PBR322
પી. બી. આર. 322 એ પ્લાઝમિડ છે અને તે સૌપ્રથમ વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાતા ઇ. કોલી ક્લોનિંગ વેક્ટર્સમાંનું એક હતું. યુનિવર્સિટી ઓફ કેલિફોર્નિયા, સાન ફ્રાન્સિસ્કો ખાતે હર્બર્ટ બોયરની પ્રયોગશાળામાં 1977 માં બનાવવામાં આવ્યું હતું, તેનું નામ પોસ્ટડૉક્ટરલ સંશોધક ફ્રાન્સિસ્કો બોલિવર ઝપાટા અને રેમન્ડ એલ. રોડરિગ્ઝના નામ પરથી રાખવામાં આવ્યું હતું. પી એટલે "પ્લાઝમિડ", અને બીઆર એટલે "બોલિવર" અને "રોડરિગ્ઝ". પી. બી. આર. 322 લંબાઈમાં 4361 બેઝ જોડી છે અને તેમાં બે એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકાર જનીનો છે-જનીન બી. એલ. એ. એન્કોડિંગ એમ્પિસિલિન પ્રતિકાર (એ. એમ. પી. આર.) પ્રોટીન, અને જનીન ટી. ટી. એ. એન્કોડિંગ ટેટ્રાસાઇક્લિન પ્રતિકાર (ટી. ટી. આર.) પ્રોટીન. તેમાં પી. એમ. બી. 1 ની પ્રતિકૃતિનું મૂળ અને આર. ઓ. પી. જનીન છે, જે પ્લાઝમિડ કોપી નંબરના અવરોધકને એન્કોડ કરે છે. પ્લાઝમિડમાં ચાલીસથી વધુ પ્રતિબંધ ઉત્સેચકો માટે અનન્ય પ્રતિબંધ સ્થળો છે. આ ચાલીસમાંથી અગિયાર સ્થળો ટેટઆર જનીનમાં આવેલા છે. ટેટઆર જનીનના પ્રવર્તકની અંદર હિન્દ III અને ક્લાઈ નામના પ્રતિબંધ ઉત્સેચકો માટે બે સ્થળો છે. આ એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકાર જનીનોના સ્રોત એમ્પીઆર gene.The ની અંદર છ મુખ્ય પ્રતિબંધ સ્થળો છે જે ટેટ્રાસાઇક્લિન માટે પી. એસ. સી. 101 અને એમ્પિસિલિન માટે આર. એસ. એફ. 2124 છે. ગોળાકાર ક્રમને એવી રીતે ક્રમાંકિત કરવામાં આવે છે કે 0 એ અનન્ય ઇકોરી સાઇટની મધ્યમાં હોય અને ગણતરી ટેટઆર જનીન દ્વારા વધે છે. દાખલા તરીકે, જો આપણે એમ્પિસિલિનને દૂર કરવું હોય, તો આપણે પી. એસ. ટી. આઈ. સામે પ્રતિબંધ એન્ડોન્યુક્લીઝ અથવા મોલેક્યુલર કાતરનો ઉપયોગ કરવો જોઈએ અને પછી પી. બી. આર. 322 એમ્પિસિલિન માટે પ્રતિરોધક બની જશે. ઇન્સર્શનલ નિષ્ક્રિયતાની સમાન પ્રક્રિયા ટેટ્રાસાઇક્લિન પર લાગુ કરી શકાય છે. એમ્પીઆર જનીન પેનિસિલિન બીટા-લેક્ટામેઝ છે. પ્રવર્તકો પી1 અને પી3 બીટા-લેક્ટામેઝ જનીન માટે છે. પી3 એ કુદરતી પ્રવર્તક છે, અને પી1 એ પી. બી. આર. 322 બનાવવા માટે બે અલગ-અલગ ડીએનએ ટુકડાઓના બંધન દ્વારા કૃત્રિમ રીતે બનાવવામાં આવે છે. પી 2 એ પી 1 જેવા જ પ્રદેશમાં છે, પરંતુ તે વિરુદ્ધ સ્ટ્રાન્ડ પર છે અને ટેટ્રાસાઇક્લિન પ્રતિકાર જનીનની દિશામાં ટ્રાન્સક્રિપ્શન શરૂ કરે છે. પૃષ્ઠભૂમિ પ્રારંભિક ક્લોનિંગ પ્રયોગો કોલઇ1 અને પી. એસ. સી. 101 જેવા કુદરતી પ્લાઝમિડનો ઉપયોગ કરીને હાથ ધરવામાં આવી શકે છે. આ દરેક પ્લાઝમિડના તેના ફાયદા અને ગેરફાયદા હોઈ શકે છે. ઉદાહરણ તરીકે, કોલઇ1 પ્લાઝમિડ અને તેના વ્યુત્પન્નમાં ઉચ્ચ નકલ સંખ્યાનો ફાયદો છે અને પ્લાઝમિડની ઉચ્ચ ઉપજ પેદા કરવા માટે પ્લાઝમિડની ક્લોરામ્ફેનિકોલ વૃદ્ધિ માટે પરવાનગી આપે છે, જો કે કોલિસિન ઇ1 સામે પ્રતિરક્ષા માટે સ્ક્રીનીંગ તકનીકી રીતે સરળ નથી. પ્લાઝમિડ પી. એસ. સી. 101, સાલ્મોનેલા પનામાનું કુદરતી પ્લાઝમિડ, ટેટ્રાસાઇક્લિન પ્રતિકાર પ્રદાન કરે છે જે એન્ટિબાયોટિક પસંદગી સાથે સરળ સ્ક્રિનિંગ પ્રક્રિયાને મંજૂરી આપે છે, પરંતુ તે ઓછી નકલ નંબર પ્લાઝમિડ છે જે પ્લાઝમિડની ઊંચી ઉપજ આપતું નથી. અન્ય પ્લાઝમિડ, આરએસએફ 2124, જે કોલઇ1નું વ્યુત્પન્ન છે, તે એમ્પિસિલિન પ્રતિકાર પ્રદાન કરે છે પરંતુ તે મોટો છે. અન્ય ઘણા પ્લાઝમિડ કૃત્રિમ રીતે એવા પ્લાઝમિડ બનાવવા માટે બનાવવામાં આવ્યા હતા જે ક્લોનિંગ હેતુ માટે આદર્શ હશે, અને ઘણા લોકો દ્વારા પી. બી. આર. 322 સૌથી વધુ બહુમુખી હોવાનું જણાયું હતું અને તેથી તેનો સૌથી વધુ ઉપયોગ થતો હતો. તેમાં પસંદ કરી શકાય તેવા માર્કર્સ તરીકે બે એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકાર જનીનો છે, અને સંખ્યાબંધ અનુકૂળ અનન્ય પ્રતિબંધ સ્થળો છે જેણે તેને ક્લોનિંગ વેક્ટર તરીકે યોગ્ય બનાવ્યું છે. પ્લાઝમિડની રચના 3 મુખ્ય સ્રોતોમાંથી આનુવંશિક સામગ્રી સાથે કરવામાં આવી હતી-પી. એસ. સી. 101નું ટેટ્રાસાઇક્લિન પ્રતિકાર જનીન, આર. એસ. એફ. 2124નું એમ્પિસિલિન પ્રતિકાર જનીન અને પી. એમ. બી. 1ના પ્રતિકૃતિ ઘટકો, જે કોલઈ1 પ્લાઝમિડની નજીકના સંબંધી છે. ત્યારથી પી. બી. આર. 322 પર આધારિત મોટી સંખ્યામાં અન્ય પ્લાઝમિડનું નિર્માણ ખાસ કરીને વિવિધ હેતુઓ માટે કરવામાં આવ્યું છે. ઉદાહરણોમાં પ્લાઝમિડની પીયુસી શ્રેણીનો સમાવેશ થાય છે. એક્સ્ટ્રાક્રોમોસોમલ પ્રોટીન એક્સપ્રેશન અને શટલ વેક્ટર માટેના મોટાભાગના એક્સપ્રેશન વેક્ટરમાં પ્રતિકૃતિનું મૂળ પી. બી. આર. 322 હોય છે, અને પી. બી. આર. 322 ના ટુકડાઓ લક્ષ્યાંકિત એકીકરણ અને રંગસૂત્રમાંથી ડી. એન. એ. ને બહાર કાઢવા માટે ઇન્ટ્રાસ્પેશિસ શટલ અથવા દ્વિસંગી વેક્ટર અને વેક્ટરના નિર્માણમાં ખૂબ જ લોકપ્રિય છે. ડીએનએ ક્રમ પી. બી. આર. 322 માં ક્રમ એ પણ જુઓ પ્રતિબંધ એન્ઝાઇમ કટીંગ સાઇટ્સની સૂચિ સંદર્ભો બાહ્ય કડીઓ પી. બી. આર. 322 નકશો પી. બી. આર. 322 લક્ષણો પી. બી. આર. 322 ડીએનએ મોબાઇલ આનુવંશિક તત્વો મોલેક્યુલર બાયોલોજી તકનીકો પ્લાઝમિડ્સ