Glucose phosphate broth
ગ્લુકોઝ ફોસ્ફેટ સૂપનો ઉપયોગ મિથાઈલ રેડ (એમ. આર.) પરીક્ષણ અને વોગ્સ-પ્રોસ્કૌર પરીક્ષણ (વી. પી.) કરવા માટે થાય છે. ગ્લુકોઝ-5 ગ્રામ/એલ ડાયપોટાશિયમ ફોસ્ફેટ-5 ગ્રામ/એલ પ્રોટીઝ પેપ્ટોન-5 ગ્રામ/એલ નિસ્યંદિત પાણી-1000 એમએલ પીએચ-6.9 મિથાઈલ લાલ પરીક્ષણ સિદ્ધાંત તેનો ઉપયોગ ગ્લુકોઝના આથો દ્વારા મિશ્ર એસિડ ઉત્પન્ન કરવાની જીવતંત્રની ક્ષમતા નક્કી કરવા અને માધ્યમની બફરિંગ ક્ષમતાને દૂર કરવા માટે થાય છે. પ્રક્રિયા પરીક્ષણ જીવતંત્રના શુદ્ધ સંવર્ધન સાથે મેકકોન્કી (ગ્લુકોઝ ફોસ્ફેટ સૂપ) નું ઇનોક્યુલેટ કરો. 48-72 કલાકો માટે 35 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર સૂપને ઉકાળવું. સેવન પછી ટ્યુબની બાજુઓમાંથી સીધા જ સૂપમાં મિથાઈલ લાલના 5 ટીપાં ઉમેરો. અર્થઘટન માધ્યમની સપાટીમાં સ્થિર લાલ રંગનો વિકાસ એ સૂચવે છે કે પીએચને 4.4 સુધી ઘટાડવા માટે પૂરતા પ્રમાણમાં એસિડનું ઉત્પાદન થાય છે અને સકારાત્મક પરીક્ષણની રચના કરે છે. અન્ય સજીવો પરીક્ષણ સબસ્ટ્રેટમાંથી ઓછી માત્રામાં એસિડ ઉત્પન્ન કરી શકે છે, તેથી પીળો અને લાલ વચ્ચે મધ્યવર્તી નારંગી રંગ વિકસી શકે છે. આ સકારાત્મક પરીક્ષણ સૂચવતું નથી. નિયંત્રણ હકારાત્મક અને નકારાત્મક નિયંત્રણો માધ્યમના દરેક લોટની તૈયારી પછી ચલાવવા જોઈએ. સકારાત્મક નિયંત્રણઃ એસ્ચેરીચીયા કોલી નકારાત્મક નિયંત્રણઃ ક્લેબસિએલા વોગ્સ પ્રોસ્કૌર પરીક્ષણ સિદ્ધાંત તેનો ઉપયોગ કેટલાક સજીવોની ગ્લુકોઝ આથોમાંથી તટસ્થ અંતિમ ઉત્પાદન, એસિટિલ મિથાઈલ કાર્બિનોલ (એસિટોઇન) ઉત્પન્ન કરવાની ક્ષમતા નક્કી કરવા માટે થાય છે. ક્લેબસિએલા, એન્ટરોબેક્ટર વગેરે જેવા સભ્યો દ્વારા ઉત્પાદિત તટસ્થ પ્રતિક્રિયાશીલ અંતિમ ઉત્પાદન એસિટોઇનનું ઉત્પાદન ગ્લુકોઝ ચયાપચયનું મુખ્ય અંતિમ ઉત્પાદન છે અને મિશ્ર એસિડની ઓછી માત્રા બનાવે છે. વાતાવરણીય ઓક્સિજન અને 40 ટકા KOH ની હાજરીમાં, એસિટોઇનને ડાયએસિટિલમાં રૂપાંતરિત કરવામાં આવે છે અને α-નેપ્થોલ લાલ રંગના સંકુલને બહાર લાવવા માટે ઉત્પ્રેરક તરીકે કામ કરે છે. મીડિયા ગ્લુકોઝ ફોસ્ફેટ બ્રોથ રીએજન્ટ્સ A: α-નેપ્થોલ-5 ગ્રામ સંપૂર્ણ ઇથાઇલ આલ્કોહોલ-100 મિલી-0.6 મિલી-3 ભાગો B: KOH-40 ગ્રામ નિસ્યંદિત પાણી-100 મિલી-0.2 મિલી-1 ભાગ પ્રક્રિયા પરીક્ષણ જીવતંત્રના શુદ્ધ ઇનોક્યુલમ સાથે ગ્લુકોઝ ફોસ્ફેટ બ્રોથની ટ્યુબને ઇનોક્યુલેટ કરો અને 24 કલાક માટે 35 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર સેવન કરો. આ સૂપના 1 મિલીમાં 5 ટકા α-નેફથોલનું 0.6 મિલી અને ત્યારબાદ 40 ટકા KOHનું 0.2 મિલી ઉમેરો. ટ્યુબને ધીમેથી હલાવો જેથી મધ્યમથી વાતાવરણીય ઓક્સિજનને ખુલ્લી પાડી શકાય અને ટ્યુબને 10-15 મિનિટ સુધી અવ્યવસ્થિત રહેવા દો. અર્થઘટન હકારાત્મક પરીક્ષણને રીએજન્ટ્સના ઉમેરા પછી 15 મિનિટ કે તેથી વધુ સમયમાં લાલ રંગના વિકાસ દ્વારા રજૂ કરવામાં આવે છે, જે એસિટોઇનના ઓક્સિડેશન પ્રોડક્ટ ડાયએસિટિલની હાજરી સૂચવે છે. 1 કલાક ઊભા રહ્યા પછી પરીક્ષણ લાલ હોવું જોઈએ કારણ કે નકારાત્મક વી. પી. સંસ્કૃતિઓ તાંબા જેવા રંગનું ઉત્પાદન કરી શકે છે જે સંભવિત રીતે ખોટા હકારાત્મક અર્થઘટનમાં પરિણમી શકે છે, કારણ કે જ્યારે મિશ્ર કરવામાં આવે ત્યારે રીએજન્ટ્સની ક્રિયાને કારણે પણ. નિયંત્રણ હકારાત્મક અને નકારાત્મક નિયંત્રણો માધ્યમના દરેક લોટની તૈયારી પછી ચલાવવા જોઈએ. સકારાત્મક નિયંત્રણઃ ક્લેબસિએલા નકારાત્મક નિયંત્રણઃ એસ્ચેરીચીયા કોલી સંદર્ભો પીએચ સૂચકાંકો માઇક્રોબાયોલોજી તકનીકો