Solid-phase reversible immobilization
સોલિડ-ફેઝ રિવર્સિબલ ઇમ્મોબિલાઇઝેશન અથવા એસ. પી. આર. આઈ. એ દ્રાવણમાંથી ન્યુક્લિક એસિડને શુદ્ધ કરવાની એક પદ્ધતિ છે. તે સિલિકા-અથવા કાર્બોક્સિલ-કોટેડ પેરામેગ્નેટિક મણકાનો ઉપયોગ કરે છે, જે પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ અને મીઠાની હાજરીમાં ન્યુક્લિક એસિડ સાથે ઉલટાવી શકાય તેવું રીતે જોડાય છે. એસ. પી. આર. આઈ. તકનીકનો એક સામાન્ય ઉપયોગ અનુક્રમણિકા પ્રતિક્રિયાઓ માટે પી. સી. આર. દ્વારા વિસ્તૃત ડીએનએના નમૂનાઓને શુદ્ધ કરવાનો છેઃ ન્યુક્લિક એસિડ શુદ્ધિકરણમાં એસ. પી. આર. આઈ. મણકાનો ઉપયોગ સિલિકા અથવા કાર્બોક્સિલ જૂથો સાથે કોટેડ પેરામેગ્નેટિક મણકા છે. જ્યારે મણકાને પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ અને ક્ષારની ઊંચી સાંદ્રતા ધરાવતા દ્રાવણમાં ફરીથી સ્થગિત કરવામાં આવે છે, ત્યારે તેઓ ન્યુક્લિક એસિડ સાથે ઉલટાવી શકાય તેવું બંધન કરવામાં સક્ષમ હોય છે. આ બંધન કદ પસંદગીયુક્ત છે, જેમાં ન્યુક્લિક એસિડના લાંબા પોલિમર ટૂંકા પોલિમર કરતાં વધુ અસરકારક રીતે જોડાય છે. એસ. પી. આર. આઈ. શુદ્ધિકરણમાં સામાન્ય રીતે નીચેના પગલાંઓનો સમાવેશ થાય છેઃ પોલિઇથિલિન ગ્લાયકોલ અને સોડિયમ ક્લોરાઇડના દ્રાવણમાં એસ. પી. આર. આઈ. મણકાને ન્યુક્લિક એસિડના નમૂના સાથે મિશ્રિત કરવામાં આવે છે. ન્યુક્લિક એસિડ મણકા સાથે જોડાય છે. મિશ્રણને ચુંબકીય ક્ષેત્રમાં મૂકવામાં આવે છે, જે ન્યુક્લિક-એસિડથી બંધાયેલા મણકાને દ્રાવણથી અલગ કરે છે. દ્રાવણ દૂર કરવામાં આવે છે અને મણકાને 80 ટકા ઇથેનોલ સાથે પાણીમાં ઘણી વખત ધોવામાં આવે છે. શેષ ઇથેનોલને દૂર કરવા માટે મણકાને સૂકવવાની મંજૂરી આપવામાં આવે છે. મણકાને ચુંબકીય ક્ષેત્રમાંથી દૂર કરવામાં આવે છે અને પાણી અથવા એલ્યુશન બફરમાં ફરીથી સ્થગિત કરવામાં આવે છે, જે મણકામાંથી ન્યુક્લિક એસિડને મુક્ત કરે છે. મિશ્રણને ફરી એકવાર ચુંબકીય ક્ષેત્રમાં મૂકવામાં આવે છે, જે મણકાને દ્રાવણથી અલગ કરે છે. દ્રાવણ, જે હવે શુદ્ધ ન્યુક્લિક એસિડ ધરાવે છે, તેને દૂર કરવામાં આવે છે અને ડાઉનસ્ટ્રીમ કાર્યક્રમો માટે ઉપયોગમાં લેવાય છે. ન્યુક્લિક એસિડ પદ્ધતિઓ ડીએનએ સિક્વન્સિંગ સોલિડ-ફેઝ નિષ્કર્ષણ સંદર્ભો ન્યુક્લિક એસિડ પણ જુઓ.