड्डियों को फ्लोरोक्रोम के साथ संयुग्मित किया जाता है ताकि बाद में फ्लो साइटोमेट्री के माध्यम से बाध्य टी-कोशिकाओं को अलग किया जा सके। संभावित नैदानिक अनुप्रयोग एम. एच. सी. मल्टीमर्स प्रतिजन-विशिष्ट टी-कोशिका का पता लगाने और अलगाव में विशिष्टता के पहले अप्राप्य स्तर की अनुमति देते हैं। यह क्षमता कई नैदानिक अनुप्रयोगों को जन्म देती है। एम. एच. सी. मल्टीमर्स वायरल या ट्यूमर से संबंधित एंटीजन के लिए विशिष्ट टी-कोशिकाओं के एक्स विवो चयन और प्रसार की अनुमति देते हैं, जिन्हें फिर प्रतिरक्षा प्रणाली को बढ़ाने के लिए फिर से पेश किया जा सकता है। एम. एच. सी. मल्टीमर्स का उपयोग प्रत्यारोपण अंगों, एक्स विवो पर ग्राफ्ट-उत्पन्न करने वाली टी-कोशिकाओं को खत्म करने के लिए भी किया जा सकता है। एम. एच. सी. मल्टीमर्स का उपयोग विवो में हानिकारक या अवांछित टी-कोशिकाओं को खत्म करने के लिए भी किया जा सकता है, जैसे कि वे जो स्व-कोशिकाओं को लक्षित करती हैं और ऑटोइम्यून बीमारी का कारण बनती हैं। कैंसर इम्यूनोथेरेपी और टीके का विकास भी इस तकनीक से काफी हद तक प्रभावित हो सकता है। उप-प्रकार एम. एच. सी. टेट्रामर एम. एच. सी. टेट्रामर में चार एम. एच. सी. अणु, एक टेट्रामेराइजेशन एजेंट और एक फ्लोरोसेंट लेबल वाला प्रोटीन (आमतौर पर स्ट्रेप्टाविडिन) होता है। एम. एच. सी. के लिए 6 या 12 बाध्यकारी स्थलों के साथ स्ट्रेप्टाविडिन भी उत्पन्न किए गए हैं। एम. एच. सी. टेट्रामर का उपयोग एपिटोप विशिष्ट बंधन द्वारा विशिष्ट टी-कोशिकाओं की पहचान करने और लेबल करने के लिए किया जाता है, जिससे पशु मॉडल और मानव दोनों में प्रतिजन विशिष्ट प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का विश्लेषण किया जा सकता है। एम. एच. सी. टेट्रामर को मूल रूप से साइटोटॉक्सिक टी कोशिकाओं की पहचान के लिए एम. एच. सी. वर्ग I अणुओं का उपयोग करके विकसित किया गया था, लेकिन पिछले दशक में उन्होंने विभिन्न प्रकार के प्रतिजनों द्वारा सी. डी. 4. टी. कोशिकाओं की पहचान की अनुमति दी है। टेट्रामर परख का उपयोग एकल-कोशिका फेनोटाइपिंग और कोशिका गिनती के लिए किया जाता है, और ईएलआईएसपीओटी और एकल-कोशिका पीसीआर जैसे अन्य तरीकों पर एक महत्वपूर्ण लाभ प्रदान करते हैं क्योंकि वे पुनर्प्राप्ति और क्रमबद्ध कोशिकाओं के आगे के अध्ययन को सक्षम करते हैं। एक फ्लो-साइटोमेट्री-आधारित अनुप्रयोग के रूप में, टेट्रामर का उपयोग करना भी आसान है और एंटीबॉडी-आधारित फ्लो साइटोमेट्री अध्ययनों के समान उनका परीक्षण करने का समय भी कम होता है। एम. एच. सी. टेट्रामर का उपयोग रोगजनक प्रतिरक्षा और टीके के विकास के अध्ययन में, एंटीट्यूमर प्रतिक्रियाओं के मूल्यांकन में, एलर्जी निगरानी और असंवेदनशीलता अध्ययनों में और स्वप्रतिरक्षा में किया जाता है। वे टी कोशिकाओं को चिह्नित करने के लिए एक आदर्श साधन प्रदान करते हैं जो एक टीके के प्रति प्रतिक्रिया करते हैं, और उनका उपयोग कई टीका प्रणालियों में टी कोशिका प्रतिक्रियाओं का परीक्षण करने के लिए किया गया है, जिसमें इन्फ्लूएंजा, पीत ज्वर, तपेदिक, एचआईवी/एसआईवी और मेलेनोमा और क्रोनिक मायलोइड ल्यूकेमिया सहित बड़ी संख्या में कैंसर वैक्सीन परीक्षण शामिल हैं। वर्ग II टेट्रामर का उपयोग रोगजनकों के लिए विभिन्न प्रकार की मानव सीडी4टी कोशिका प्रतिक्रियाओं के विश्लेषण के लिए किया गया है, जिसमें इन्फ्लूएंजा ए, बोरेलिया, एपस्टीन-बार वायरस, सीएमवी, माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस, मानव टी-लिम्फोट्रोपिक वायरस 1, हेपेटाइटिस सी, एंथ्रेक्स, गंभीर तीव्र श्वसन सिंड्रोम वायरस, मानव पेपिलोमावायरस और एचआईवी शामिल हैं। टेट्रामर प्रकार विकसित किए गए हैं, जो या तो रेडियोलेबल्ड हैं या सैपोरिन जैसे विष के साथ युग्मित हैं, जिन्हें जीवित चूहों में निर्दिष्ट टी कोशिका आबादी को संशोधित करने या कम करने के लिए इंजेक्ट किया जा सकता है। पेप्टाइड-एम. एच. सी. टेट्रामर का भी चिकित्सीय रूप से उपयोग किया गया है। उदाहरण के लिए, साइटोमेगालोवायरस-विशिष्ट टी कोशिकाओं को स्टेम सेल प्रत्यारोपण रोगियों के लिए एक चिकित्सा के रूप में उपयोग करने के लिए चुंबकीय मनका-आधारित संवर्धन का उपयोग करके शुद्धता के उच्च स्तर तक समृद्ध किया गया है। एम. एच. सी. पेंटामर पेंटामर में पाँच एम. एच. सी.-पेप्टाइड हेडग्रुप होते हैं, जो एक समतल विन्यास में व्यवस्थित होते हैं ताकि, एम. एच. सी. टेट्रामर के विपरीत, सभी हेडग्रुप सी. डी. 8 + टी सेल से संपर्क कर सकें। हेडग्रुप लचीले लिंकर्स के माध्यम से एक कुंडलित-कुंडल बहुआयामीकरण डोमेन से जुड़े होते हैं, जो बदले में पांच फ्लोरोसेंट या बायोटिन टैग से जुड़े होते हैं। पेंटामर एपीसी, आर-पीई, या बायोटिन लेबलिंग के साथ उपलब्ध हैं, और दीर्घकालिक भंडारण के लिए अलग-अलग टैग के साथ बिना लेबल वाले भी हैं। पेंटामर अन्य मल्टीमर अभिकर्मकों की तुलना में बेहतर चमक और धुंधलापन प्रदान करते हैं। एम. एच. सी. पेंटामर का उपयोग फ्लो साइटोमेट्री में प्रतिजन-विशिष्ट सी. डी. 8 + टी कोशिकाओं का पता लगाने में किया गया है, और 750 से अधिक सहकर्मी समीक्षा प्रकाशनों में उद्धृत किया गया है, जिनमें कई पत्रिकाओं नेचर एंड साइंस में शामिल हैं। एम. एच. सी. पेंटामर का उपयोग ऊतक धुंधला करने और प्रतिजन-विशिष्ट टी कोशिकाओं के चुंबकीय अलगाव में भी किया जा सकता है। जबकि पेंटामर्स को केवल अनुसंधान उपयोग के लिए लाइसेंस दिया गया है, 2009 में एक टीम को माँ-बेटी के स्थानांतरण के लिए ई. बी. वी.-विशिष्ट टी कोशिकाओं को अलग करने के लिए, बेटी में ई. बी. वी. से जुड़े लिम्फोमा के जीवन रक्षक उपचार के लिए उनका उपयोग करने के लिए एक विशेष वितरण प्रदान किया गया था। पेंटामर्स निम्नलिखित रोग क्षेत्रों से एंटीजन के लिए उपलब्ध हैंः एडेनोवायरस, एचसीवी, मलेरिया, एसआईवी, ऑटोइम्यून रोग, एचआईवी, प्रत्यारोपण एंटीजन, ट्राइपानोसोमा, कैंसर, एचपीवी, तपेदिक, क्लैमाइडिया, एचटीएलवी, वैक्सीनिया, सीएमवी, इन्फ्लूएंजा, वीएसवी, ईबीवी, एलसीएमवी, आरएसवी, वेस्ट नाइल वायरस, एचबीवी, लिस्टेरिया, सेंडाई वायरस, पीला बुखार। कस्टम विशिष्टता वाले पेंटामर भी चालू किए जा सकते हैं। पेंटामर का उपयोग वर्तमान में शिक्षाविदों, उद्योग और चिकित्सकों द्वारा अनुसंधान में किया जाता है, और पेंटामर का उपयोग करके अनुसंधान कई अवसरों पर अंतर्राष्ट्रीय मीडिया में दिखाई दिया है। एम. एच. सी. डेक्सट्रैमर® एम. एच. सी. मल्टीमर का एक रूप है जिसे 2002 में डेनिश जैव प्रौद्योगिकी कंपनी, इम्यूडेक्स द्वारा विकसित और ट्रेडमार्क किया गया था। डेक्सट्रैमर अभिकर्मकों को फ्लोरोसेंट रूप से एफ. आई. टी. सी., पी. ई. या ए. पी. सी. के साथ लेबल किया जाता है, और इसमें एक डेक्सट्रान रीढ़ से जुड़े एम. एच. सी. अणु होते हैं, जिनका उपयोग फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके द्रव कोशिकाओं और ठोस ऊतक नमूनों में प्रतिजन-विशिष्ट टी-कोशिकाओं का पता लगाने के लिए किया जाता है। इन टी-कोशिकाओं में टी-सेल रिसेप्टर्स (टी. सी. आर.) होते हैं जो एंटीजन प्रस्तुत करने वाली कोशिकाओं की सतह पर प्रदर्शित एक विशिष्ट एम. एच. सी.-पेप्टाइड कॉम्प्लेक्स को पहचानते हैं जो इन विशिष्ट टी-सेल आबादी का पता लगाने, अलगाव करने और मात्रा निर्धारित करने की अनुमति देता है क्योंकि मल्टीमर्स की पिछली पीढ़ियों में बेहतर संकेत-से-शोर अनुपात मौजूद नहीं है। डेक्सट्रैमर अभिकर्मकों को विभिन्न रोगों में शामिल विभिन्न मानव, चूहे और रीसस मकाक जीन के लिए बड़ी संख्या में एम. एच. सी.-पेप्टाइड्स के साथ विकसित किया गया है, जिनमें कैंसर, एच. आई. वी., एपस्टीन-बार वायरस (ई. बी. वी.), साइटोमेगालोवायरस (सी. एम. वी.), एल. सी. एम. वी., ह्यूमन पेपिलोमावायरस (एच. पी. वी.), बी. के. पॉलीओमावायरस, एच. टी. एल. वी., हेपेटाइटिस, माइकोबैक्टीरियम और ग्राफ्ट-वर्सेस-होस्ट रोग शामिल हैं, लेकिन इन्हीं तक सीमित नहीं हैं। डेक्सट्रैमर तकनीक का उपयोग वर्तमान में शैक्षणिक और नैदानिक अनुसंधान में उनकी बढ़ी हुई विशिष्टता और बाध्यकारी आत्मीयता के कारण किया जाता है, जो विशिष्ट टी-कोशिकाओं के लिए उत्साह बढ़ाने की अनुमति देता है और दाग की तीव्रता को बढ़ाता है। यह लाभ डेक्सट्रैमर की एकल टी-कोशिका से कई बार जुड़ने की बढ़ती क्षमता का परिणाम है, जिससे पेंटामर और टेट्रामर जैसी अन्य मल्टीमर तकनीकों की तुलना में इस अंतःक्रिया की स्थिरता में सुधार होता है। आगे के अनुप्रयोगों में विभिन्न रोग स्थितियों के लिए प्रतिजन विशिष्ट टी-कोशिका आबादी को अलग करने के साथ-साथ इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री (आई. एच. सी.) का उपयोग करके स्थिति का पता लगाने की क्षमता शामिल है। ठोस ट्यूमर)। इसलिए ये अभिकर्मक भविष्य की दवा और टीके के विकास के लिए महत्वपूर्ण हैं। इम्यूडेक्स ने रक्त के नमूनों में सी. डी. 8 + टी-कोशिकाओं का खोजपूर्ण पता लगाने और उनकी मात्रा निर्धारित करने के लिए एक सी. एम. वी. डेक्सट्रैमर® परख विकसित की, जिसमें भविष्य की नैदानिक स्थितियों में सी. एम. वी. की प्रगति की जांच और निगरानी में सहायता के लिए एपिटोप की एक विस्तृत श्रृंखला शामिल है। एम. एच. सी. डेक्सट्रैमर अभिकर्मक एम. एच. सी. वर्ग I और एम. एच. सी. वर्ग II अणुओं के साथ उपलब्ध हैं। संदर्भ प्रतिरक्षा विज्ञान