Glucose phosphate broth
গ্লুকোজ ফসফেট মশাল মিথাইল রেড (এমআর) পরীক্ষা এবং ভোগেস-প্রসকাউয়ার পরীক্ষা (ভিপি) করতে ব্যবহৃত হয়। উপাদান গ্লুকোজ-5 গ্রাম/লি ডিপোটাসিয়াম ফসফেট-5 গ্রাম/লি প্রোটোজ পেপটোন-5 গ্রাম/লি পাতিত জল-1000 মিলি পিএইচ-6.9 মিথাইল লাল পরীক্ষার নীতি এটি গ্লুকোজের গাঁজন দ্বারা মিশ্র অ্যাসিড উত্পাদন করার জন্য একটি জীবের ক্ষমতা নির্ধারণ করতে এবং মাধ্যমের বাফারিং ক্ষমতা অতিক্রম করতে ব্যবহৃত হয়। পদ্ধতি পরীক্ষা জীবের বিশুদ্ধ সংস্কৃতির সাথে ম্যাককঙ্কির (গ্লুকোজ ফসফেট মশাল) টিকাদান করুন। 35 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 48-72 ঘন্টার জন্য ঝোলটি জ্বালান। ইনকিউবেশনের পরে নলের পাশ দিয়ে সরাসরি ঝোলের মধ্যে 5 ফোঁটা মিথাইল লাল যোগ করুন। ব্যাখ্যা মাধ্যমের পৃষ্ঠে স্থিতিশীল লাল রঙের বিকাশ পিএইচ 4.4-এ নামিয়ে আনার জন্য পর্যাপ্ত অ্যাসিড উৎপাদনের ইঙ্গিত দেয় এবং একটি ইতিবাচক পরীক্ষা গঠন করে। যেহেতু অন্যান্য জীব পরীক্ষার স্তর থেকে কম পরিমাণে অ্যাসিড উৎপাদন করতে পারে, তাই হলুদ এবং লালের মধ্যে একটি মধ্যবর্তী কমলা রঙ বিকশিত হতে পারে। এটি ইতিবাচক পরীক্ষার ইঙ্গিত দেয় না। নিয়ন্ত্রণ মাধ্যমের প্রতিটি লট প্রস্তুত করার পরে ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ চালানো উচিত। ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণঃ এসচেরিচিয়া কোলাই নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণঃ ক্লেবসিয়েলা ভোগেস প্রসকাউয়ার পরীক্ষার নীতি এটি কিছু জীবের গ্লুকোজ গাঁজন থেকে একটি নিরপেক্ষ শেষ পণ্য, অ্যাসিটাইল মিথাইল কার্বিনল (অ্যাসিটয়েন) উত্পাদন করার ক্ষমতা নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়। ক্লেবসিয়েলা, এন্টারোব্যাক্টর ইত্যাদির মতো সদস্যদের দ্বারা উত্পাদিত একটি নিরপেক্ষ প্রতিক্রিয়াশীল শেষ পণ্য অ্যাসিটয়েনের উৎপাদন হল গ্লুকোজ বিপাকের প্রধান শেষ পণ্য এবং কম পরিমাণে মিশ্র অ্যাসিড গঠন করে। বায়ুমণ্ডলীয় অক্সিজেন এবং 40 শতাংশ কেওএইচ-এর উপস্থিতিতে, অ্যাসিটয়েন ডায়াসিটাইলে রূপান্তরিত হয় এবং α-ন্যাফথোল লাল রঙের কমপ্লেক্স বের করার জন্য অনুঘটক হিসাবে কাজ করে। মিডিয়া গ্লুকোজ ফসফেট ব্রথ রিজেন্টস এঃ α-ন্যাফথোল-5 গ্রাম অ্যাবসলিউট ইথাইল অ্যালকোহল-100 মিলি-0.6 মিলি-3 অংশ বিঃ কেওএইচ-40 গ্রাম পাতিত জল-100 মিলি-0.2 মিলি-1 অংশ পদ্ধতি গ্লুকোজ ফসফেট ব্রথের একটি টিউবকে পরীক্ষা জীবের বিশুদ্ধ ইনোকুলাম দিয়ে টিকাদান করুন এবং 24 ঘন্টার জন্য 35 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ইনকিউবেট করুন। এই ঝোলের 1 মিলি-তে 5 শতাংশ α-নাফথোলের 0.6 মিলি এবং 40 শতাংশ KOH-এর 0.2 মিলি যোগ করুন। মাঝারি থেকে বায়ুমণ্ডলীয় অক্সিজেন উন্মুক্ত করার জন্য নলটি আলতো করে নাড়ুন এবং নলটিকে 10-15 মিনিটের জন্য নিরবচ্ছিন্ন থাকতে দিন। ব্যাখ্যা একটি ইতিবাচক পরীক্ষা বিকারক যোগ করার 15 মিনিট বা তার বেশি সময়ের মধ্যে লাল রঙের বিকাশ দ্বারা প্রতিনিধিত্ব করা হয়, যা অ্যাসিটয়েনের জারণ পণ্য ডায়াসিটাইলের উপস্থিতি নির্দেশ করে। 1 ঘন্টা দাঁড়িয়ে থাকার পরে পরীক্ষাটি লাল হওয়া উচিত কারণ নেতিবাচক ভিপি কালচারগুলি তামার মতো রঙ তৈরি করতে পারে যার ফলে সম্ভাব্যভাবে একটি ভুল ইতিবাচক ব্যাখ্যা হতে পারে, কারণ মিশ্রিত হলে বিকারকগুলির ক্রিয়ার কারণেও। নিয়ন্ত্রণ মাধ্যমের প্রতিটি লট প্রস্তুত করার পরে ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ চালানো উচিত। ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণঃ ক্লেবসিয়েলা নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণঃ এসচেরিকিয়া কোলাই রেফারেন্স পিএইচ সূচক অণুজীববিজ্ঞান কৌশল