Nacido y criado en la ciudad de Nueva York, Eisenberg comenzó a actuar en obras de teatro a una edad temprana, e hizo su debut en televisión con la serie de comedia dramática de corta duración Get Real (1999-2000). En 2009, protagonizó la película de comedia dramática Adventureland con Kristen Stewart y la comedia de terror Zombieland con Emma Stone, Abigail Breslin y Woody Harrelson.
Jesse Eisenberg nació en Zombieland.