P19 cell
પી19 કોષો એ એક ગર્ભ કાર્સિનોમા કોષ રેખા છે જે ઉંદરમાં ગર્ભમાંથી મેળવેલા ટેરાટોકાર્સિનોમાથી મેળવવામાં આવે છે. કોષ રેખા પ્લુરિપોટન્ટ છે અને તે ત્રણેય સૂક્ષ્મજીવાણુ સ્તરોના કોષ પ્રકારોમાં તફાવત કરી શકે છે. ઉપરાંત, તે સૌથી વધુ લાક્ષણિકતા ધરાવતી ગર્ભ કાર્સિનોમા (ઇસી) કોષ રેખા છે જે વિવિધ ચોક્કસ સારવારો દ્વારા કાર્ડિયાક સ્નાયુ કોષો અને ચેતાકોષીય કોષોમાં પ્રેરિત થઈ શકે છે. ખરેખર, ડાઇમિથાઇલ સલ્ફોક્સાઇડ (ડી. એમ. એસ. ઓ.) માં સંકલિત પી. 19 કોષોને ખુલ્લા પાડવાથી હૃદય અને હાડપિંજરના સ્નાયુઓમાં તફાવત આવે છે. ઉપરાંત, પી19 કોષોને રેટિનોઇક એસિડ (આરએ) માં ખુલ્લા પાડવાથી તેમને ચેતાકોષીય કોષોમાં અલગ કરી શકાય છે. જો આક્રમક કેન્સર કોષ વધે અને મેટાસ્ટેસાઇઝ થાય તો મનુષ્યમાં P19 સેલ લાઇન કેન્સર કોષોની ઉત્પત્તિ દર્દીના મૃત્યુમાં પરિણમી શકે છે. જો કે, સંશોધકો વધુ ચોક્કસ સારવાર શોધવા માટે કેન્સરના કોષોના વિકાસનો અભ્યાસ કરવા માટે આ કોષોનો ઉપયોગ કરે છે. વિકાસલક્ષી જીવવિજ્ઞાનીઓ માટે, ગર્ભસ્થ કાર્સિનોમા, જે ટેરાટોકાર્સિનોમાથી ઉદ્ભવે છે, તે વિકાસલક્ષી અભ્યાસ માટે સારો હેતુ છે. 1982માં, મેકબર્ની અને રોજર્સે ગાંઠની વૃદ્ધિને પ્રેરિત કરવા માટે વૃષણમાં 7.5 દિવસના ઉંદરના ગર્ભનું પ્રત્યારોપણ કર્યું હતું. અવિભાજિત સ્ટેમ કોશિકાઓ ધરાવતી કોષ સંસ્કૃતિઓને પ્રાથમિક ગાંઠમાંથી અલગ કરવામાં આવી હતી જેમાં યુપ્લોઇડ કેરીયોટાઇપ હોય છે. આ સ્ટેમ કોશિકાઓને એમ્બ્રયોનલ કાર્સિનોમા પી19 કોશિકાઓ નામ આપવામાં આવ્યું હતું. આ વ્યુત્પન્ન P19 કોષો પોષક કોષો વિના ઝડપથી વિકસ્યા હતા અને જાળવવા માટે સરળ હતા. વધુમાં, P19 કોષોની બહુપરતાની પુષ્ટિ પછી કોષોને અન્ય માઉસ તાણના બ્લાસ્ટોસિસ્ટ્સમાં દાખલ કરીને કરવામાં આવી હતી. સંશોધકોએ શોધી કાઢ્યું હતું કે પ્રાપ્તકર્તા ઉંદરમાં વૃદ્ધિ પામતા ત્રણેય જીવાણુ સ્તરોની પેશીઓ હતી. તેમના સતત અભ્યાસોના આધારે, તેઓએ મૂળ P19 કોષોમાંથી પેટા પ્રકારનાં કોષ રેખાઓ મેળવીઃ P19S18, P19D3, P19RAC65 અને P19C16. આ પેટા પ્રકારનાં કોષ રેખાઓ વચ્ચેનો તફાવત એ છે કે અનુક્રમે રેટિનોઇક એસિડ અથવા ડી. એમ. એસ. ઓ. સાથેની સારવારના જવાબમાં ચેતાકોષીય કોષો અથવા સ્નાયુ કોષોમાં તફાવત કરવાની ક્ષમતા છે. તાજેતરમાં, વિવિધ અભ્યાસો કોષ રેખાઓ ઉત્પન્ન કરે છે જે શરૂઆતમાં અલગ P19 કોષોમાંથી મેળવવામાં આવી હતી. P19 કોષોની પ્લુરિપોટેન્સીને કારણે, તે નવી વ્યુત્પન્ન કોષ રેખાઓ એક્ટોડર્મ, મેસોડર્મ અને એન્ડોડર્મ જેવા કોષો હોઈ શકે છે. સ્થિર રંગસૂત્ર રચનાને કારણે પી19 કોષો પી19 કોષોનું વિભેદન ઘાતાંકીય વૃદ્ધિમાં જાળવી શકાય છે. કારણ કે ગર્ભસ્થ કાર્સિનોમા ત્રણેય જીવાણુ સ્તરોના કોષોમાં તફાવત કરી શકે છે, P19 કોષો તે એક્ટોડર્મ, મેસોડર્મ અને એન્ડોડર્મ જેવા કોષોમાં પણ તફાવત કરી શકે છે. જ્યારે ગર્ભના કાર્સિનોમા કોષોને ઉચ્ચ ઘનતા પર સંવર્ધન કરવામાં આવે છે, ત્યારે તેઓ અલગ પડવાનું શરૂ કરે છે. કોષોને ગર્ભના શરીરમાં એકત્રિત કરીને, ઇસી કોષો પણ તફાવતની પ્રક્રિયા કરી શકે છે. પી-19 કોષોમાં, સંકલિત ગર્ભ શરીરના કોષોમાં દવાઓની બિન-ઝેરી સાંદ્રતા ઉમેરવાથી ઉમેરવામાં આવેલી દવાના આધારે પી-19 કોષોને ચોક્કસ કોષ રેખાઓમાં અલગ પાડી શકાય છે. બે સૌથી સામાન્ય અને અસરકારક દવાઓ રેટિનોઇક એસિડ (આરએ) અને ડાઇમિથાઇલ સલ્ફોક્સાઇડ (ડીએમએસઓ) છે. અભ્યાસોએ દર્શાવ્યું છે કે આરએની ચોક્કસ સાંદ્રતા પી19 કોષોને ચેતાકોષો અને ગ્લિયલ કોષો સહિત ચેતાકોષીય કોષોમાં તફાવત કરવા માટે પ્રેરિત કરી શકે છે, જ્યારે 0.5%-1% DMSO એ પી19 કોષોને કાર્ડિયાક અથવા હાડપિંજરના સ્નાયુ કોષોમાં તફાવત કરવા તરફ દોરી જાય છે. આરએ સારવાર પદ્ધતિમાં, ચેતાકોષો, એસ્ટ્રોગ્લિયા અને ફાઇબ્રોબ્લાસ્ટ્સને એકત્રીકરણ પછી ઓળખી શકાય છે. વિભેદક કોષોમાં કોલિન એસિટિલટ્રાન્સફેરેઝ અને એસિટિલ કોલિનેસ્ટેરેઝ પ્રવૃત્તિઓ પણ હોય છે. જ્યારે ડી. એમ. એસ. ઓ. સાથે સારવાર કરવામાં આવે છે, ત્યારે હૃદયના સ્નાયુ કોશિકાઓ સંપર્કમાં આવ્યાના 5 દિવસ પછી વિકસિત થાય છે અને હાડપિંજરના સ્નાયુ કોશિકાઓ સંપર્કમાં આવ્યાના 8 દિવસ પછી દેખાય છે. તે અભ્યાસો દર્શાવે છે કે ડ્રગ એક્સપોઝર બહુવિધ P19 કોષોને કોષોના વિવિધ સ્તરોમાં અલગ પાડવાનું કારણ બને છે. કારણ કે રેટિનોઇક એસિડ અથવા ડી. એમ. એસ. ઓ. ની સાંદ્રતા કોષો માટે બિન-ઝેરી હોય છે, દવા-વિશિષ્ટ તફાવત કોષોના પ્રેરણાને કારણે છે, પસંદગીને કારણે નહીં. દવા-વિશિષ્ટ તફાવતની પદ્ધતિની તપાસ કરવા માટે P19 કોષોના મ્યુટન્ટ્સ પેદા કરવામાં આવ્યા છે. તદુપરાંત, જનીન અભિવ્યક્તિનો અભ્યાસ કરીને અથવા P19 કોષોના મ્યુટન્ટ્સ ઉત્પન્ન કરીને ન્યુરોજેનેસિસ અને માયોજેનેસિસ સંબંધિત સંકેત માર્ગોની પણ તપાસ કરવામાં આવી હતી. P19 કોષોમાં ન્યુરોજેનેસિસ. રેટિનોઇક એસિડ સાથે અવિભાજિત P19 કોષોની સારવાર તેમને ખાસ કરીને ચેતાકોષીય કોષોમાં પ્રેરિત કરી શકે છે. આરએના 1 માઇક્રોનથી 3 માઇક્રોન વચ્ચેના ડોઝનો ઉપયોગ કરીને ચેતાકોષો સૌથી વધુ વિપુલ કોષ પ્રકાર તરીકે પેદા કરી શકાય છે. આ સારવાર હેઠળના ચેતાકોષો છ દિવસ અને નવ દિવસની વચ્ચે સૌથી વધુ વસ્તી સુધી પહોંચ્યા હતા. ન્યુરોફિલામેન્ટ પ્રોટીન, એચ. એન. કે.-1 એન્ટિજેન અને ટિટાનસ ટોક્સિન બંધનકર્તા સ્થળો જેવા કેટલાક ન્યુરોનલ માર્કર્સ આ દિવસો દરમિયાન ઉચ્ચતમ સ્તરે વ્યક્ત થાય છે. છથી નવ દિવસની સારવાર પછી, સંબંધિત ચેતાકોષોની વસ્તીમાં ઘટાડો થાય છે, જે સંભવતઃ બિન-ચેતાકોષીય કોષોના ઝડપી પ્રસારને કારણે છે. 10 દિવસના સંપર્ક પછી, એસ્ટ્રોગ્લિયલ કોષોને ગ્લિયલ ફાઇબ્રિલરી એસિડિક પ્રોટીન (જી. એફ. એ. પી.) નો ઉપયોગ કરીને શોધી શકાય છે, જે ગ્લિયલ કોષોનું ચોક્કસ માર્કર છે. ચેતાકોષો અને એસ્ટ્રોસાઇટ્સ સિવાય, P19 કોષો ઓલિગોડેન્ડ્રોસાઇટ્સમાં પણ તફાવત કરી શકે છે, જે ચોક્કસ માર્કર્સ, માયેલિન-સંકળાયેલ ગ્લાયકોપ્રોટીન અને 2,3 '-સાયક્લિક-ન્યુક્લિયોટાઇડ 3'-ફોસ્ફોડીસ્ટેરેઝનો ઉપયોગ કરીને શોધી શકાય છે. વધુમાં, જ્યારે આરએ-પ્રેરિત કોષોને મગજમાં ટ્રાન્સપ્લાન્ટ કરવામાં આવ્યા ત્યારે ઓલિગોડેન્ડ્રોસાઇટ્સ પણ ઉંદરમાં ફાઇબર બંડલ્સમાં વિકસિત થયા અને સ્થળાંતર કર્યું. રેટિનોઇક એસિડ માત્ર P19 કોષોને જ નહીં પરંતુ અન્ય પૂર્વજ કોષો અથવા ગર્ભ સ્ટેમ કોષોને પણ તફાવત માટે પ્રેરિત કરી શકે છે. રેટિનોઇક એસિડની સારવાર પછીના કોષો ન્યુરોનલ માર્કર જનીનોને તરત જ વ્યક્ત કરતા ન હોવાથી, આરએએ સેલ્યુલર તફાવતની પ્રક્રિયા કરવા માટે અમુક માર્ગ શરૂ કરવો જ જોઇએ. ઘણા અભ્યાસોએ આરએ-પ્રેરિત પદ્ધતિઓની તપાસ કરવા માટે પી19 કોષોનો ઉપયોગ કર્યો હતો, જેમાં રેટિનોઇક એસિડ રીસેપ્ટર જનીનોના મ્યુટન્ટ એલીલનું નિર્માણ અને આરએના સંપર્કમાં આવતા રીસેપ્ટર જનીનો, હોક્સ જનીનો અને રેટિનોલ બંધનકર્તા પ્રોટીનની અભિવ્યક્તિનો અભ્યાસ સામેલ છે. આ તમામ અભ્યાસો સૂચવે છે કે P19 કોષ એ ચોક્કસ સેલ્યુલર માર્ગમાં દખલ કરતી દવાઓની પદ્ધતિની તપાસ કરવા માટે એક સારી ઈન વિટ્રો મોડેલ સિસ્ટમ છે. વધુમાં, પી19 કોષમાં આરએ-પ્રેરિત ન્યુરોજેનેસિસની ક્ષમતાનો ઉપયોગ કરીને, ઘણા સંશોધકોએ ન્યુરો-અથવા ગ્લિયોજેનેસિસની ઈન વિટ્રો ભિન્નતા પદ્ધતિઓને ઓળખવાનું શરૂ કર્યું. કેટલાક સંબંધિત માર્ગો અથવા ડબલ્યુ. એન. ટી./β-કેટેનિન પાથવે, નોચ પાથવે અને હેજહોગ પાથવે સહિત જનીન અભિવ્યક્તિનો ઉપયોગ કરીને અથવા સંબંધિત જનીનો માટે એલીલ્સ ઉત્પન્ન કરીને તપાસ કરવામાં આવે છે. P19 કોષ રેખામાં માયોજેનેસિસ રેટિનોઇક એસિડની જેમ જ, DMSO પ્રેરિત તફાવત P19 કોષો માટે ચોક્કસ નથી. તે ન્યુરોબ્લાસ્ટોમા કોષો, ફેફસાના કેન્સર કોષો અને માઉસ ઇ. એસ. કોષોને પણ પ્રેરિત કરી શકે છે. 0.5-1% ની સાંદ્રતા પર DMSO એ P19 કોષોને મેસોડર્મલ અને એન્ડોડર્મલ કોષ પ્રકારોને એકત્રિત કરવા અને પ્રક્રિયા કરવા માટે પ્રેરિત કર્યા. એકત્રીકરણ અને તફાવત દરમિયાન થતી સેલ્યુલર પદ્ધતિનો હજુ પણ સંપૂર્ણ અભ્યાસ કરવામાં આવ્યો નથી. જો કે, કેટલાક અભ્યાસો દર્શાવે છે કે સેલ્યુલર સંચાર P19 કોષોમાં સ્નાયુઓના તફાવતમાં મહત્વપૂર્ણ ભૂમિકા ભજવે છે જે સમજાવી શકે છે કે સ્નાયુઓના તફાવતની પ્રક્રિયા કરવા માટે કોષોને પહેલા શા માટે એકત્રિત કરવાની જરૂર છે. પી19 કોષોમાં માયોજેનેસિસની પદ્ધતિને સ્પષ્ટ કરવા માટે, જી. એ. ટી. એ.-4, એમ. ઇ. એફ. 2સી, એમ. એસ. એક્સ.-1, <આઇ. ડી. 1>, એમ. એચ. ઓ. એક્સ., એમ. એસ. એક્સ.-2 અને એમ. એલ. પી. સહિતના કેટલાક કાર્ડિયાક વિશિષ્ટ ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળો તફાવત દરમિયાન બદલાતા જોવા મળે છે. અહેવાલો દર્શાવે છે કે GATA-4, NKx2.5 અને MEF2c બધા DMSO ઇન્ડક્શન પછી નિયમન કરવામાં આવ્યા હતા. તાજેતરના વર્ષોમાં, P19 કોષોનો ઉપયોગ કાર્ડિયાક ભિન્નતા અને માયોજેનેસિસની પદ્ધતિનો અભ્યાસ કરવા માટે પણ કરવામાં આવ્યો હતો. મુખ્ય અસરગ્રસ્ત સંકેત માર્ગ, અસ્થિ મોર્ફોજેનેટિક પ્રોટીન (BMPs) માર્ગ એ P19 કોષોમાં સૌથી વધુ ભારપૂર્વક અભ્યાસ કરાયેલ સંકેત છે. પી19સીએલ6નોગિન કોષ રેખા ઉત્પન્ન કરીને, જે બીએમપી વિરોધી નોગિનને વધુ પડતી અભિવ્યક્ત કરે છે, તેમને જાણવા મળ્યું કે જ્યારે 1 ટકા ડીએમએસઓ સાથે સારવાર કરવામાં આવે ત્યારે મ્યુટન્ટ કોષો કાર્ડિયોમાયોસાઇટ્સમાં અલગ પડતા નથી, જે સૂચવે છે કે આ પ્રણાલીમાં કાર્ડિયોમાયોસાઇટ તફાવત માટે બીએમપી અનિવાર્ય છે. તેમણે એ દર્શાવતા પુરાવા પણ પૂરા પાડ્યા કે કાર્ડિયોજેનિક બીએમપી સિગ્નલિંગ પાથવેમાં ટીએકે1, Nkx-2.5 અને જીએટીએ-4 મહત્વપૂર્ણ છે. ભવિષ્યની દિશાઓમાં P19 કોષો ન્યુરોનલ કોષો અને સ્નાયુ કોષો બંનેની મૂલ્યવાન રચના પ્રદાન કરે છે. અન્ય ગર્ભ સ્ટેમ કોશિકાઓની સરખામણીમાં P19 કોષો જાળવવા અને સંવર્ધન કરવા માટે સરળ હોવાથી, તેઓ ઈન વિટ્રોમાં વિકાસલક્ષી અભ્યાસ કરવા માટે એક અનુકૂળ મોડેલ છે. ચોક્કસ જનીનોને વ્યક્ત કરવા અથવા બહાર કાઢવા માટે આ કોષ રેખાને હેરફેર કરવાની તકનીકો સંકેત માર્ગો, કાર્યાત્મક પાસાઓ અને માયોજેનેસિસ અને ન્યુરોજેનેસિસના પ્રોટીન અભિવ્યક્તિનું નિયમન કરવાની વિગતવાર તપાસ માટે પરવાનગી આપે છે. વિસ્તૃત સંશોધન હૃદય અથવા મગજના વિકાસ અને પરિપક્વતાના પછીના તબક્કાઓને પણ સ્પષ્ટ કરી શકે છે. સંદર્ભો બાહ્ય કડીઓ P19 ઉંદર કોષ રેખાઓ માટે સેલોસૌરસની એન્ટ્રી