Solid-phase reversible immobilization
সলিড-ফেজ রিভারসিবল ইমমোবিলাইজেশন বা এসপিআরআই হল দ্রবণ থেকে নিউক্লিক অ্যাসিড বিশুদ্ধ করার একটি পদ্ধতি। এটি সিলিকা-বা কার্বক্সিল-লেপা প্যারাম্যাগনেটিক পুঁতি ব্যবহার করে, যা পলিইথিলিন গ্লাইকোল এবং লবণের উপস্থিতিতে নিউক্লিক অ্যাসিডের সাথে বিপরীতভাবে আবদ্ধ হয়। এস. পি. আর. আই প্রযুক্তির একটি সাধারণ প্রয়োগ হল ক্রম প্রতিক্রিয়ার জন্য পি. সি. আর দ্বারা পরিবর্ধিত ডি. এন. এ-র নমুনাগুলি শুদ্ধ করাঃ নিউক্লিক অ্যাসিড পরিশোধন এস. পি. আর. আই পুঁতির ব্যবহার হল সিলিকা বা কার্বক্সিল গ্রুপের সাথে লেপযুক্ত প্যারাম্যাগনেটিক পুঁতি। যখন পলিথিলিন গ্লাইকোল এবং লবণের উচ্চ ঘনত্বের দ্রবণে পুঁতিগুলি পুনরায় স্থগিত করা হয়, তখন তারা নিউক্লিক অ্যাসিডের সাথে বিপরীতভাবে বাঁধতে সক্ষম হয়। নিউক্লিক অ্যাসিডের দীর্ঘ পলিমারগুলি ছোট পলিমারগুলির তুলনায় আরও দক্ষতার সাথে বাঁধে। একটি এসপিআরআই পরিশোধন সাধারণত নিম্নলিখিত পদক্ষেপগুলি অন্তর্ভুক্ত করেঃ পলিইথিলিন গ্লাইকোল এবং সোডিয়াম ক্লোরাইডের দ্রবণে এসপিআরআই পুঁতিগুলি নিউক্লিক অ্যাসিডের একটি নমুনার সাথে মিশ্রিত করা হয়। নিউক্লিক অ্যাসিডগুলি পুঁতির সাথে আবদ্ধ হয়। মিশ্রণটি একটি চৌম্বক ক্ষেত্রে স্থাপন করা হয়, যা নিউক্লিক-অ্যাসিড আবদ্ধ পুঁতিকে দ্রবণ থেকে পৃথক করে। দ্রবণটি সরিয়ে ফেলা হয় এবং পুঁতিগুলি 80 শতাংশ ইথানল দিয়ে জলে একাধিকবার ধুয়ে ফেলা হয়। অবশিষ্ট ইথানল অপসারণের জন্য পুঁতিগুলিকে শুকিয়ে যেতে দেওয়া হয়। পুঁতিগুলি চৌম্বক ক্ষেত্র থেকে সরানো হয় এবং জল বা একটি ইল্যুশন বাফার-এ পুনরায় স্থগিত করা হয়, যা পুঁতি থেকে নিউক্লিক অ্যাসিড মুক্ত করে। মিশ্রণটি আবার একটি চৌম্বক ক্ষেত্রে স্থাপন করা হয়, যা সমাধান থেকে পুঁতিগুলিকে পৃথক করে। দ্রবণটি, যা এখন বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিড ধারণ করে, অপসারণ করা হয় এবং নিম্নমুখী প্রয়োগের জন্য ব্যবহার করা হয়। আরও দেখুন নিউক্লিক অ্যাসিড পদ্ধতি ডিএনএ সিকোয়েন্সিং সলিড-ফেজ এক্সট্রাকশন রেফারেন্স নিউক্লিক অ্যাসিড