P-TEFb
હકારાત્મક ટ્રાન્સક્રિપ્શન વિસ્તરણ પરિબળ, પી-ટીઇએફબી, એક મલ્ટીપ્રોટીન સંકુલ છે જે યુકેરીયોટ્સમાં આરએનએ પોલિમરેઝ II (પોલ II) દ્વારા ટ્રાન્સક્રિપ્શનના નિયમનમાં આવશ્યક ભૂમિકા ભજવે છે. દીક્ષા પછી તરત જ પોલ II મોટાભાગના માનવ જનીનો પર પ્રમોટર નિકટવર્તી વિરામિત સ્થિતિમાં ફસાઈ જાય છે (આકૃતિ 1). પી-ટીઇએફબી એ સાયક્લિન આધારિત કિનેઝ છે જે ડી. આર. બી. સંવેદનશીલતા પ્રેરક પરિબળ (ડી. એસ. આઇ. એફ.) અને નકારાત્મક વિસ્તરણ પરિબળ (એનઇએલએફ), તેમજ પોલ II ના મોટા પેટા એકમના કાર્બોક્સિલ ટર્મિનલ ડોમેનને ફોસ્ફોરાયલેટ કરી શકે છે અને આ એમઆરએનએના સંશ્લેષણ તરફ દોરી જતા ઉત્પાદક વિસ્તરણમાં સંક્રમણનું કારણ બને છે. પી-ટીઇએફબીનું નિયમન આંશિક રીતે 7એસકે એસએનઆરએનપી સાથે ઉલટાવી શકાય તેવા જોડાણ દ્વારા થાય છે. પી-ટીઇએફબી અવરોધકો ડી. આર. બી. અથવા ફ્લેવોપિડિરોલ સાથેના કોષોની સારવાર એમ. આર. એન. એ. ના ઉત્પાદનમાં ઘટાડો અને આખરે કોષના મૃત્યુ તરફ દોરી જાય છે. ડ્રોસોફિલા કોષોમાંથી મેળવેલ ઈન વિટ્રો ટ્રાન્સક્રિપ્શન સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને શોધ, રચના અને માળખું પી-ટીઇએફબીને લાંબા રન-ઓફ ટ્રાન્સક્રિપ્ટની પેઢી માટે જરૂરી પરિબળ તરીકે ઓળખવામાં આવ્યું હતું અને શુદ્ધ કરવામાં આવ્યું હતું. તે સાયક્લિન આધારિત કાઇનેઝ છે જેમાં ઉત્પ્રેરક પેટા એકમ, સી. ડી. કે. 9 અને ડ્રોસોફિલામાં નિયમનકારી પેટા એકમ, સાયક્લિન ટી છે. મનુષ્યોમાં પી-ટીઇએફબીના બહુવિધ સ્વરૂપો છે જેમાં સીડીકે9 અને કેટલાક સાયક્લિન પેટા એકમોમાંથી એક, સાયક્લિન ટી1, ટી2 અને કે. પી.-ટીઇએફબી બ્રોમોડોમેન પ્રોટીન બીઆરડી4 સહિત અન્ય પરિબળો સાથે સંકળાયેલા છે, અને તે સુપર એલોંગેશન કોમ્પ્લેક્સ તરીકે ઓળખાતા પ્રોટીનના મોટા સંકુલ સાથે સંકળાયેલા જોવા મળે છે. મહત્ત્વની વાત એ છે કે, એઇડ્સ વાયરસ માટે, પી-ટીઇએફબી એચઆઇવી ટેટ પ્રોટીન દ્વારા લક્ષિત છે જે સામાન્ય સેલ્યુલર પી-ટીઇએફબી નિયંત્રણને બાયપાસ કરે છે અને સીધા પી-ટીઇએફબીને એચઆઇવી જિનોમમાં પ્રમોટર પ્રોક્સિમલ થોભાવેલા પોલિમરેઝમાં લાવે છે. સી. ડી. કે. 9 અને સાયક્લિન ટી1 ધરાવતી માનવ પી-ટીઇએફબીની રચનાઓ અને એચઆઇવી ટેટ પી-ટીઇએફબી સંકુલને એક્સ-રે ક્રિસ્ટલોગ્રાફીનો ઉપયોગ કરીને ઉકેલવામાં આવ્યા છે. પ્રથમ ઉકેલાયેલ માળખાએ દર્શાવ્યું હતું કે બે પેટા એકમો ગોઠવવામાં આવ્યા હતા જેમ કે અન્ય સાયક્લિન આધારિત કિનસેસમાં જોવા મળે છે. મૂળ માળખા માટે ઉપયોગમાં લેવાતા પેટા એકમોમાં અજાણતાં ત્રણ એમિનો એસિડ અવેજી રજૂ કરવામાં આવ્યા હતા અને યોગ્ય ક્રમનો ઉપયોગ કરીને અનુગામી માળખાના નિર્ધારણમાં સક્રિય સ્થળની આસપાસના કેટલાક નોંધપાત્ર ફેરફારો સિવાય સમાન એકંદર માળખું દર્શાવવામાં આવ્યું હતું. પી-ટીઇએફબી સાથે બંધાયેલ એચઆઇવી ટેટની રચના દર્શાવે છે કે વાયરલ પ્રોટીન સાયક્લિન ટી1 સબયૂનિટ (આકૃતિ 2) સાથે વ્યાપક સંપર્કો બનાવે છે. પી-ટીઇએફબીનું નિયમન યુકેરીયોટિક જનીન અભિવ્યક્તિને નિયંત્રિત કરવામાં તેની કેન્દ્રિય ભૂમિકાને કારણે, પી-ટીઇએફબી પેટા એકમોને એન્કોડિંગ કરતા જનીનોના અનુલેખન, પેટા એકમ એમઆરએનએનું ભાષાંતર, પેટા એકમોનું ટર્નઓવર અને 7એસકે એસએનઆરએનપી સાથે સંકળાયેલી અસામાન્ય પદ્ધતિ દ્વારા પણ કડક નિયમનને આધિન છે. આકૃતિ 3 માં બતાવ્યા પ્રમાણે પી-ટીઇએફબી 7એસકે એસએનઆરએનપીમાં ડબલ સ્ટ્રેન્ડેડ આરએનએ બંધનકર્તા પ્રોટીન હેક્સિમ (મનુષ્યોમાં હેક્સિમ 1 અથવા હેક્સિમ 2) દ્વારા રાખવામાં આવે છે. 7SK RNA અથવા કોઈપણ ડબલ સ્ટ્રેન્ડેડ RNA સાથે બંધાયેલ HEXIM P-TEFb સાથે જોડાય છે અને કિનેઝ પ્રવૃત્તિને અટકાવે છે. અન્ય બે પ્રોટીન હંમેશા 7SK RNA સાથે સંકળાયેલા જોવા મળે છે. મિથાઈલ ફોસ્ફેઝ કેપિંગ એન્ઝાઇમ એમ. ઇ. પી. સી. ઈ. 7એસ. કે. આર. એન. એ. ના પ્રથમ ન્યુક્લિયોટાઇડના ગામા ફોસ્ફેટ પર મિથાઈલ જૂથ મૂકે છે અને લા સંબંધિત પ્રોટીન એલ. એ. આર. પી. 7એસ. કે. ના 3 'અંત સાથે જોડાય છે. જ્યારે 7 એસ. કે. એસ. એન. આર. એન. પી. માંથી પી-ટી. ઇ. એફ. બી. કાઢવામાં આવે છે, ત્યારે 7 એસ. કે. આર. એન. એ. રચના પરિવર્તનમાંથી પસાર થાય છે, એચ. ઇ. એક્સ. આઇ. એમ. બહાર કાઢે છે અને એચ. એન. આર. એન. પી. દૂર કરાયેલા પરિબળોનું સ્થાન લે છે. પી-ટીઇએફબીના પુનઃ અનુક્રમ માટે આરએનએની બીજી પુનઃગોઠવણીની જરૂર પડે છે, જે એચઇએક્સઆઇએમ અને પછી પી-ટીઇએફબીનું બંધન છે. ઝડપથી વિકસતા કોષોમાં 7એસકે એસએનઆરએનપી એ પી-ટીઇએફબીનું મુખ્ય સ્વરૂપ છે. સમીક્ષા માટે. સંદર્ભો પ્રોટીન