Floxing
জেনেটিক্সে, ফ্লক্সিং বলতে দুটি লক্স পি সাইটের মধ্যে একটি ডিএনএ সিকোয়েন্সের (যা পরে ফ্লক্স করা হয়) স্যান্ডউইচিংকে বোঝায়। শব্দগুলি "ফ্ল্যাঙ্কিং/ফ্ল্যাঙ্কড বাই এল. ও. এস. পি" বাক্যাংশের উপর নির্মিত। এল. ও. এস. পি সাইটগুলির মধ্যে পুনর্মিলন ক্রি রিকম্বিনেজ দ্বারা অনুঘটকিত হয়। একটি জিনকে ফ্লক্স করার ফলে এটি মুছে ফেলা যায় (ছিটকে যায়), স্থানান্তরিত হয় বা বিপরীতমুখী হয় যা ক্রি-লক্স রিকম্বিনেশন নামে পরিচিত। জিনগুলির ফ্লক্সিং বৈজ্ঞানিক মডেল সিস্টেমের বিকাশে অপরিহার্য কারণ এটি গবেষকদের জিন অভিব্যক্তির স্থানিক এবং সাময়িক পরিবর্তন করতে দেয়। উপরন্তু, ইঁদুরের মতো প্রাণীদের মানুষের রোগ অধ্যয়নের জন্য মডেল হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। অতএব, মানুষের রোগ এবং ওষুধের বিকাশ অধ্যয়নের জন্য জিন অভিব্যক্তি পরিচালনা করতে ইঁদুরের মধ্যে ক্রি-লক্স সিস্টেম ব্যবহার করা যেতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, ক্রি-লক্স সিস্টেম ব্যবহার করে, গবেষকরা অনকোজিন এবং টিউমার দমনকারী জিন এবং ইঁদুরের মডেলগুলিতে ক্যান্সারের বিকাশ ও অগ্রগতিতে তাদের ভূমিকা অধ্যয়ন করতে পারেন। গবেষণায় ফ্লক্সিং একটি জিনের ব্যবহার এটিকে মুছে ফেলা (ছিটকে দেওয়া), স্থানান্তর বা সন্নিবেশ করার (ক্রি-লক্স পুনঃসংযোগের বিভিন্ন পদ্ধতির মাধ্যমে) অনুমতি দেয়। জিনগুলির ফ্লক্সিং বৈজ্ঞানিক মডেল সিস্টেমের বিকাশে অপরিহার্য কারণ এটি জিন অভিব্যক্তির স্থানিক এবং সাময়িক পরিবর্তনের অনুমতি দেয়। সাধারণ মানুষের ভাষায়, জিনটি বিজ্ঞানী দ্বারা নির্বাচিত যে কোনও সময়ে ভিভোতে একটি নির্দিষ্ট টিস্যুতে ছিটকে যেতে পারে (নিষ্ক্রিয়)। বিজ্ঞানী তখন নক-আউট জিনের প্রভাবগুলি মূল্যায়ন করতে পারেন এবং জিনের স্বাভাবিক কার্যকারিতা সনাক্ত করতে পারেন। এটি গর্ভধারণ থেকে শুরু করে জিনের অনুপস্থিতির থেকে আলাদা, যার মাধ্যমে জীবের বিকাশের জন্য প্রয়োজনীয় জিনের নিষ্ক্রিয়তা বা ক্ষতি কোষের স্বাভাবিক ক্রিয়ায় হস্তক্ষেপ করতে পারে এবং টেকসই বংশধরের উৎপাদন রোধ করতে পারে। মুছে ফেলার প্রক্রিয়া মুছে ফেলার ঘটনাগুলি জিন সম্পাদনা পরীক্ষা-নিরীক্ষা সম্পাদনের জন্য সঠিকভাবে অংশগুলি বা এমনকি সম্পূর্ণ জিনের সম্পাদনা করার মাধ্যমে কার্যকর। মুছে ফেলার জন্য একই দিকে মুখ করা এলওএক্সপি সাইটগুলির সাথে আগ্রহের বিভাগটির ফ্লক্সিং প্রয়োজন। ক্রে রিকম্বিনেজ একমুখী এলওএক্সপি সাইটগুলি সনাক্ত করবে এবং ডিএনএ-র ফ্লক্সড অংশটিকে এক্সাইজ করবে। সফলভাবে সম্পাদিত ক্লোনগুলি একটি সিলেকশন মার্কার ব্যবহার করে নির্বাচন করা যেতে পারে যা একই ক্রি-লক্সপি সিস্টেম ব্যবহার করে অপসারণ করা যেতে পারে। একই প্রক্রিয়াটি একটি এফ. আর. টি/এফ. এল. পি সাইট প্রবর্তন করে শর্তাধীন অ্যালিল তৈরি করতে ব্যবহার করা যেতে পারে যা একই প্রক্রিয়াটি সম্পন্ন করে তবে একটি ভিন্ন এনজাইম দিয়ে। বিপরীতমুখী ঘটনার প্রক্রিয়া জিনগত উপাদানের পরিমাণ বজায় রাখার জন্য কার্যকর। উল্টানো জিনগুলি প্রায়শই অস্বাভাবিক ফেনোটাইপের সাথে যুক্ত হয় না, যার অর্থ উল্টানো জিনগুলি সাধারণত কার্যকর। ক্রে-লক্সপি পুনঃসংযোগ যার ফলে সন্নিবেশের জন্য লক্সপি সাইটগুলির আগ্রহের জিন ফ্লক্স করার প্রয়োজন হয়, যেখানে লক্সপি সাইটগুলি একে অপরের দিকে মুখ করে থাকে। ক্রি পুনর্মিলনের মাধ্যমে, এলওএক্সপি সাইটগুলি দ্বারা ফ্লক্স করা অঞ্চলটি উল্টো হয়ে যাবে, এই প্রক্রিয়াটি স্থায়ী নয় এবং বিপরীত হতে পারে। ট্রান্সলোকেশন ইভেন্টের প্রক্রিয়াটি ঘটে যখন এলওএক্সপি একটি একমুখী অভিযোজনে দুটি ভিন্ন ডিএনএ অণুর উপর ফ্লক্স জিন স্থাপন করে। ক্রি রিকম্বিনেজ তারপর দুটি ডিএনএ অণুর মধ্যে একটি স্থানান্তর তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়, একটি ডিএনএ অণু থেকে অন্যটিতে জিনগত উপাদান বিনিময় করে উভয় ফ্লক্সড জিনের একযোগে স্থানান্তর গঠন করে। গবেষণায় কার্ডিওমায়োসাইটস (হৃৎপিণ্ডের পেশী টিস্যু)-এর সাধারণ প্রয়োগগুলি এক ধরনের ক্রি রিকম্বিনেজ প্রকাশ করতে দেখা গেছে যা কার্ডিওমায়োসাইটের জন্য অত্যন্ত নির্দিষ্ট এবং গবেষকরা অত্যন্ত দক্ষ পুনর্মিলন সম্পাদনের জন্য ব্যবহার করতে পারেন। এটি এক ধরনের ক্রি ব্যবহার করে অর্জন করা হয় যার অভিব্যক্তি-মায়োসিন হেভি চেইন প্রবর্তক (-মাইএইচসি) দ্বারা চালিত হয়। এই পুনর্মিলনগুলি এমনভাবে জিনগুলিকে ব্যাহত করতে সক্ষম যা শুধুমাত্র ভিভোতে হৃৎপিণ্ডের টিস্যুর জন্য নির্দিষ্ট এবং বেশিরভাগ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহারের জন্য হৃৎপিণ্ডের শর্তাধীন নকআউট তৈরির অনুমতি দেয়। উদাহরণস্বরূপ,-মাইএইচসি প্রবর্তকের সাথে ক্রি রিকম্বিনেজ ব্যবহার করলে শুধুমাত্র হৃৎপিণ্ডে ফ্লক্সড জিন নিষ্ক্রিয় হয়ে যায়। উপরন্তু, এই নকআউটগুলি প্ররোচিত হতে পারে। বেশ কয়েকটি মাউস গবেষণায়, ক্রে রিকম্বিনেজ প্ররোচিত করতে ট্যামোক্সিফেন ব্যবহার করা হয়। এই ক্ষেত্রে, ক্রি রিকম্বিনেজ মাউস ইস্ট্রোজেন রিসেপ্টর (ইআর)-এর একটি অংশে সংযুক্ত করা হয় যার লিগ্যান্ড বাইন্ডিং ডোমেনের (এলবিডি) মধ্যে একটি রূপান্তর রয়েছে। মিউটেশনটি রিসেপ্টরকে নিষ্ক্রিয় করে দেয়, যা চ্যাপেরোন প্রোটিন যেমন হিট শক প্রোটিন 70 এবং 90 (এইচএসপি 70 এবং এইচএসপি 90) এর সাথে মিথস্ক্রিয়ার মাধ্যমে ভুল স্থানীয়করণের দিকে পরিচালিত করে। ট্যামোক্সিফেন ক্রি-ইআর-এর সাথে আবদ্ধ হয় এবং চ্যাপেরোনগুলির সাথে এর মিথস্ক্রিয়া ব্যাহত করে, যা ক্রি-ইআর ফিউশন প্রোটিনকে নিউক্লিয়াসে প্রবেশ করতে এবং ফ্লক্সড জিনের উপর পুনঃসংযোগ করতে দেয়। উপরন্তু, নির্দিষ্ট তাপ শক উপাদানগুলির (এইচ. এস. ই) নিয়ন্ত্রণে থাকলে ক্রি রিকম্বিনেজ তাপ দ্বারা প্ররোচিত হতে পারে। তথ্যসূত্র ডি. এন. এ জেনেটিক্স কৌশল