Tissue cytometry
টিস্যু ইমেজ সাইটোমেট্রি বা টিস্যু সাইটোমেট্রি হল ডিজিটাল হিস্টোপ্যাথোলজির একটি পদ্ধতি এবং এটি ধ্রুপদী ডিজিটাল প্যাথোলজি (গ্লাস স্লাইড স্ক্যানিং এবং ভার্চুয়াল স্লাইড জেনারেশন) এবং গণনামূলক প্যাথোলজি (ডিজিটাল বিশ্লেষণ)-কে সমস্ত ধরনের রোগ, টিস্যু এবং কোষের প্রকারের পাশাপাশি আণবিক চিহ্নিতকারী এবং এই চিহ্নিতকারীগুলিকে দৃশ্যমান করার জন্য সংশ্লিষ্ট দাগযুক্ত পদ্ধতির সমাধান সহ একটি সমন্বিত পদ্ধতির সাথে একত্রিত করে। টিস্যু সাইটোমেট্রি ভার্চুয়াল স্লাইড ব্যবহার করে কারণ এগুলি একাধিক, বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ স্লাইড স্ক্যানার, পাশাপাশি ডেডিকেটেড ইমেজ অ্যানালাইসিস সফ্টওয়্যার দ্বারা তৈরি করা যেতে পারে-বিশেষত মেশিন এবং গভীর শিক্ষার অ্যালগরিদম সহ। টিস্যু সাইটোমেট্রি পুরু টিস্যুগুলির মধ্যে সেলুলার বিশ্লেষণকে সক্ষম করে, সংজ্ঞায়িত সেলুলার উপ-জনসংখ্যার উপর স্থানিক তথ্য সহ রূপতাত্ত্বিক এবং প্রাসঙ্গিক তথ্য ধরে রাখে। এই প্রক্রিয়ায়, একটি টিস্যু নমুনা, হয় ফরমালিন-ফিক্সড প্যারাফিন-এমবেডেড (এফএফপিই) বা হিমায়িত টিস্যু বিভাগ, যা "ক্রায়োকট" নামেও পরিচিত, তা ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (আইএইচসি) বা ইমিউনোফ্লোরেসেন্ট মার্কার দিয়ে লেবেল করা হয়, উচ্চ-থ্রুপুট স্লাইড স্ক্যানার দিয়ে স্ক্যান করা হয় এবং ভার্চুয়াল স্লাইড থেকে সংগৃহীত ডেটা এমন সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে প্রক্রিয়াজাত ও বিশ্লেষণ করা হয় যা টিস্যু প্রসঙ্গে পৃথক কোষগুলি স্বয়ংক্রিয়ভাবে সনাক্ত করতে এবং প্রতিটি কোষের জন্য নিউক্লিয়াস এবং সাইটোপ্লাজমের মধ্যে পার্থক্য করতে সক্ষম। অতিরিক্ত অ্যালগরিদমগুলি কোষীয় ঝিল্লি, উপকোষীয় কাঠামো (যেমন সাইটোস্কেলিটাল ফাইবার, ভ্যাকুওল, নিউক্লিওলি) এবং/অথবা বহুকোষী টিস্যু কাঠামো (গ্রন্থি, গ্লোমেরুলি, এপিডার্মিস বা টিউমার ফোসি) সনাক্ত করতে পারে। ফ্লুরোসেন্স অ্যাক্টিভেটেড সেল সার্টিং (এফ. এ. সি. এস) হল বিশ্লেষণের একটি পদ্ধতি যা একক কোষে ফ্লুরোসেন্স সংকেতগুলি পরিমাপ করে, যেখানে সংকেতটি অ্যান্টিবডি-মধ্যস্থ দাগ দেওয়ার কৌশল এবং ফ্লো সাইটোমেট্রি দ্বারা সনাক্ত করা ফেনোটাইপগুলি থেকে আসে। ফ্লো সাইটোমেট্রি-র প্রধান সীমাবদ্ধতা হল যে এটি শুধুমাত্র প্রয়োগ করা যেতে পারে-যেমন নাম থেকে বোঝা যায়-দ্রবণে থাকা কোষে। যদিও কঠিন টিস্যুকে "দ্রবণীয়" করার পদ্ধতি বিদ্যমান, তবে এই ধরনের যে কোনও প্রক্রিয়াকরণ টিস্যু স্থাপত্য এবং যে কোনও স্থানিক প্রসঙ্গকে অপরিবর্তনীয়ভাবে ধ্বংস করে দেয়। অতএব, টিস্যু সাইটোমেট্রি মৌলিক গবেষণা, ক্লিনিকাল অনুশীলন এবং ক্লিনিকাল ট্রায়ালগুলিতে ফ্লো সাইটোমেট্রি এবং ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের ব্যবহারকে পরিপূরক করে কঠিন টিস্যু বিভাগে (পাশাপাশি আনুগত্য কোষ সংস্কৃতি) এফ. এ. সি. এস-এর মতো বিশ্লেষণ প্রদান করে। ফ্লো সাইটোমেট্রি-র বিরুদ্ধে টিস্যু সাইটোমেট্রি-র সুবিধা হল যে টিস্যু সাইটোমেট্রি-র জন্য কোষগুলিকে তরলে ঝুলিয়ে রাখার প্রয়োজন হয় না, যা টিস্যু কাঠামো, অঙ্গসংস্থান এবং প্রাসঙ্গিক তথ্যের অখণ্ডতা বজায় রাখতে সহায়তা করে, আরও সুনির্দিষ্ট এবং সঠিক প্রাসঙ্গিক বিশ্লেষণে সহায়তা করে যা ফ্লো সাইটোমেট্রি-তে সম্ভব নয়। ইতিহাস ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি ক্লিনিকাল অনুশীলনে ব্যবহৃত হয়, যেখানে প্রতিটি সম্ভাব্য ক্যান্সার রোগীর টিস্যু বায়োপসি সংগ্রহ করা হয়, ফর্মালিনে স্থির করা হয় এবং প্যারাফিনের উপর এম্বেড করা হয়। এই টিস্যু বিভাগগুলি ক্লিনিকাল রোগ নির্ণয়ের জন্য ডায়াগনস্টিক উপাদানের প্রতিনিধিত্বকারী পাতলা বিভাগগুলি সরবরাহ করার জন্য একটি মাইক্রোটোমে ক্রমিকভাবে কাটা হয়। একবার ক্যান্সার কোষ সনাক্ত করার জন্য প্রাথমিকভাবে হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন দাগ দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। বিস্তার, বংশ, ভবিষ্যদ্বাণীমূলক এবং অনকোজেনিক লক্ষ্যগুলির জন্য একাধিক চিহ্নিতকারী দাগ দেওয়া হয়। প্যাথলজিস্টরা অবজেক্টিভ লেন্সের মাধ্যমে মূল্যায়নের জন্য অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করেন এবং শতাংশ বা ইতিবাচক/নেতিবাচক হিসাবে দাগ স্কোর করে রোগ নির্ণয় শেষ করেন। চাক্ষুষ মূল্যায়ন একটি বিষয়গত রোগ নির্ণয় এবং চিকিৎসার পরিকল্পনা প্রদান করে। একটি স্থির টিস্যুতে ইমিউনোস্টেইন্ড কোষের উপর ফ্লো সাইটোমেট্রি-এর মতো বিশ্লেষণ করার জন্য একটি আরও শক্তিশালী এবং স্বয়ংক্রিয় সিস্টেম ডিজাইন করা হয়েছিল এবং টিস্যু সাইটোমেট্রি বলা হয়। 1990-এর দশকে স্টেইনার এবং একার (সিইও/প্রতিষ্ঠাতা টিস্যুগনোস্টিক্স)-এর পেটেন্টের উপর ভিত্তি করে এই কৌশলটি চালু করা হয়েছিল, যা "টিস্যু বিভাগে বিভিন্ন কোষের জনসংখ্যার সাইটোমেট্রিক বিশ্লেষণ বা ফ্লোরোসন্স ডাই এবং/অথবা ক্রোমোজেনের মাধ্যমে দৃশ্যমান কোষ সংস্কৃতির" একটি পদ্ধতি বর্ণনা করে। একবিংশ শতাব্দীর গোড়ার দিকে হার্নানি ও অন্যান্যরা অতিরিক্ত পেটেন্ট দায়ের করেছিলেন। ইমিউনোস্টেইন্ড টিস্যুতে ভার্চুয়াল ফ্লো সাইটোমেট্রি সম্পাদন করা। পরেরটির মূল বিষয়গুলি 1982 সালে গিলেট এবং অন্যান্যদের দ্বারা উপস্থাপিত পদ্ধতি থেকে উদ্ভূত হয়েছিল, যা একটি বর্ণালী রেফারেন্স লাইব্রেরির সাথে ফ্যাক্টর বিশ্লেষণ ব্যবহার করে বর্ণালী মিশ্রণের গুণগত বিশ্লেষণ বর্ণনা করে। এই গবেষণার পরে, ঝোউ আর এবং অন্যান্যরা। পেরোক্সিডেস-অ্যান্টিপেরক্সিডেস (পিএপি) জটিল কৌশলের সাহায্যে প্রস্টেট টিউমারের হিস্টোলজিক অংশে প্রস্টেট-নির্দিষ্ট অ্যাসিড ফসফেটেজ (পিএসএপি)-এর পরিমাণ নির্ধারণের জন্য ডায়ামিনোবেঞ্জিডিন (ডিএবি)-কে স্তর হিসাবে ব্যবহার করে একটি পদ্ধতি প্রকাশ করেন। টিস্যু সাইটোমেট্রি টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্টের প্রয়োগঃ টিস্যু সাইটোমেট্রি গবেষণায় টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্টের বৈশিষ্ট্য নির্ধারণের জন্য ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। আই. এইচ. সি/আই. এফ-প্রক্রিয়াজাত টিস্যু বিভাগের মধ্যে ইমিউন ল্যান্ডস্কেপ বা টিউমার-ভাস্কুলারাইজেশন সনাক্তকরণ। একটি কারণ হল এই প্রযুক্তি ব্যবহার করে জটিল টিস্যু স্থাপত্য অক্ষত থাকে এবং তাই সেলুলার ফেনোটাইপ এবং/অথবা বহুকোষী কাঠামোর মধ্যে স্থানিক সম্পর্কও বিশ্লেষণ করা যেতে পারে। টিস্যু সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে একাধিক গবেষণা গোষ্ঠী বিভিন্ন ধরনের ক্যান্সারের রোগীদের বেঁচে থাকার উপর বিভিন্ন ইমিউন সেল উপ-জনসংখ্যার (সিডি4, সিডি68, সিডি8, সিডি20, ফক্সপি3, পিডি1) প্রভাব প্রদর্শন করতে সক্ষম হয়েছে। স্তন ক্যান্সার, কোলন ক্যান্সার, গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সার, মেলানোমা, নন-স্মল সেল ফুসফুসের ক্যান্সার)। যেহেতু ক্যান্সার থেরাপিতে একটি অভিনব চিকিৎসা কৌশল ইমিউন চেকপয়েন্টগুলিকে (অ্যান্টিটুমোরাল ইমিউন প্রতিক্রিয়া প্রতিরোধকারী অণু) লক্ষ্য করে, তাই টিস্যু সাইটোমেট্রি দ্বারা প্রাপ্ত অন্তর্দৃষ্টি নতুন লক্ষ্য অণু/বায়োমার্কার খুঁজে বের করার পাশাপাশি রোগীদের জন্য সর্বোত্তম চিকিত্সা কৌশল নির্ধারণ করতে সহায়তা করতে পারে। ইমিউনোলজিঃ ইমিউন কোষের প্রসঙ্গ প্রদাহজনক রোগের ব্যুৎপত্তি বর্ণনা করার জন্য গুরুত্বপূর্ণ, যা প্রায়শই অভিযোজিত এবং/অথবা সহজাত ইমিউন কোষের দুর্বল কার্যকারিতার ফলস্বরূপ হয়। টিস্যু সাইটোমেট্রি তাদের স্থানীয় টিস্যু পরিবেশের মধ্যে নির্দিষ্ট কোষ, বিশেষত ভিন্নধর্মী জনসংখ্যার সনাক্তকরণ এবং স্থানীয়করণের জন্য এবং রোগের পিছনে সংকেতগুলি সনাক্ত করার জন্য কার্যকর। উদাহরণস্বরূপ, এটি আইজিজি4-সম্পর্কিত রোগগুলি তদন্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিলঃ একটি গবেষণাপত্রে ফাইব্রোসিং মিডিয়াস্টিনাইটিস টিএইচ2 কোষের পরিবর্তে সিডি4 + সিটিএল দ্বারা চালিত হওয়ার কথা বলা হয়েছে যেখানে সিডি4 + সিটিএল-এর অনুপ্রবেশ টিস্যু সাইটোমেট্রি দ্বারা চিত্রিত করা হয়েছিল। ফলো-আপ স্টাডিজ তদন্ত করে যে ফলিকুলার টি কোষগুলি আইজিজি 4-সম্পর্কিত রোগ এবং কিমুরা রোগে বি-সেল ক্লাস-স্যুইচিং ইভেন্টগুলিকে কীভাবে প্রভাবিত করে-গবেষকরা টিস্যু সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে এআইসিডিএ + সিডি 19 + বি কোষ এবং আইজিজি 4 এক্সপ্রেশনের মধ্যে একটি সম্পর্ক খুঁজে পেয়েছেন। মেসেনকাইমাল স্টেম সেলের বৈশিষ্ট্যঃ মেসেনকাইমাল স্টেম সেল (এম. এস. সি) হল বহুমুখী কোষ যার হাড়, কার্টিলেজ, পেশী, দাঁতের বিকাশ এবং চর্বি টিস্যুর মতো বিভিন্ন উপ-প্রকারের মধ্যে পার্থক্য করার ক্ষমতা রয়েছে যার পুনরুত্পাদক ওষুধের জন্য ক্লিনিকাল গুরুত্ব রয়েছে। যাইহোক, যদিও ন্যূনতম ফেনোটাইপিক মানদণ্ড সংজ্ঞায়িত করা হয়েছে, এম. এস. সি-গুলিকে তাদের বৈচিত্র্যময় প্রকৃতির কারণে তাদের স্বতন্ত্র বায়োমার্কার সম্পর্কে আরও বৈশিষ্ট্যযুক্ত করা দরকার। টিস্যু সাইটোমেট্রি শান্ত এমসিএস-এর বায়োমার্কারগুলি বর্ণনা করতে এবং এই জনসংখ্যার উপর হায়ালুরোনানের প্রভাবকে আরও বৈশিষ্ট্যযুক্ত করতে প্রতিশ্রুতিবদ্ধভাবে সহায়তা করে। টিস্যু সাইটোমেট্রি গ্লিওব্লাস্টোমার সাথে এম. এস. সি-র মিথস্ক্রিয়া অনুসন্ধান করতেও ব্যবহার করা যেতে পারেঃ কোষের সংমিশ্রণ, এক্সট্রাসেলুলার ভেসিকল স্থানান্তর এবং আন্তঃকোষীয় যোগাযোগের বৈশিষ্ট্য নির্ধারণ করতে। উপরন্তু, টিস্যু সাইটোমেট্রি মুরিন হিপ্পোক্যাম্পাসের ছবি তুলতে এবং আলঝেইমার রোগের মডেল হিসাবে এম. এস. সি প্রতিস্থাপনের সাথে ইঁদুরের মধ্যে এম1/এম2 মাইক্রোগ্লিয়া কল্পনা করতে ব্যবহৃত হয়। কোভিড-19: কোভিড-19 মহামারীতে রোগের অগ্রগতি এবং তীব্রতার রূপরেখা তৈরি করতে বিভিন্ন সরঞ্জামের প্রয়োজন ছিল। টিস্যু সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে, গবেষকরা ইমিউন কোষ এবং সার্স-কোভ-2 ভাইরাসের আন্তঃক্রিয়া এবং রোগের উপর এর প্রভাব সম্পর্কে রিপোর্ট করেছেনঃ উদাহরণস্বরূপ, একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে সিডি4 + সাইটোটক্সিক টি কোষগুলি গুরুতর কোভিড-19-এ ফুসফুসে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রসারিত হয়েছে। আরেকটি অনুসন্ধান তীব্র কোভিড-19-এ লিম্ফ নোড এবং স্প্লিনে জীবাণু কেন্দ্রগুলির ক্ষতির চিত্র তুলে ধরে, যা মাল্টি-কালার ইমিউনোফ্লোরেসেন্স সাইটোমেট্রি দ্বারা দেখানো হয়েছিল। স্নায়ুবিজ্ঞানঃ স্নায়ু বিকাশ প্রক্রিয়া অনুসরণ করা স্নায়ুবিজ্ঞানের গবেষণার একটি সক্রিয় ক্ষেত্র। স্নায়ুতন্ত্রে বিভিন্ন উদ্দীপনার ভূমিকা নির্ধারণের জন্য পরিমাণগত টিস্যু বিশ্লেষণ ব্যাপকভাবে কাজে লাগানো হয়। একটি গবেষণা দল প্লুরিপোট্যান্ট স্টেম কোষের স্নায়বিক পার্থক্যের উপর চৌম্বক ক্ষেত্রের প্রভাব সম্পর্কে রিপোর্ট করেছে, যেখানে টিস্যু সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে ফেনোটাইপিক প্রভাবগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। স্নায়ুবিজ্ঞানে টিস্যু সাইটোমেট্রি-র আরেকটি প্রয়োগ হাইপোথ্যালামিক নিউরনের উপর চাপের প্রভাব মূল্যায়নের জন্য পরিকল্পিত একটি গবেষণায় দেখানো হয়েছিল। রেফারেন্স ক্লিনিকাল প্যাথলজি ল্যাবরেটরি কৌশল মেডিকেল ইমেজিং হিস্টোপ্যাথলজি মাইক্রোস্কোপি