Monocyte monolayer assay
মনোসাইট মনোলেয়ার অ্যাসে (এম. এম. এ) রক্ত সঞ্চালনের প্রাপকদের দ্বারা উত্পাদিত অ্যালোঅ্যান্টিবডিগুলির ক্লিনিকাল তাৎপর্য নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়। যখন অসঙ্গতিপূর্ণ কোষীয় রক্তের পণ্যগুলি রক্তাল্পতা রোগীর কাছে স্থানান্তরিত হয় তখন এই পরীক্ষাটি ইন্ট্রাভাসকুলার হেমোলাইসিসের সম্ভাবনা মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়। যখন দাতা কোষগুলিতে এমন পদার্থ থাকে যা প্রাপকের দ্বারা উত্পাদিত হয় না, তখন প্রাপকের ইমিউন সিস্টেম পদার্থের বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডি তৈরি করে; এগুলিকে অ্যালোঅ্যান্টিবডি বলা হয়। নির্দিষ্ট শ্বেত রক্তকণিকা, যাকে মনোসাইট বলা হয়, বিদেশী উপাদান গ্রহণের দায়িত্ব দেওয়া হয় এবং নির্দিষ্ট প্রদাহজনক ঘটনার সময় সক্রিয় হয়ে ওঠে। এই সক্রিয় মনোসাইটগুলি অ্যান্টিবডি-সংবেদনশীল লোহিত রক্তকণিকার (আরবিসি) সংস্পর্শে আসে এবং ফাগোসাইটোসিস (ইনজেকশন) প্রদর্শন করতে পারে বা নাও করতে পারে এবং দাতার লোহিত রক্তকণিকা ধ্বংস করতে পারে। যদি মনোসাইটগুলি আরবিসি ধ্বংস করে, তবে সেই আরবিসি-র সাথে সংযুক্ত অ্যান্টিবডিগুলি চিকিৎসাগতভাবে গুরুত্বপূর্ণ বলে মনে করা হয়। পটভূমি ব্লাড ব্যাঙ্কিং একটি ক্লিনিকাল পরীক্ষাগারের মধ্যে একটি ঘনত্ব যা সম্ভাব্য সংক্রমণ প্রাপকদের নমুনা বিশ্লেষণ করে এবং সেই রোগীর যত্নের দায়িত্বে থাকা স্বাস্থ্যসেবা দলকে সামঞ্জস্যপূর্ণ রক্তের পণ্য সরবরাহ করে। রক্তের টাইপিং (এবিও/আরএইচ অবস্থা নির্ধারণ), অ্যান্টিবডি স্ক্রিনিং, সেরোলজিক ক্রস-ম্যাচিং, ডাইরেক্ট অ্যান্টিগ্লোবুলিন টেস্টিং এবং অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ সহ বেশ কয়েকটি নিয়মিত পরীক্ষা করা হয়। এবিও এবং আরএইচ (ডি) রক্তের গ্রুপের অ্যান্টিজেনগুলিতে প্রাকৃতিকভাবে ঘটে যাওয়া অ্যান্টিবডিগুলির (আইসোহেমাগ্লুটিনিন) উপস্থিতি ছাড়াও, অতিরিক্ত ইমিউন-স্টিমুলেটেড অ্যান্টিবডিগুলিকে অপ্রত্যাশিত অ্যালোঅ্যান্টিবডি হিসাবে বিবেচনা করা হয়। অপ্রত্যাশিত অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ একটি শ্রম-নিবিড় প্রক্রিয়া, এবং কখনও কখনও অ্যান্টিবডির সঠিক সনাক্তকরণে সহায়তা করার জন্য বিশেষ পরীক্ষাগার কৌশল যোগ করার প্রয়োজন হয়। এই কৌশলগুলির মধ্যে রয়েছে এলিউশন, অ্যাডসর্পশন এবং এনজাইম চিকিৎসা। কিছু রোগী উচ্চ ফ্রিকোয়েন্সি অ্যান্টিজেনের অ্যান্টিবডি তৈরি করে। অর্থাৎ, মানব জনসংখ্যার একটি উল্লেখযোগ্য অংশে লাল কোষের অ্যান্টিজেন উপস্থিত রয়েছে। অ্যান্টিবডিটি চিকিৎসাগতভাবে গুরুত্বপূর্ণ কিনা তা মূল্যায়ন করা সন্দেহজনক এবং খুব কঠিন হতে পারে। একটি ক্লিনিক্যালি উল্লেখযোগ্য অ্যান্টিবডি হল এমন একটি অ্যান্টিবডি যা ইন ভিট্রো হেমোলাইসিস বা সংক্রমিত দাতা লোহিত রক্তকণিকার বেঁচে থাকা হ্রাস করতে সক্ষম। মনোসাইট মনোলেয়ার পরীক্ষা ব্যবহার করে ক্লিনিকাল তাৎপর্যের জন্য উচ্চ ফ্রিকোয়েন্সি অ্যান্টিজেনের অ্যান্টিবডিগুলি মূল্যায়ন করা যেতে পারে। হেমোলাইটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া রক্ত সঞ্চালনে বিভিন্ন ধরনের অস্বাভাবিক প্রতিক্রিয়া রয়েছে। এর মধ্যে, একটি সম্ভাব্য প্রাণঘাতী প্রতিক্রিয়া হেমোলাইটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া হিসাবে পরিচিত। এটি একটি ইমিউন মিডিয়েটেড প্রতিক্রিয়া যেখানে প্রাপক অ্যান্টিবডিগুলি দাতা লাল রক্ত কোষের অ্যান্টিজেন (গুলি) আক্রমণ করে, যার ফলে দাতা কোষগুলির হেমোলাইসিস হয়। প্রতিক্রিয়াটি সময়ের মধ্যে, অবিলম্বে পরে বা 28 দিন পরে পর্যন্ত ঘটতে পারে। প্রথম 24 ঘন্টার মধ্যে একটি তীব্র প্রতিক্রিয়া লক্ষ্য করা যায়, যেখানে রক্ত সঞ্চালনের 24 ঘন্টা থেকে 28 দিনের মধ্যে একটি বিলম্বিত প্রতিক্রিয়া লক্ষ্য করা যায়। অ্যালোঅ্যান্টিবডি গঠন এবং ক্লিনিকাল তাৎপর্য এবিও রক্তের গ্রুপ সিস্টেম সম্পর্কে কথা বলার সময়, ল্যান্ডস্টেইনারের আইন বলে যে কোনও ব্যক্তির যদি এ এবং/অথবা বি অ্যান্টিজেন থাকে তবে তারা এই অ্যান্টিজেনগুলির অ্যান্টিবডি তৈরি করবে না। তবে, যদি কোনও ব্যক্তির এ বা বি অ্যান্টিজেন না থাকে, তবে তারা স্বাভাবিকভাবেই অ্যান্টি-এ এবং অ্যান্টি-বি অ্যান্টিবডি তৈরি করবে। ইন্টারন্যাশনাল সোসাইটি অফ ব্লাড ট্রান্সফিউশন (আইএসবিটি) অনুসারে, শত শত বিভিন্ন লোহিত রক্তকণিকা অ্যান্টিজেনযুক্ত 43টি রক্তের গ্রুপ সিস্টেমের বর্ণনা দেওয়া হয়েছে। কিছু ব্যতিক্রম ছাড়া, অনেক অ-এ. বি. ও রক্তের গ্রুপ সিস্টেমের অ্যান্টিজেনের অ্যান্টিবডি উৎপাদনকে উদ্দীপিত করার জন্য একটি সংবেদনশীল ঘটনার প্রয়োজন হয়। অন্য কথায়, অবৈধ অ্যান্টিবডি উৎপাদনের জন্য ইমিউন সিস্টেমকে অবশ্যই অ্যান্টিজেনের সংস্পর্শে আসতে হবে। রক্ত সঞ্চালন, স্টেম সেল/অস্থি মজ্জা প্রতিস্থাপন এবং গর্ভাবস্থার মাধ্যমে অ্যান্টিজেনের সংস্পর্শে আসতে পারে। একটি অ্যালোঅ্যান্টিবডির ক্লিনিকাল তাৎপর্য নির্ভর করে দাতার লোহিত রক্তকণিকার বেঁচে থাকার ক্ষমতা হ্রাস করার ক্ষমতার উপর। ক্লিনিক্যালি উল্লেখযোগ্য অ্যালোঅ্যান্টিবডিগুলির বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে রয়েছেঃ ইমিউনোগ্লোবুলিন জি অ্যান্টিবডি সাবক্লাস, শরীরের তাপমাত্রায় প্রতিক্রিয়াশীলতা এবং একটি পরোক্ষ অ্যান্টিগ্লোবুলিন পরীক্ষায় অ্যান্টি-হিউম্যান গ্লোবুলিনের (এ. এইচ. জি) উপস্থিতিতে লাল রক্ত কোষের সংযোজন ঘটানোর ক্ষমতা। কখনও কখনও, একটি অ্যান্টিবডির ক্লিনিকাল তাৎপর্য নির্ধারণ করা কঠিন হতে পারে। উচ্চ প্রাদুর্ভাবযুক্ত লাল কোষের অ্যান্টিজেনগুলির অ্যান্টিবডিগুলি কখনও কখনও ক্লিনিক্যালি উল্লেখযোগ্য অ্যালোঅ্যান্টিবডিগুলির সনাক্তকরণকে আড়াল করতে পারে কারণ সংশ্লিষ্ট অ্যান্টিজেন বেশিরভাগ ক্ষেত্রে উপস্থিত থাকে, যদি না সমস্ত নয়, এই অ্যান্টিবডিগুলি সনাক্ত করতে ব্যবহৃত স্ক্রিনিং লাল রক্ত কোষগুলির মধ্যে অ্যান্টিজেন থাকে। এখানেই মনোসাইট মনোলেয়ার পরীক্ষা কার্যকর হতে পারে। নীতি এমএমএ একটি অত্যন্ত শ্রম-নিবিড়, ম্যানুয়াল ল্যাবরেটরি পরীক্ষার পদ্ধতি। এই পরীক্ষায় নিম্নলিখিত পদক্ষেপগুলি সম্পাদন করা হয়ঃ স্বাভাবিক, সুস্থ ব্যক্তিদের কাছ থেকে অ্যান্টিকোয়াগুলেটেড রক্ত সংগ্রহ করা হয়। অ্যাসিড সাইট্রেট ডেক্সট্রোজ পছন্দ করা হয়। পেরিফেরাল ব্লাড মনোনিউক্লিয়ার সেল (পিবিএমসি) একটি ফিকোল-পাক ঘনত্ব গ্রেডিয়েন্ট ব্যবহার করে রক্তের নমুনা থেকে সংগ্রহ করা হয়। পি. বি. এম. সি-গুলিকে ফসফেট-বাফার্ড স্যালাইন (পি. বি. এস) ব্যবহার করে ধুয়ে ফেলা হয় এবং তারপরে মনোসাইটগুলিকে কার্যকর রাখার জন্য টিস্যু কালচার মিডিয়াতে ঝুলিয়ে রাখা হয়। পিবিএমসি-মিডিয়া মিশ্রণটি একটি টিস্যু কালচার চেম্বার স্লাইডে যোগ করা হয়। মনোসাইটগুলি একটি মনোসাইট মনোলেয়ার গঠন করে কাচের স্লাইডে আটকে থাকবে। সিরাম মিশ্রিত করা হয় এবং শরীরের তাপমাত্রায় (37 ডিগ্রি সেলসিয়াস) 5 শতাংশ গ্রুপ ও আরবিসি সাসপেনশন সহ ইনকিউবেট করা হয়। (এই পদক্ষেপটি অ্যান্টিবডির সাথে আরবিসি সংবেদনশীল বা আবরণ করে) সংবেদনশীল আরবিসিগুলি কোনও সীমাহীন অ্যান্টিবডি বা হস্তক্ষেপকারী পদার্থ অপসারণের জন্য পিবিএস দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়। ধোয়া, সংবেদনশীল আরবিসি তারপর মনোসাইট মনোলেয়ার টিস্যু কালচার চেম্বার স্লাইডে যোগ করা হয়। 60 মিনিট, 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস ইনকিউবেশনের পরে, চেম্বার স্লাইডগুলি থেকে সুপারনেট্যান্টটি সরানো হয় এবং পিবিএস দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়। একবার স্লাইডটি সম্পূর্ণ শুকিয়ে গেলে, এটি রাইটস-জিয়েমসা দাগ দিয়ে দাগ দেওয়া হয়। আরবিসি ফাগোসাইটোসিসের প্রমাণের জন্য মাইক্রোস্কোপের অধীনে কমপক্ষে 600 (200 যদি পজিটিভিটি 20 শতাংশের বেশি হয়) মনোসাইট পর্যবেক্ষণ করা হয়। গুণগত মানের নিশ্চয়তার জন্য রোগীর নমুনার সাথে একটি ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণও করা হয়। ব্যাখ্যা যদি ইতিবাচক বা নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণগুলি ব্যর্থ হয়, তবে পুরো পরীক্ষার পদ্ধতিটি অবৈধ এবং অবশ্যই পুনরাবৃত্তি করতে হবে। একটি ইতিবাচক এম. এম. এ-র মানদণ্ড পরীক্ষাগার অনুসারে পরিবর্তিত হয়, যদিও স্যান্ড্রা ন্যান্স এবং অন্যান্যদের দ্বারা মূলত প্রতিষ্ঠিত সীমাটি 20 শতাংশের বেশি ফাগোসাইটিক ক্রিয়াকলাপ পর্যবেক্ষণ করা হয়। ক্লিনিক্যালি, একটি পজিটিভ এমএমএ নির্দেশ করে যে পরীক্ষার ক্ষেত্রে ব্যবহৃত রোগীর সিরামে ক্লিনিক্যালি উল্লেখযোগ্য অ্যান্টিবডি রয়েছে যা অ্যান্টিবডি-মধ্যস্থ ফাগোসাইটোসিস সৃষ্টি করতে সক্ষম। আরও দেখুন তীব্র হেমোলাইটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া অ্যান্টিবডি অপসোনাইজেশন অ্যালোঅ্যান্টিবডি রেফারেন্স ট্রান্সফিউশন মেডিসিন রক্ত পরীক্ষা