‫ال‬ ‫استخالص‬ ‫األوكسيجين‬ ‫المنزوع‬ ‫الريبي‬ ‫النووي‬ ‫حمض‬


‫العينة‬ ‫رمز‬


Sample


‫الموقع‬


Location


‫األعراض‬


Symptoms


‫الالذقية‬


Lattakia

Table 2. The nucleotides sequence of primers used and the annealing temperature used for each. 

‫المرجع‬


Reference


‫حرارة‬ ‫اإللتحام‬


Ann. temp.


‫الجين‬ ‫المضخم‬


Amplified Gene


‫الدنا‬ ‫حجم‬ ‫المضخم‬


Size


Figure 1 .

 1 Figure 1. Tomato plant samples with TYLCV symptoms of upward curling of leaflet margins, chlorosis, leaf deformation and plant stunting. 




  




  


( ‫بحوث‬ ‫حصر:‬ ‫فيروسات‬ ) Research Paper (Survey: Viruses) ‫ي‬ ‫تحر‬ ‫انتشار‬ ‫ا‬ ‫ل‬ ‫ساللة‬ ‫األصفر‬ ‫اق‬ ‫األور‬ ‫تجعد‬ ‫لفيروس‬ ‫اإلسبانية‬ ‫ل‬ ‫لبندورة‬ / ‫الطماطم‬ (TYLCSV-ES) ‫ضمن‬ ‫ي‬ ‫السور‬ ‫الساحل‬ ‫في‬ ‫المحمية‬ ‫البيوت‬ ‫ا‬ ‫حسن‬ ‫علي‬ ‫وس‬ 1 ‫و‬ ‫مهنا‬ ‫محمد‬ ‫أحمد‬

  
				‫المقاومة‬ ‫المحاصيل‬ ‫وقاية‬ ‫المحاصيل‬ ‫طر‬ ‫ائ‬ ‫ق‬	‫أهم‬	‫بية‬ ‫تر‬ ‫من‬	‫الحيوي،‬ ‫الفيروس‬ ‫و/أو‬ ‫البيضاء‬ ‫للذبابة‬ ‫و‬ ‫تعد‬ ‫لذلك‬
	3،2 * ‫النبات‬ ‫وقاية‬ ‫قسم‬ ، ‫اسل‬ ‫المر‬ ‫للباحث‬ ‫اإللكتروني‬ ( ‫؛‬ 2 ) ‫اعة‬ ‫الزر‬ ‫كلية‬ ، ‫ية‬ ‫سور‬ * ، ‫ال‬ ‫يد‬ ‫بر‬ : A.M.Mouhanna@gmail.com ‫دمشق‬ ‫جامعة‬ ‫ية‬ ‫سور‬ ، ‫؛‬	‫دمشق‬ ‫ية‬ ‫سور‬ .	( 3 1 ) ( ) ‫الخاصة‬ ‫ية‬ ‫السور‬ ‫الجامعة‬ ) ‫الحيوية،‬ ‫للتقانة‬ ‫العامة‬ ‫الهيئة‬ (SPU) ،
	(TYLCSV-ES)	‫الطماطم‬	‫الملخص‬ ‫للبندورة‬ ‫األصفر‬ ‫اق‬ ‫األور‬ ‫تجعد‬ ‫لفيروس‬ ‫اإلسبانية‬ ‫الساللة‬ ‫انتشار‬ / ‫العربية،‬ ‫النبات‬ ‫وقاية‬ ‫مجلة‬ ‫السوري.‬ ‫الساحل‬ ‫في‬ ‫المحمية‬ ‫البيوت‬ ‫ا‬ ‫علي‬ ‫وس‬ ‫و‬ ‫مهنا.‬ ‫محمد‬ ‫أحمد‬ 2022 . ‫تحري‬ 40 ( 1 :) 7 -14 .	‫حسن،‬ ‫ضمن‬
	‫يصيب‬ Solanum lycopersicum L. ‫فيروس‬ TYLCV ‫عدد‬ ) ‫ا‬ ‫اقتصاد‬ ( ‫ي‬ ‫ا‬ ‫في‬ ‫بما‬ ‫ها‬ ‫الفل‬ ‫يفلة‬ ‫الحلو‬ ‫ة‬ ( Capsicum annuum L. ‫ة‬ ‫للبندور‬ ‫إضافة‬ / ‫الطماطم‬ ‫كبير‬ ‫ا‬ ‫من‬ ‫المهمة‬ ‫المحاصيل‬ ) ‫التبغ‬ ‫و‬ ( Nicotiana tabacum L. ‫الفاصولياء‬ ‫و‬ ) (Phaseolus vulgaris L. ( ‫عن‬ ‫فضال‬ ‫اع‬ ‫أنو‬ ‫من‬ ‫ة‬ ‫الضار‬ ‫األعشاب‬ ( Dı ́ az-Pendón et al., 2010 .) ‫ينتقل‬ ‫ال‬ ‫فيروس‬ ‫البيضاء‬ ‫التبغ‬ ‫ذبابة‬ ‫اسطة‬ ‫بو‬ ( Bemisia tabaci Genn. ) (Persistent circulative manner) ‫ة‬ ‫ار‬ ‫الدو‬ ‫ة‬ ‫المثابر‬ ‫يقة‬ ‫بالطر‬ ( Wei et al., 2014 .) ‫االحصائيات‬ ‫تشير‬ ‫إلى‬ ‫المزروعات‬ ‫إصابة‬ TYLCV ‫بفيروس‬ ‫ضمن‬ ‫عن‬ ‫يد‬ ‫تز‬ ‫مساحة‬ 7 ‫سنويا‬ ‫هكتار‬ ‫مليون‬ ( Glick et al., 2009 .) ‫عام‬ ‫ار‬ ‫باصفر‬ ‫اإلصابة‬ ‫اض‬ ‫أعر‬ ‫تتمثل‬ ‫ل‬ ‫لنبات‬ ‫المصاب‬ ، ‫وتق‬ ‫ز‬ ‫وقصر‬ ‫م‬ ‫السالميات‬ ، ‫لون‬ ‫وتغير‬ ‫اق‬ ‫األور‬ ‫وتشو‬ ‫شكل‬ ‫ه‬ ‫ها‬ ‫األزهار،‬ ‫عقد‬ ‫في‬ ‫فشل‬ ، ‫ي‬ ‫تدن‬ ‫ثمار‬ ‫ونوعية‬ ‫حجم‬ ‫انخفاضا‬ ‫مسببا‬ ‫المصابة‬ ‫النباتات‬ ‫يصل‬ ‫قد‬ ‫الغلة‬ ‫في‬ ‫حتى‬ 90 -100 % ‫؛‬ ‫حيث‬ ‫يعد‬ ‫مرض‬ TYLCD ‫اض‬ ‫األمر‬ ‫أهم‬ ‫من‬ ‫اعية‬ ‫الزر‬ ‫المحاصيل‬ ‫على‬ ‫المدمر‬ ‫االقتصادي‬ ‫التأثير‬ ‫ذات‬ ‫الفيروسية‬ ، ‫وذلك‬ ‫مد‬ ‫بسبب‬ ‫اه‬ ‫الع‬ ‫و‬ ‫اسع‬ ‫الو‬ ‫ائلي‬ ، ‫ناقل‬ ‫انتشار‬ ‫على‬ ‫ة‬ ‫السيطر‬ ‫لصعوبة‬ ‫باإلضافة‬ ‫ه‬	/ ‫جنس‬ ‫الطماطم‬ Begomovirus (TYLCV) ، ‫الي‬ ‫حو‬ ‫يضم‬ ‫إذ‬ Geminiviridae ‫الو‬ ‫الفيروس‬ ‫أمية‬ ‫التو‬ ‫الفيروسات‬ ‫يعد‬ ‫أجناس‬ ‫أكبر‬ ‫ات‬ ‫النباتية‬ ، 424 ‫فيروسيا‬ ‫نوعا‬ ‫عائلة‬ ‫و‬ ‫الذي‬ ( Zerbini et al., 2017 ) . ‫يتكون‬ ‫اثي‬ ‫الور‬ ‫المجين‬ ‫جزيء‬ ‫من‬ ‫من‬ ‫احد‬ ‫و‬ ‫حمض‬ ‫ـ‬ ‫ال‬ DNA ‫أحادي‬ ‫السلسلة‬ ، ‫من‬ ‫مؤلف‬ ‫حلقي‬ 2800 ‫ن‬ ‫يو‬ ‫كليوتيد‬ ، ‫على‬ ‫يحتوي‬ ‫ات‬ ‫إطار‬ ‫ستة‬ ‫اءة‬ ‫قر‬ ‫مفتوح‬ ‫ة‬ (ORFs) ، ‫و‬ ‫محاط‬ ‫المزدوج‬ ‫البروتيني‬ ‫بالغالف‬ ‫أمية‬ ‫التو‬ ‫الفيروسات‬ ‫لعائلة‬ ‫المميز‬ ( Gronenborn, 2007 .) ‫اءة‬ ‫القر‬ ‫ات‬ ‫إطار‬ ‫تشفرها‬ ‫التي‬ ‫البروتينات‬ ‫يت‬ ‫م‬ ‫س‬ ‫المفتوحة‬ ‫ة‬ ‫الست‬ ‫وظائفها‬ ‫على‬ ‫بناء‬ : ( ‫الغالف‬ ‫بروتين‬ CP/V1 ‫بروتين‬ ،) ( ‫الفيروس‬ ‫حركة‬ MP/V2 ،) ‫ب‬ ‫روتين‬ ‫افق‬ ‫مر‬ ‫ل‬ ‫ل‬ ‫تضاعف‬ ( Rep/C1 ،) ( ‫النسخ‬ ‫تنشيط‬ ‫بروتين‬ TrAP/C2 ‫بروتين‬ ،) ‫معز‬ ‫للتضاعف‬ ‫ز‬ ( Ren/C3 ‫وبروتين‬ ،) ‫م‬ ‫حد‬ ‫د‬ ‫ل‬ ‫الفيروس‬ ‫انتشار‬ ‫و‬ ‫اض‬ ‫األعر‬ ‫عن‬ ‫لتعبير‬ ( C4 ) ‫و‬ ، ‫جميع‬ ‫هذه‬ ‫ية‬ ‫الجهاز‬ ‫العدوى‬ ‫لنجاح‬ ‫ية‬ ‫ضرور‬ ‫الستة‬ ‫البروتينات‬ ‫ل‬ ‫لنبات‬ ‫العائل‬ ( Castillo et al., 2007 .)
							https://doi.org/10.22268/AJPP-40.1.007014
				Arab Society for Plant Protection	‫النبات‬ ‫لوقاية‬ ‫العربية‬ ‫الجمعية‬	2022	©
				)	( 2022	1	‫عدد‬ ،	40	‫مجلد‬ ‫العربية،‬ ‫النبات‬ ‫وقاية‬ ‫مجلة‬

(

  Shen et al., 2020 


	‫المصابة‬ ‫المجمدة‬ ‫في‬ ‫طور‬ ‫في‬ ‫ي‬ ‫عند‬ ‫ة‬ ‫ار‬ ‫حر‬ ‫و‬ ‫اإلزهار‬ ‫العقد‬ -90 ‫°س‬ ‫إلى‬ ‫و‬ ‫السائل‬ ‫اآلزوت‬ ‫في‬ ‫وضعت‬ ‫حين‬ ‫ات‬ ‫االختبار‬ ‫اء‬ ‫إجر‬ . ‫شكل‬ 1 . ‫بندورة‬ ‫عينات‬ / ‫طماطم‬ ‫تظهر‬ ‫بفيروس‬ ‫االصابة‬ ‫أعراض‬ ‫و‬ ‫فظت‬ ‫ح‬ TYLCV : ‫حواف‬ ‫التفاف‬ ‫األ‬ ‫وراق‬ ‫األعلى‬ ‫نحو‬ ‫األوراق‬ ‫شكل‬ ‫تشوه‬ ‫مع‬ ‫واصفرارها‬ ‫و‬ ‫النبات‬ ‫تقزم‬ .	.) ‫السالالت‬ ‫من‬ ‫كبير‬ ‫عدد‬ ‫شد‬ ‫تختلف‬ ‫سج‬ ‫ل‬ ‫ا‬ ‫اض‬ ‫أعر‬ ‫الساللة‬ ‫باختالف‬ ‫العائل‬ ‫النبات‬ ‫على‬ ‫تها‬ ‫عالميا‬ ‫الفيروس‬ ‫لهذا‬ ‫و‬ ‫تسبب‬ ‫التي‬ ، ‫فس‬ ‫ج‬ ‫لت‬ ‫الساللتان‬ ‫الشرسة‬ TYLCV-IL ‫و‬ ‫المعتدلة‬ TYLCV-Mld ‫فلسطين‬ ‫في‬ ‫الفيروس‬ ‫هذا‬ ‫سالالت‬ ‫من‬ ‫آخر‬ ‫عدد‬ ‫بية‬ ‫العر‬ ‫المنطقة‬ ‫في‬ ‫وينتشر‬ ‫المحتلة،‬ ‫مثل‬ ‫ال‬ ‫ساللة‬ ‫اإلسبانية‬ TYLCSV-ES TYLCSV-Sic ‫صقلية‬ ‫وساللة‬ ‫العمانية‬ ‫الساللة‬ ‫و‬ TYLCV-om ( Anfoka et al., 2008 ) . ‫لوحظ‬ ‫وقد‬ ‫بأن‬ ‫الفيروس‬ ‫بهذا‬ ‫اإلصابة‬ ‫تكون‬ ‫ما‬ ‫غالبا‬ ‫إص‬ ‫عن‬ ‫ناتجة‬ ‫مختلطة‬ ‫ابة‬ ‫معقد‬ ‫فيروسي‬ ‫سالالت‬ ‫من‬ ‫لعدد‬ TYLCV ‫معا‬ ، ‫م‬ ‫م‬ ‫حد‬ ‫من‬ ‫يد‬ ‫يز‬ ‫ا‬ ‫االقتصادية‬ ‫الخسائر‬ ‫من‬ ‫يد‬ ‫لمز‬ ‫ويؤدي‬ ، ‫وذلك‬ ‫من‬ ‫خالل‬ ‫حدوث‬ ‫توليف‬ ‫إعادة‬ Recombination ‫سالالت‬ ‫بين‬ ( Monci et al., 2002 ) ‫ك‬ ‫شف‬ ‫السوري‬ ‫الساحل‬ ‫في‬ ‫خالل‬ ‫األ‬ ‫ام‬ ‫عو‬ 2014 -2016 ‫من‬ ‫كل‬ ‫الساللة‬ ‫المعتدلة‬ TYLCV-Mld TYLCV-IL ( Hasan & Mouhanna, 2016 ) ‫؛‬ ‫و‬ ‫لوحظ‬ 2018 -2019 ‫اض‬ ‫أعر‬ ‫ظهور‬ ‫ية‬ ‫ظاهر‬ ‫ة‬ ‫حد‬ ‫أكثر‬ ‫تلك‬ ‫وتشابه‬ ‫فيروس‬ ‫يسببها‬ ‫التي‬ TYLCV ‫ة‬ ‫البندور‬ ‫نباتات‬ ‫على‬ / ‫الطماطم‬ ، ‫م‬ ‫حقلي‬ ‫بمسح‬ ‫القيام‬ ‫استدعى‬ ‫لتحري‬ ‫ال‬ ‫سالالت‬ ‫ل‬ ‫المختلفة‬ TYLCV ‫المتوسط،‬ ‫البحر‬ ‫حوض‬ ‫منطقة‬ ‫في‬ ‫حاليا‬ ‫بانتشارها‬ ‫المعروفة‬ ‫ك‬ ‫اإلسبانية‬ TYLCV-ES ‫صقلية‬ ‫وساللة‬ TYLCSV-Sic ‫العمانية‬ TYLCV-om ‫التي‬ ‫و‬ ‫ة‬ ‫كبير‬ ‫ا‬ ‫ار‬ ‫أضر‬ ‫تسبب‬ ‫ل‬ ‫ة‬ ‫البندور‬ ‫نبات‬ / ‫المتوسط‬ ‫البحر‬ ‫حوض‬ ‫منطقة‬ ‫في‬ . ‫و‬ ‫نت‬ ‫بي‬ ‫قد‬ ‫صقلية‬ TYLCSV-Sic ‫السوري‬ ‫الساحل‬ ‫ومهنا‬ ‫(حسن‬ ، 2021 ) . ‫البحث‬ ‫هذا‬ ‫هدف‬ ‫لذا‬ ‫إ‬ ‫انتشار‬ ‫عن‬ ‫ال‬ ‫اإلسبانية‬ ‫ساللة‬ TYLCSV-ES ‫السوري‬ ‫الساحل‬ ‫في‬ ‫من‬ ‫الرغم‬ ( Díaz-Pendón et al., 2019 .) ‫الساللة‬ ‫لهذه‬ ‫الحيوي‬ ‫التنوع‬ ‫عن‬ ‫ة‬ ‫المتوفر‬ ‫المعلومات‬ ‫ة‬ ‫ندر‬ ‫على‬ ‫الكشف‬ ‫لى‬ ‫في‬ ‫المحمية‬ ‫البيوت‬ ‫بعض‬ ‫في‬ ‫محدود‬ ‫بشكل‬ ‫ساللة‬ ‫انتشار‬ ‫سابقة‬ ‫اسة‬ ‫در‬ ‫الطماطم‬ ‫الساللة‬ ‫و‬ ‫الساللة‬ ‫فيروس‬ ‫ما‬ ‫اض‬ ‫األعر‬ ‫اعة‬ ‫الزر‬ ‫موسمي‬ ‫خالل‬ ‫الشرسة‬ ‫و‬ ‫عن‬ . ‫الفيروس‬ ‫لهذا‬ ‫مختلفة‬ ‫عمليات‬ ‫اض‬ ‫األعر‬ ‫ة‬
		‫ائق‬ ‫وطر‬ ‫ه‬	‫بحث‬	‫ال‬	‫اد‬ ‫مو‬
		‫العينات‬ ‫وجمع‬ ‫الحقلي‬ ‫المسح‬ ‫من‬ ‫عدد‬ ‫إلى‬ ‫حقلية‬ ‫ات‬ ‫يار‬ ‫ز‬ ‫يت‬ ‫جر‬ ‫أ‬ ‫ة‬ ‫الفتر‬ ‫خالل‬ ‫بين‬ ‫ما‬ ‫اقعة‬ ‫الو‬ ‫أول‬ ‫كانون‬ ‫المحمية‬ ‫البيوت‬ / ‫ديسمبر‬ 2018 ‫السوري‬ ‫الساحل‬ ‫في‬ ‫و‬ ‫لغاية‬ ‫ين‬ ‫تشر‬ ‫الثاني‬ / ‫نوفمبر‬ 2019 ‫خاللها‬ ‫مع‬ ‫ج‬ ، ‫عينات‬ ‫من‬ ‫اق‬ ‫أور‬ ‫نباتات‬ ‫بعض‬ ‫ة‬ ‫البندور‬ / ‫الطماطم‬ ‫(جدول‬ 1 ) ‫أظهرت‬ ‫التي‬ ‫أ‬ ‫شبيهة‬ ‫اضا‬ ‫عر‬ ‫التي‬ ‫اض‬ ‫باألعر‬ ‫فيروس‬ ‫يسببها‬ TYLCV ( ‫شكل‬ 1 .) ‫للنباتات‬ ‫النامية‬ ‫القمم‬ ‫معت‬ ‫ج‬

Table 1 .

 1 Virus isolates studied, collection locations and major symptoms on plants from which samples were collected. 


	(DNA)						
	‫العينات‬ ‫من‬ ‫النووي‬ ‫الحمض‬ ‫خلص‬ ‫است‬ ‫صوديوم‬ ‫يتات‬ ‫كبر‬ (SDS) Sodium dodecyl sulfate ‫ة‬ ‫المختبر‬ ‫باستخدام‬ ‫و‬ ‫فق‬ ‫قبل‬ ‫من‬ ‫الموصوفة‬ . et al Gilbertson ( 1991 ‫التعديالت‬ ‫بعض‬ ‫مع‬ ) ‫دوديسيل‬ ‫ات‬ ‫الخطو‬ ‫بروتيناز‬ ‫بإضافة‬ K ‫ل‬ ‫التثفيل‬ ‫سرعة‬ ‫فع‬ ‫ور‬ ‫االستخالص‬ ‫لمحلول‬ ‫ضمان‬ ‫ترسيب‬ ‫أفضل‬ ‫ل‬ ‫النووي‬ ‫لحمض‬ ‫ومهنا،‬ ‫(حسن‬ 2016 .)
	Polymerase chain reaction	‫از‬ ‫للبوليمير‬	‫المتسلسل‬	‫تفاعل‬	‫ال‬	‫ر‬	‫اختبا‬
	(PCR) ‫اختبار‬ ‫أجري‬ Green Master Mix 2X ‫ـ‬ ‫ال‬ PCR ‫كلي‬ ‫بحجم‬ ® PromegaGoTaq 25 ‫ميكروليتر‬ ‫و‬ ، ‫باستخدام‬ ‫ثالثة‬ ‫بادئات‬ ‫ات‬ ‫األدو‬ ‫طقم‬ ( ‫جدول‬ 2 ) . 5000 -TC ‫جهاز‬ ‫باستخدام‬ ‫المتسلسلة‬ ‫ة‬ ‫البلمر‬ ‫تفاعالت‬ ‫ت‬ ‫ذ‬ ‫ف‬ ‫ن‬ (UK) Ltd. techne Thermocycler ‫التالي:‬ ‫الشكل‬ ‫على‬ 5 ‫دقائق‬ ‫عند‬ ‫ة‬ ‫ار‬ ‫حر‬ 94 ‫س°‬ ‫األولي‬ ‫للفصل‬ ، 40 ‫ة‬ ‫دور‬ ‫منها‬ ‫كل‬ 30 ‫ثانية‬ ‫عند‬ ‫ة‬ ‫ار‬ ‫حر‬ 94 ‫س°‬ ، 45 ‫ثانية‬ ‫ة‬ ‫ار‬ ‫حر‬ ‫عند‬ ‫للبادئ‬ ‫تبعا‬ ‫اختلفت‬ ‫المستخدم‬ ‫(جدول‬ 2 ،) ‫احدة‬ ‫و‬ ‫دقيقة‬ ‫عند‬ ‫ة‬ ‫ار‬ ‫حر‬ 72 ° ‫ا‬ ‫أخير‬ ‫و‬ ‫س،‬ 10 ‫دقائق‬ ‫عند‬ ‫ة‬ ‫ار‬ ‫حر‬ 72 ° ‫س.‬ ‫ر‬ ‫ح‬ ‫ل‬ ‫ت‬ ‫ـ‬ ‫ال‬ ‫تضخيم‬ ‫اتج‬ ‫نو‬ PCR ‫في‬ ‫تركيز‬ ‫األغاروز‬ ‫هالمة‬ 1.5 .%
	DNA ‫الفيروسية‬ ‫الت‬ ‫للعز‬ )	( ‫النووي‬ ‫الحمض‬	‫يو‬ ‫كليوتيدات‬	‫ن‬ ‫تتابع‬	‫تحديد‬
	‫المدروسة‬ ‫أجري‬ TYAlmv2516/TYAlmc115 ‫اختبار‬ ‫ـ‬ ‫ـ‬ ‫ال‬ PCR ‫المتخصص‬ ‫باستخدام‬ ‫با‬ ‫ل‬ ‫اإلسبانية‬ TYCSV-ES ، ‫و‬ ‫م‬ ‫المصم‬ ‫جينية‬ ‫بين‬ ‫منطقة‬ ‫لتضخيم‬ ‫البادئات‬ ‫زوج‬ ‫السالل‬ ‫عن‬ ‫كشف‬ ‫ة‬ Intergenic region (IR) ‫من‬ ‫يب‬ ‫القر‬ ‫الجزء‬ ‫و‬ ‫النهاية‬ 5 AC1 ‫ثة‬ ‫للمور‬ ' ( ‫بروتين‬ ‫ثة‬ ‫مور‬ ‫التضاعف‬ Rep ) ‫قم‬ ‫ر‬ ‫النيوكليوتيد‬ ‫عند‬ 2516

Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) is one of the most destructive plant viruses which infect a large number of vegetable crops in greenhouses causing significant economic losses. A survey was conducted to identify TYLCV strains which infect tomato plants (Solanum lycopesicum L.) in greenhouses along the Syrian coast. PCR results using specific primer pair TYAlmv2516/TYAlmc115 confirmed the presence of Spanish strain (TYLCSV-ES)́iń6́out́of́thé19́tested́samples,́whereaśotheŕsampleśdidn't́react́with́this primer pair. Phylogenetic tree showed that the isolates To11 and To18 collected from Tartous province clustered in the same subgroup with 99.1% nucleotide identity, and this subgroup clustered in one group with TYLCSV-ES 5a