Selectable marker
પસંદગીપાત્ર માર્કર એ કોષમાં, ખાસ કરીને બેક્ટેરિયમમાં અથવા સંવર્ધનમાં કોષોમાં દાખલ કરાયેલ જનીન છે, જે કૃત્રિમ પસંદગી માટે યોગ્ય લક્ષણ પ્રદાન કરે છે. તે રિપોર્ટર જનીનનો એક પ્રકાર છે જેનો ઉપયોગ પ્રયોગશાળામાં માઇક્રોબાયોલોજી, મોલેક્યુલર બાયોલોજી અને આનુવંશિક ઇજનેરીમાં થાય છે, જે કોષમાં વિદેશી ડીએનએ દાખલ કરવા માટે ટ્રાન્સફેક્શન અથવા અન્ય પ્રક્રિયાની સફળતાને સૂચવે છે. પસંદગીપાત્ર માર્કર્સ ઘણીવાર એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકાર જનીનો હોય છે (એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકાર માર્કર એ જનીન છે જે પ્રોટીન ઉત્પન્ન કરે છે જે એન્ટિબાયોટિક સામે પ્રતિકાર સાથે આ પ્રોટીનને વ્યક્ત કરતા કોષો પૂરા પાડે છે.). બેક્ટેરિયા કે જે વિદેશી ડીએનએ દાખલ કરવાની પ્રક્રિયાને આધિન છે તે એન્ટિબાયોટિક ધરાવતા માધ્યમ પર ઉગાડવામાં આવે છે, અને તે બેક્ટેરિયલ વસાહતો કે જે વિકાસ કરી શકે છે તે સફળતાપૂર્વક આનુવંશિક સામગ્રીને અપનાવી અને વ્યક્ત કરી છે. સામાન્ય રીતે એમ્પિસિલિન, ક્લોરામ્ફેનિકોલ, ટેટ્રાસાઇક્લિન અથવા કેનામાઇસિન વગેરે જેવા એન્ટિબાયોટિક્સ સામે જનીન એન્કોડિંગ પ્રતિકારને ઇ. કોલી માટે ઉપયોગી પસંદગીપાત્ર માર્કર્સ માનવામાં આવે છે. મોડસ ઓપરેન્ડી બિન-પ્રતિકારક પદાર્થોને પુનઃ સંયોજક પદાર્થોથી અલગ કરવામાં આવે છે; એટલે કે, બેક્ટેરિયામાં આર-ડીએનએ દાખલ કરવામાં આવે છે, કેટલાક બેક્ટેરિયાને સફળતાપૂર્વક રૂપાંતરિત કરવામાં આવે છે અને કેટલાક બિન-રૂપાંતરિત રહે છે. જ્યારે એમ્પિસિલિન ધરાવતા માધ્યમ પર ઉગાડવામાં આવે છે, ત્યારે બેક્ટેરિયા એમ્પિસિલિન પ્રતિકારના અભાવને કારણે મૃત્યુ પામે છે. આ સ્થિતિ પછીથી નાઇટ્રોસેલ્યુલોઝ કાગળ પર નોંધવામાં આવે છે અને જરૂરી ઉત્પાદનના મોટા પાયે ઉત્પાદન માટે તેમને પોષક માધ્યમમાં ખસેડવા માટે અલગ કરવામાં આવે છે. પસંદ કરી શકાય તેવા માર્કરનો વિકલ્પ સ્ક્રીનેબલ માર્કર છે જેને રિપોર્ટર જનીન તરીકે પણ સૂચવી શકાય છે, જે સંશોધકને ઇચ્છિત અને અનિચ્છનીય કોષો વચ્ચે તફાવત કરવાની મંજૂરી આપે છે, દા. ત. વાદળી અને સફેદ વસાહતો વચ્ચે. આ ઇચ્છિત અથવા અનિચ્છનીય કોષો ફક્ત બિન-રૂપાંતરિત કોષો છે જે પ્રયોગ દરમિયાન જનીનને લેવામાં અસમર્થ હતા. સકારાત્મક અને નકારાત્મક મોલેક્યુલર બાયોલોજી સંશોધન માટે માંગવામાં આવેલી પસંદગીના આધારે વિવિધ પ્રકારના માર્કર્સનો ઉપયોગ કરી શકાય છે. તેમાં નીચેનાનો સમાવેશ થાય છેઃ સકારાત્મક અથવા પસંદગી માર્કર્સ એ પસંદ કરી શકાય તેવા માર્કર્સ છે જે યજમાન જીવતંત્રને પસંદગીયુક્ત લાભ આપે છે. એક ઉદાહરણ એન્ટિબાયોટિક પ્રતિકાર હશે, જે યજમાન જીવતંત્રને એન્ટિબાયોટિક પસંદગીમાં ટકી રહેવાની મંજૂરી આપે છે. નકારાત્મક અથવા પ્રતિકૂળ માર્કર્સ એ પસંદ કરી શકાય તેવા માર્કર્સ છે જે પસંદગી પર યજમાન જીવતંત્રની વૃદ્ધિને દૂર કરે છે અથવા અટકાવે છે. એક ઉદાહરણ થાઇમિડીન કિનેઝ હશે, જે યજમાનને ગેન્સીક્લોવિરની પસંદગી પ્રત્યે સંવેદનશીલ બનાવે છે. હકારાત્મક અને નકારાત્મક પસંદ કરી શકાય તેવા માર્કર્સ યજમાનને એક શરત હેઠળ લાભ આપીને હકારાત્મક અને નકારાત્મક બંને માર્કર તરીકે કામ કરી શકે છે, પરંતુ એક અલગ શરત હેઠળ વૃદ્ધિને અટકાવે છે. એક ઉદાહરણ એ એન્ઝાઇમ હશે જે ઓક્સોટ્રોફી (હકારાત્મક પસંદગી) ને પૂરક બની શકે છે અને રાસાયણિકને ઝેરી સંયોજન (નકારાત્મક પસંદગી) માં રૂપાંતરિત કરવામાં સક્ષમ હોઈ શકે છે. પસંદ કરી શકાય તેવા માર્કર્સના સામાન્ય ઉદાહરણોમાં નીચેનાનો સમાવેશ થાય છેઃ બીટા-લેક્ટામેઝ જે બેક્ટેરિયલ યજમાનો માટે એમ્પિસિલિન પ્રતિકાર પ્રદાન કરે છે. ટી. એન. 5 માંથી નિયો જનીન, જે ઇ. કોલી જિનોમમાંથી યુકેરીયોટિક કોષોમાં બેક્ટેરિયામાં કેનામાઇસીન અને જીનેટિકિન સામે પ્રતિકાર પ્રદાન કરે છે મ્યુટન્ટ ફેબી જનીન (એમ. એફ. એ. બી. આઈ.), જે યજમાનને ટ્રાઇક્લોસન પ્રતિકાર પ્રદાન કરે છે. યુઆરએ3, ખમીરમાંથી નીકળતા ઓરોટિડીન-5 'ફોસ્ફેટ ડીકાર્બોક્સિલેઝ એ હકારાત્મક અને નકારાત્મક રીતે પસંદ કરી શકાય તેવું માર્કર છે. તે યુરેસિલ બાયોસિન્થેસિસ માટે જરૂરી છે અને યુરેસિલ (સકારાત્મક પસંદગી) માટે ઓક્સોટ્રોફિક હોય તેવા યુઆરએ3 મ્યુટન્ટ્સને પૂરક બની શકે છે. એન્ઝાઇમ યુઆરએ3 5-ફ્લોરોરોટિક એસિડ (5એફઓએ) ને ઝેરી સંયોજન 5-ફ્લોરોરાસિલમાં પણ રૂપાંતરિત કરે છે, તેથી યુઆરએ3 જનીન વહન કરતા કોઈપણ કોષોને 5એફઓએ (નકારાત્મક પસંદગી) ની હાજરીમાં મારી નાખવામાં આવશે. ભવિષ્યમાં વૈકલ્પિક માર્કર તકનીકોનો વધુ વખત ઉપયોગ કરવાની જરૂર પડશે, ઓછામાં ઓછું, અંતિમ ઉત્પાદનમાં તેમની દ્રઢતા વિશેની ચિંતાઓને શાંત કરવા માટે. તે પણ શક્ય છે કે માર્કર્સને સંપૂર્ણપણે ભવિષ્યની તકનીકો દ્વારા બદલવામાં આવશે જે દૂર કરી શકાય તેવા માર્કર્સનો ઉપયોગ કરે છે, અને અન્ય જે માર્કર્સનો બિલકુલ ઉપયોગ કરતા નથી, તેના બદલે સહ-પરિવર્તન, હોમોલોગસ પુનઃસંયોજન અને પુનઃસંયોજન-મધ્યસ્થી ઉચ્છેદન પર આધાર રાખે છે. આનુવંશિક માર્કર જનીન બાયોમાર્કર સંદર્ભો આનુવંશિક તકનીકો મોલેક્યુલર બાયોલોજી એન્ટિમાઇક્રોબાયલ પ્રતિકાર પણ જુઓ