Intracellular delivery
অন্তঃকোষীয় প্রসব হল জীবন্ত কোষে বাহ্যিক উপাদান প্রবর্তনের প্রক্রিয়া। কোষে যে উপাদানগুলি সরবরাহ করা হয় তার মধ্যে রয়েছে নিউক্লিক অ্যাসিড (ডিএনএ এবং আরএনএ), প্রোটিন, পেপটাইড, অভেদ্য ছোট অণু, সিন্থেটিক ন্যানোমেটারিয়াল, অর্গানেল এবং মাইক্রন-স্কেল ট্রেসার, যন্ত্র এবং বস্তু। এই ধরনের অণু এবং উপকরণগুলি কোষের আচরণ অনুসন্ধান করতে, কোষের ক্রিয়াকলাপগুলি প্রকৌশলী করতে বা একটি প্যাথোলজিকাল ফাংশন সংশোধন করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির চিকিৎসা প্রয়োগগুলি ইন ভিট্রো ফার্টিলাইজেশন (আইভিএফ) এবং এমআরএনএ টিকা থেকে শুরু করে জিন থেরাপি এবং সিএআর-টি কোষের প্রস্তুতি পর্যন্ত বিস্তৃত। শিল্প প্রয়োগের মধ্যে রয়েছে প্রোটিন উৎপাদন, জৈব উৎপাদন এবং উদ্ভিদ ও প্রাণীর জিনগত প্রকৌশল। জীববিজ্ঞান এবং জেনেটিক্স অধ্যয়নের ক্ষেত্রে ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারি একটি মৌলিক কৌশল, যেমন জীবন্ত কোষে প্রোটিনের কার্যকারিতা অনুসন্ধানের জন্য ডিএনএ প্লাজমিড ট্রান্সফেকশন ব্যবহার করা। জৈবিক, রাসায়নিক এবং শারীরিক কৌশল সহ আন্তঃকোষীয় বিতরণ সম্পাদনের জন্য বিস্তৃত পদ্ধতির অস্তিত্ব রয়েছে যা ঝিল্লির ব্যাঘাত বা বাহকদের মধ্যে বিতরণ উপাদান প্যাকেজিংয়ের মাধ্যমে কাজ করে। ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারি কোষ জীববিজ্ঞান এবং প্রযুক্তির সংযোগস্থলে রয়েছে এবং জেনেটিক্স, বায়োটেকনোলজি, বায়ো ইঞ্জিনিয়ারিং এবং ড্রাগ ডেলিভারি সহ বিজ্ঞান ও ওষুধের অনেক ক্ষেত্রের সাথে সম্পর্কিত। ইলেকট্রনিক সংকেত, কোষ প্রক্রিয়াকরণ এবং অণুর মাধ্যমে তথ্য প্রেরণের মাধ্যমে কম্পিউটার যেভাবে কাজ করে তার অনুরূপ প্রয়োগ। কোষে লোড করা অণু এবং উপকরণের উপর নির্ভর করে, বিভিন্ন ফলাফল বা প্রয়োগ অর্জন করা যেতে পারে (উদাহরণস্বরূপ চিত্র "আন্তঃকোষীয় সরবরাহের প্রয়োগ" দেখুন)। অন্তঃকোষীয় সরবরাহের মাধ্যমে কোষগুলি অনুসন্ধান এবং ইঞ্জিনিয়ার করতে ব্যবহৃত পণ্যসম্ভার সামগ্রীর কয়েকটি প্রধান শ্রেণিবিন্যাস নীচে দেওয়া হল। কার্গো প্রকার নিউক্লিক অ্যাসিড ট্রান্সফেকশন নিউক্লিক অ্যাসিডের আন্তঃকোষীয় বিতরণকে বোঝায়ঃ ডিএনএ, আরএনএ এবং তাদের অনুরূপ। নিউক্লিক অ্যাসিডের যে উপাদানগুলি সাধারণত কোষে স্থানান্তরিত হয় সেগুলি হল প্লাজমিড ডিএনএ, এমআরএনএ, এসআইআরএনএ এবং অলিগোনিউক্লিওটাইড। সংক্রমণ প্রয়োগগুলি তিনটি প্রধান ক্ষেত্র জুড়ে বিস্তৃতঃ মৌলিক জৈবিক গবেষণা, জৈব উৎপাদন এবং জিন ও কোষ-ভিত্তিক চিকিৎসা। মৌলিক গবেষণায়, কোষ জীববিজ্ঞান এবং জেনেটিক্স থেকে শুরু করে ইমিউনোলজি এবং ড্রাগ আবিষ্কার পর্যন্ত ক্ষেত্রে ট্রান্সফেকশন একটি ভিত্তি কৌশল। জৈব উৎপাদনে, সংক্রমণ প্রোটিন, অ্যান্টিবডি, ভাইরাল ভেক্টর এবং ভ্যাকসিনের জন্য ভাইরাসের মতো কণা উৎপাদনের জন্য ব্যবহৃত হয়। কোষ-ভিত্তিক থেরাপিতে ট্রান্সফেকশন এক্স-ভিভো জিন থেরাপি, হেমাটোপোয়েটিক স্টেম সেল ইঞ্জিনিয়ারিং, ইনডিউসড প্লুরিপোট্যান্ট স্টেম সেল উৎপাদন এবং ইমিউনোথেরাপির জন্য কোষের এক্স-ভিভো প্রস্তুতির মতো প্রয়োগের জন্য ব্যবহৃত হয় গত 50 বছর ধরে নিউক্লিক অ্যাসিড ট্রান্সফেকশন ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির সবচেয়ে সাধারণ উপবিভাগ। 1970-এর দশকের শেষের দিকে মাইক্রোইঞ্জেকশন এবং ক্যালসিয়াম ফসফেট পদ্ধতির মাধ্যমে জিন প্রকাশের উদ্দেশ্যে প্লাজমিড ডিএনএ প্রাণী কোষে রূপান্তরিত হতে শুরু করে। তারপর থেকে, এটি বহুবিধ গবেষণায় জিন এবং প্রোটিনের কার্যকারিতা অনুসন্ধান করতে ব্যবহৃত হয়ে আসছে। ডি. এন. এ প্লাজমিডগুলি শারীরিকভাবে বড় এবং জটিল অণু যার <আই. ডি. 1> কিলো-বেসপেয়ার প্লাজমিড> 100 এন. এম ব্যাসের দ্রবণ থাকে যখন মুক্ত এবং ঘনীভূত হয় না। তা সত্ত্বেও, এগুলি সম্পাদনা এবং প্রস্তুত করার জন্য সুপ্রতিষ্ঠিত এবং তুলনামূলকভাবে কম খরচের কৌশলগুলির কারণে, এগুলি জৈবিক গবেষণায় খুব সাধারণভাবে ব্যবহৃত হয়েছে। 1970-এর দশকে দেখা যায় যে, এম. আর. এন. এ-র মাইক্রোইঞ্জেকশনের ফলে প্রোটিন প্রকাশ পায়। নির্দিষ্ট কিছু পরিস্থিতিতে, ডিএনএ প্লাজমিডগুলির তুলনায় প্রোটিন অভিব্যক্তি প্ররোচিত করার জন্য এমআরএনএ সংক্রমণকে সুবিধাজনক বলে মনে করা হয় কারণ নিম্নলিখিত কারণগুলি জিনোমিক ইন্টিগ্রেশনের ঝুঁকি হ্রাস করে, সাইটোসোলিক ডেলিভারি পর্যাপ্ত হওয়ার সাথে নিউক্লিয়ার ডেলিভারির প্রয়োজন হয় না, প্রোটিন অভিব্যক্তি ডোজ-নির্ভর এবং দ্রুত, কম বিষাক্ত এবং ডিএনএ ভেক্টরের তুলনায় ইমিউনোজেনিক যখন যথাযথভাবে রাসায়নিকভাবে পরিবর্তিত হয়। সুতরাং, বেশিরভাগ থেরাপিউটিক অ্যাপ্লিকেশনের জন্য ডি. এন. এ-র চেয়ে এম. আর. এন. এ-কে একটি ভাল বিকল্প হিসাবে বিবেচনা করা হয় যদিও এটি আরও ব্যয়বহুল এবং অভ্যন্তরীণভাবে অস্থির। অলিগোনিউক্লিওটাইড হল 30টিরও কম দৈর্ঘ্যের ডি. এন. এ বা আর. এন. এ-র একক বা ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড ক্রম। ছোট হস্তক্ষেপকারী আর. এন. এ (এস. আই. আর. এন. এ) হল আর. এন. এ-র ছোট <আই. ডি1> বেস পেয়ার ডুপ্লেক্স যা জিন অভিব্যক্তি নীরব করতে কোষে রূপান্তরিত হতে পারে। 1998 সালে তাদের নোবেল পুরস্কার বিজয়ী আবিষ্কারের পর থেকে, জিন ক্রিয়াকলাপে ব্যাঘাত ঘটানোর জন্য হাজার হাজার জৈবিক গবেষণায় এসআইআরএনএ কোষে রূপান্তরিত হয়েছে। ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির জন্য আগ্রহের অন্যান্য অলিগোনিউক্লিওটাইডগুলির মধ্যে রয়েছে অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইডস (এ. এস. ও), মাইক্রো আর. এন. এ (এম. আই. আর. এন. এ) এবং এপট্যামার। এই ধরনের অলিগোনিউক্লিওটাইড বিভিন্ন পদ্ধতির মাধ্যমে কোষের আচরণ পরিবর্তন করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। লিপিড ন্যানো পার্টিকেলস এবং ইলেক্ট্রোপোরেশন বর্তমানে নিউক্লিক অ্যাসিড ট্রান্সফেকশনের জন্য ব্যাপক কৌশল। যাইহোক, কার্যকর সংক্রমণ অনেক প্রাথমিক কোষ, স্টেম কোষ, রোগী-উদ্ভূত কোষ এবং নিউরনে একটি বাধা হিসাবে রয়ে গেছে। এই ধরনের কোষে জৈবিক গবেষণা পরিচালনা এবং সম্ভাব্য চিকিৎসা প্রয়োগ পরিচালনা করার ক্ষমতা প্রায়শই সংক্রমণ দক্ষতা এবং চিকিত্সার প্রতি সহনশীলতার দ্বারা সীমাবদ্ধ থাকে। উপরন্তু, বর্তমানে মানবদেহের কোষের উপর সংক্রমণ সঞ্চালনের দীর্ঘমেয়াদী প্রভাব সম্পর্কে একটি দুর্বল ধারণা রয়েছে। প্রোটিন এবং পেপটাইড জীবন্ত কোষে প্রোটিন সরবরাহ, যেমন জিনোম-সম্পাদনাকারী নিউক্লিয়াস, সক্রিয় প্রতিরোধমূলক অ্যান্টিবডি বা উদ্দীপক ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর, কোষের কার্যকারিতা পরিচালনা ও বিশ্লেষণের জন্য একটি শক্তিশালী সরঞ্জামের প্রতিনিধিত্ব করে। উপরন্তু, কার্যকরী আন্তঃকোষীয় বিতরণ ব্যবহারযোগ্য প্রোটিন ওষুধের ভাণ্ডারকে প্রসারিত করতে পারে কারণ বেশিরভাগ বর্তমান প্রোটিন-ভিত্তিক থেরাপিউটিক্স বহির্মুখী লক্ষ্যগুলিতে আঘাত করে এবং এটি বর্তমান গবেষণা প্রচেষ্টার একটি সীমানা। কোষে বিশুদ্ধ প্রোটিন সরবরাহ 1960-এর দশকের গোড়ার দিকে শুরু হয়েছিল। উদাহরণগুলির মধ্যে রয়েছে ফেরিটিন দিয়ে মাইক্রোইনজেকশন দেওয়া অ্যামিবা এবং বোভাইন অ্যালবুমিন দিয়ে মাইক্রোইনজেকশন দেওয়া ইঁদুরের ডিম। যেহেতু প্রোটিনের বিভিন্ন আকার, আকৃতি এবং চার্জ থাকে, তাই এগুলি সহজেই এক-আকার-ফিট-সমস্ত সমাধান সহ কোষে সরবরাহ করা যায় না যা ক্যাশিয়ানিক লিপিডগুলি নিউক্লিক অ্যাসিড সংক্রমণের জন্য ব্যবহার করে। এর বিপরীতে, কোষে প্রোটিন সরবরাহের জন্য বিভিন্ন পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছে যার মধ্যে রয়েছেঃ মাইক্রোইনজেকশন, পিনোসোমের অসমোটিক লাইসিস, হাইপোটোনিক শক, স্ক্র্যাপ লোডিং, বিড লোডিং, সিরিঞ্জ লোডিং, ডিটারজেন্ট এক্সপোজার, ইলেক্ট্রোপোরেশন, ছিদ্র-গঠনকারী টক্সিন, কোষ অনুপ্রবেশকারী পেপটাইড, ন্যানোক্যারিয়ার, কোষ চেপে ধরা, ন্যানোনিডলস, অ্যাকোস্টিক বিশৃঙ্খলা এবং বাষ্প ন্যানোবুবল। জিনোম সম্পাদনার উদ্দেশ্যে, এস. জি. আর. এন. এ-র সঙ্গে সংযুক্ত ক্যাস 9 প্রোটিন ইলেক্ট্রোপোরেশন, মাইক্রোইঞ্জেকশন, লিপিড ন্যানোপার্টিকল ফর্মুলেশন, অসমোটিক্যালি ইনডিউসড এন্ডোসাইটোসিস এবং তারপরে এন্ডোসোম ব্যাঘাত, মাইক্রোফ্লুইডিক বিকৃতি এবং কোষের অনুপ্রবেশকারী পেপটাইডস থেকে শুরু করে অন্যান্য পদ্ধতির মাধ্যমে সরবরাহ করা হয়েছে। ছোট অণু আন্তঃকোষীয় সরবরাহের প্রয়োজন হয় এমন ছোট অণুগুলির মধ্যে রয়েছেঃ অভেদ্য ছোট অণু ওষুধ, ছোট অণু প্রোব এবং ক্রায়োপ্রোটেক্ট্যান্ট। প্রথমটির একটি উদাহরণ হল ব্লিওমাইসিন, যা একটি অ্যান্টিক্যান্সার ড্রাগ যার পজিটিভ চার্জ এবং হাইড্রোফোবিসিটির কারণে দুর্বল ব্যাপ্তিযোগ্যতা রয়েছে। ইলেক্ট্রোপোরেশনের মাধ্যমে আন্তঃকোষীয় ডেলিভারি সম্পাদন করে, ব্লিওমাইসিনের শক্তি একশো গুণেরও বেশি বাড়ানো যেতে পারে। ছোট অণু অনুসন্ধানের ক্ষেত্রে, যখন কোষের অভ্যন্তরে সরবরাহ করা হয়, তখন এই অণুগুলি ঝিল্লি সম্ভাব্যতা, পিএইচ এবং আয়নগুলির ঘনত্বের মতো সেলুলার বৈশিষ্ট্যগুলি রিপোর্ট করতে সক্ষম হয়। একটি উদাহরণ হল পি. এফ. বি. আই, একটি ফ্লুরোসেন্ট ডাই যা আন্তঃকোষীয় পটাসিয়ামের ঘনত্ব পরিমাপের জন্য নিযুক্ত করা যেতে পারে। পরিশেষে, কিছু ক্যানডিডেট ক্রায়োপ্রোটেক্ট্যান্ট অণু যেমন অভেদ্য শর্করা অত্যন্ত হাইড্রোফিলিক এবং কোষের ঝিল্লি জুড়ে ছড়িয়ে পড়ে না। উদাহরণস্বরূপ, ট্রেহালোজ (এমডাব্লু = 342 ডিএ) একটি প্রাকৃতিক ডিস্যাকারাইড যা বিভিন্ন জীব দ্বারা সংশ্লেষিত হয় যাতে তাদের নির্জলীকরণ বা হিমায়ন সহ্য করতে সহায়তা করে। 200 মিলিমিটার পর্যন্ত ঘনত্বে প্রাণী কোষে লোড করা ট্রেহ্যালোজ হিমায়িত এবং গলানোর সময় দুর্দান্ত ক্রায়োপ্রোটেকশন সরবরাহ করতে দেখা গেছে। মাইক্রোস্কেলে মাইক্রোস্কেল কার্গো উপকরণগুলি বিভিন্ন প্রয়োগের জন্য কোষে সফলভাবে সরবরাহ করা হয়েছে। এক শতাব্দী ধরে কোষে মাইক্রোস্কেল কার্গো প্রবর্তনের জন্য মাইক্রোইনজেকশন হল প্রভাবশালী পদ্ধতি। একটি সর্বোত্তম উদাহরণ ছিল ব্যাঙের ডিমে একটি সোমাটিক কোষের নিউক্লিয়াসের প্রতিস্থাপন যা দেখায় যে সম্পূর্ণরূপে পৃথক সোমাটিক কোষ থেকে নিউক্লিয়াস একটি ডিমে ঢোকানো হলে একটি নতুন প্রাণীতে পরিণত হতে পারে। প্রাণীদের মধ্যে আইভিএফ ধারণার প্রমাণ হিসাবে ডিমে শুক্রাণু ইনজেকশন দেওয়ার জন্য প্রথম মাইক্রোইনজেকশন ব্যবহার করা হয়েছিল। কৃত্রিম ক্রোমোজোমগুলি প্রুফ-অফ-কনসেপ্ট জিন থেরাপির জন্য মাইক্রোইনজেকশন দ্বারা কোষে ইঞ্জিনিয়ার এবং স্থানান্তরিত করা হয়েছে। মাইক্রোইঞ্জেকশনের মাধ্যমে বিভিন্ন ধরনের কোষে মাইটোকন্ড্রিয়ার প্রতিস্থাপনও প্রদর্শিত হয়েছে। আরও সম্প্রতি ব্যাকটেরিয়া এবং মাইটোকন্ড্রিয়া সরবরাহের উদ্দেশ্যে কোষের ঝিল্লিতে ক্ষণস্থায়ী ছিদ্র খোলার জন্য লেজার-ট্রিগার ক্যাভিটেশন বুদ্বুদ ব্যবহার করা হয়েছে। মাইক্রোইঞ্জেকশন বা ব্যালিস্টিক প্রপালশন ব্যবহার করে, মাইক্রন-স্কেল কণা, গোলক এবং পুঁতি সেলুলার মাইক্রোহিওলজি অধ্যয়নের জন্য কোষে লোড করা হয়েছে যা কোষের অভ্যন্তরীণ যান্ত্রিক আচরণ মূল্যায়ন করে। উদাহরণস্বরূপ, 5.6 মাইক্রন পর্যন্ত মাইক্রোইনজেক্টেড পেগিলেটেড ট্রেসার পুঁতি ব্যবহার করে দেখা গেছে যে মোটর চালিত সাইটোপ্লাজমিক মিশ্রণ ছোট এবং বড় উভয় কোষীয় উপাদানের আন্তঃকোষীয় চলাচলকে যথেষ্ট পরিমাণে উন্নত করে। অন্যান্য অন্তঃকোষীয় সরবরাহের জন্য আগ্রহের অন্যান্য উপকরণগুলির মধ্যে রয়েছে কার্বন ন্যানোটিউব, কোয়ান্টাম ডট, চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেল এবং ন্যানোডিভিস যা সেন্সর বা প্রোব হিসাবে কাজ করে চিকিৎসা অ্যাপ্লিকেশন নিম্নলিখিত চিকিৎসা চিকিত্সার উদাহরণ যা কমপক্ষে একটি ধাপে অন্তঃকোষীয় বিতরণের উপর নির্ভর করে। হেমাটোপোয়েটিক স্টেম সেল-ভিত্তিক জিন থেরাপিঃ অ্যাডেনোসিন ডিঅ্যামিনেজ সিভিয়ার কম্বাইন্ড ইমিউনোডেফিসিয়েন্সি (এ. ডি. এ-এস. সি. আই. ডি)-এর চিকিৎসার জন্য স্ট্রিমভেলিস, যা একটি কার্যকরী অ্যাডেনোসিন ডিঅ্যামিনেজ (এ. ডি. এ) জিনের এক্স ভিভো গামা রেট্রোভাইরাল ভেক্টর জিন সরবরাহের মাধ্যমে উত্পাদিত হয় (ইউরোপীয় অনুমোদন 2017 মঞ্জুর)। স্ট্রিমভেলিস ছিল প্রথম এক্স ভিভো অটোলোগাস জিন থেরাপি যা ইউরোপীয় মেডিসিন এজেন্সি থেকে অনুমোদন লাভ করে। একটি কার্যকরী হিউম্যান অ্যারিলসালফ্যাটেজ এ (এআরএসএ) জিনের এক্স ভিভো লেন্টিভাইরাল জিন সরবরাহের মাধ্যমে উত্পাদিত মেটাক্রোম্যাটিক লিউকোডিস্ট্রোফি (এমএলডি) চিকিত্সার জন্য অ্যাটিডারসাজিন অটোটেমসেল (লিবমেল্ডি হিসাবে ব্র্যান্ডেড) (ইউরোপীয় অনুমোদন 2020 মঞ্জুর)। ট্রান্সফিউশন-ডিপেন্ডেন্ট বিটা থ্যালাসেমিয়া (টিডিটি) চিকিৎসার জন্য বেটিবেলোগোজেন অটোটেমসেল (জিন্টেগ্লো হিসাবে ব্র্যান্ডেড), একটি কার্যকরী মানব এইচবিবি জিনের এক্স ভিভো লেন্টিভাইরাল জিন সরবরাহের মাধ্যমে উত্পাদিত (ইউরোপীয় এবং মার্কিন অনুমোদন 2022 মঞ্জুর)। সি. এ. আর-টি সেল ইমিউনোথেরাপিঃ বি-সেল অ্যাকিউট লিম্ফোব্লাস্টিক লিউকেমিয়া (বি-সেল এ. এল. এল)-এর চিকিৎসার জন্য টিসাজেনলেক্লুসেল (কাইমরিয়া হিসাবে চিহ্নিত), যা সিডি-19-কে লক্ষ্য করে একটি সি. এ. আর জিনের এক্স ভিভো লেন্টিভাইরাল জিন সরবরাহের মাধ্যমে উত্পাদিত হয় (মার্কিন অনুমোদন 2017 মঞ্জুর)। বড় বি-সেল লিম্ফোমার চিকিত্সার জন্য অ্যাক্সিক্যাবট্যাজিন সিলোলিউসেল (ইয়েস্কার্টা হিসাবে ব্র্যান্ডেড), সিডি-19-কে লক্ষ্য করে একটি সিএআর জিনের এক্স ভিভো গামা রেট্রোভাইরাল জিন সরবরাহের মাধ্যমে উত্পাদিত হয় (মার্কিন অনুমোদন 2017 মঞ্জুর)। রিল্যাপ্সড/রিফ্র্যাক্টরি ম্যান্টল সেল লিম্ফোমা (আর/আর এমসিএল) সহ প্রাপ্তবয়স্ক রোগীদের চিকিত্সার জন্য ব্রেক্সুক্যাবটেজিন অটোলেউসেল (টেকার্টাস হিসাবে ব্র্যান্ডেড), সিডি-19-কে লক্ষ্য করে একটি সিএআর জিনের এক্স ভিভো গামা রেট্রোভাইরাল জিন সরবরাহের মাধ্যমে উত্পাদিত হয় (মার্কিন অনুমোদন 2021 মঞ্জুর)। ইন ভিভো ভাইরাল ভেক্টর-মিডিয়েটেড জিন থেরাপিঃ স্পাইনাল মাসকুলার অ্যাট্রোফির চিকিৎসার জন্য ওনাসেমনোজেন অ্যাবেপারভোভেক (জোলগেসমা হিসাবে ব্র্যান্ডেড), একটি এএভি9 ভাইরাল ভেক্টরের ইন্ট্রাভেনাস ইনফিউশন দ্বারা পরিচালিত হয় যা প্রভাবিত মোটর নিউরনে একটি কার্যকরী এসএমএন1 ট্রান্সজিন সরবরাহ করে (মার্কিন অনুমোদন 2019 মঞ্জুর)। লেবার জন্মগত অ্যামোরোসিসের (একটি উত্তরাধিকারসূত্রে প্রাপ্ত রেটিনাল ব্যাধি যা প্রগতিশীল অন্ধত্ব সৃষ্টি করে) চিকিত্সার জন্য ভোরেটিন নেপারভোভেক (লুক্সটার্না হিসাবে ব্র্যান্ডেড), একটি এ. এ. ভি 2 ভাইরাল ভেক্টরের সাবরেটিনাল ইনজেকশন দ্বারা পরিচালিত হয় যা আর. পি. ই 65 মিউটেশনের ক্ষতিপূরণের জন্য চোখের কোষে আর. পি. ই 65 জিনের একটি কার্যকরী অনুলিপি সরবরাহ করে (মার্কিন অনুমোদন 2017 মঞ্জুর)। এস. আই. আর. এন. এ ওষুধঃ বংশগত ট্রান্সথাইরেটিন-মধ্যস্থ অ্যামাইলয়েডোসিসে আক্রান্ত ব্যক্তিদের মধ্যে পলিনিউরোপ্যাথির চিকিত্সার জন্য প্যাটিসিরান (অনপাট্রো), লিপিড ন্যানোপার্টিকেলে তৈরি এস. আই. আর. এন. এ-এর শিরায় আধান দ্বারা পরিচালিত হয় যা প্যাথোজেনিক ট্রান্সথাইরেটিন এম. আর. এন. এ-র অভিব্যক্তি নীরব করার জন্য লিভার কোষে প্রবেশ করে (মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র এবং ইউরোপীয় অনুমোদন 2018 মঞ্জুর)। তীব্র হেপাটিক পর্ফিরিয়ায় আক্রান্ত প্রাপ্তবয়স্কদের চিকিৎসার জন্য জিভোসিরান (গিভ্লারি), যা সিরায় সি. আর. এন. এ-গ্যাল. এন. এ. সি কনজুগেট দ্বারা পরিচালিত হয় যা যকৃতের হেপাটোসাইটগুলিতে প্রবেশ করে প্যাথোজেনিক অ্যামিনোলেভুলিনেট সিন্থেস 1 (এ. এল. এ. এস 1) এম. আর. এন. এ-র অভিব্যক্তি বন্ধ করে দেয় (মার্কিন অনুমোদন 2019 মঞ্জুর)। এমআরএনএ টিকাঃ মডার্না কোভিড-19 টিকা (স্পাইকভ্যাক্স হিসাবে চিহ্নিত) সার্স-কোভ-2 ভাইরাসের সংক্রমণের কারণে সৃষ্ট কোভিড-19-এর বিরুদ্ধে সুরক্ষা প্রদানের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে (মার্কিন জরুরি ব্যবহারের অনুমোদন 2020)। এটি লবণাক্ত অবস্থায় এম. আর. এন. এ-এল. এন. পি কমপ্লেক্সের 0.5 মিলি মাত্রার ইন্ট্রামাসকুলার ইনজেকশন দ্বারা পরিচালিত হয়। স্থানীয় ইনজেকশন আবাসিক/অনুপ্রবেশকারী এপিসি, সম্পর্কিত ইমিউন কোষ এবং পেশী কোষে এমআরএনএ-এলএনপি কমপ্লেক্স সরবরাহ করে বলে জানা গেছে, যা কোভিড স্পাইক প্রোটিনের স্থানীয় অভিব্যক্তি উদ্দীপিত করে ভবিষ্যতে সার্স-কোভ-2-এর সংস্পর্শে আসার বিরুদ্ধে ইমিউন সিস্টেমকে প্রধান করে তোলে। ফাইজার-বায়োএনটেক কোভিড-19 ভ্যাকসিন (কমিরনাটি হিসাবে ব্র্যান্ডেড) সার্স-কোভ-2 ভাইরাসের সংক্রমণের কারণে সৃষ্ট কোভিড-19 এর বিরুদ্ধে সুরক্ষা প্রদানের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে (মার্কিন জরুরি ব্যবহারের অনুমোদন 2020)। লিপিড ন্যানোপার্টিকালের গঠন ভিন্ন, ফাইজার এএলসি-0315 নামে পরিচিত আয়নীকরণযোগ্য লিপিড ব্যবহার করে এবং মডার্না এসএম-102 নামে একটি আয়নীকরণযোগ্য লিপিড ব্যবহার করে। অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইডস (এ. এস. ও): সমজাতীয় পারিবারিক হাইপারকোলেস্টেরোলেমিয়ার চিকিৎসার জন্য মিপোমেরসেন (কাইনাম্রো হিসাবে ব্র্যান্ডেড), রাসায়নিকভাবে পরিবর্তিত এ. এস. ও-এর সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশন দ্বারা পরিচালিত হয় যা 30 দিনের অর্ধ-জীবনের সাথে যকৃতে জমা হয়। প্যাথোজেনিক এপোবি এমআরএনএ (2013 সালে মার্কিন অনুমোদন)-এর অভিব্যক্তি রোধ করতে এ. এস. ওগুলি লিভার কোষে প্রবেশ করে। স্পাইনাল মাসকুলার অ্যাট্রোফি (এস. এম. এ)-র চিকিৎসার জন্য স্পিন্রাজা (নুসিনারসেন হিসাবে ব্র্যান্ডেড), রাসায়নিকভাবে পরিবর্তিত এ. এস. ও-র ইন্ট্রাথেক্যাল ইনজেকশন দ্বারা পরিচালিত হয় যা মোটর নিউরন কোষে প্রবেশ করে, এস. এম. এন. 2 এম. আর. এন. এ-কে আবদ্ধ করে এবং প্রোটিনের অভিব্যক্তি পুনরুদ্ধারের জন্য এস. এম. এন 2 জিনের বিকল্প স্প্লাইসিং পরিবর্তন করে। মানব গর্ভাবস্থার জন্য ইন ভিট্রো ফার্টিলাইজেশন (আইভিএফ): কম শুক্রাণুর সংখ্যা বা গতিশীলতার মতো ক্ষেত্রে, বা যেখানে শুক্রাণু দ্বারা ডিম সহজেই প্রবেশ করা যায় না, সেখানে একক শুক্রাণুকে ইন্ট্রাসাইটোপ্লাজমিক স্পার্ম ইনজেকশন (আই. সি. এস. আই) নামে একটি পদ্ধতি ব্যবহার করে সরাসরি ডিমে মাইক্রোইনজেকশন দেওয়া যেতে পারে। ইনজেকশনের পরে নিষিক্ত ডিমটি একটি বিশেষ বৃদ্ধির মাধ্যমে প্রায় 48 ঘন্টার জন্য ইনকিউবেট করা হয় যতক্ষণ না ডিমটি ছয় থেকে আটটি কোষ নিয়ে গঠিত হয়। এরপরে এটি একটি পাতলা, প্লাস্টিকের ক্যাথেটারের মাধ্যমে রোগীর জরায়ুতে স্থানান্তরিত হয়, যা যোনি এবং জরায়ুর মধ্য দিয়ে যায়। আই. সি. এস. আই দ্বারা সৃষ্ট প্রথম মানব গর্ভাবস্থা 1991 সালে জিয়ানপিয়েরো পালের্মো এবং তাঁর দল দ্বারা পরিচালিত হয়েছিল। আই. সি. এস. আই-এর মাধ্যমে আই. ভি. এফ 1990-এর দশক থেকে বিশ্বব্যাপী লক্ষ লক্ষ গর্ভধারণকে সহজ করেছে। নিরাপত্তা। মানব কোষে পদার্থের আন্তঃকোষীয় সরবরাহের তাৎক্ষণিক এবং দীর্ঘমেয়াদী চিকিৎসা প্রভাবগুলি বোঝার জন্য গবেষণা এখনও প্রাথমিক পর্যায়ে রয়েছে। উদাহরণস্বরূপ, তদন্তে দেখা গেছে যে আই. সি. এস. আই-এর মাধ্যমে জন্ম নেওয়া শিশুরা প্রাকৃতিকভাবে গর্ভধারণ করা শিশুদের তুলনায় বেশি স্বাস্থ্য সমস্যায় ভোগ করে। তবে, এটি পিতামাতার প্রজনন ব্যবস্থার দুর্বল স্বাস্থ্য বা আইভিএফ এবং আই. সি. এস. আই পদ্ধতির দিকগুলির কারণে হয়েছে কিনা তা জানা যায়নি। গামা রেট্রোভাইরাল এবং লেন্টিভাইরাল ভেক্টর দিয়ে প্রস্তুত এইচএসসি-ভিত্তিক জিন থেরাপিতে কিছু ক্ষেত্রে জিনোটক্সিসিটির কারণে লিউকেমিয়ার ঝুঁকি বৃদ্ধি পেয়েছে, যেমনটি স্ট্রিমভেলিসের ক্ষেত্রে ঘটেছে। উপরন্তু, থেরাপিউটিক সিরনা এবং এমআরএনএর আন্তঃকোষীয় সরবরাহের জন্য ব্যবহৃত লিপিডগুলি প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করতে পারে। প্যাটিসিরানের ক্ষেত্রে, ন্যানোপার্টিকেলে প্রতিক্রিয়া হ্রাস করতে একাধিক প্রদাহরোধী ওষুধের সাথে প্রাক-চিকিত্সা ব্যবহার করা হয়। এসএম-102 এবং এএলসি-0315-এর মতো এমআরএনএ ভ্যাকসিনের নতুন রাসায়নিক উপাদানগুলির অন্তঃকোষীয় সরবরাহের চিকিৎসা সংক্রান্ত প্রভাব সম্পর্কে বর্তমানে খুব কম তথ্য পাওয়া যায়, যা প্রাপক জনসংখ্যার স্বল্প ও দীর্ঘমেয়াদী স্বাস্থ্যের উপর প্রভাব ফেলে। সুতরাং, আন্তঃকোষীয় ডেলিভারি ব্যবহার করে এমন চিকিৎসা চিকিৎসার জন্য নিরাপত্তা এবং অনিচ্ছাকৃত পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া একটি গুরুত্বপূর্ণ বিষয় হিসাবে অব্যাহত থাকবে। পদ্ধতির বিভাগ আন্তঃকোষীয় সরবরাহের বর্তমান পদ্ধতিগুলিকে দুটি বিস্তৃত বিভাগে রাখা যেতে পারেঃ মেমব্রেন ডিসরাপশন-মিডিয়েটেড ক্যারিয়ার-মিডিয়েটেড মেমব্রেন ডিসরাপশন মেমব্রেন ডিসরাপশন-মিডিয়েটেড কৌশলগুলির মধ্যে রয়েছে কোষের ঝিল্লিতে অস্থায়ী ছিদ্র তৈরি করা এবং উভয়টির মাধ্যমে পণ্যসম্ভারের অণু সরবরাহ করা এ) এক্সট্রাসেলুলার সলিউশন থেকে উপকরণগুলির ব্যাপ্তিযোগ্যকরণ এবং বিচ্ছুরিত প্রবাহ বি) একটি যানবাহন বা বাহকের সাথে সরাসরি অনুপ্রবেশ যা উভয়ই প্লাজমা ঝিল্লিকে ছিদ্র করে এবং আগ্রহের পণ্যসম্ভারের পরিচয় দেয়। কোষের প্লাজমা ঝিল্লি যান্ত্রিক, বৈদ্যুতিক, রাসায়নিক, আলোকীয় বা তাপীয় উপায়ে বিঘ্নিত হতে পারে। আন্তঃকোষীয় বিতরণ পদ্ধতি যা ব্যাপ্তিযোগ্যকরণকে কাজে লাগায় তার মধ্যে রয়েছেঃ তড়িৎ সংযোজন তাপীয় চিকিত্সা অপ্টোপরেশন (সাধারণত একটি লেজার দিয়ে) ক্যাভিটেশন প্রভাব (সাধারণত আল্ট্রাসাউন্ড বা লেজার/কণার মিথস্ক্রিয়া থেকে) তরল শিয়ার (সাধারণত মাইক্রোফ্লুইডিক্স বা ক্যাভিটেশনের মাধ্যমে) ডিটারজেন্ট/সার্ফ্যাক্ট্যান্ট ছিদ্র-গঠনকারী টক্সিন ওসমোটিক/হাইড্রোস্ট্যাটিক বল সরাসরি যান্ত্রিক পদ্ধতি যেমন মাইক্রোফ্লুইডিক কোষ চেপে ধরা, স্ক্র্যাপ লোডিং, পুঁতি লোড করা। ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারি পদ্ধতি যা সরাসরি অনুপ্রবেশ ব্যবহার করে তার মধ্যে রয়েছেঃ ক্লাসিক মাইক্রোইনজেকশন মাইক্রোইনজেকশনের নতুন রূপ (যেমন। ন্যানোপিপেট, অটোমেশন ইত্যাদি) ব্যালিস্টিক কণা/জিন বন্দুক ন্যানোনিডলস এবং তাদের বৈচিত্র্য যেমন ন্যানোস্ট্রস, ন্যানোস্পিয়ারস এবং ন্যানোওয়্যার। ঝিল্লি ব্যাঘাত-মধ্যস্থ ডেলিভারি পদ্ধতিগুলি প্রায় যে কোনও উপাদান সরবরাহ করতে পারে যা দ্রবণে ছড়িয়ে দেওয়া যেতে পারে, যা তাদের বাহক-মধ্যস্থ পদ্ধতির চেয়ে আরও সর্বজনীন করে তোলে। ঝিল্লি ব্যাঘাত-মধ্যস্থ পদ্ধতির জন্য প্রধান চ্যালেঞ্জ হল প্রয়োজনীয় ডেলিভারি প্রয়োগের জন্য সর্বোত্তম আকৃতি, আকার, অবস্থান এবং সময়কালের গর্ত তৈরি করা। অতিরিক্ত ঝিল্লির ক্ষতি এড়ানো উচিত কারণ এটি কোষগুলিকে মেরে ফেলতে পারে বা তাদের কার্যকারিতা নষ্ট করতে পারে। বাহক বাহক-মধ্যস্থ ডেলিভারি কৌশলগুলি একটি ন্যানোস্কেল বাহকের মধ্যে বা উপরে পণ্যসম্ভারকে প্যাকেজ করে, যা তারপর পণ্যসম্ভার সরবরাহ করার জন্য কোষে প্রবেশ করে। বাহকগুলি সাধারণত কোষের অভ্যন্তরে এন্ডোসাইটোসিস (বেশিরভাগ বাহক) বা কোষের প্লাজমা ঝিল্লির সাথে ফিউশনের মাধ্যমে প্রবেশ করে তবে, কিছু বাহক এখনও পর্যন্ত অজানা প্রক্রিয়াগুলির মাধ্যমে প্লাজমা ঝিল্লি অতিক্রম বা ক্ষণস্থায়ীভাবে ব্যাহত হওয়ার বিরল খবর পাওয়া যায়। বাহক-ভিত্তিক পদ্ধতিগুলি বিভিন্ন জৈব রাসায়নিক সমাবেশ নিয়ে গঠিত, বেশিরভাগ আণবিক থেকে ন্যানোস্কেল মাত্রার। বাহকদের উদ্দেশ্য তিনগুণ, পণ্যসম্ভারকে প্যাকেজ করা এবং এটিকে অবক্ষয় থেকে রক্ষা করা, অভিপ্রায়যুক্ত আন্তঃকোষীয় বগিতে প্রবেশাধিকার অর্জন করা এবং উপযুক্ত সময় এবং অবস্থানে পে-লোড ছেড়ে দেওয়া। বাহকগুলি জৈব-অনুপ্রাণিত হতে পারে, যেমন পুনর্গঠিত ভাইরাস, কণার মতো ভাইরাস, ভেসিকল, কোষ ভূত এবং কার্যকরী লিগ্যান্ড এবং পেপটাইড। এগুলি রসায়ন, উপকরণ বিজ্ঞান এবং ন্যানোটেকনোলজির সংশ্লেষণ কৌশলের উপর ভিত্তি করে হতে পারে, যার মধ্যে জৈব এবং অজৈব উত্স থেকে ম্যাক্রোমোলিকুলার কমপ্লেক্সগুলির সমাবেশ জড়িত। আন্তঃকোষীয় সরবরাহের জন্য যে বাহকগুলি ব্যবহার করা হয়েছে তার মধ্যে রয়েছেঃ পলিমার সমাবেশ লিপিড সমাবেশ লাইপোসোম (লিপিড সমাবেশের বিপরীতে জলীয় অভ্যন্তর সহ ফাঁপা) লবণ কমপ্লেক্স (যেমন। সি. এ. পি. ও. 4-নিউক্লিক অ্যাসিড ঘনীভূত) এক্সোসোম এবং অন্যান্য জৈব-অনুপ্রাণিত ভেসিকল সেল-পেনেট্রেটিং পেপটাইড (সি. পি. পি.), যা প্রোটিন ট্রান্সডাকশন ডোমেন (পি. টি. ডি.) নামেও পরিচিত, লিগ্যান্ড প্রোটিন বা চিনি ভিত্তিক ন্যানোসেম্বলিগুলিকে সংযুক্ত করে (যেমন। চিটোসান) অজৈব ন্যানোক্যারিয়ার (যেমন। মেসোপোরাস সিলিকা, ধাতব ন্যানো পার্টিকেলস, চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেলস) ন্যানোটেকনোলজি-ভিত্তিক বাহক (যেমন। কোয়ান্টাম ডট, কার্বন ন্যানোটিউব) ভাইরাল ভেক্টর (লেন্টিভাইরাস, রেট্রোভাইরাস, অ্যাডেনোভাইরাস, অ্যাডেনো-সম্পর্কিত ভাইরাস (এ. এ. ভি) এবং অন্যান্য ভাইরাসের উপর ভিত্তি করে) পুনরায় উদ্দেশ্যযুক্ত ব্যাকটেরিয়া টক্সিন এবং ভাইরাল উপাদানগুলি বাহকগুলি কীভাবে কোষে প্রবেশ করে তা নিয়ে গবেষণা ইঙ্গিত দেয় যে বেশিরভাগ বাহক এন্ডোসোমাল বিভাগ থেকে সাইটোপ্লাজমে পালানোর আগে এন্ডোসাইটোসিসের মাধ্যমে প্রবেশ করে। ন্যানোক্যারিয়ারদের জন্য উপলব্ধ এন্ডোসাইটোসিসের প্রক্রিয়াগুলির মধ্যে রয়েছে ক্ল্যাথ্রিন-নির্ভর এবং ক্ল্যাথ্রিন-স্বাধীন পথের মাধ্যমে ফাগোসাইটোসিস এবং পিনোসাইটোসিস। লক্ষ্য কোষ দ্বারা নিযুক্ত অভ্যন্তরীণকরণের পথগুলি নির্ভর করে আকার, আকৃতি, উপাদানের গঠন, পৃষ্ঠের রসায়ন এবং/অথবা বাহকের চার্জের উপর। এন্ডোসোম থেকে পালাতে সক্ষম নয় এমন পণ্যসম্ভারগুলি অবক্ষয়ের জন্য লাইসোসোমে পাচার করা হয় বা কোষের পৃষ্ঠে পুনর্ব্যবহার করা হয়। লিপিড ন্যানো পার্টিকেল এবং কোষ-অনুপ্রবেশকারী পেপটাইড সহ বেশিরভাগ অ-ভাইরাল বাহক কৌশলগুলির জন্য প্রায় 1 শতাংশ এন্ডোসোমাল পালানোর কার্যকারিতা রিপোর্ট করা হয়েছে। উপরন্তু, এন্ডোসোম পালানোর সঠিক প্রক্রিয়া অস্পষ্ট রয়ে গেছে এবং এটি একটি চলমান গবেষণার বিষয়। এন্ডোসাইটোসিস ছাড়াও, কিছু বাহক সংমিশ্রণের মাধ্যমে সরাসরি প্লাজমা ঝিল্লির সাথে মিশে যেতে সক্ষম হয়। জীববিজ্ঞানে ফিউশন ইভেন্টগুলির মধ্যে রয়েছে ভেসিকল ফিউশন, সেল-সেল ফিউশন এবং সেল-ভাইরাস ফিউশন। এই ক্ষেত্রে, জক্সটাপোজড ঝিল্লিগুলি নির্দিষ্ট প্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া দ্বারা ঘনিষ্ঠ সংস্পর্শে টানা হয় এবং লিপিড মিশ্রণ এবং পরবর্তী ফিউশন প্রচারের জন্য ইন্টারফেসিয়াল জল বাদ দেওয়া হয়। আবৃত ভাইরাসগুলি লক্ষ্য কোষের ঝিল্লির সাথে সংমিশ্রণে মধ্যস্থতা করার জন্য ট্রান্সমেম্ব্রেন ভাইরাল প্রোটিন নিয়োগ করতে পারে এবং এই প্রক্রিয়াটি ইঞ্জিনিয়ারড ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির জন্য ব্যবহার করা হয়েছে। একটি প্রাথমিক উদাহরণ ছিল লক্ষ্য কোষের প্লাজমা ঝিল্লির সাথে প্রাক-লোড করা লোহিত রক্তকণিকা ভূতগুলিকে ফিউজ করার জন্য সেন্তাই ভাইরাসের ব্যবহার। এই কৌশলের একটি বৈচিত্র্য লক্ষ্য কোষের ঝিল্লিতে ইনফ্লুয়েঞ্জা হেমাগ্লুটিনিনের (এইচ. এ) অভিব্যক্তি ব্যবহার করে, যা তারপর লাল রক্ত কোষের পৃষ্ঠে সিয়ালিক অ্যাসিডের অবশিষ্টাংশগুলিকে ফিউশন প্ররোচিত করতে আবদ্ধ করে। ভাইরোসোম, যা লাইপোসোম বা ভেসিকলগুলিতে পুনর্গঠিত ভাইরাল ঝিল্লির উপাদানগুলির সমন্বয়ে গঠিত, ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির উদ্দেশ্যে ফিউশন ক্ষমতাও প্রদর্শন করে। সেনডাই, ইনফ্লুয়েঞ্জা, ভেসিকুলার স্টোমাটাইটিস এবং অন্যান্য ভাইরাস থেকে ফিউশন উপাদান দিয়ে কার্যকরী ভাইরোসোম তৈরি করা হয়েছে। কিছু এক্সোজোম এবং এক্সট্রাসেলুলার ভেসিকল লক্ষ্য কোষের সাথে মিশে গেছে বলে জানা গেছে এবং চাহিদা অনুযায়ী ফিউজ করার জন্য ইঞ্জিনিয়ারিংও হতে পারে। মজার বিষয় হল, প্রোটিন সরবরাহের জন্য ব্যবহৃত ফিউজোজেনিক লাইপোসোমগুলি ফিউজোজেনিক প্রোটিন বা পেপটাইডের উপস্থিতি ছাড়াই শুধুমাত্র লিপিড সংমিশ্রণকে সংশোধন করে ফিউশন করতে সক্ষম বলে জানা গেছে। ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির জন্য ব্যবহৃত ফিউজোজেনিক বাহকগুলির মধ্যে রয়েছে (1) কোষ ভূত, মৃত কোষ যা তাদের সাইটোপ্লাজমকে কার্গো দ্বারা প্রতিস্থাপিত করেছে, (2) ভাইরোসোম, কার্যকরী ভাইরাল প্রোটিন প্রদর্শনের জন্য কার্গো-লোডেড ভেসিকলগুলি পুনর্গঠন করা হয়েছে এবং (3) ফিউজোজেনিক লাইপোসোম। ভাইরাল ভেক্টর। ভাইরাল ভেক্টরগুলি কোষে প্রবেশের জন্য ভাইরাল সংক্রমণের পথকে কাজে লাগায় তবে ভাইরাল জিনের পরবর্তী অভিব্যক্তি এড়ায় যা প্রতিলিপি এবং প্যাথোজেনিসিটির দিকে পরিচালিত করে। এটি ভাইরাল জিনোমের কোডিং অঞ্চলগুলি মুছে দিয়ে এবং বিতরণ করার জন্য ডিএনএ দিয়ে প্রতিস্থাপন করে করা হয়, যা হয় হোস্ট ক্রোমোজোমাল ডিএনএতে সংহত হয় বা একটি এপিসোডাল ভেক্টর হিসাবে বিদ্যমান। ভাইরাল ভেক্টরগুলি প্রথম 1970-এর দশক থেকে জিন সরবরাহের জন্য নিযুক্ত করা হয়েছিল, যা এসভি 40 বা রেট্রোভাইরাস থেকে নির্মিত হয়েছিল। লেন্টিভাইরাস, রেট্রোভাইরাস, অ্যাডেনোভাইরাস বা অ্যাডেনো-সম্পর্কিত ভাইরাস এবং অন্যান্য ভাইরাসের উপাদানগুলির উপর ভিত্তি করে নতুন প্রজন্মের ভাইরাল ভেক্টর প্ল্যাটফর্ম তৈরি করা হয়েছে। ডিএনএ সরবরাহের জন্য অত্যন্ত কার্যকর হলেও, ভাইরাল ভেক্টরগুলির উল্লেখযোগ্য দুর্বলতাগুলি হল (1) শ্রম-নিবিড় এবং ব্যয়বহুল প্রোটোকল, (2) সুরক্ষা সমস্যা, (3) ইমিউন/প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করার ঝুঁকি, (4) রিকম্বিনেন্ট ভেক্টরের সাথে জিনোমে সংহতকরণ, (5) সন্নিবেশমূলক জিনোটক্সিসিটির ঝুঁকি, এবং (6) সীমিত প্যাকেজিং ক্ষমতা (অ্যাডেনো এবং এএভি সাধারণত 5− 7.5 কেবি বহন করতে সীমাবদ্ধ)। ট্রান্সফেকশনের জন্য ন্যানো পার্টিকেল। নিউক্লিক অ্যাসিডের আন্তঃকোষীয় সরবরাহের জন্য সর্বাধিক ব্যবহৃত ন্যানো পার্টিকেলগুলি ক্যাশনিক লিপিড এবং পলিমারের সমাবেশের উপর ভিত্তি করে। এই ক্যাশনিক অণুগুলি ডিএনএ প্লাজমিড (~ 50-200 এনএম), এমআরএনএ (10-100 এনএম) এবং অন্যান্য নিউক্লিক অ্যাসিডগুলিকে ("ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির জন্য আগ্রহের সাধারণ অণুগুলির বৈশিষ্ট্য" দেখুন) দশ ন্যানোমিটার পর্যন্ত মাত্রা সহ কম্প্যাক্ট ন্যানো পার্টিকেলে ঘনীভূত করে। এই কণাগুলির ধনাত্মক আধান বেশিরভাগ প্রাণী কোষের প্রাকৃতিক ঋণাত্মক আধানের (−35 থেকে −80 mV ঝিল্লি সম্ভাব্যতা) কারণে কোষ পৃষ্ঠের প্রতি তাদের আকর্ষণকে সহজতর করে। বাঁধাইয়ের পরে, এন্ডোসাইটোসিস 100 এনএম এর নিচে আকারের পরিসরের কণাগুলির জন্য সবচেয়ে কার্যকর বলে মনে করা হয়। ন্যানো পার্টিকেলে জটিলতা নিউক্লিক অ্যাসিডগুলিকে অবক্ষয়ের বিরুদ্ধে সুরক্ষা প্রদান করে যতক্ষণ না সেগুলি উপযুক্ত আন্তঃকোষীয় বগিতে ছেড়ে দেওয়া হয়। 1960-এর দশক থেকে দেখা যায় যে নিউক্লিক অ্যাসিডের সঙ্গে ক্যাটিয়ানিক অণুর মিশ্রণের ফলে ম্যাক্রোমোলিকুলার কমপ্লেক্স তৈরি হয় যা কোষকে সংক্রামিত করতে পারে। দুটি প্রাথমিক উদাহরণ ছিল পলিমার ডাইথাইলামিনোইথাইল-ডেক্সট্রান (ডিইএই-ডেক্সট্রান)/নিউক্লিক অ্যাসিড সংমিশ্রণ (1968) এবং অদ্রবণীয় আয়নিক লবণ ক্যালসিয়াম ফসফেট/নিউক্লিক অ্যাসিড অবক্ষেপক (1973)। সংক্রমণের জন্য ক্যাশিয়ানিক লিপিডের ব্যবহার 1980-এর দশকে শুরু হয়, যাকে "লাইপোফেকশন" বলা হয় এবং 1993 সালে চালু হওয়া জনপ্রিয় পণ্য লাইপোফেকটামিনের ভিত্তি হয়ে ওঠে। 1990-এর দশকে ডেনড্রিমারের উপর ভিত্তি করে অন্যান্য ক্যাশনিক ট্রান্সফেকশন বিকারক তৈরি করা হয়েছিল যেমন 1993 সালে পিএএমএএম (1990-এর দশকের শেষের দিকে চালু হওয়া "সুপারফেক্ট" বিকারক) এবং 1995 সালে পিইআই-এর মতো ক্যাশনিক পলিমার (শীঘ্রই "পলিজেট" হিসাবে বাজারজাত করা হয়)। বর্তমানে গবেষণায়, বেশিরভাগ নিউক্লিক অ্যাসিড ট্রান্সফেকশন লিপিড বিকারকগুলির সাথে সঞ্চালিত হয়, পলিমার বিকারক এবং ইলেক্ট্রোপোরেশন অন্যান্য প্রধান বিকল্প হিসাবে। কিছু পুনরাবৃত্ত কোষ বা ইন ভিভো অ্যাপ্লিকেশন ভাইরাল ভেক্টরের জন্য আরও উপযুক্ত হতে পারে। প্রযুক্তিগত অগ্রগতি মাইক্রোফ্যাব্রিকেশন, ন্যানোপ্রযুক্তি, রসায়ন এবং অন্যান্য গবেষণা ক্ষেত্রে ঝিল্লির ব্যাঘাতের অগ্রগতি আন্তঃকোষীয় বিতরণ পদ্ধতির নির্ভুলতা এবং কার্যকারিতার উন্নতিতে অবদান রেখেছে। বৈদ্যুতিন সংযোজন। ইলেক্ট্রোপোরেশনের প্রাথমিক সংস্করণগুলি একটি কিউভেটের দ্রবণে কোষে সংজ্ঞায়িত ভোল্টেজের বৈদ্যুতিক স্পন্দন প্রয়োগ করতে বাল্ক ইলেক্ট্রোড ব্যবহার করত। 90-এর দশকের শেষের দিকে মাইক্রোফ্লুইডিক্স ব্যবহারের মাধ্যমে বৈদ্যুতিন সংযোজনকে মাইক্রোস্কেলে আনা হয়েছিল। এর পরে ন্যানো-ইলেকট্রোপোরেশন ন্যানো অ্যাপারচার এবং ন্যানোস্ট্রোর ব্যবহারের মাধ্যমে অর্জন করা হয়েছিল। ইলেক্ট্রোপোরেশনের ন্যানো এবং মাইক্রো সংস্করণগুলি লক্ষ্য কোষে আরোপিত ঝিল্লি বিঘ্নের আকার এবং অবস্থানের উপর অনেক বেশি নির্ভুলতা এবং নিয়ন্ত্রণ বৈশিষ্ট্যযুক্ত। ম্যাক্সসাইট নামে একটি সংস্থা ফ্লো ইলেক্ট্রোপোরেশনের একটি উচ্চ-থ্রুপুট সংস্করণ তৈরি করেছে যা কয়েক মিনিটের মধ্যে লক্ষ লক্ষ কোষ প্রক্রিয়াকরণ করতে পারে। উপরন্তু, অন্যান্য গবেষণা গোষ্ঠীগুলি উচ্চ থ্রুপুট মাল্টি-ওয়েল সিস্টেমে বৈদ্যুতিন সংযোজন পরামিতিগুলি উন্নত করতে গভীর শিক্ষাকে নিযুক্ত করেছে। যান্ত্রিক যোগাযোগ। কোষের ঝিল্লিতে আঘাত করা বস্তুর যান্ত্রিক শক্তিকে কাজে লাগানোর জন্য আন্তঃকোষীয় বিতরণ প্রোটোকলের প্রথম সংস্করণগুলি ছিল স্ক্র্যাপ লোডিং এবং কাচের পুঁতি লোডিংয়ের মতো সহজ এবং অপরিশোধিত পদ্ধতি। উদাহরণস্বরূপ, স্ক্র্যাপ লোডিং-এ, একটি স্প্যাটুলাকে একটি সমতল স্তরের উপর কালচার করা আনুগত্য কোষগুলির মধ্যে টেনে নিয়ে যাওয়া হয়। কোষগুলি স্তর থেকে খোসা ছাড়ার সাথে সাথে তারা পরিবর্তনশীল পরিমাণে ঝিল্লির ক্ষতির মধ্য দিয়ে যায় এবং দ্রবণে অণু গ্রহণ করতে সক্ষম হয়। কোষের মধ্যে প্রোটিন এবং ছোট অণু প্রবর্তনের জন্য অনেক জৈবিক গবেষণায় স্ক্র্যাপ এবং পুঁতি লোডিং ব্যবহার করা হয়েছে। 1990-এর দশকের শেষের দিক থেকে গবেষকরা ন্যানোনিডল এবং মাইক্রোফ্যাব্রিকেটেড ডিভাইস ব্যবহারের মাধ্যমে কঠিন চুক্তি-ভিত্তিক ঝিল্লি ব্যাঘাতের নির্ভুলতা উন্নত করার জন্য কাজ করেছেন। 2003 সালে নিউক্লিক অ্যাসিড ট্রান্সফেকশনের জন্য প্রথম ন্যানোনিডল ব্যবহার করা হয় এবং তারপর 2010 সালে বিভিন্ন পণ্য সরবরাহের প্রদর্শন করা হয়। আরও কার্যকারিতা যোগ করার জন্য এগুলিকে বৈদ্যুতিন সংযোজন, প্রবাহ জলাধার এবং ডিটারজেন্টের সাথে একত্রিত করা হয়েছে। উপরন্তু, সময়-সমাধান পদ্ধতিতে কোষে অণু সন্নিবেশ এবং নিষ্কাশন উভয় ক্ষেত্রেই ন্যানোস্ট্রোগুলি ব্যবহার করা হয়েছে। 1999 সালে দেখা যায় যে পলিকার্বনেট ফিল্টারগুলির ছিদ্রগুলির মধ্য দিয়ে কোষগুলি পাস করা ডিএনএ সংক্রমণ অর্জনের জন্য কোষের ঝিল্লিতে অস্থায়ী ব্যাঘাত সৃষ্টি করে। পদ্ধতিটিকে "ফিল্ট্রোপোরেশন" বলা হত এবং সেই সময়ে এটি খুব বেশি মনোযোগ পায়নি। 2012 সালে এম. আই. টি-র গবেষকরা দেখতে পান যে সিলিকন মাইক্রোফ্লুইডিক যন্ত্রগুলিতে সংকোচনগুলির মধ্য দিয়ে কোষগুলি প্রবাহিত করা বিভিন্ন উপকরণের আন্তঃকোষীয় বিতরণ অর্জনের জন্য কোষের ঝিল্লিকে ব্যাহত করতে সক্ষম। কোষ সংকোচন নামে পরিচিত এই পদ্ধতিটি এসকিউজেড বায়োটেক নামে একটি সংস্থায় ছড়িয়ে দেওয়া হয়েছিল যা কোষ-ভিত্তিক থেরাপিগুলি বিকাশের জন্য আন্তঃকোষীয় বিতরণ প্রযুক্তি ব্যবহার করার উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে। কোষের প্রবাহের গতি এবং মাইক্রোফ্লুইডিক সংকোচনের আকৃতি ও আকার সামঞ্জস্য করে, কোষের সংকোচন বিভিন্ন কোষের প্রকার এবং বিতরণ প্রয়োগের জন্য উপযুক্ত করা যেতে পারে। অন্যান্য গবেষণা দলগুলি মাইক্রোসিভ এবং পি. ডি. এম. এস-ভিত্তিক মাইক্রোফ্লুইডিক যন্ত্রগুলিতে কোষের সংকোচন ধারণাটি প্রদর্শন করেছে। নিউক্লিয়াসে ডি. এন. এ এবং অন্যান্য উপকরণের দ্রুত সরবরাহ অর্জনের জন্য কোষের সংকোচনকে ইলেক্ট্রোপোরেশনের সাথে একত্রিত করা হয়েছে। এটি প্রথমে প্লাজমা ঝিল্লিতে ছিদ্র প্রবর্তনের মাধ্যমে কাজ করে, তারপরে একটি বৈদ্যুতিক স্পন্দন 1) পারমাণবিক ঝিল্লিকে ব্যাহত করে এবং 2) কোষে নেতিবাচকভাবে চার্জ করা নিউক্লিক অ্যাসিডগুলিকে চালিত করে। মাইক্রোফ্লুইডিক কোষ চেপে ধরার পরে ডাউনস্ট্রিম ইলেক্ট্রোপোরেশন পারমাণবিক ঝিল্লিতে অস্থায়ী ব্যাঘাত ঘটায় যা 15 মিনিটের মধ্যে মেরামত করা হয়েছিল। তরল শিয়ার। কোষের ঝিল্লিকে নিয়ন্ত্রণযোগ্যভাবে বিঘ্নিত করার জন্য তরল শিয়ার বল ব্যবহারের প্রাথমিক উদাহরণগুলির মধ্যে রয়েছে প্রচলিত আল্ট্রাসাউন্ড, সাসপেনশনে কোষগুলির জন্য সিরিঞ্জ লোড করা এবং আনুগত্য কোষে শঙ্কু-প্লেট ভিসকোমিটারের ব্যবহার। সিরিঞ্জ লোড করার সময়, কোষের সাসপেনশনগুলি একটি সূক্ষ্ম সুই টিপের মাধ্যমে একটি সিরিঞ্জ থেকে চুষে বের করে দেওয়া হয়। সূঁচের অগ্রভাগে তরল শিয়ার বল প্রবাহের বেগের উপর নির্ভর করে এবং কোষের ঝিল্লিকে ব্যাহত করার জন্য তৈরি করা যেতে পারে। 1990-এর দশক থেকে, কোষগুলিকে ব্যাপ্তিযোগ্য করার জন্য তরল শিয়ার বল প্রয়োগের আরও সুনির্দিষ্ট কৌশলগুলির মধ্যে রয়েছে মাইক্রোফ্লুইডিক্স, আল্ট্রাসাউন্ড, শক ওয়েভ এবং লেজার-ভিত্তিক পদ্ধতি। জলীয় পরিবেশে একটি শোষক বস্তুর লেজার বিকিরণ ক্যাভিটেশন, প্লাজমা উৎপাদন, রাসায়নিক প্রতিক্রিয়া এবং তাপ সহ বিভিন্ন প্রভাব তৈরি করতে পারে। লেজার-কণা এবং লেজার-পৃষ্ঠের মিথস্ক্রিয়া উভয়ই ক্যাভিটেশন ইভেন্ট তৈরি করতে কাজে লাগানো হয়েছে যা কোষগুলিকে স্থানীয়ভাবে ঘনীভূত তরল শিয়ার শক্তির সংস্পর্শে আনে। উদাহরণস্বরূপ, একটি ধাতব ন্যানোস্ট্রাকচার বীজ কাঠামো হিসাবে স্বল্প লেজার পালস শক্তি সংগ্রহ করতে এবং এটিকে অত্যন্ত স্থানীয় বিস্ফোরক বাষ্প বুদ্বুদে রূপান্তর করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। এই ধারণার একটি উচ্চ থ্রুপুট সংস্করণ 2015 সালে উন্মোচন করা হয়েছিল, ধাতব শোষক দ্বারা রেখাযুক্ত ছিদ্রগুলির সাথে সজ্জিত সাবস্ট্রেটগুলি আনুগত্য কোষের বেসাল পাশের নীচে বিস্ফোরিত ক্যাভিটেশন বুদ্বুদ তৈরি করতে বিকিরণ করা হয়েছিল। বিভিন্ন ধরনের কোষের সাইটোপ্লাজমে জীবন্ত ব্যাকটেরিয়া (> 1 মাইক্রন) সফলভাবে প্রবর্তনের জন্য ছিদ্রগুলির মাধ্যমে পণ্যসম্ভারের সক্রিয় পাম্পিংয়ের সাথে মেমব্রেন পারমিয়াবিলাইজেশনকে সমন্বিত করা হয়েছিল। তাপীয় প্রভাব। কোষে অণু সরবরাহের একটি সহজ উপায় হল ছিদ্র তৈরি না হওয়া পর্যন্ত প্লাজমা ঝিল্লিকে গরম করা। পর্যাপ্ত উচ্চ তাপমাত্রায়, লিপিড দ্বিস্তরীয় স্তরগুলি বিচ্ছিন্ন হয়ে যায় কারণ উপাদান অণুগুলির গতিশক্তি ঝিল্লি গঠন বজায় রাখার শক্তির চেয়ে বেশি, যথা হাইড্রোফোবিক শক্তি যা লিপিড লেজ থেকে জলকে প্রতিহত করে। এই পদ্ধতির নেতিবাচক দিকটি হল এটি অবিশ্বাস্যভাবে অ-নির্দিষ্ট এবং কোষের অত্যধিক ক্ষতি করতে পারে। তাপীয় উপায়ে কোষগুলিকে ব্যাপ্তিযোগ্য করার কৌশলগুলির মধ্যে রয়েছে (1) শীতলকরণ-গরম করার চক্রের মাধ্যমে কোষগুলিকে সাইক্লিং করা, যা হিমায়িত হতে পারে বা নাও হতে পারে, (2) সুপারফিজিওলজিকাল তাপমাত্রায় গরম করার জন্য কোষগুলি, এবং (3) কোষের একটি ছোট অংশের ক্ষণস্থায়ী তীব্র গরম করা। পরের ক্ষেত্রে, তাপীয় ইঙ্কজেট প্রিন্টারগুলি প্রাণী কোষে আন্তঃকোষীয় বিতরণ এবং সংক্রমণের জন্য সফলভাবে ব্যবহার করা হয়েছে। লেজার-কণার মিথস্ক্রিয়া সঠিকভাবে কোষের ঝিল্লিকে তাপীয়ভাবে ব্যাহত করে বলে জানা গেছে। সোনার ন্যানোপার্টিকালগুলি একটি ঘন পৃষ্ঠ স্তরে প্যাক করা হয়েছিল যেখানে 10 সেকেন্ডের বেশি ইনফ্রারেড লেজার বিকিরণ কোষের নিচের অংশকে গরম করে এবং রঙ, ডেক্সট্রান্স এবং প্লাজমিডগুলির ব্যাপ্তিযোগ্যকরণ এবং বিতরণকে ট্রিগার করে। 2021 সালে এই ধারণাটি আরও বিকশিত হয়েছিল যখন গবেষকরা দেখিয়েছিলেন যে জৈব-সামঞ্জস্যপূর্ণ ইলেক্ট্রোস্পুন ন্যানোফাইবারে এম্বেড করা হালকা-সংবেদনশীল আয়রন অক্সাইড ন্যানো পার্টিকেলগুলি কোষ এবং ন্যানো পার্টিকেলগুলির মধ্যে সরাসরি যোগাযোগ ছাড়াই ফটোথার্মাল প্রভাব দ্বারা ঝিল্লি ব্যাপ্তিযোগ্যকরণকে ট্রিগার করতে পারে। এই পদ্ধতিটি ভ্রূণের স্টেম সেল এবং হার্ড-টু-ট্রান্সফেক্ট টি কোষ সহ আনুগত্য এবং সাসপেনশন কোষে সি. আর. আই. এস. পি. আর-সি. এ. এস 9 যন্ত্রপাতি এবং সি. আর. এন. এ সরবরাহ করতে সক্ষম ছিল। কার্গো এবং বাহক এম. আর. এন. এ ওষুধের জৈব রাসায়নিক বর্ধন। লিপিড ন্যানো পার্টিকেল গঠন এবং নিউক্লিক অ্যাসিড রসায়নের অগ্রগতি নিউক্লিক অ্যাসিড থেরাপিউটিক্সের বিকাশে গুরুত্বপূর্ণ, যেমন এমআরএনএ টিকা। উদাহরণস্বরূপ, ক্যাশনিক আয়নীকরণযোগ্য লিপিডগুলির নকশা, যা লিপিড ন্যানোপার্টিকাল গঠনের একটি মূল উপাদান, প্রাথমিক এন্ডোসোমাল পিএইচ-এর কাছাকাছি একটি অ্যাসিড বিচ্ছিন্নতা ধ্রুবক (পিকেএ) সহ এন্ডোসোমাল মুক্তিকে সক্ষম করে। মডার্নার কোভিড ভ্যাকসিনে লিপিড ন্যানো পার্টিকেলগুলি আয়নীকরণযোগ্য লিপিড এস. এম-102, কোলেস্টেরল, 1,2-ডিস্টিয়ারয়েল-স্ঙ্গ্লিসেরো-3 ফসফোকোলিন (ডি. এস. পি. সি) এবং পি. ই. জি 2000-ডি. এম. জি দ্বারা গঠিত যা এম. আর. এন. এ-কে আবদ্ধ করে। ফাইজার/বায়োএনটেক কোভিড টিকা অ্যাকিউটাস থেরাপিউটিক্স থেকে এএলসি-0315 লিপিড ব্যবহার করে এবং এমআরএনএর সাথে কোলেস্টেরল, ডিএসপিসি এবং একটি পিইজি-লিপিড (এএলসি-0159) দিয়ে এটি তৈরি করে। ইন্ট্রামাসকুলার ইনজেকশনের পরে, ন্যানো পার্টিকেলগুলি কোষে প্রবেশ করে, এমআরএনএ সাইটোপ্লাজমে মুক্তি পায় এবং সার্স-কোভ2 স্পাইক প্রোটিনের অভিব্যক্তি রোগীর কোষে ঘটে। সিরনা ওষুধ। প্যাটিসিরান, 2018 সালে এফ. ডি. এ থেকে নিয়ন্ত্রণমূলক অনুমোদন প্রাপ্ত প্রথম এস. আই. আর. এন. এ ভিত্তিক ওষুধ, লিপিড ন্যানোপার্টিকল ফর্মুলেশনের উপর ভিত্তি করে যা ট্রান্সথাইরেটিন জিনের একটি অস্বাভাবিক প্যাথোজেনিক ফর্মের নীরবতার জন্য লিভারে এস. আই. আর. এন. এ প্যাকেজ এবং বিতরণ করে। থেরাপিউটিক সি. আর. এন. এ দুটি লিপিড এক্সাইপেন্ট, ডি. এলিন-এম. সি3-ডি. এম. এ এবং পি. ই. জি2000-সি-ডি. এম. জি দিয়ে তৈরি করা হয়, একটি লিপিড ন্যানোপার্টিকেলে যা রোগীর শিরায় প্রবেশ করে এবং লিভারে হেপাটোসাইটগুলিকে লক্ষ্য করে। উপরন্তু, এস. আই. আর. এন. এ থেরাপিউটিক্সে রাসায়নিকভাবে পরিবর্তিত নিউক্লিওটাইডগুলি রাসায়নিক স্থিতিশীলতা এবং কার্যকারিতা উন্নত করে, নির্দিষ্ট ধরনের কোষকে লক্ষ্য করতে সহায়তা করে এবং প্রতিকূল ইমিউনোলজিকাল প্রতিক্রিয়া হ্রাস করতে সহায়তা করে। ছোট অণু, কার্বোহাইড্রেট, অ্যাপট্যামার, পেপটাইড এবং অ্যান্টিবডি সহ বিভিন্ন লিগ্যান্ডকে সি. আর. এন. এ-র সঙ্গে সমযোজীভাবে যুক্ত করা হয়েছে যাতে কোষের গ্রহণ উন্নত হয় এবং নির্দিষ্ট ধরনের কোষকে লক্ষ্য করা যায়। উদাহরণস্বরূপ, গ্যালএনএসি-এসআইআরএনএ কনজুগেটগুলি কেবল ক্যাটিয়ানিক উপকরণের প্রয়োজন ছাড়াই লিগ্যান্ড ভিত্তিক কোষ অভ্যন্তরীণকরণের জন্য একটি পদ্ধতি সরবরাহ করে না, তবে বিশেষভাবে হেপাটোসাইটগুলিকেও লক্ষ্য করে। গ্যালএনএসি-সিরএনএ কনজুগেটগুলি দ্বিতীয় এফডিএ-অনুমোদিত সিরএনএ ওষুধ, গিভোসিরানে নিযুক্ত করা হয়েছিল, যা যকৃতে এএলএএস1 এক্সপ্রেশনকে ডাউন-রেগুলেট করে তীব্র হেপাটিক পর্ফিরিয়ার চিকিত্সার জন্য পরিচালিত হয়। এএসও ওষুধ। প্রথম অনুমোদিত অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইডস (এ. এস. ও) ওষুধটি 1998 সালে ফমিভিরসেনের সাথে উন্মোচন করা হয়েছিল, একটি 21-মের অলিগোনিউক্লিওটাইড যা সাইটোমেগালোভাইরাস এম. আর. এন. এ-এর অনুবাদকে বাধা দেয়। প্রাক-এম. আর. এন. এ বা এম. আর. এন. এ বাঁধাইয়ের মাধ্যমে, এ. এস. ও-রা প্রাক-এম. আর. এন. এ প্রক্রিয়াকরণ এবং স্প্লাইসিং, প্রতিযোগিতামূলক প্রতিরোধ, ট্রান্সলেশন যন্ত্রপাতির স্টেরিক অবরোধ এবং আবদ্ধ লক্ষ্য আর. এন. এ-র অবক্ষয় সহ প্রক্রিয়াগুলির মাধ্যমে প্রতিলিপি-পরবর্তী প্রোটিন সংশ্লেষণ নিয়ন্ত্রণ করতে পারে। এএসও নিউক্লিওসাইড, নিউক্লিওবেস এবং ইন্টার্নুক্লিওসাইড মেরুদণ্ডের রাসায়নিক পরিবর্তনগুলি লক্ষ্য আকর্ষণ এবং কার্যকারিতা বজায় রেখে ফার্মাকোকাইনেটিক্স এবং ফার্মাকোডাইনামিক্সের উন্নতির মূল চাবিকাঠি। থেরাপিউটিকভাবে কার্যকর এ. এস. ওগুলি ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয়, তাই তাদের আন্তঃকোষীয় প্রসবের জন্য কোনও বাহকের প্রয়োজন হয় না। বেশিরভাগ চিকিৎসাগতভাবে প্রযোজ্য এ. এস. ও হল নগ্ন অণু যা এন্ডোসাইটোসিসের মাধ্যমে কোষে প্রবেশ করতে এবং তাদের আন্তঃকোষীয় লক্ষ্যকে আবদ্ধ করে তাদের থেরাপিউটিক প্রভাব প্রয়োগ করতে সক্ষম। উন্নত ভাইরাল ভেক্টর। প্রায় 70 শতাংশ জিন থেরাপি ক্লিনিকাল ট্রায়াল জিন বিতরণ ধাপের জন্য ভাইরাল ভেক্টর ব্যবহার করেছে। অ্যাডেনোভাইরাস, অ্যাডেনো-সম্পর্কিত ভাইরাস (এ. এ. ভি) এবং লেন্টিভাইরাল ভেক্টর বর্তমানে জৈবপ্রযুক্তি এবং ক্লিনিকাল প্রয়োগে ব্যবহৃত প্রধান ভাইরাল ভেক্টর। ভাইরাল ভেক্টরের উন্নতির একটি বিশিষ্ট উদাহরণ হল এ. এ. ভি। ভেক্টর ইঞ্জিনিয়ারিং এএভি ট্রান্সডাকশন দক্ষতা (ট্রান্সজিন ক্যাসেটকে অনুকূল করে), ভেক্টর ট্রপিজম (ক্যাপসিড ইঞ্জিনিয়ারিং ব্যবহার করে) এবং ক্যাপসিড এবং ট্রান্সজিনের হোস্ট ইমিউন প্রতিক্রিয়া এড়ানোর ক্ষমতা (জিনগতভাবে এই উপাদানগুলিকে সংশোধন করে), পাশাপাশি এএভির বড় আকারের উৎপাদনকে অনুকূল করতে পারে। এ. এ. ভি ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের আরেকটি উদাহরণে, মেশিন লার্নিং এ. এ. ভি রূপগুলি তৈরি করতে প্রয়োগ করা হয়েছে যা পূর্ববর্তী এক্সপোজার থেকে ইমিউন প্রতিক্রিয়াগুলিকে এড়াতে পারে। ভাইরাসের মতো কণা। ভাইরাস-সদৃশ কণা (ভিএলপি) হল ভাইরাল প্রোটিনের সমাবেশ যা ভাইরাল জেনেটিক উপাদান ছাড়াও বা তার পরিবর্তে এমআরএনএ, প্রোটিন বা আরএনপি-র মতো পণ্যসম্ভার সামগ্রী প্যাকেজ করে। যেহেতু ভিএলপিগুলি বিদ্যমান ভাইরাল স্ক্যাফোল্ডগুলি থেকে উদ্ভূত হয়, তাই তারা ভাইরাসগুলির প্রাকৃতিক বৈশিষ্ট্যগুলি কাজে লাগায় যা কার্যকরী আন্তঃকোষীয় বিতরণকে সক্ষম করে, যার মধ্যে রয়েছে কার্গোগুলিকে আবদ্ধ করার ক্ষমতা, এন্ডোসোমগুলি থেকে পালানোর ক্ষমতা এবং বিভিন্ন ধরনের কোষকে লক্ষ্য করার জন্য পুনরায় প্রোগ্রাম করা। যাইহোক, ভাইরাসের বিপরীতে, ভিএলপিগুলি ডিএনএর পরিবর্তে এমআরএনএ বা প্রোটিন হিসাবে তাদের পণ্য সরবরাহ করতে পারে, যা ভাইরাল জিনোম একীকরণের ঝুঁকি যথেষ্ট পরিমাণে হ্রাস করে। ভিএলপিগুলি জিন সম্পাদনা এজেন্টের মতো আণবিক পণ্য সরবরাহের জন্য আগ্রহী কারণ তারা ভাইরাল এবং নন-ভাইরাল ডেলিভারি উভয়েরই সুবিধা প্রদান করতে পারে। ইঞ্জিনিয়ারড ডিএনএ-মুক্ত ভিএলপিগুলি সম্প্রতি জিন সম্পাদনার উদ্দেশ্যে স্তন্যপায়ী কোষে বেস এডিটর বা ক্যাস 9 রাইবোনিউক্লিওপ্রোটিনগুলি দক্ষতার সাথে প্যাকেজ এবং সরবরাহ করতে দেখানো হয়েছে। তথ্যসূত্র জিন বিতরণ জৈবপ্রযুক্তি