Countercurrent chromatography
કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી (CCC, કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી પણ) એ પ્રવાહી-પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફીનું એક સ્વરૂપ છે જે પ્રવાહી સ્થિર તબક્કાનો ઉપયોગ કરે છે જે કેન્દ્રગામી બળને કારણે કેન્દ્રત્યાગના કેન્દ્ર તરફ ગતિ કરતા સ્થિર તબક્કાની રચના કરતા અણુઓની જડતા દ્વારા સ્થાને રાખવામાં આવે છે અને તેનો ઉપયોગ મિશ્રણના રાસાયણિક ઘટકોને અલગ કરવા, ઓળખવા અને માપવા માટે થાય છે. તેના વ્યાપક અર્થમાં, કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં સંબંધિત પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી તકનીકોનો સંગ્રહ સામેલ છે જે નક્કર આધાર વિના બે અમિશ્રણીય પ્રવાહી તબક્કાઓનો ઉપયોગ કરે છે. બે પ્રવાહી તબક્કાઓ એકબીજાના સંપર્કમાં આવે છે કારણ કે ઓછામાં ઓછો એક તબક્કો સ્તંભ, હોલો ટ્યુબ અથવા ચેનલો સાથે જોડાયેલા ચેમ્બરની શ્રેણી દ્વારા પમ્પ કરવામાં આવે છે, જેમાં બંને તબક્કાઓ હોય છે. પરિણામી ગતિશીલ મિશ્રણ અને પતાવટ ક્રિયા ઘટકોને બે તબક્કામાં તેમની સંબંધિત દ્રાવ્યતા દ્વારા અલગ કરવાની મંજૂરી આપે છે. ઇચ્છિત વિભાજન માટે યોગ્ય પસંદગી પ્રદાન કરવા માટે ઓછામાં ઓછા બે અમિશ્રણીય પ્રવાહી ધરાવતી વિવિધ પ્રકારની બે તબક્કાની દ્રાવક પ્રણાલીઓનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. કેટલીક પ્રકારની કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી, જેમ કે બેવડા પ્રવાહ CCC, એક સાચી કાઉન્ટરકરન્ટ પ્રક્રિયા દર્શાવે છે જ્યાં બે અમિશ્રણીય તબક્કાઓ એકબીજાથી પસાર થાય છે અને સ્તંભના વિરુદ્ધ છેડા પર બહાર નીકળે છે. જો કે, વધુ વખત, એક પ્રવાહી સ્થિર તબક્કા તરીકે કાર્ય કરે છે અને સ્તંભમાં જાળવી રાખવામાં આવે છે જ્યારે ગતિશીલ તબક્કાને તેના દ્વારા પમ્પ કરવામાં આવે છે. પ્રવાહી સ્થિર તબક્કો કેન્દ્રગામી બળને કારણે કેન્દ્રત્યાગના કેન્દ્ર તરફ ગતિ કરતા સ્થિર તબક્કાની રચના કરતા અણુઓના ગુરુત્વાકર્ષણ અથવા જડતા દ્વારા રાખવામાં આવે છે. ગુરુત્વાકર્ષણ પદ્ધતિના ઉદાહરણને ડ્રોપલેટ કાઉન્ટર કરંટ ક્રોમેટોગ્રાફી (DCCC) કહેવામાં આવે છે. બે સ્થિતિઓ છે જેના દ્વારા સ્થિર તબક્કો કેન્દ્રગામી બળ દ્વારા જાળવી રાખવામાં આવે છેઃ હાઇડ્રોસ્ટેટિક અને હાઇડ્રોડાયનેમિક. હાઇડ્રોસ્ટેટિક પદ્ધતિમાં, સ્તંભને કેન્દ્રિય અક્ષની આસપાસ ફેરવવામાં આવે છે. હાઇડ્રોસ્ટેટિક સાધનોનું કેન્દ્રત્યાગી પાર્ટીશન ક્રોમેટોગ્રાફી (સી. પી. સી.) નામ હેઠળ વેચાણ કરવામાં આવે છે. હાઇડ્રોડાયનેમિક સાધનોને ઘણીવાર હાઇ-સ્પીડ અથવા હાઇ-પર્ફોર્મન્સ કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી (અનુક્રમે એચ. એસ. સી. સી. સી. અને એચ. પી. સી. સી. સી.) સાધનો તરીકે વેચવામાં આવે છે, જે સ્તંભમાં સ્થિર તબક્કાને જાળવી રાખવા માટે હેલિકલ કોઇલમાં આર્કિમિડીઝના સ્ક્રૂ બળ પર આધાર રાખે છે. સીસીસી પ્રણાલીના ઘટકો મોટાભાગના પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી રૂપરેખાંકનો જેવા જ હોય છે, જેમ કે ઉચ્ચ-પ્રદર્શન પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી (એચ. પી. એલ. સી.). એક અથવા વધુ પંપ કૉલમમાં તબક્કાઓ પહોંચાડે છે જે પોતે સીસીસી સાધન છે. સ્વચાલિત અથવા મેન્યુઅલ સિરીંજથી ભરેલા નમૂના લૂપ દ્વારા સ્તંભમાં નમૂનાઓ દાખલ કરવામાં આવે છે. બહારના પ્રવાહનું નિરીક્ષણ અલ્ટ્રાવાયોલેટ-વિઝિબલ સ્પેક્ટ્રોસ્કોપી અથવા માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી જેવા વિવિધ ડિટેક્ટર્સ દ્વારા કરવામાં આવે છે. પંપની કામગીરી, સી. સી. સી. સાધન, નમૂના ઈન્જેક્શન અને શોધને જાતે અથવા માઇક્રોપ્રોસેસર દ્વારા નિયંત્રિત કરી શકાય છે. આધુનિક કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી થિયરી અને પ્રેક્ટિસનો પુરોગામી કાઉન્ટરકરન્ટ ડિસ્ટ્રિબ્યુશન (CCD) હતો. સીસીડીના સિદ્ધાંતનું વર્ણન 1930ના દાયકામાં રેન્ડલ અને લોંગટિન દ્વારા કરવામાં આવ્યું હતું. આર્ચર માર્ટિન અને રિચાર્ડ લોરેન્સ મિલિંગ્ટન સિંગેએ 1940ના દાયકા દરમિયાન આ પદ્ધતિનો વધુ વિકાસ કર્યો હતો. છેવટે, લાઇમેન સી. ક્રેગે 1944માં ક્રેગ કાઉન્ટરકરન્ટ વિતરણ ઉપકરણ રજૂ કર્યું જેણે સી. સી. ડી. ને પ્રયોગશાળાના કાર્ય માટે વ્યવહારુ બનાવ્યું. સી. સી. ડી. નો ઉપયોગ ઘણા દાયકાઓ સુધી વિવિધ પ્રકારના ઉપયોગી સંયોજનોને અલગ કરવા માટે કરવામાં આવતો હતો. સ્ટાન્ડર્ડ કોલમ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં નક્કર સ્થિર તબક્કો અને પ્રવાહી ગતિશીલ તબક્કો હોય છે, જ્યારે ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફી (જી. સી.) નક્કર આધાર અને વાયુયુક્ત ગતિશીલ તબક્કા પર નક્કર અથવા પ્રવાહી સ્થિર તબક્કાનો ઉપયોગ કરે છે. તેનાથી વિપરીત, પ્રવાહી-પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફીમાં, ગતિશીલ અને સ્થિર બંને તબક્કાઓ પ્રવાહી હોય છે. જોકે, આ વિરોધાભાસ પહેલા જેવો દેખાય છે તેટલો તીવ્ર નથી. રિવર્સ-ફેઝ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં, ઉદાહરણ તરીકે, સ્થિર તબક્કાને પ્રવાહી તરીકે ગણી શકાય જે સૂક્ષ્મ-છિદ્રાળુ સિલિકા ઘન આધાર સાથે રાસાયણિક બંધન દ્વારા સ્થિર થાય છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં કેન્દ્રગામી અથવા ગુરુત્વાકર્ષણીય બળો સ્થિર પ્રવાહી સ્તરને સ્થિર કરે છે. નક્કર આધારોને દૂર કરીને, સ્તંભ પર એનાલાઇટનું કાયમી શોષણ ટાળવામાં આવે છે, અને એનાલાઇટની ઉચ્ચ પુનઃપ્રાપ્તિ પ્રાપ્ત કરી શકાય છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ સરળતાથી સામાન્ય ફેઝ ક્રોમેટોગ્રાફી અને રિવર્સ-ફેઝ ક્રોમેટોગ્રાફી વચ્ચે ફક્ત મોબાઇલ અને સ્થિર તબક્કાઓને બદલીને ફેરવવામાં આવે છે. કોલમ ક્રોમેટોગ્રાફી સાથે, અલગ થવાની ક્ષમતા વ્યાપારી રીતે ઉપલબ્ધ સ્થિર તબક્કાના માધ્યમો અને તેની વિશિષ્ટ લાક્ષણિકતાઓ દ્વારા મર્યાદિત છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં લગભગ કોઈપણ જોડીના અમિશ્રાવ્ય ઉકેલોનો ઉપયોગ કરી શકાય છે, જો કે સ્થિર તબક્કાને સફળતાપૂર્વક જાળવી શકાય છે. દ્રાવક ખર્ચ પણ સામાન્ય રીતે એચ. પી. એલ. સી. કરતા ઓછો હોય છે. કોલમ ક્રોમેટોગ્રાફીની તુલનામાં, મોટાભાગના કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં પ્રવાહ અને કુલ દ્રાવકનો ઉપયોગ અડધાથી અને દસમા સુધી પણ ઘટાડી શકાય છે. ઉપરાંત, સ્થિર તબક્કાના માધ્યમોની ખરીદી અને નિકાલનો ખર્ચ દૂર થાય છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીનો બીજો ફાયદો એ છે કે પ્રયોગશાળામાં હાથ ધરવામાં આવેલા પ્રયોગોને ઔદ્યોગિક જથ્થામાં માપી શકાય છે. જ્યારે ગેસ ક્રોમેટોગ્રાફી અથવા એચ. પી. એલ. સી. મોટા જથ્થા સાથે હાથ ધરવામાં આવે છે, ત્યારે સપાટી-થી-વોલ્યુમ ગુણોત્તર અને પ્રવાહ ગતિશીલતા સાથેના મુદ્દાઓને કારણે રિઝોલ્યુશન ખોવાઈ જાય છે; જ્યારે બંને તબક્કાઓ પ્રવાહી હોય ત્યારે આ ટાળવામાં આવે છે. સી. સી. સી. અલગ કરવાની પ્રક્રિયાને ત્રણ તબક્કામાં થતી હોવાનું વિચારી શકાય છેઃ મિશ્રણ, પતાવટ અને બે તબક્કાઓનું વિભાજન (જોકે તે ઘણીવાર સતત થાય છે). તેમની વચ્ચેના આંતરપૃષ્ઠીય વિસ્તારને મહત્તમ કરવા અને સામૂહિક સ્થાનાંતરણને વધારવા માટે તબક્કાઓનું જોરદાર મિશ્રણ મહત્વપૂર્ણ છે. વિશ્લેષક તેના વિભાજન ગુણાંક અનુસાર તબક્કાઓ વચ્ચે વિતરણ કરશે જેને વિતરણ ગુણાંક, વિતરણ અચળાંક અથવા વિભાજન ગુણોત્તર પણ કહેવામાં આવે છે અને તેને પી, કે, ડી, કેસી અથવા કેડી દ્વારા રજૂ કરવામાં આવે છે. ચોક્કસ બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલીમાં વિશ્લેષણ માટે વિભાજન ગુણાંક સાધનના કદ, પ્રવાહ દર, સ્થિર તબક્કા રીટેન્શન વોલ્યુમ ગુણોત્તર અને સ્થિર તબક્કાને સ્થિર કરવા માટે જરૂરી જી-બળથી સ્વતંત્ર છે. સ્થિર તબક્કાની જાળવણીની માત્રા એક નિર્ણાયક પરિમાણ છે. સ્થિર તબક્કાની જાળવણીને પ્રભાવિત કરતા સામાન્ય પરિબળો પ્રવાહ દર, બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલીની દ્રાવક રચના અને જી-બળ છે. સ્થિર તબક્કાની જાળવણી સ્થિર તબક્કાના વોલ્યુમ જાળવણી ગુણોત્તર (એસ. એફ.) દ્વારા રજૂ થાય છે, જે સ્થિર તબક્કાના જથ્થાને સાધનના કુલ જથ્થા દ્વારા વિભાજિત કરવામાં આવે છે. પતાવટનો સમય એ દ્રાવક પ્રણાલી અને નમૂના મેટ્રિક્સનો ગુણધર્મ છે, જે બંને સ્થિર તબક્કાની જાળવણીને મોટા પ્રમાણમાં પ્રભાવિત કરે છે. મોટાભાગના પ્રક્રિયા રસાયણશાસ્ત્રીઓ માટે, "કાઉન્ટરકરન્ટ" શબ્દનો અર્થ બે અમિશ્રણીય પ્રવાહી વિરોધી દિશામાં આગળ વધી રહ્યા છે, જે સામાન્ય રીતે મોટા કેન્દ્રત્યાગી નિષ્કર્ષક એકમોમાં જોવા મળે છે. બેવડા પ્રવાહ (નીચે જુઓ) સી. સી. સી. ના અપવાદ સાથે, કામગીરીના મોટાભાગના કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી મોડ્સમાં સ્થિર તબક્કો અને ગતિશીલ તબક્કો હોય છે. આ પરિસ્થિતિમાં પણ, પ્રતિકૂળ પ્રવાહ સાધન સ્તંભની અંદર થાય છે. કેટલાક સંશોધકોએ સી. સી. સી. અને સી. પી. સી. બંનેનું નામ બદલીને લિક્વિડ-લિક્વિડ ક્રોમેટોગ્રાફી કરવાનો પ્રસ્તાવ મૂક્યો છે, પરંતુ અન્યને લાગે છે કે "કાઉન્ટરકરન્ટ" શબ્દ પોતે જ ખોટો છે. કોલમ ક્રોમેટોગ્રાફી અને એચ. પી. એલ. સી. થી વિપરીત, કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી ઓપરેટરો કોલમ વોલ્યુમની તુલનામાં મોટા જથ્થાને દાખલ કરી શકે છે. સામાન્ય રીતે કોઇલના જથ્થાના 5 થી 10 ટકા ઇન્જેક્ટ કરી શકાય છે. કેટલાક કિસ્સાઓમાં આને કોઇલના જથ્થાના 15 થી 20 ટકા સુધી વધારી શકાય છે. સામાન્ય રીતે, મોટાભાગના આધુનિક વ્યાપારી સી. સી. સી. અને સી. પી. સી. 5 થી 40 ગ્રામ/એલ ક્ષમતાને દાખલ કરી શકે છે. ચોક્કસ સાધન માટે પણ તેની શ્રેણી એટલી મોટી છે કે તમામ સાધન વિકલ્પોને છોડી દો, કારણ કે લક્ષ્ય, મેટ્રિક્સ અને ઉપલબ્ધ બાયફેસિક દ્રાવકનો પ્રકાર ઘણો બદલાય છે. અંદાજે 10 ગ્રામ/એલ વધુ લાક્ષણિક મૂલ્ય હશે, જેનો ઉપયોગ મોટાભાગની એપ્લિકેશનો બેઝ વેલ્યુ તરીકે કરી શકે છે. કાઉન્ટરકરન્ટ સેપરેશન ઇચ્છિત સેપરેશન માટે યોગ્ય બાયફેસિક સોલવન્ટ સિસ્ટમ પસંદ કરવાથી શરૂ થાય છે. સી. સી. સી. વ્યવસાયી માટે વિવિધ પ્રમાણમાં એન-હેક્ઝેન (અથવા હેપ્ટેન), ઇથાઇલ એસિટેટ, મિથેનોલ અને પાણીના મિશ્રણ સહિત બાયફેસિક દ્રાવક મિશ્રણની વિશાળ શ્રેણી ઉપલબ્ધ છે. આ મૂળભૂત દ્રાવક પ્રણાલીને કેટલીકવાર HEMWat દ્રાવક પ્રણાલી તરીકે ઓળખવામાં આવે છે. દ્રાવક પ્રણાલીની પસંદગી સી. સી. સી. સાહિત્યના અવલોકન દ્વારા નિર્દેશિત થઈ શકે છે. પાતળા સ્તરની ક્રોમેટોગ્રાફીની પરિચિત તકનીકનો ઉપયોગ શ્રેષ્ઠ દ્રાવક પ્રણાલી નક્કી કરવા માટે પણ થઈ શકે છે. "પરિવારો" માં દ્રાવક પ્રણાલીઓની સંસ્થાએ દ્રાવક પ્રણાલીઓની પસંદગીને પણ ખૂબ સરળ બનાવી છે. દ્રાવક પ્રણાલીનું એક-બાટલી વિભાજન પ્રયોગ દ્વારા પરીક્ષણ કરી શકાય છે. પાર્ટીશનિંગ પ્રયોગમાંથી માપવામાં આવેલ પાર્ટીશન ગુણાંક સંયોજનની ઇલ્યુશન વર્તણૂક સૂચવશે. લાક્ષણિક રીતે, દ્રાવક પ્રણાલી પસંદ કરવી ઇચ્છનીય છે જ્યાં લક્ષ્ય સંયોજન (ઓ) નો વિભાજન ગુણાંક 0.25 અને 8 ની વચ્ચે હોય. ઐતિહાસિક રીતે, એવું માનવામાં આવતું હતું કે કોઈ પણ વ્યાપારી કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફ આયનીય પ્રવાહીની ઊંચી સ્નિગ્ધતાનો સામનો કરી શકશે નહીં. જો કે, આધુનિક સાધનો કે જે 30 થી 70 +% આયનીય પ્રવાહીને સમાવી શકે છે (અને સંભવિત રીતે 100% આયનીય પ્રવાહી, જો બંને તબક્કાઓ યોગ્ય રીતે કસ્ટમાઇઝ કરેલા આયનીય પ્રવાહી હોય તો) ઉપલબ્ધ થઈ ગયા છે. આયનીય પ્રવાહીને ધ્રુવીય/બિન-ધ્રુવીય કાર્બનિક, અકિરાલ અને કાયરલ સંયોજનો, બાયો-મોલેક્યુલ અને અકાર્બનિક વિભાજન માટે કસ્ટમાઇઝ કરી શકાય છે, કારણ કે આયનીય પ્રવાહીને અસાધારણ સદ્ધરતા અને વિશિષ્ટતા માટે કસ્ટમાઇઝ કરી શકાય છે. બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલીની પસંદગી કર્યા પછી તેનો એક સમૂહ તૈયાર કરવામાં આવે છે અને તેને વિભાજક નાળામાં સંતુલિત કરવામાં આવે છે. આ પગલાને દ્રાવક પ્રણાલીનું પૂર્વ-સંતુલન કહેવામાં આવે છે. બે તબક્કાઓ અલગ પડે છે. પછી સ્તંભ એક પંપ સાથે સ્થિર ભરવામાં આવે છે. આગળ, સ્તંભને સંતુલનની સ્થિતિઓ સેટ કરવામાં આવે છે, જેમ કે ઇચ્છિત પરિભ્રમણ ઝડપ, અને ગતિશીલ તબક્કાને સ્તંભ દ્વારા પમ્પ કરવામાં આવે છે. જ્યાં સુધી સ્તંભ સંતુલન પ્રાપ્ત ન થાય ત્યાં સુધી ગતિશીલ તબક્કો સ્થિર તબક્કાના એક ભાગને વિસ્થાપિત કરે છે અને ગતિશીલ તબક્કો સ્તંભમાંથી બહાર નીકળી જાય છે. સ્તંભ સંતુલન તબક્કા દરમિયાન અથવા સંતુલન પૂર્ણ થયા પછી કોઈપણ સમયે નમૂનાને સ્તંભમાં દાખલ કરી શકાય છે. એલુઅન્ટનું કદ સ્તંભમાં મોબાઇલ તબક્કાના કદને વટાવી જાય તે પછી, નમૂનાના ઘટકો એલુઇટ થવાનું શરૂ કરશે. એકતાના પાર્ટીશન ગુણાંક સાથેના સંયોજનો એલ્યુટ થશે જ્યારે ઇન્જેક્શનના સમયથી ગતિશીલ તબક્કાના એક સ્તંભનું કદ સ્તંભમાંથી પસાર થઈ ગયું હોય. પરિણામોના રિઝોલ્યુશનને વધારવામાં મદદ કરવા માટે સંયોજનને પછી બીજા સ્થિર તબક્કામાં દાખલ કરી શકાય છે. લક્ષ્ય સંયોજન (ઓ) નાબૂદ થયા પછી પ્રવાહ બંધ થઈ જાય છે અથવા સ્તંભ દ્વારા સ્થિર તબક્કાને પમ્પ કરીને સ્તંભને બહાર કાઢવામાં આવે છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીના મુખ્ય ઉપયોગનું ઉદાહરણ એ છે કે પ્લાન્ટ અર્ક જેવા અત્યંત જટિલ મેટ્રિક્સ લેવા, કાળજીપૂર્વક પસંદ કરેલી દ્રાવક પ્રણાલી સાથે કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીનું વિભાજન કરવું અને તમામ નમૂનાને પુનઃપ્રાપ્ત કરવા માટે સ્તંભને બહાર કાઢવું. મૂળ જટિલ મેટ્રિક્સને અલગ સાંકડી ધ્રુવીયતા બેન્ડમાં વિભાજિત કરવામાં આવશે, જે પછી રાસાયણિક રચના અથવા બાયોએક્ટિવિટી માટે ચકાસી શકાય છે. અન્ય ક્રોમેટોગ્રાફિક અને નોન ક્રોમેટોગ્રાફિક તકનીકો સાથે જોડાણમાં એક અથવા વધુ કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી વિભાજન કરવાથી અત્યંત જટિલ મેટ્રિસીસની રચનાત્મક માન્યતામાં ઝડપી પ્રગતિ થવાની સંભાવના છે. ડ્રોપ્લેટ સી. સી. સી. ડ્રોપ્લેટ કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી (ડી. સી. સી. સી.) 1970માં તનિમુરા, પિસાનો, ઇતો અને બોમન દ્વારા રજૂ કરવામાં આવી હતી. ડીસીસીસી સ્થિર તબક્કામાંથી ગતિશીલ તબક્કાને ખસેડવા માટે માત્ર ગુરુત્વાકર્ષણનો ઉપયોગ કરે છે જે શ્રેણીમાં જોડાયેલી લાંબી ઊભી નળીઓમાં રાખવામાં આવે છે. અવરોહી સ્થિતિમાં, ગાઢ ગતિશીલ તબક્કાના ટીપાં અને નમૂનાને માત્ર ગુરુત્વાકર્ષણનો ઉપયોગ કરીને હળવા સ્થિર તબક્કાના સ્તંભોમાંથી પસાર થવા દેવામાં આવે છે. જો ઓછા ગાઢ ગતિશીલ તબક્કાનો ઉપયોગ કરવામાં આવે તો તે સ્થિર તબક્કામાંથી પસાર થશે; આને ચડતા મોડ કહેવામાં આવે છે. એક સ્તંભમાંથી ઇલ્યૂઅન્ટને બીજામાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવે છે; જેટલા વધુ સ્તંભોનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, તેટલી વધુ સૈદ્ધાંતિક પ્લેટો પ્રાપ્ત કરી શકાય છે. ડી. સી. સી. સી. ને કુદરતી ઉત્પાદનના વિભાજન સાથે થોડી સફળતા મળી હતી પરંતુ હાઇ-સ્પીડ કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીના ઝડપી વિકાસ દ્વારા તેને મોટા ભાગે ગ્રહણ કરવામાં આવ્યું હતું. ડી. સી. સી. સી. ની મુખ્ય મર્યાદા એ છે કે પ્રવાહ દર ઓછો હોય છે, અને મોટાભાગની દ્વિસંગી દ્રાવક પ્રણાલીઓ માટે નબળું મિશ્રણ પ્રાપ્ત થાય છે. હાઇડ્રોડાયનેમિક સીસીસી સીસીસીના આધુનિક યુગની શરૂઆત ડૉ. યોઇચિરો ઇતો દ્વારા ગ્રહોની સેન્ટ્રીફ્યુજના વિકાસ સાથે થઈ હતી, જેને સૌપ્રથમ 1966માં બંધ હેલિકલ ટ્યુબ તરીકે રજૂ કરવામાં આવી હતી, જેને "ગ્રહોની" ધરી પર ફેરવવામાં આવી હતી અને "સૂર્ય" ધરી પર ફેરવવામાં આવી હતી. ત્યારબાદ ફ્લો-થ્રુ મોડેલ વિકસાવવામાં આવ્યું હતું અને નવી તકનીકને 1970માં કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી કહેવામાં આવી હતી. ક્લોરોફોર્મમાં ડી. એન. પી. એમિનો એસિડના પરીક્ષણ મિશ્રણોનો ઉપયોગ કરીને આ તકનીકનો વધુ વિકાસ કરવામાં આવ્યો હતોઃ હિમનદી એસિટિક એસિડઃ 0.1 એમ જલીય હાઇડ્રોક્લોરિક એસિડ (2:1 વી/વી) દ્રાવક પ્રણાલી. સાધનને ઇજનેરી બનાવવા માટે ઘણા વિકાસની જરૂર હતી જેથી જ્યારે તબક્કાઓ કોઇલ (ઓ) દ્વારા પમ્પ કરવામાં આવી રહ્યા હોય ત્યારે જરૂરી ગ્રહોની ગતિ જાળવી શકાય. બે અક્ષોનું સંબંધિત પરિભ્રમણ (સિંક્રનસ અથવા બિન-સિંક્રનસ), કોઇલમાંથી પ્રવાહની દિશા અને રોટર ખૂણા જેવા પરિમાણોની તપાસ કરવામાં આવી હતી. 1982 સુધીમાં આ તકનીક "હાઇ-સ્પીડ" કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી (એચએસસીસીસી) તરીકે ઓળખાતી તકનીક માટે પૂરતી અદ્યતન હતી. પીટર કારમેસીએ શરૂઆતમાં પીસી ઇન્ક. ઇટો મલ્ટીલેયર કોઇલ સેપરેટર/એક્સટ્રેક્ટરનું વ્યાપારીકરણ કર્યું હતું, જેમાં એક જ બોબિન (જેના પર કોઇલને વીંટાળવામાં આવે છે) અને કાઉન્ટરબેલેન્સનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો, ઉપરાંત "ફ્લાઇંગ લીડ્સ" નો સમૂહ કે જે ટ્યુબિંગ છે જે બોબિનને જોડે છે. ડૉ. વોલ્ટર કોનવે અને અન્યોએ પાછળથી બોબિન ડિઝાઇન એવી રીતે વિકસાવી કે બહુવિધ કોઇલ, વિવિધ ટ્યુબિંગ કદની કોઇલ પણ, એક જ બોબિન પર મૂકી શકાય. એડવર્ડ ચાઉએ પાછળથી ફાર્મટેક સી. સી. સી. તરીકે ટ્રિપલ બોબિન ડિઝાઇનનો વિકાસ કર્યો અને તેનું વ્યાપારીકરણ કર્યું, જેમાં ત્રણ બોબિન વચ્ચે લીડ માટે ડી-ટ્વિસ્ટ મિકેનિઝમ હતું. 1993માં રજૂ થયેલ ક્વાટ્રો સી. સી. સી. એ નવી મિરર ઇમેજ, ટ્વીન બોબિન ડિઝાઇનનો ઉપયોગ કરીને વ્યાપારી રીતે ઉપલબ્ધ સાધનોનો વધુ વિકાસ કર્યો, જેને બહુવિધ બોબિન વચ્ચે ફાર્મટેકની ડી-ટ્વિસ્ટ મિકેનિઝમની જરૂર નહોતી, તેથી તે હજુ પણ એક જ સાધન પર બહુવિધ બોબિનને સમાવી શકે છે. હાઇડ્રોડાયનેમિક સી. સી. સી. હવે દરેક સાધન દીઠ 4 કોઇલ સાથે ઉપલબ્ધ છે. આ કોઇલ પી. ટી. એફ. ઈ., પી. ઈ. ઈ. કે., પી. વી. ડી. એફ. અથવા સ્ટેઈનલેસ સ્ટીલ ટ્યુબિંગમાં હોઈ શકે છે. "2D" CCC (નીચે જુઓ) ની સુવિધા માટે 2,3 અથવા 4 કોઇલ બધા એક જ બોરની હોઈ શકે છે. કોઇલને લંબાવવા અને ક્ષમતા વધારવા માટે કોઇલને શ્રેણીમાં જોડી શકાય છે, અથવા કોઇલને સમાંતર જોડી શકાય છે જેથી 2,3, અથવા 4 વિભાજન એક સાથે કરી શકાય. એક સાધન પર કોઇલ વિવિધ કદની પણ હોઈ શકે છે, જે એક સાધન પર 1 થી 6 મીમી સુધીની હોય છે, આમ એક સાધનને દરરોજ મિલીગ્રામથી કિલો સુધી ઑપ્ટિમાઇઝ કરવાની મંજૂરી આપે છે. તાજેતરમાં ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટ ડેરિવેટિવ્ઝને કસ્ટમ અથવા પ્રમાણભૂત વિકલ્પો તરીકે ઉડતી લીડને બદલે વિવિધ હાઇડ્રોડાયનેમિક સીસીસી ડિઝાઇન માટે ફરતી સીલ સાથે ઓફર કરવામાં આવી છે. ઉચ્ચ પ્રદર્શન સી. સી. સી. સાધનોના સંચાલન સિદ્ધાંત માટે એક સ્તંભની જરૂર પડે છે જેમાં બોબિનની આસપાસ વીંટાળેલી નળી હોય છે. બોબિનને ડબલ-એક્સિસ જાઇરેટરી ગતિ (એક કાર્ડિયોઇડ) માં ફેરવવામાં આવે છે, જે દરેક પરિભ્રમણ દરમિયાન ચલ જી-બળને સ્તંભ પર કાર્ય કરવા માટેનું કારણ બને છે. આ ગતિ સ્તંભને પરિભ્રમણ દીઠ એક વિભાજન પગલું અને નમૂનાના ઘટકોને બે અમિશ્રણીય પ્રવાહી તબક્કાઓ વચ્ચેના વિભાજન ગુણાંકને કારણે સ્તંભમાં અલગ જોવા માટેનું કારણ બને છે. "હાઇ-પર્ફોર્મન્સ" કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી (એચ. પી. સી. સી. સી.) એચ. એસ. સી. સી. સી. જેવી જ રીતે કામ કરે છે. સાત વર્ષની સંશોધન અને વિકાસ પ્રક્રિયાએ એચ. પી. સી. સી. સી. મશીનોના 80 ગ્રામની સરખામણીમાં 240 ગ્રામ ઉત્પન્ન કરનારા એચ. પી. સી. સી. સી. સાધનોનું ઉત્પાદન કર્યું હતું. જી-બળમાં આ વધારો અને સ્તંભના મોટા બોરએ ગતિશીલ તબક્કાના પ્રવાહ દરમાં સુધારો અને ઉચ્ચ સ્થિર તબક્કાની જાળવણીને કારણે થ્રુપુટમાં દસ ગણો વધારો કર્યો છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી એ પ્રારંભિક પ્રવાહી ક્રોમેટોગ્રાફી તકનીક છે, જો કે ઉચ્ચ-જી એચ. પી. સી. સી. સી. સાધનોના આગમન સાથે હવે થોડા મિલીગ્રામ જેટલા ઓછા નમૂના લોડિંગવાળા ઉપકરણોને સંચાલિત કરવું શક્ય છે, જ્યારે કે ભૂતકાળમાં સેંકડો મિલીગ્રામ જરૂરી હતા. આ તકનીક માટેના મુખ્ય ઉપયોગ ક્ષેત્રોમાં કુદરતી ઉત્પાદન શુદ્ધિકરણ અને દવાના વિકાસનો સમાવેશ થાય છે. હાઇડ્રોસ્ટેટિક સી. સી. સી. હાઇડ્રોસ્ટેટિક સી. સી. સી. અથવા સેન્ટ્રીફ્યુગલ પાર્ટીશન ક્રોમેટોગ્રાફી (સી. પી. સી.) ની શોધ 1980ના દાયકામાં જાપાની કંપની સેંકી એન્જિનિયરિંગ લિમિટેડ દ્વારા કરવામાં આવી હતી, જેના પ્રમુખ કાનિચી નુનોગાકી હતા. 1990ના દાયકાના અંતથી ફ્રાન્સમાં સી. પી. સી. નો વ્યાપક વિકાસ કરવામાં આવ્યો છે. ફ્રાન્સમાં, તેઓએ શરૂઆતમાં સાંકી દ્વારા શરૂ કરાયેલ સ્ટેક્ડ ડિસ્ક ખ્યાલને શ્રેષ્ઠ બનાવ્યો. તાજેતરમાં, ફ્રાન્સ અને યુકેમાં, બિન-સ્ટેક્ડ ડિસ્ક સી. પી. સી. રૂપરેખાંકનો પી. ટી. એફ. ઈ., સ્ટેઈનલેસ સ્ટીલ અથવા ટાઇટેનિયમ રોટર્સ સાથે વિકસાવવામાં આવ્યા છે. આ મૂળ ખ્યાલની સ્ટેક્ડ ડિસ્ક વચ્ચે સંભવિત લિકેજને દૂર કરવા અને સારી ઉત્પાદન પ્રથા માટે વરાળની સફાઈને મંજૂરી આપવા માટે ડિઝાઇન કરવામાં આવી છે. 100 મિલીથી 12 લિટર સુધીની વોલ્યુમ વિવિધ રોટર સામગ્રીમાં ઉપલબ્ધ છે. 25-લિટર રોટર સી. પી. સી. માં ટાઇટેનિયમ રોટર છે. આ તકનીકને કેટલીકવાર "ઝડપી" સી. પી. સી. અથવા "ઉચ્ચ પ્રદર્શન" સી. પી. સી. નામ હેઠળ વેચવામાં આવે છે. અનુભૂતિ કેન્દ્રત્યાગી પાર્ટીશન ક્રોમેટોગ્રાફ સાધન એક અનન્ય રોટર સાથે રચાયેલ છે જેમાં સ્તંભ હોય છે. આ રોટર તેની મધ્ય ધરી પર ફરે છે (જ્યારે એચ. એસ. સી. સી. સી. સ્તંભ તેની ગ્રહોની ધરી પર ફરે છે અને સાથે સાથે અન્ય સૌર ધરીની આસપાસ વિચિત્ર રીતે ફરે છે). ઓછા કંપન અને ઘોંઘાટ સાથે, સી. પી. સી. 500 થી 2000 આર. પી. એમ. સુધીની લાક્ષણિક પરિભ્રમણ ઝડપ શ્રેણી પ્રદાન કરે છે. હાઇડ્રોડાયનેમિક સી. સી. સી. થી વિપરીત, પરિભ્રમણની ઝડપ સ્થિર તબક્કાના રીટેન્શન વોલ્યુમ રેશિયોના સીધા પ્રમાણસર નથી. ડી. સી. સી. સી. ની જેમ, સી. પી. સી. ને ઉતરતા અથવા ચડતા ક્રમમાં સંચાલિત કરી શકાય છે, જ્યાં દિશા ગુરુત્વાકર્ષણને બદલે રોટર દ્વારા પેદા થતા બળ સાથે સંબંધિત હોય છે. મોટા ચેમ્બર અને ચેનલો સાથે ફરીથી ડિઝાઇન કરાયેલ સી. પી. સી. સ્તંભને કેન્દ્રત્યાગી વિભાજન નિષ્કર્ષણ (સી. પી. ઈ.) નામ આપવામાં આવ્યું છે. CPE ડિઝાઇનમાં, ઝડપી પ્રવાહ દર અને વધેલા કોલમ લોડિંગ પ્રાપ્ત કરી શકાય છે. લાભો સી. પી. સી. ઝડપી બેચ-ઉત્પાદન માટે વિશ્લેષણાત્મક ઉપકરણો (થોડા મિલિલીટર) થી ઔદ્યોગિક ઉપકરણો (કેટલાક લિટર) સુધી સીધું પ્રમાણ પ્રદાન કરે છે. સી. પી. સી. ખાસ કરીને જલીય બે તબક્કાની દ્રાવક પ્રણાલીઓને સમાવવા માટે યોગ્ય લાગે છે. સામાન્ય રીતે, સી. પી. સી. સાધનો દ્રાવક પ્રણાલીઓને જાળવી શકે છે જે તબક્કાઓ વચ્ચે ઘનતામાં નાના તફાવતોને કારણે હાઇડ્રોડાયનેમિક સાધનમાં સારી રીતે જાળવી શકાતા નથી. તે પ્રવાહ પેટર્નની કલ્પના કરવા માટે સી. પી. સી. ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટેશનના વિકાસ માટે ખૂબ જ મદદરૂપ રહ્યું છે જે એસિંક્રોનસ કેમેરા અને સી. પી. સી. રોટર દ્વારા ટ્રિગર થયેલ સ્ટ્રોબોસ્કોપ સાથે સી. પી. સી. ચેમ્બરમાં મિશ્રણ અને પતાવટને જન્મ આપે છે. કામગીરીની રીતો ઉપરોક્ત હાઇડ્રોડાયનેમિક અને હાઇડ્રોસ્ટેટિક સાધનોનો ઉપયોગ વૈજ્ઞાનિકની ચોક્કસ અલગ કરવાની જરૂરિયાતોને પહોંચી વળવા માટે વિવિધ રીતો અથવા કામગીરીની રીતોમાં થઈ શકે છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી તકનીકની શક્તિ અને સંભવિતતાનો લાભ લેવા માટે કામગીરીની ઘણી રીતો તૈયાર કરવામાં આવી છે. સામાન્ય રીતે, નીચેની રીતો વ્યાપારી રીતે ઉપલબ્ધ સાધનો સાથે કરી શકાય છે. નોર્મલ-ફેઝ નોર્મલ ફેઝ ઇલ્યુશન બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલીના બિન-જલીય અથવા તબક્કાને ચલ તબક્કા તરીકે સ્તંભ દ્વારા પંપીંગ કરીને પ્રાપ્ત થાય છે, જેમાં સ્તંભમાં વધુ ધ્રુવીય સ્થિર તબક્કો જાળવી રાખવામાં આવે છે. ના મૂળ નામકરણનું કારણ સુસંગત છે. પેપર ક્રોમેટોગ્રાફીના મૂળ સ્થિર તબક્કાઓને ડાયટોમેસિયસ અર્થ્સ (કુદરતી માઇક્રો-પોરસ સિલિકા) જેવી વધુ કાર્યક્ષમ સામગ્રી દ્વારા સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યા હતા અને ત્યારબાદ આધુનિક સિલિકા જેલ દ્વારા અનુસરવામાં આવ્યું હતું, પાતળા-સ્તરની ક્રોમેટોગ્રાફી સ્થિર તબક્કો ધ્રુવીય (સિલિકા સાથે જોડાયેલા હાઇડ્રોક્સી જૂથો) હતો અને એન-હેક્સેન જેવા બિન-ધ્રુવીય દ્રાવકો સાથે મહત્તમ જાળવણી પ્રાપ્ત કરવામાં આવી હતી. ત્યારબાદ ધ્રુવીય સંયોજનોને પ્લેટની ઉપર ખસેડવા માટે ક્રમશઃ વધુ ધ્રુવીય એલ્યુઅન્ટ્સનો ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો. વિવિધ આલ્કેન બંધાયેલા તબક્કાઓનો પ્રયાસ કરવામાં આવ્યો હતો જેમાં C18 સૌથી વધુ લોકપ્રિય બન્યું હતું. આલ્કેન સાંકળો સિલિકા સાથે રાસાયણિક રીતે બંધાયેલી હતી, અને ઇલ્યુશન વલણમાં ઉલટું થયું હતું. આમ ધ્રુવીય સ્થિર "સામાન્ય" તબક્કાની ક્રોમેટોગ્રાફી બની ગઈ અને બિન-ધ્રુવીય સ્થિર તબક્કાની ક્રોમેટોગ્રાફી "વિપરીત" તબક્કાની ક્રોમેટોગ્રાફી બની ગઈ. રિવર્સ-ફેઝ ઇન રિવર્સ-ફેઝ (દા. ત. જલીય ગતિશીલ તબક્કો) ઇલ્યુશન, જલીય તબક્કાનો ઉપયોગ ઓછા ધ્રુવીય સ્થિર તબક્કા સાથે ગતિશીલ તબક્કા તરીકે થાય છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં સમાન દ્રાવક પ્રણાલીનો ઉપયોગ સામાન્ય અથવા રિવર્સ ફેઝ મોડમાં ફક્ત સ્તંભમાંથી ગતિશીલ તબક્કાના પ્રવાહની દિશા બદલીને થઈ શકે છે. ઇલ્યુશન-એક્સટ્રુઝન EECCC શબ્દ સૂચવવામાં આવ્યો તે પહેલાં CCC પ્રેક્ટિશનરો દ્વારા પરિભ્રમણને અટકાવીને અને સ્તંભ દ્વારા દ્રાવક અથવા ગેસને પંપીંગ કરીને વિભાજન પ્રયોગના અંતે સ્તંભમાંથી સ્થિર તબક્કાનો ઉપયોગ કરવામાં આવતો હતો. ઇલ્યુશન-એક્સટ્રુઝન મોડ (EECCC) માં, પરિભ્રમણ જાળવી રાખીને સિસ્ટમમાં પમ્પ કરવામાં આવતા તબક્કાને બદલીને ચોક્કસ બિંદુ પછી મોબાઇલ તબક્કાને બહાર કાઢવામાં આવે છે. ઉદાહરણ તરીકે, જો વિભાજન ચોક્કસ બિંદુએ ગતિશીલ તબક્કા તરીકે જલીય તબક્કા સાથે શરૂ કરવામાં આવ્યું હોય તો કાર્બનિક તબક્કાને સ્તંભમાંથી પમ્પ કરવામાં આવે છે જે અસરકારક રીતે બંને તબક્કાઓને બહાર કાઢે છે જે સ્વિચિંગ સમયે સ્તંભમાં હાજર હોય છે. સંપૂર્ણ નમૂનાને પ્રસાર દ્વારા રીઝોલ્યુશન ગુમાવ્યા વિના ધ્રુવીયતાના ક્રમમાં (સામાન્ય અથવા વિપરીત) દૂર કરવામાં આવે છે. તેને દ્રાવક તબક્કાના માત્ર એક સ્તંભ વોલ્યુમની જરૂર પડે છે અને અનુગામી વિભાજન માટે તાજા સ્થિર તબક્કાથી ભરેલા સ્તંભને છોડી દે છે. ઢાળ દ્રાવક ઢાળનો ઉપયોગ કોલમ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં ખૂબ જ સારી રીતે વિકસાવવામાં આવ્યો છે પરંતુ સીસીસીમાં તે ઓછો સામાન્ય છે. દ્રાવક ઢાળ વિભાજન દરમિયાન ગતિશીલ તબક્કાની ધ્રુવીયતાને વધારીને (અથવા ઘટાડીને) ઉત્પન્ન થાય છે જેથી ધ્રુવીયતાની વિશાળ શ્રેણીમાં શ્રેષ્ઠ રીઝોલ્યુશન પ્રાપ્ત કરી શકાય. ઉદાહરણ તરીકે, સ્થિર તબક્કા તરીકે હેપ્ટેનનો ઉપયોગ કરીને મિથેનોલ-વોટર મોબાઇલ ફેઝ ગ્રેડિયન્ટનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. સ્તંભની અંદર સંતુલનની સ્થિતિમાં વિક્ષેપ દ્વારા સર્જાયેલા સ્થિર તબક્કાના અતિશય નુકસાનને કારણે તમામ બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલીઓમાં આ શક્ય નથી. ઢાળ કાં તો પગલાંઓમાં અથવા સતત ઉત્પન્ન થઈ શકે છે. ડ્યુઅલ-મોડમાં, ગતિશીલ અને સ્થિર તબક્કાઓ વિભાજન પ્રયોગ દ્વારા આંશિક રીતે ઉલટાવી દેવામાં આવે છે. આ માટે સ્તંભ દ્વારા પમ્પ કરવામાં આવતા તબક્કાને તેમજ પ્રવાહની દિશાને બદલવાની જરૂર છે. ડ્યુઅલ-મોડ કામગીરી સ્તંભમાંથી સમગ્ર નમૂનાને દૂર કરે તેવી શક્યતા છે પરંતુ પ્રવાહના તબક્કા અને દિશાને બદલવાથી ઇલ્યુશનનો ક્રમ વિક્ષેપિત થાય છે. ડ્યુઅલ-ફ્લો ડ્યુઅલ-ફ્લો, જેને ડ્યુઅલ તરીકે પણ ઓળખવામાં આવે છે, કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી ત્યારે થાય છે જ્યારે બંને તબક્કાઓ સ્તંભની અંદર વિરુદ્ધ દિશામાં વહે છે. હાઇડ્રોડાયનેમિક અને હાઇડ્રોસ્ટેટિક સીસીસી બંને માટે બેવડા પ્રવાહની કામગીરી માટે સાધનો ઉપલબ્ધ છે. ડ્યુઅલ-ફ્લો કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફીનું વર્ણન સૌપ્રથમ 1985માં યોઇચિરો ઇતો દ્વારા ફીણ સીસીસી માટે કરવામાં આવ્યું હતું જ્યાં ગેસ-પ્રવાહી વિભાજન કરવામાં આવ્યું હતું. પ્રવાહી-પ્રવાહી વિભાજન ટૂંક સમયમાં અનુસરવામાં આવ્યું. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી સાધનમાં ફેરફાર કરવો આવશ્યક છે જેથી સ્તંભના બંને છેડા પર ઇનલેટ અને આઉટલેટ બંને ક્ષમતાઓ હોય. આ પદ્ધતિ સ્તંભની મધ્યમાં અથવા હાઇડ્રોડાયનેમિક સાધનમાં બે બોબિન વચ્ચે રજૂ કરવામાં આવતા નમૂના સાથે સતત અથવા ક્રમિક વિભાજનને સમાવી શકે છે. ઇન્ટરમિટન્ટ કાઉન્ટરકરન્ટ એક્સ્ટ્રેક્શન (ICcE) નામની તકનીક એક અર્ધ-સતત પદ્ધતિ છે જ્યાં તબક્કાઓના પ્રવાહને સામાન્ય અને રિવર્સ-ફેઝ ઇલ્યુશન વચ્ચે "અવારનવાર" બદલવામાં આવે છે જેથી સ્થિર તબક્કો પણ બદલાતો રહે. રિસાયક્લિંગ અને ક્રમિક રિસાયક્લિંગ ક્રોમેટોગ્રાફી એચ. પી. એલ. સી. અને સી. સી. સી. બંનેમાં પ્રેક્ટિસ કરવામાં આવે છે. રિસાયક્લિંગ ક્રોમેટોગ્રાફીમાં, લક્ષ્ય સંયોજનો એલ્યુટ થયા પછી સ્તંભમાં ફરીથી દાખલ કરવામાં આવે છે. સ્તંભમાંથી પસાર થતા દરેક પાસથી સંયોજનો અનુભવતા સૈદ્ધાંતિક પ્લેટની સંખ્યામાં વધારો થાય છે અને ક્રોમેટોગ્રાફિક રીઝોલ્યુશનમાં વધારો થાય છે. સીધું રિસાયક્લિંગ આઇસોક્રેટિક સોલવન્ટ સિસ્ટમ સાથે થવું જોઈએ. આ મોડ સાથે, અલગતાને સરળ બનાવવા માટે એ જ અથવા અલગ કૉલમ પર પસંદગીયુક્ત રીતે ફરીથી રંગસૂત્ર કરી શકાય છે. પસંદગીયુક્ત રિસાયક્લિંગની આ પ્રક્રિયાને "હાર્ટ-કટ" તરીકે ઓળખવામાં આવે છે અને તે ખાસ કરીને પસંદગીના લક્ષિત સંયોજનોને શુદ્ધ કરવામાં અસરકારક છે, જેમાં પુનઃપ્રાપ્તિની કેટલીક બલિદાનની ખોટ છે. એક ક્રોમેટોગ્રાફી પ્રયોગમાંથી પસંદ કરેલા અપૂર્ણાંકોને બીજી ક્રોમેટોગ્રાફિક પદ્ધતિ સાથે ફરીથી અલગ કરવાની પ્રક્રિયા વૈજ્ઞાનિકો દ્વારા લાંબા સમયથી કરવામાં આવી રહી છે. રિસાયક્લિંગ અને ક્રમિક ક્રોમેટોગ્રાફી એ આ પ્રક્રિયાનું સુવ્યવસ્થિત સંસ્કરણ છે. સી. સી. સી. માં, સ્તંભની અલગ લાક્ષણિકતાઓમાં ફક્ત બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલીની રચનામાં ફેરફાર કરીને ફેરફાર કરી શકાય છે. આયન-વિનિમય અને પી. એચ.-ઝોન-રિફાઇનિંગ પરંપરાગત સી. સી. સી. પ્રયોગમાં ઉપકરણને સ્થિર તબક્કાથી ભરવામાં આવે અને ગતિશીલ તબક્કા સાથે સંતુલિત કરવામાં આવે તે પહેલાં બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલી પૂર્વ-સમતોલિત થાય છે. પૂર્વ-સંતુલન પછી બંને તબક્કામાં ફેરફાર કરીને આયન-વિનિમય સ્થિતિ બનાવવામાં આવી છે. સામાન્ય રીતે, ગતિશીલ તબક્કામાં આયનીય વિસ્થાપક (અથવા એલ્યુટર) ઉમેરવામાં આવે છે અને સ્થિર તબક્કામાં આયનીય રિટેઇનર ઉમેરવામાં આવે છે. ઉદાહરણ તરીકે, જલીય ગતિશીલ તબક્કામાં વિસ્થાપક તરીકે એન. એ. આઈ. હોઈ શકે છે અને કાર્બનિક સ્થિર તબક્કામાં ચતુર્થાંશ એમોનિયમ ક્ષાર સાથે ફેરફાર કરી શકાય છે જેને રિટેઇનર તરીકે એલિક્વેટ 336 કહેવાય છે. પીએચ-ઝોન-રિફાઇનિંગ તરીકે ઓળખાતી પદ્ધતિ એ આયન-એક્સચેન્જ પદ્ધતિનો એક પ્રકાર છે જે એસિડ અને/અથવા પાયાનો દ્રાવક સંશોધકો તરીકે ઉપયોગ કરે છે. સામાન્ય રીતે, વિશ્લેષકોને તેમના પી. કે. એ. મૂલ્યો દ્વારા નિર્ધારિત ક્રમમાં દૂર કરવામાં આવે છે. ઉદાહરણ તરીકે, 6 ઓક્સિન્ડોલ એલ્કલોઇડ્સને હેક્ઝેન-ઇથાઇલ એસિટેટ-મિથેનોલ-વોટર (3ઃ7:1:9, વી/વી) થી બનેલી બાયફેસિક દ્રાવક પ્રણાલી સાથે જેલસેમિયમ એલિગન્સ સ્ટેમ અર્કના 4.5 ગ્રામ નમૂનામાંથી અલગ કરવામાં આવ્યા હતા, જ્યાં 10 એમ. એમ. ટ્રાઇથિલામાઇન (ટીઇએ) ને જાળીદાર તરીકે ઉપલા કાર્બનિક સ્થિર તબક્કામાં અને 10 એમ. એમ. હાઇડ્રોક્લોરિક એસિડ (એચસીએલ) ને જલીય ગતિશીલ તબક્કામાં ઉમેરવામાં આવ્યું હતું. આયન-વિનિમય પદ્ધતિઓ જેમ કે પીએચ-ઝોન-રિફાઇનિંગમાં જબરદસ્ત ક્ષમતા હોય છે કારણ કે ઉચ્ચ નમૂનાનો ભાર વિભાજન શક્તિનો ત્યાગ કર્યા વિના પ્રાપ્ત કરી શકાય છે. તે આયનીકરણ કરી શકાય તેવા સંયોજનો સાથે શ્રેષ્ઠ રીતે કામ કરે છે જેમ કે એલ્કલોઇડ્સ ધરાવતા નાઇટ્રોજન અથવા ફેટી એસિડ ધરાવતા કાર્બોક્સિલિક એસિડ. એપ્લિકેશન્સ કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી અને સંબંધિત પ્રવાહી-પ્રવાહી અલગ કરવાની તકનીકોનો ઉપયોગ ઔદ્યોગિક અને પ્રયોગશાળા બંને સ્તરે વિવિધ પ્રકારના રાસાયણિક પદાર્થોને શુદ્ધ કરવા માટે કરવામાં આવે છે. વિભાજનની અનુભૂતિમાં પ્રોટીન, ડીએનએ, કેનાબીસ સેટીવા એન્ટિબાયોટિક્સમાંથી કેનાબીડિઓલ (સીબીડી), વિટામિન્સ, કુદરતી ઉત્પાદનો, ફાર્માસ્યુટિકલ્સ, ધાતુના આયનો, જંતુનાશકો, એન્ન્ટીયોમર્સ, પર્યાવરણીય નમૂનાઓમાંથી પોલિઆરોમેટિક હાઇડ્રોકાર્બન, સક્રિય ઉત્સેચકો અને કાર્બન નેનોટ્યુબ્સનો સમાવેશ થાય છે. કાઉન્ટરકરન્ટ ક્રોમેટોગ્રાફી તેની માપનીયતાની ઉચ્ચ ગતિશીલ શ્રેણી માટે જાણીતી છેઃ મિલિગ્રામથી કિલોગ્રામ જથ્થામાં શુદ્ધ રાસાયણિક ઘટકો આ તકનીક દ્વારા મેળવી શકાય છે. તેમાં રાસાયણિક રીતે જટિલ નમૂનાઓને વણઉકેલાયેલા કણો સાથે સમાવવાનો પણ ફાયદો છે. આ પણ જુઓ ક્રોમેટોગ્રાફીનો ઇતિહાસ સુપરક્રિટિકલ ફ્લુઇડ ક્રોમેટોગ્રાફી સંદર્ભો બાહ્ય કડીઓ ક્રોમેટોગ્રાફી