استخلاص الرنا
[[ملف:PhOH-CHCl3 extraction.svg|250px|تصغير|يسار|استخلاص الرنا عبر استخلاص الطورين [[:en:Aqueous two-phase system|(en)]] وترسيب الإيثانول [[:en:Ethanol precipitation|(en)]].]]
'''استخلاص الرنا''' {{إنج|RNA extraction}} هو تنقية الرنا من العينات البيولوجية، هذا الإجراء معقد بسبب تواجد إنزيمات ال[[ريبونوكلياز|ريبونزكلياز]] الوفير في الخلايا والأنسجة، والتي بإمكانها تفكيك الرنا بسرعة.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة |مؤلف=Peirson SN, Butler JN |عنوان=RNA extraction from mammalian tissues |صحيفة=Methods Mol. Biol. |المجلد=362 |العدد= |صفحات=[https://archive.org/details/circadianrhythms00rosa/page/315 315–27] |سنة=2007 |pmid=17417019 |doi=10.1007/978-1-59745-257-1_22 |سلسلة=Methods in Molecular Biology |isbn=978-1-58829-417-3 |مسار=https://archive.org/details/circadianrhythms00rosa/page/315 | مسار أرشيف = https://web.archive.org/web/20200823003755/https://archive.org/details/circadianrhythms00rosa/page/315 | تاريخ أرشيف = 23 أغسطس 2020 }}</ref> تُستَخدم العديد من الطرق في [[علم الأحياء الجزيئي]] لعزل الرنا من العينات، وأشهر هذه الطرق هي استخلاص حمض ثيوسيانات الغوانيدنيوم-فينول-كلوروفورم [[:en:Acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction|(en)]].<ref>{{استشهاد بدورية محكمة |مؤلف=Chomczynski P, Sacchi N |عنوان=The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction: twenty-something years on |صحيفة=Nat Protoc |المجلد=1 |العدد=2 |صفحات=581–5 |سنة=2006 |pmid=17406285 |doi=10.1038/nprot.2006.83}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة |مؤلف=Bird IM |عنوان=Extraction of RNA from cells and tissue |صحيفة=Methods Mol. Med. |المجلد=108 |العدد= |صفحات=139–48 |سنة=2005 |pmid=16028681}}</ref> تتميز طريقة ورقة الترشيح في [[انحلال|التحليل]] و[[شطف (كيمياء)|الشطف]] بقدرة إنتاجية عالية.<ref>[http://fortiusbio.com/LyseNow_Strip_Card.html?redirect=1 FortiusBio High Throughput RNA Extraction Filter Paper Card] {{Webarchive|url=https://web.archive.org/web/20160506211327/http://fortiusbio.com/RNA_Extraction_Card_8.html |date=6 مايو 2016}}</ref>

استخلاص الرنا في سائل الهيدروجين باستخدام [[هاون ومدقة]] (أو آلة فولاذية تعرف بساحقة النسيج) مفيد كذلك في منع نشاط الريبونوكليازات.
== التلوث بالرناز ==
استخلاص الرنا في تجارب علم الأحياء الخلوي يُعقده بشدة تواجد جزيئات الرناز الوافر والقوي والتي تقوم بتفكيك عينات الرنا. يمكن لبعض جزيئات الرناز أن تكون قوية للغاية وتثبيطها صعب مقارنة بتثبيط [[ديوكسي ريبو نوكلياز|الدنازات]]. فضلا عن الرناز الخلوي المتحرر، توجد العديد من الرنازات في المحيط الجواري. تطورت الرنازات للقيام بالعديد من الوظائف الخلوية في مختلف الكائنات،<ref>{{استشهاد بدورية محكمة | doi = 10.1099/mic.0.023218-0| عنوان = A type II secreted RNase of Legionella pneumophila facilitates optimal intracellular infection of Hartmannella vermiformis| سنة = 2009| مؤلف1-الأخير = Rossier | مؤلف1-الأول = O.| مؤلف2-الأخير = Dao | مؤلف2-الأول = J.| مؤلف3-الأخير = Cianciotto | مؤلف3-الأول = N. P.| صحيفة = Microbiology| المجلد = 155| العدد = 3| صفحات = 882–890 | pmid=19246759 | pmc=2662391}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة | doi = 10.1016/j.tibs.2010.02.002| عنوان = T2 Family ribonucleases: Ancient enzymes with diverse roles| سنة = 2010| مؤلف1-الأخير = Luhtala | مؤلف1-الأول = N. | مؤلف2-الأخير = Parker | مؤلف2-الأول = R. | صحيفة = Trends in Biochemical Sciences| المجلد = 35| العدد = 5| صفحات = 253–259 | pmid=20189811 | pmc=2888479}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة | doi = 10.1007/s11030-006-9028-2| عنوان = The RNase a superfamily: Generation of diversity and innate host defense| سنة = 2006| مؤلف1-الأخير = Dyer | مؤلف1-الأول = K. D. | مؤلف2-الأخير = Rosenberg | مؤلف2-الأول = H. F. | صحيفة = Molecular Diversity| المجلد = 10| العدد = 4| صفحات = 585–597| مسار = https://zenodo.org/record/1232824|مسار أرشيف= https://web.archive.org/web/20190731091737/https://zenodo.org/record/1232824|تاريخ أرشيف=2019-07-31}}</ref> على سبيل المثال: يتم فرز الرناز 7 وهو عضو من العائلة الكبيرة [[ريبونوكلياز بنكرياسي|رناز A]] بواسطة الجلد البشري ويعمل كعامل قوي مضاد للمرض.<ref>{{استشهاد بدورية محكمة | doi = 10.1074/jbc.M207587200| عنوان = RNase 7, a Novel Innate Immune Defense Antimicrobial Protein of Healthy Human Skin| سنة = 2002| مؤلف1-الأخير = Harder | مؤلف1-الأول = J.| صحيفة = Journal of Biological Chemistry| المجلد = 277| العدد = 48| صفحات = 46779–46784| pmid=12244054}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة | doi = 10.1371/journal.pone.0006424| عنوان = RNase 7 Contributes to the Cutaneous Defense against Enterococcus faecium| سنة = 2009| مؤلف1-الأخير = Köten | مؤلف1-الأول = B. | مؤلف2-الأخير = Simanski | مؤلف2-الأول = M. | مؤلف3-الأخير = Gläser | مؤلف3-الأول = R. | مؤلف4-الأخير = Podschun | مؤلف4-الأول = R. | مؤلف5-الأخير = Schröder | مؤلف5-الأول = J. M. | مؤلف6-الأخير = Harder | مؤلف6-الأول = J. R. | صحيفة = PLoS ONE| المجلد = 4| العدد = 7| صفحات = e6424 | pmid=19641608 | pmc=2712763}}</ref> بالنسبة لهذه الرنازات المفرَزَة، حتى النشاط الإنزيمي قد لا يكون ضروريا لعملها المتوقع فعل سبيل المثال تعمل الرنازات المناعية عبر إزالة استقرار [[غشاء خلوي|الغشاء الخلوي]] لل[[بكتيريا]].<ref>{{استشهاد بدورية محكمة | doi = 10.1074/jbc.M607321200| عنوان = The Flexible and Clustered Lysine Residues of Human Ribonuclease 7 Are Critical for Membrane Permeability and Antimicrobial Activity| سنة = 2006| مؤلف1-الأخير = Huang | مؤلف1-الأول = Y. -C. | مؤلف2-الأخير = Lin | مؤلف2-الأول = Y. -M. | مؤلف3-الأخير = Chang | مؤلف3-الأول = T. -W. | مؤلف4-الأخير = Wu | مؤلف4-الأول = S. -J. | مؤلف5-الأخير = Lee | مؤلف5-الأول = Y. -S. | مؤلف6-الأخير = Chang | مؤلف6-الأول = M. D. -T. | مؤلف7-الأخير = Chen | مؤلف7-الأول = C.| مؤلف8-الأخير = Wu | مؤلف8-الأول = S. -H. | مؤلف9-الأخير = Liao | مؤلف9-الأول = Y. -D. | صحيفة = Journal of Biological Chemistry| المجلد = 282| العدد = 7| صفحات = 4626–4633 | pmid=17150966
}}</ref><ref>{{استشهاد بدورية محكمة | doi = 10.1189/jlb.1107725| عنوان = RNase a ribonucleases and host defense: An evolving story| سنة = 2008| مؤلف1-الأخير = Rosenberg | مؤلف1-الأول = H. F.| صحيفة = Journal of Leukocyte Biology| المجلد = 83| العدد = 5| صفحات = 1079–87| pmid=18211964| pmc=2692241}}</ref>

لمواجهة هذا، يتم غسل المعدات التي تُستخدم لاستخلاص الرنا بعناية وتتُرك مفصولة عن باقي معدات المخبر، كما تعالج بختلف المواد الكيميائية القوية للقضاء على الرنازات. لسبب ما يحرص مؤدوا التجارب على عدم ترك جلدهم العاري يلمس المعدات.
== مراجع ==
{{مراجع|2}}
{{شريط بوابات|الكيمياء|الكيمياء الحيوية|علم الأحياء الخلوي والجزيئي|علم الوراثة}}

{{بذرة بكتيريا}}

[[تصنيف:أساليب الكيمياء الحيوية]]
[[تصنيف:تقنيات وراثية]]
[[تصنيف:علم الجينوم]]
استخلاص الرنا  هو تنقية الرنا من العينات البيولوجية، هذا الإجراء معقد بسبب تواجد إنزيمات الريبونزكلياز الوفير في الخلايا والأنسجة، والتي بإمكانها تفكيك الرنا بسرعة. تُستَخدم العديد من الطرق في علم الأحياء الجزيئي لعزل الرنا من العينات، وأشهر هذه الطرق هي استخلاص حمض ثيوسيانات الغوانيدنيوم-فينول-كلوروفورم (en). تتميز طريقة ورقة الترشيح في التحليل والشطف بقدرة إنتاجية عالية.FortiusBio High Throughput RNA Extraction Filter Paper Card 

استخلاص الرنا في سائل الهيدروجين باستخدام هاون ومدقة (أو آلة فولاذية تعرف بساحقة النسيج) مفيد كذلك في منع نشاط الريبونوكليازات.
 التلوث بالرناز 
استخلاص الرنا في تجارب علم الأحياء الخلوي يُعقده بشدة تواجد جزيئات الرناز الوافر والقوي والتي تقوم بتفكيك عينات الرنا. يمكن لبعض جزيئات الرناز أن تكون قوية للغاية وتثبيطها صعب مقارنة بتثبيط الدنازات. فضلا عن الرناز الخلوي المتحرر، توجد العديد من الرنازات في المحيط الجواري. تطورت الرنازات للقيام بالعديد من الوظائف الخلوية في مختلف الكائنات، على سبيل المثال: يتم فرز الرناز 7 وهو عضو من العائلة الكبيرة رناز A بواسطة الجلد البشري ويعمل كعامل قوي مضاد للمرض. بالنسبة لهذه الرنازات المفرَزَة، حتى النشاط الإنزيمي قد لا يكون ضروريا لعملها المتوقع فعل سبيل المثال تعمل الرنازات المناعية عبر إزالة استقرار الغشاء الخلوي للبكتيريا.

لمواجهة هذا، يتم غسل المعدات التي تُستخدم لاستخلاص الرنا بعناية وتتُرك مفصولة عن باقي معدات المخبر، كما تعالج بختلف المواد الكيميائية القوية للقضاء على الرنازات. لسبب ما يحرص مؤدوا التجارب على عدم ترك جلدهم العاري يلمس المعدات.
 مراجع 

تصنيف:أساليب الكيمياء الحيوية
تصنيف:تقنيات وراثية
تصنيف:علم الجينوم