Juan José Mariano Rocha
Liniers emitió el 6 de septiembre un documento, ante la posibilidad de una segunda invasión, instando a la población a organizarse en cuerpos militares separados según su origen hispano. El primer batallón que había sido originado para defender a Buenos Aires fue la Compañía de Cazadores Correntinos el 14 de agosto del mismo año que quedó al mando de Juan José Fernández Blanco y que sería agregada como novena compañía del nuevo «Batallón de Voluntarios Urbanos Cántabros de la Amistad» o bien Tercio de Vizcaínos.
Misión de Ajacán
Los españoles lograron fundar un asentamiento estable en 1565 en San Agustín (Florida), el primero fundado por europeos en lo que hoy es Estados Unidos. En los dos años siguientes establecieron otros nueve puestos de avanzada militares (presidios) desde la bahía de Tampa alrededor de la península de Florida y la costa atlántica hasta Santa Elena, en una isla frente a Port Royal (Carolina del Sur). Sólo los presidios de San Agustín y Santa Elena duraron más de tres años. Desde Santa Elena, Juan Pardo recibió el encargo de dirigir las expediciones al interior buscando una ruta a las minas de plata mexicanas. Fundó el Fuerte San Juan en 1567-68 en el cacicazgo regional de Joara como el primer asentamiento europeo en el interior de Norteamérica en el oeste de la actual Carolina del Norte, fundando asimismo otras cinco guarniciones en el interior. Todos fueron pronto destruidos por los nativos americanos. Se han encontrado restos arqueológicos en el Fuerte San Juan y Joara.