Rabbit hybridoma
খরগোশ হাইব্রিডোমা হল একটি সংকর কোষের রেখা যা একটি অ্যান্টিবডি উৎপাদনকারী খরগোশ বি কোষের সাথে একটি ক্যান্সারযুক্ত বি-কোষের (মায়েলোমা) সংমিশ্রণ দ্বারা গঠিত হয়। ইতিহাস খরগোশের ইমিউন সিস্টেমকে উচ্চতর আকর্ষণ এবং ফসফো-পেপটাইড, কার্বোহাইড্রেট এবং ইমিউনোজেন সহ অনেক অণুর আরও বৈচিত্র্যময় স্বীকৃতির সাথে অ্যান্টিবডি বিকাশের বাহন হিসাবে নথিভুক্ত করা হয়েছে যা অন্যথায় মাউসে ইমিউনোজেনিক নয়। যাইহোক, সাম্প্রতিক সময় পর্যন্ত, খরগোশ থেকে পাওয়া অ্যান্টিবডিগুলির ধরন পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলির মধ্যে সীমাবদ্ধ ছিল। 1970-এর দশকে মাউস হাইব্রিডোমা প্রযুক্তির বিকাশের পরে খরগোশের মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি তৈরির জন্য বেশ কয়েকটি প্রচেষ্টা করা হয়েছিল। খরগোশের মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি তৈরি করতে মাউস-র্যাবিট হেটেরো-হাইব্রিডোমাস নিয়ে গবেষণা করা হয়েছিল। যাইহোক, এই হেটেরো-হাইব্রিডোমাগুলি শেষ পর্যন্ত ক্লোন করা কঠিন ছিল এবং ক্লোনগুলি সাধারণত অস্থির ছিল এবং দীর্ঘ সময়ের জন্য অ্যান্টিবডি নিঃসরণ করত না। 1995 সালে, শিকাগোর লয়োলা বিশ্ববিদ্যালয়ের ক্যাথরিন নাইট এবং তার সহকর্মীরা ইমিউনোগ্লোবুলিনের ভারী এবং হালকা চেইন বর্ধকগুলির নিয়ন্ত্রণে অনকোজিনেস ভি-এ. বি. এল এবং সি-মাইককে অতিরিক্তভাবে প্রকাশ করে একটি ডাবল ট্রান্সজেনিক খরগোশ তৈরিতে সফল হন। খরগোশটি একটি মায়েলোমার মতো টিউমার তৈরি করে, যা 240ই-1 নামে একটি প্লাজমাসাইটোমা কোষের লাইনকে বিচ্ছিন্ন করার অনুমতি দেয়। খরগোশের লিম্ফোসাইটের সাথে 240ই-1 কোষের সংমিশ্রণ হাইব্রিডোমা তৈরি করে যা খরগোশের মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলিকে ধারাবাহিকভাবে নিঃসৃত করে। যাইহোক, 1970-এর দশকে বিকশিত প্রথম দিকের মাউস মায়েলোমা লাইনের মতো, স্থিতিশীলতা একটি উদ্বেগের বিষয় ছিল। ডাঃ নাইটের ল্যাবরেটরি থেকে 240ই-1 সেল লাইন পাওয়া বেশ কয়েকটি ল্যাবরেটরি 240ই-1 ফিউশন সেল লাইনের স্থায়িত্ব সমস্যার কথা জানিয়েছে। উন্নত ফিউশন অংশীদার 1996 সালে, ক্যালিফোর্নিয়া সান ফ্রান্সিসকো বিশ্ববিদ্যালয়ের (ইউ. সি. এস. এফ) ওয়েমিন ঝু এবং রবার্ট পাইটেলা ড. নাইটের গবেষণাগার থেকে 240ই-1 অর্জন করেন এবং একটি উন্নত খরগোশ সংকর বিকাশের চেষ্টা করেন। 240ই-1-এর বৈশিষ্ট্যগুলির উন্নতিগুলি পুনরাবৃত্ত সাবক্লোনিং, উচ্চ ফিউশন দক্ষতার জন্য নির্বাচন, শক্তিশালী বৃদ্ধি এবং একটি ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপের অধীনে উজ্জ্বল চেহারার মতো অঙ্গসংস্থানগত বৈশিষ্ট্যগুলির মাধ্যমে সম্পন্ন করা হয়েছিল। নির্বাচিত সাবক্লোনগুলি একটি স্থিতিশীল হাইব্রিডোমা এবং মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি নিঃসরণ উত্পাদন করার ক্ষমতার জন্য আরও পরীক্ষা করা হয়েছিল। একাধিক দফা সাবক্লোনিং এবং নির্বাচন প্রক্রিয়ার পরে, 240ই-ডাব্লু নামে একটি নতুন কোষ লাইন চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং যা আরও ভাল ফিউশন দক্ষতা এবং স্থিতিশীলতা প্রকাশ করেছিল। সেল লাইন 240ই-ডাব্লু তখন থেকে গবেষণা এবং বাণিজ্যিক প্রয়োগের জন্য খরগোশের মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি উৎপাদনের জন্য আরও উন্নত এবং অনুকূলিত করা হয়েছে। প্রক্রিয়া একটি খরগোশের মধ্যে হাইব্রিডোমা গঠনের প্রক্রিয়াটি প্রথমে একটি খরগোশের কাছ থেকে বি-কোষ অর্জন করে যা টিকা দেওয়া হয়েছে। খরগোশের জন্য অসংখ্য ইমিউনাইজেশন প্রোটোকল রয়েছে, বিশেষত পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডি তৈরির জন্য। টিকাদানের পরে, বি-কোষগুলিকে একটি প্রার্থী খরগোশ ফিউশন অংশীদার কোষ লাইনের সাথে সংযুক্ত করে হাইব্রিডোমা তৈরি করা হয়। হাইব্রিডোমা থেকে প্রাপ্ত অ্যান্টিবডিগুলি একটি অ্যান্টিজেনের জন্য পরীক্ষা করা হয় যা এলিসা, ওয়েস্টার্ন ব্লট, ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি এবং এফ. এ. সি. এস-এর মতো ডায়াগনস্টিক পরীক্ষার মাধ্যমে আগ্রহের মানদণ্ড পূরণ করে। মোনোক্লোনাল বৈশিষ্ট্যগুলি নিশ্চিত করার জন্য ফলস্বরূপ হাইব্রোডোমাগুলি সাবক্লোন করা যেতে পারে। জাতীয় ক্যান্সার ইনস্টিটিউটে (বেথেসডা, ইউএসএ) খরগোশের অ্যান্টিবডি মিচেল হো এবং ইরা পাস্তানের মানবিককরণ খরগোশের মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলির একটি গ্রুপকে পৃথক করেছে (যেমন। ওয়াইপি218, ওয়াইপি223) যা ক্যান্সার থেরাপির জন্য সি টার্মিনাল প্রান্তের কাছাকাছি দুর্বল ইমিউনোজেনিক সাইটগুলি সহ মেসোথেলিনের বিরল এপিটোপগুলি সনাক্ত করে। ডাঃ হো-এর গবেষণাগার প্রোটিন ডেটা ব্যাংক থেকে তাদের অ্যান্টিজেনগুলির সাথে খরগোশের অ্যান্টিবডিগুলির জটিল কাঠামো বিশ্লেষণ করেছে এবং খরগোশের এফভি-তে তার অ্যান্টিজেনের 6 অ্যাংস্ট্রম দূরত্বের মধ্যে অ্যান্টিজেন-যোগাযোগকারী অবশিষ্টাংশগুলি চিহ্নিত করেছে। তারা "এইচ. ভি. 4" এবং "এল. ভি. 4", নন-কমপ্লিমেন্টারিটি-ডিটারমিং রিজন (সি. ডি. আর) লুপগুলির নামকরণ করেছে যা কাঠামোগতভাবে অ্যান্টিজেনের কাছাকাছি এবং যথাক্রমে খরগোশের ভারী চেইন এবং হালকা চেইনের কাঠামো 3-এ অবস্থিত। গণনামূলক কাঠামোগত মডেলিংয়ের উপর ভিত্তি করে, হো এবং ঝাং সম্মিলিত কাবাট/আইএমজিটি/প্যারাটোম সিডিআরগুলিকে একটি মানব জার্মলাইন ফ্রেমওয়ার্ক সিকোয়েন্সে গ্রাফ্টিং করে একটি মানবকরণ কৌশল তৈরি করেছিলেন। হিউম্যানাইজড খরগোশ এফভিএস দ্বারা গঠিত ইমিউনোটক্সিন (যেমন। এইচওয়াইপি218) ক্লিনিক্যালি ব্যবহৃত টক্সিনের সাথে সংযুক্ত হয়ে টিউমার কোষের বিরুদ্ধে তাদের মূল খরগোশ এফভি থেকে প্রাপ্ত ইমিউনোটক্সিনগুলির তুলনায় শক্তিশালী সাইটোটক্সিসিটি দেখায়। এইচওয়াইপি218 অ্যান্টিবডির উপর ভিত্তি করে সিএআর টি কোষগুলিও ইঁদুরের টিউমার বৃদ্ধিতে কার্যকর বাধা দেখায়। পদ্ধতি (অর্থাৎ। সংযুক্ত কাবাট/আইএমজিটি/প্যারাটোম খরগোশ সিডিআরগুলিকে একটি স্থিতিশীল মানব জার্মলাইন কাঠামোতে কলম করার পরামর্শ দেওয়া হয়েছে) খরগোশের অ্যান্টিবডিগুলিকে মানবিক করার একটি সাধারণ পদ্ধতি হিসাবে। তথ্যসূত্র বাইরের লিঙ্ক 240ই-ডাব্লু ইমিউনোলজি বায়োটেকনোলজি ইমিউন সিস্টেম মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি থেরাপিউটিক অ্যান্টিবডি খরগোশের কোষের লাইনের জন্য 240ই-1 সেলোসরাস প্রবেশের জন্য বাহ্যিক লিঙ্ক