Spectrophotometric Determination of Tetracycline Hydrochloride in Pure Form and Pharmaceutical Preparation by Coupling with Diazotized Anthranilic Acid

Keywords: Spectrophotometry, Tetracycline Hydrochloride, Azo, Uni and Multivariate

A simple, fast and sensitive spectrophotometric method has been applied for the determination of tetracycline hydrochloride in its pure form and in pharmaceutical preparations. The method based on coupling reaction of the antibiotic with diazotized anthranilic acid to form a stable yellow azo dye which shows a maximum absorption at 419 nm. Uni-and multivariate approaches were followed in optimizing the experimental conditions. Under optimum experimental conditions obtained via multivariate (Central Composite Design), the linearity of the constructed calibration curve was in the range of 0.5-60 μg.mL -1 with molar absorptivity of 14619 L.mol -1 .cm -  and the value of detection limit was 0.2813μg.mL -  . The capability of the method for the analysis of real tetracycline samples was evaluated. The results show that the method could successfully be applied with no significant interference from the common excipients. 

‫الطيفي‬ ‫التقدير‬ ‫لل‬ ‫مستحضرات‬ ‫وفي‬ ‫النقية‬ ‫بصورته‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫باال‬ ‫صيدالنية‬ ‫المؤزوت‬ ‫االنثرانلك‬ ‫حامض‬ ‫مع‬ ‫قتران‬




  




  




  




  




  




  


‫المس‬ ‫والمحاليل‬ ‫المواد‬ ‫تعملة‬

  
														‫المقدمة‬
	‫الكيميائية‬	‫الصيغة‬	‫يمتلك‬	‫الحلقة‬	‫رباعي‬ ‫هيدروكاربوني‬ ‫لمركب‬ ‫اسم‬ ‫هو‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬
	‫الموجبة‬ ‫البكتريا‬ ‫من‬ ‫الناتجة‬ ‫االلتهابات‬	‫من‬ ‫الكثير‬ ‫معالجة‬ ‫في‬	‫يستعمل‬	‫فعال‬ ‫حيوي‬ ‫مضاد‬	‫وهو‬	C [1]	22	H	24	2 N	8 O	.HCl
	‫الغرام‬ ‫صبغة‬ ‫تجاه‬ ‫والسالبة‬ ‫و‬ ‫ا‬ ‫للثة‬ ] 0،9 [ . ‫الكوليرا‬ ‫مرض‬ ‫معالجة‬ ‫في‬ ‫اعاله‬ ‫العقار‬ ‫يستعمل‬ ‫كذلك‬ ] 7،0 [ ، ‫مثل‬ ‫االلتهابات‬ ‫العين‬ ‫والتهابات‬ ‫الشباب‬ ‫وحب‬ ‫والحروق‬ ‫الجروح‬ ‫عن‬ ‫الناتجة‬ ‫عبد‬ ‫محسن‬ ‫مريم‬ ] 0 [ . ‫يقل‬ ‫امتصاص‬ ‫ب‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫وساطة‬ ‫ديكران‬ ‫بهجت‬ ‫سرمد‬ ‫مضادات‬ ‫الحموضة‬ ‫والحليب‬ ‫ألنها‬ ‫والحديد‬ ‫والمغنيسيوم‬ ‫الكالسيوم‬ ‫مع‬ ‫للذوبان‬ ‫قابله‬ ‫غير‬ ‫معقدات‬ ‫تكون‬ ‫ان‬ ‫الممكن‬ ‫من‬ ‫محمود‬ ‫خليل‬ ‫علي‬ ‫كلية‬ ‫الكيمياء/‬ ‫قسم‬ ‫بغداد‬ ‫جامعة‬ ‫الهيثم)/‬ ‫(ابن‬ ‫الصرفة‬ ‫للعلوم‬ ‫التربية‬ [ 0،0 .] ( ‫مخطط‬ 1 ) ‫اعاله.‬ ‫للعقار‬ ‫التركيبية‬ ‫الصيغة‬ ‫يوضح‬ ] 1 [
														‫/حزيران/‬ 6102	‫في:‬ ‫قبل‬ 5	6102 ،	‫/أيار/‬	‫في:‬ ‫استلم‬ 8
														‫الخالصة‬
	‫بعض‬	‫وفي‬ ‫النقية‬ ‫عيناته‬ ‫في‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬	‫دواء‬	‫لتقدير‬	‫ة‬	‫وحساس‬	‫ة‬	‫وسريع‬	‫ة‬	‫سهل‬ ‫طيفيه‬ ‫طريقه‬	‫استعمال‬ ‫تم‬
	‫لتكوين‬ ‫المؤزوت‬ ‫االنثرانلك‬ ‫حامض‬ ‫مع‬	‫اعاله‬	‫الحيوي‬ ‫لمضاد‬	‫ل‬	‫اقتران‬	‫تفاعل‬	‫على‬ ‫الطريقه‬ ‫تعتمد‬ ‫الصيدالنية.‬ ‫حضرات‬	‫المس‬ ‫ت‬
	‫المتغيرات‬ ‫طريقة‬	‫است‬ ‫عملت‬	‫اذ‬	‫نانوميتر،‬	914	‫الموجي‬ ‫الطول‬ ‫عند‬ ‫امتصاص‬ ‫اعلى‬ ‫عطت‬	‫أ‬ ‫اللون‬ ‫صفراء‬	‫مستقرة‬ ‫زو‬	‫آ‬	‫صبغه‬
	‫تراوحت‬ ‫خطية‬	‫المركزي)‬ ‫التراكم‬ ‫(تصميم‬	‫المتعددة‬ ‫المتغيرات‬ ‫طريقة‬ ‫عطت‬	‫أ‬	‫التجربة.‬ ‫ظروف‬ ‫لضبط‬ ‫والمتعددة‬ ‫االحادية‬
	‫يساوي‬ ‫كشف‬ ‫وبحد‬	-1	‫.سنتيمتر‬	-1	‫لتر.مول‬	19014	‫مقدارها‬ ‫مولية‬ ‫وامتصاصية‬	-1	‫ميكروغرام‬ ) . ‫ملليتر‬	-03	3.0	(	‫بين‬
	‫المستحضرات‬		‫بعض‬	‫ميكروغرام‬ . ‫ملليت‬ ‫ة‬ ‫االمتصاص‬ ‫قيم‬ ‫على‬ ‫يذكر‬ ‫تأثير‬ ‫وبدون‬ ‫ر‬ -1 ‫في‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫تقدير‬ ‫في‬ ‫بنجاح‬ ‫الطريقه‬ ‫تطبيق‬ ‫تم‬ . ‫المستحضرات.‬ ‫تلك‬ ‫في‬ ‫المتواجدة‬ ‫المتداخالت‬ ‫من‬ ( ‫مخطط‬ 0 )	3.7210 ‫الصيدالني‬
	‫المفتاحية‬ ‫الكلمات‬ : ‫ا‬ ‫ستعملت‬ ‫لتقدير‬ ‫طرائق‬ ‫عدة‬ ‫هيدروكلوريد،‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫طيفية،‬ ‫عقار‬ ‫مثل‬ ‫تترااسايكلين‬ [7,6]HPLC ‫آ‬ ‫والمتعددة.‬ ‫االحادية‬ ‫المتغيرات‬ ‫زو،‬ ، RHPLC [8] ، LC [ 13 [ ‫الجرياني‬ ‫الحقن‬ ‫و‬ ] 11 -10 ‫ومهار‬ ‫الثمن‬ ‫غالية‬ ‫معدات‬ ‫الطرائق‬ ‫هذه‬ ‫تتطلب‬ ‫حال‬ ‫اية‬ ‫وعلى‬ ] ‫ة‬ ], 4 [ ‫علمي‬ ‫ة‬ ‫الفولتامتري‬ ‫االدمصاص‬ ،
	‫،االزدواج‬ ]	[ ‫الحديد‬ ‫مع‬ ‫العقار‬ ‫لهذا‬ ‫معقدات‬ 19	‫تكوين‬ ‫مثل‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫لتقدير‬ ‫انتشارآ‬ ‫االكثر‬ ‫هي‬ ،	‫الطيفية‬	‫لطرائق‬	‫ا‬
									. ]	[ ‫الحركيه‬ ‫الطيفيه‬ ‫الطرائق‬ 12	‫و‬	]	[ ‫الشحنه‬ ‫انتقال‬ ‫معقدات‬ 12	،]	‫ديازو[‬ ‫ازدواج‬ 10	،]	[ ‫التأكسدي‬ 10
	‫المستحضرات‬ ‫وفي‬ ‫النقية‬	‫بصورته‬	‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬	‫عقار‬	‫لتقدير‬ ‫جديدة‬ ‫طيفية‬ ‫طريقة‬ ‫اقتراح‬ ‫العمل‬ ‫يتضمن‬
				‫اللون.‬ ‫اصفر‬		‫محلولها‬ ‫مستقرة‬ ‫ازو‬ ‫صبغه‬ ‫لتكوين‬	‫المؤزوت‬	‫االنثرانلك‬ ‫حامض‬ ‫مع‬ ‫اقترانه‬	‫طريق‬ ‫عن‬ ‫الصيدالنية‬
	‫االحادية‬ ‫المتغيرات‬ ‫طريقة‬ ‫وهما‬ ‫اعاله‬ ‫العقار‬ ‫لتقدير‬ ‫الفضلى‬ ‫الظروف‬ ‫وايجاد‬ ‫العمل‬ ‫ظروف‬ ‫لضبط‬ ‫طريقتان‬	‫است‬ ‫عملت‬
														‫المركزي.‬ ‫التراكم‬ ‫بتصميم‬ ‫والمتمثلة‬ ‫المتعددة‬ ‫ات‬	‫غير‬	‫المت‬ ‫وطريقة‬
														‫العملي‬ ‫الجزء‬
														‫ستعملة‬	‫الم‬	‫األجهزة‬
	‫الكوارتز‬	‫من‬ ‫خاليا‬	‫واست‬ ‫عملت‬	UV-VIS 1800-SHIMADZU	‫نوع‬ ‫المزدوج‬ ‫الشعاع‬ ‫ذي‬ ‫مطياف‬ ‫جهاز‬	‫ستعمل‬	‫ا‬
	Labtech .	‫نوع‬	‫حراري‬ ‫ومسخن‬	Sartorius	‫نوع‬	‫الفارزة‬ ‫بعد‬ ‫مراتب‬	‫ة‬	‫اربع‬ ‫ذو‬	‫حساس‬ ‫ميزان‬ ‫سم،‬	1	‫ضوئي‬ ‫مسار‬ ‫ذات‬
														‫المحاليل‬ ‫تحضير‬ ‫في‬ ‫المقطر‬ ‫والماء‬	‫العالية‬	‫النقاوة‬	‫ذات‬	‫الكيميائية‬	‫المواد‬	‫است‬ ‫تم‬ ‫عمال‬

‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫عقار‬ ‫محلول‬ 511 ‫ميكروغرام‬ . ‫ملليتر‬

  
	‫محلول‬	‫وحفظ‬ ‫المقطر‬ ‫بالماء‬ ‫العالمة‬ ‫الى‬ ‫الحجم‬	‫واكمل‬	‫دقائق‬	0	‫لمدة‬	‫المزيج‬	‫و‬ ‫الملح‬ ‫ذوبان‬ ‫لحين‬ ‫ترك‬	‫المزيج‬ ‫ورج‬	‫الصوديوم‬
														‫الثالجه‬ ‫في‬ .	‫المؤزوت‬	‫االنثرانلك‬	‫حامض‬	‫ملح‬
														‫الصيدالنية‬ ‫المستحضرات‬ ‫ل‬	‫مح‬ ‫الي‬
	‫المستحضر‬ ‫من‬		‫ة‬	‫معين‬	‫وزن‬ ‫كمية‬ ‫ت‬	‫ثم‬ ,	‫حد‬ ‫على‬ ‫واحدة‬ ‫كل‬ ‫وزن‬ ‫بعد‬ ( ‫بعض‬ ‫مع‬ ‫كبسوالت‬ ‫ة‬ )	13	‫محتوى‬ ‫خلط‬ ‫تم‬
	‫ورشح‬ ‫المقطر‬ ‫الماء‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬	03	‫في‬ ‫واذيبت‬	‫النقية.‬ ‫الدوائية‬ ‫المادة‬ ‫من‬	‫رام‬	‫ملغ‬	703	‫ماي‬ ‫كافيء‬	‫على‬	‫ي‬	‫تحو‬	‫الصيدالني‬
	‫ملليتر‬		133	‫سعة‬ ‫حجمية‬ ‫قنينة‬ ‫الى‬ ‫االذابة‬ ‫بعد‬	‫الكمية‬ ‫هذه‬ ‫ت‬	Whatman No. ‫نقل‬ )	91	( ‫نوع‬ ‫ترشيح‬ ‫ورقة‬	‫باستخدام‬ ‫المحلول‬
														‫العالمة.‬ ‫لى‬	‫ا‬ ‫المقطر‬ ‫بالماء‬ ‫الحجم‬ ‫كمل‬	‫ا‬	‫ثم‬
														‫االولية‬ ‫العمل‬ ‫طريقة‬
	‫المحضر،‬ ‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ‫مع‬ ‫د‬	‫هيدروكلور‬ ‫ي‬	‫تتراسايكلين‬	‫عقار‬ ‫اقتران‬ ‫امكانية‬ ‫لمعرفة‬ ‫واولية‬ ‫تمهيدية‬	‫دراسة‬ ‫اجريت‬
	1	‫على‬ ‫تحتوي‬	‫ليتر‬	‫مل‬	13	‫سعة‬ ‫حجمية‬ ‫قنينة‬ ‫الى‬ ‫موالري‬	3.330	‫بتركيز‬ ‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬	3.0	‫اضافة‬ ‫تم‬ ‫حيث‬
	‫من‬ ‫ملليتر‬	3.0	‫اليه‬ ‫يضاف‬ ‫ثم‬ ‫الرج‬ ‫مع‬	-1	‫ميكروغرام‬ . ‫ملليتر‬	133	‫تركيز‬ ‫ذو‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫التتراسايكلين‬ ‫محلول‬	‫من‬	‫ليتر‬	‫مل‬
	‫الى‬ ‫الحجم‬ ‫ويكمل‬ ‫موالري‬	0	‫الهيدروكلوريك‬ ‫حامض‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬	3.7	‫اليه‬ ‫يضاف‬ ‫وبعدها‬ ‫موالري‬	1	‫الصوديوم‬ ‫هيدروكسيد‬
				-1 .	‫ميكروغرام‬ . ‫ملليتر‬	13	‫التخفيف‬ ‫بعد‬	‫ت‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تراسايكلين‬	‫عقار‬	‫تركيز‬ ‫يصبح‬ ‫وبذلك‬ ‫ر،‬	‫المقط‬ ‫بالماء‬ ‫العالمه‬
														‫المعتمدة‬ ‫العمل‬ ‫طريقه‬
														‫االحادي‬ ‫المتغير‬ ‫بأسلوب‬	-	I
														-0
	‫النقية‬	‫المادة‬	‫من‬	‫غرام‬	3 3.30	‫أذابة‬	‫من‬	-1	‫ميكروغرام‬ . ‫ملليتر‬	033	‫بتركيز‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫محلول‬ ‫حضر‬
	‫العالمة‬ ‫الى‬ ‫الحجم‬ ‫واكمال‬ ‫المقطر‬ ‫الماء‬ ‫من‬	‫ليتر‬	‫مل‬	13	‫في‬	‫العراق)‬	‫سامراء‬	-	‫األدوية‬	‫لصناعة‬	‫العامة‬	‫الشركة‬	‫من‬ ‫(مزوده‬
														.	‫ليتر‬	‫مل‬	133	‫سعة‬ ‫ذات‬ ‫حجمية‬ ‫قنينة‬	‫باستعمال‬
														‫المستعملة‬ ‫والقواعد‬ ‫الحوامض‬ ‫محاليل‬
	‫البوتاسيوم‬ ‫وهيدروكسيد‬	‫الصوديوم‬ ‫هيدروكسيد‬ ‫ومحاليل‬	‫موالري‬	0	‫بتركيز‬ ‫الهيدروكلوريك‬	‫لحامض‬ ‫محاليل‬ ‫حضرت‬
	‫مائي‬ ‫وسط‬ ‫في‬ ‫منهم‬ ‫لكل‬ ‫موالري‬	1	‫وبتركيز‬ ‫الصوديوم‬ ‫كاربونات‬ ‫الى‬ ‫اضافة‬ ‫االمونيوم‬ ‫وهيدروكسيد‬ ‫الليثيوم‬ ‫وهيدروكسيد‬
														‫معايرة.‬ ‫بدون‬ ‫واستعملت‬
														‫موالري‬	1.115	‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ‫محلول‬
	‫الرج‬ ‫مع‬ ‫المقطر‬ ‫الماء‬ ‫من‬	‫مل‬ ‫ليتر‬	03	‫في‬ ‫االنثرانلك‬ ‫حامض‬	‫مسحوق‬	‫من‬	‫غ‬ ‫رام‬	3.3020	‫بأذابة‬ ‫المحلول‬ ‫هذا‬ ‫تحضير‬ ‫تم‬
	‫في‬ ‫المزيج‬	‫برد‬ ‫ان‬ ‫وبعد‬ .	‫التحريك‬ ‫مع‬ ‫المركز‬ ‫الهيدروكلوريك‬ ‫حامض‬ ‫من‬	‫مل‬ ‫ليتر‬	3.02	‫اضيف‬	‫التامة‬	‫اإلذابة‬	‫وبعد‬	‫والتسخين‬ ,
	‫نتريت‬ ‫من‬	‫غ‬ ‫رام‬	3.3090	‫اضيف‬	‫ثم‬	‫مل‬ ‫ليتر‬	133	‫سعه‬ ‫معتمه‬ ‫حجميه‬ ‫قنينه‬ ‫الى‬ ‫المحلول‬ ‫نقل‬	° ‫م)‬	( ‫بحدود‬ 3 -0	‫ثلجي‬ ‫حمام‬

‫اليها‬ ‫الوصول‬ ‫تم‬ ‫التي‬ ‫الفضلى‬ ‫الظروف‬ ‫بحسب‬

  
	‫تحوي‬ ‫هيدروكلوريد‬	‫تتراسايكلين‬ ‫عقار‬ ‫محلول‬	‫من‬	‫متزايدة‬	‫حجوم‬ ‫ملليتر‬	13	‫سعة‬	‫الحجمية‬	‫القناني‬ ‫من‬	‫ة‬	‫مجموع‬ ‫الى‬	‫تنقل‬
	3.9	‫و‬ ‫الرج‬ ‫مع‬ ‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ‫موالري‬	3.330	‫من‬ ‫ملليتر‬	1.7	‫منها‬ ‫كل‬ ‫الى‬	‫يضاف‬ ‫ثم‬ ‫ميكروغرام‬ )	033	-	( ‫على‬ 0
	)	‫موالري‬	( 0	‫الهيدروكلوريك‬ ‫حامض‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬	3.0	‫و‬ ‫اضافة‬ ‫بعد‬	‫موالري‬ .)	( 1	‫الصوديوم‬ ‫هيدروكسيد‬	‫محلول‬	‫من‬ ‫ملليتر‬
	‫مقابل‬ ‫نانوميتر‬	914	‫الموجي‬ ‫الطول‬ ‫عند‬ ‫االمتصاص‬ ‫قيمة‬ ‫وتقاس‬ ‫المقطر‬ ‫لماء‬	‫با‬ ‫العالمه‬ ‫الى‬	‫التفاعل‬ ‫مزيج‬	‫حجم‬ ‫يكمل‬
													‫الصوري.‬ ‫المحلول‬
							‫المتعددة‬ ‫المتغيرات‬ ‫بأسلوب‬	-	II

‫اليها‬ ‫الوصول‬ ‫تم‬ ‫التي‬ ‫الفضلى‬ ‫الظروف‬ ‫بحسب‬

  ‫لتقدير‬ ‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ‫مع‬ ‫تفاعله‬ ‫عند‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫عقار‬‫المحضر‬ ‫وهي‬ ‫التفاعل‬ ‫في‬ ‫تأثير‬ ‫اعلى‬ ‫لها‬ ‫ظهر‬ ‫التي‬ ‫العوامل‬ ‫اختيار‬ ‫تم‬ ‫وقد‬ . 


	7312	‫عام‬ )	1	( ‫العدد‬	03	‫المجلد‬	‫والتطبيقية‬ ‫الصرفة‬ ‫للعلوم‬ ‫الهيثم‬ ‫إبن‬ ‫مجلة‬
	Ibn Al-Haitham Jour. for Pure & Appl. Sci.	Vol. 30 (1) 2017
	‫المت‬ ‫أسلوب‬ ‫غيرات‬	‫على‬	‫باالعتماد‬	‫عمليا‬	‫لها‬	‫الفضلى‬ ‫القيم‬	‫إليجاد‬	‫التفاعل‬ ‫في‬ ‫رئيس‬	‫تأثير‬	‫ذات‬ ‫متغيرات‬	‫ة‬	‫ثالث‬ ‫درست‬
																	7 [	] 20 -1	‫المركزي‬ ‫التراكم‬	‫تصميم‬ ‫نمط‬ ‫المتعددة‬
	‫حجم‬ ‫زمن‬ ‫تأثير‬ ‫و‬ ) ( ‫محلول‬ 3.330 ‫االقتران‬ ‫تفاعل‬ ‫موالري‬ ) ‫القاعدة‬ ‫اضافة‬ ‫بعد‬ ‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ، 3 ، -1 ‫و‬ ) ‫المبينة‬ ‫جدول(‬ ‫في‬ 7 ) Volume of Standard Run salt (mL) . 1.4 1 x 1 = (X1 -1.4) /0.6 ( ‫الصوديوم‬ ‫هيدروكسيد‬ 2 x ( ‫والمتمثل‬ ‫قيمة‬ ‫بكل‬ ‫الخاصة‬ ‫الشفرة‬ ‫ايجاد‬ ‫خاللها‬ ‫من‬ ‫يمكن‬ ‫والتي‬ ( ‫المحضر‬ 1 (x ‫وحجم‬ ( ‫محلول‬ 1 ‫موالري‬ ) ( 3 (x 1 0.3067 10 1.1 0.0545 0 0.1 2.0 7 x 2 = (X7 -0.6) /0.5 0.2343 20 1.1 2.0 0 x 3 = (X0 -10) /10 0.0375 20 0.1 2.0 9
	‫يبين‬ ( ‫االستجابه‬ ‫قيم‬ ‫مع‬ ‫المركزي‬ ‫التراكم‬ ‫تصميم‬ ‫الجدول‬ ( 0 ‫الفضلى‬ ‫قيمتها‬ ‫ايجاد‬ ‫والمراد‬ ‫الدراسه‬ ‫قيد‬ ‫للعوامل‬ ‫الحقيقيه‬ ‫القيم‬ ) ‫المقاسة‬ ‫االمتصاصية)‬ ‫قيمة‬ ‫عمليا‬ ‫وقد‬ . ‫استعملت‬ ‫والمقترحة‬ ‫معادلة‬ 0.2728 10 0.6 1.4 ‫نوع‬ ‫خطي‬ -‫تربيعي‬ ‫ذات‬ ‫التأثيرات‬ ‫الرئ‬ ‫يسية‬ ( 0.2728 10 0.6 1.4 Linear-quadratic second-order polynomial main ‫موديل‬ ‫على‬ ‫باالعتماد‬ ‫مفكوك‬ ‫الدرجة‬ 0 ‫الثانية‬ 0 effects ) ‫للتعبير‬ ‫عن‬ ‫قيمة‬ ‫االمتصاص‬ ‫كدالة‬ ‫للمتغيرات‬ ‫يبين‬ ‫الثالثة.‬ ‫التحليل‬ ‫اإلحصائي‬ ‫للنتائج‬ ‫أن‬ ‫هذا‬ ‫الطراز‬ ( ‫الموديل‬ 0.2728 10 0.6 1.4 2 ) ‫من‬ ‫تصميم‬ ‫التجربة‬ ‫المستعمل‬ ‫كان‬ ‫مالئما‬ , ‫فقد‬ ‫أظهرت‬ ‫العالقة‬ ‫بين‬ ‫قيم‬ ‫المتغيرات‬ ‫قيد‬ ‫الدراسة‬ ‫مع‬ ‫قيم‬ ‫االمتصاصية‬ 0.2728 10 0.6 1.4 2 ‫المقاسة‬ ‫انطباقا‬ ‫جيدا،‬ ‫لذلك‬ ‫أمكن‬ ‫حساب‬ ‫قيمة‬ ‫المتغيرات‬ ‫الثالثة‬ ‫التي‬ ‫تعطي‬ ‫أعلى‬ ‫قيمة‬ ‫لالستجابة‬ ( ‫االمتصاص‬ ) ‫بطريقة‬ ‫رياضية‬ 0.2001 20 0.6 1.4 4 . ‫أظهرت‬ ‫النتائج‬ ‫أن‬ ‫قيمة‬ ‫حجم‬ ‫محلول‬ ‫حامض‬ ‫االنثرانلك‬ ‫المؤزوت‬ = 0 ‫ملليتر‬ ‫وقيمة‬ ‫الصوديوم‬ ‫هيدروكسيد‬ ‫محلول‬ = 0.2775 10 0.6 0.8 13 1 ‫ملليتر،‬ ‫وأما‬ ‫قيمة‬ ‫الزمن‬ ‫فكان‬ ‫المحسوب‬ ‫لالقتران‬ ‫الالزم‬ 2 ‫دقيقة‬ . ‫ويمكن‬ ‫اعتبار‬ ‫هذه‬ ‫القيم‬ ‫ظروفا‬ ‫فضليات‬ ‫لتقدير‬ ‫عقار‬ 0.2905 0 0.1 0.8 11
	‫لهذا‬	‫االستجابة‬ 17	‫سطح‬	( 9 ‫طراز‬ )	‫الشكل‬ ‫يبين‬ 1.4	‫الديازونيوم‬ 0.6 ‫االنثرانلك‬ ‫لحامض‬ .	‫ملح‬	‫مع‬	‫عند‬ 10 ‫تفاعله‬	‫تتراسايكلين‬ 0.2728 ‫هيدروكلوريد‬
				‫حالة‬ .	‫كل‬ 10		‫في‬	‫الفضلى‬	‫قيمته‬	‫األخر‬ 0.8 ‫عند‬	‫المتغير‬	‫وتثبيت‬	‫االمتصاصية‬ ) 1.1	(	‫االستجابة‬	‫مع‬	‫الدراسة‬ 20	‫قيد‬	‫متغيرين‬	‫النظام‬ 0.1952 ‫بين‬ ‫كل‬
	‫تضاف‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫محلول‬ 1 ‫موالري‬ ‫الى‬ ‫سلسلة‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫من‬ ‫هيدروكسيد‬ ‫قنان‬ ‫ثم‬ ‫منها‬ ‫كل‬ ‫الى‬ ‫يضاف‬ ‫حجمية‬ ‫سعة‬ 13 ‫الصوديوم‬ ‫ويترك‬ ‫المزيج‬ ‫ملليتر‬ 0 ‫ملليتر‬ ‫حجوم‬ ‫من‬ ‫لمدة‬ ‫ثمانية‬ ‫متزايدة‬ 3.330 ‫جانبا.‬ ‫دقائق‬ ‫من‬ ‫يحتوي‬ ‫محلول‬ ‫موالري‬ ‫ملح‬ ‫الديازونيوم‬ ( 0 -‫ذلك‬ ‫وبعد‬ ‫يضاف‬ ‫مع‬ 033 ) ‫الرج‬ ‫ميكروغرام‬ ‫و‬ 1 ‫ملليتر‬ 3.0 ‫ملليتر‬ ‫من‬ ‫حامض‬ ‫الهيدروكلوريك‬ 0 ‫موالري‬ ‫ويكمل‬ ‫الحجم‬ ‫الى‬ ‫العالمه‬ ‫بالماء‬ ‫المقطر‬ ‫وتقاس‬ ‫قيمة‬ ‫االمتصاصية‬ ‫عند‬ ‫الطول‬ ‫الموجي‬ ‫من‬ ‫الغرفة‬ ‫حرارة‬ ‫(الجدول‬ 9 ) . ‫محلول‬ ‫امتصاص‬ ‫ية‬ ‫المحلول‬ ‫المقاسة‬ ‫بلغت‬ 40.0 % ‫قيم‬ ‫من‬ ‫تها‬ ‫االصلية‬ ‫بعد‬ ‫لمدة‬ ‫الناتج‬ ‫ترك‬ 79 ‫درجة‬ ‫وفي‬ ‫مظلم‬ ‫مكان‬ ‫في‬ ‫ساعة‬ ‫من‬ 0.1942 10 0.1 1.4 19 ‫المتكونة‬ ‫االزو‬ ‫صبغة‬ ‫استقرارية‬ ‫دراسة‬ ‫دراسة‬ ‫تم‬ ‫استقراريه‬ ‫قياس‬ ‫خالل‬ ‫من‬ ‫المتكونة‬ ‫االزو‬ ‫صبغة‬ ‫امتصاصية‬ ‫قيمة‬ 0.2525 0 0.6 1.4 10 ‫زمنيه‬ ‫فترات‬ ‫في‬ ‫التخفيف‬ ‫بعد‬ ‫المحلول‬ ‫اضافة‬ ‫تم‬ ‫اذ‬ ‫مختلفه،‬ 1.7 ‫ملليتر‬ ‫س‬ ‫حجمية‬ ‫قنينة‬ ‫الى‬ ‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ‫من‬ ‫عة‬ 13 ‫على‬ ‫تحتوي‬ ‫ملليتر‬ 1 ‫ملليتر‬ ‫من‬ 0.2345 0 1.1 2.0 10 ‫عقار‬ ‫محلول‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫بتركيز‬ 133 ‫ميكروغرام/ملليتر‬ ‫ثم‬ ‫الرج‬ ‫مع‬ ‫اضيف‬ ‫اليه‬ 3.9 0.2606 0 1.1 0.8 12 ‫هيدروكسيد‬ ‫محلول‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬ ‫الصوديوم‬ 1 ‫يضاف‬ ‫بعدها‬ ‫موالري،‬ 3.0 ‫المركز‬ ‫الهيدروكلوريك‬ ‫حامض‬ ‫محلول‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬ 0 0.2728 10 0.6 1.4 12 ‫الى‬ ‫الحجم‬ ‫ويكمل‬ ‫موالري‬ ‫العالمة‬ ‫الموجي‬ ‫الطول‬ ‫عند‬ ‫الصوري‬ ‫المحلول‬ ‫مقابل‬ ‫االمتصاص‬ ‫ويقاس‬ ‫المقطر‬ ‫بالماء‬ 914 ‫نانوميتر،‬ ‫بعد‬ 0.1603 20 0.1 0.8 14 ‫زمنية‬ ‫فترات‬ ( ‫من‬ ‫تراوحت‬ ‫مختلفة‬ 3 -79 ‫ساعة‬ ) . ‫لوحظ‬ ‫وقد‬ ‫عليها‬ ‫الحصول‬ ‫تم‬ ‫التي‬ ‫النتائج‬ ‫من‬ ‫قيمة‬ ‫ان‬ ‫وجد‬ ‫حيث‬ ‫مستقر‬ ‫المعقد‬ ‫ان‬ 0.3104 10 0.6 2.0 73
																	914 ‫النهائية‬ ‫االمتصاص‬ ‫اطياف‬ ‫نانوميتر‬ ‫مقابل‬ ‫المحلول‬ ‫الصوري‬ .
	‫ملح‬ ‫مع‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫من‬ ‫الصوري‬ ‫المحلول‬ . ‫االطياف‬ ‫وأظهرت‬	13 ‫بأسل‬ ‫وبين‬ ‫ميكروغرام‬ . ‫ملليتر‬ ‫مختلفين،‬ ‫مقابل‬ -1	‫اقتران‬ ‫من‬ ‫المتكون‬ ‫تم‬ ‫الحصول‬ ‫عليها‬	‫تم‬ ‫والمناقشة‬ ‫النتائج‬ ‫تسجيل‬ ‫ا‬ ‫طيف‬ ‫المعقد‬ ‫متصاص‬ ‫الديازونيوم‬ ‫الظروف‬ ‫عند‬ ‫الفضلى‬ ‫التي‬
	‫ف‬	‫ا‬	‫ا‬ ‫طي‬	( 0 )		‫الشكل‬ ‫يبين‬ ‫نانوميتر.‬	914	‫الموجي‬ ‫الطول‬ ‫عند‬	‫الحالتين‬ ‫كال‬ ‫في‬	‫كانت‬	‫االولي‬ ‫االمتصاص‬ ‫طيف‬ ‫المسجلة‬ ‫ان‬ ‫لالمتصاص‬ ‫قيمه‬ ‫اعلى‬ ‫ية‬
	‫وتكوين‬	‫المؤزوت‬ ‫االنثرانلك‬ ‫حامض‬ ‫ملح‬	‫مع‬	‫هيدروكلوريد‬	‫عقار‬ ‫اقتران‬ ‫امكانية‬ ‫االولية‬ ‫النتائج‬ ‫اظهرت‬ ‫متصاص‬ ‫اال‬ ‫ل‬ ‫و‬ ‫المتكونة‬ ‫االزو‬ ‫صبغة‬ ‫ل‬ ‫مح‬ ‫ا‬ ‫ل‬ ‫ي‬ ‫ل‬ ‫ها‬ ‫الصوري‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫ة‬ .
	( 1 ) B	‫الشكل‬ ) A ‫و‬	‫صبغة‬ ‫من‬ ‫كل‬ ‫امتصاص‬ ‫طيف‬ ‫آ‬ ‫زو‬ ‫مستقرة‬ ‫اعطت‬ ‫التفاعل‬ ‫ناتج‬ ‫أعظم‬ ‫الموجي‬ ‫الطول‬ ‫عند‬ ‫امتصاص‬ ‫الصوري‬ ‫والمحلول‬ ‫المتكون‬ 914 ‫اعتمادا‬ ‫الصوري‬ ‫المحلول‬ ‫مقابل‬ ‫نانوميتر‬ . ‫اإلحصائية‬ ‫والمعالجة‬ ‫المعايرة‬ ‫منحنيات‬ ‫االولية.‬ ‫العمل‬ ‫طريقة‬ ‫على‬ ‫(الشكل‬ ‫المتعددة‬ ‫والمتغيرات‬ ‫األحادي‬ ‫المتغير‬ ‫السلوبي‬ ‫الفضلى‬ ‫الظروف‬ ‫بتطبيق‬ ‫معايرة‬ ‫منحنيات‬ ‫بناء‬ ‫تم‬ ‫يظهر‬ 0
	‫المؤثرة‬ ‫العوامل‬ ‫دراسة‬ ‫التراكيز‬ ‫من‬ ‫مديات‬ ‫في‬ ‫بير‬ ‫لقانون‬ ‫يخضع‬ ‫االقتران‬ ‫تفاعل‬ ‫من‬ ‫الناتج‬ ‫اللوني‬ ‫النظام‬ ‫ان‬ ‫المنحنيين‬ ‫كال‬ ‫اظهر‬ ‫وقد‬ ‫التوالي.‬ ‫على‬ ‫إليجاد‬ ‫الفضلى‬ ‫الظروف‬
	‫تم‬ ( ‫بين‬ ‫تراوحت‬ ‫اتباع‬ ‫اسلوبين‬ 3.0 -03 ‫الظروف‬ ‫الى‬ ‫للوصول‬ ‫ميكروغرام‬ / ‫ملليتر‬ ( ‫و‬ ) ‫الفضلى‬ 3.0 -03 ‫لتقدير‬ ‫ميكروغرام/ملليتر‬ ‫عقار‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫لالسلوبين‬ ‫الفضلى‬ ‫الظروف‬ ‫طبيق‬ ‫عند‬ ) ‫هيدروكلوريد‬ ‫بعد‬ ‫اقترانه‬ ‫مع‬ ‫حامض‬
	‫تتراسايكلين‬		‫بأسلوب‬ 0 ‫الخصائص‬ ‫بعض‬ ‫دراسة‬ ‫المتغير‬ ‫االحادي‬ ‫التحليلية‬ ‫واسلوب‬ ‫للطريقة‬ ‫المتغيرات‬ ‫المقترح‬ ‫المتعددة‬ ‫لتقديرعقار‬ ‫ة‬ .	‫االنثرانلك‬ ‫الجدول‬ ‫ويبين‬ ‫التوالي.‬ ‫على‬ ‫المذكوربن‬ ‫المؤزوت‬ ‫وذلك‬ ‫بإجراء‬ ‫الدراسة‬
	‫هي‬ ‫اآلزو‬ ‫صبغة‬ ‫لتكوين‬ ‫االقتران‬ ‫تفاعل‬ ‫المتضمنة‬ ‫التفاعالت‬ ‫على‬ ‫السيطرة‬ ‫في‬ ‫تسهم‬ ‫التي‬ ‫األساسية‬ ‫العوامل‬ ‫من‬ ‫ان‬ . ‫هيدروكلوريد‬
	‫ال‬ ‫المقترحة‬ ‫للطريقة‬ ‫والضبط‬ ‫الدقة‬ ‫حساب‬ ‫أخرى‬ ‫عوامل‬ ‫الى‬ ‫إضافة‬ ‫الديازونيوم‬ ‫ملح‬ ‫فيها‬ ‫يحضر‬ ‫التي‬ ‫الحرارة‬ ‫ودرجة‬ ‫التفاعل‬ ‫لوسط‬ ‫الحامضية‬ ‫دالة‬ ‫الى‬ ‫للوصول‬ ‫الالزمة‬ ‫الصوديوم‬ ‫هيدروكسيد‬ ‫وكمية‬ ‫اعاله‬ ‫العقار‬ ‫مع‬ ‫لتفاعله‬ ‫الالزم‬ ‫والزمن‬ ‫المؤزوت‬ ‫الكاشف‬ ‫تأثير‬ ‫دراسة‬ [19] ‫تمت‬ . ‫تأثير‬ ‫دراسة‬ ‫وتمت‬ ‫كما‬ ‫لالمتصاص.‬ ‫قيمة‬ ‫اعلى‬ ‫وتوافقية‬ ‫دقة‬ ‫حساب‬ ‫لغرض‬ ‫الطريقة‬ ‫تراكيز‬ ‫ثالثة‬ ‫قياس‬ ‫تم‬ ( ‫مختلفة‬ 0 , 13 , 03 ) ‫ميكروغرام‬ . ‫ملليتر‬ -1 ‫من‬ ‫محلول‬ ‫على‬ ‫للحصول‬ ‫اإلضافة‬ ‫وترتيب‬ ‫المضاف‬ ‫الهيدروكلوريك‬ ‫حامض‬ ‫كمية‬ ‫هيدروكلوريد‬ ‫تتراسايكلين‬ ‫التي‬ ‫التجريبية‬ ‫الظروف‬ ‫مجموعة‬ ‫تحت‬ ‫المقترحة‬ ‫الطريقة‬ ‫بتطبيق‬ ‫وذلك‬ ‫منها‬ ‫لكل‬ ‫تكرارات‬ ‫ولثالثة‬ ‫المعتمد.‬ ‫للتفاعل‬ ‫منتوج‬ ‫اعلى‬ ‫استعمال‬ ‫ان‬ ‫النتائج‬ ‫أظهرت‬ 1.7 ‫محلول‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬ 0.005 ‫و‬ ‫المؤزوت‬ ‫الكاشف‬ ‫من‬ ‫موالري‬ 3.9 ‫ا‬ ‫النتائج‬ ‫أظهرت‬ ‫المتعددة.‬ ‫والمتغيرات‬ ‫األحادي‬ ‫المتغير‬ ‫بأسلوبي‬ ‫اليها‬ ‫الوصول‬ ‫تم‬ ‫الجدول‬ ‫في‬ ‫لمبينة‬ 0 ‫على‬ ‫الحصول‬ ‫أمكن‬ ‫انه‬ ‫محلول‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬ 1 ‫موالري‬ NaOH ‫و‬ 3.0 ‫محلول‬ ‫من‬ ‫ملليتر‬ 0 ‫موالري‬ HCL ‫(الش‬ ‫النتائج‬ ‫افضل‬ ‫اعطى‬ ‫قد‬ ‫كل‬ 7 ( ‫النسبي‬ ‫للخطاء‬ ‫المئوية‬ ‫النسبة‬ ‫قيم‬ ‫تراوحت‬ ‫اذ‬ ‫الحالتين,‬ ‫كال‬ ‫في‬ ‫ومضبوطة‬ ‫دقيقة‬ ‫نتائج‬ -0.0011-0.2800 ( ‫و‬ ) 0.4630-‫نتائج‬ ‫أظهرت‬ ‫كما‬ .) ‫ان‬ ‫الدراسة‬ ‫يتفاعل‬ ‫العقار‬ ‫مباشرة‬ ‫اللون‬ ‫اصفر‬ ‫محلول‬ ‫معطيآ‬ ‫المؤزوت‬ ‫االنثرانلك‬ ‫حامض‬ ‫ملح‬ ‫مع‬ 0.9200 ( ‫النسبي‬ ‫القياسي‬ ‫لالنحراف‬ ‫المئوية‬ ‫النسبة‬ ‫وقيم‬ ) 0.170-0.420 ( ‫و‬ ) 0.327-1.040 ‫تحت‬ ‫الطريقة‬ ‫تطبيق‬ ‫عند‬ ) ‫اضافة‬ ‫بعد‬ ‫مباشرة‬ ‫يظهر‬ ‫القاعدة‬ ، ‫المالئم‬ ‫الوسط‬ ‫توفير‬ ‫لغرض‬ ‫المستعملة‬ ‫القواعد‬ ‫ببقية‬ ‫مقارنتها‬ ‫عند‬ ‫األفضل‬ ‫هي‬ ‫الصوديوم‬ ‫هيدروكسيد‬ ‫ان‬ ‫وجد‬ ‫حيث‬ ‫بأسلوبي‬ ‫المستحصلة‬ ‫الظروف‬ ‫المتغير‬ ‫األحادي‬ ‫والمتغيرات‬ ‫التوالي.‬ ‫على‬ ‫المتعددة‬
	‫ثم‬ ‫العقار‬ ‫محلول‬ ‫بمزج‬ ‫كان‬ ‫المستعملة‬ ‫الكواشف‬ ‫محاليل‬ ‫لمزج‬ ‫ترتيب‬ ‫أفضل‬ ‫ان‬ ‫وجد‬ ‫وقد‬ .)	0	‫(الشكل‬ ‫ان‬	‫االقتر‬ ‫لتفاعل‬
																	1 .)	‫(الجدول‬ ‫القاعدة‬ ‫محلول‬ ‫يضاف‬ ‫ذلك‬ ‫وبعد‬ ‫المؤزوت‬ ‫الكاشف‬ ‫ملح‬ ‫محلول‬

(
Spectrophotometric Determination of Tetracycline Hydrochloride in Pure Form and Pharmaceutical Preparation by Coupling with Diazotized Anthranilic Acid