Umu Chromotest
ফার্মাকোলজি এবং জেনেটিক্সের জন্য, উমু ক্রোমোটেস্ট, প্রথম বিকশিত এবং ওডা এট আল দ্বারা প্রকাশিত, রাসায়নিক যৌগগুলির জিনোটক্সিক সম্ভাব্যতা মূল্যায়নের জন্য একটি জৈবিক পরীক্ষা (জৈব বিশ্লেষণ)। এটি ডিএনএ-ক্ষতিকারক এজেন্টদের উমু অপেরনের অভিব্যক্তি প্ররোচিত করার ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে। রেকা, লেক্সা এবং ইউএমইউডি-র ক্ষতির সাথে সম্পর্কিত, ইউএমইউসি জিন মূলত এসওএস প্রতিক্রিয়ার মাধ্যমে ব্যাকটেরিয়াল মিউটেজেনেসিসে জড়িত। এই পরীক্ষাটি একটি অপেরন ফিউশন ব্যবহার করে যা ল্যাক অপেরনকে (β-গ্যালাক্টোসিডেস উৎপাদনের জন্য দায়ী, একটি প্রোটিন যা ল্যাকটোজকে অবনমিত করে) ইউমু-সম্পর্কিত প্রোটিনের নিয়ন্ত্রণে রাখে। ল্যাকটোজ অ্যানালগ যোগ করে একটি সাধারণ কালারিমেট্রিক পরীক্ষা সম্ভব যা β-গ্যালাক্টোসিডেস দ্বারা অবনমিত হয়, একটি রঙিন যৌগ তৈরি করে যা স্পেকট্রোফোটোমেট্রি-র মাধ্যমে পরিমাণগতভাবে পরিমাপ করা যেতে পারে। রঙ বিকাশের মাত্রা হল উৎপাদিত β-গ্যালাক্টোসিডেসের একটি পরোক্ষ পরিমাপ, যা নিজেই ডিএনএ ক্ষতির পরিমাণের সাথে সরাসরি সম্পর্কিত। ইউমু ক্রোমোটেস্টের পদ্ধতিটি আই. এস. ও 13829-এর অধীনে "জলের গুণমান-ইউমু-টেস্ট ব্যবহার করে জল এবং বর্জ্য জলের জিনোটক্সিসিটি নির্ধারণ"-এর অধীনে বিধিবদ্ধ করার অতিরিক্ত সুবিধা রয়েছে। যদিও জিনোটক্সিসিটিকে মানুষের ক্যান্সারের বিকাশের সাথে সরাসরি যুক্ত করা যায় না, তবে ব্যাকটেরিয়ায় জিনোটক্সিক প্রভাব এবং স্তন্যপায়ী প্রাণীদের মধ্যে তাদের মিউটেজেনিক এবং টিউমার-সূচনাকারী বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে একটি শক্তিশালী সম্পর্ক বিদ্যমান বলে প্রমাণিত হয়েছে। তত্ত্ব সালমোনেলা টাইফিমুরিয়াম টিএ 1535 [পিএসকে 1002] ব্যাকটেরিয়া একটি 96-কূপের মাইক্রোপ্লেটে সম্ভাব্য জিনোটক্সিক পরীক্ষার যৌগের সংস্পর্শে আসে। যদি ব্যাকটেরিয়ার জিনোমে জিনোটক্সিক ক্ষত তৈরি হয়, তবে সাধারণ এস. ও. এস প্রতিক্রিয়ার অংশ হিসাবে ইউ. এম. ইউ. সি জিন প্ররোচিত হয়। প্লাজমিড পি. এস. কে. 1002-এ ল্যাকজেড রিপোর্টার জিনের সাথে সংযুক্ত ইউ. এম. ইউ. সি জিন রয়েছে, অনেকটা এস. ও. এস ক্রোমোটেস্টের ফিউশনের মতো। ইউএমইউসি-জিনের প্রবর্তন এইভাবে নমুনার জিনোটক্সিক সম্ভাবনার একটি পরিমাপ। যেহেতু বিটা-গ্যালাক্টোসিডেসের জন্য ইউএমইউসি-জিন ল্যাকজেড-জিনের সাথে সংযুক্ত থাকে, তাই ল্যাকজেড-এনকোডেড বি-গ্যালাক্টোসিডেস দ্বারা বর্ণহীন ওএনপিজি সাবস্ট্রেট (ও-নাইট্রোফেনিল-বিটা-ডি-গ্যালাক্টোপাইরানোসাইড)-কে হলুদ পণ্য ও-নাইট্রোফেনিলে রূপান্তরিত করে পরিমাপ করে বিটা-গ্যালাক্টোসিডেস ক্রিয়াকলাপ নির্ধারণের মাধ্যমে ইউএমইউসি-জিনের প্রবর্তন সহজেই মূল্যায়ন করা যেতে পারে। যেহেতু এস. ও. এস প্রতিক্রিয়া জিনোটক্সিক ক্ষতগুলির একটি সাধারণ প্রতিক্রিয়া, তাই উপযুক্ত রিপোর্টার জিন গঠনের সাথে এস. টাইফিমুরিয়ামের একটি স্ট্রেন সমস্ত শ্রেণীর ব্যাকটেরিয়াল জিনোটক্সিন সনাক্ত করার জন্য যথেষ্ট। অন্যান্য ব্যাকটেরিয়াল জিনোটক্সিসিটি এবং মিউটেজেনিসিটি অ্যাসেসের মতো, ক্রিয়াকলাপের জন্য বিপাকীয় সক্রিয়করণের প্রয়োজন এমন যৌগগুলি এস 9 মাইক্রোসোমাল ইঁদুরের লিভার নির্যাস যোগ করে তদন্ত করা যেতে পারে। পদ্ধতির এস. টাইফিমুরিয়াম ব্যাকটেরিয়া বৃদ্ধির সূচকীয় পর্যায়ে ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণের পাশাপাশি শূন্যস্থান সহ তিনবার পরীক্ষার নমুনার ঘনত্ব হ্রাসের জন্য 2 ঘন্টার জন্য উন্মুক্ত থাকে। 2 ঘন্টা পরে, এক্সপোজার কালচারগুলি তাজা বৃদ্ধির মাধ্যমে পাতলা করা হয় এবং আরও 2 ঘন্টার জন্য বাড়তে দেওয়া হয়। ইউএমইউসি জিন এবং ফিউজড ল্যাকজেড রিপোর্টার জিনের প্রবর্তন এবং পরবর্তী β-গ্যালাক্টোসিডেসের অভিব্যক্তি ব্যাকটেরিয়ার লিসিসের পরে মূল্যায়ন করা হয়। রঙহীন ওএনপিজি প্ররোচিত β-গ্যালাক্টোসিডেসের উপস্থিতিতে হলুদ পণ্য ও-নাইট্রোফিনাইলে রূপান্তরিত হয়। রঙের তীব্রতা প্ররোচিত প্রোটিনের পরিমাণের সাথে সম্পর্কযুক্ত এবং এইভাবে পরীক্ষার নমুনার জিনোটক্সিক শক্তি। পরিমাণগত মেট্রিক্স ব্যবহার করা হয়, যার মধ্যে প্লেটের শোষণ বৃদ্ধি পর্বের আগে এবং পরে ওডি 600 এ পড়া হয়, পাশাপাশি ওএনপিজি ইনকিউবেশনের পরে ওডি 420। এটি সাইটোটক্সিসিটিও উপস্থিত রয়েছে কিনা এবং আইআর মানগুলিকে অকার্যকর করছে কিনা তা নির্ধারণ করার জন্য ইন্ডাকশন অনুপাত (আইআর), পাশাপাশি বৃদ্ধির ফ্যাক্টর গণনা করার অনুমতি দেয়। উপকারিতা মিউটেজেনিসিটির জন্য উমু ক্রোমোটেস্ট এবং ঐতিহ্যবাহী অ্যামেস পরীক্ষার মধ্যে উচ্চ সম্পর্ক প্রতি বছর সংশ্লেষিত হাজার হাজার নতুন ফার্মাসিউটিক্যাল, কৃষি এবং শিল্প রাসায়নিকের প্রাথমিক পর্যায়ের পরীক্ষার জন্য একটি যুক্তিসঙ্গত বিকল্প হিসাবে এটিকে সমর্থন করে। বেশিরভাগ বড় রাসায়নিক প্রস্তুতকারকের ঐতিহ্যবাহী অ্যামেস পরীক্ষার মাধ্যমে প্রতি বছর 100 বা তার বেশি সিন্থেটিক রাসায়নিক পরীক্ষা করার ক্ষমতা রয়েছে, যার জন্য বেশ কয়েকটি সালমোনেলা স্ট্রেন ব্যবহার করা প্রয়োজন। ইউমু পরীক্ষা, শুধুমাত্র একটি সালমোনেলা স্ট্রেন ব্যবহার করে, সম্ভাব্যভাবে একই সম্পদ সহ নতুন রাসায়নিকের একটি বৃহত্তর পরিসীমা পরীক্ষা করতে পারে। বস্তুগত ব্যয় এবং শ্রম হ্রাসের পাশাপাশি এর মজবুততাও এটিকে জটিল পরিবেশগত নমুনার জন্য উপযুক্ত পর্দা হিসাবে স্থান দিয়েছে। তথ্যসূত্র পরীক্ষা