PBR322
পিবিআর322 একটি প্লাজমিড এবং এটি প্রথম ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত ই. কোলাই ক্লোনিং ভেক্টরগুলির মধ্যে একটি। 1977 সালে সান ফ্রান্সিসকোর ইউনিভার্সিটি অফ ক্যালিফোর্নিয়ার হারবার্ট বোয়ারের গবেষণাগারে তৈরি করা হয়েছিল, এটি পোস্টডক্টরাল গবেষক ফ্রান্সিসকো বলিভার জাপাটা এবং রেমন্ড এল রদ্রিগেজের নামে নামকরণ করা হয়েছিল। পি মানে "প্লাজমিড", এবং বিআর মানে "বলিভার" এবং "রদ্রিগেজ"। পিবিআর322 হল দৈর্ঘ্যে 4361 বেস জোড়া এবং এর দুটি অ্যান্টিবায়োটিক প্রতিরোধ জিন রয়েছে-জিন ব্লা যা অ্যাম্পিসিলিন প্রতিরোধের (এএমপিআর) প্রোটিনকে এনকোডিং করে এবং জিন টিটিএ যা টেট্রাসাইক্লিন প্রতিরোধের (টেটআর) প্রোটিনকে এনকোডিং করে। এতে পি. এম. বি1-এর প্রতিলিপির উৎস রয়েছে এবং রোপ জিন রয়েছে, যা প্লাজমিড অনুলিপি সংখ্যার একটি নিয়ন্ত্রককে এনকোড করে। প্লাজমিডে চল্লিশেরও বেশি সীমাবদ্ধতা উৎসেচকের জন্য অনন্য সীমাবদ্ধতা স্থান রয়েছে। এই চল্লিশটি স্থানের মধ্যে এগারোটি টেটআর জিনের মধ্যে রয়েছে। টেটআর জিনের প্রবর্তকের মধ্যে হিন্দ-3 এবং ক্লাই নামক সীমাবদ্ধ উৎসেচকের জন্য দুটি স্থান রয়েছে। এই অ্যান্টিবায়োটিক প্রতিরোধকারী জিনের উৎসের ভিতরে ছয়টি মূল সীমাবদ্ধতা স্থান রয়েছে যা হল টেট্রাসাইক্লিন-এর জন্য পি. এস. সি. 101 এবং অ্যামপিসিলিনের জন্য আর. এস. এফ. 2124। বৃত্তাকার ক্রমটি এমনভাবে অঙ্কিত করা হয় যে 0 হল অনন্য ইকোআরআই সাইটের মাঝখানে এবং টেটআর জিনের মাধ্যমে গণনা বৃদ্ধি পায়। উদাহরণস্বরূপ, যদি আমাদের অ্যাম্পিসিলিন অপসারণ করতে হয়, তাহলে আমাদের অবশ্যই পি. এস. টি. আই-এর বিরুদ্ধে সীমাবদ্ধতা এন্ডোনিউক্লিজ বা আণবিক কাঁচি ব্যবহার করতে হবে এবং তারপর পিবিআর 322 অ্যাম্পিসিলিনের বিরুদ্ধে প্রতিরোধী হয়ে উঠবে। টেট্রাসাইক্লিনে সন্নিবেশ নিষ্ক্রিয়করণের একই প্রক্রিয়া প্রয়োগ করা যেতে পারে। অ্যামপিআর জিন হল পেনিসিলিন বিটা-ল্যাক্টামেজ। প্রোমোটার পি1 এবং পি3 হল বিটা-ল্যাক্টামেজ জিনের জন্য। পি3 হল প্রাকৃতিক প্রবর্তক, এবং পি1 কৃত্রিমভাবে দুটি ভিন্ন ডিএনএ খণ্ডের বন্ধন দ্বারা পিবিআর322 তৈরি করা হয়। পি2 পি1-এর মতো একই অঞ্চলে রয়েছে, তবে এটি বিপরীত স্ট্র্যান্ডে রয়েছে এবং টেট্রাসাইক্লিন প্রতিরোধ জিনের দিকে প্রতিলিপি শুরু করে। পটভূমি প্রারম্ভিক ক্লোনিং পরীক্ষা-নিরীক্ষা প্রাকৃতিক প্লাজমিড যেমন কোলই1 এবং পিএসসি101 ব্যবহার করে পরিচালিত হতে পারে। এই প্লাজমিডগুলির প্রত্যেকটির সুবিধা এবং অসুবিধা থাকতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, কোলই1 প্লাজমিড এবং এর ডেরিভেটিভসগুলির উচ্চ অনুলিপি সংখ্যার সুবিধা রয়েছে এবং প্লাজমিডের ক্লোরামফেনিকল পরিবর্ধনকে প্লাজমিডের উচ্চ ফলন উত্পাদন করতে দেয়, তবে কোলিসিন ই1-এর প্রতিরোধের জন্য স্ক্রিনিং প্রযুক্তিগতভাবে সহজ নয়। সালমোনেলা পানামার একটি প্রাকৃতিক প্লাজমিড, প্লাজমিড পিএসসি 101, টেট্রাসাইক্লিন প্রতিরোধের অনুমোদন দেয় যা অ্যান্টিবায়োটিক নির্বাচনের সাথে সহজ স্ক্রিনিং প্রক্রিয়াটির অনুমতি দেয়, তবে এটি একটি কম অনুলিপি সংখ্যা প্লাজমিড যা প্লাজমিডের উচ্চ ফলন দেয় না। আরেকটি প্লাজমিড, আরএসএফ 2124, যা কোলই1 থেকে উদ্ভূত, অ্যাম্পিসিলিন প্রতিরোধ ক্ষমতা প্রদান করে কিন্তু বড়। অন্যান্য অনেক প্লাজমিড কৃত্রিমভাবে এমন একটি তৈরি করার জন্য তৈরি করা হয়েছিল যা ক্লোনিংয়ের উদ্দেশ্যে আদর্শ হবে এবং পিবিআর 322 অনেকের দ্বারা সর্বাধিক বহুমুখী বলে মনে করা হয়েছিল এবং তাই এটি সবচেয়ে জনপ্রিয়ভাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। এটিতে দুটি অ্যান্টিবায়োটিক প্রতিরোধের জিন রয়েছে, নির্বাচনযোগ্য চিহ্নিতকারী হিসাবে এবং বেশ কয়েকটি সুবিধাজনক অনন্য সীমাবদ্ধতা সাইট রয়েছে যা এটিকে ক্লোনিং ভেক্টর হিসাবে উপযুক্ত করে তুলেছে। প্লাজমিডটি 3টি প্রধান উৎস থেকে জেনেটিক উপাদান দিয়ে তৈরি করা হয়েছিল-পিএসসি 101-এর টেট্রাসাইক্লিন প্রতিরোধ জিন, আরএসএফ 2124-এর অ্যাম্পিসিলিন প্রতিরোধ জিন এবং কোলই1 প্লাজমিডের ঘনিষ্ঠ আত্মীয় পিএমবি1-এর প্রতিলিপি উপাদান। পিবিআর322-এর উপর ভিত্তি করে বিপুল সংখ্যক অন্যান্য প্লাজমিড বিশেষভাবে বিভিন্ন উদ্দেশ্যে তৈরি করা হয়েছে। উদাহরণের মধ্যে রয়েছে পি. ইউ. সি সিরিজের প্লাজমিড। এক্সট্রাক্রোমোসোমাল প্রোটিন এক্সপ্রেশন এবং শাটল ভেক্টরের জন্য বেশিরভাগ এক্সপ্রেশন ভেক্টর প্রতিলিপির পি. বি. আর. 322 উৎস ধারণ করে এবং পি. বি. আর. 322-এর টুকরোগুলি ক্রোমোজোম থেকে ডি. এন. এ-র লক্ষ্যযুক্ত সংহতকরণ এবং উত্তোলনের জন্য আন্তঃপ্রজাতি শাটল বা বাইনারি ভেক্টর এবং ভেক্টর নির্মাণে খুব জনপ্রিয়। ডি. এন. এ ক্রম পি. বি. আর. 322-এর ক্রম আরও দেখুন সীমাবদ্ধতা উৎসেচক কাটার সাইটগুলির তালিকা উল্লেখ বাহ্যিক লিঙ্ক পি. বি. আর. 322 মানচিত্র পি. বি. আর. 322 বৈশিষ্ট্য পি. বি. আর. 322 ডি. এন. এ মোবাইল জেনেটিক উপাদান আণবিক জীববিজ্ঞান কৌশল প্লাজমিড