Объединение Руси
Начавшаяся в 1558 году Ливонская война, в которую в 1561 году вступило Великое княжество Литовское, оказалась для него непосильным бременем. В 1569 году оно было вынуждено объединиться с Королевством Польским и образовать совместное государство, известное как Речь Посполитая. Кроме прочего, Великое княжество Литовское лишалось южнорусских (ныне украинских) земель, перешедших в состав Польши. Брестская уния 1596 года привела к расколу православного населения Речи Посполитой, борьбе униатов и православных и государственной дискриминации не принявших Унию. В рамках полемики обеих сторон наблюдалось как дальнейшее отчуждение униатов от идеи общерусского единства, так и усиленное обращение к ней в кругах православных деятелей Западной Руси, углубивших её идеологические основы и начала.
Русско-польские войны
С этого времени война приобрела в основном характер противостояния Русского царства и Великого княжества Литовского и велась преимущественно на территории последнего. В 1563 году русским войском был взят Полоцк, но развить успех не удалось, так как в 1564 году русское войско потерпело поражение в битве при Чашниках. Вскоре после этого была введена опричнина (1565—1572). В 1569 году Великое княжество Литовское объединилось с Королевством Польским в единую Речь Посполитую.