Recombinant AAV mediated genome engineering
রিকম্বিনেন্ট অ্যাডেনো-অ্যাসোসিয়েটেড ভাইরাস (আর. এ. এ. ভি) ভিত্তিক জিনোম ইঞ্জিনিয়ারিং একটি জিনোম সম্পাদনা প্ল্যাটফর্ম যা রিকম্বিনেন্ট এ. এ. ভি ভেক্টরের ব্যবহারকে কেন্দ্র করে যা জীবিত স্তন্যপায়ী কোষের জিনোমে ডি. এন. এ সিকোয়েন্স সন্নিবেশ, মুছে ফেলা বা প্রতিস্থাপন করতে সক্ষম করে। এই কৌশলটি মারিয়ো কেপেচি এবং অলিভার স্মিথিসের নোবেল পুরস্কার বিজয়ী আবিষ্কারের উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়েছে যে, সমজাতীয় পুনঃসংযোগ (এইচআর), একটি প্রাকৃতিক হাই-ফিডেলিটি ডিএনএ মেরামত প্রক্রিয়া, ইঁদুরের মধ্যে সুনির্দিষ্ট জিনোম পরিবর্তন সম্পাদনের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। আরএএভি মধ্যস্থ জিনোম-সম্পাদনা এই কৌশলটির দক্ষতা উন্নত করে যে কোনও পূর্ব-প্রতিষ্ঠিত এবং পৃথক মানব কোষ লাইনে জিনোম ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের অনুমতি দেয়, যা মাউস ইএস কোষের বিপরীতে এইচআর-এর কম হার রয়েছে। আইসোজেনিক মানব রোগের মডেল তৈরি করতে মানব কোষ লাইনের প্রকৌশল কাজে ব্যবহারের জন্য এই কৌশলটি ব্যাপকভাবে গ্রহণ করা হয়েছে। এটি প্রোটিন টিকা এবং থেরাপিউটিক্সের জৈব উৎপাদনের জন্য জৈব উৎপাদনকারী কোষের লাইনগুলিকে অনুকূল করতেও ব্যবহৃত হয়েছে। উপরন্তু, আর. এ. এ. ভি-এর অ-রোগজনক প্রকৃতির কারণে, এটি জীবিত রোগীদের মধ্যে জিন থেরাপি সম্পাদনের জন্য একটি পছন্দসই ভেক্টর হিসাবে আবির্ভূত হয়েছে। আর. এ. এ. ভি ভেক্টর আর. এ. এ. ভি জিনোমটি সিঙ্গেল-স্ট্র্যান্ডেড ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড (এস. এস. ডি. এন. এ) দিয়ে তৈরি, ইতিবাচক বা নেতিবাচক-সংবেদনশীল, যা প্রায় 4.7 কিলোবেস দীর্ঘ। এই একক-আটকে থাকা ডিএনএ ভাইরাল ভেক্টরগুলির উচ্চ ট্রান্সডাকশন হার রয়েছে এবং জিনোমে ডাবল স্ট্র্যান্ড ডিএনএ বিরতি না ঘটিয়ে অন্তঃসত্ত্বা এইচআরকে উদ্দীপিত করার একটি অনন্য বৈশিষ্ট্য রয়েছে, যা অন্যান্য হোমিং এন্ডোনিউক্লিয়াস মধ্যস্থ জিনোম সম্পাদনা পদ্ধতির বৈশিষ্ট্য। সক্ষমতা ব্যবহারকারীরা যে কোনও লক্ষ্য জিনোমিক লোকাসে একটি আর. এ. এ. ভি ভেক্টর ডিজাইন করতে পারেন এবং স্তন্যপায়ী দৈহিক কোষ-প্রকারের মোট এবং সূক্ষ্ম উভয় অন্তঃসত্ত্বা জিন পরিবর্তন সম্পাদন করতে পারেন। এর মধ্যে রয়েছে কার্যকরী জিনোমিক্সের জন্য জিন নক-আউট বা জীবন্ত কোষে শারীরবৃত্তীয় স্তরে স্থানান্তরের ঘটনাগুলি ট্র্যাক করার জন্য প্রোটিন ট্যাগ সন্নিবেশের 'নক-ইন'। সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ বিষয় হল, আর. এ. এ. ভি একবারে একটি একক অ্যালিলকে লক্ষ্য করে এবং এর ফলে কোনও লক্ষ্যহীন জিনোমিক পরিবর্তন হয় না। এই কারণে, এটি সূক্ষ্ম এসএনপি বা পয়েন্ট মিউটেশন দ্বারা সৃষ্ট জেনেটিক রোগের নিয়মিত এবং সঠিক মডেল তৈরি করতে সক্ষম যা ক্রমবর্ধমানভাবে নতুন ওষুধ আবিষ্কার কর্মসূচির লক্ষ্য। প্রয়োগগুলি আজ অবধি, আরএএভি মধ্যস্থ জিনোম ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের ব্যবহার 2100 টিরও বেশি পিয়ার পর্যালোচিত বৈজ্ঞানিক জার্নালে প্রকাশিত হয়েছে। আর. এ. এ. ভি ভিত্তিক জিনোম সম্পাদনার আরেকটি উদীয়মান প্রয়োগ হল রোগীদের মধ্যে জিন থেরাপির জন্য, সঠিকতা এবং পদ্ধতির দ্বারা প্রদত্ত অফ-টার্গেট রিকম্বিনেশন ইভেন্টের অভাবের কারণে। আরও দেখুন জৈবিক প্রকৌশল জিনোম ইঞ্জিনিয়ারিং হোমিং এন্ডোন্যুক্লিয়াস হোমোলোগাস রিকম্বিনেশন মেগানুক্লিয়াস জিঙ্ক ফিঙ্গার নিউক্লিয়াস আইসোজেনিক মানব রোগের মডেল ক্যাস9 রেফারেন্স উৎস অনকোজেনিক পিআই3কে মিউটেশনের অন্তঃসত্ত্বা অভিব্যক্তি সক্রিয় পিআই3কে সিগন্যালিং এবং এ. এ. সি. আর/ই. ও. আর. টি. সি আণবিক লক্ষ্য এবং ক্যান্সার থেরাপিউটিক্স, বস্টন, ইউ. এস. এ, নভেম্বর 2009-এ উপস্থাপিত একটি আক্রমণাত্মক ফেনোটাইপ পোস্টার অনকোজেনিক পিআই3কে মিউটেশনের অন্তঃসত্ত্বা অভিব্যক্তি মাইটোকন্ড্রিয়া পোস্টারে অ্যান্টি-অ্যাপোপটিক প্রোটিন সংগ্রহের দিকে পরিচালিত করে যা এ. এ. সি. আর 2010, ওয়াশিংটন, ডি. সি., ইউ. এস. এ, এপ্রিল 2010 পিআই3-কিনেজ ইনহিবিটর ক্রিয়াকলাপ প্রোফাইলগুলি সংজ্ঞায়িত করতে 'এক্স-ম্যান' আইসোজেনিক কোষ লাইনের ব্যবহার পোস্টার এ. এ. সি. আর 2010, ওয়াশিংটন, ডি. সি., ইউ. এস. এ, এপ্রিল মাসে উপস্থাপিত। 2010 'এক্স-ম্যান' মিউট্যান্ট পিআই3সিএ-র ব্যবহার পৃথক টিউবুলিন আইসোফর্মের অভিব্যক্তি বাড়ায় এবং এ. এ. সি. আর 2010, ওয়াশিংটন, ডি. সি., ইউ. এস. এ, এপ্রিল-এ উপস্থাপিত অ্যান্টি-মাইটোটিক কেমোথেরাপি ওষুধের বিরুদ্ধে প্রতিরোধের প্রচার করে। 2010 বায়োকেমিস্ট্রি রিকম্বিনেন্ট প্রোটিন