Supravital staining
সুপ্রাভিটাল স্টেনিং হল কোনও জীব থেকে অপসারণ করা জীবন্ত কোষগুলি পরীক্ষা করার জন্য মাইক্রোস্কোপি-তে ব্যবহৃত স্টেনিংয়ের একটি পদ্ধতি। এটি ইন্ট্রাভিটাল স্টেইনিং থেকে আলাদা, যা শরীরে দাগটি ইনজেকশন দিয়ে বা অন্যথায় প্রবর্তন করে করা হয়। সুতরাং একটি সুপ্রাভিটাল দাগের বিষাক্ততা বেশি হতে পারে, কারণ অল্প কিছু কোষের অল্প সময়ের জন্য বেঁচে থাকার প্রয়োজন হয়। "গুরুত্বপূর্ণ দাগ" শব্দটি কিছু লেখক বিশেষভাবে একটি ইন্ট্রাভিটাল দাগকে বোঝাতে ব্যবহার করেন, এবং অন্যরা একটি সুপ্রাভিটাল দাগের সাথে বিনিময়যোগ্যভাবে ব্যবহার করেন, মূল ধারণাটি হল যে পরীক্ষা করা কোষটি এখনও জীবিত। যেহেতু কোষগুলি জীবন্ত এবং অপরিবর্তিত থাকে, তাই শরীরের বাইরে অতিপ্রাকৃত দাগগুলি অস্থায়ী প্রকৃতির হয়। সবচেয়ে সাধারণ সুপ্রাভিটাল দাগটি নতুন মিথাইলিন নীল বা উজ্জ্বল ক্রেসিল নীল ব্যবহার করে রেটিকুলোসাইটগুলিতে সঞ্চালিত হয়, যা সুপ্রাভিটাল দাগ দ্বারা এই জীবন্ত অপরিণত লাল রক্তকণিকাগুলিতে বৈশিষ্ট্যগতভাবে অধঃক্ষিপ্ত রাইবোজোমের রেটিকুলোফিলামেন্টাস প্যাটার্নটি দেখা সম্ভব করে তোলে। এই ধরনের কোষের সংখ্যা গণনা করে লোহিত রক্তকণিকা গঠনের হার নির্ধারণ করা যেতে পারে, যা অস্থি মজ্জার ক্রিয়াকলাপ এবং রক্তাল্পতা সম্পর্কে একটি অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে। এটি গুরুত্বপূর্ণ দাগের বিপরীতে, যখন ব্যবহৃত রঙটি জীবন্ত কোষ থেকে বাদ দেওয়া হয় যাতে শুধুমাত্র মৃত কোষগুলি ইতিবাচকভাবে দাগযুক্ত হয়। (গুরুত্বপূর্ণ দাগের মধ্যে রয়েছে ট্রাইপ্যান নীল এবং প্রোপিডিয়াম আয়োডাইডের মতো রঙ, যা হয় খুব ভারী বা কোষের ঝিল্লি অতিক্রম করার জন্য খুব বেশি চার্জযুক্ত, অথবা যা সক্রিয়ভাবে জীবিত কোষ দ্বারা দ্রুত পাম্প করা হয়।) এফ. এ. সি. এস বিশ্লেষণের মতো প্রয়োগের জন্য কোষের পৃষ্ঠের অ্যান্টিবডি স্টেইনিং (ইমিউনোফ্লোরেসেন্স)-এর সাথে সুপ্রাভিটাল স্টেইনিং একত্রিত করা যেতে পারে। ডিটারজেন্ট ট্রাইটন এক্স-100 ব্যবহার করে বিপরীতমুখী কোষের ব্যাপ্তিযোগ্যকরণের মাধ্যমে জীবন্ত কোষের অভ্যন্তরেও ইমিউনোফ্লোরেসেন্স করা যেতে পারে। কোষের সংখ্যার জন্য উপযুক্ত ঘনত্বের সাথে যত্ন সহকারে সামঞ্জস্য করা, প্রাক-চিকিত্সা কোষের অভ্যন্তরে 1 থেকে 150 কিলোডাল্টনের মধ্যে অণুগুলির প্রবেশাধিকারের অনুমতি দিতে পারে। যদিও এই প্রসঙ্গে অ্যান্টিবডিগুলি একইভাবে ব্যবহার করা যেতে পারে, তবে "সুপ্রাভিটাল স্টেন" শব্দটি সাধারণত ছোট রাসায়নিকের জন্য সংরক্ষিত থাকে যা অভ্যন্তরীণভাবে উপযুক্ত বৈশিষ্ট্য ধারণ করে। আর. বি. সি-র জন্য সাধারণ সুপ্রাভিটাল রঞ্জকের উদাহরণগুলিঃ নতুন মিথাইলিন নীল উজ্জ্বল ক্রেসিল নীল স্ফটিক বেগুনি মিথাইল বেগুনি নীল হোয়েকস্ট দাগ রেফারেন্স দাগ