E-box
ઇ-બોક્સ (એન્હાન્સર બોક્સ) એ કેટલાક યુકેરીયોટ્સમાં જોવા મળતું ડીએનએ પ્રતિક્રિયા તત્વ છે જે પ્રોટીન-બંધનકર્તા સ્થળ તરીકે કામ કરે છે અને ચેતાકોષો, સ્નાયુઓ અને અન્ય પેશીઓમાં જનીન અભિવ્યક્તિને નિયંત્રિત કરવા માટે જોવા મળે છે. તેનો ચોક્કસ ડીએનએ ક્રમ, સી. એ. એન. એન. ટી. જી. (જ્યાં એન કોઈપણ ન્યુક્લિયોટાઇડ હોઈ શકે છે), સી. એ. સી. જી. ટી. જી. ના પેલિનડ્રોમિક કેનોનિકલ ક્રમ સાથે, જનીન અનુલેખન શરૂ કરવા માટે અનુલેખન પરિબળો દ્વારા ઓળખાય છે અને બંધાયેલ છે. એકવાર ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો ઇ-બોક્સ દ્વારા પ્રમોટરો સાથે જોડાઈ જાય, પછી અન્ય ઉત્સેચકો પ્રમોટર સાથે જોડાઈ શકે છે અને ડીએનએથી એમઆરએનએમાં ટ્રાન્સક્રિપ્શનની સુવિધા આપી શકે છે. ડિસ્કવરી ઇ-બોક્સની શોધ 1985માં સુસુમુ ટોનેગાવાની અને વોલ્ટર ગિલ્બર્ટની પ્રયોગશાળાઓ વચ્ચેના સહયોગમાં ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન હેવી-ચેઇન એન્હાન્સરમાં નિયંત્રણ તત્વ તરીકે કરવામાં આવી હતી. તેમને જાણવા મળ્યું કે પેશી-વિશિષ્ટ અનુલેખન વૃદ્ધિ તત્વમાં 140 આધાર જોડીનો વિસ્તાર વિવિધ પેશીઓ અને અનુક્રમમાં અનુલેખન વૃદ્ધિના વિવિધ સ્તરો માટે પૂરતો હતો. તેઓએ સૂચવ્યું હતું કે ચોક્કસ પેશીઓ દ્વારા બનાવવામાં આવેલા પ્રોટીન કોષના તફાવત દરમિયાન જનીનોના સમૂહને સક્રિય કરવા માટે આ વૃદ્ધિકર્તાઓ પર કામ કરે છે. 1989 માં, ડેવિડ બાલ્ટીમોરની પ્રયોગશાળાએ પ્રથમ બે ઇ-બોક્સ બંધનકર્તા પ્રોટીન, ઇ 12 અને ઇ 47 ની શોધ કરી. આ ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન વધારનારા બી. એચ. એલ. એચ. ડોમેન્સ દ્વારા પ્રોટીન સાથે હેટેરોડાઇમર તરીકે જોડાઈ શકે છે. 1990માં, અન્ય ઇ-પ્રોટીન, આઇટીએફ-2એ (પાછળથી તેનું નામ બદલીને ઇ2-2એએલટી કરવામાં આવ્યું) ની શોધ કરવામાં આવી હતી જે ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન લાઇટ ચેઇન એન્હાન્સર્સ સાથે જોડાઈ શકે છે. બે વર્ષ પછી, ત્રીજા ઇ-બોક્સ બંધનકર્તા પ્રોટીન, એચ. ઇ. બી. ની શોધ હેલા કોષોમાંથી સી. ડી. એન. એ. પુસ્તકાલયની તપાસ કરીને કરવામાં આવી હતી. 1997માં E2-2ના સ્પ્લાઇસ-વેરિઅન્ટની શોધ કરવામાં આવી હતી અને તે સ્નાયુ-વિશિષ્ટ જનીનના પ્રવર્તકને અવરોધે છે. ત્યારથી, સંશોધકોએ સ્થાપિત કર્યું છે કે ઇ-બોક્સ કેટલાક યુકેરીયોટ્સમાં જનીન અનુલેખનને અસર કરે છે અને ઇ-બોક્સ બંધનકર્તા પરિબળો શોધી કાઢ્યા છે જે ઇ-બોક્સ સર્વસંમતિ ક્રમને ઓળખે છે. ખાસ કરીને, કેટલાક પ્રયોગોએ દર્શાવ્યું છે કે ઇ-બોક્સ ટ્રાન્સક્રિપ્શન-ટ્રાન્સલેશન ફીડબેક લૂપનો એક અભિન્ન ભાગ છે જેમાં સર્કેડિયન ઘડિયાળનો સમાવેશ થાય છે. બાઈન્ડીંગ ઇ-બોક્સ બાઈન્ડીંગ પ્રોટીન ટ્રાન્સક્રિપ્શનલ પ્રવૃત્તિને નિયંત્રિત કરવામાં મુખ્ય ભૂમિકા ભજવે છે. આ પ્રોટીનમાં સામાન્ય રીતે મૂળભૂત હેલિક્સ-લૂપ-હેલિક્સ પ્રોટીન માળખાકીય રચના હોય છે, જે તેમને ડાઇમર તરીકે બાંધવાની મંજૂરી આપે છે. આ રચનામાં બે એમ્ફીપેથિક α-હેલિસીસનો સમાવેશ થાય છે, જે એમિનો એસિડના નાના ક્રમ દ્વારા અલગ પડે છે, જે એક અથવા વધુ β-વળાંક બનાવે છે. આ α-હેલિસીસ વચ્ચેની હાઇડ્રોફોબિક ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ ડાયમેરાઇઝેશનને સ્થિર કરે છે. આ ઉપરાંત, દરેક બી. એચ. એલ. એચ. મોનોમરનો મૂળભૂત વિસ્તાર હોય છે, જે બી. એચ. એલ. એચ. મોનોમર અને ઇ-બોક્સ (મૂળભૂત વિસ્તાર ડીએનએના મુખ્ય ખાંચ સાથે સંપર્ક કરે છે) વચ્ચે મધ્યસ્થી કરવામાં મદદ કરે છે. ડીએનએ મોટિફ ("CAGCTG" વિરુદ્ધ "CACGTG") પર આધાર રાખીને bHLH પ્રોટીન મૂળભૂત અવશેષોનો એક અલગ સમૂહ ધરાવે છે. ઇ-બોક્સ બંધનને ઉંદરમાં Zn2 + દ્વારા મોડ્યુલેટ કરવામાં આવે છે. ઇ-બોક્સની ઉપરની બાજુએ લગભગ 23 ન્યુક્લિયોટાઇડ્સ સ્થિત સીટી-સમૃદ્ધ પ્રદેશો (સીટીઆરઆર) ઇ-બોક્સ બંધનકર્તા, ટ્રાન્સએક્ટિવેશન (આનુવંશિક અભિવ્યક્તિનો વધેલો દર), અને સર્કેડિયન જનીનો બીએમએએલ1/એનપીએએસ2 અને બીએમએએલ1/સીએલઓસીકે સંકુલના અનુલેખનમાં મહત્વપૂર્ણ છે. વિવિધ ઇ-બોક્સની બંધનકર્તા વિશિષ્ટતા તેમના કાર્યમાં આવશ્યક હોવાનું જણાયું છે. વિવિધ કાર્યો ધરાવતા ઇ-બોક્સમાં અલગ સંખ્યા અને બંધનકર્તા પરિબળનો પ્રકાર હોય છે. ઇ-બોક્સનો સર્વસંમતિ ક્રમ સામાન્ય રીતે CANNTG હોય છે; જો કે, બિન-કેનોનિકલ ઇ-બોક્સ તરીકે ઓળખાતા સમાન ક્રમના અન્ય ઇ-બોક્સ અસ્તિત્વમાં છે. આમાં સમાવેશ થાય છે, પરંતુ તે આટલું મર્યાદિત નથીઃ માઉસ પિરિયડ 2 (PER2) જનીનનો CACGTT ક્રમ 20 bp અપસ્ટ્રીમ અને માનવ અને ઉંદર APOE ના નિકટવર્તી પ્રમોટર પ્રદેશમાં MyoD કોર એન્હાન્સર CACCTCGTGAC અનુક્રમમાં જોવા મળતા તેના અભિવ્યક્તિ CAGCTT ક્રમને નિયંત્રિત કરે છે, જે લિપોપ્રોટીનનો પ્રોટીન ઘટક છે. ઇ-બોક્સ-નિયંત્રિત જનીનો અને સર્કેડિયન ઘડિયાળ વચ્ચેની કડીની શોધ 1997માં થઈ હતી, જ્યારે હાઓ, એલન અને હાર્ડિન (ટેક્સાસ એ એન્ડ એમ યુનિવર્સિટી ખાતે જીવવિજ્ઞાન વિભાગ) એ ડ્રોસોફિલા મેલાનોગાસ્ટરમાં સમયગાળા (પ્રતિ) જનીનમાં લયબદ્ધતાનું વિશ્લેષણ કર્યું હતું. તેમને 69 બી. પી. ડીએનએ ટુકડાની અંદર પ્રતિ જનીનનું ઉપરની તરફનું સર્કેડિયન ટ્રાન્સક્રિપ્શનલ એન્હાન્સર મળ્યું. PER પ્રોટીનના સ્તરના આધારે, એન્હાન્સરે LD (લાઇટ-ડાર્ક) અને DD (કોન્સ્ટન્ટ ડાર્ક) બંને પરિસ્થિતિઓમાં mRNA ટ્રાન્સક્રિપ્શનનું ઉચ્ચ સ્તર ચલાવ્યું હતું. ઉન્નતકર્તા ઉચ્ચ-સ્તરના જનીન અભિવ્યક્તિ માટે જરૂરી હોવાનું જણાયું હતું પરંતુ સર્કેડિયન લયબદ્ધતા માટે નહીં. તે બી. એમ. એ. એલ. 1/સી. એલ. ઓ. સી. કે. સંકુલના લક્ષ્ય તરીકે પણ સ્વતંત્ર રીતે કામ કરે છે. ઇ-બોક્સ સર્કેડિયન જનીનોમાં મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવે છે; અત્યાર સુધીમાં, નવ ઇ/ઇ 'બોક્સ નિયંત્રિત સર્કેડિયન જનીનોની ઓળખ કરવામાં આવી છેઃ PER1, PER2, BHLHB2, BHLHB3, CRY1, DBP, Nr1d1, Nr1d2, અને RORC. ઇ-બોક્સ કેટલાક સર્કેડિયન જનીનો સાથે જોડાયેલ હોવાથી, તે શક્ય છે કે તેની સાથે સંકળાયેલા જનીનો અને પ્રોટીન "(સર્કેડિયન) પ્રણાલીમાં નિર્ણાયક અને સંવેદનશીલ બિંદુઓ" હોય. ઇ-બોક્સ એ સર્કેડિયન તબક્કા સાથે સંકળાયેલા ટોચના પાંચ ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળ પરિવારોમાંનું એક છે અને તે મોટાભાગના પેશીઓમાં જોવા મળે છે. કુલ 320 ઇ-બોક્સ-નિયંત્રિત જનીનો એસસીએન (સુપ્રાચિયાસ્મેટિક ન્યુક્લિયસ), યકૃત, મહાધમની, મૂત્રપિંડ, ડબલ્યુએટી (સફેદ ચરબીયુક્ત પેશી), મગજ, એટ્રિયા, વેન્ટ્રિકલ, પ્રિફ્રન્ટલ કોર્ટેક્સ, હાડપિંજરના સ્નાયુ, બીએટી (બ્રાઉન એડીપોઝ પેશી) અને કેલ્વેરિયલ અસ્થિમાં જોવા મળે છે. CLOCK-સંબંધિત તત્વો (EL-બોક્સ; GGCACGAGGC) જેવા ઇ-બોક્સ પણ ઘડિયાળ-નિયંત્રિત જનીનોમાં સર્કેડિયન લય જાળવવા માટે મહત્વપૂર્ણ છે. એ જ રીતે ઇ-બોક્સની જેમ, ક્લોક સંબંધિત તત્વ જેવા ઇ-બોક્સ પણ બી. એમ. એ. એલ. 1/ક્લોકનું અનુલેખન પ્રેરિત કરી શકે છે, જે પછી જનીનો (અંક, ડી. બી. પી., એન. આર. 1 ડી. 1) ધરાવતા અન્ય ઇ. એલ.-બોક્સમાં અભિવ્યક્તિ તરફ દોરી શકે છે. જો કે, EL-બોક્સ અને નિયમિત E-બોક્સ વચ્ચે તફાવત છે. DEC1 અને DEC2 ને દબાવવાથી EL-બોક્સની સરખામણીએ E-બોક્સ પર વધુ અસર પડે છે. વધુમાં, HES1, જે એક અલગ સર્વસંમતિ ક્રમ (CACNAG, જેને N-બોક્સ તરીકે ઓળખવામાં આવે છે) સાથે જોડાઈ શકે છે, તે EL-બોક્સમાં દમન અસર દર્શાવે છે, પરંતુ E-બોક્સમાં નહીં. બિન-કેનોનિકલ ઇ-બોક્સ અને ઇ-બોક્સ જેવા ક્રમ બંને સર્કેડિયન ઓસિલેશન માટે નિર્ણાયક છે. આના પર તાજેતરના સંશોધનો એક પૂર્વધારણા બનાવે છે કે ક્યાં તો કેનોનિકલ અથવા નોન-કેનોનિકલ ઇ-બોક્સ પછી વચ્ચે 6 બેઝ જોડી અંતરાલ સાથે ઇ-બોક્સ જેવા ક્રમ એ સર્કેડિયન ટ્રાન્સક્રિપ્શન માટે જરૂરી સંયોજન છે. સિલિકો વિશ્લેષણમાં એવું પણ સૂચવવામાં આવ્યું છે કે આવા અંતરાલ અન્ય જાણીતા ઘડિયાળ-નિયંત્રિત જનીનોમાં અસ્તિત્વમાં છે. પ્રોટીનની ભૂમિકા જે ઇ-બોક્સ સાથે જોડાય છે ત્યાં ઘણા પ્રોટીન છે જે ઇ-બોક્સ સાથે જોડાય છે અને જનીન અનુલેખનને અસર કરે છે. ક્લોક-એ. આર. એન. ટી. એલ. સંકુલ ક્લોક-એ. આર. એન. ટી. એલ. (બી. એમ. એ. એલ. 1) સંકુલ સસ્તન પ્રાણીઓના સર્કેડિયન ચક્રનો અભિન્ન ભાગ છે અને સર્કેડિયન લયબદ્ધતા જાળવવા માટે મહત્વપૂર્ણ છે. તે જાણીને કે બંધનકર્તા પ્રવર્તક પ્રદેશમાં પ્રતિ જનીનનું અનુલેખન સક્રિય કરે છે, સંશોધકોએ 2002માં શોધ્યું કે DEC1 અને DEC2 (bHLH અનુલેખન પરિબળો) એ BMAL1 અને/અથવા ઇ-બોક્સ ઘટકો માટેની સ્પર્ધા સાથે સીધી ક્રિયાપ્રતિક્રિયા દ્વારા CLOCK-BMAL1 સંકુલને દબાવી દીધું. તેઓએ તારણ કાઢ્યું કે DEC1 અને DEC2 સસ્તન પરમાણુ ઘડિયાળના નિયમનકારો હતા. 2006માં, રીપરજર અને શિબલરે શોધ્યું કે ઇ-બોક્સ સાથે આ સંકુલના બંધનથી સર્કેડિયન ડી. બી. પી. ટ્રાન્સક્રિપ્શન અને ક્રોમેટિન સંક્રમણો (ક્રોમેટિનથી ફેકલ્ટેટિવ હેટેરોક્રોમેટિનમાં ફેરફાર) થયા. એવું તારણ કાઢવામાં આવ્યું હતું કે CLOCK પ્રથમ અને બીજા ઇન્ટ્રોનમાં સ્થિત એન્હાન્સર પ્રદેશોમાં ઇ-બોક્સ મોટિફ્સ સાથે બંધન કરીને DBP અભિવ્યક્તિનું નિયમન કરે છે. એમવાયસી (સી-માયસી, એક ઓન્કોજીન) એમવાયસી (સી-માયસી), એક જનીન જે ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળ માયસી માટે કોડ કરે છે, તે સસ્તન પ્રાણીઓના કોષના પ્રસાર અને એપોપ્ટોસિસને નિયંત્રિત કરવામાં મહત્વપૂર્ણ છે. 1991માં, સંશોધકોએ પરીક્ષણ કર્યું હતું કે શું સી-માયકે ડીએનએને E12 સાથે ડાઇમરાઇઝ કરીને તેને જોડી શકે છે. E6 ના ડાયમર્સ, ચિમેરિક પ્રોટીન, ઇ-બોક્સ તત્વ (GGCCACGTGACC) સાથે જોડાવા સક્ષમ હતા, જેને અન્ય HLH પ્રોટીન દ્વારા ઓળખવામાં આવ્યું હતું. E6 ની અભિવ્યક્તિએ c-Myc ના કાર્યને દબાવી દીધું, જે બંને વચ્ચેની કડી દર્શાવે છે. 1996માં, એવું જાણવા મળ્યું હતું કે માઇક મેક્સ સાથે હેટેરોડાઇમરાઇઝ થાય છે અને આ હેટેરોડાઇમરિક કોમ્પ્લેક્સ સીએસી (જી/એ) ટીજી ઇ-બોક્સ ક્રમ સાથે જોડાઈ શકે છે અને ટ્રાન્સક્રિપ્શનને સક્રિય કરી શકે છે. 1998માં એવું તારણ કાઢવામાં આવ્યું હતું કે સી-માયસીનું કાર્ય ઇ-બોક્સ તત્વો દ્વારા ચોક્કસ જનીનોના અનુલેખનને સક્રિય કરવા પર આધારિત છે. એમવાયઓડી1 (એમવાયઓડી) એમવાયઓડી એમઆરએફ બીએચએલએચ પરિવારમાંથી આવે છે અને તેની મુખ્ય ભૂમિકા સ્નાયુબદ્ધ પેશીઓની રચના, માયોજેનેસિસ છે. આ પરિવારના અન્ય સભ્યોમાં માયોજેનિન, માયફ5, માયફ6, મિસ્ટ1 અને નેક્સ-1નો સમાવેશ થાય છે. જ્યારે માયોડી ઇ-બોક્સ મોટિફ સી. એ. એન. ટી. જી. સાથે જોડાય છે, ત્યારે સ્નાયુમાં તફાવત અને સ્નાયુ-વિશિષ્ટ પ્રોટીનની અભિવ્યક્તિ શરૂ થાય છે. સંશોધકોએ રિકોમ્બિનન્ટ માયોડી ક્રમના વિવિધ ભાગોને દૂર કર્યા અને તારણ કાઢ્યું કે માયોડીએ સ્નાયુ વિશિષ્ટ જનીન α7 ઇન્ટિગ્રિન અને સાર્કોમેરિક sMtCK ના પ્રમોટર ક્રમના ઇ-બોક્સ અને ટેટ્રાલપ્લેક્સ માળખાને બાંધવા માટે સમાવિષ્ટ તત્વોનો ઉપયોગ કર્યો હતો. માયોડી એચ. બી.-ઇ. જી. એફ. (હેપરિન-બંધનકર્તા ઇ. જી. એફ. જેવા વૃદ્ધિ પરિબળ) નું નિયમન કરે છે, જે ઇ. જી. એફ. (બાહ્ય વૃદ્ધિ પરિબળ) પરિવારના સભ્ય છે જે કોષની વૃદ્ધિ અને પ્રસારને ઉત્તેજિત કરે છે. તે હેપેટોસેલ્યુલર કાર્સિનોમા, પ્રોસ્ટેટ કેન્સર, સ્તન કેન્સર, અન્નનળી કેન્સર અને ગેસ્ટ્રિક કેન્સરના વિકાસમાં ભૂમિકા ભજવે છે. માયોડી માયોજીના નોનકેનોનિકલ ઇ બોક્સ સાથે પણ જોડાઈ શકે છે અને તેની અભિવ્યક્તિને નિયંત્રિત કરી શકે છે. માયઓજી (માયોજેનિન) માયઓજી માયઓડી ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળ પરિવાર સાથે સંબંધિત છે. મજ્જાતંતુકીય ચેતોપાગમની રચના માટે માયોજી-ઇ-બોક્સ બંધન જરૂરી છે કારણ કે હાડપિંજરના સ્નાયુ જનીન અભિવ્યક્તિમાં એચડીએસી-ડાચ 2-માયોજેનિન સંકેત માર્ગની ઓળખ કરવામાં આવી છે. સ્નાયુ બગાડના લક્ષણો ધરાવતા દર્દીઓમાં માયઓજીની અભિવ્યક્તિમાં ઘટાડો જોવા મળ્યો છે. માયોબ્લાસ્ટ તફાવતમાં માયોજી અને માયોડી પણ સામેલ હોવાનું દર્શાવવામાં આવ્યું છે. તેઓ કેથેપ્સિન બી પ્રમોટર પ્રવૃત્તિને સક્રિય કરીને અને તેની એમઆરએનએ અભિવ્યક્તિને પ્રેરિત કરીને કાર્ય કરે છે. TCF3 (E47) E47 એ E47 ચોક્કસ bHLH-એન્કોડિંગ એક્સોનમાં વૈકલ્પિક સ્પ્લાઇસડ E2A દ્વારા ઉત્પન્ન થાય છે. તેની ભૂમિકા પેશી વિશિષ્ટ જનીન અભિવ્યક્તિ અને તફાવતને નિયંત્રિત કરવાની છે. 3pk અને MK2 સહિત ઘણા કાઇનેસ E47 સાથે સંકળાયેલા છે. આ 2 પ્રોટીન E47 સાથે સંકુલ બનાવે છે અને તેની અનુલેખન પ્રવૃત્તિને ઘટાડે છે. સી. કે. આઈ. આઈ. અને પી. કે. એ. પણ ફોસ્ફોરાયલેટ E47 ઈન વિટ્રોમાં દર્શાવવામાં આવ્યા છે. અન્ય ઇ-બોક્સ બંધનકર્તા પ્રોટીનની જેમ, E47 પણ ઇ-બોક્સમાં CANNTG ક્રમ સાથે જોડાય છે. હોમોઝાયગસ E2A નોક-આઉટ ઉંદરમાં, B કોષોનો વિકાસ DJ ગોઠવણીના તબક્કા પહેલા અટકી જાય છે અને B કોષો પરિપક્વ થવામાં નિષ્ફળ જાય છે. E47 હેટેરોડાઇમર (E12 સાથે) અથવા હોમોડિમર (પરંતુ નબળા) તરીકે બંધાયેલ હોવાનું દર્શાવવામાં આવ્યું છે. બી. એમ. એ. એલ. 1/સી. એલ. ઓ. સી. કે. ઇ-બોક્સ સાથે કેવી રીતે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે તેનો માળખાકીય આધાર અજાણ હોવા છતાં, તાજેતરના સંશોધનોએ દર્શાવ્યું છે કે બી. એમ. એ. એલ. 1/સી. એલ. ઓ. સી. કે. ના બી. એચ. એલ. એચ. પ્રોટીન ડોમેન્સ અન્ય બી. એચ. એલ. એચ. ધરાવતા પ્રોટીન જેવા જ છે, દા. ત. માઇક/મેક્સ, જેને ઇ-બોક્સ સાથે સ્ફટિકીકરણ કરવામાં આવ્યું છે. એવું અનુમાન કરવામાં આવે છે કે આ ઉચ્ચ આકર્ષણ બંધનને ટેકો આપવા માટે ચોક્કસ પાયા જરૂરી છે. વધુમાં, સર્કેડિયન ઇ-બોક્સની આસપાસના પ્રદેશ પરની શ્રેણીની મર્યાદાઓ સંપૂર્ણપણે સમજી શકાઇ નથીઃ એવું માનવામાં આવે છે કે સર્કેડિયન ટ્રાન્સક્રિપ્શન થાય તે માટે આનુવંશિક અનુક્રમમાં ઇ-બોક્સ એકબીજાથી અવ્યવસ્થિત રીતે અંતર રાખવા માટે તે જરૂરી છે પરંતુ પૂરતું નથી. ઇ-બોક્સ સાથે સંકળાયેલા તાજેતરના સંશોધનનો હેતુ વધુ બંધનકર્તા પ્રોટીન શોધવાનો પ્રયાસ કરવાનો તેમજ બંધનને રોકવા માટે વધુ પદ્ધતિઓ શોધવાનો છે. મેડિકલ સ્કૂલ ઓફ નાનજિંગ યુનિવર્સિટીના સંશોધકોએ શોધી કાઢ્યું છે કે એફબીએક્સએલ 3 (એફ-બોક્સ/લ્યુસીન સમૃદ્ધ-પુનરાવર્તન પ્રોટીન) નું કંપનવિસ્તાર ઇ-બોક્સ દ્વારા વ્યક્ત થાય છે. તેઓએ FBXL3 ની ઉણપ ધરાવતા ઉંદરોનો અભ્યાસ કર્યો અને જાણવા મળ્યું કે તે સર્કેડિયન સમયગાળાની લંબાઈને અસર કરીને સર્કેડિયન લયમાં પ્રતિસાદ લૂપ્સને નિયંત્રિત કરે છે. હાર્વર્ડ મેડિકલ સ્કૂલના સંશોધકો દ્વારા 4 એપ્રિલ, 2013 ના રોજ પ્રકાશિત થયેલા એક અભ્યાસમાં જાણવા મળ્યું છે કે ઇ-બોક્સની બંને બાજુના ન્યુક્લિયોટાઇડ્સ પ્રભાવ પાડે છે જે ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો ઇ-બોક્સ સાથે જ જોડાઈ શકે છે. આ ન્યુક્લિયોટાઇડ્સ ડીએનએ સ્ટ્રાન્ડની 3-ડી અવકાશી ગોઠવણી નક્કી કરે છે અને બંધનકર્તા ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળોના કદને પ્રતિબંધિત કરે છે. અભ્યાસમાં ઇન વિવો અને ઇન વિટ્રો સ્ટ્રેન્ડ્સ વચ્ચે બંધનકર્તા પેટર્નમાં તફાવત પણ જોવા મળ્યો હતો. સંદર્ભો બાહ્ય કડીઓ નિયમનકારી ક્રમ ડીએનએ