Αr14 RNA
αr14 એ α-પ્રોટીઓબેક્ટેરિયાના વ્યાપક જૂથમાં પ્રતિનિધિઓ સાથે બેક્ટેરિયાના નાના બિન-કોડિંગ આર. એન. એ. નું કુટુંબ છે. આ પરિવારનો પ્રથમ સભ્ય (એસ. એમ. આર. 14સી2) રંગસૂત્ર (સી) માં સ્થિત સિનોરિઝોબિયમ મેલિલોટી 1021 લોકસમાં જોવા મળ્યો હતો. પાછળથી તેનું નામ બદલીને એન. એફ. ઇ. આર. 1 (નોડ્યુલ ફોર્મેશન એફિશિયન્સી આર. એન. એ.) કરવામાં આવ્યું હતું અને તે મીઠાના તાણમાં અને કઠોળના મૂળ પર સહજીવી ક્રિયાપ્રતિક્રિયા દરમિયાન ખૂબ જ વ્યક્ત થાય છે. વધુ સમરૂપતા અને માળખા સંરક્ષણ વિશ્લેષણમાં 2 અન્ય રંગસૂત્ર નકલો અને 3 પ્લાઝમિડિક નકલો ઓળખી કાઢવામાં આવી હતી. વધુમાં, કેટલાક નાઇટ્રોજન-ફિક્સિંગ સિમ્બાયોટિક રાઇઝોબિયા (એટલે કે સંપૂર્ણ લંબાઈના એસ. એમ. આર. 14સી હોમોલોગ્સ) માં ઓળખવામાં આવ્યા છે. આર. લેગુમિનોસેરમ bv.viciae, આર. લેગુમિનોસેરમ બીવી. ટ્રાઇફોલી, આર. એટલી અને કેટલીક મેસોર્હિઝોબિયમ પ્રજાતિઓ), એગ્રોબેક્ટેરિયમ પ્રજાતિઓ (એટલે કે એગ્રોબેક્ટેરિયમ પ્રજાતિઓ) સાથે જોડાયેલા છોડના પેથોજેન્સમાં. એ. ટ્યુમફેસિઅન્સ, એ. વિટિસ, એ. રેડિયોબેક્ટર, અને એગ્રોબેક્ટેરિયમ એચ13) તેમજ બ્રુસેલાની પ્રજાતિઓ (બી. ઓવિસ, બી. કેનિસ, બી. એબોર્ટસ અને બી. માઇક્રોટિસ, અને બી. મેલિટેંસિસના કેટલાક બાયોવર્સ) ના વ્યાપક વર્ણપટમાં. αr14C RNA પ્રજાતિઓ 115-125 nt લાંબી છે (કોષ્ટક 1) અને સારી રીતે વ્યાખ્યાયિત સામાન્ય ગૌણ માળખું ધરાવે છે (આકૃતિ 1). મોટાભાગના αr14 લખાણોને α-પ્રોટિઓબેક્ટેરિયલ જીનોમ (આકૃતિ 5) ના ઇન્ટરજેનિક પ્રદેશો (આઇજીઆર) ની અંદર સ્વતંત્ર ટ્રાન્સક્રિપ્શન એકમોના સારી રીતે વ્યાખ્યાયિત પ્રમોટર પ્રદેશોમાંથી વ્યક્ત કરાયેલ ટ્રાન્સ-એક્ટિંગ એસઆરએનએ તરીકે સૂચિબદ્ધ કરી શકાય છે. શોધ અને માળખું એસ. એમ. આર. 14. સી. 2 એસ. આર. એન. એ. નું વર્ણન ડેલ વેલ એટ અલ દ્વારા કરવામાં આવ્યું હતું, પૂરક વ્યૂહરચનાઓના એકીકરણમાં સમાવિષ્ટ કોમ્પ્યુટેશનલ તુલનાત્મક જીનોમિક અભિગમના પરિણામે, સંદર્ભ એસ. મેલિલોટી 1021 તાણ (<આઇ. ડી. 1>) ના ઇન્ટરજેનિક પ્રદેશો (આઇ. જી. આર.) માં નવીન એસ. આર. એન. એ.-એન્કોડિંગ જનીનો શોધવા માટે રચાયેલ છે. ઉત્તરીય સંકરણ પ્રયોગોએ પુષ્ટિ કરી હતી કે અનુમાનિત એસ. એમ. આર. 14સી2 લોકસ અપેક્ષિત કદની એક જ નકલને વ્યક્ત કરે છે, જે મુક્ત-જીવંત અને એન્ડોસિમ્બાયોટિક બેક્ટેરિયામાં અલગ રીતે સંચિત થાય છે. ટી. એ. પી. આધારિત 5 '-આર. એ. સી. ઈ. પ્રયોગોએ સંપૂર્ણ લંબાઈના એસ. એમ. આર. 14સી ટ્રાન્સક્રિપ્ટની ટ્રાન્સક્રિપ્શન સ્ટાર્ટ સાઇટ (ટી. એસ. એસ.) ને એસ. મેલિલોટી 1021 જીનોમ (<આઇ. ડી. 1>) માં <આઇ. ડી. 2> એન. ટી. સ્થિતિ પર મેપ કરી હતી, જ્યારે 3'-અંત એ <આઇ. ડી. 3> એન. ટી. સ્થિતિ પર સ્થિત હોવાનું માનવામાં આવતું હતું, જે એક પ્રામાણિક રો-સ્વતંત્ર ટર્મિનેટર (આકૃતિ 5) ના યુ. એસ. ના સતત પટ્ટાના છેલ્લા અવશેષ સાથે મેળ ખાય છે. સમાંતર અને પછીના અભ્યાસોમાં જેમાં એસ. એમ. આર. 14. સી. 2 ટ્રાન્સક્રિપ્ટને એસ. આર. એ. 38 અથવા એસ. એમ. 7 'તરીકે ઓળખવામાં આવે છે, તેણે સ્વતંત્ર રીતે એસ. મેલિલોટી અને તેની નજીકથી સંબંધિત તાણ 2011 માં આ એસ. આર. એન. એ. ની અભિવ્યક્તિની પુષ્ટિ કરી હતી. એસ. મેલિલોટી 2011ના નાના આરએનએ અપૂર્ણાંક (50-350 nt) ના તાજેતરના ઊંડા અનુક્રમ-આધારિત લાક્ષણિકતાઓએ એસ. એમ. આર. 14સી2 (અહીં સ્મેલસી397 તરીકે ઓળખવામાં આવે છે) ની અભિવ્યક્તિની વધુ પુષ્ટિ કરી, અને એસ. મેલિલોટી 1021 જિનોમમાં સમાન સ્થાને સંપૂર્ણ લંબાઈના લખાણના 5 '-અને 3'-અંતને મેપ કર્યા. એસ. એમ. આર. 14. સી. 2 ના ન્યુક્લિયોટાઇડ ક્રમનો ઉપયોગ શરૂઆતમાં આર. એફ. એ. એમ. ડેટાબેઝ (આવૃત્તિ 10; <આઇ. ડી. 1>) સામે શોધ કરવા માટે ક્વેરી તરીકે કરવામાં આવ્યો હતો. આ સમરૂપતા શોધ આ ડેટાબેઝમાં જાણીતા બેક્ટેરિયલ એસ. આર. એન. એ. સાથે કોઈ મેળ ખાતી નથી. હાલમાં ઉપલબ્ધ તમામ બેક્ટેરિયલ જીનોમ (20 એપ્રિલ 2011ના રોજ 1,615 સિક્વન્સ; https://www.ncbi.nlm.nih.gov;) સામે ડિફોલ્ટ પરિમાણો સાથે આગામી SLR14C2ને બ્લાસ્ટ કરવામાં આવ્યું હતું. ક્વેરી ક્રમ (78-89% સમાનતા) માં નોંધપાત્ર સમરૂપતા દર્શાવતા પ્રદેશોને ઇન્ફર્નલ (version1.0) (આકૃતિ 2) નો ઉપયોગ કરીને બીજ સંરેખણમાંથી કોવેરિયન્સ મોડેલ (CM) બનાવવા માટે કાઢવામાં આવ્યા હતા. આ CM નો ઉપયોગ હાલના બેક્ટેરિયલ જીનોમિક ડેટાબેઝમાં αr9 પરિવારના નવા સભ્યોની વધુ શોધમાં કરવામાં આવ્યો હતો અને નીચેના કોષ્ટક 2 માં ફરી શરૂ કરવામાં આવ્યો હતોઃ પરિવાર માટે સર્વસંમતિ ગૌણ માળખું શોધવા માટે પરિણામોનું જાતે નિરીક્ષણ કરવામાં આવ્યું હતું (આકૃતિ 1 અને આકૃતિ 2). સર્વસંમતિનું માળખું પણ ખૂબ જ સમાન આગાહીઓ સાથે પ્રોગ્રામ લોકર્નેટ સાથે સ્વતંત્ર રીતે આગાહી કરવામાં આવ્યું હતું. ઇન્ફર્નલનો ઉપયોગ કરીને સીએમ સાથે મળેલા સિક્વન્સના જાતે નિરીક્ષણથી 101 હોમોલોગ સિક્વન્સ શોધવાની મંજૂરી મળી. એસ. એમ. આર. 14સી2 સાથે 36 નજીકના સમરૂપતાઓને એન્કોડિંગ કરતી રાઇઝોબિયલ પ્રજાતિઓ હતીઃ એસ. મેડિકે અને એસ. ફ્રેડી, બે આર. લેગુમિનોસેરમ ટ્રાઇફોલી સ્ટ્રેઇન (ડબલ્યુએસએમ2304 અને ડબલ્યુએસએમ1325), બે આર. એટલી સ્ટ્રેઇન સીએફએન 42 અને સીઆઇએટી 652, સંદર્ભ આર. લેગુમિનોસેરમ બીવી. વિસિયા 3841 જાત અને એગ્રોબેક્ટેરિયમ પ્રજાતિ એ. વિટિસ, એ. ટ્યૂમેફેસિયન્સ, એ. રેડિયોબેક્ટર અને એ. એચ. 13. આ તમામ ક્રમમાં નોંધપાત્ર ઇન્ફર્નલ ઇ-મૂલ્યો (5.63E-29-8.16E-18) અને બીટ-સ્કોર્સ દર્શાવવામાં આવ્યા હતા. મોડેલ સાથે મળેલા બાકીના ક્રમમાં (1.33E-17 અને 8.79E-03) વચ્ચે ઉચ્ચ ઇ-મૂલ્યો દર્શાવવામાં આવ્યા હતા પરંતુ ઓછા બીટ-સ્કોર્સ દર્શાવવામાં આવ્યા હતા અને તે બ્રુસેલા પ્રજાતિઓ (બી. ઓવિસ, બી. કેનિસ, બી. એબોર્ટસ, બી. માઇક્રોટિસ અને બી. મેલિટેંસિસના કેટલાક બાયોબાર), બ્રુસેલા એન્થ્રોપી અને મેસોર્હિઝોબમ પ્રજાતિઓ લોટી, એમ. સિસેરી અને એમ. બીએનસી દ્વારા એન્કોડ કરવામાં આવ્યા છે. આ નમૂનાએ એસ. મેલિલોટી જિનોમમાં પાંચ વધારાની નકલો ઓળખી કાઢી હતી, જેમાંથી બેને એક જ આઇજીઆર (એસએમઆર14સી2, એસએમઆર14સી3) માં એકસાથે શોધી કાઢ્યા હતા. એસ. મેડિકે (Smedr14C1, Smedr14C2), એસ. ફ્રેડી (Sfr14C1, Sfr14C2), એમ. લોટી (Mlr14C1, Mlr14C2) અને એમ. સિસેરી (Mr14C1, Mr14C2) માટે સમાન પરિણામો મેળવવામાં આવ્યા હતા. એસ. મેલિલોટી જીનોમમાં મળી આવેલી વધારાની નકલોના સંદર્ભમાં, તાજેતરના અભ્યાસોમાં પાંચમાંથી ચાર નકલોની અભિવ્યક્તિની સ્વતંત્ર રીતે પુષ્ટિ કરવામાં આવી છેઃ એસ. એમ. આર. 14સી3 નો ઉલ્લેખઃ એસ. આર. એ. 38, એસ. એમ. 7 અથવા એસ. એમ. સી. 398 એસ. એમ. આર. 14એ1 નો ઉલ્લેખઃ એસ. એમ. એ. 8 અથવા એસ. એમ. એ. 075 એસ. એમ. આર. 14એ2 નો ઉલ્લેખઃ એસ. એમ. એ. 099 એસ. એમ. આર. 14બી નો ઉલ્લેખઃ એસ. એમ. બી. 161 અનુમાનિત નકલ એસ. એમ. આર. 14સી1 માટે અત્યાર સુધી કોઈ પ્રાયોગિક પુરાવા નથી. અભિવ્યક્તિ માહિતી સમાંતર અભ્યાસોએ વિવિધ જૈવિક પરિસ્થિતિઓ હેઠળ એસ. મેલિલોટી 1021 માં એસ. એમ. આર. 14સી અભિવ્યક્તિનું મૂલ્યાંકન કર્યું; એટલે કે. ટીવાયમાં બેક્ટેરિયાની વૃદ્ધિ, ન્યૂનતમ માધ્યમ (એમએમ) અને લ્યુટોલિન-એમએમ સૂપ અને એન્ડોસિમ્બાયોટિક બેક્ટેરિયા (એટલે કે. પરિપક્વ સહજીવી આલ્ફાલ્ફા નોડ્યુલ્સ) અને મીઠાનું ઊંચું દબાણ, ઓક્સિડેટીવ તણાવ અને ઠંડા અને ગરમ આંચકા તણાવ. મુક્ત-જીવંત બેક્ટેરિયામાં એસ. એમ. આર. 14. સી. 2 ની અભિવ્યક્તિ વૃદ્ધિ-આધારિત હોવાનું જણાયું હતું, જ્યારે બેક્ટેરિયા સ્થિર તબક્કામાં પ્રવેશ્યા ત્યારે જનીન મજબૂત રીતે ડાઉન-રેગ્યુલેટેડ હતું. મુક્ત-જીવંત બેક્ટેરિયા (લોગ તબક્કો ટીવાય અથવા એમએમ કલ્ચર્સ) ની સરખામણીમાં એસએમઆર14સી2ની અભિવ્યક્તિ નોડ્યુલ્સમાં ~ 5 ગણી વધી છે, જે બેક્ટેરિયાના ચેપ અને/અથવા બેક્ટેરોઇડ તફાવત દરમિયાન આ એસઆરએનએનો સમાવેશ સૂચવે છે. તાજેતરના ઊંડા અનુક્રમ ડેટામાં પ્લાઝ્મિક નકલોની વિભેદક અભિવ્યક્તિ મળી આવી છે. એસ. એમ. આર. 14એ1 એ જટિલ માધ્યમમાં ખૂબ જ નીચા અભિવ્યક્તિ સ્તર સાથે અને ઘટતા તાપમાન પર સમાન માધ્યમમાં વિભેદક અભિવ્યક્તિ શરતો દર્શાવી હતી. જો કે, ગરમીના આંચકાના તણાવને કારણે તેનું ખૂબ જ નિયમન કરવામાં આવ્યું હતું. એસ. એમ. આર. 14બીએ સ્થિર તબક્કામાં તેની અભિવ્યક્તિમાં 8 ગણો વધારો દર્શાવ્યો હતો. વધુમાં, એસિડિક, બેઝિક અને ઓક્સિડેટીવ સ્ટ્રેસ પ્રમોટર વિશ્લેષણ પર એક અઠવાડિયાનું નિયમન (<8 ગણો) પણ દર્શાવ્યું હતું. અત્યાર સુધી તપાસવામાં આવેલા αr14 પરિવારના સભ્યોના તમામ પ્રમોટર પ્રદેશો એસ. આર. એન. એ. ના ટ્રાન્સક્રિપ્શન સ્ટાર્ટ સાઇટના અપસ્ટ્રીમમાં 120 બી. પી. સુધી વિસ્તરેલા અનુક્રમમાં ખૂબ જ સંરક્ષિત છે. તમામ નજીકના હોમોલોગ લોકીમાં ઓળખી શકાય તેવા σ70-આધારિત પ્રવર્તકો હોય છે જે-35/- 10 સર્વસંમતિની રચના સીટીટીએજીએસી-એન17-સીટીએટીએટી દર્શાવે છે, જે અગાઉ પ્રોટીઓબેક્ટેરિયાના α-પેટાજૂથમાં અન્ય ઘણી જાતિઓમાં વ્યાપકપણે સંરક્ષિત હોવાનું દર્શાવવામાં આવ્યું છે. અન્ય જાણીતા અનુલેખન પરિબળો માટે બંધનકર્તા સાઇટ્સને ઓળખવા માટે અમે રેગપ્રેડિક્શન (http://regpredict.lbl.gov/regpredict/help.html) દ્વારા પૂરા પાડવામાં આવેલ ફાસ્ટા ક્રમનો ઉપયોગ કર્યો અને રેગ્યુલોનડીબી (http://regulondb.ccg.unam.mx) દ્વારા પૂરા પાડવામાં આવેલ તે સ્થિતિ વજન મેટ્રિક્સ (પીએસડબલ્યુએમ) નો ઉપયોગ કર્યો. અમે સર્વસંમતિ/પેટર પ્રોગ્રામનો ઉપયોગ કરીને રેગપ્રેડિક્શન સિક્વન્સમાંથી દરેક ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળ માટે પીએસડબલ્યુએમ બનાવ્યું, દરેક મેટ્રિક્સ માટે 14 અને 30 ની વચ્ચેની મુખ્ય લંબાઈ માટે શ્રેષ્ઠ અંતિમ મેટ્રિક્સ પસંદ કરીને થ્રેશોલ્ડ સરેરાશ ઇ-મૂલ્ય <10ઇ-10 સ્થાપિત કરવામાં આવ્યું હતું, (જુઓ http://gps-tools2.its.yale.edu માં "થ્રેશોલ્ડ સર્વસંમતિ"). વધુમાં, અમે એમ. ઇ. એમ. ઇ. (<આઇ. ડી. 1>) નો ઉપયોગ કરીને સંરક્ષિત અજ્ઞાત રૂપાંકનો માટે શોધ કરી અને હળવા નિયમિત અભિવ્યક્તિઓનો ઉપયોગ કર્યો (એટલે કે. તમામ એસ. એમ. આર. 14સી2 હોમોલોગ્સ પ્રમોટર્સ પર પેટર્ન મેચિંગ). આ અભ્યાસોએ લોકીના બે સારી રીતે વ્યાખ્યાયિત જૂથો જાહેર કર્યા, પ્રથમ એક સૌથી નજીકના હોમોલોગ્સ (આકૃતિ 5) દ્વારા રજૂ કરવામાં આવ્યું હતું, જેણે 26 બી. પી. લાંબો પ્રદેશ રજૂ કર્યો હતો, જે સ્થિતિ-40 અને-75 વચ્ચે ખૂબ જ સંરક્ષિત હતો, જેને (આકૃતિ 5) માં સંરક્ષિત એમ. ઇ. એમ. ઇ. મોટિફ તરીકે ચિહ્નિત કરવામાં આવ્યો હતો, પરંતુ જાણીતા ટ્રાન્સક્રિપ્શન પરિબળ બંધનકર્તા સાઇટ્સ મેટ્રિક્સ સાથે કોઈ નોંધપાત્ર સમાનતા સ્થાપિત કરી શકાઇ ન હતી. αr14 પરિવારના નજીકના સંબંધી ન હોય તેવા સભ્યોના જૂથે સંરક્ષિત પ્રમોટર્સનું બીજું જૂથ બનાવ્યું હતું (આકૃતિ 6). તેઓએ એક અલગ પ્રમોટર ક્ષેત્ર રજૂ કર્યું, જે તમામ સભ્યોમાં ખૂબ જ સારી રીતે સંરક્ષિત હતું અને વધારાના અજ્ઞાત 20 બી. પી. મોટિફ. જીનોમિક સંદર્ભ αr14 પરિવારના મોટાભાગના સભ્યો ટ્રાન્સ-એન્કોડેડ એસ. આર. એન. એ. છે જે ક્રોમોસોમલ આઇ. જી. આર. માં સ્વતંત્ર પ્રમોટરોમાંથી લખાયેલા છે. બીજ સંરેખણના સભ્યોના ઘણા પડોશી જનીનોની ટિપ્પણી કરવામાં આવી ન હતી અને તેથી વધુ જાતે ક્યુરેટ કરવામાં આવ્યા હતા. સિનોર્હિઝોબિયમ જૂથના જીનોમ (એસ. એમ. આર. 14સી2, એસ. એમ. આર. 14સી3, એસ. એમ. ડી. આર. 14સી1, એસ. એમ. ડી. આર. 14સી2, એસ. એફ. આર. 14સી1, એસ. એફ. આર. 14સી2) માં ટેન્ડમ નકલોએ સંરક્ષિત જીનોમિક સંદર્ભ રજૂ કર્યો હતો. જનીન અપસ્ટ્રીમ DUF1127 ડોમેન ધરાવતા અજ્ઞાત પ્રોટીન માટે કોડેડ છે અને જનીન ડાઉનસ્ટ્રીમ ટ્રિગર પરિબળ માટે કોડેડ છે. આંશિક રીતે સંરક્ષિત જીનોમિક સંદર્ભ, DUF1127 પ્રોટીન અપસ્ટ્રીમ અને 5-કેટો-4-ડિઓક્સીયુરોનેટ આઇસોમેરેઝ ડાઉનસ્ટ્રીમ, રાઇઝોબિયમ જૂથ Rlt1325r14p02, Rlvr14p11, Rlt2304r14p02, અને ReCIATr14A ની પ્લાઝમિડિક નકલો માટે મળી આવ્યા હતા. આંશિક જીનોમિક સંરક્ષણનો એક સમાન કિસ્સો, DUF1127 પ્રોટીન અપસ્ટ્રીમ અને tRNA (યુરેસિલ-5-)-મિથાઈલટ્રાન્સફેરેઝ ડાઉનસ્ટ્રીમ, મેસોર્હિઝોબિયમ પ્રજાતિઓના કિસ્સામાં જોવા મળ્યો હતો, જેણે એમ. લોટી (Mlr14C1, Mlr14C2) અને એમ. સિસેરી (Mcr14C1, Mcr14C2) ની ટેન્ડમ નકલો પણ રજૂ કરી હતી. એ જ સંદર્ભ બ્રુસેલા એન્થ્રોપી (Oar14CII2) ના રંગસૂત્ર II માં બીજી નકલ અને બ્રુસેલા જૂથમાં રંગસૂત્ર I માં બીજી નકલ (Bor14CI2, Bcr14CI2, Bmir14CI2, Bs1330r14CI2, Bm16Mr14CI1, BAS19r14CI2, Bm23457r14CI1, BMEA _ A0934, BruAb1 _ 0906, BA19941r14CI2) માટે જોવા મળ્યો હતો. આ તમામ કિસ્સાઓમાં એસ. આર. એન. એ. તેમના આઇ. જી. આર. માં એક નકલ તરીકે દેખાયા હતા. Bs23445r14CI2, Bمار14CI2, અને Rlvr14C2 એ ડાઉનસ્ટ્રીમમાં tRNA (યુરેસિલ-5-)-મિથાઈલટ્રાન્સફેરેઝ માટે જનીન કોડિંગ શેર કર્યું હતું, પરંતુ અપસ્ટ્રીમમાં જનીન કોડિંગ શેર કર્યું ન હતું. પરિણામો બે અન્ય સારી રીતે સંરક્ષિત જીનોમિક સંદર્ભો દર્શાવે છે. નિકોટિનિક એસિડ મોનોન્યુક્લિયોટાઇડ એડેનિલિલટ્રાન્સફેરેઝ અપસ્ટ્રીમ માટે જનીન કોડિંગ અને મોલિબ્ડેનમ એબીસી ટ્રાન્સપોર્ટર ડાઉનસ્ટ્રીમ માટે જનીન કોડિંગ સાથે એક, જે એ. રેડિયોબેક્ટર જીનોમ (એઆરઆર 14સીઆઈ 3) અને રાઇઝોબિયમ જૂથ જીનોમ (આરઈસીએફએનઆર 14સી 3, આરએલટી 1325આર 14સી 3, આરએલવીઆર 14સી 3, આરએલટી 2304આર 14સી 3) માં એઆર 14 પરિવારની ત્રીજી નકલ દ્વારા વહેંચાયેલ છે. બીજું જૂથ બ્રુસેલાસ જીનોમમાં રંગસૂત્ર I માં પ્રથમ નકલ દ્વારા રચાય છે જે LrgB પટલ પ્રોટીન માટે જનીન અપસ્ટ્રીમ કોડિંગને શેર કરે છે અને જનીન ડાઉનસ્ટ્રીમ આલ્ફા/બીટા હાઇડ્રોલેઝ માટે કોડિંગ કરે છે. વધારાની ફાઇલોઃ વધારાની ફાઇલ 1 વધારાની ફાઇલ 2 વધારાની ફાઇલ 3 વધારાની ફાઇલ 4 વધારાની ફાઇલ 5 વધારાની ફાઇલ 6 વધારાની ફાઇલ 7 વધારાની ફાઇલ 8 વધારાની ફાઇલ 9 વધારાની ફાઇલ 10 વધારાની ફાઇલ 11 સંદર્ભો આરએનએ