Q-FISH
ક્વોન્ટિટેટિવ ફ્લોરોસન્ટ ઇન સિટુ હાઇબ્રિડાઇઝેશન (ક્યૂ-ફિશ) એ પરંપરાગત ફિશ પદ્ધતિ પર આધારિત સાયટોજેનેટિક તકનીક છે. ક્યૂ-ફિશમાં, ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપી અને વિશ્લેષણ સોફ્ટવેરનો ઉપયોગ કરીને રંગસૂત્રોના ડીએનએમાં લક્ષ્ય ક્રમને માપવા માટે પેપ્ટાઇડ ન્યુક્લિક એસિડ (પીએનએ) ઓલિગોન્યુક્લિયોટાઇડ્સ તરીકે ઓળખાતા લેબલ (સાય 3 અથવા એફઆઇટીસી) કૃત્રિમ ડીએનએ નકલનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. ક્યૂ-ફિશનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે ટેલોમેરની લંબાઈનો અભ્યાસ કરવા માટે થાય છે, જે કરોડઅસ્થિધારી પ્રાણીઓમાં રંગસૂત્રોના દૂરના છેડે સ્થિત પુનરાવર્તિત હેક્સામેરિક સિક્વન્સ (TTAGGG) છે. ડીએનએ-નુકસાનની પ્રતિક્રિયાઓ તેમજ જીનોમ અસ્થિરતાને રોકવા માટે રંગસૂત્રના છેડા પર ટેલોમર્સ જરૂરી છે. આજે પણ ટેલોમેર સંશોધનના ક્ષેત્રમાં ક્યૂ-ફિશ પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. પી. એન. એ. અને માછલી એ હકીકતને કારણે કે પી. એન. એ. બેકબોન્સમાં કોઈ ચાર્જ ફોસ્ફેટ જૂથો નથી, પી. એન. એ. અને ડી. એન. એ. વચ્ચેનું બંધન ડી. એન. એ./ડી. એન. એ. અથવા ડી. એન. એ./આર. એન. એ. ડુપ્લેક્સ કરતાં વધુ મજબૂત છે. ક્યૂ-ફિશ પી. એન. એ. ની આ અનન્ય લાક્ષણિકતાનો ઉપયોગ કરે છે જ્યાં ઓછી આયનીય શક્તિ પર, પી. એન. એ. પૂરક સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ સિક્વન્સમાં પરિણમી શકે છે જ્યારે સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ કરી શકતું નથી. એવી પરિસ્થિતિઓનો ઉપયોગ કરીને કે જે ફક્ત લેબલ થયેલ (સીસીસીટીએએ) 3 પીએનએને (ટીટીએજીજી) એન લક્ષ્ય ક્રમમાં સંકરણ કરવાની મંજૂરી આપે છે, ક્યૂ-ફિશ પીએનએના સંકરણને ટેલોમેરિક ક્રમમાં પ્રમાણિત કરવામાં સક્ષમ છે. સંવર્ધિત કોષો માટે સામાન્ય પદ્ધતિ/પ્રોટોકોલ મેટાફેઝ-ધરપકડ કરાયેલા કોષો તૈયાર કરો સંવર્ધિત કોષોની લણણીના કેટલાક કલાકો પહેલા, કોલસેમિડ સંવર્ધન માધ્યમમાં ઉમેરવામાં આવે છે. કોલસેમિડ માઇટોટિક કોષોમાં માઇક્રોટ્યુબ્યુલ્સને વિક્ષેપિત કરીને મેટાફેઝ સ્થિતિમાં કોષોને અટકાવવાનું કાર્ય કરે છે. કોષોને પછી ત્રિપ્સિનીકૃત કરવામાં આવે છે અને હાયપોટોનિક બફરમાં ફરીથી સ્થગિત કરવામાં આવે છે. આ એકત્રિત કોષોને ફૂલી જશે અને રંગસૂત્રો ફેલાવશે. કોષોને સ્થિર કરો હાયપોટોનિક દ્રાવણને પછી સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા દૂર કરવામાં આવે છે અને મિથેનોલ/ગ્લેશિયલ એસિટિક એસિડ ફિક્સેટિવમાં ફરીથી સ્થગિત કરવામાં આવે છે. સ્લાઇડ્સ તૈયાર કરો માઇક્રોસ્કોપ સ્લાઇડ પર સેલ સસ્પેન્શનના થોડા ટીપાં મૂકો અને આખી રાત હવાને સૂકવવા દો. બીજા દિવસે, થોડી મિનિટો માટે સ્લાઇડને ફોસ્ફેટ બફર ખારા (પીબીએસ) માં ડૂબાડો. સ્લાઇડ્સને ફોર્મેલ્ડિહાઇડમાં ઠીક કરો સ્લાઇડ્સને 4 ટકા ફોર્મેલ્ડિહાઇડ દ્રાવણમાં સ્થાનાંતરિત કરો અને થોડી મિનિટો માટે ઠીક કરો. પી. બી. એસ. વડે સ્લાઈડોને ઘણી વખત ધોઈ લો. પેપ્સિન સ્લાઇડ્સ સાથેની ટ્રીટ સ્લાઇડ્સ પછી પેપ્સિન દ્રાવણમાં સ્થાનાંતરિત થાય છે. પેપ્સિન એક પ્રોટીઝ છે અને પ્રોટીનને પેપ્ટાઇડ્સમાં પચાવવાનું કામ કરે છે. હાઇબ્રિડાઇઝ પી. એન. એ. પ્રોબ (સાય 3 અથવા એફ. આઈ. ટી. સી. લેબલવાળા પી. એન. એ.) હાઇબ્રિડાઇઝેશન મિશ્રણનો એક નાનો જથ્થો કવરસ્લિપ પર મૂકવામાં આવે છે અને પછી માઇક્રોસ્કોપ સ્લાઇડ પર નરમાશથી મૂકવામાં આવે છે જેમાં નિશ્ચિત કોષો હોય છે. હીટ ડિનેચર ડીએનએ પછી સ્લાઇડને પહેલાથી ગરમ કરેલા પકાવવાની નાની ભઠ્ઠીમાં મૂકવામાં આવે છે જ્યાં કોષમાં રંગસૂત્રોના ડીએનએને 80 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર થોડી મિનિટો માટે વિકૃત કરવામાં આવે છે. પછી સ્લાઇડને ઓરડાના તાપમાને કેટલાંક કલાકો સુધી છોડી દેવામાં આવે છે જેથી પી. એન. એ. ને પૂરક ડીએનએમાં સંકરણ કરવાની મંજૂરી મળે. અનબાઉન્ડ પી. એન. એ. ને દૂર કરવા માટે વોશ સ્લાઇડ્સ અને કાઉન્ટરસ્ટેઇન ડી. એન. એ. (ડી. એ. પી. આઈ. અથવા પી. આઈ.) સ્લાઇડ્સ પછી અનબાઉન્ડ પી. એન. એ. ને દૂર કરવા માટે વિવિધ વોશ સોલ્યુશન્સમાં કાળજીપૂર્વક ધોવામાં આવે છે. માઇક્રોસ્કોપ માઉન્ટિંગ માધ્યમ પછી કોષો પર મૂકવામાં આવે છે. આ માધ્યમમાં સામાન્ય રીતે ડી. એ. પી. આઈ. (એક ડી. એન. એ. કાઉન્ટરસ્ટેઇન) અને પી. એન. એ. ફ્લોરોસન્સ જાળવવા અને ફોટોબ્લીચિંગ ઘટાડવા માટે એન્ટીફેડ સોલ્યુશન હોય છે. છબી કેપ્ચર અને વિશ્લેષણ પ્રાયોગિક નમૂનાઓની છબી લેવામાં આવે તે પહેલાં, કૅમેરા અને ફ્લોરોસન્ટ માઇક્રોસ્કોપની યોગ્ય ગોઠવણીની ખાતરી કરવા માટે ફ્લોરોસન્ટ સંદર્ભ મણકાની છબી બનાવવામાં આવે છે. વધુમાં, દરેક સંપાદન સત્ર પહેલાં આ સંદર્ભ મણકાની છબી લેવામાં આવશે. આ સુનિશ્ચિત કરશે કે નમૂનાઓ વચ્ચેનો તફાવત દીવો અથવા કેમેરામાં ભૂલોને કારણે નથી. મેટાફેઝ સેલ પછી જાતે પસંદ કરવામાં આવે છે અને કેમેરા માટે કેન્દ્રિત થાય છે. બે પ્રકારની છબીઓ લેવામાં આવે છેઃ રંગીન રંગસૂત્રોના ચિત્રો તેમની મેટાફેઝ સ્થિતિમાં અને ટેલોમર્સની ફ્લોરોસન્ટ છબીઓ. પછી બંને છબીઓને સંયુક્ત છબી બનાવવા માટે સુપરઇમ્પોઝ કરી શકાય છે. આ છબીને પછી કાર્યોટાઇપ અથવા નિયુક્ત નામકરણ કરી શકાય છે. વધુમાં, પી-આર્મ્સ વિરુદ્ધ ક્યૂ-આર્મ્સમાં ટેલોમેર લંબાઈનું આંતર-રંગસૂત્ર વિતરણ માપી શકાય છે. વિવિધ પ્રયોગોના ડેટાનો ઉપયોગ ફ્લોરોસન્સની તીવ્રતાને સામાન્ય બનાવવા માટે થઈ શકે છે જ્યારે ટેલોમેરિક પુનરાવર્તનોની જાણીતી સંખ્યા ધરાવતા પ્લાઝમિડનો ઉપયોગ ટેલોમેર ફ્લોરોસન્સ અને ટેલોમેરની લંબાઈને સંબંધિત કરવામાં મદદ કરવા માટે ધોરણો તરીકે થઈ શકે છે. ફ્લોરોસન્ટ સંદર્ભ મણકા ઉપરાંત, બહેન ક્રોમેટિડ્સમાંથી સિગ્નલની શક્તિ સમાન હોવી જોઈએ અને તેથી ડેટાની ચોકસાઈને માપવા માટે અન્ય નિયંત્રણ તરીકે ઉપયોગ કરી શકાય છે. છેવટે, એ મહત્વનું છે કે છબીઓ સંતૃપ્ત ન હોય. જો ફ્લોરોસન્સની તીવ્રતા સંતૃપ્તિ સુધી પહોંચે છે, તો ટેલોમેરની લંબાઈ ઓછો અંદાજિત થઈ જાય છે. ક્યૂ-ફિશ છબી વિશ્લેષણ સોફ્ટવેર ફ્લિન્ટબોક્સ નેટવર્ક પર મફતમાં ઉપલબ્ધ છે. ટેલોમેર લંબાઈના વિતરણ અને તેને વિવિધ બીમારીઓ સાથે સાંકળવા સંબંધિત માહિતીને માપવા માટે એપ્લિકેશન્સ અને મહત્વ ક્યુ-ફિશનો વ્યાપક ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો છે. આ સંદર્ભમાં, ક્યૂ-ફિશ ખાસ કરીને સુસંગત છે કારણ કે તે વિવેચનાત્મક રીતે ટૂંકા ટેલોમિયર્સને શોધવા અને તેનું પ્રમાણ નક્કી કરવામાં સક્ષમ છે. એવું દર્શાવવામાં આવ્યું છે કે તે સરેરાશ ટેલોમેર લંબાઈને બદલે આ વિવેચનાત્મક રીતે ટૂંકા ટેલોમેરની આવર્તન છે, જે ટેલોમેર ડિસફંક્શનમાં મહત્વપૂર્ણ છે. જ્યારે ક્યુ-ફિશ ટેલોમેરની લંબાઈ વિશે સચોટ માહિતી પૂરી પાડે છે, ત્યારે તેની સુસંગતતા ક્યુ-ફિશને અન્ય ફિશ સંબંધિત તકનીકો સાથે જોડીને વિસ્તૃત કરી શકાય છે, જેમ કે ફ્લો-ફિશ. ફ્લો-ફિશમાં, ફ્લો સાયટોમેટ્રીનો ઉપયોગ ક્યૂ-ફિશમાં માત્ર મુઠ્ઠીભર કોષોને બદલે કોષોની મોટી વસ્તીમાં ફ્લોરોસન્સની તીવ્રતા (અને આમ ટેલોમેર લંબાઈ) માપવા માટે થાય છે. તેનાથી વિપરીત, ક્યૂ-ફિશથી વિપરીત, ફ્લો-ફિશ વ્યક્તિગત કોષની અંદર ચોક્કસ રંગસૂત્રમાં ટેલોમેરની લંબાઈ નક્કી કરવામાં અસમર્થ છે. જો કે, ક્યુ-ફિશને સામાન્ય રીતે લો-થ્રુપુટ માનવામાં આવે છે અને વસ્તીના અભ્યાસ માટે યોગ્ય નથી, તેમ છતાં જૂથોએ હાઇ-થ્રુપુટ (એચટી) ક્યુ-ફિશ પ્રોટોકોલ વિકસાવ્યા છે જે 96 વેલ પ્લેટ્સમાં ઇન્ટરફેઝ ન્યુક્લિયસ પર ક્યુ-ફિશ કરવા માટે સ્વચાલિત મશીનરીનો ઉપયોગ કરે છે. એ જ રીતે, મલ્ટિપ્લેક્સ-ફિશ અને સેનએમ-ફિશ જેવી અન્ય પદ્ધતિઓ વિકસાવવામાં આવી છે જેનો ઉપયોગ ક્યૂ-ફિશ સાથે પણ થઈ શકે છે. મલ્ટિપ્લેક્સ-ફિશ વિવિધ રંગોમાં 24 રંગસૂત્રોની કલ્પના કરવા અને આંતર-અથવા આંતર-રંગસૂત્ર પુનઃગોઠવણીને ઓળખવા માટે વિવિધ તપાસનો ઉપયોગ કરે છે. સેન્ટ્રોમિયર-વિશિષ્ટ બહુ-રંગીન માછલી (સી. એન. એમ.-ફિશ) મલ્ટીપ્લેક્સ-ફિશમાંથી બહુ-રંગીન ચકાસણીનો ઉપયોગ કરે છે તેમજ સેન્ટ્રોમિયર પ્રદેશોને ઓળખવા અને અલગ પાડવા માટે સેન્ટ્રોમિયર વિશિષ્ટ લેબલવાળી ચકાસણીનો ઉપયોગ કરે છે. સેન્ટ્રોમેર અસાધારણતા અથવા રંગસૂત્રોની પુનઃગોઠવણી અને ટેલોમેરની લંબાઈ વચ્ચેના સંબંધની ઉચ્ચ તબીબી અસર થઈ શકે છે, કારણ કે આ તમામ પૂર્વ અથવા જન્મ પછીના નિદાન અને ગાંઠના વિકાસમાં મહત્વપૂર્ણ દેખાય છે. આ પ્રયોગો ટેલોમેરની ભૂમિકા અને ટેલોમેરની લંબાઈના મહત્વ વિશે વધુ જ્ઞાન પ્રદાન કરી શકે છે. ક્યૂ-ફિશનો બીજો ઉપયોગ ટેલોમેરિક ફ્યુઝનની શોધ છે, જ્યાં રંગસૂત્રોના છેડા ટેલોમેરમાં એક સાથે જોડવામાં આવ્યા છે, જેને કેટલીકવાર ઇન્ટર્સ્ટિશલ (રંગસૂત્રની અંદર) ટેલોમેરિક સિક્વન્સ (આઇટીએસ) કહેવામાં આવે છે. ટેલોમેરિક ફ્યુઝનનો અભ્યાસ કેટલીકવાર ઉત્ક્રાંતિનો માર્ગ બતાવી શકે છે. ઉદાહરણ તરીકે, એક માનવ રંગસૂત્રમાં આઇટીએસ હોય છે જે ચિમ્પાન્ઝીમાં બે રંગસૂત્રોની સમકક્ષ હોવાનું અનુમાન કરવામાં આવે છે જે એક સાથે જોડાયેલા હોય છે. વિવિધ પ્રજાતિઓમાં ટેલોમેરની લંબાઈના નિયમનનું નિરીક્ષણ કરવાથી કેરીયોટાઇપ ઉત્ક્રાંતિ અને માનવ બીમારીઓ સાથે સુસંગતતા વિશે મહત્વપૂર્ણ માહિતી પણ પ્રગટ થાય છે. અન્ય એક ઉદાહરણમાં, નોન-હોમોલોગસ એન્ડ જોઇનિંગ (એન. એચ. ઇ. જે.) પ્રોટીન ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએના ભંગાણની મરામત કરે છે અને કાર્ય કરવા માટે કેયુ70/કેયુ80 હેટેરોડાઇમર પર આધાર રાખે છે. આ પ્રોટીનને વિક્ષેપિત કરવાથી ટેલોમેરિક શોર્ટનિંગ થાય છે, જે માછલી સાથે ટેલોમેરની લંબાઈને માપવા દ્વારા જોઇ શકાય છે. ઉદાહરણ તરીકે, કુ 80 જનીનનો અભાવ ધરાવતા ઉંદરમાં, ટેલોમેરની લંબાઈને ક્યુફિશ દ્વારા માપવામાં આવે છે અને તે નોંધપાત્ર રીતે ટૂંકી હોવાનું જોવા મળે છે. ક્યુ-ફિશનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે કેન્સર સંશોધનમાં કેન્સરગ્રસ્ત અને બિન-કેન્સરગ્રસ્ત કોષો વચ્ચે ટેલોમેરની લંબાઈમાં તફાવત માપવા માટે થાય છે. ટેલોમેરનું ટૂંકું થવું જીનોમિક અસ્થિરતાનું કારણ બને છે અને વૃદ્ધાવસ્થા સાથે કુદરતી રીતે થાય છે, બંને પરિબળો કે જે કેન્સરના સંભવિત કારણો સાથે સંબંધિત છે. ક્યૂ-ફિશના ફાયદા અન્ય ફિશ તકનીકો પર ક્યૂ-ફિશનો સૌથી મોટો ફાયદો એ તકનીકની માત્રાત્મક ક્ષમતા છે. ડીએનએ તપાસનો ઉપયોગ કરતી પરંપરાગત માછલીની સરખામણીમાં, માત્રાત્મક માહિતી મેળવવી મુશ્કેલ છે કારણ કે સંકરણ તપાસ પૂરક જીનોમિક ડીએનએ સેરના પુનઃજનન સાથે સ્પર્ધા કરે છે. તેથી, પી. એન. એ. નો ઉપયોગ કરીને અને ખૂબ જ કડક પરિસ્થિતિઓમાં તેમનું સંકરણ કરીને, તે વ્યક્તિને આ સમસ્યાને દૂર કરવાની મંજૂરી આપે છે. તેવી જ રીતે, કારણ કે કોઈ વ્યક્તિ પી. એન. એ. તપાસની હાજરીમાં રંગસૂત્ર ડીએનએને વિકૃત કરવામાં સક્ષમ છે, તે ફિશ પ્રક્રિયાને સરળ બનાવે છે. વધુમાં, આ પદ્ધતિ વધુ રીઝોલ્યુશન પ્રદાન કરે છે, જે વપરાશકર્તાને ચોક્કસ કોષમાં દરેક વ્યક્તિગત રંગસૂત્ર (પી અથવા ક્યૂ આર્મ) ની ટેલોમેર લંબાઈની તપાસ કરવાની મંજૂરી આપે છે. ઉપરાંત, સધર્ન બ્લોટ્સથી વિપરીત, જેને બ્લોટ માટે 105 થી વધુ કોષોની જરૂર પડે છે, ક્યૂ-ફિશમાં 30 થી ઓછા કોષોની જરૂર પડે છે. ક્યૂ-ફિશની ખામીઓ તેના ફાયદા હોવા છતાં, ક્યૂ-ફિશ ખૂબ જ શ્રમ-સઘન છે અને સામાન્ય રીતે ઉચ્ચ થ્રુપુટ વિશ્લેષણ માટે યોગ્ય નથી. આ તકનીક સારી રીતે તૈયાર કરવામાં આવેલા મેટાફેઝ કોષો પર આધાર રાખે છે અને તે મહત્વપૂર્ણ છે કે માપન સચોટ હોય તે માટે સાધનો અને નમૂનાઓને યોગ્ય રીતે સમાયોજિત/સામાન્ય કરવામાં આવે. ઉપરાંત, જ્યારે કોષોની માત્ર થોડી માત્રાની જરૂર હોય છે, ત્યારે એક જ સમયે મેટાફેઝમાં પૂરતી સંખ્યા મેળવવી મુશ્કેલ છે. વધુમાં, નબળા રંગસૂત્ર મોર્ફોલોજી તૈયારી દરમિયાન ઊંચા તાપમાને વધુ પડતા સંપર્કમાં આવવાથી પરિણમી શકે છે. તેવી જ રીતે, જો કોઈ વિવિધ કોષ પ્રકારોનો ઉપયોગ કરી રહ્યું હોય, તો ક્યૂ-ફિશના ઘણા પગલાઓ (જેમ કે કોલેસિમિડ સારવારની લંબાઈ) માટે ઓપ્ટિમાઇઝેશનની જરૂર પડશે. ફ્લોરોસન્સ માઇક્રોસ્કોપીમાં એક સામાન્ય સમસ્યા ફોટોબ્લીચિંગ છે, જ્યાં પ્રકાશના સંપર્કમાં આવવાના પરિણામે ફ્લોરોફોર તેની પ્રવૃત્તિ ગુમાવે છે. આ ફ્લોરોસન્સની તીવ્રતાના અચોક્કસ માપન તરફ દોરી શકે છે. ફોટોબ્લીચિંગ, પ્રકાશ સ્રોત સ્થિરતા અને સિસ્ટમ પરિવર્તનશીલતા એ ભૂલના તમામ સ્રોતો છે પરંતુ જો વપરાશકર્તા નમૂનાઓ વચ્ચે સંપાદન સમય ઘટાડવામાં અને યોગ્ય નિયંત્રણોનો સમાવેશ કરવામાં સક્ષમ હોય તો તેને ઘટાડી શકાય છે. શાસ્ત્રીય તકનીક ક્યૂ-ફિશ અને પી. એન. એ. ના વિકાસ પહેલા, ટેલોમેરની લંબાઈ માપવા માટેની શાસ્ત્રીય તકનીક સધર્ન બ્લોટ્સનો ઉપયોગ હતો. આ પદ્ધતિમાં, જીનોમિક ડીએનએને પ્રતિબંધ ઉત્સેચકોનો ઉપયોગ કરીને પચાવવામાં આવે છે અને જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ દ્વારા અલગ કરવામાં આવે છે. પછી ડીએનએને પટલ પર સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવે છે અને કિરણોત્સર્ગી અથવા ફ્લોરોસન્ટ ટેલોમેરિક ડીએનએ પ્રોબ્સનો ઉપયોગ કરીને સંકરણ કરવામાં આવે છે. જો કે, આ પદ્ધતિ માત્ર કોષની વસ્તીમાં સરેરાશ ટેલોમેર લંબાઈનું મૂલ્યાંકન કરવામાં સક્ષમ છે અને જિનોમમાં ઇન્ટર્સ્ટિશલ ટેલોમેરિક સિક્વન્સની હાજરી અચોક્કસ માપ આપી શકે છે. ક્યૂ-ફિશ ફ્લો-ફિશના ફેરફારો ક્યૂ-ફિશની જેમ, ફ્લો-ફિશ એ ક્યૂ-ફિશનું અનુકૂલન છે જે ફ્લો સાયટોમેટ્રી સાથે પી. એન. એ. ના ઉપયોગને જોડે છે. આ પદ્ધતિમાં, ફ્લો-ફિશ મેટાફેઝ રંગસૂત્રોને બદલે ઇન્ટરફેઝ કોષોનો ઉપયોગ કરે છે અને સસ્પેન્શનમાં પી. એન. એ. પ્રોબ્સને સંકરણ કરે છે. સંકરણ પછી, પ્રમાણમાં ટૂંકા સમયમાં ફ્લો સાયટોમીટર પર હજારો કોષોનું વિશ્લેષણ કરી શકાય છે. જો કે, ફ્લો-ફિશ દરેક કોષ માટે માત્ર સરેરાશ ટેલોમેરિક લંબાઈ પ્રદાન કરે છે જ્યારે ક્યૂ-ફિશ વ્યક્તિગત રંગસૂત્રની ટેલોમેર લંબાઈનું વિશ્લેષણ કરવામાં સક્ષમ છે. જો કે ક્યૂ-ફિશની માત્રાત્મક ક્ષમતાનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે ટેલોમેર સંશોધનમાં થાય છે, અન્ય ક્ષેત્રો કે જેમાં માત્ર ગુણાત્મક માહિતીની જરૂર હોય તેમણે સંશોધન અને નિદાન બંને હેતુઓ માટે ફિશ સાથે પી. એન. એ. નો ઉપયોગ અપનાવ્યો છે. ક્લિનિકની અંદર ઝડપથી ચેપી રોગોને ઓળખવા અને તેનું નિદાન કરવા માટે પી. એન. એ.-ફિશ પરીક્ષણો વિકસાવવામાં આવ્યા છે. સકારાત્મક રક્ત સંવર્ધનના પરંપરાગત ગ્રામ સ્ટેનિંગ સાથે જોડાઈને, પી. એન. એ. નો ઉપયોગ પ્રજાતિ-વિશિષ્ટ આર. આર. એન. એ. (રિબોસોમલ આર. એન. એ.) ને લક્ષ્ય બનાવવા માટે બેક્ટેરિયા અથવા યીસ્ટના વિવિધ પ્રકારોને ઓળખવા માટે કરી શકાય છે. પરીક્ષણ પ્રમાણમાં ઝડપથી કરી શકાય છે, તેથી આ પરીક્ષણને હોસ્પિટલોમાં ઉપયોગ કરવા માટે વિચારણા કરવામાં આવી રહી છે જ્યાં હોસ્પિટલ દ્વારા હસ્તગત ચેપ થઈ શકે છે. કો-ફિશ (રંગસૂત્ર અભિગમ-ફિશ) અન્ય અનુકૂલન કે જે પી. એન. એ. અને ફિશનો ઉપયોગ કરે છે તેને કો-ફિશ (રંગસૂત્ર અભિગમ-ફિશ) તરીકે ઓળખવામાં આવે છે જે ચોક્કસ રીતે પી. એન. એ. સાથે રંગસૂત્રોના લેબલિંગ માટે પરવાનગી આપે છે. આ પદ્ધતિમાં ડીએનએની નવી પ્રતિકૃતિઓ (બીઆરડીયુ સમાવેશના ઉપયોગ દ્વારા) ને પસંદગીયુક્ત રીતે દૂર કરવાનો સમાવેશ થાય છે, જેના પરિણામે માત્ર એક જ અવરોધિત લક્ષ્ય ડીએનએ બને છે. વિવિધ રંગીન એકદિશાત્મક પી. એન. એ. તપાસનો ઉપયોગ કરીને, બહેન ક્રોમેટિડ્સને અનન્ય રીતે લેબલ કરવું શક્ય બને છે. સંદર્ભો સાયટોજેનેટિક્સ