SDD-AGE
जैव रसायन और आणविक जीव विज्ञान में, एस. डी. डी.-ए. जी. ई. अर्ध-असंतृप्त डिटर्जेंट अगरोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस के लिए संक्षिप्त है। यह बड़े प्रोटीन पॉलिमरों का पता लगाने और उन्हें चिह्नित करने की एक विधि है जो अधिकांश बड़े प्रोटीन परिसरों के विपरीत कमरे के तापमान पर 2 प्रतिशत एस. डी. एस. में स्थिर होते हैं। यह विधि प्रियॉन और एमाइलॉइड के अध्ययन के लिए बहुत उपयोगी है, जो प्रोटीनयुक्त पॉलिमर के गठन की विशेषता है। अगरोज का उपयोग जेल के लिए किया जाता है क्योंकि एस. डी. एस. प्रतिरोधी पॉलिमर बड़े होते हैं (200-4000 + के. डी. ए. रेंज में) और पारंपरिक पॉलीएक्रिलामाइड जेल में प्रवेश नहीं कर सकते हैं, जिसमें छोटे छिद्र होते हैं। दूसरी ओर अगरोज में बड़े छिद्र होते हैं, जो पॉलिमर को अलग करने की अनुमति देते हैं। इस विधि के उपयोग ने शोधकर्ताओं को यह समझने में मदद की कि कम से कम कुछ प्रकार के प्रियॉन समुच्चय दो-स्तरीय संरचना में मौजूद थे-पॉलिमर में समूहीकृत प्रोटीन अणु, जो बहुत स्थिर हैं और कमरे के तापमान पर 2 प्रतिशत एस. डी. एस. के साथ उपचार का सामना करते हैं, और समुच्चय, जो पॉलिमर के बंडल हैं, जो इन स्थितियों में अलग हो जाते हैं। पॉलिमर के आकार में अंतर विवो में बहुलक विखंडन की दक्षता का संकेत दे सकते हैं। यह विधि रूसी हृदय विज्ञान अनुसंधान संस्थान की आणविक आनुवंशिकी प्रयोगशाला में बनाई गई थी और 2003 में क्रिंडुश्किन एट अल द्वारा प्रकाशित की गई थी। मूल विधि में एक टी. ए. ई. बफरिंग प्रणाली का उपयोग किया गया और एक झिल्ली (मूल रूप से पी. वी. डी. एफ.) पर प्रोटीन के हस्तांतरण के लिए एक संशोधित वैक्यूम ब्लॉटिंग प्रणाली को शामिल किया गया। संशोधित वैक्यूम ब्लॉटिंग प्रणाली वास्तव में एक वैक्यूम-सहायता प्राप्त केशिका स्थानांतरण है, क्योंकि वैक्यूम केवल उस तरल पदार्थ की मदद करता है जो पहले से ही प्रणाली को छोड़ने के लिए जेल और झिल्ली से गुजर चुका है। भिन्नता अन्य संशोधनों का भी उपयोग किया गया है, जैसे कि बागरियान्तसेव एट अल में वर्णित एक, पारंपरिक गीले स्थानांतरण और एक टी. जी. बी. बफरिंग प्रणाली का उपयोग करते हुए, और अन्य अर्ध-शुष्क हस्तांतरण या केशिका हस्तांतरण का उपयोग करते हुए। डीडी-एजीई, विधि का एक और परिवर्तन जो पूरी तरह से विकृतीकरण स्थितियों का उपयोग करता है-जिसमें डाइथिओथ्रेइटोल (डीटीटी) जैसे घटाने वाले एजेंट और 95 डिग्री सेल्सियस पर गर्मी विकृतीकरण शामिल हैं-पॉलीग्लूटामाइन प्रोटीन के गर्मी-स्थिर समावेश निकायों के विश्लेषण के लिए उपयुक्त है। संदर्भ प्रोटीन विधियाँ आणविक जीव विज्ञान