Supravital staining
अधोमुखी धुंधलापन धुंधलापन की एक विधि है जिसका उपयोग सूक्ष्मदर्शी में जीवित कोशिकाओं की जांच करने के लिए किया जाता है जिन्हें किसी जीव से हटा दिया गया है। यह इंट्रावाइटल स्टेनिंग से अलग है, जो शरीर में दाग को इंजेक्ट करके या अन्यथा पेश करके किया जाता है। इस प्रकार एक अधोमुखी दाग में अधिक विषाक्तता हो सकती है, क्योंकि केवल कुछ कोशिकाओं को थोड़ी देर के लिए जीवित रहने की आवश्यकता होती है। "महत्वपूर्ण दाग" शब्द का उपयोग कुछ लेखकों द्वारा विशेष रूप से एक इंट्रावाइटल दाग को संदर्भित करने के लिए किया जाता है, और अन्य लोगों द्वारा एक सुपर्रावाइटल दाग के साथ, मूल अवधारणा यह है कि जिस कोशिका की जांच की जा रही है वह अभी भी जीवित है। चूँकि कोशिकाएँ जीवित होती हैं और शरीर के बाहर ठीक नहीं होती हैं, इसलिए अधोमुखी दाग अस्थायी प्रकृति के होते हैं। सबसे आम अतिप्रवाही दाग रेटिक्युलोसाइट्स पर नए मिथिलीन नीले या शानदार क्रेसिल नीले रंग का उपयोग करके किया जाता है, जिससे अतिप्रवाही दाग द्वारा इन जीवित अपरिपक्व लाल रक्त कोशिकाओं में विशिष्ट रूप से अवक्षेपित राइबोसोम के रेटिक्युलोफिलामेंटस पैटर्न को देखना संभव हो जाता है। ऐसी कोशिकाओं की संख्या की गणना करके लाल रक्त कोशिका निर्माण की दर निर्धारित की जा सकती है, जो अस्थि मज्जा गतिविधि और एनीमिया में एक अंतर्दृष्टि प्रदान करती है। यह महत्वपूर्ण दाग के विपरीत है, जब नियोजित रंग वह होता है जिसे जीवित कोशिकाओं से बाहर रखा जाता है ताकि केवल मृत कोशिकाओं को सकारात्मक रूप से दाग लगाया जा सके। (महत्वपूर्ण दागों में ट्राइपन ब्लू और प्रोपिडियम आयोडाइड जैसे रंग शामिल हैं, जो या तो बहुत भारी होते हैं या कोशिका झिल्ली को पार करने के लिए बहुत अधिक आवेशित होते हैं, या जो सक्रिय रूप से जीवित कोशिकाओं द्वारा तेजी से पंप किए जाते हैं।) एफ. ए. सी. एस. विश्लेषण जैसे अनुप्रयोगों के लिए सुपरवैटल स्टेनिंग को कोशिका सतह एंटीबॉडी स्टेनिंग (इम्यूनोफ्लोरेसेंस) के साथ जोड़ा जा सकता है। डिटर्जेंट ट्राइटन एक्स-100 का उपयोग करके प्रतिवर्ती कोशिका पारगम्यता द्वारा जीवित कोशिकाओं के आंतरिक भाग के भीतर भी इम्यूनोफ्लोरेसेंस किया जा सकता है। कोशिकाओं की संख्या के लिए उचित सांद्रता के लिए सावधानीपूर्वक समायोजित, पूर्व-उपचार कोशिका के आंतरिक भाग में 1 और 150 किलोडाल्टन के बीच अणुओं की पहुंच की अनुमति दे सकता है। हालांकि इस संदर्भ में एंटीबॉडी का उपयोग इसी तरह से किया जा सकता है, लेकिन "सुपर्राविटल स्टेन" शब्द आमतौर पर छोटे रसायनों के लिए आरक्षित है जिनमें आंतरिक रूप से उपयुक्त गुण होते हैं। आर. बी. सी. के लिए सामान्य अधोमुखी रंगों के उदाहरण अधोमुखी रंगः नया मिथिलीन नीला उज्ज्वल क्रेसिल नीला क्रिस्टल बैंगनी मिथाइल बैंगनी नील नीला होचस्ट दाग संदर्भ धुंधलापन