Magnetic-activated cell sorting
મેગ્નેટિક-એક્ટિવેટેડ સેલ સોર્ટિંગ (એમ. એ. સી. એસ.) એ મિલ્ટેની બાયોટેક દ્વારા શોધાયેલ તેમના સપાટીના એન્ટિજેન્સ (સી. ડી. અણુઓ) ના આધારે વિવિધ કોષોની વસ્તીને અલગ કરવાની એક પદ્ધતિ છે. MACS નામ કંપનીનું નોંધાયેલું ટ્રેડમાર્ક છે. આ પદ્ધતિ મિલ્ટેની બાયોટેકની એમએસીએસ સિસ્ટમ સાથે વિકસાવવામાં આવી હતી, જે સુપરપેરામેગ્નેટિક નેનોપાર્ટિકલ્સ અને કૉલમનો ઉપયોગ કરે છે. સુપરપેરામેગ્નેટિક નેનોપાર્ટિકલ્સ 100 એનએમના ક્રમમાં હોય છે. તેનો ઉપયોગ લક્ષિત કોષોને સ્તંભની અંદર પકડવા માટે ટેગ કરવા માટે થાય છે. સ્તંભને કાયમી ચુંબક વચ્ચે મૂકવામાં આવે છે જેથી જ્યારે ચુંબકીય કણ-કોષ સંકુલ તેમાંથી પસાર થાય, ત્યારે ટેગ કરેલા કોષોને પકડી શકાય. સ્તંભમાં સ્ટીલનું ઊન હોય છે જે ચુંબકીય ક્ષેત્રના ઢાળમાં વધારો કરે છે જેથી જ્યારે સ્તંભને કાયમી ચુંબક વચ્ચે મૂકવામાં આવે ત્યારે વિભાજન કાર્યક્ષમતાને મહત્તમ કરી શકાય. મેગ્નેટિક-એક્ટિવેટેડ સેલ સોર્ટિંગ એ ઇમ્યુનોલોજી, કેન્સર સંશોધન, ન્યુરોસાયન્સ અને સ્ટેમ સેલ સંશોધન જેવા ક્ષેત્રોમાં સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતી પદ્ધતિ છે. મિલ્ટેની માઇક્રોબીડ્સનું વેચાણ કરે છે જે એન્ટિબોડીઝ સાથે જોડાયેલા ચુંબકીય નેનોપાર્ટિકલ્સ છે જેનો ઉપયોગ ચોક્કસ કોષોને લક્ષ્ય બનાવવા માટે થઈ શકે છે. પ્રક્રિયા MACS પદ્ધતિ ચોક્કસ સપાટીના એન્ટિજેન સામે એન્ટિબોડીઝ સાથે કોટેડ ચુંબકીય નેનોપાર્ટિકલ્સનો ઉપયોગ કરીને કોષોને અલગ કરવાની મંજૂરી આપે છે. આ કારણે આ એન્ટિજેનને વ્યક્ત કરતા કોષો ચુંબકીય નેનોપાર્ટિકલ્સ સાથે જોડાય છે. મણકા અને કોશિકાઓનું સેવન કર્યા પછી, દ્રાવણને મજબૂત ચુંબકીય ક્ષેત્રમાં એક સ્તંભમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવે છે. આ તબક્કામાં, નેનોપાર્ટિકલ્સ સાથે જોડાયેલા કોષો (એન્ટિજેનને વ્યક્ત કરતા) સ્તંભ પર રહે છે, જ્યારે અન્ય કોષો (એન્ટિજેનને વ્યક્ત કરતા નથી) તેમાંથી વહે છે. આ પદ્ધતિ સાથે, કોષોને ચોક્કસ એન્ટિજેન (ઓ) ના સંદર્ભમાં હકારાત્મક કે નકારાત્મક રીતે અલગ કરી શકાય છે. હકારાત્મક અને નકારાત્મક પસંદગી હકારાત્મક પસંદગી સાથે, રસના એન્ટિજેન (ઓ) ને વ્યક્ત કરતા કોષો, જે ચુંબકીય સ્તંભ સાથે જોડાયેલા હોય છે, ચુંબકીય ક્ષેત્રમાંથી સ્તંભને દૂર કર્યા પછી, એક અલગ પાત્રમાં ધોવાઇ જાય છે. આ પદ્ધતિ ચોક્કસ કોષના પ્રકારને અલગ કરવા માટે ઉપયોગી છે, ઉદાહરણ તરીકે સીડી4 લિમ્ફોસાઇટ્સ. વધુમાં, તે શુક્રાણુઓની વહેલી તપાસને સક્ષમ કરે છે જે એપોપ્ટોસિસની શરૂઆત કરે છે, જો કે તેઓ પર્યાપ્ત દેખાવ અને ગતિશીલતા બતાવી શકે છે. ચુંબકીય લેબલ ધરાવતું રીસેપ્ટર જે એનેક્સિન સાથે જોડાય છે તે શુક્રાણુમાં ઉમેરવામાં આવે છે. સામાન્ય કોષોની અંદર, ફોસ્ફેટિડિલસેરિન પરમાણુ કોષ પટલની અંદર કોષરસ તરફ સ્થિત હોય છે. તેમ છતાં, તે કોષોમાં કે જે એપોપ્ટોટિક પ્રક્રિયા શરૂ કરે છે ફોસ્ફેટિડિલસેરિન તેના બદલે કોષ પટલની બાહ્ય બાજુની સામે હોય છે, જે એનેક્સિન કોન્જ્યુગેટ સાથે જોડાય છે. તેથી, સામાન્ય શુક્રાણુ લેબલવાળા રીસેપ્ટર સાથે બંધન કર્યા વિના સ્તંભમાંથી પસાર થશે. બીજી બાજુ, પ્રોપોપ્ટોટિક શુક્રાણુ ફસાયેલા રહેશે, જે ચુંબકીય-લેબલવાળા એન્ટિબોડીને કારણે શુક્રાણુ પસંદગી પ્રક્રિયા તરીકે બહાર આવે છે. છેવટે, આ તકનીક મર્યાદિત હોવા છતાં તેની અસરકારકતા દર્શાવે છે. નકારાત્મક પસંદગી સાથે, ઉપયોગમાં લેવાતી એન્ટિબોડી સપાટીના એન્ટિજેન (ઓ) સામે હોય છે જે રસ ન હોય તેવા કોષો પર હાજર હોવાનું જાણીતું છે. સ્તંભ પર કોષો/ચુંબકીય નેનોપાર્ટિકલ્સના દ્રાવણના વહીવટ પછી આ એન્ટિજેન્સને વ્યક્ત કરતા કોષો સ્તંભ સાથે જોડાય છે અને તેમાંથી પસાર થતા અપૂર્ણાંકને એકત્રિત કરવામાં આવે છે, કારણ કે તેમાં આ અનિચ્છનીય એન્ટિજેન્સવાળા લગભગ કોઈ કોષો નથી. ફેરફારો રસના એન્ટિજેન સામે એન્ટિબોડી સાથે જોડાયેલા ચુંબકીય નેનોપાર્ટિકલ્સ હંમેશા ઉપલબ્ધ હોતા નથી, પરંતુ તેને અવગણવાનો એક માર્ગ છે. ફ્લોરોફોર-સંયોજિત એન્ટિબોડીઝ વધુ પ્રચલિત હોવાથી, એન્ટી-ફ્લુરોક્રોમ એન્ટિબોડીઝ સાથે કોટેડ ચુંબકીય નેનોપાર્ટિકલ્સનો ઉપયોગ કરવો શક્ય છે. તેઓ રસના એન્ટિજેન સામે ફ્લોરોસન્ટ-લેબલવાળા એન્ટિબોડીઝ સાથે સેવન કરે છે અને આમ એન્ટિજેનના સંદર્ભમાં કોષને અલગ કરવા માટે કામ કરી શકે છે. ફ્લો સાયટોમેટ્રી ડાયનેબેડ્સ ક્લસ્ટર્સ ઓફ ડિફરન્સીએશન મોલેક્યુલર બાયોલોજી સંદર્ભો એસ. મિલ્ટેની, ડબલ્યુ. મુલર, ડબલ્યુ. વેઇશેલ અને એ. રેડબ્રુક, "હાઇ ગ્રેડિયન્ટ મેગ્નેટિક સેલ સેપરેશન વિથ એમએસીએસ", સાયટોમેટ્રી, વોલ્યુમ પણ જુઓ. 11, ના. 2, પીપી. 231-238,1990.