Calcofluor-white
कैल्कोफ्लोर-व्हाइट या सी. एफ. डब्ल्यू. जीव विज्ञान और वस्त्रों में उपयोग की जाने वाली एक फ्लोरोसेंट नीली डाई है। यह चिटिन और सेल्युलोज के 1-3 बीटा और 1-4 बीटा पॉलीसेकेराइड्स से जुड़ता है जो कवक, पौधों और शैवाल पर कोशिका भित्ति में मौजूद होते हैं। पादप कोशिका जीवविज्ञान अनुसंधान में, इसका उपयोग शैवाल और उच्च पौधों दोनों की कोशिका दीवारों पर दाग लगाने के लिए किया जाता है। यह ऊतक में कवक की कल्पना और पहचान के लिए एक संवेदनशील उपकरण के रूप में चिकित्सा और पशु जीव विज्ञान में भी उपयोगी है। उपयोग चिकित्सा सी. एफ. डब्ल्यू. का उपयोग नैदानिक कवक विज्ञान और परजीवी विज्ञान दोनों में किया जा सकता है। नेत्र प्रजातियों में मुक्त-जीवित अमीबा में सिस्ट हो सकते हैं जिन्हें दाग के साथ स्पष्ट रूप से देखा जा सकता है। पैप स्मीयर में यीस्ट की प्रतिक्रिया को मजबूत करने में मदद करने के लिए सी. एफ. डब्ल्यू. का उपयोग पापनिकोलौ दाग के साथ किया जा सकता है। शोध में, कैल्कोफ्लोर-व्हाइट का उपयोग खमीर कोशिकाओं की कली के निशान को दागने के लिए भी किया जाता है क्योंकि कली के निशान में चिटिन की मात्रा अधिक होती है, जो उन्हें बाकी कोशिका झिल्ली की तुलना में अधिक दाग देती है। इस दाग के कारण, कली के निशान को गिनना संभव है जो कोशिका की उम्र के लिए एक संकेत है। यह गेहूं के रोगाणु एग्लूटिनिन (डब्ल्यूजीए) के समान धुंधला पैटर्न दिखाता है, जो पॉलीसेकेराइड्स पर एन-एसिटाइलग्लूकोसामाइन और सियालिक एसिड को बांधता है। यह विशेष रूप से म्यूकर और जाइगोमाइकोसिस के कारक एजेंटों की पहचान के लिए उपयोगी है। कैल्कोफ्लोर-व्हाइट का उपयोग बख्तरबंद डिनोफ्लाजेलेट में थिकल प्लेटों पर दाग लगाने के लिए किया जा सकता है। कपड़ा सी. एफ. डब्ल्यू. एक कपड़े को चमकाने वाला रंग है। यह शुरू में पानी में घुलनशील और रंगहीन होता है। इसका एक ऑप्टिकल ब्राइटनिंग प्रभाव है जिसका उपयोग 1940 के दशक से कपड़ों को सफेद रूप देने के लिए किया जाता रहा है। इसे कपड़े धोने के डिटर्जेंट में भी एक ब्राइटनर के रूप में व्यावसायिक रूप से जोड़ा जाता है। फ्लोरोसेंस सलूशन जो कैल्कोफ्लोर-व्हाइट के लिए जलीय होते हैं, उनमें 300 से 412 एनएम तक का अवशोषण स्पेक्ट्रम होता है जिसका शिखर 347 एनएम होता है। प्रतिदीप्ति का शिखर पराबैंगनी प्रकाश के साथ सबसे अच्छा होता है, लेकिन बैंगनी/नीली बैंगनी भी प्रतिदीप्ति के महान परिणाम देती है। कैल्कोफ्लोर-व्हाइट एक फ्लोरोसेंट डाई है, जिसका अर्थ है कि इसमें एक उत्तेजना और उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य है जो एक दूसरे से अलग है। उत्तेजना तरंग दैर्ध्य 380 एनएम है जबकि उत्सर्जन 475 एनएम है। प्रतिदीप्ति को पराबैंगनी प्रकाश के साथ सबसे अच्छा देखा जा सकता है, लेकिन इसे बैंगनी या नीले बैंगनी रंग के साथ भी देखा जा सकता है। प्रतिदीप्ति के लिए सूक्ष्मदर्शी में उपयोग किए जाने वाले बाधा फिल्टर के कारण कवक यूवी/बैंगनी/बैंगनी-नीले प्रकाश के तहत एक चमकीले हरे रंग को प्रदर्शित करता है। कैल्कोफ्लोर व्हाइट को धुंधलापन की सावधानीपूर्वक व्याख्या करनी पड़ती है क्योंकि कुछ गैर-विशिष्ट प्रतिक्रियाएँ पृष्ठभूमि को एक फ्लोरोसेंट पीले-हरे रंग का बना सकती हैं। सर्वोत्तम संभव तस्वीर देखने के लिए नीली रोशनी के नीचे या अन्य फिल्टर के साथ कोशिकाओं को देखकर इसे कम किया जा सकता है। इवांस ब्लू कैल्कोफ्लोर व्हाइट के लिए एक काउंटरस्टेन है क्योंकि यह नीली रोशनी के साथ पृष्ठभूमि के ऊतकों और कोशिकाओं को कम करने में मदद कर सकता है। तुलनात्मक अध्ययन फंगल ओन्कोमाइकोसिस के निदान के लिए केओएच, कैल्कोफ्लोर-व्हाइट और फंगल कल्चर के तुलनात्मक अध्ययन में, सीएफडब्ल्यू को मनुष्यों में संक्रमण का पता लगाने में सबसे संवेदनशील विधि के रूप में देखा गया था। अध्ययन में देखा गया कि 150 रोगियों में से 95 में सी. एफ. डब्ल्यू. पॉजिटिव पाया गया। अध्ययन में के. ओ. एच. पर काल्कोफ्लोर-व्हाइट दाग का उपयोग करने के प्रमुख लाभों की भी समीक्षा की गई। इसने चर्चा की कि सी. एफ. डब्ल्यू. को एक त्वरित जांच समय की आवश्यकता होती है क्योंकि इसे कम बिजली के उद्देश्यों पर देखा जा सकता है और एक मिनट के भीतर किया जा सकता है जबकि के. ओ. एच. को प्रत्येक स्लाइड के लिए लगभग 3 से 4 मिनट की आवश्यकता होती है। यह के. ओ. एच. की तुलना में जाँच का एक तेज़ और अधिक संवेदनशील तरीका है, और पृष्ठभूमि सामग्री को सी. एफ. सी. का उपयोग करके मोड़ दिया जा सकता है। मनुष्यों में एक कवक संक्रमण, माइकोसिस का निदान करने के तरीकों के अध्ययन में, सी. एफ. डब्ल्यू. की तुलना के. ओ. एच. और शिकागो स्काई ब्लू 6बी से की गई थी। सी. एफ. डब्ल्यू. ने उन मामलों में सकारात्मक परीक्षण दिखाया जिनमें माइकोसिस संक्रमण का संदेह था जबकि शिकागो स्काई ब्लू 6बी में 55 प्रतिशत सटीकता थी। अध्ययन से पता चला है कि सी. एफ. डब्ल्यू. शिकागो स्काई ब्लू 6बी की तुलना में त्वरित पहचान में कम प्रभावी है, लेकिन यह कवक संक्रमण का पता लगाने का एक प्रभावी तरीका है। एक अध्ययन जिसने फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी के साथ सी. एफ. डब्ल्यू. का उपयोग करके कैंसर या पूर्व-कैंसर वाले घावों में कैंडिडा का पता लगाने की जांच की। अध्ययन माइकोटिक संक्रमण की एक प्रजाति के खिलाफ कैल्कोफ्लोर-व्हाइट की प्रभावशीलता को देखना चाहता था जो प्रतिरक्षाविहीन रोगियों के खिलाफ मृत्यु या गंभीर चोट का कारण बन सकता है। इसने ग्राम स्टेनिंग और पी. ए. एस. स्टेनिंग की तुलना में डाई की संवेदनशीलता की भी जांच की। अध्ययन ने निष्कर्ष निकाला कि यह साइटोपैथोलॉजी और हिस्टोपैथोलॉजी में निदान का एक त्वरित और आसान तरीका था, लेकिन यह अपेक्षाकृत महंगा था। अध्ययन से यह भी पता चला कि दाग को प्रभावी बनाने के लिए किसी विशेष तकनीक की आवश्यकता नहीं थी। डाई पी. ए. एस. या ग्राम स्टेनिंग में भी हस्तक्षेप नहीं करती है। कोशिका विज्ञान के लिए, पैप-सी. एफ. डब्ल्यू. ने 135 में से 50 बार सकारात्मक प्रतिक्रिया दी, और हिस्टोपैथोलॉजी के लिए, इसने केवल सी. एफ. डब्ल्यू. दाग के लिए 135 में से 43 बार सकारात्मक प्रतिक्रिया दी। अध्ययन से पता चला कि पैप और सी. एफ. डब्ल्यू. की जोड़ी के साथ धुंधलापन में सुधार हुआ। परिणामों ने दिया कि रंग त्वरित निदान और प्रभावशीलता के मामले में अविश्वसनीय रूप से प्रभावी था, जिससे यह इस विशेष अध्ययन में ग्राम पॉजिटिव और पी. ए. एस. से बेहतर बन गया। कुल मिलाकर, दाग के अनुसंधान और नैदानिक उद्देश्यों के लिए प्रमुख लाभ हैं, लेकिन यह थोड़ा महंगा होने का मुद्दा है और कुछ प्रजातियों के लिए उतना सटीक नहीं हो सकता है। कैल्कोफ्लोर-व्हाइट स्टेनिंग सी. एफ. डब्ल्यू. की सीमाएँ कॉक्सिडियोइड्स इमिटिस, हिस्टोप्लाज्मा कैप्सूलेटम और क्रिप्टोकॉकस नियोफॉर्मन्स सहित कई कवक जीवों के खराब धुंधलापन और प्रतिदीप्ति को दर्शाती हैं। फेफड़ों की बायोप्सी में न्यूमोसिस्टिस कैरिनी के सी. एफ. डब्ल्यू. धुंधलापन को कमरे के तापमान पर प्रारंभिक सी. एफ. डब्ल्यू. द्वारा पांच मिनट के लिए अनुकूलित किया जा सकता है और उसके बाद पांच मिनट के लिए 65 डिग्री सेल्सियस ऊष्मायन किया जा सकता है। फ्लोरोसेंस को गहरे रंग के रंग वाले कवक द्वारा ढका जा सकता है। संदर्भ बाहरी लिंक फ्लुका से उत्पाद का प्रलेखन पृष्ठ। दागदार रंग