Cytometry
সাইটোমেট্রি হল কোষের সংখ্যা এবং বৈশিষ্ট্যের পরিমাপ। সাইটোমেট্রিক পদ্ধতি দ্বারা পরিমাপ করা যেতে পারে এমন ভেরিয়েবলগুলির মধ্যে রয়েছে কোষের আকার, কোষ গণনা, কোষের অঙ্গসংস্থান (আকৃতি ও কাঠামো), কোষ চক্র পর্যায়, ডিএনএ সামগ্রী এবং কোষের পৃষ্ঠে বা সাইটোপ্লাজমে নির্দিষ্ট প্রোটিনের অস্তিত্ব বা অনুপস্থিতি। সম্পূর্ণ রক্ত গণনার মতো সাধারণ রক্ত পরীক্ষায় রক্ত কোষের বৈশিষ্ট্য এবং গণনা করতে সাইটোমেট্রি ব্যবহার করা হয়। একইভাবে, কোষ জীববিজ্ঞান গবেষণায় এবং চিকিৎসা নির্ণয়ে ক্যান্সার এবং এইডসের মতো রোগের সাথে সম্পর্কিত বিস্তৃত প্রয়োগগুলিতে কোষগুলিকে চিহ্নিত করতে সাইটোমেট্রি ব্যবহার করা হয়। সাইটোমেট্রিক যন্ত্র ইমেজ সাইটোমিটার ইমেজ সাইটোমেট্রি হল সাইটোমেট্রি-র প্রাচীনতম রূপ। ইমেজ সাইটোমিটারগুলি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে বিপুল সংখ্যক কোষের স্থিতিশীল ইমেজিং দ্বারা কাজ করে। বিশ্লেষণের আগে, কোষগুলি সাধারণত বৈসাদৃশ্য বাড়ানোর জন্য বা ফ্লোরোক্রোম দিয়ে লেবেল করে নির্দিষ্ট অণু সনাক্ত করার জন্য দাগযুক্ত হয়। ঐতিহ্যগতভাবে, ম্যানুয়াল গণনায় সহায়তা করার জন্য হিমোসাইটোমিটারের মধ্যে কোষগুলি দেখা হয়। ডিজিটাল ক্যামেরা প্রবর্তনের পর থেকে, 1990-এর দশকের মাঝামাঝি সময়ে, ইমেজ সাইটোমিটারের অটোমেশন স্তর ক্রমাগত বৃদ্ধি পেয়েছে। এর ফলে সহজ সেল কাউন্টার থেকে শুরু করে পরিশীলিত উচ্চ-সামগ্রী স্ক্রিনিং সিস্টেম পর্যন্ত স্বয়ংক্রিয় চিত্র সাইটোমিটারের বাণিজ্যিক প্রাপ্যতা দেখা দিয়েছে। ফ্লো সাইটোমিটার মাইক্রোস্কোপি স্বয়ংক্রিয় করার প্রাথমিক সমস্যার কারণে, ফ্লো সাইটোমিটার 1950-এর দশকের মাঝামাঝি থেকে প্রভাবশালী সাইটোমেট্রিক যন্ত্র হয়ে উঠেছে। ফ্লো সাইটোমিটারগুলি প্রবাহ কৌশল ব্যবহার করে একক কোষগুলিকে সারিবদ্ধ করে কাজ করে। কোষগুলি আলোকীয়ভাবে বা কুল্টার নীতি নামে একটি বৈদ্যুতিক প্রতিবন্ধকতা পদ্ধতি ব্যবহার করে চিহ্নিত করা হয়। অপটিক্যালি চিহ্নিত করার সময় নির্দিষ্ট অণুগুলি সনাক্ত করার জন্য, কোষগুলি বেশিরভাগ ক্ষেত্রে একই ধরনের ফ্লোরোক্রোম দ্বারা দাগযুক্ত থাকে যা ইমেজ সাইটোমিটার দ্বারা ব্যবহৃত হয়। ফ্লো সাইটোমিটার সাধারণত ইমেজ সাইটোমিটারের তুলনায় কম তথ্য সরবরাহ করে, তবে এর থ্রুপুট উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি। সেল সার্টার হল ফ্লো সাইটোমিটার যা কোষগুলিকে তাদের বৈশিষ্ট্য অনুযায়ী শ্রেণীবদ্ধ করতে সক্ষম। ইঙ্কজেট প্রিন্টারগুলিতে যে প্রযুক্তি ব্যবহার করা হয় তার অনুরূপ প্রযুক্তি ব্যবহার করে বাছাই করা হয়। যান্ত্রিক কম্পনের মাধ্যমে তরল প্রবাহটি বিন্দুতে বিভক্ত হয়ে যায়। তারপর ফোঁটাগুলির মধ্যে থাকা কোষের বৈশিষ্ট্য অনুযায়ী ফোঁটাগুলিকে বৈদ্যুতিকভাবে চার্জ করা হয়। তাদের চার্জের উপর নির্ভর করে, ফোঁটাগুলি অবশেষে একটি বৈদ্যুতিক ক্ষেত্র দ্বারা বিভিন্ন পাত্রে বিপথগামী হয়। টাইম-ল্যাপস সাইটোমিটার টাইম-ল্যাপস সাইটোমিটারের একটি প্রধান বৈশিষ্ট্য হল আলো-নির্গমনকারী ডায়োডের মতো অ-তাপ-উৎপাদনকারী আলোর উৎসগুলির ব্যবহার। এটি একটি টাইম-ল্যাপস সাইটোমিটারকে একটি প্রচলিত সেল কালচার ইনকিউবেটরের ভিতরে স্থাপন করার অনুমতি দেয় যাতে ইনকিউবেটরের ভিতরে তাপ তৈরি না করে সেলুলার প্রক্রিয়াগুলির অবিচ্ছিন্ন পর্যবেক্ষণ সহজতর হয়। ইতিহাস হিমোসাইটোমিটার সাইটোমেট্রি-র প্রাথমিক ইতিহাস রক্ত কোষ গণনার বিকাশের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে জড়িত। কার্ল ভন ভিয়েরর্ড, লুই-চার্লস মালাসেজ, কার্ল বার্কার এবং অন্যান্যদের কাজের মাধ্যমে 19 শতকের শেষের দিকে রক্ত কোষের ঘনত্ব একটি রক্ত কোষ গণনা চেম্বার, হিমোসাইটোমিটার এবং একটি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে সঠিকভাবে পরিমাপ করা যেতে পারে। 1950-এর দশক পর্যন্ত রক্ত কোষ গণনা করার জন্য হিমোসাইটোমিটার ছিল আদর্শ পদ্ধতি। রক্ত কোষ গণনা প্রয়োগগুলিতে হিমোসাইটোমিটার এখন বৈদ্যুতিন কোষ কাউন্টার দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছে। যাইহোক, হিমোসাইটোমিটার এখনও কোষ কালচার পরীক্ষাগারে কোষ গণনা করার জন্য ব্যবহার করা হচ্ছে। মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে গণনা করার ম্যানুয়াল কাজটি পর্যায়ক্রমে ছোট স্বয়ংক্রিয় চিত্র সাইটোমিটার দ্বারা নেওয়া হয়। ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ 1904 সালে, জেনার কার্ল জিস-এ মরিৎজ ভন রোহর এবং আগস্ট কোলার প্রথম অতিবেগুনী মাইক্রোস্কোপ তৈরি করেন। অণুবীক্ষণ যন্ত্রের উদ্দেশ্য ছিল চাক্ষুষ আলোর চেয়ে কম তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলোকসজ্জা ব্যবহার করে উচ্চতর আলোকীয় রেজোলিউশন অর্জন করা। যাইহোক, জৈবিক উপাদান পর্যবেক্ষণ করার সময় তারা অটোফ্লোরেসেন্স নিয়ে সমস্যার সম্মুখীন হয়েছিল। সৌভাগ্যবশত, কোহলার ফ্লুরোসেন্সের সম্ভাবনা দেখেছিলেন। রবার্ট উডের কাজের উপর ভিত্তি করে 1910 সালে জেইসে হেইনরিচ লেহম্যান ফ্লুরোসেন্স এক্সাইটেশন আলোর জন্য একটি ফিল্টারিং কৌশল তৈরি করেছিলেন। যাইহোক, তাঁর তৈরি "লুমিনেজেনজমিক্রোস্কপ" বাজারে দ্বিতীয় স্থানে ছিল, অস্কার হেইমস্ট্যাড্ট দ্বারা স্বাধীনভাবে তৈরি, যিনি ভিয়েনার অপ্টিশে ওয়ার্ক এজি-তে কাজ করেছিলেন, যা আজ লাইকা মাইক্রোসিস্টেমের একটি অংশ। সাইটোফোটোমেট্রি 1930-এর দশকের গোড়ার দিকে বিভিন্ন সংস্থা অতিবেগুনী ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপ তৈরি করেছিল। বর্তমানে প্রতিষ্ঠিত হিমোসাইটোমিটারের বাইরে যাওয়ার জন্য সাইটোমেট্রি নির্ধারণ করা হয়েছিল। এই সময়ে, স্টকহোমের ক্যারোলিনস্কা ইনস্টিটিউটে কর্মরত টরবজর্ন ক্যাসপারসন সাইটোফোটোমিটার নামে ক্রমবর্ধমান আরও পরিশীলিত যন্ত্রের একটি সিরিজ তৈরি করেছিলেন। এই যন্ত্রগুলি সেলুলার নিউক্লিক অ্যাসিড এবং কোষের বৃদ্ধি ও কার্যকারিতার সাথে তাদের সম্পর্ক পরিমাপ করতে একটি স্পেকট্রোফোটোমিটারের সাথে একটি ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপকে একত্রিত করে। ক্যাসপারসনের প্রাথমিক যন্ত্রপাতি এখন আশাহীনভাবে আদিম বলে মনে হয়। কিন্তু, এই আদিম যন্ত্রটিও ফলাফল পেয়েছিল এবং অন্যান্য গবেষকদের দৃষ্টি আকর্ষণ করেছিল। 1940-এর দশক থেকে বিশ্লেষণাত্মক কোষবিজ্ঞানের অনেক অগ্রগতি স্টকহোমে তীর্থযাত্রা করা লোকদের দ্বারা করা হয়েছিল। পালস সাইটোফোটোমেট্রি দ্বিতীয় বিশ্বযুদ্ধের সময় কোষ গণনা স্বয়ংক্রিয় করার প্রথম প্রচেষ্টা করা হয়েছিল। গাকার এবং অন্যান্য। অ্যারোসোলে ব্যাকটেরিয়া সনাক্ত করার জন্য একটি যন্ত্র তৈরি করে। ল্যাগারক্র্যান্টজ মাইক্রোস্কোপির উপর ভিত্তি করে একটি স্বয়ংক্রিয় সেল কাউন্টার তৈরি করে এবং মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে পৃথকভাবে গণনা করার জন্য কোষগুলিকে সারিবদ্ধ করার অসুবিধাগুলি চিহ্নিত করে, যেমনটি মলদাভান 1934 সালে প্রস্তাব করেছিলেন। জোসেফ এবং ওয়ালেস কুল্টার একটি তরলে স্থগিত মাইক্রোস্কোপিক কণাগুলির গণনা এবং আকারের জন্য বৈদ্যুতিক প্রতিবন্ধকতা ব্যবহার করার নীতি উদ্ভাবন করে এই অসুবিধাগুলি প্রদক্ষিণ করেন। এই নীতিটি আজ কুল্টার নীতি হিসাবে পরিচিত এবং 1954 সালে কুল্টার ইলেকট্রনিক্স দ্বারা প্রকাশিত স্বয়ংক্রিয় রক্ত কোষ কাউন্টারে ব্যবহৃত হয়েছিল। "কুল্টার কাউন্টার" ছিল প্রথম বাণিজ্যিক প্রবাহ সাইটোমিটার। 1960-এর দশকে ডিট্রিচ, গোহদে এবং কামেনস্কি 30 বছর আগে ক্যাসপারসন দ্বারা প্রবর্তিত নকশার উন্নতি করেছিলেন। ডিট্রিচ এবং গোহদের পালস সাইটোফোটোমিটার একটি জেইস ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপের চারপাশে নির্মিত হয়েছিল এবং 1968 সালে পার্টেক জিএমবিএইচ দ্বারা আইসিপি 11 হিসাবে বাণিজ্যিকীকরণ করা হয়েছিল। 1970 সালে বায়ো/ফিজিক্স সিস্টেমস ইনকর্পোরেটেড কামেনস্কির যন্ত্রটিকে সাইটোগ্রাফ হিসাবে বাণিজ্যিকীকরণ করে। এই যন্ত্রগুলি পূর্ববর্তী কুল্টার কাউন্টারের মতো কোষ গণনা করতে সক্ষম ছিল। তবে আরও গুরুত্বপূর্ণ বিষয় হল, তারা কোষীয় বৈশিষ্ট্যগুলি পরিমাপ করতেও সক্ষম ছিল। যাইহোক, এই প্রাথমিক সাইটোফোটোমিটারগুলি মাইক্রোস্কোপি-ভিত্তিক। ফ্লো সাইটোমেট্রি 1953 সালে ক্রসল্যান্ড-টেলর মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে লোহিত রক্তকণিকা গণনা করার একটি ব্যর্থ প্রচেষ্টা প্রকাশ করেছিলেন যেখানে তিনি কোষগুলিকে হাইড্রোডায়নামিকভাবে ফোকাস করার জন্য ম্যান তরল ব্যবহার করে কোষগুলিকে সারিবদ্ধ করার সমস্যা সমাধান করেছিলেন। 1960-এর দশকের শেষের দিকে লস আলামোস ন্যাশনাল ল্যাবরেটরির ভ্যান ডিল্লা প্রথম অ-মাইক্রোস্কোপি-ভিত্তিক সাইটোফোটোমিটার তৈরি করেন। তিনি মূলত মাইক্রোস্কোপির জন্য তৈরি ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক এবং একটি লেজার-ভিত্তিক ফ্লুরোসেন্ট সনাক্তকরণ ব্যবস্থার সাথে ক্রসল্যান্ড-টেলরের সাফল্যের সংমিশ্রণে এটি করেছিলেন-ফ্লো সাইটোমিটার যা আমরা আজ জানি। ফুলউইলার, লস আলামোস-এও, 1965 সালে প্রথম সেল সার্টার তৈরি করতে অবিচ্ছিন্ন ইঙ্কজেট প্রিন্টার প্রযুক্তির সাথে কুল্টার নীতির সংমিশ্রণ করে। 1973 সালে স্টেইনক্যাম্প এবং লস আলামোসের দলটি একটি ফ্লুরোসেন্স-ভিত্তিক কোষ সার্টারের সাথে অনুসরণ করে। 1978 সালে ফ্লোরিডার পেনসাকোলায় আমেরিকান ইঞ্জিনিয়ারিং ফাউন্ডেশনের সম্মেলনে পালস সাইটোফোটোমেট্রি নামটি পরিবর্তন করে ফ্লো সাইটোমেট্রি করা হয়, যা দ্রুত জনপ্রিয় হয়ে ওঠে। সেই সময়ে পালস সাইটোফোটোমেট্রি ফ্লো সাইটোমেট্রি-র আধুনিক রূপে বিকশিত হয়েছিল, যা দশ বছর আগে ভ্যান ডিল্লা দ্বারা প্রবর্তিত হয়েছিল। আরও দেখুন ভর সাইটোমেট্রি রেফারেন্স বাহ্যিক লিঙ্ক সাইটোমেট্রি ভলিউম 10 বাই পারডিউ ইউনিভার্সিটি সাইটোমেট্রি ল্যাবরেটরিজ রক্ত পরীক্ষা কোষ জীববিজ্ঞান ক্লিনিকাল প্যাথোলজি ফ্লো সাইটোমেট্রি ল্যাবরেটরি কৌশল ল্যাবরেটরি সরঞ্জাম জৈবিক কৌশল এবং সরঞ্জাম