Recombinant AAV mediated genome engineering
રિકોમ્બિનન્ટ એડેનો-એસોસિએટેડ વાયરસ (આરએએવી) આધારિત જિનોમ એન્જિનિયરિંગ એ જિનોમ એડિટિંગ પ્લેટફોર્મ છે જે રિકોમ્બિનન્ટ એએવી વેક્ટરના ઉપયોગ પર કેન્દ્રિત છે જે જીવંત સસ્તન પ્રાણીઓના કોષોના જિનોમમાં ડીએનએ સિક્વન્સ દાખલ કરવા, કાઢી નાખવા અથવા અવેજીને સક્ષમ કરે છે. આ તકનીક મારિયો કેપેચી અને ઓલિવર સ્મિથીઝની નોબેલ પુરસ્કાર વિજેતા શોધ પર આધારિત છે કે સમરૂપ પુનઃસંયોજન (એચઆર), એક કુદરતી ઉચ્ચ-વફાદારી ડીએનએ રિપેર મિકેનિઝમ, ઉંદરમાં ચોક્કસ જિનોમ ફેરફારો કરવા માટે ઉપયોગમાં લઈ શકાય છે. આર. એ. એ. વી. મધ્યસ્થી જીનોમ-એડિટિંગ આ તકનીકની કાર્યક્ષમતામાં સુધારો કરે છે જેથી કોઈપણ પૂર્વ-સ્થાપિત અને અલગ માનવ કોષ રેખામાં જીનોમ એન્જિનિયરિંગને મંજૂરી મળે, જે માઉસ ઇ. એસ. કોષોથી વિપરીત, એચ. આર. ના નીચા દર ધરાવે છે. આઇસોજેનિક માનવ રોગના નમૂનાઓ પેદા કરવા માટે માનવ કોષ રેખાઓના ઇજનેરીમાં ઉપયોગ માટે આ તકનીકને વ્યાપકપણે અપનાવવામાં આવી છે. તેનો ઉપયોગ પ્રોટીન રસીઓ અને ઉપચારશાસ્ત્રના જૈવઉત્પાદન માટે જૈવઉત્પાદક કોષ રેખાઓને શ્રેષ્ઠ બનાવવા માટે પણ કરવામાં આવે છે. વધુમાં, આર. એ. એ. વી. ની બિન-રોગકારક પ્રકૃતિને કારણે, તે જીવંત દર્દીઓમાં જનીન ઉપચાર કરવા માટે ઇચ્છનીય વાહક તરીકે ઉભરી આવ્યું છે. આર. એ. એ. વી. વેક્ટર આર. એ. એ. વી. જીનોમ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીઓક્સીરીબોન્યુક્લિક એસિડ (એસ. એસ. ડી. એન. એ.) થી બનેલો છે, જે ક્યાં તો પોઝિટિવ-અથવા નેગેટિવ-સેન્સેડ છે, જે લગભગ 4.7 કિલોબેઝ લાંબો છે. આ સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ વાયરલ વેક્ટરમાં ટ્રાન્સડક્શન દર ઊંચો હોય છે અને તેમાં જિનોમમાં ડબલ સ્ટ્રાન્ડ ડીએનએના ભંગાણનું કારણ બન્યા વિના એન્ડોજેનસ એચઆરને ઉત્તેજીત કરવાનો એક અનોખો ગુણધર્મ હોય છે, જે અન્ય હોમિંગ એન્ડોન્યુક્લીઝ મધ્યસ્થી જિનોમ સંપાદન પદ્ધતિઓની લાક્ષણિકતા છે. ક્ષમતાઓ વપરાશકર્તાઓ કોઈપણ લક્ષિત જીનોમિક લોકસ માટે આર. એ. એ. વી. વેક્ટરની રચના કરી શકે છે અને સસ્તન સોમેટિક કોષ-પ્રકારોમાં કુલ અને સૂક્ષ્મ બંને અંતજનન જનીન ફેરફારો કરી શકે છે. આમાં કાર્યાત્મક જીનોમિક્સ માટે જનીન નોક-આઉટ અથવા જીવંત કોષોમાં શારીરિક સ્તરે સ્થાનાંતરણની ઘટનાઓને ટ્રેક કરવા માટે પ્રોટીન ટેગ નિવેશનો 'નોક-ઇન' સમાવેશ થાય છે. સૌથી અગત્યનું, આર. એ. એ. વી. એક સમયે એક જ એલીલને લક્ષ્ય બનાવે છે અને તે કોઈપણ લક્ષ્ય વિનાના જીનોમિક ફેરફારોમાં પરિણમતું નથી. આને કારણે, તે સૂક્ષ્મ એસ. એન. પી. અથવા બિંદુ પરિવર્તનને કારણે થતા આનુવંશિક રોગોનું નિયમિત અને સચોટ રીતે નમૂના તૈયાર કરવામાં સક્ષમ છે, જે વધુને વધુ નવીન દવા શોધ કાર્યક્રમોનું લક્ષ્ય છે. એપ્લિકેશન્સ આજની તારીખે, આરએએવી મધ્યસ્થી જીનોમ એન્જિનિયરિંગનો ઉપયોગ 2100 થી વધુ પીઅર સમીક્ષા વૈજ્ઞાનિક સામયિકોમાં પ્રકાશિત કરવામાં આવ્યો છે. આર. એ. એ. વી. આધારિત જિનોમ એડિટિંગનો બીજો ઊભરતો ઉપયોગ દર્દીઓમાં જનીન ઉપચાર માટે છે, જે અભિગમ દ્વારા પૂરી પાડવામાં આવતી ચોકસાઈ અને લક્ષ્ય વગરની પુનઃસંયોજન ઘટનાઓના અભાવને કારણે છે. આ પણ જુઓ બાયોલોજિકલ એન્જિનિયરિંગ હોમિંગ એન્ડોન્યુક્લીઝ હોમોલોગસ રિકોમ્બિનેશન મેગાન્યુક્લીઝ ઝિંક ફિંગર ન્યુક્લીઝ ઇસોજેનિક હ્યુમન ડિસીઝ મોડલ્સ Cas9 સંદર્ભો સ્ત્રોતો ઓન્કોજેનિક PI3K મ્યુટેશનની એન્ડોજેનસ એક્સપ્રેશન સક્રિય PI3K સિગ્નલિંગ તરફ દોરી જાય છે અને AACR/EORTC મોલેક્યુલર લક્ષ્યો અને કેન્સર થેરાપ્યુટિક્સ, બોસ્ટન, યુએસએ, નવેમ્બર 2009 માં પ્રસ્તુત એક આક્રમક ફેનોટાઇપ પોસ્ટર ઓન્કોજેનિક PI3K મ્યુટેશનની એન્ડોજેનસ એક્સપ્રેશન એએસીઆર 2010, વોશિંગ્ટન, ડીસી, યુએસએ, એપ્રિલમાં પ્રસ્તુત મિટોકોન્ડ્રિયા પોસ્ટરમાં એન્ટિ-એપોપ્ટોટિક પ્રોટીનના સંચય તરફ દોરી જાય છે. 2010 પી. આઈ. 3-કિનેઝ અવરોધક પ્રવૃત્તિ રૂપરેખાઓને વ્યાખ્યાયિત કરવા માટે 'એક્સ-મેન' આઇસોજેનિક કોષ રેખાઓનો ઉપયોગ એ. એ. સી. આર. 2010, વોશિંગ્ટન, ડી. સી., યુએસએ, એપ્રિલમાં પ્રસ્તુત પોસ્ટર. 2010 'એક્સ-મેન' મ્યુટન્ટ પીઆઇ3સીએનો ઉપયોગ વ્યક્તિગત ટ્યુબ્યુલિન આઇસોફોર્મ્સની અભિવ્યક્તિમાં વધારો કરે છે અને એએસીઆર 2010, વોશિંગ્ટન, ડીસી, યુએસએ, એપ્રિલમાં પ્રસ્તુત એન્ટિ-મિટોટિક કિમોથેરાપી દવાઓના પોસ્ટર સામે પ્રતિકારને પ્રોત્સાહન આપે છે. 2010 બાયોકેમિસ્ટ્રી રિકોમ્બિનન્ટ પ્રોટીન