Minusheet perfusion culture system
মিনিশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেমটি আনুগত্য কোষের সংমিশ্রণে উন্নত কোষ কালচার পরীক্ষার জন্য এবং নির্বাচিত জৈব উপাদান, বিশেষ টিস্যু বাহক এবং সামঞ্জস্যপূর্ণ পারফিউশন কালচার পাত্রেগুলির সংমিশ্রণে বিশেষ টিস্যু তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়। মাইনশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেমের প্রযুক্তিগত বিকাশটি ইন ভিট্রো অবস্থার অধীনে জীবের মধ্যে পাওয়া বিশেষ টিস্যুগুলির অবস্থার যতটা সম্ভব কাছাকাছি সাদৃশ্যপূর্ণ পরিবেশ তৈরি করার ধারণা দ্বারা চালিত হয়েছিল। এই আবিষ্কারের ভিত্তিটি তাই মিনিশিট টিস্যু বাহকগুলিতে মাউন্ট করা সর্বোত্তম কোষের আনুগত্যের জন্য পৃথকভাবে নির্বাচিত জৈব উপাদান। উপরন্তু, সর্বদা শ্বাসযন্ত্রের গ্যাস সহ তাজা পুষ্টি সরবরাহ করতে এবং একটি টিস্যু-নির্দিষ্ট তরল পরিবেশ অনুকরণ করতে, টিস্যু বাহকগুলিকে সামঞ্জস্যপূর্ণ পারফিউশন কালচার পাত্রে ঢোকানো যেতে পারে। ফলস্বরূপ, বিভিন্ন প্রকাশনা দেখায় যে এই উদ্ভাবনী পদ্ধতির দ্বারা উত্পন্ন টিস্যুগুলি একটি চমৎকার এবং স্থিতিশীল গুণমান প্রদর্শন করে। সুতরাং, একদিকে সিস্টেমটি আনুগত্য কোষের সংস্কৃতি এবং বিশেষ টিস্যু উৎপাদনের জন্য একটি অত্যন্ত অভিযোজিত ভিত্তি প্রদান করে। অন্যদিকে মাইনুশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেম প্রচলিত স্ট্যাটিক 24 ওয়েল কালচার প্লেট এবং আধুনিক পারফিউশন কালচার প্রযুক্তির মধ্যে একটি পদ্ধতিগত ব্যবধানকে দূর করছে। পুনরুৎপাদনশীল ওষুধ, টিস্যু ইঞ্জিনিয়ারিং, ন্যানোটেকনোলজি, জৈব উপাদান গবেষণা এবং নতুন উন্নত ওষুধের উন্নত বিষাক্ততা পরীক্ষায় বিশেষায়িত টিস্যুগুলির গুরুত্বপূর্ণ প্রজন্মের প্রয়োজন। তবে, প্রায়শই দেখা যায় যে উত্থিত টিস্যুগুলি প্রত্যাশিত কার্যকরী বৈশিষ্ট্য প্রদর্শন করে না। পরিবর্তে ডিডিফারেন্সিয়েশন দেখা যায় [1-4]। এই কোষের জৈবিক পরিবর্তনগুলি কোষের বিচ্ছিন্নতার পরে উদ্ভূত হয় এবং সাব-অপ্টিমাল তরল পরিবেশ এবং জৈব পদার্থের উপর ছোটখাটো আঠার কারণে একটি পাত্রে স্থির সংস্কৃতির সময় এগিয়ে যায়। পুষ্টি এবং শ্বাসযন্ত্রের গ্যাসের সাথে আরও অনিয়ন্ত্রিত সরবরাহ, মেটাবোলাইট এবং প্যারাক্রাইন ফ্যাক্টরগুলির একটি ওভারশুট বা রিওলজিকাল স্ট্রেস অনুপস্থিত ডিডিফারেন্সিয়েশনের মাত্রা বাড়িয়ে তুলতে পারে। ফলস্বরূপ, বিশেষায়িত টিস্যুগুলির একটি সর্বোত্তম প্রজন্মের ক্ষেত্রে একটি শক্তিশালী কৌশলকে যতটা সম্ভব ক্ষতিকারক পরামিতিগুলি বাদ দিতে হবে, অন্যদিকে টিস্যু বিকাশের প্রক্রিয়াকে সমর্থনকারী কারণগুলি অবশ্যই তীব্র করতে হবে [5]। নির্বাচিত জৈব উপাদানগুলি টিস্যু বাহকের মধ্যে বিকাশকে উৎসাহিত করে প্রাকৃতিক পরিস্থিতিতে একটি সর্বোত্তম টিস্যু বিকাশের পূর্বশর্ত হল এক্সট্রাসেলুলার ম্যাট্রিক্সের সাথে একটি কোষ-নির্দিষ্ট মিথস্ক্রিয়া, যেখানে ইন ভিট্রো পরিস্থিতিতে এক্সট্রাসেলুলার ম্যাট্রিক্সের বিকল্প নির্বাচন করতে হয়। যাইহোক, গুরুত্বপূর্ণ সমস্যাটি হল যে একটি জৈব উপাদান একটি পরিপক্ক টিস্যুর মধ্যে কার্যকরী বৈশিষ্ট্যগুলির বিকাশকে ভাল এবং খারাপ অর্থে প্রভাবিত করতে পারে। ফলস্বরূপ, একটি ডিসেলুলারাইজড এক্সট্রাসেলুলার ম্যাট্রিক্স, সদ্য বিকশিত সিন্থেটিক পলিমার, বায়োডিগ্রেডেবল স্ক্যাফোল্ড, সিরামিক বা ধাতব মিশ্র ধাতুগুলির উপযুক্ততার পূর্বাভাস দেওয়া যায় না তবে অবশ্যই পরীক্ষা করা উচিত। কোষের আনুগত্য এবং যোগাযোগকে ইতিবাচকভাবে প্রভাবিত করে এমন পরামিতিগুলি পূরণ করার জন্য, প্রযুক্তিগত ধারণাটি একটি মাইনুশিট টিস্যু ক্যারিয়ারের উপর ভিত্তি করে তৈরি (চিত্র। 1)। এই সরঞ্জামের সাহায্যে কোষের আনুগত্য এবং টিস্যুর বিকাশ পৃথকভাবে নির্বাচিত জৈব উপাদান দিয়ে পরীক্ষা করা যেতে পারে। এই পরীক্ষাগুলি প্রথমে স্থির অবস্থায় করা যেতে পারে (চিত্র। 2) এবং তারপর গতিশীল (চিত্র। 3) সাংস্কৃতিক পরিস্থিতি [6]। উভয় ক্ষেত্রেই একটি মিনিশিট টিস্যু বাহক ক্ষতি প্রতিরোধ করে তবে পরীক্ষার সময় অন্তর্ভুক্ত কোষ বা টিস্যুগুলির বিকাশকে সমর্থন করে। একটি প্রচলিত 24 ওয়েল কালচার প্লেটের সঙ্গে সামঞ্জস্যপূর্ণ থাকার জন্য একটি নির্বাচিত জৈব উপাদানকে অবশ্যই 13 মিমি ব্যাসে ঘুষি মারতে হবে। এই বিন্যাসে অনেক উপকরণ বাণিজ্যিকভাবেও পাওয়া যায়। আরও উপকরণগুলি ফিল্টার, ফয়েল, জাল, পশম এবং স্ক্যাফোল্ডের আকারে প্রয়োগ করা যেতে পারে (চিত্র। 1এ)। একটি সহজ পরিচালনার জন্য এবং বিকাশের সময় ক্ষতি রোধ করার জন্য নির্বাচিত নমুনাগুলি একটি মিনিশিট টিস্যু বাহকের মূল অংশে স্থাপন করা হয় (চিত্র। 1বি)। একটি টান বলয়কে নিচে চাপা দিয়ে জৈব উপাদানটি অবস্থানে রাখা হয় (চিত্র। 1সি)। একটি টিস্যু বাহক স্থাপন করার পরে একটি ব্যাগে আবৃত করা হয় এবং জীবাণুমুক্ত করা হয়। টিস্যু বাহকের উপর কোষের বীজ বপন করা কোষের বীজ বপনের জন্য মাউন্ট করা টিস্যু বাহক একটি 24 ওয়েল কালচার প্লেটে একটি ফোর্সপস দ্বারা স্থানান্তরিত হয় (চিত্র। 2)। একটি টিস্যু ক্যারিয়ার কালচার মাধ্যমের উপরে কোষগুলিকে কেন্দ্রীভূত করার জন্য একটি স্তরে যোগ করা হয় যাতে নির্বাচিত জৈব উপাদানটি কেবল ভিজে যায়। তারপর কোষের একটি অ্যালিকোট একটি পিপেট দ্বারা মাউন্ট করা জৈব পদার্থের পৃষ্ঠে স্থানান্তরিত হয়। টিস্যু বাহক সহ একটি স্ট্যান্ডার্ড কালচার প্রোটোকল উপরের দিকে কোষের বীজ বপন করে শুরু করা যেতে পারে। যখন একটি টিস্যু বাহককে ঘুরিয়ে দেওয়া হয়, তখন কোষগুলিকে অন্য দিকেও বীজ বপন করা যেতে পারে যাতে দুটি ভিন্ন ধরনের কোষের সাথে সহ-সংস্কৃতির পরীক্ষা-নিরীক্ষা সম্ভব হয়। শুধুমাত্র একক কোষই নয়, একটি ছোট টিস্যু বাহকের মধ্যে একটি বোনা জালের দুটি টুকরোর মধ্যে টিস্যুর একটি পাতলা টুকরোও লাগানো যেতে পারে। আরও নমনীয় উপকরণ যেমন কোলাজেন শীট একটি ড্রামের ত্বকের মতো টিস্যু বাহকে ব্যবহার করা যেতে পারে। স্থানিক প্যারেনকাইমা বিকাশের জন্য একটি কৃত্রিম ইন্টারস্টিটিয়াম হিসাবে একটি পলিয়েস্টার পশম বসিয়ে শেষ কিন্তু অন্তত চমৎকার ফলাফল পাওয়া গেছে। এটা স্পষ্ট যে প্রতিটি বিশেষায়িত টিস্যুর জন্য একটি টিস্যু বাহকের মধ্যে খুব স্বতন্ত্র স্থানিক পরিবেশ তৈরি করা যেতে পারে। সামঞ্জস্যপূর্ণ পারফিউশন কালচার ধারক এটি দেখানো হয়েছে যে 24টি কূপ কালচার প্লেটের মধ্যে স্থির পরিবেশ পুষ্টি এবং হরমোনের হ্রাস, বিপাকের অনিয়ন্ত্রিত বৃদ্ধি এবং সময়ের সাথে সাথে প্যারাক্রাইন ফ্যাক্টরগুলির একটি ওভারশুটের দিকে পরিচালিত করে। এই কারণগুলির কারণে 24টি কূপ কালচার প্লেটে শুধুমাত্র স্বল্প সময়ের জন্য কোষের বীজ বপন করার জন্য অনুবর্তী কোষ সহ একটি ক্ষুদ্রতর টিস্যু বাহক ব্যবহার করা হয়। ফলস্বরূপ, কোষের সংযুক্তির পরে টিস্যু বাহককে একটি গতিশীল তরল পরিবেশ প্রদানের জন্য একটি পারফিউশন কালচার পাত্রে স্থানান্তরিত করা হয়। বিশেষায়িত টিস্যুগুলির পৃথক প্রয়োজনীয়তা পূরণের জন্য বিভিন্ন ধরনের পারফিউশন কালচার পাত্রে তৈরি করা হয়েছিল (চিত্র। 3)। প্রতিটি পারফিউশন কালচার পাত্রে কালচার মাধ্যম পরিবহনের জন্য কমপক্ষে একটি ইনলেট এবং একটি আউটলেট থাকে। একটি আধারের একটি মৌলিক সংস্করণ ক্রমাগত মাঝারি পরিবহনের অধীনে যথাক্রমে ক্রমবর্ধমান টিস্যুগুলির সহজ স্নানের অনুমতি দেয় (চিত্র। 4এ)। একটি গ্রেডিয়েন্ট পাত্রে টিস্যু বাহককে বেস এবং ঢাকনার মধ্যে স্থাপন করা হয় যাতে উভয় পক্ষের এপিথেলিয়ার জন্য একটি সাধারণ পরিবেশ অনুকরণ করে পৃথক মাধ্যম সরবরাহ করা যায় (চিত্র। 4বি)। আরও একটি কালচার ধারক একটি স্বচ্ছ ঢাকনা এবং বেস দিয়ে তৈরি করা হয় যা টিস্যু বিকাশের সময় মাইক্রোস্কোপিক পর্যবেক্ষণের অনুমতি দেয় (চিত্র। 4সি)। উপরন্তু, একটি পারফিউশন কালচার ধারক একটি নমনীয় সিলিকন ঢাকনা প্রদর্শন করতে পারে। একটি উৎকেন্দ্রিক ঘূর্ণক দ্বারা এই ঢাকনাতে বল প্রয়োগ করা কার্টিলেজ এবং হাড়ের টিস্যু ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের প্রয়োজন অনুসারে একটি যান্ত্রিক বোঝা অনুকরণ করে। একটি বিশেষ টিস্যু ইঞ্জিনিয়ারিং পাত্রে পৃথক স্ক্যাফোল্ড দিয়ে অরিকল বা বিভিন্ন ধরনের কার্টিলেজের মতো আকৃতির টিস্যু তৈরি করা যেতে পারে। পরিশেষে, পলিয়েস্টার পশম দিয়ে তৈরি একটি কৃত্রিম ইন্টারস্টিটিয়াম দিয়ে ভরা একটি পারফিউশন ধারকের মধ্যে রেনাল স্টেম/প্রজননক কোষ থেকে প্রাপ্ত নলগুলির স্থানিক সম্প্রসারণ পাওয়া যায়। পরিশেষে, এই সমস্ত পাত্রে একটি বিশেষ পলিকার্বোনেট (ম্যাক্রোলন®) থেকে মেশিন তৈরি করা হয় যাতে এগুলির সবগুলিই একাধিক ব্যবহারের জন্য অটোক্লেভ করা যায়। পারফিউশন কালচার পরীক্ষার কার্যকারিতা একটি পারফিউশন কালচার ধারকের মধ্যে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস প্রয়োজনীয় তাপমাত্রা বজায় রাখার জন্য, একটি হিটিং প্লেট (মেড্যাক্স-নাগেল, কিয়েল, জার্মানি) এবং একটি কভার ঢাকনা (দেখানো হয়নি) কয়েক সপ্তাহ ধরে কালচার পরীক্ষার সময় ব্যবহার করা হয় (চিত্র। 5, 7)। ধীরে ধীরে ঘূর্ণায়মান পেরিস্টাল্টিক পাম্প (আইএসএমএটিইসি, আইপিসি এন8, ওয়ার্থাইম, জার্মানি) ব্যবহার করে সংস্কৃতি মাধ্যমের পরিবহন সর্বোত্তমভাবে সম্পন্ন করা হয়। এটি প্রতি ঘন্টায় 0.1 থেকে 5 মিলিলিটারের মধ্যে সামঞ্জস্যযোগ্য এবং সঠিক পাম্পের হার সরবরাহ করতে সক্ষম। সংরক্ষণের বোতল থেকে পারফিউশন কালচারের মাধ্যমের মধ্য দিয়ে যাওয়ার সময় একটি মাউন্ট করা টিস্যু বাহক বরাবর পরিবহন করা হয় যাতে অন্তর্ভুক্ত কোষগুলি সরবরাহ করা যায়। একটি পারফিউশন কালচার ধারকের মধ্যে টিস্যু বাহকের সঠিক জ্যামিতিক স্থান সর্বদা তাজা পুষ্টি এবং সমস্ত দিক থেকে শ্বাসযন্ত্রের গ্যাস সহ মাঝারি সরবরাহের পরিবহনের সময় গ্যারান্টি দেয়। একই সময়ে এটি বিপাকীয় পণ্যগুলির একটি অ-শারীরবৃত্তীয় সংগ্রহ এবং প্যারাক্রাইন ফ্যাক্টরগুলির একটি ওভারশুটকে প্রতিরোধ করে। পুরো কালচার সময়ের জন্য এই নিয়ন্ত্রিত পরিবেশ বজায় রাখার জন্য, বিপাকীয় মাধ্যমটি একটি পৃথক বর্জ্য বোতলে সংগ্রহ করা হয়। ফলস্বরূপ, মাঝারি পুনরায় সঞ্চালিত হয় না। পারফিউশন কালচারের সময় পিএইচ-এর স্থিতিশীলতা সাধারণত একটি সিও2 ইনকিউবেটরে কোষ কালচার পরীক্ষা-নিরীক্ষা করা হয়। এছাড়াও এই ধরনের পরিবেশে পারফিউশন কালচার পরীক্ষা-নিরীক্ষা করা যেতে পারে। যাইহোক, একটি আরও ভাল সমাধান হল একটি পরীক্ষাগার টেবিলে বায়ুমণ্ডলীয় বাতাসের অধীনে পারফিউশন কালচার পরীক্ষার কার্যকারিতা, কারণ এটি সম্পূর্ণ পরিচালনাকে সহজতর করে। যাইহোক, এই ক্ষেত্রে সংস্কৃতি মাধ্যমকে বায়ুমণ্ডলীয় বায়ুর সাথে সামঞ্জস্য করতে হবে। একটি ইনকিউবেটরের মধ্যে 5 শতাংশ কার্বন ডাই অক্সাইড বায়ুমণ্ডলে মিডিয়াকে রাখা সর্বদা তুলনামূলকভাবে উচ্চ পরিমাণে NaHCO3 ধারণ করে যা 7.2 এবং 7.4 এর মধ্যে একটি ধ্রুবক পিএইচ বজায় রাখে। যদি একটি সিও2 ইনকিউবেটরের বাইরে পারফিউশন কালচারের জন্য এই ধরনের একটি সূত্রযুক্ত মাধ্যম ব্যবহার করা হয়, তবে বায়ুমণ্ডলীয় বাতাসে সিও2-এর (0.3%) কম পরিমাণের কারণে পিএইচ শারীরবৃত্তীয় পরিসীমা থেকে অনেক বেশি ক্ষারীয় মানগুলিতে স্থানান্তরিত হবে। এই কারণে সিও2 ইনকিউবেটরের বাইরে পারফিউশন কালচারের জন্য ব্যবহৃত যে কোনও মাধ্যমকে এনএইচসিও3-এর ঘনত্ব হ্রাস করে এবং/অথবা জৈবিক বাফার যেমন এইচইপিইএস (জিআইবিসিও/ইনভিট্রোজেন, কার্লসরুহে, জার্মানি) বা বাফার অল (সিগমা-অ্যালড্রিচ-কেমি, মুচেন, জার্মানি) যোগ করে স্থিতিশীল করতে হবে। জৈব বাফার দ্রবণের ক্রমবর্ধমান পরিমাণ মাধ্যমের একটি অ্যালিকোটে মিশ্রিত করে প্রয়োজনীয় পরিমাণ সহজেই নির্ধারণ করা যেতে পারে। তারপর মাধ্যমটিকে অবশ্যই বায়ুমণ্ডলীয় বাতাসের অধীনে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে একটি থার্মো প্লেটে সারা রাত ভারসাম্য বজায় রাখতে হবে। উদাহরণস্বরূপ, 50 এম. এম. ও. এল/এল. এইচ. ই. পি. ই. এস-এর প্রয়োগ বা বাফার অল-এর সমতুল্য (সিএ। 1 শতাংশ) থেকে আইএমডিএম (ইসকোভের পরিবর্তিত ডুলবেক্কোর মাধ্যম, জিআইবিসিও/ইনভিট্রোজেন) একটি পরীক্ষাগার টেবিলে বায়ুমণ্ডলীয় বায়ুর অধীনে দীর্ঘমেয়াদী পারফিউশন কালচার জুড়ে 7.4 এর একটি ধ্রুবক পিএইচ বজায় রাখবে। মাঝারি মাত্রায় অক্সিজেনের প্রাপ্যতা পারফিউশন কালচার পরীক্ষায় একটি গ্যাস পারগম্য সিলিকন টিউবের মাধ্যমে আইএমডিএম-এর মতো একটি নির্বাচিত মাধ্যমের O2-এর উচ্চ সম্পৃক্ততা পেতে হয়। একটি সিলিকন নলের ব্যবহার একটি পাতলা প্রাচীর (1 মিমি), ছোট অভ্যন্তরীণ ব্যাস (1 মিমি) এবং এর বর্ধিত দৈর্ঘ্যের (1 মিটার) কারণে বিচ্ছুরণের মাধ্যমে গ্যাস বিনিময়ের জন্য একটি বড় পৃষ্ঠ সরবরাহ করে। উদাহরণস্বরূপ, একটি স্ট্যান্ডার্ড পারফিউশন কালচার পরীক্ষার সময় বায়ুমণ্ডলীয় বায়ুর বিরুদ্ধে সামঞ্জস্যপূর্ণ আইএমডিএম (3024 মিলিগ্রাম/এল NaHCO3,50 mmol/L HEPES) বিশ্লেষণ কমপক্ষে 160 মিমি এইচজি O2 [7] এর ধ্রুবক আংশিক চাপ দেখায়। অক্সিজেন সামগ্রীর মড্যুলেশন এটি দেখানো হয়েছে যে ক্রমবর্ধমান কোষ এবং টিস্যুগুলির খুব পৃথক অক্সিজেন প্রয়োজনীয়তা রয়েছে। এই কারণে এটি গুরুত্বপূর্ণ যে অক্সিজেনের বিষয়বস্তু পৃথক পারফিউশন কালচার পরীক্ষায় অভিযোজিত হতে পারে। প্রযুক্তিগত সমাধান হল একটি গ্যাস এক্সচেঞ্জার মডিউল যা একটি গ্যাস ইনলেট এবং আউটলেট ধারণ করে (চিত্র। 6এ)। আরও মাঝারি পরিবহনের জন্য একটি দীর্ঘ পাতলা-প্রাচীরযুক্ত সিলিকন টিউব সহ একটি সর্পিল মডিউলের ভিতরে স্থাপন করা হয়। যেহেতু নলটি অত্যন্ত গ্যাস-প্রবেশযোগ্য, তাই এটি গ্যাস বিনিময় মডিউলের কালচার মাঝারি এবং অভ্যন্তরীণ বায়ুমণ্ডলের মধ্যে গ্যাসের সর্বোত্তম বিস্তারের নিশ্চয়তা দেয়। ফলস্বরূপ, মডিউলের মধ্য দিয়ে একটি নির্দিষ্ট গ্যাস মিশ্রণের ধ্রুবক প্রবাহের মাধ্যমে কাঙ্ক্ষিত গ্যাস বায়ুমণ্ডলকে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে। এইভাবে অক্সিজেন বা অন্য যে কোনও গ্যাসের উপাদানকে বিস্তারের মাধ্যমে মাধ্যমের মধ্যে নিয়ন্ত্রিত করা যেতে পারে। এই সহজ প্রোটোকল প্রয়োগ করে সম্পূর্ণ জীবাণুমুক্ত অবস্থায় দীর্ঘমেয়াদী কালচার পরীক্ষার সময় পরিবাহিত মাধ্যমের মধ্যে অক্সিজেনের আংশিক চাপ হ্রাস করা সম্ভব হয়েছিল [7]। ক্ষতিকারক গ্যাসের বুদ্বুদ অপসারণ পারফিউশন কালচার পরীক্ষা-নিরীক্ষা করে সর্বদা বিবেচনা করতে হবে যে কালচার মাধ্যমের ধীর পরিবহনের সময় গ্যাসের বুদ্বুদ তৈরি হচ্ছে। এগুলি স্টোরেজ বোতলে মাঝারি স্তন্যপানের সময়, নলের মধ্যে পরিবহনের সময়, কালচার ধারকের মধ্যে বিতরণের সময় এবং বর্জ্য বোতলের পথে অপসারণের সময় উদ্ভূত হয়। অজানা কারণে গ্যাসের বুদ্বুদ বিশেষত টিউব, সংযোগকারী এবং পারফিউশন পাত্রেগুলির মধ্যে উপাদান পরিবর্তনের সময় জমা হয়। প্রথমে এই গ্যাস বুদ্বুদগুলি এত ছোট যে সেগুলি মানুষের চোখ দিয়ে পর্যবেক্ষণ করা যায় না, তবে কালচার মাধ্যমের চলমান পরিবহনের সময় এগুলি আকারে বৃদ্ধি পায় এবং একটি এম্বোলাস তৈরি করতে সক্ষম হয় যা মাঝারি প্রবাহকে ব্যাপকভাবে বাধা দেয়। একটি কালচার ধারকের মধ্যে গ্যাসের বুদ্বুদগুলি মাঝারি সরবরাহের আঞ্চলিক ঘাটতির দিকে পরিচালিত করছে এবং তরলের ধারাবাহিকতায় বিরতি সৃষ্টি করছে যাতে ব্যাপক তরল চাপ পরিবর্তিত হয়। একটি গ্রেডিয়েন্ট পারফিউশন কালচার পাত্রে, যেখানে দুটি মাধ্যম ঠিক একই গতিতে পরিবহন করা হয়, এম্বোলিক প্রভাবগুলি চাপের পার্থক্যের দিকে পরিচালিত করতে পারে যার ফলে অন্তর্ভুক্ত এপিথেলিয়াল বাধা [5,9] ধ্বংস হতে পারে। পারফিউশন কালচার পরীক্ষার মধ্যে গ্যাস বুদ্বুদের ঘনত্ব এড়াতে, একটি গ্যাস এক্সপ্যান্ডার মডিউল তৈরি করা হয়েছিল (চিত্র। 6বি)। এই মডিউলটি পরিবহনের সময় মাধ্যম থেকে গ্যাসের বুদ্বুদ সরিয়ে দেয়। মাঝারি যখন গ্যাস এক্সপ্যান্ডার মডিউলে প্রবেশ করে, তখন এটি একটি ছোট জলাধারের মধ্যে উত্থিত হয় এবং একটি বাধা নিচে নামার আগে প্রসারিত হয়। এই প্রক্রিয়া চলাকালীন গ্যাসের বুদবুদগুলি গ্যাস এক্সপ্যান্ডার মডিউলের শীর্ষে থাকা মাধ্যম থেকে পৃথক করা হয়। ফলস্বরূপ, ধারকটি ছেড়ে যাওয়ার মাধ্যমটি অক্সিজেন-স্যাচুরেটেড তবে গ্যাসের বুদ্বুদ থেকে মুক্ত [8,9]। অ্যাপ্লিকেশনগুলির বিস্তৃত বর্ণালী বিগত বছরগুলিতে মাইনুশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেম নিয়ে অনেক গবেষণাপত্র প্রকাশিত হয়েছিল। বিস্তৃত বর্ণালীটি দেখায় যে মডুলার সিস্টেমটি টিস্যু ইঞ্জিনিয়ারিং, জৈব উপাদান গবেষণা এবং উন্নত ফার্মাসিউটিক্যাল ড্রাগ বিষাক্ততা পরীক্ষায় ব্যবহৃত দুর্দান্ত কোষ জৈবিক মানের বিশেষ টিস্যু তৈরি করতে প্রয়োগ করা হয়েছিল। এই অ্যাপ্লিকেশনগুলির একটি সম্পূর্ণ তালিকা ডেটা ব্যাঙ্কে পাওয়া যায় 'প্রোসিডিংস ইন পারফিউশন কালচার' ('এক্সটার্নাল লিঙ্ক' দেখুন)। অসংখ্য পেটেন্ট (ডিই 39 23,279, ডিই 42 00,446, ডিই 42 08 805, ডিই 44 43 902, ডিই 19530 556, ডিই 196 48 876 সি2, ডিই 199 52,847 বি4, ইউএস 5 190 878, ইউএস 5 316 945, ইউএস 5 665 599, জে 2847669, ডিই 10 2005,002 938, পিএ 10 2004 054 125.6, পিএ 10 2005 001 747.9, পেটেন্ট বিচারাধীন) দ্বারা প্রদর্শিত হয়েছে। উইল ডব্লিউ. মিনুথ উপস্থাপিত মিনিশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেম আবিষ্কার করেছেন। লুসিয়া ডেঙ্ক এবং উইল ডব্লিউ মিনুথ বিগত বছরগুলিতে মাইনুশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেমের সাথে অসংখ্য পরীক্ষামূলক পরীক্ষা-নিরীক্ষা করেছেন। পরীক্ষামূলক কাজটি বর্তমানে আহত রেনাল প্যারেনকাইমা মেরামতের জন্য একটি কৃত্রিম পলিয়েস্টার ইন্টারস্টিটিয়াম তৈরির দিকে মনোনিবেশ করছে। 1992 সালে জার্মানির মিউনিখে মিনিশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেম ফিলিপ মরিস গবেষণা পুরস্কার 'চ্যালেঞ্জ অফ দ্য ফিউচার' লাভ করে। পুরস্কারটি হস্তান্তর করেন হেনরি কিসিঞ্জার, হ্যান্স জোয়াকিম ফ্রেডরিখস এবং পল মুলার। বাজারে মিনিশিট পারফিউশন কালচার সিস্টেম চালু করার জন্য, ক্যাথরিন লরেঞ্জ-মিনুথ অলাভজনক ভিত্তিক মিনিসেলস এবং মিনিটিসু ভার্ট্রিয়েবস জিএমবিএইচ (ডি-93077 ব্যাড অ্যাবাচ/জার্মানি) প্রতিষ্ঠা করেছিলেন। বাহ্যিক লিঙ্ক পারফিউশন কালচারের কার্যধারা ফিলিপ মরিস স্টিফটুং মাইনশিট ওয়েবসাইট রেফারেন্স 1। এলাউট জি, হেঙ্কেনস টি, পাপেলিউ পি, স্নাইকার্স এস, ভিনকেন এম, ভানহেকে টি, রোজিয়ার্স ভি (2006) বিচ্ছিন্ন হেপাটোসাইট এবং তাদের সংস্কৃতির বিভাজন প্রক্রিয়ার অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়া। কার ড্রাগ মেটাব 7 (6): 629-60। 2. শুহ ই, হফম্যান এস, স্টক কে, নটবোম এইচ, মুলার আর, রটার এন (2011) 3ডি-তে কনড্রোসাইট রিডিফারেন্সিয়েশনঃ আঠালো সাইটের ঘনত্ব এবং স্তর স্থিতিস্থাপকতার প্রভাব। জে বায়োমেড ম্যাটার রেস এঃ ডিওআই 10.1002/jbm.a.33226। 3. ঝাং ওয়াই, লি টিএস, লি এস. টি, ওয়াওরোস্কি কে. এ, চেং কে, গালাং জি, মাল্লিয়ারাস কে, আব্রাহাম এম. আর, ওয়াং সি, মারবান ই (2010) স্তন্যপায়ী ক্যাডিওমায়োসাইটের বিচ্যুতি এবং বিস্তার 2010 প্লাস ওয়ান 5 (9): ই12559। 4. লিউ ওয়াই, জিয়াং এক্স, ইউ এমকে, ডং জে, ঝাং এক্স, সাং এলএল, চুং ওয়াইডব্লিউ, লি টি, চ্যান এইচসি (2010) অস্থিমজ্জা থেকে উদ্ভূত নিউরন থেকে বিচ্ছিন্নতা এবং ট্রান্সলাইনেজ পুনর্বিন্যাসের মাধ্যমে এপিথেলিয়াল কোষে স্যুইচ করা। সেল বায়োল ইন্ট 34 (11): 1075-83। 5টি। মিনথ ডাব্লিউডাব্লিউ এবং ডেনক এল 2011 আনুগত্য কোষের সাথে উন্নত সংস্কৃতি পরীক্ষা-নিরীক্ষা। পারফিউশন কালচারে একক কোষ থেকে বিশেষ টিস্যু পর্যন্ত। আইএসবিএন নং। 978-3-88246-330-9, http://epub.uni-regensburg.de/21484 6। মিনুথ ডাব্লিউডাব্লিউ, ডেঙ্ক এল, গ্ল্যাশাউসার এ 2010 একাধিক বিশেষায়িত টিস্যু উৎপাদনের জন্য একটি মডুলার কালচার সিস্টেম। জৈব উপাদান 31:2945-2954। 7. স্ট্রেহল আর, শুমাখার কে, মিনুথ ডাব্লিউডাব্লিউ 2004 পারফিউশন সংস্কৃতিতে ভ্রূণের রেনাল এক্সপ্ল্যান্টগুলিতে নিয়ন্ত্রিত শ্বাসযন্ত্রের গ্যাস সরবরাহ করেছে। টিস্যু ইং 10 (7-8): 1196-203। 8. মিনুথ ডাব্লিউডাব্লিউ, স্ট্রেহল আর, শুমাখার কে 2004 টিস্যু ফ্যাক্টরিঃ কার্যকরী টিস্যুগুলির ইন ভিট্রো প্রজন্মের জন্য একটি মডুলার সিস্টেমের ধারণাগত নকশা। টিস্যু ইং 10:285-294। 9টি। মিনুথ ডাব্লিউডাব্লিউ, ডেনক এল, রোজগার এ 2009 গ্রেডিয়েন্ট পারফিউশন কালচার-বায়োমেডিসিনে এপিথেলিয়ার জন্য একটি টিস্যু-নির্দিষ্ট পরিবেশ অনুকরণ করা। জে এপিথেলিয়াল বায়োলজি অ্যান্ড ফার্মাকোলজি 2:1-13। জৈব উপাদান জৈব ওষুধ কোষ সংস্কৃতি আণবিক জীববিজ্ঞান কৌশল