Adherent culture
અનુવર્તી કોષ સંવર્ધન એ કોષ સંવર્ધનનો એક પ્રકાર છે જેમાં વૃદ્ધિ થાય તે માટે કોષોને સપાટી સાથે જોડવાની જરૂર પડે છે. મોટાભાગના કરોડઅસ્થિધારી વ્યુત્પન્ન કોષો (હેમેટોપોએટીક કોષોને બાદ કરતાં) ને સંવર્ધિત કરી શકાય છે અને કોષ સંલગ્નતા અને ફેલાવાને સરળ બનાવવા માટે 2 પરિમાણીય મોનોલેયરની જરૂર પડે છે. કોષના નમૂનાઓ ટીશ્યુ એક્સપ્લાન્ટ અથવા કોષ સસ્પેન્શન કલ્ચરમાંથી લઈ શકાય છે. જ્યાં સુધી તેઓ ઉપલબ્ધ સપાટીના વિસ્તારને આવરી લેતા નથી ત્યાં સુધી પોષકતત્વો ધરાવતા વૃદ્ધિ માધ્યમ સાથે સુસંગત કોષ સંવર્ધન વધતું રહેશે. ટ્રિપ્સિન જેવા પ્રોટીઝનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે કોષોમાંથી ફ્લાસ્કમાં સંલગ્નતાને તોડવા માટે થાય છે. વૈકલ્પિક રીતે, સેલ સ્ક્રેપર્સનો ઉપયોગ યાંત્રિક રીતે સંલગ્નતાને તોડવા માટે થઈ શકે છે જો પ્રોટીએઝ રજૂ કરવાથી સેલ કલ્ચરને નુકસાન થઈ શકે છે. સસ્પેન્શન કલ્ચર્સથી વિપરીત, અન્ય મુખ્ય પ્રકારના કોષ સંવર્ધનમાં, સુસંગત સંવર્ધન માટે યાંત્રિક અથવા ઉત્સેચકીય વિયોજનનો ઉપયોગ કરીને નિયમિત રીતે પસાર કરવાની જરૂર પડે છે. ઊંધી માઈક્રોસ્કોપનો ઉપયોગ કરીને સંવર્ધનની કલ્પના કરી શકાય છે, જો કે સુસંગત સંવર્ધનની વૃદ્ધિ ઉપલબ્ધ સપાટી વિસ્તાર પર આધારિત છે. આ કારણોસર, અનુયાયી કોષ સંવર્ધનોનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે કોષોની ઊંચી ઉપજ મેળવવા માટે થતો નથી, તેના બદલે સસ્પેન્શન સંવર્ધનોનો ઉપયોગ પસંદ કરવામાં આવે છે. પદ્ધતિઓ અને જાળવણી કોષોને અલગ પાડવા માટે અનુસરતા સંવર્ધન માટે ઉપયોગમાં લેવાતા પ્રાથમિક કોષોને અલગ કરવા જોઈએ અને વિષયમાંથી સારવાર કરવી જોઈએ, અથવા અગાઉથી અસ્તિત્વમાં રહેલી કોષ રેખાઓમાંથી સ્થાનાંતરિત કરી શકાય છે. અનુગામી કોષોને સૌપ્રથમ સપાટી સાથે જોડાયેલા મોનોલેયરમાં સ્થાનાંતરિત કરવા જોઈએ, અને તેમના આકારશાસ્ત્રીય તફાવતો દ્વારા વર્ગીકૃત કરવામાં આવે છે. ફાઇબ્રોબ્લાસ્ટ જેવા સંલગ્ન કોષો રેખીય અને ખેંચાયેલા આકાર ધરાવે છે, અને જ્યારે મોનોલેયર સાથે જોડાયેલા હોય ત્યારે સ્થળાંતર કરે છે. એપિથેલિયલ જેવા સંલગ્ન કોષો વિશાળ અને બહુકોણીય આકાર ધરાવે છે, અને જ્યારે મોનોલેયર સાથે જોડાયેલા હોય ત્યારે સ્થળાંતર કરતા નથી. એકવાર કોષો તેમના સ્રોતથી યોગ્ય રીતે અલગ થઈ જાય અને માધ્યમોમાં સ્થાનાંતરિત થઈ જાય, પછી કોષ પસાર કરી શકાય છે. પ્રયોગશાળાઓ માટે અનુવર્તી કોષ સંવર્ધન જાળવણી અનુવર્તી કોષ સંવર્ધન પસાર કરતી વખતે, ખર્ચવામાં આવેલા માધ્યમોને વારંવાર બહાર કાઢવા જોઈએ અને તાજા માધ્યમો સાથે બદલવા જોઈએ. સંવર્ધન પાત્રને વારંવાર ટેપ પણ કરી શકાય છે, જેને કોષની ટુકડીને સરળ બનાવવા માટે યાંત્રિક અથવા ઉત્સેચકીય પદ્ધતિઓ સાથે જોડવું જોઈએ. સંવર્ધન જહાજને સેન્ટ્રીફ્યુજ પણ કરી શકાય છે, જે એક સુપરનેટન્ટ બનાવે છે જે પાઇપેટનો ઉપયોગ કરીને કાઢી શકાય છે. કોષોને અઠવાડિયામાં 2 થી 3 વખત ખવડાવવા જોઈએ, અને શ્રેષ્ઠ કોષ પ્રસારની ખાતરી કરવા માટે યોગ્ય તાપમાન, ભેજ, પ્રકાશ અને પીએચ પર સંવર્ધન કરવું આવશ્યક છે. પેસિંગ (સબકલ્ચરિંગ) કોષો જ્યારે અનુયાયી સંસ્કૃતિઓ સસ્પેન્શન સંસ્કૃતિઓ સાથે સમાનતા ધરાવે છે, ત્યારે તેઓ કેવી રીતે સંસ્કારી અને પસાર થાય છે તેમાં ઘણા મુખ્ય તફાવતો છે. સુસંગત સંવર્ધન પસાર કરવા માટે, ખર્ચવામાં આવેલા માધ્યમોને કચરો ઉત્પાદન તરીકે કોષો ધરાવતી બાટલીમાંથી બહાર કાઢવામાં આવે છે. કોષોને એવા માધ્યમો સાથે જોડવામાં આવે છે જે સંવર્ધન પાત્રમાં દૂર કરવામાં આવ્યા ન હતા, અને પછી કોષોને અલગ કરવા માટે ધોવા અને સેવનના પગલાંની શ્રેણી જરૂરી છે. ધોવાના પગલાઓ માટે, કોષ સંવર્ધનની સામેની બાજુએ સંતુલિત મીઠાનું દ્રાવણ રેડવામાં આવે છે, અને પછી સંતુલિત મીઠાનું દ્રાવણ કાઢતાં પહેલાં સંવર્ધન પાત્રને હલાવવામાં આવે છે. સંવર્ધન પગલાં માટે સંવર્ધન વાહિની પર ગરમી લાગુ કરવામાં આવે છે, જેના કારણે પ્રોટીનનું વિકૃતિકરણ થાય છે અને કોષો માધ્યમથી ધીમે ધીમે અલગ થાય છે. એ જ રીતે સસ્પેન્શન કલ્ચર્સની જેમ, કોષોની કુલ સંખ્યાની ગણતરી હિમોસાયટોમીટર અને ટ્રીપન બ્લુનો ઉપયોગ કરીને કરી શકાય છે. વાણિજ્યિક ઉપયોગો અને મર્યાદાઓ સુસંગત સંસ્કૃતિઓનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે કોષવિજ્ઞાન માટે અને નાના પાયે સેલ્યુલર ઉત્પાદનોની લણણી માટે થાય છે. તેમની વૃદ્ધિ 2D સુધી મર્યાદિત હોવાથી, ઇન-વિવો કોષ માળખા અને કાર્યનો અભ્યાસ કરવા માટે સુસંગત સંસ્કૃતિઓનો ઉપયોગ કરવો મુશ્કેલ છે. આ મર્યાદાને ટાળવા માટે અને દવા પરીક્ષણ માટે સુસંગત કોષ સંવર્ધનોનો ઉપયોગ કરવા માટે 3D સૂક્ષ્મ વાહકોનો ઉપયોગ કરીને સુસંગત કોષ સંવર્ધનને વિકસાવવા માટે સંશોધન કરવામાં આવી રહ્યું છે. એડેરન્ટ કલ્ચર્સના વ્યાવસાયિક ઉપયોગોમાં નીચેનાનો સમાવેશ થાય છેઃ એડેરન્ટ કોષોનું ઉત્પાદન જે રસીના વિકાસ માટે ઉપયોગમાં લેવાતા રસના પ્રોટીન બનાવે છે. કોષ અને જનીન ઉપચાર માટે વાયરલ વેક્ટર સાથે સુસંગત કોષોનો ઉપયોગ થાય છે. ઈન વિટ્રોમાં સંલગ્ન કોષોને સૂક્ષ્મ અને નેનો ટેકનોલોજી પહોંચાડવી. કેન્સર સેલ સ્ક્રિનિંગ માટે સુસંગત સેલ મોર્ફોલોજીને સમાયોજિત કરવી. સંદર્ભો કોષ સંસ્કૃતિ