Adherent culture
আনুগত্য কোষ সংস্কৃতি হল এক ধরনের কোষ সংস্কৃতি যার বৃদ্ধির জন্য কোষগুলিকে একটি পৃষ্ঠের সাথে সংযুক্ত করা প্রয়োজন। বেশিরভাগ মেরুদণ্ডী প্রাণী থেকে উদ্ভূত কোষগুলি (হেমাটোপোয়েটিক কোষ ব্যতীত) কালচার করা যেতে পারে এবং কোষের আনুগত্য এবং বিস্তারকে সহজতর করার জন্য একটি দ্বিমাত্রিক মনোলেয়ারের প্রয়োজন হয়। কোষের নমুনা টিস্যু এক্সপ্ল্যান্ট বা সেল সাসপেনশন কালচার থেকে নেওয়া যেতে পারে। পুষ্টিকর বৃদ্ধির মাধ্যমের আধিক্য সহ অনুসারী কোষ সংস্কৃতি ততক্ষণ পর্যন্ত বৃদ্ধি পেতে থাকবে যতক্ষণ না তারা উপলব্ধ পৃষ্ঠ এলাকা জুড়ে থাকে। ট্রিপসিনের মতো প্রোটিজগুলি সাধারণত কোষ থেকে ফ্লাস্কের সংযুক্তি ভাঙতে ব্যবহৃত হয়। বিকল্পভাবে, সেল স্ক্র্যাপারগুলি যান্ত্রিকভাবে আঠালো ভাঙতে ব্যবহার করা যেতে পারে যদি প্রোটিজগুলি প্রবর্তন করা কোষ সংস্কৃতির ক্ষতি করতে পারে। সাসপেনশন কালচারের বিপরীতে, অন্যান্য প্রধান ধরনের কোষ কালচার, আনুগত্য কালচারের জন্য যান্ত্রিক বা এনজাইম্যাটিক বিচ্ছিন্নতা ব্যবহার করে নিয়মিত উত্তরণের প্রয়োজন হয়। একটি উল্টানো মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে কালচারটি কল্পনা করা যেতে পারে, তবে আনুগত্য কালচারের বৃদ্ধি উপলব্ধ পৃষ্ঠের এলাকার উপর নির্ভরশীল। এই কারণে, আনুগত্য কোষ সংস্কৃতি সাধারণত কোষের উচ্চ ফলন অর্জনের জন্য ব্যবহৃত হয় না, পরিবর্তে সাসপেনশন সংস্কৃতির ব্যবহার পছন্দ করা হয়। পদ্ধতি এবং রক্ষণাবেক্ষণ কোষ বিচ্ছিন্নকরণ আনুগত্য সংস্কৃতির জন্য ব্যবহৃত প্রাথমিক কোষগুলিকে অবশ্যই একটি বিষয় থেকে বিচ্ছিন্ন এবং চিকিত্সা করা উচিত, অথবা পূর্ব-বিদ্যমান কোষের রেখা থেকে স্থানান্তরিত হতে পারে। অনুসারী কোষগুলিকে প্রথমে একটি পৃষ্ঠের সাথে সংযুক্ত একটি মনোলেয়ারে স্থানান্তরিত করতে হবে এবং তাদের অঙ্গসংস্থানগত পার্থক্য দ্বারা শ্রেণীবদ্ধ করা হয়। ফাইব্রোব্লাস্টের মতো অনুবর্তী কোষগুলির একটি রৈখিক এবং প্রসারিত আকৃতি থাকে এবং মনোলেয়ারের সাথে সংযুক্ত হলে স্থানান্তরিত হয়। এপিথেলিয়ালের মতো অনুবর্তী কোষগুলির একটি বৃহত্তর এবং বহুভুজাকার আকৃতি থাকে এবং একস্তরের সাথে সংযুক্ত হলে স্থানান্তরিত হয় না। একবার কোষগুলি তাদের উৎস থেকে সঠিকভাবে বিচ্ছিন্ন হয়ে গেলে এবং মিডিয়াতে স্থানান্তরিত হলে, কোষের উত্তরণ পরিচালনা করা যেতে পারে। গবেষণাগারগুলির জন্য অনুবর্তী কোষ সংস্কৃতি রক্ষণাবেক্ষণ অনুবর্তী কোষ সংস্কৃতিগুলি পাস করার সময়, ব্যয় করা মাধ্যমকে অবশ্যই বারবার পাইপ আউট করতে হবে এবং তাজা মাধ্যম দিয়ে প্রতিস্থাপন করতে হবে। কালচার ভেসেলটি বারবার ট্যাপ করা যেতে পারে, যা কোষ বিচ্ছিন্নতা সহজতর করার জন্য যান্ত্রিক বা এনজাইম্যাটিক পদ্ধতির সাথে মিলিত করা উচিত। কালচার জাহাজটিকে সেন্ট্রিফিউজও করা যেতে পারে, যা একটি সুপারনেট্যান্ট গঠন করে যা একটি পিপেট ব্যবহার করে বের করা যেতে পারে। কোষগুলিকে অবশ্যই সপ্তাহে 2 থেকে 3 বার খাওয়াতে হবে এবং সর্বোত্তম কোষের বিস্তার নিশ্চিত করার জন্য উপযুক্ত তাপমাত্রা, আর্দ্রতা, আলো এবং পিএইচ-এ কালচার করতে হবে। প্যাসেজিং (সাবকলচারিং) কোষ যদিও অনুসারী সংস্কৃতিগুলি সাসপেনশন সংস্কৃতির সাথে সাদৃশ্য ভাগ করে নেয়, তবে সেগুলি কীভাবে কালচার করা হয় এবং প্যাসেজ করা হয় তার মধ্যে অনেকগুলি মূল পার্থক্য রয়েছে। অনুসারী কালচার প্যাসেজিংয়ের জন্য, ব্যয় করা মাধ্যমটি প্রথমে বর্জ্য পণ্য হিসাবে কোষযুক্ত ফ্লাস্ক থেকে পাইপ করা হয়। একটি কালচার পাত্রে অপসারণ করা হয়নি এমন মাধ্যমের সাথে কোষগুলি আবদ্ধ থাকে এবং কোষগুলি পৃথক করার জন্য একাধিক ধোয়া এবং ইনকিউবেশন পদক্ষেপের প্রয়োজন হয়। ধোয়ার পদক্ষেপের জন্য, সেল কালচারের বিপরীত দিকে একটি সুষম লবণের দ্রবণ ঢেলে দেওয়া হয় এবং ভারসাম্যপূর্ণ লবণের দ্রবণটি নিষ্কাশনের আগে কালচার পাত্রটি কাঁপানো হয়। ইনকিউবেশন ধাপের জন্য কালচার পাত্রে তাপ প্রয়োগ করা হয়, যার ফলে প্রোটিন বিকৃতি ঘটে এবং মাধ্যম থেকে কোষগুলি ধীরে ধীরে পৃথক হয়ে যায়। একইভাবে সাসপেনশন কালচারের ক্ষেত্রে, হিমোসাইটোমিটার এবং ট্রাইপ্যান ব্লু ব্যবহার করে মোট কোষের সংখ্যা গণনা করা যেতে পারে। বাণিজ্যিক প্রয়োগ এবং সীমাবদ্ধতা অনুসারী সংস্কৃতিগুলি সাধারণত কোষবিজ্ঞান এবং ছোট আকারে কোষীয় পণ্য সংগ্রহের জন্য ব্যবহৃত হয়। যেহেতু তাদের বৃদ্ধি 2ডি-তে সীমাবদ্ধ, তাই ইন-ভিভো কোষের কাঠামো এবং কার্যকারিতা অধ্যয়নের জন্য আনুগত্য সংস্কৃতি ব্যবহার করা কঠিন। এই সীমাবদ্ধতা এড়াতে এবং ড্রাগ পরীক্ষার জন্য আনুগত্য কোষ সংস্কৃতি ব্যবহার করার জন্য থ্রিডি মাইক্রোক্যারিয়ার ব্যবহার করে আনুগত্য কোষ সংস্কৃতি বৃদ্ধির জন্য গবেষণা করা হচ্ছে। আনুগত্য সংস্কৃতির বাণিজ্যিক প্রয়োগগুলির মধ্যে রয়েছেঃ আনুগত্য কোষ তৈরি করা যা টিকা বিকাশের জন্য ব্যবহৃত আগ্রহের প্রোটিন তৈরি করে। কোষ এবং জিন থেরাপির জন্য ভাইরাল ভেক্টরের সাথে একত্রে ব্যবহৃত অনুসারী কোষ। ইন ভিট্রোতে অনুসারী কোষে মাইক্রো এবং ন্যানো প্রযুক্তি সরবরাহ করা। ক্যান্সার কোষ স্ক্রিনিংয়ের জন্য অনুসারী কোষের অঙ্গসংস্থান সামঞ্জস্য করা। তথ্যসূত্র কোষ সংস্কৃতি