CFTR inhibitory factor
સી. એફ. ટી. આર. અવરોધક પરિબળ (સી. આઈ. એફ.) એ ગ્રામ-નેગેટિવ બેક્ટેરિયા સ્યુડોમોનાસ એરુગિનોસા અને એસિનેટોબેક્ટર નોસોકોમિયાલિસ દ્વારા સ્ત્રાવ થતું પ્રોટીન વાયરલેન્સ પરિબળ છે. ડાર્ટમાઉથ મેડિકલ સ્કૂલ ખાતે શોધાયેલ, સી. આઈ. એફ. યજમાન ડ્યૂબિક્વિટેટીંગ મશીનરીમાં દખલ કરીને સિસ્ટીક ફાઇબ્રોસિસ ટ્રાન્સમેમ્બ્રેન કંડક્ટન્સ રેગ્યુલેટર (સી. એફ. ટી. આર.) અને પી-ગ્લાયકોપ્રોટીન જેવા યુકેરીયોટિક ઉપકલા કોષોમાં પસંદગીના એ. બી. સી. પરિવહનકારોની હેરફેરને બદલવામાં સક્ષમ છે. સી. એફ. ટી. આર. ના યુબીક્વિટિન-મધ્યસ્થ અધઃપતનને પ્રોત્સાહન આપીને, સી. આઈ. એફ. સેલ્યુલર સ્તરે સિસ્ટિક ફાઇબ્રોસિસની ફીનોકોપી કરવામાં સક્ષમ છે. સી. આઈ. એફ. જનીનને 3 જનીન ઓપેરોનના ભાગ રૂપે લખવામાં આવે છે, જેની અભિવ્યક્તિ સી. આઈ. એફ. આર. દ્વારા નકારાત્મક રીતે નિયંત્રિત થાય છે, જે ટી. ટી. આર. ફેમિલી રિપ્રેસર છે. ક્રિયાના સેલ્યુલર મિકેનિઝમની શોધ સૌપ્રથમ માનવ વાયુમાર્ગના ઉપકલા કોષો સાથે પી. એરુગિનોસાને સહ-સંવર્ધન કરીને અને ધ્રુવીકૃત મોનોલેયરમાં ક્લોરાઇડ આયન પ્રવાહ પર પરિણામી અસરનું નિરીક્ષણ કરીને કરવામાં આવી હતી. સહ-સંવર્ધન પછી, સી. એફ. ટી. આર. વિશિષ્ટ ક્લોરાઇડ આયન પ્રવાહમાં ભારે ઘટાડો જોવા મળ્યો હતો. આ કોષોની એપિકલ સપાટી પર સી. એફ. ટી. આર. ના ઘટેલા સ્તરને કારણે આ નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું. આ અસર પાછળથી પી. એરુગિનોસા દ્વારા ઉત્પાદિત એક જ સ્ત્રાવિત પ્રોટીનનું પરિણામ હોવાનું જાણવા મળ્યું હતું, જેને આ પ્રારંભિક ફીનોટાઇપ માટે સી. એફ. ટી. આર. અવરોધક પરિબળ નામ આપવામાં આવ્યું હતું. સી. આઈ. એફ. પી. એરુગિનોસા પી. એ. 14 દ્વારા દ્રાવ્ય પ્રોટીન તરીકે સ્ત્રાવ થાય છે તેમજ બાહ્ય પટલ વેસિકલ્સ (ઓ. એમ. વી.) માં પેક કરવામાં આવે છે. ઓ. એમ. વી. માં લાગુ કરવામાં આવે ત્યારે સી. આઈ. એફ. વધુ શક્તિશાળી હોય છે, જે સંભવતઃ વિતરણની કાર્યક્ષમતાને કારણે હોય છે. શુદ્ધ, પુનઃ સંયોજક સિફ પ્રોટીન સસ્તન પ્રાણીઓના કોષોના ધ્રુવીકૃત મોનોલેયર્સ પર લાગુ કરી શકાય છે અને એપિકલ પટલમાંથી સી. એફ. ટી. આર. અને પી-ગ્લાયકોપ્રોટીનને દૂર કરવા માટે પ્રોત્સાહન આપી શકાય છે. સી. આઈ. એફ. યજમાન ડ્યૂબિક્વિટીલેશન પ્રણાલીમાં દખલ કરીને આ પરિપૂર્ણ કરે છે. ઇપોક્સાઇડ હાઇડ્રોલેઝ એન્ઝાઇમ મિકેનિઝમ સી. આઈ. એફ. એ અનન્ય સબસ્ટ્રેટ પસંદગી સાથે ઇપોક્સાઇડ હાઇડ્રોલેઝ (ઇ. એચ.) છે. સી. આઈ. એફ. એ વાઈરુલેન્સ પરિબળ તરીકે સેવા આપતા ઇ. એચ. નું પ્રથમ ઉદાહરણ છે. માળખાકીય સરખામણીના આધારે, એવું લાગે છે કે એન્ઝાઇમ એએસપી129, જીએલયુ153 અને હિસ297 અવશેષોના ઉત્પ્રેરક ત્રિપુટીનો ઉપયોગ કરે છે, જેમાં સહાયક અવશેષો હિસ177 અને ટાયર239 રિંગ ઓપનિંગ દરમિયાન ઇપોક્સાઇડ ઓક્સિજનનું સંકલન કરે છે. સી. આઈ. એફ. એ કેનોનિકલ ટાયર-ટાયર જોડીને બદલે ઇપોક્સાઇડ સબસ્ટ્રેટનું સંકલન કરવા માટે હિસ-ટાયર જોડીનો ઉપયોગ કરતા ઇ. એચ. નું પ્રથમ ઉદાહરણ પણ છે. સૂચિત એન્ઝાઇમ મિકેનિઝમમાં, એએસપી129 ન્યુક્લિયોફિલિકલી સબસ્ટ્રેટના ઇપોક્સાઇડ ભાગની કાર્બન પર હુમલો કરે છે, જે એસ્ટર સાથે જોડાયેલા એન્ઝાઇમ-એસાઇલ મધ્યવર્તી બનાવે છે. જે પસંદગી માટે કાર્બન પર હુમલો કરવામાં આવે છે તે સબસ્ટ્રેટના આધારે બદલાય છે. પ્રતિક્રિયાના બીજા તબક્કામાં, ચાર્જ-રિલે હિસ297-ગ્લૂ153 જોડી દ્વારા પાણીનો અણુ સક્રિય થાય છે, અને એસ. પી. 129ના સી. જી. એમ. પર ન્યુક્લિયોફિલિક હુમલો કરે છે. આ એસ્ટર જૂથને હાઇડ્રોલાઇઝ કરે છે, હાઇડ્રોલિસિસ ઉત્પાદનને વિસિનલ ડાયોલ તરીકે મુક્ત કરે છે. માળખું સી. આઈ. એફ. પ્રોટીનના α/β હાઇડ્રોલેઝ પરિવાર સાથે સંબંધિત છે. તેની રચના એક્સ-રે ક્રિસ્ટલોગ્રાફી દ્વારા નક્કી કરવામાં આવી હતી અને તેમાં કેપ ડોમેન સાથે કેનોનિકલ α/β હાઇડ્રોલેઝ ફોલ્ડનો સમાવેશ થાય છે, જેનો ઉપયોગ તે દ્રાવણમાં બંધારણીય રીતે હોમો-ડાયમેરાઇઝ કરવા માટે કરે છે. સક્રિય સ્થળને α/β હાઇડ્રોલેઝ કોર અને કેપ વચ્ચેના ઇન્ટરફેસ પર પ્રોટીનના આંતરિક ભાગમાં દફનાવવામાં આવે છે. સંદર્ભો વાઈરલન્સ પરિબળો સિસ્ટિક ફાઇબ્રોસિસ