Simmons' citrate agar
સિમન્સના સાઇટ્રેટ અગરનો ઉપયોગ સાઇટ્રેટના ઉપયોગના આધારે ગ્રામ-નેગેટિવ બેક્ટેરિયાને અલગ પાડવા માટે થાય છે, ખાસ કરીને એન્ટરોબેક્ટેરિયેસી પરિવારના ગેમાપ્રોટોબેક્ટેરિયાને અલગ પાડવા માટે અથવા તો તે જ જીનસની પ્રજાતિઓ વચ્ચે પણ. ઉદાહરણ તરીકે, સાલ્મોનેલા એન્ટિરિટિડિસ સિમન્સના અગર પર હકારાત્મક (વાદળી) પરિણામ આપે છે અને આમ તે સાલ્મોનેલા ટાઇફી, સાલ્મોનેલા પુલોરમ અને સાલ્મોનેલા ગેલિનારમ જેવી અન્ય સાલ્મોનેલા પ્રજાતિઓથી અલગ પડે છે, જે નકારાત્મક (લીલા) પરિણામ આપે છે. સિમોન્સ અગર માટે એક સામાન્ય એપ્લિકેશન ફેકલ દૂષિતતા માટે ખોરાક અથવા પાણીનું નિરીક્ષણ કરવાની છે, જે ઇ. કોલી જેવા એન્ટરોબેક્ટેરેલ્સ ક્રમમાં ફેકલ કોલીફોર્મની હાજરી દ્વારા સૂચવવામાં આવે છે. એક નમૂનામાં, ઇ. કોલી, જે સાઇટ્રેટ-નેગેટિવ છે, તેને બિન-મળ, સાઇટ્રેટ-પોઝિટિવ કોલીફોર્મથી અલગ કરી શકાય છે જે ઘણીવાર પાણી, માટી અને સિમોન્સ અગરનો ઉપયોગ કરીને છોડ પર જોવા મળે છે. વધુમાં, સિમોન્સના અગરનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે કોલીફોર્મને ઓળખવા માટે આઇએમવીઆઇસી પરીક્ષણોના ભાગ રૂપે થાય છે. તે એવા સજીવોની પસંદગી માટે ઉપયોગી છે કે જેઓ તેના મુખ્ય કાર્બન અને ઊર્જા સ્ત્રોત તરીકે સાઇટ્રેટનો ઉપયોગ કરે છે. તે એક વ્યાખ્યાયિત, પસંદગીયુક્ત અને વિભેદક માધ્યમ છે જે એકમાત્ર કાર્બન સ્ત્રોત તરીકે સાઇટ્રેટ અને એકમાત્ર નાઇટ્રોજન સ્ત્રોત તરીકે એમોનિયમ આયનોનો ઉપયોગ કરવાની જીવતંત્રની ક્ષમતાની ચકાસણી કરે છે. સાઇટ્રેટ પારગમ્યતા દ્વારા કોષમાં પ્રવેશ્યા પછી, સાઇટ્રેટ લાઇઝ તેને એસિટેટ અને ઓક્સાલોએસેટેટમાં વિભાજીત કરે છે, જે આગળ કાર્બન ડાયોક્સાઇડ અને પાયરુવેટમાં વિભાજિત થાય છે. કોષના પીએચ પર આધાર રાખીને, પાયરુવેટ એસિટેટમાં ફેરવાઈ શકે છે અને 7 ની નીચે પીએચ પર અથવા એસિટેટ + લેક્ટેટ + કાર્બન ડાયોક્સાઇડ અને એસિટોઇન + કાર્બન ડાયોક્સાઇડ 7 અને નીચે પીએચ પર રચના કરી શકે છે. જ્યારે અગરમાં પાણી અને સોડિયમ કાર્બોનેટ સાઇટ્રેટ ચયાપચયમાં મુક્ત કાર્બન ડાયોક્સાઇડ સાથે પ્રતિક્રિયા આપે છે, ત્યારે આલ્કલાઇન ઉત્પાદનો રચાય છે અને પીએચ વધારે છે, જે અગરને લીલાથી વાદળી રંગમાં બદલવા તરફ દોરી જાય છે. આ માધ્યમમાં સોડિયમ ક્લોરાઇડ, સોડિયમ સાઇટ્રેટ, એમોનિયમ ડાયહાઇડ્રોજન ફોસ્ફેટ, ડાયપોટાશિયમ ફોસ્ફેટ અને મેગ્નેશિયમ સલ્ફેટ હોય છે. તેમાં બ્રોમોથાઇમોલ વાદળી પણ હોય છે, જે પીએચ સૂચક છે. બ્રોમોથાઇમોલ વાદળી 6.9 ની નીચે પીએચ પર લીલો હોય છે, અને પછી 7.6 કે તેથી વધુના પીએચ પર વાદળી થઈ જાય છે. જેમ્સ એસ. સિમોન્સ દ્વારા 1926માં સિમોન્સના સાઇટ્રેટ અગરનો વિકાસ કરવામાં આવ્યો હતો, જેમાં તેમણે સાઇટ્રેટ ચયાપચયની ઓક્સિડેટીવ પ્રતિક્રિયાઓના પરિણામે પીએચમાં થતા ફેરફારોનું નિરીક્ષણ કરવા માટે કોઝરના સાઇટ્રેટ અગરમાં 1.5 ટકા અગર અને બ્રોમોથાઇમોલ વાદળીને પીએચ સૂચક તરીકે ઉમેર્યા હતા. 1923માં સ્ટુઅર્ટ એ. કોઝર દ્વારા વિકસાવવામાં આવેલું કોઝરનું અગર એક સ્પષ્ટ, રંગહીન અગર છે જે અસ્પષ્ટતા દ્વારા બેક્ટેરિયાના વિકાસનું નિરીક્ષણ કરવાની મંજૂરી આપે છે. રંગહીન અગર સાથે, નકારાત્મક પરિણામોને હકારાત્મક તરીકે ખોટું અર્થઘટન કરવું વધુ સામાન્ય છે, જેને સિમોન્સ દ્વારા બ્રોમોથાઇમોલ વાદળી ઉમેરવાના ફેરફાર દ્વારા ઘટાડી શકાય છે. રચના માધ્યમ નીચેની રચના સાથે pH 6.9 ± 0.2 (25 °C પર) પર 1 લિટર ડિઓનાઇઝ્ડ પાણીમાં તૈયાર કરવામાં આવે છે, તૈયારી જોકે તેનો ઉપયોગ અન્ય સ્વરૂપોમાં થઈ શકે છે (દા. ત., પેટ્રી પ્લેટ), સિમોન્સના સાઇટ્રેટ અગરનો ઉપયોગ ઘણીવાર ટેસ્ટ ટ્યુબમાં સ્લેન્ટ્સ અથવા ઢોળાવોમાં થાય છે. પેટ્રી વાનગીઓ પર સ્લેન્ટ્સનો ઉપયોગ કરવાનો એક ફાયદો ઓક્સિજનની પહોંચ છે, જે સાઇટ્રેટ ચયાપચય માટે જરૂરી છે. સિમન્સના અગરને સપ્લાયર્સ પાસેથી તૈયાર પાવડર અથવા સ્લેંટ તરીકે ખરીદી શકાય છે. ટેસ્ટ ટ્યુબમાં ગરમ અગર ઉમેરીને અને તેને ત્રાંસા ખૂણા પર મજબૂત કરવાની મંજૂરી આપીને એક સ્લેંટ તૈયાર કરવામાં આવે છે. નમૂનામાંથી અગરમાં કોષોને સ્થાનાંતરિત કરવા માટે, એક જંતુરહિત સોયનો ઉપયોગ નમૂનામાંથી એક અલગ વસાહત પસંદ કરવા અને અગરની સપાટી પર દોરવા માટે થાય છે, જેમ કે અગર પ્લેટ પર કરવામાં આવે છે. હળવા કોષનું ઇનોક્યુલમ તૈયાર કરવું મહત્વપૂર્ણ છે કારણ કે ઇનોક્યુલમમાંથી કાર્બન અને નાઇટ્રોજન ધરાવતા પોષક તત્ત્વો અથવા મૃત બેક્ટેરિયલ કોષ દ્રવ્યનું વહન ખોટા હકારાત્મક પરિણામો ઉત્પન્ન કરી શકે છે. કોષના નમૂનાને સ્થાનાંતરિત કરવા માટે સોયનો ઉપયોગ કરવાથી વધારાનું ઇનોક્યુલમ વહન ઘટાડી શકાય છે. સિમન્સના સાઇટ્રેટ અગર પર ઉગતા અર્થઘટન સજીવો એકમાત્ર કાર્બન સ્ત્રોત તરીકે સાઇટ્રેટનો ઉપયોગ કરવામાં સક્ષમ છે અને તેઓ માધ્યમમાં એમોનિયમ મીઠાનું ચયાપચય કરી શકે છે (વૃદ્ધિ માટે એકમાત્ર નાઇટ્રોજન સ્ત્રોત તરીકે સેવા આપે છે). સાઇટ્રેટનો ઉપયોગ ઉપઉત્પાદનો તરીકે કાર્બોનેટ અને બાયકાર્બોનેટના નિર્માણમાં પરિણમે છે. સાઇટ્રેટનું અધઃપતન કરનારા સજીવોએ એમોનિયમ ક્ષારનો પણ ઉપયોગ કરવો જોઈએ, જે એમોનિયા ઉત્પન્ન કરે છે, આમ માધ્યમના પીએચમાં વધારો કરે છે. પીએચમાં વધારો પછી બ્રોમોથાઇમોલ વાદળી સૂચકમાં રંગ પરિવર્તનનું કારણ બને છે, જે તેને વાદળી બનાવે છે. તટસ્થ પરિસ્થિતિઓમાં માધ્યમ લીલો રંગ રહે છે. વાદળીમાં રંગ પરિવર્તન ઉપયોગી છે કારણ કે સિમોન્સના સાઇટ્રેટ અગર પર વૃદ્ધિ ઘણીવાર મર્યાદિત હોય છે અને જો તે રંગ પરિવર્તન માટે ન હોય તો તેનું નિરીક્ષણ કરવું મુશ્કેલ હશે. કેટલીકવાર, સિમોન્સના સાઇટ્રેટ અગર પર વૃદ્ધિને વાદળી રંગમાં ફેરફાર કર્યા વિના શોધવાનું શક્ય છે. સાઇટ્રેટ ઉપયોગ પરીક્ષણ માટે આને નકારાત્મક તરીકે ગુણ આપવો જોઈએ. આવા માધ્યમો પર સાલ્મોનેલા અને પ્રોવિડેન્સિયા જેવા બેક્ટેરિયાનો વિકાસ થાય છે. સંદર્ભો બાહ્ય કડીઓ ASM માઇક્રોબેલિબ્રેરી લેખ "સિટ્રેટ ટેસ્ટ પ્રોટોકોલ" માઇક્રોબાયોલોજીકલ મીડિયા