Bioorthogonal chemistry
বায়োঅর্থোগোনাল রসায়ন শব্দটি যে কোনও রাসায়নিক বিক্রিয়াকে বোঝায় যা স্থানীয় জৈব রাসায়নিক প্রক্রিয়াগুলিতে হস্তক্ষেপ না করে জীবজগতের অভ্যন্তরে ঘটতে পারে। 2003 সালে ক্যারোলিন আর. বের্টোজি এই শব্দটি উদ্ভাবন করেন। এর প্রবর্তনের পর থেকে, জৈব-অর্থোগোনাল প্রতিক্রিয়ার ধারণাটি কোষীয় বিষাক্ততা ছাড়াই জীবিত ব্যবস্থায় বাস্তব সময়ে গ্লাইকেন, প্রোটিন এবং লিপিডের মতো জৈব অণুগুলির অধ্যয়নকে সক্ষম করেছে। বেশ কয়েকটি রাসায়নিক বন্ধন কৌশল তৈরি করা হয়েছে যা জৈব-অর্থোগোনালিটির প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে, যার মধ্যে রয়েছে অ্যাজাইড এবং সাইক্লোঅ্যাক্টাইনের মধ্যে 1,3-দ্বিমেরু সাইক্লোঅ্যাডিশন (যাকে তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়নও বলা হয়), নাইট্রোন এবং সাইক্লোঅ্যাক্টাইনের মধ্যে, অ্যালডিহাইড এবং কিটোন থেকে অক্সাইম/হাইড্রাজোন গঠন, টেট্রাজিন বন্ধন, আইসোসায়ানাইড-ভিত্তিক ক্লিক প্রতিক্রিয়া এবং অতি সম্প্রতি, কোয়াড্রিসাইক্লেন বন্ধন। বায়োর্থোগোনাল রসায়নের ব্যবহার সাধারণত দুটি ধাপে হয়। প্রথমত, একটি সেলুলার সাবস্ট্রেট একটি বায়োর্থোগোনাল কার্যকরী গ্রুপ (রাসায়নিক রিপোর্টার) দিয়ে পরিবর্তিত হয় এবং কোষে প্রবর্তিত হয়; সাবস্ট্রেটগুলির মধ্যে রয়েছে মেটাবোলাইট, এনজাইম ইনহিবিটার ইত্যাদি। জৈব ক্রিয়াকলাপকে প্রভাবিত করা এড়াতে রাসায়নিক রিপোর্টার অবশ্যই স্তরটির কাঠামোকে নাটকীয়ভাবে পরিবর্তন করবেন না। দ্বিতীয়ত, সাবস্ট্রেটের প্রতিক্রিয়া এবং লেবেল করার জন্য পরিপূরক কার্যকরী গ্রুপ সম্বলিত একটি প্রোব চালু করা হয়। যদিও তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়নের মতো কার্যকর জৈব-অর্থোগোনাল প্রতিক্রিয়াগুলি বিকশিত হয়েছে, নতুন প্রতিক্রিয়াগুলির বিকাশ একই জৈবপ্রণালীতে লেবেলিংয়ের একাধিক পদ্ধতি ব্যবহার করার অনুমতি দেওয়ার জন্য লেবেলিংয়ের জন্য অর্থোগোনাল পদ্ধতি তৈরি করে চলেছে। ক্লিক রসায়ন এবং বায়োঅর্থোগোনাল রসায়নের বিকাশের জন্য বার্টোজ্জিকে 2022 সালে রসায়নে নোবেল পুরস্কার প্রদান করা হয়। জৈব-অর্থোগোনাল শব্দটি এসেছে গ্রীক জৈব-"জীবিত" এবং অর্থোগনিওস "ডান-কোণযুক্ত" থেকে। সুতরাং আক্ষরিক অর্থে একটি প্রতিক্রিয়া যা একটি জীবন্ত ব্যবস্থার সাথে লম্বভাবে যায়, এইভাবে এটিকে বিরক্ত করে না। জৈব-অর্থোগোনালিটি-র প্রয়োজনীয়তা জৈব-অর্থোগোনাল হিসাবে বিবেচিত হওয়ার জন্য, একটি প্রতিক্রিয়াকে অবশ্যই বেশ কয়েকটি প্রয়োজনীয়তা পূরণ করতে হবেঃ নির্বাচনযোগ্যতাঃ জৈবিক যৌগের সাথে পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া এড়াতে অন্তঃসত্ত্বা কার্যকরী গোষ্ঠীর মধ্যে প্রতিক্রিয়া অবশ্যই নির্বাচনযোগ্য হতে হবে জৈবিক জড়তাঃ প্রতিক্রিয়াশীল অংশীদার এবং ফলস্বরূপ সংযোগের কোনও প্রতিক্রিয়াশীল পদ্ধতি থাকা উচিত নয় যা অধ্যয়নের অধীনে থাকা জীবের স্থানীয় রাসায়নিক কার্যকারিতা ব্যাহত করতে সক্ষম। রাসায়নিক জড়তাঃ সমযোজী সংযোগটি শক্তিশালী এবং জৈবিক প্রতিক্রিয়াগুলির জন্য নিষ্ক্রিয় হওয়া উচিত। গতিবিদ্যাঃ প্রতিক্রিয়া অবশ্যই দ্রুত হতে হবে যাতে প্রোব বিপাক এবং ক্লিয়ারেন্সের আগে সমযোজী বন্ধন অর্জন করা যায়। কম প্রাচুর্যের প্রজাতির ছোট সংকেতগুলিকে হ্রাস করতে পারে এমন প্রতিক্রিয়াগুলিতে প্রতিযোগিতা রোধ করতে কোষীয় প্রক্রিয়াগুলির সময় স্কেলে (মিনিট) প্রতিক্রিয়া অবশ্যই দ্রুত হতে হবে। দ্রুত প্রতিক্রিয়াও একটি দ্রুত প্রতিক্রিয়া প্রদান করে, যা গতিশীল প্রক্রিয়াগুলিকে সঠিকভাবে অনুসরণ করার জন্য প্রয়োজনীয়। প্রতিক্রিয়া জৈব সামঞ্জস্যঃ প্রতিক্রিয়াগুলি অ-বিষাক্ত হতে হবে এবং পিএইচ, জলীয় পরিবেশ এবং তাপমাত্রা বিবেচনা করে জৈবিক পরিস্থিতিতে কাজ করতে হবে। ফার্মাকোকাইনেটিক্স একটি ক্রমবর্ধমান উদ্বেগের বিষয় কারণ বায়োর্থোগোনাল রসায়ন জীবন্ত প্রাণী মডেলগুলিতে প্রসারিত হয়। অ্যাক্সেসিবল ইঞ্জিনিয়ারিংঃ কেমিক্যাল রিপোর্টারকে অবশ্যই বিপাকীয় বা প্রোটিন ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের মাধ্যমে জৈব অণুতে অন্তর্ভুক্ত করতে সক্ষম হতে হবে। সর্বোত্তমভাবে, কার্যকরী গোষ্ঠীগুলির মধ্যে একটি খুব ছোট যাতে এটি স্থানীয় আচরণকে বিঘ্নিত না করে। স্টাউডিঙ্গার বন্ধন হল 2000 সালে বার্টোজি গোষ্ঠী দ্বারা বিকশিত একটি প্রতিক্রিয়া যা ট্রায়ারিলফসফিনের সাথে অ্যাজাইডের ক্লাসিক স্টাউডিঙ্গার প্রতিক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে তৈরি। এটি সম্পূর্ণ অজৈব কার্যকরী গোষ্ঠীর সাথে প্রথম প্রতিক্রিয়া হিসাবে বায়োর্থোগোনাল রসায়নের ক্ষেত্রটি চালু করেছিল যদিও এটি আর ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয় না। স্টাউডিঙ্গার লাইগেশন জীবন্ত কোষ এবং জীবন্ত ইঁদুর উভয় ক্ষেত্রেই ব্যবহৃত হয়েছে। জৈব-অর্থোগোনালিটি অ্যাজাইড একটি নরম ইলেক্ট্রোফাইল হিসাবে কাজ করতে পারে যা ফসফিনের মতো নরম নিউক্লিওফাইল পছন্দ করে। এটি বেশিরভাগ জৈবিক নিউক্লিওফাইলের বিপরীতে যা সাধারণত শক্ত নিউক্লিওফাইল। প্রতিক্রিয়াটি একটি স্থিতিশীল পণ্য উৎপাদনের জন্য জল-সহনশীল পরিস্থিতিতে নির্বাচিতভাবে অগ্রসর হয়। ফসফিনগুলি জীবন্ত ব্যবস্থায় সম্পূর্ণ অনুপস্থিত এবং হালকা হ্রাস সম্ভাবনা থাকা সত্ত্বেও ডাইসালফাইড বন্ধনকে হ্রাস করে না। অ্যাজিডোথাইমিডিনের মতো এফডিএ-অনুমোদিত ওষুধগুলিতে এবং ক্রস লিঙ্কার হিসাবে অন্যান্য ব্যবহারের মাধ্যমে অ্যাজাইডগুলি জৈব সামঞ্জস্যপূর্ণ বলে প্রমাণিত হয়েছিল। উপরন্তু, তাদের ছোট আকার তাদের সেলুলার বিপাকীয় পথের মাধ্যমে জৈব অণুতে সহজেই অন্তর্ভুক্ত হতে দেয়। প্রক্রিয়া ক্লাসিক স্টাউডিঙ্গার প্রতিক্রিয়া নিউক্লিওফিলিক ফসফিন ইলেক্ট্রোফিলিক টার্মিনাল নাইট্রোজেনের অ্যাজাইডকে আক্রমণ করে। একটি চার-সদস্যের রূপান্তর অবস্থার মাধ্যমে, এন2 হারিয়ে গিয়ে একটি আজা-আইলাইড গঠন করে। অস্থিতিশীল ইলাইড হাইড্রোলাইজড হয়ে ফসফিন অক্সাইড এবং একটি প্রাথমিক অ্যামাইন তৈরি করে। যাইহোক, এই বিক্রিয়াটি অবিলম্বে বায়োর্থোগোনাল নয় কারণ হাইড্রোলাইসিস আজা-আইলাইডের সমযোজী বন্ধনকে ভেঙে দেয়। স্টাউডিঙ্গার লাইগেশন প্রতিক্রিয়াটি স্থানীয় ঘনত্ব বাড়ানোর জন্য এস্টারকে অবস্থান করে তাত্ক্ষণিক হাইড্রোলাইসিসকে প্রতিহত করার জন্য প্রতিক্রিয়াশীলতার একটি নতুন পথের মাধ্যমে আজা-আইলাইডকে নির্দেশ করার জন্য অ্যারিল বলয়ের একটিতে ফসফরাস পরমাণুর সাথে একটি এস্টার গ্রুপ অর্থো অন্তর্ভুক্ত করার জন্য সংশোধন করা হয়েছিল। এজাইডের উপর প্রাথমিক নিউক্লিওফিলিক আক্রমণ হল হার-সীমাবদ্ধ পদক্ষেপ। ইলাইড একটি পাঁচ-সদস্যের বলয় গঠনের জন্য আন্তঃআণবিক সাইক্লাইজেশনের মাধ্যমে ইলেক্ট্রোফিলিক এস্টার ট্র্যাপের সাথে প্রতিক্রিয়া করে। এই বলয়টি হাইড্রোলাইসিসের মধ্য দিয়ে যায় এবং একটি স্থিতিশীল অ্যামাইড বন্ধন গঠন করে। সীমাবদ্ধতা ফসফিন বিকারকগুলি ধীরে ধীরে জীবন্ত ব্যবস্থায় বায়ু জারণের মধ্য দিয়ে যায়। উপরন্তু, এটি সম্ভবত সাইটোক্রোম পি 450 এনজাইম দ্বারা ভিট্রোতে বিপাক করা হয়। প্রতিক্রিয়াগুলির গতিবিদ্যা ধীর এবং দ্বিতীয় ক্রমের হার ধ্রুবক প্রায় 0.0020 M−1·s−1। ফসফাইনে ইলেক্ট্রন-দানকারী গোষ্ঠী যুক্ত করে নিউক্লিওফিলিক আক্রমণের হার বাড়ানোর প্রচেষ্টা গতিবিদ্যার উন্নতি করেছে, তবে বায়ু জারণের হারও বাড়িয়েছে। দুর্বল গতিবিদ্যার জন্য ফসফিনের উচ্চ ঘনত্ব ব্যবহার করা প্রয়োজন যা ইমেজিং অ্যাপ্লিকেশনগুলিতে উচ্চ পটভূমি সংকেতের সমস্যা সৃষ্টি করে। ফ্লুরোসিন এবং লুসিফেরিন ভিত্তিক ফ্লুরোজেনিক ফসফিন বিকারকগুলির বিকাশের মাধ্যমে উচ্চ পটভূমির সমস্যা মোকাবেলার চেষ্টা করা হয়েছে, তবে অভ্যন্তরীণ গতিবিদ্যা একটি সীমাবদ্ধতা রয়ে গেছে। তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়ন হল একটি জৈব-অর্থোগোনাল প্রতিক্রিয়া যা কার্ল ব্যারি শার্পলেস এবং অন্যান্যদের কাজের উপর ভিত্তি করে ক্যারোলিন বার্টোজি একটি অ্যাজাইড অ্যালকাইন হুইজেন সাইক্লোঅ্যাডিশনের সক্রিয় রূপ হিসাবে প্রথম বিকশিত করেছিলেন। কিউএএসি-র বিপরীতে, কিউ-মুক্ত ক্লিক রসায়নকে একটি সাইটোটক্সিক তামার অনুঘটক নির্মূল করে জৈব-অর্থোগোনাল হিসাবে সংশোধন করা হয়েছে, যা প্রতিক্রিয়াটিকে দ্রুত এবং জীবন্ত কোষের বিষাক্ততা ছাড়াই এগিয়ে যাওয়ার অনুমতি দেয়। তামার পরিবর্তে, বিক্রিয়াটি একটি স্ট্রেন-প্রোমোটড অ্যালকাইন-অ্যাজাইড সাইক্লোঅ্যাডিশন (এস. পি. এ. এ. সি)। এটি স্টাউডিঙ্গার লাইগেশনের দ্রুত বিকল্প হিসাবে বিকশিত হয়েছিল, প্রথম প্রজন্ম ষাট গুণ দ্রুত প্রতিক্রিয়া জানিয়েছিল। প্রতিক্রিয়ার জৈব-অর্থোগোনালিটি কালচারড কোষ, জীবন্ত জেব্রাফিশ এবং ইঁদুরের মধ্যে কিউ-মুক্ত ক্লিক প্রতিক্রিয়া প্রয়োগ করার অনুমতি দিয়েছে। তামা বিষাক্ততা ক্লাসিক তামা-অনুঘটক অ্যাজাইড-অ্যালকাইন সাইক্লোঅ্যাডিশন জৈব সংযোগের জন্য একটি অত্যন্ত দ্রুত এবং কার্যকর ক্লিক প্রতিক্রিয়া হয়েছে, তবে এটি সিইউ (আই) আয়নগুলির বিষাক্ততার কারণে জীবিত কোষে ব্যবহারের জন্য উপযুক্ত নয়। তামার অনুঘটক দ্বারা গঠিত প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির জারণ ক্ষতির কারণে বিষাক্ততা হয়। কপার কমপ্লেক্সগুলি সেলুলার বিপাকের পরিবর্তনকে প্ররোচিত করতেও পাওয়া গেছে এবং কোষ দ্বারা গ্রহণ করা হয়। জৈব অণুর ক্ষতি রোধ করতে এবং ইন ভিট্রো অ্যাপ্লিকেশনগুলিতে অপসারণের সুবিধার্থে লিগ্যান্ডগুলির কিছু বিকাশ হয়েছে। যাইহোক, এটি দেখা গেছে যে জটিলতার বিভিন্ন লিগ্যান্ড পরিবেশ এখনও বিপাক এবং গ্রহণকে প্রভাবিত করতে পারে, যা সেলুলার ফাংশনে একটি অবাঞ্ছিত বিশৃঙ্খলা প্রবর্তন করে। জৈব-অর্থোগোনালিটি অ্যাজাইড গ্রুপটি বিশেষত জৈব-অর্থোগোনাল কারণ এটি অত্যন্ত ছোট (কোষের ব্যাপ্তিযোগ্যতার জন্য অনুকূল এবং বিশৃঙ্খলা এড়ায়), বিপাকীয়ভাবে স্থিতিশীল এবং স্বাভাবিকভাবেই কোষে বিদ্যমান থাকে না এবং তাই এর কোনও প্রতিযোগিতামূলক জৈবিক পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া নেই। যদিও অ্যাজাইডগুলি প্রতিক্রিয়ার জন্য উপলব্ধ সবচেয়ে প্রতিক্রিয়াশীল 1,3-ডাইপোল নয়, তবে তাদের পার্শ্ব প্রতিক্রিয়ার আপেক্ষিক অভাব এবং সাধারণ সিন্থেটিক পরিস্থিতিতে স্থিতিশীলতার জন্য এগুলি পছন্দ করা হয়। অ্যালকাইনটি ততটা ছোট নয়, তবে এতে এখনও ইন ভিভো লেবেলিংয়ের জন্য প্রয়োজনীয় স্থিতিশীলতা এবং অর্থোগোনালিটি রয়েছে। সাইক্লোঅক্টাইনগুলি ঐতিহ্যগতভাবে লেবেলিং অধ্যয়নের জন্য সবচেয়ে সাধারণ সাইক্লোঅ্যালকাইন, কারণ এগুলি সবচেয়ে ছোট স্থিতিশীল অ্যালকাইন বলয়। প্রক্রিয়া প্রতিক্রিয়াটি একটি আদর্শ 1,3-দ্বিমেরু সাইক্লোঅ্যাডিশন হিসাবে অগ্রসর হয়, যা এক ধরনের অ্যাসিঙ্ক্রোনাস, সমন্বিত পেরিসাইক্লিক স্থানান্তর। 1, 3-ডাইপোলের দ্বৈত প্রকৃতির কারণে অ্যাজাইডের উপর একটি ইলেক্ট্রোফিলিক বা নিউক্লিওফিলিক কেন্দ্রের সনাক্তকরণ অসম্ভব হয়ে পড়ে যাতে চক্রাকার ইলেক্ট্রন প্রবাহের দিকটি অর্থহীন হয়। [পি] তবে, গণনায় দেখা গেছে যে নাইট্রোজেনের মধ্যে ইলেক্ট্রন বিতরণের ফলে সবচেয়ে ভিতরের নাইট্রোজেন পরমাণু সর্বাধিক ঋণাত্মক চার্জ বহন করে। যদিও প্রতিক্রিয়াটি ট্রায়াজোলের একটি রিজিওআইসোমেরিক মিশ্রণ তৈরি করে, প্রতিক্রিয়ায় রেজিওইলেক্টিভিটির অভাব বেশিরভাগ বর্তমান প্রয়োগের জন্য একটি বড় উদ্বেগের বিষয় নয়। তামা-অনুঘটক হুইজেন সাইক্লোঅ্যাডিশন দ্বারা আরও বেশি রিজিওস্পেসিফিক এবং কম বায়োঅর্থোগোনাল প্রয়োজনীয়তা সর্বোত্তমভাবে পরিবেশন করা হয়, বিশেষত একটি স্ট্রেইনড সাইক্লোঅ্যাক্টাইন সংশ্লেষণের সিন্থেটিক অসুবিধা (একটি টার্মিনাল অ্যালকাইন যোগ করার তুলনায়) দেওয়া হয়। সাইক্লোঅ্যাক্টিন ওসিটি-র বিকাশ ছিল কিউ-মুক্ত ক্লিক রসায়নের জন্য বিকশিত প্রথম সাইক্লোঅ্যাক্টিন। যদিও শারীরবৃত্তীয় তাপমাত্রায় রৈখিক অ্যালকিনগুলি প্রতিক্রিয়াশীল নয়, ওসিটি কোনও বিষাক্ততা না দেখিয়ে জৈবিক পরিস্থিতিতে অ্যাজাইডের সাথে সহজেই প্রতিক্রিয়া করতে সক্ষম হয়েছিল। যাইহোক, এটি খুব কম জল-দ্রবণীয় ছিল এবং স্টাউডিঙ্গার লাইগেশনের তুলনায় গতিবিদ্যার খুব কমই উন্নতি হয়েছিল। জলের দ্রবণীয়তা উন্নত করার জন্য এ. এল. ও (অ্যারিল-কম অক্টিনে) তৈরি করা হয়েছিল, তবে এর গতিবিদ্যা এখনও দুর্বল ছিল। প্রোপার্জিলিক অবস্থানে ইলেক্ট্রন-উত্তোলন ফ্লোরিন প্রতিস্থাপনের মাধ্যমে হার বাড়ানোর জন্য মনোফ্লোরিনেটেড (এম. ও. এফ. ও) এবং ডিফ্লোরিনেটেড (ডি. আই. এফ. ও) সাইক্লোঅক্টিন তৈরি করা হয়েছিল। সিন্থেটিক অ্যাক্সেসিবিলিটি এবং জৈবিক জড়তার দিক থেকে ফ্লোরিন একটি ভাল ইলেক্ট্রন-উত্তোলনকারী গ্রুপ। বিশেষত, এটি একটি ইলেক্ট্রোফিলিক মাইকেল গ্রহণকারী গঠন করতে পারে না যা জৈবিক নিউক্লিওফাইলগুলির সাথে পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া করতে পারে। ডিআইবিও (ডাইবেনজোসাইক্লোক্টাইন) দুটি অ্যারিল বলয়ের সংমিশ্রণ হিসাবে বিকশিত হয়েছিল, যার ফলে খুব বেশি চাপ এবং বিকৃতি শক্তি হ্রাস পায়। এটি প্রস্তাব করা হয়েছিল যে বায়ারিল প্রতিস্থাপন রিং স্ট্রেন বাড়ায় এবং প্রতিক্রিয়াশীলতা উন্নত করতে অ্যালকাইনের সাথে সংমিশ্রণ সরবরাহ করে। যদিও গণনাগুলি ভবিষ্যদ্বাণী করেছে যে মনো-অ্যারিল প্রতিস্থাপন স্টেরিক সংঘর্ষ (অ্যাজাইড অণুর সাথে) এবং স্ট্রেনের মধ্যে একটি সর্বোত্তম ভারসাম্য প্রদান করবে, মনো-অ্যারিলেটেড পণ্যগুলি অস্থির বলে দেখানো হয়েছে। বি. এ. আর. এ. সি (বায়ারিলাজ্যাসাইক্লোক্টিনোন) একটি অ্যামাইড বন্ড যোগ করে যা বিকৃতি দ্বারা হার বাড়ানোর জন্য একটি এস. পি. 2-এর মতো কেন্দ্র যোগ করে। অ্যামাইড অনুরণন অতিরিক্ত অসম্পূর্ণতা তৈরি না করে অতিরিক্ত স্ট্রেনে অবদান রাখে যা একটি অস্থির অণুর দিকে পরিচালিত করে। উপরন্তু, সাইক্লোঅক্টাইন বলয়ে একটি হেটেরোঅটম যোগ করা অণুর দ্রবণীয়তা এবং ফার্মাকোকাইনেটিক্স উভয়কেই উন্নত করে। বি. এ. আর. এ. সি-এর যথেষ্ট হার (এবং সংবেদনশীলতা) রয়েছে যে অতিরিক্ত প্রোব ধুয়ে ফেলা পটভূমি হ্রাস করার জন্য অপ্রয়োজনীয়। এটি এমন পরিস্থিতিতে অত্যন্ত কার্যকর করে তোলে যেখানে রিয়েল-টাইম ইমেজিং বা পুরো প্রাণীর ইমেজিংয়ের মতো ধোয়া অসম্ভব। যদিও বি. এ. আর. এ. সি অত্যন্ত কার্যকর, তবে এর কম স্থায়িত্বের জন্য এটি অবশ্যই 0 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করতে হবে, যা আলো এবং অক্সিজেন থেকে সুরক্ষিত। ডিআইবিএসি/এডিআইবিও উৎপাদনের জন্য বিএআরএসি-তে আরও সমন্বয় বৈচিত্র্যগুলি দূরবর্তী রিং স্ট্রেন যোগ করতে এবং অ্যালকাইনের চারপাশে স্টেরিক্স হ্রাস করার জন্য প্রতিক্রিয়াশীলতা আরও বাড়ানোর জন্য করা হয়েছিল। কেটো-ডি. আই. বি. ও, যেখানে হাইড্রক্সিল গ্রুপকে কেটোনে রূপান্তরিত করা হয়েছে, বলয় গঠনের পরিবর্তনের কারণে এর হার তিনগুণ বৃদ্ধি পেয়েছে। অস্থিতিশীলতার কারণে একটি ডিফ্লুওরোবেনজোসাইক্লোক্টাইন (ডিআইএফবিও) তৈরির প্রচেষ্টা ব্যর্থ হয়েছিল। ইন ভিভো মাউস অধ্যয়নের সাথে ডি. আই. এফ. ও-এর সমস্যাগুলি জৈব-অর্থোগোনাল প্রতিক্রিয়া তৈরি করার অসুবিধা চিত্রিত করে। যদিও কোষের লেবেলিং-এ ডি. আই. এফ. ও অত্যন্ত প্রতিক্রিয়াশীল ছিল, তবে সিরাম অ্যালবুমিনের সাথে বন্ধনের কারণে এটি মাউস স্টাডিতে খারাপ কাজ করেছিল। সাইক্লোঅক্টাইনের হাইড্রোফোবিসিটি ঝিল্লি এবং সিরাম প্রোটিন দ্বারা পৃথকীকরণকে উৎসাহিত করে, জৈব উপলব্ধ ঘনত্ব হ্রাস করে। এর প্রতিক্রিয়ায়, জলের দ্রবণীয়তা, মেরুতা এবং ফার্মাকোকাইনেটিক্স বাড়ানোর জন্য ডিআইএমএসি (ডাইমেথক্সিয়াজ্যাসাইক্লোক্টাইন) তৈরি করা হয়েছিল, যদিও মাউস মডেলগুলির বায়োর্থোগোনাল লেবেলিংয়ের প্রচেষ্টা এখনও বিকাশে রয়েছে। প্রতিক্রিয়াশীলতা এই সাইক্লোঅ্যাডিশন প্রতিক্রিয়াগুলির তাপগতিবিদ্যা এবং গতিবিদ্যা ব্যাখ্যা করার জন্য গণনামূলক প্রচেষ্টা গুরুত্বপূর্ণ হয়েছে যা প্রতিক্রিয়ার উন্নতি অব্যাহত রাখতে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করেছে। স্থায়িত্ব ত্যাগ না করে অ্যালকাইন সক্রিয় করার জন্য দুটি পদ্ধতি রয়েছেঃ রূপান্তর অবস্থা শক্তি হ্রাস বা প্রতিক্রিয়াশীল স্থায়িত্ব হ্রাস। প্রতিক্রিয়াশীল স্থায়িত্ব হ্রাসঃ হক প্রস্তাব করেছেন যে অ্যাজাইড এবং অ্যালকাইনকে রূপান্তর অবস্থার জ্যামিতিতে বিকৃত করার জন্য প্রয়োজনীয় শক্তির পার্থক্য (এড ‡) প্রতিক্রিয়ার জন্য বাধা উচ্চতা নিয়ন্ত্রণ করে। সক্রিয়করণ শক্তি (E ‡) হল অস্থিতিশীল বিকৃতি এবং স্থিতিশীল মিথস্ক্রিয়ার সমষ্টি (Ei ‡)। সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য বিকৃতি হল অ্যালকাইন বিকৃতি কম অবদান সহ অ্যাজাইড কার্যকরী গোষ্ঠীতে। যাইহোক, এটি শুধুমাত্র সাইক্লোঅক্টাইন যা উচ্চ প্রতিক্রিয়াশীলতার জন্য সহজেই পরিবর্তন করা যেতে পারে। ফিনাইল অ্যাজাইড এবং অ্যাসিটিলিন (16.2 কিলোক্যালরি/মোল) বনাম সাইক্লোঅক্টাইন (8.0 কিলোক্যালরি/মোল)-এর বিক্রিয়ার হিসেব করা বাধাগুলির ফলে প্রত্যাশিত হার 106 বৃদ্ধি পায়। সাইক্লোঅক্টাইনের জন্য কম বিকৃতি শক্তির প্রয়োজন হয় (1.4 কিলোক্যালরি/মোল বনাম 4.6 কিলোক্যালরি/মোল) যার ফলে কম মিথস্ক্রিয়া শক্তি থাকা সত্ত্বেও সক্রিয়করণ শক্তি কম হয়। ট্রানজিশন স্টেট এনার্জি হ্রাস করাঃ এল. ইউ. এম. ও শক্তি এবং এইচ. ও. এম. ও-এল. ইউ. এম. ও ব্যবধান হ্রাস করে ফ্লোরিন বৃদ্ধির হারের মতো ইলেকট্রন প্রত্যাহারকারী গোষ্ঠী। এটি রূপান্তর অবস্থায় অ্যাজাইড থেকে ফ্লুরিনেটেড সাইক্লোঅক্টাইনে বৃহত্তর চার্জ স্থানান্তরের দিকে পরিচালিত করে, মিথস্ক্রিয়া শক্তি (নিম্ন নেতিবাচক মান) এবং সামগ্রিক সক্রিয়করণ শক্তি বৃদ্ধি করে। অ্যালকাইন π দাতা অরবিটাল এবং সিএফ σ * গ্রহণকারীদের মধ্যে হাইপারকনজুগেশনের ফলে এলইউএমও হ্রাস পায়। এই মিথস্ক্রিয়াগুলি বন্ডগুলি বিকৃত হওয়ার সাথে সাথে দাতা/গ্রহণকারীর ক্ষমতা বৃদ্ধির ফলে প্রাথমিকভাবে ট্রানজিশন অবস্থায় স্থিতিশীলতা প্রদান করে। এন. বি. ও গণনায় দেখা গেছে যে ট্রানজিশন অবস্থা বিকৃতি মিথস্ক্রিয়া শক্তি 2.8 কিলোক্যালরি/মোল বৃদ্ধি করে। সমতলের বাইরে π বন্ধনের মধ্যে হাইপারকনজুগেশন বেশি হয় কারণ সমতলের মধ্যে π বন্ধনগুলি দুর্বলভাবে সারিবদ্ধ থাকে। যাইহোক, ট্রানজিশন অবস্থা বাঁকানো ইন-প্লেন π বন্ডগুলিকে আরও অ্যান্টিপেরিপ্ল্যানার ব্যবস্থা করার অনুমতি দেয় যা মিথস্ক্রিয়াকে সহজতর করে। অতিরিক্ত হাইপারকনজুগেটিভ মিথস্ক্রিয়া শক্তি স্থিতিশীলতা গঠনকারী সিএন বন্ডের কারণে σ * এর বৈদ্যুতিন জনসংখ্যা বৃদ্ধির মাধ্যমে অর্জন করা হয়। σ * CF বন্ধনের সাথে নেতিবাচক হাইপারকনজুগেশন এই স্থিতিশীল মিথস্ক্রিয়াকে বাড়ায়। যদিও তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়নের বর্তমান ইমেজিং অ্যাপ্লিকেশনগুলিতে রেজিওসিলেক্টিভিটি একটি বড় সমস্যা নয়, এটি এমন একটি সমস্যা যা ওষুধের নকশা বা পেপটিডোমিমেটিক্সের মতো ক্ষেত্রে ভবিষ্যতের প্রয়োগগুলিকে বাধা দেয়। বর্তমানে বেশিরভাগ সাইক্লোঅক্টাইন প্রতিক্রিয়া করে রিজিওআইসোমেরিক মিশ্রণ তৈরি করে। [এম] গণনার বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে, সক্রিয়করণ শক্তিতে 1,4 যোগফলের উপর 2.9 কিলোক্যালরি/মোল পর্যন্ত 1,5 যোগফলের জন্য গ্যাস পর্যায় রিজিওসিলেক্টিভিটি গণনা করা হয়, তবে সমাধান সংশোধনের ফলে উভয় রিজিওআইসোমারের জন্য একই শক্তি বাধা তৈরি হয়। যদিও ডি. আই. এফ. ও-এর সাইক্লোঅ্যাডিশনের 1,4টি আইসোমার তার বৃহত্তর দ্বিমেরু মুহুর্তের দ্বারা অপছন্দিত হয়, দ্রবণ এটিকে 1,5টি আইসোমারের চেয়ে আরও দৃঢ়ভাবে স্থিতিশীল করে, যা রিজিওসিলেক্টিভিটিকে ক্ষয় করে। বিসিএন (বাইসাইক্লো)-এর মতো প্রতিসম সাইক্লোঅ্যাক্টিনগুলি সাইক্লোঅ্যাডিশনের পরে একটি একক রিজিওআইসোমার গঠন করে এবং ভবিষ্যতে এই সমস্যা সমাধানে কাজ করতে পারে। প্রয়োগ তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়নের সর্বাধিক বিস্তৃত প্রয়োগ জীবন্ত কোষ বা প্রাণীদের জৈবিক ইমেজিংয়ে একটি অ্যাজাইড-ট্যাগ করা জৈব অণু এবং একটি ইমেজিং এজেন্ট বহনকারী একটি সাইক্লোঅক্টাইন ব্যবহার করে। ডি. আই. বি. ও-এর ফ্লুরোসেন্ট কেটো এবং অক্সাইম রূপগুলি ফ্লুরো-সুইচ ক্লিক বিক্রিয়ায় ব্যবহৃত হয় যেখানে সাইক্লোঅক্টাইনের ফ্লুরোসেন্স প্রতিক্রিয়ায় গঠিত ট্রায়াজোল দ্বারা প্রশমিত হয়। অন্যদিকে, কুমারিন-সংযুক্ত সাইক্লোঅক্টাইন যেমন কুমবারাক এমনভাবে তৈরি করা হয়েছে যে অ্যালকাইন ফ্লুরোসেন্সকে দমন করে এবং ট্রায়াজোল গঠন ফ্লুরোসেন্স কোয়ান্টাম ফলনকে দশগুণ বৃদ্ধি করে। ফটো অ্যাক্টিভেটেবল সাইক্লোঅক্টাইন ব্যবহার করে সাবস্ট্রেট লেবেলিংয়ের স্থানিক এবং সাময়িক নিয়ন্ত্রণ তদন্ত করা হয়েছে। এটি বিক্রিয়ার আগে অ্যালকাইনের ভারসাম্যের অনুমতি দেয় যাতে ঘনত্বের গ্রেডিয়েন্টের ফলে শিল্পকর্মগুলি হ্রাস করা যায়। মুখোশযুক্ত সাইক্লোঅক্টাইনগুলি অন্ধকারে অ্যাজাইডের সাথে বিক্রিয়া করতে অক্ষম হয় তবে আলোর সাথে বিকিরণের পরে প্রতিক্রিয়াশীল অ্যালকাইনে পরিণত হয়। পিইটি ইমেজিং এজেন্ট সংশ্লেষণে ব্যবহারের জন্য তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়ন অন্বেষণ করা হচ্ছে যা যৌগগুলি প্রয়োগ করার আগে আইসোটোপিক ক্ষয় হ্রাস করার জন্য উচ্চ বিশুদ্ধতা এবং ফলন সহ দ্রুত তৈরি করা আবশ্যক। উচ্চ হার ধ্রুবক এবং এস. পি. এ. এ. সি-এর বায়োঅর্থোগোনালিটি উভয়ই পি. ই. টি রসায়নের জন্য উপযুক্ত। শাস্কি নামে একটি সংস্থা ক্যান্সার থেরাপিউটিক্সে ক্লিক রসায়ন প্রয়োগ করছে এবং দ্বিতীয় পর্যায়ের পরীক্ষায় ক্যান্সার রোগীদের মধ্যে প্রধান প্রার্থীকে মূল্যায়ন করছে। অন্যান্য জৈব-অর্থোগোনাল প্রতিক্রিয়া নাইট্রোন ডাইপোল সাইক্লোঅ্যাডিশন তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়ন নাইট্রোনকে অ্যাজাইডের পরিবর্তে 1,3-ডাইপোল হিসাবে ব্যবহার করার জন্য অভিযোজিত হয়েছে এবং পেপটাইডের পরিবর্তনে ব্যবহৃত হয়েছে। একটি নাইট্রন এবং একটি সাইক্লোঅক্টাইনের মধ্যে এই সাইক্লোঅ্যাডিশন এন-অ্যালকাইলেটেড আইসোক্সাজোলিন গঠন করে। বিক্রিয়ার হার জল দ্বারা বর্ধিত হয় এবং নাইট্রনের প্রতিস্থাপনের উপর নির্ভর করে 12 থেকে 32 এম − 1 এস − 1 পর্যন্ত দ্বিতীয় ক্রমের হারের ধ্রুবকগুলির সাথে অত্যন্ত দ্রুত হয়। যদিও প্রতিক্রিয়াটি অত্যন্ত দ্রুত, এটি বিপাকীয় লেবেলিংয়ের মাধ্যমে জৈব অণুতে নাইট্রনকে অন্তর্ভুক্ত করতে সমস্যার সম্মুখীন হয়। লেবেলিং শুধুমাত্র অনুবাদ-পরবর্তী পেপটাইড পরিবর্তনের মাধ্যমে অর্জন করা হয়েছে। নরবোর্নিন সাইক্লোঅ্যাডিশন 1,3 ডাইপোলার সাইক্লোঅ্যাডিশন 1,3-ডাইপোল হিসাবে নাইট্রাইল অক্সাইড এবং ডাইপোলারোফাইল হিসাবে নরবোর্নিন ব্যবহার করে জৈব-অর্থোগোনাল প্রতিক্রিয়া হিসাবে বিকশিত হয়েছে। এর প্রাথমিক ব্যবহার স্বয়ংক্রিয় অলিগোনিউক্লিওটাইড সংশ্লেষকগুলিতে ডিএনএ এবং আরএনএ লেবেলিং এবং জীবিত কোষের উপস্থিতিতে পলিমার ক্রসলিংকিংয়ে হয়েছে। স্ট্রেন-প্রচারিত প্রতিক্রিয়াশীলতা এবং স্থিতিশীলতার মধ্যে ভারসাম্যের কারণে নরবোর্নিনদের ডাইপোলারোফাইল হিসাবে নির্বাচিত করা হয়েছিল। এই বিক্রিয়ার অসুবিধাগুলির মধ্যে রয়েছে শক্তিশালী তড়িৎ-ফিলিসিটি এবং ধীর প্রতিক্রিয়া গতিবিদ্যার কারণে নাইট্রাইল অক্সাইডের ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীলতা। অক্সেনোরবোর্নাডাইন সাইক্লোঅ্যাডিশন অক্সেনোরবোর্নাডাইন সাইক্লোঅ্যাডিশন হল একটি 1,3-ডাইপোলার সাইক্লোঅ্যাডিশন যার পরে একটি ফ্যুরান অণু অপসারণের সাথে একটি ট্রায়াজোল-সংযুক্ত কনজুগেট তৈরি করার জন্য একটি রেট্রো-ডিলস অ্যাল্ডার প্রতিক্রিয়া হয়। প্রাথমিক কাজ পেপটাইড লেবেলিং পরীক্ষায় এর উপযোগিতা প্রতিষ্ঠা করেছে এবং এটি স্পেকট ইমেজিং যৌগ উৎপাদনেও ব্যবহৃত হয়েছে। আরও সম্প্রতি, একটি অক্সানোরবোর্নাডাইনের ব্যবহার অনুঘটক-মুক্ত ঘরের তাপমাত্রা "আইক্লিক" বিক্রিয়ায় বর্ণনা করা হয়েছে, যেখানে একটি মডেল অ্যামিনো অ্যাসিড ধাতব অংশের সাথে যুক্ত, জৈব-অর্থোগোনাল প্রতিক্রিয়াগুলির একটি অভিনব পদ্ধতিতে। অক্সেনোরবোর্নাডাইনে রিং স্ট্রেন এবং ইলেক্ট্রনের ঘাটতি সাইক্লোঅ্যাডিশন হার-সীমাবদ্ধ পদক্ষেপের প্রতি প্রতিক্রিয়াশীলতা বাড়ায়। রেট্রো-ডিলস অ্যাল্ডার বিক্রিয়াটি স্থির 1,2,3 ট্রায়াজোল গঠনের জন্য দ্রুত ঘটে। সমস্যাগুলির মধ্যে রয়েছে প্রতিস্থাপনের জন্য দুর্বল সহনশীলতা যা অক্সেনোরবোর্নাডাইনের ইলেকট্রনিক্স পরিবর্তন করতে পারে এবং কম হার (10−4 ক্রমের দ্বিতীয় ক্রমের হার ধ্রুবক)। টেট্রাজিন বন্ধন টেট্রাজিন বন্ধন হল একটি বিপরীত-চাহিদা ডায়েলস অ্যাল্ডার বিক্রিয়ায় একটি ট্রান্স-সাইক্লোঅক্টিন এবং একটি এস-টেট্রাজিনের প্রতিক্রিয়া যার পরে নাইট্রোজেন গ্যাস নির্মূল করার জন্য একটি রেট্রো-ডায়েলস অ্যাল্ডার প্রতিক্রিয়া হয়। 2000 এম − 1-এস − 1 (9:1 মিথেনল/জলে) এর দ্বিতীয় ক্রম হারের ধ্রুবকের সাথে বিক্রিয়াটি অত্যন্ত দ্রুত হয় যা অত্যন্ত কম ঘনত্বে জৈব অণুগুলির পরিবর্তনের অনুমতি দেয়। ব্যাচের গণনামূলক কাজের উপর ভিত্তি করে, দুটি ট্রান্সানুলার মিথস্ক্রিয়া হ্রাসের কারণে সাইক্লোঅক্টেনের জন্য 12.4 কিলোক্যালরি/মোলের তুলনায় জেড-সাইক্লোঅক্টিনের জন্য স্ট্রেন শক্তি 7.0 কিলোক্যালরি/মোল। ই-সাইক্লোঅক্টিনের একটি অত্যন্ত বাঁকানো দ্বিবন্ধন রয়েছে যার ফলে 17.9 কিলোক্যালরি/মোল স্ট্রেন শক্তি পাওয়া যায়। এইভাবে, অত্যন্ত স্ট্রেইনড ট্রান্স-সাইক্লোঅক্টিন একটি প্রতিক্রিয়াশীল ডায়নোফাইল হিসাবে ব্যবহৃত হয়। ডায়িন হল একটি 3,6-ডায়ারিল-এস-টেট্রাজিন যা জলের সাথে তাৎক্ষণিক প্রতিক্রিয়া প্রতিরোধ করার জন্য প্রতিস্থাপিত করা হয়েছে। প্রতিক্রিয়াটি একটি প্রাথমিক সাইক্লোঅ্যাডিশনের মাধ্যমে অগ্রসর হয় যার পরে একটি বিপরীত ডায়েলস অ্যাল্ডার N2 কে নির্মূল করে এবং প্রতিক্রিয়ার বিপরীতমুখীতা প্রতিরোধ করে। জলের প্রতিক্রিয়া কেবল সহনশীলই নয়, এটিও দেখা গেছে যে জলীয় মাধ্যমে এই হার বৃদ্ধি পায়। জলীয় মাধ্যমে 1 এম-1 এস-1 ক্রম অনুসারে দ্বিতীয় ক্রম হারে ডায়নোফাইল হিসাবে নরবোর্নিন ব্যবহার করে প্রতিক্রিয়াও করা হয়েছে। জীবন্ত কোষ এবং পলিমার কাপলিং লেবেল করার ক্ষেত্রে এই প্রতিক্রিয়া প্রয়োগ করা হয়েছে। [4 + 1] সাইক্লোঅ্যাডিশন এই আইসোসায়ানাইড ক্লিক বিক্রিয়াটি একটি [4 + 1] সাইক্লোঅ্যাডিশন যার পরে এন2-এর একটি রেট্রো-ডিলস অ্যাল্ডার নির্মূল হয়। প্রতিক্রিয়াটি একটি প্রাথমিক [4 + 1] সাইক্লোঅ্যাডিশনের সাথে এগিয়ে যায় এবং তারপরে একটি তাপগতিবিদ্যার সিঙ্ক নির্মূল করতে এবং বিপরীতমুখীতা প্রতিরোধ করতে একটি বিপরীতমুখী হয়। এই পণ্যটি স্থিতিশীল যদি একটি টারশিয়ারি অ্যামাইন বা আইসোসাইনোপ্রোপানোয়েট ব্যবহার করা হয়। যদি একটি গৌণ বা প্রাথমিক আইসোসায়ানাইড ব্যবহার করা হয়, তবে উৎপাদনটি একটি ইমাইন গঠন করবে যা দ্রুত হাইড্রোলাইজড হয়। আইসোসায়ানাইড তার ছোট আকার, স্থিতিশীলতা, অ-বিষাক্ততা এবং স্তন্যপায়ী সিস্টেমে অনুপস্থিতির কারণে একটি পছন্দের রাসায়নিক রিপোর্টার। যাইহোক, বিক্রিয়াটি ধীর, দ্বিতীয় ক্রমের হারের ধ্রুবক 10−2M−1·s−1-এর ক্রমে থাকে। টেট্রাজোল ফটোক্লিক রসায়ন ফটোক্লিক রসায়ন একটি ফটোইনডিউসড সাইক্লোএলিমিনেশন ব্যবহার করে এন2 মুক্ত করে। এটি নাইট্রোজেন গ্যাসের ক্ষতির মাধ্যমে একটি স্বল্পস্থায়ী 1,3 নাইট্রাইল ইমাইন মধ্যবর্তী উৎপন্ন করে, যা পাইরাজোলিন সাইক্লোডাক্ট তৈরি করতে একটি অ্যালকিনের সাথে 1,3-দ্বিমেরু সাইক্লোডাশনের মধ্য দিয়ে যায়। কোষে ফটোড্যামেজ হ্রাস করার জন্য আলোর সংক্ষিপ্ত সংস্পর্শে (তরঙ্গদৈর্ঘ্য টেট্রাজোল-নির্ভর) ফটোইনডাকশন ঘটে। বিক্রিয়াটি জলীয় অবস্থায় বৃদ্ধি পায় এবং একটি একক রিজিওআইসোমার তৈরি করে। ক্ষণস্থায়ী নাইট্রাইল ইমাইন একটি বাঁকানো কাঠামোর কারণে 1,3-দ্বিমেরু সাইক্লোঅ্যাডিশনের জন্য অত্যন্ত প্রতিক্রিয়াশীল যা বিকৃতি শক্তি হ্রাস করে। ফিনাইল বলয়ের উপর ইলেকট্রন-দানকারী গোষ্ঠীগুলির সাথে প্রতিস্থাপন এইচ. ও. এম. ও শক্তি বৃদ্ধি করে, যখন 1,3 নাইট্রাইল ইমিনের উপর স্থাপন করা হয় এবং প্রতিক্রিয়ার হার বৃদ্ধি করে। এই পদ্ধতির সুবিধাগুলির মধ্যে রয়েছে স্থানিক বা সাময়িকভাবে প্রতিক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ করার ক্ষমতা এবং জেনেটিক এনকোডিংয়ের মতো সহজ জৈবিক পদ্ধতি ব্যবহার করে জৈব অণুতে অ্যালকিন এবং টেট্রাজোল উভয়কেই অন্তর্ভুক্ত করার ক্ষমতা। উপরন্তু, প্রতিক্রিয়ার অগ্রগতি পর্যবেক্ষণ করার জন্য টেট্রাজোলকে ফ্লোরোজেনিক হিসাবে ডিজাইন করা যেতে পারে। কোয়াড্রিসাইক্লেন বন্ধন কোয়াড্রিসাইক্লেন বন্ধন π ব্যবস্থার সাথে [2 + 2 + 2] সাইক্লোঅ্যাডিশনের মধ্য দিয়ে যাওয়ার জন্য একটি অত্যন্ত চাপযুক্ত কোয়াড্রিসাইক্লেন ব্যবহার করে। কোয়াড্রিসাইক্লেন অজৈব, জৈব অণুগুলির সাথে প্রতিক্রিয়াশীল নয় (সম্পূর্ণ সম্পৃক্ততার কারণে), তুলনামূলকভাবে ছোট এবং অত্যন্ত চাপযুক্ত (~ 80 কিলোক্যালরি/মোল)। তবে, এটি ঘরের তাপমাত্রায় এবং শারীরবৃত্তীয় পিএইচ-এ জলীয় অবস্থায় অত্যন্ত স্থিতিশীল। এটি নির্বাচিতভাবে ইলেক্ট্রন-দরিদ্র π সিস্টেমের সাথে প্রতিক্রিয়া করতে সক্ষম তবে সাধারণ অ্যালকিন, অ্যালকিন বা সাইক্লোঅক্টাইনের সাথে নয়। বিস (ডিথিওবেঞ্জিল) নিকেল (II) কে প্রতিক্রিয়াশীলতার উপর ভিত্তি করে একটি প্রার্থী পর্দা থেকে প্রতিক্রিয়া অংশীদার হিসাবে বেছে নেওয়া হয়েছিল। নরবোর্নাডাইনে আলো-প্ররোচিত রূপান্তর রোধ করতে, পণ্যের নিকেলকে চিলেট করতে ডাইথাইলডিথিওকার্বামেট যোগ করা হয়। এই বিক্রিয়াগুলি জলীয় অবস্থার দ্বারা বর্ধিত হয় যার দ্বিতীয় ক্রমের হার ধ্রুবক হল 0.25 M−1·s−1। বিশেষ আগ্রহের বিষয় হল যে এটি অক্সাইম গঠন এবং তামা-মুক্ত ক্লিক রসায়ন উভয়ের জন্য জৈব-অর্থোগোনাল হিসাবে প্রমাণিত হয়েছে। নিউক্লিয়ার ইমেজিং এবং রেডিওথেরাপিতে প্রাক-লক্ষ্য পরীক্ষার জন্য বায়োর্থোগোনাল রসায়ন একটি আকর্ষণীয় সরঞ্জাম। উন্নত কঠিন টিউমারের চিকিৎসার জন্য টেট্রাজিন-সাইক্লোক্টিন রসায়ন ক্লিনিকাল ট্রায়াল পরীক্ষার মধ্য দিয়ে যাচ্ছে। তথ্যসূত্র রাসায়নিক বিক্রিয়া