Magnetic-activated cell sorting
ম্যাগনেটিক-অ্যাক্টিভেটেড সেল সার্টিং (এম. এ. সি. এস) হল মিল্টেনি বায়োটেক দ্বারা উদ্ভাবিত তাদের পৃষ্ঠ অ্যান্টিজেন (সি. ডি অণু)-এর উপর নির্ভর করে বিভিন্ন কোষের জনসংখ্যার পৃথকীকরণের একটি পদ্ধতি। এম. এ. সি. এস নামটি কোম্পানির একটি নিবন্ধিত ট্রেডমার্ক। পদ্ধতিটি মিল্টেনি বায়োটেকের এম. এ. সি. এস সিস্টেমের সাহায্যে তৈরি করা হয়েছিল, যা সুপারপ্যারাম্যাগনেটিক ন্যানো পার্টিকেল এবং কলাম ব্যবহার করে। অতি-চৌম্বকীয় ন্যানো কণা 100 ন্যানোমিটারের ক্রমের হয়। এগুলি লক্ষ্যযুক্ত কোষগুলিকে কলামের ভিতরে ধরার জন্য ট্যাগ করতে ব্যবহৃত হয়। কলামটি স্থায়ী চুম্বকের মধ্যে স্থাপন করা হয় যাতে চৌম্বক কণা-কোষ কমপ্লেক্সটি যখন এর মধ্য দিয়ে যায়, তখন ট্যাগ করা কোষগুলি ধরা যায়। স্তম্ভটি ইস্পাত উল নিয়ে গঠিত যা স্থায়ী চুম্বকগুলির মধ্যে কলামটি স্থাপন করার সময় পৃথকীকরণের দক্ষতা সর্বাধিক করতে চৌম্বক ক্ষেত্রের গ্রেডিয়েন্ট বাড়ায়। চৌম্বকীয়-সক্রিয় কোষ বাছাই ইমিউনোলজি, ক্যান্সার গবেষণা, স্নায়ুবিজ্ঞান এবং স্টেম সেল গবেষণার মতো ক্ষেত্রে সাধারণত ব্যবহৃত একটি পদ্ধতি। মিল্টেনি মাইক্রোবাইড বিক্রি করে যা অ্যান্টিবডিগুলির সাথে সংযুক্ত চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেল যা নির্দিষ্ট কোষগুলিকে লক্ষ্য করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। প্রক্রিয়া এম. এ. সি. এস পদ্ধতি একটি নির্দিষ্ট পৃষ্ঠের অ্যান্টিজেনের বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডি দিয়ে আবৃত চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেল ব্যবহার করে কোষগুলিকে পৃথক করার অনুমতি দেয়। এর ফলে এই অ্যান্টিজেন প্রকাশকারী কোষগুলি চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেলের সাথে সংযুক্ত হয়। পুঁতি এবং কোষগুলিকে ইনকিউবেট করার পরে, সমাধানটি একটি শক্তিশালী চৌম্বক ক্ষেত্রের একটি কলামে স্থানান্তরিত হয়। এই ধাপে, ন্যানো পার্টিকেলের সাথে সংযুক্ত কোষগুলি (অ্যান্টিজেন প্রকাশ করে) কলামে থাকে, যখন অন্যান্য কোষগুলি (অ্যান্টিজেন প্রকাশ করে না) প্রবাহিত হয়। এই পদ্ধতিতে, নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেন (গুলি)-এর সাপেক্ষে কোষগুলিকে ইতিবাচক বা নেতিবাচকভাবে পৃথক করা যেতে পারে। ধনাত্মক এবং ঋণাত্মক নির্বাচন ধনাত্মক নির্বাচনের সাথে, চৌম্বক কলামের সাথে সংযুক্ত আগ্রহের অ্যান্টিজেন (গুলি) প্রকাশকারী কোষগুলি চৌম্বক ক্ষেত্র থেকে কলামটি সরিয়ে ফেলার পরে একটি পৃথক পাত্রে ধুয়ে ফেলা হয়। এই পদ্ধতিটি একটি নির্দিষ্ট ধরনের কোষের পৃথকীকরণের জন্য কার্যকর, উদাহরণস্বরূপ সিডি4 লিম্ফোসাইট। উপরন্তু, এটি শুক্রাণুর প্রাথমিক সনাক্তকরণকে সক্ষম করে যা অ্যাপোপটোসিস শুরু করে, যদিও তারা পর্যাপ্ত চেহারা এবং গতিশীলতা দেখাতে পারে। একটি চৌম্বকীয়-লেবেলযুক্ত রিসেপ্টর যা অ্যানেক্সিনের সাথে আবদ্ধ হয় শুক্রাণুতে যোগ করা হয়। স্বাভাবিক কোষের অভ্যন্তরে, ফসফ্যাটিডিলসেরিন অণু কোষের ঝিল্লির মধ্যে সাইটোপ্লাজমের দিকে অবস্থিত। তা সত্ত্বেও, যে কোষগুলি অ্যাপোপটোটিক প্রক্রিয়া শুরু করে, ফসফ্যাটিডিলসেরিন পরিবর্তে কোষের ঝিল্লির বাইরের দিকে মুখ করে থাকে, যা অ্যানেক্সিন কনজুগেটের সাথে আবদ্ধ হয়। অতএব, সাধারণ শুক্রাণু লেবেলযুক্ত রিসেপ্টরটির সাথে আবদ্ধ না হয়ে কলামের মধ্য দিয়ে যাবে। অন্যদিকে, প্রোপোপটিক শুক্রাণু আটকে থাকবে, যা চৌম্বকীয় লেবেলযুক্ত অ্যান্টিবডির জন্য শুক্রাণু নির্বাচন প্রক্রিয়া হিসাবে পরিণত হয়। অবশেষে, এই কৌশলটি তার কার্যকারিতা দেখিয়েছে, যদিও এটি সীমিত রয়ে গেছে। নেতিবাচক নির্বাচনের ক্ষেত্রে, ব্যবহৃত অ্যান্টিবডিগুলি পৃষ্ঠতলের অ্যান্টিজেনের (গুলি) বিরুদ্ধে থাকে যা আগ্রহের নয় এমন কোষে উপস্থিত বলে জানা যায়। কলামে কোষ/চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেলের দ্রবণ প্রয়োগের পরে এই অ্যান্টিজেনগুলি প্রকাশকারী কোষগুলি কলামের সাথে আবদ্ধ হয় এবং যে ভগ্নাংশটি এর মধ্য দিয়ে যায় তা সংগ্রহ করা হয়, কারণ এতে এই অবাঞ্ছিত অ্যান্টিজেনগুলির সাথে প্রায় কোনও কোষ থাকে না। পরিবর্তনগুলি আগ্রহের অ্যান্টিজেনের বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডির সাথে সংযুক্ত চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেলগুলি সর্বদা উপলব্ধ থাকে না, তবে এটিকে এড়িয়ে চলার একটি উপায় রয়েছে। যেহেতু ফ্লুরোফোর-সংযুক্ত অ্যান্টিবডিগুলি অনেক বেশি প্রচলিত, তাই অ্যান্টি-ফ্লুরোক্রোম অ্যান্টিবডিগুলির সাথে আবৃত চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেলগুলি ব্যবহার করা সম্ভব। এগুলি আগ্রহের অ্যান্টিজেনের বিরুদ্ধে ফ্লুরোসেন্ট-লেবেলযুক্ত অ্যান্টিবডিগুলির সাথে ইনকিউবেট করা হয় এবং এইভাবে অ্যান্টিজেনের ক্ষেত্রে কোষ পৃথকীকরণের জন্য কাজ করতে পারে। আরও দেখুন ফ্লো সাইটোমেট্রি ডায়নাবেডস ক্লাস্টার্স অফ ডিফারেন্সিয়েশন আণবিক জীববিজ্ঞান রেফারেন্স এস. মিল্টেনি, ডব্লিউ. মুলার, ডব্লিউ. উইচেল এবং এ. র্যাডব্রুচ, "হাই গ্রেডিয়েন্ট ম্যাগনেটিক সেল সেপারেশন উইথ এম. এ. সি. এস", সাইটোমেট্রি, ভলিউম। 11, না। 2, পিপি। 231-238,1990।