Floxing
આનુવંશિકતામાં, ફ્લોક્સિંગ એ બે લોક્સ પી સાઇટ્સ વચ્ચે ડીએનએ સિક્વન્સ (જેને પછી ફ્લોક્સ્ડ કહેવામાં આવે છે) ના સેન્ડવિચિંગનો સંદર્ભ આપે છે. આ શબ્દો "ફ્લેન્કિંગ/ફ્લેન્ક્ડ બાય લોક્સપી" શબ્દસમૂહ પર બાંધવામાં આવ્યા છે. એલ. ઓ. એસ. પી. સાઇટ્સ વચ્ચેનું પુનઃસંયોજન ક્રે પુનઃસંયોજન દ્વારા ઉત્પ્રેરિત થાય છે. જનીનને ફ્લોક્સ કરવાથી તેને ક્રે-લોક્સ પુનઃસંયોજન નામની પ્રક્રિયામાં કાઢી નાખવામાં આવે છે (બહાર ફેંકી દેવામાં આવે છે), સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવે છે અથવા ઊંધું કરવામાં આવે છે. વૈજ્ઞાનિક નમૂના પ્રણાલીઓના વિકાસમાં જનીનોનું ફ્લોક્સિંગ આવશ્યક છે કારણ કે તે સંશોધકોને જનીન અભિવ્યક્તિમાં અવકાશી અને અસ્થાયી ફેરફાર કરવાની મંજૂરી આપે છે. વધુમાં, ઉંદર જેવા પ્રાણીઓનો ઉપયોગ માનવ રોગનો અભ્યાસ કરવા માટે નમૂના તરીકે થઈ શકે છે. તેથી, માનવ રોગો અને દવાના વિકાસનો અભ્યાસ કરવા માટે જનીન અભિવ્યક્તિમાં હેરફેર કરવા માટે ઉંદરમાં ક્રે-લોક્સ સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. ઉદાહરણ તરીકે, ક્રે-લોક્સ સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને, સંશોધકો ઓન્કોજીન્સ અને ટ્યુમર સપ્રેસર જનીનો અને ઉંદરના નમૂનાઓમાં કેન્સરના વિકાસ અને પ્રગતિમાં તેમની ભૂમિકાનો અભ્યાસ કરી શકે છે. સંશોધનમાં ઉપયોગો જનીનને ફ્લોક્સિંગ કરવાથી તેને કાઢી નાખવામાં આવે છે (બહાર કાઢી નાખવામાં આવે છે), સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવે છે અથવા દાખલ કરવામાં આવે છે (ક્રે-લોક્સ પુનઃસંયોજનમાં વિવિધ પદ્ધતિઓ દ્વારા). વૈજ્ઞાનિક નમૂના પ્રણાલીઓના વિકાસમાં જનીનોનું ફ્લોક્સિંગ આવશ્યક છે કારણ કે તે જનીન અભિવ્યક્તિના અવકાશી અને અસ્થાયી પરિવર્તનને મંજૂરી આપે છે. સામાન્ય માણસની દ્રષ્ટિએ, વિવોમાં ચોક્કસ પેશીઓમાં જનીનને વૈજ્ઞાનિક દ્વારા પસંદ કરેલા કોઈપણ સમયે બહાર કાઢી શકાય છે (નિષ્ક્રિય કરી શકાય છે). વૈજ્ઞાનિક પછી નોક-આઉટ જનીનની અસરોનું મૂલ્યાંકન કરી શકે છે અને જનીનની સામાન્ય કામગીરીને ઓળખી શકે છે. આ વિભાવનાથી શરૂ થતાં જનીનની ગેરહાજરી કરતાં અલગ છે, જેમાં જીવતંત્રના વિકાસ માટે જરૂરી જનીનોની નિષ્ક્રિયતા અથવા ખોટ કોષોના સામાન્ય કાર્યમાં દખલ કરી શકે છે અને સક્ષમ સંતાનના ઉત્પાદનને અટકાવી શકે છે. કાઢી નાંખવાની પદ્ધતિઓ કાઢી નાંખવાની ઘટનાઓ જનીન સંપાદન પ્રયોગો કરવા માટે ઉપયોગી છે, જેમાં સંપૂર્ણ જનીનોના વિભાગોને ચોક્કસપણે સંપાદિત કરવામાં આવે છે. કાઢી નાંખવા માટે સમાન દિશાનો સામનો કરતી એલ. ઓ. એક્સ. પી. સાઇટ્સ સાથે રસના સેગમેન્ટનું ફ્લોક્સિંગ જરૂરી છે. ક્રી રિકોમ્બિનેઝ યુનિડાયરેક્શનલ લોક્સપી સાઇટ્સને શોધી કાઢશે અને ડીએનએના ફ્લોક્સ્ડ સેગમેન્ટને એક્સાઇઝ કરશે. સફળતાપૂર્વક સંપાદિત ક્લોનને પસંદગી માર્કરનો ઉપયોગ કરીને પસંદ કરી શકાય છે જેને સમાન ક્રિ-લોક્સપી સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને દૂર કરી શકાય છે. એ જ પદ્ધતિનો ઉપયોગ એફ. આર. ટી./એફ. એલ. પી. સાઇટ રજૂ કરીને શરતી એલીલ્સ બનાવવા માટે કરી શકાય છે જે સમાન પદ્ધતિને પૂર્ણ કરે છે પરંતુ એક અલગ એન્ઝાઇમ સાથે. વ્યુત્ક્રમ વ્યુત્ક્રમ ઘટનાઓની પદ્ધતિ આનુવંશિક સામગ્રીની માત્રા જાળવવા માટે ઉપયોગી છે. ઊંધી જનીનો ઘણીવાર અસામાન્ય ફીનોટાઇપ સાથે સંકળાયેલા નથી, એટલે કે ઊંધી જનીનો સામાન્ય રીતે વ્યવહારુ હોય છે. ક્રે-લોક્સપી પુનઃસંયોજન કે જે નિવેશમાં પરિણમે છે તે માટે લોક્સપી સાઇટ્સને એકબીજા તરફ લક્ષી લોક્સપી સાઇટ્સ સાથે રસના જનીનને ફ્લોક્સ કરવાની જરૂર પડે છે. ક્રિ પુનઃસંયોજનમાંથી પસાર થવાથી, લોક્સપી સાઇટ્સ દ્વારા ફ્લોક્સ થયેલ પ્રદેશ ઊંધો થઈ જશે, આ પ્રક્રિયા કાયમી નથી અને તેને ઉલટાવી શકાય છે. ટ્રાન્સલોકેશન ઇવેન્ટ્સની મિકેનિઝમ ત્યારે થાય છે જ્યારે એલ. ઓ. એક્સ. પી. બે અલગ-અલગ ડીએનએ પરમાણુઓ પર ફ્લોક્સ જનીનોને એક દિશાત્મક દિશામાં મૂકે છે. ક્રિ રીકોમ્બિનેઝનો ઉપયોગ પછી બે ડીએનએ અણુઓ વચ્ચે સ્થળાંતર પેદા કરવા માટે થાય છે, આનુવંશિક સામગ્રીને એક ડીએનએ પરમાણુથી બીજામાં બદલીને બંને ફ્લોક્સ્ડ જનીનોનું એક સાથે સ્થાનાંતરણ બનાવે છે. સંશોધનમાં સામાન્ય ઉપયોગો કાર્ડિયોમાયોસાઇટ્સ (હૃદય સ્નાયુ પેશીઓ) એક પ્રકારનાં ક્રે રિકોમ્બિનેઝને વ્યક્ત કરવા માટે દર્શાવવામાં આવ્યા છે જે કાર્ડિયોમાયોસાઇટ્સ માટે અત્યંત વિશિષ્ટ છે અને સંશોધકો દ્વારા અત્યંત કાર્યક્ષમ પુનઃસંયોજન કરવા માટે તેનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. આ એક પ્રકારનાં ક્રીનો ઉપયોગ કરીને પ્રાપ્ત થાય છે જેની અભિવ્યક્તિ-માયોસિન હેવી ચેઇન પ્રમોટર (-માયએચસી) દ્વારા ચલાવવામાં આવે છે. આ પુનઃસંયોજન જનીનોને એવી રીતે વિક્ષેપિત કરવામાં સક્ષમ છે જે વિવોમાં માત્ર હૃદયની પેશીઓ માટે વિશિષ્ટ છે અને મોટે ભાગે નિયંત્રણ તરીકે ઉપયોગ કરવા માટે હૃદયના શરતી નોકઆઉટની રચના માટે પરવાનગી આપે છે. ઉદાહરણ તરીકે,-માયએચસી પ્રમોટર સાથે ક્રે રિકોમ્બિનેઝનો ઉપયોગ કરવાથી ફ્લોક્સ્ડ જનીન એકલા હૃદયમાં નિષ્ક્રિય થઈ જાય છે. વધુમાં, આ નોકઆઉટ ઇન્ડ્યુસિબલ હોઈ શકે છે. કેટલાક માઉસ અભ્યાસોમાં, ટેમોક્સિફેનનો ઉપયોગ ક્રે રિકોમ્બિનેઝને પ્રેરિત કરવા માટે થાય છે. આ કિસ્સામાં, ક્રી રિકોમ્બિનેઝને માઉસ એસ્ટ્રોજન રીસેપ્ટર (ઇ. આર.) ના એક ભાગ સાથે જોડવામાં આવે છે, જેમાં તેના લિગાન્ડ બંધનકર્તા ક્ષેત્ર (એલ. બી. ડી.) માં પરિવર્તન હોય છે. પરિવર્તન રીસેપ્ટરને નિષ્ક્રિય બનાવે છે, જે હીટ શોક પ્રોટીન 70 અને 90 (એચ. એસ. પી. 70 અને એચ. એસ. પી. 90) જેવા ચેપરોન પ્રોટીન સાથેની તેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ દ્વારા ખોટા સ્થાનિકીકરણ તરફ દોરી જાય છે. ટેમોક્સિફેન ક્રિ-ઇઆર સાથે જોડાય છે અને ચેપરોન સાથેની તેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયામાં વિક્ષેપ પાડે છે, જે ક્રિ-ઇઆર ફ્યુઝન પ્રોટીનને ન્યુક્લિયસમાં પ્રવેશવાની અને ફ્લોક્સ્ડ જનીન પર પુનઃસંયોજન કરવાની મંજૂરી આપે છે. વધુમાં, જ્યારે ચોક્કસ હીટ શોક એલિમેન્ટ્સ (એચ. એસ. ઇ.) ના નિયંત્રણ હેઠળ હોય ત્યારે ક્રી રિકોમ્બિનેઝને ગરમી દ્વારા પ્રેરિત કરી શકાય છે. સંદર્ભો ડીએનએ આનુવંશિક તકનીકો