‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫لبذور‬ ‫الفينولي‬ ‫المستخلص‬ ‫لمركبات‬ ‫الكمي‬ ‫الكيميائي‬ ‫التقدير‬ Syzygium aromaticum ‫لألغذية‬ ‫الملوثة‬ ‫البكتيرية‬ ‫العزالت‬ ‫بعض‬ ‫في‬ ‫له‬ ‫التثبيطي‬ ‫التأثير‬ ‫وتقييم‬ ‫هاشم‬ ‫طالب‬ ‫صبا‬





  






  




‫في‬ ‫الفعالة‬ ‫الكيمائية‬ ‫:المركبات‬ Syzygium aromaticum ‫جدول‬ ، :2 ‫القياسية‬ ‫للمركبات‬ ‫القياسي‬ ‫االحتجاز‬ ‫زمن‬

  

							. . .	-4 6 -4 6 -4 6	2 :) 85 2 :) 85 2 :) 85	73 ( 73 ( 73 (	‫العراقية،‬ ‫البيطرية‬ ‫لطبية‬ ‫العراقية،‬ ‫البيطرية‬ ‫لطبية‬ ‫العراقية،‬ ‫البيطرية‬ ‫لطبية‬	‫ا‬ ‫المجلة‬ ‫ا‬ ‫المجلة‬ ‫ا‬ ‫المجلة‬
	0.8) ‫المركبات‬ ‫من‬ ‫واحد‬ ‫يعتبراليوجينول‬ ‫انبوبة‬ ‫في‬ ‫تخفيف‬ ‫كل‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ )	saline ( ‫للبكتريا‬ ‫مضادة‬ ‫وضع‬ ‫،ثم‬ ‫فقط‬ 5 ) .		‫البكترية‬ ‫المرشحات‬ ‫بأستعمال‬ ‫التركيز‬ ‫عند‬ ‫،أما‬ ‫الدراسة‬ ‫قيد‬ ‫الخمسة‬ 0.45 ‫تعقيم‬ ‫لغرﺽ‬ ‫ملم‬ 2.5 / ‫ملغم‬
	‫واضيف‬ ‫معقمة‬ ‫اختبار‬ ‫أ‬ ‫الفينول‬ ‫مجموعة‬ ‫يحتوي‬ ‫الذي‬ ‫األروماتية‬ ( ‫انبوبة‬ ‫لكل‬ 0.2 ‫ليصبح‬ ‫الدم‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ ) ‫فعالية‬ ‫يمتلك‬ ‫ذ‬		‫المستخلص‬ 10) ) . ‫معنوية‬ ‫فروق‬ ‫وجود‬ ‫األحصائي‬ ‫مليلترفأظهرالتحليل‬
	‫النهائي‬ ‫الحجم‬ ‫المجهرية‬ ‫لألحياء‬ ‫مضادة‬ ‫بدرجة‬ ‫األنابيب‬ ‫حضنت‬ ‫مل‬ ‫واحد‬ ‫انبوبة‬ ‫لكل‬ ‫تزداد‬ ‫الفعالي‬ ‫هذه‬ ‫المجاميع‬ ‫بزيادة‬ ‫ة‬		‫دراسة‬ ‫تم‬ P<0.05) ‫تث‬ ‫في‬ ) ‫البكتريا‬ ‫نمو‬ ‫في‬ ‫النباتي‬ ‫المستخلص‬ ‫تأثير‬ ‫بكتريا‬ ‫بيط‬ B. subtilis ‫العزالت‬ ‫وباقي‬
	‫العلوم‬ ‫كلية‬ ‫األغذية‬ ‫من‬ ‫المعزولة‬ ‫حيث‬ -‫على‬ ‫الحصول‬ ‫تم‬ ‫المس‬ ‫الجامعة‬ ‫ت‬ ‫نصرية‬ ‫عزال‬ ، ‫ت‬ 2 ‫بتركيز‬ ‫المعاملة‬ ‫نتائج‬ ‫،وبينت‬ 20 ً ‫معنويا‬ ً ‫تأثيرا‬ ‫ملغم/مليلتر‬ ‫من‬ ‫كل‬ . ‫والمياه‬ ‫البيئة‬ ‫دائرة‬ ‫حرارة‬ ( ‫الفينولية‬ 37 20 -‫والتكنولوجيا‬ ‫العلوم‬ ‫وزارة‬ ‫لمدة‬ 24 ‫ساعة‬ . ‫الباحث‬ ‫بها‬ ‫قام‬ ‫التي‬ ‫الدراسة‬ ‫نتائج‬ ‫أظهرت‬ ‫،كما‬ ) ‫التباين‬ ‫وفق‬ ‫النتائج‬ ‫حللت‬ -‫بغداد‬ -‫العراق‬ ‫بكتريا‬ Bacillus subtilis ، Staphylococcus aureus (Analysis of Variance) ANOVA ‫بأتجاهين‬ 13) ) . ‫البكتيرية‬ ‫األنواع‬ ‫جميع‬ ‫تثبيط‬ ‫في‬ P<0.05) ‫وبمعدالت‬ ) (16) ‫الموجبة‬ ‫البكتريا‬ ‫ضد‬ ‫اليوجينول‬ ‫مستخلص‬ ‫فعالية‬
	dr.sabatalib@yahoo.com Pseudomonase aeruginosa 8 ، ‫و‬ Escherichia coli ‫أقطار(‬ ، 22 ‫و‬ 17 ‫و‬ 14 ‫و‬ 9 ‫ملم‬ ) B. subtilis, , S. aureus ‫لصبغة‬ ‫السالبة‬ ‫البكتريا‬ ‫ضد‬ ‫فعاليته‬ ‫من‬ ‫أفضل‬ ‫غرام‬ ‫لصبغة‬ mail: -E
	/ 2112 ‫غرام‬ ‫لصبغة‬ ‫السالبة‬ ‫البكتريا‬ ‫أحتواء‬ ‫الى‬ ‫السبب‬ ‫ويعزى‬ ‫غرام‬ ‫النت‬ ‫والمناقشة‬ ‫ائج‬	/ 6	: ‫للنشر‬ ‫قبل‬ 11 ‫علوم‬ ‫قسم‬ ‫مختبرات‬ ‫من‬ Ps Salmonella typhimurium E. coli ، aeruginosa ، S. typhymurium	‫و‬ ،
	‫الخالصة‬ ‫الفينولي‬ ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫لبذور‬ ‫بغداد‬ ‫جامعة‬ ‫المستخلص‬ ‫تأثير‬ ‫لمعرفة‬ ‫هو‬ ‫الدراسة‬ ‫هذه‬ ‫من‬ ‫الهدف‬ ‫إن‬ ‫الكمي‬ ‫الكيميائي‬ ‫الكشف‬ ‫والنوعي‬ ‫الزراعة‬ ‫كلية‬ ‫في‬ ‫االحيائية‬ ‫والتقانات‬ ‫األغذية‬ / ‫زرعت‬ ‫العزالت‬ ‫اآلكار‬ ‫سطح‬ ‫على‬ ‫البكتيرية‬ ‫المغذي‬ Nutrient agar ‫ا‬ ‫تعد‬ ‫ل‬ ‫التوالي‬ ‫على‬ ( ‫ملحق‬ ، . (1 ( ‫به‬ ‫جاء‬ ‫ما‬ ‫مع‬ ‫يتفق‬ ‫وهذا‬ 17 ‫حيث‬ ) ‫ا‬ ‫السكرايد‬ ‫متعدد‬ ‫على‬ ‫والسالبة‬ ‫الموجبة‬ ‫البكتريا‬ ‫نمو‬ ‫على‬ ‫لشحمي‬ Lipopolysaccharid . ‫أجري‬ ‫فعالة‬ ‫مركبات‬ ‫على‬ ‫للحصول‬ ً ‫مهما‬ ً ‫مصدرا‬ ‫نباتات‬ ‫تجا‬ ‫القرنفل‬ ‫لنبات‬ ‫الفينولي‬ ‫للمستخلص‬ ‫التثبيطية‬ ‫الفعالية‬ ‫اكد‬ ‫ه‬ (LPS) ‫المرور‬ ‫من‬ ‫للماء‬ ‫المحبة‬ ‫الجزيئات‬ ‫قدرة‬ ‫على‬ ً ‫فضال‬ ‫الكيميائية‬ ‫المضافات‬ ‫من‬ ً ‫بدال‬ ‫طبيعية‬ ‫مضافات‬ ‫تستخدم‬ ‫حرارة‬ ‫درجة‬ ‫ي‬ ً ‫ف‬ ‫وحضنت‬ 37 ‫م‬ ‫الصناعية‬ . ‫النباتات‬ ‫أو‬ ‫األعشاب‬ ‫تستخدم‬ ‫منها‬ ‫متعددة‬ ‫ألغراﺽ‬ ‫بكتريا‬ ‫من‬ ‫كل‬ aeruginosa Ps. ‫و‬ subtilis B. . ‫كما‬ ‫بسهولة‬ ‫غرام‬ ‫لصبغة‬ ‫الموجبة‬ ‫للبكتريا‬ ‫الخلوي‬ ‫الجدار‬ ‫خالل‬ ‫الكروماتوكرافي‬ ‫تقنية‬ ‫وبأستخدام‬ ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫لبذور‬ ‫الفينولي‬ ‫المستخلص‬ ‫في‬ ‫الفعالة‬ ‫للمركبات‬ ( ‫األداء‬ ‫عالي‬ ‫السائل‬ HPLC ‫احتوا‬ ‫النتائج‬ ‫أظهرت‬ ) ‫ئه‬ ‫المركبات‬ ‫على‬ ‫التالية‬ ( Eugenol ، Caffeic acid ، ‫لمدة‬ 24 ‫ساعة‬ . ‫حف‬ ‫ثم‬ ‫حرارة‬ ‫درجة‬ ‫في‬ ‫العينات‬ ‫ظت‬ ‫الثال‬ ‫جة‬ ‫غذائية‬ Nutrition ‫وطبية‬ Medical ‫ومنكهات‬ Flavoring ‫الباحثان‬ ‫نتائج‬ ‫بينت‬ 3) ‫كل‬ ‫تجاه‬ ‫الكحولي‬ ‫المستخلص‬ ‫فعالية‬ ) ‫الببتيدوكاليكون‬ ‫طبقة‬ ‫على‬ ‫جدارها‬ ‫الحتواء‬ Kaempferol ، Vallinic acid ، Ferulic acid ، Ellagic acid) ، Chlorogenic acid ، Borneal . ‫للمستخلص‬ ‫التثبيطية‬ ‫الفعالية‬ ‫تقييم‬ ‫تم‬ ‫بالتر‬ ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫لبذور‬ ‫الفينولي‬ ‫ا‬ ‫كيز‬ ( 0.039 ‫و‬ 0.0781 ‫و‬ 0.156 ‫و‬ 0.312 ‫و‬ 0.625 ‫و‬ 1.21 ‫و‬ 2.5 ‫و‬ 5 ‫و‬ 10 ‫و‬ ( 20 ‫ملغم‬ / 5 ‫األستعمال‬ ‫لحين‬ ‫م‬ . ‫الحفر‬ ‫طريقة‬ ‫أستخدمت‬ (Agar well diffusion) ‫المستخلص‬ ‫فعالية‬ ‫لتحديد‬ . ‫العالق‬ ‫حضر‬ ‫أذ‬ ‫وملونات‬ Coloring ‫حافظة‬ ‫ومواد‬ ‫بكتريا‬ ‫من‬ Staph. aureus ، E. coli ، aeruginosa . Peptidoglycan ‫فقط‬ . ‫الفينولي‬ ‫المستخلص‬ ‫يحتوي‬ ‫كذلك‬ Preservatives ‫أخرى‬ ‫وأستعماالت‬ (14) . ‫الحتواء‬ ً ‫ونظرا‬ ‫نبات‬ ‫على‬ ‫القرنفل‬ Ps ( ‫الباحث‬ ‫به‬ ‫جاء‬ ‫ما‬ ‫عن‬ ً ‫فضال‬ . (18 ‫التثبطية‬ ‫الفعالية‬ ‫عن‬ ‫م‬ ‫كما‬ ‫الالجيك‬ ‫حامض‬ ‫على‬ ‫القرنفل‬ ‫لنبات‬ ( ‫جدول‬ ‫في‬ ‫وضح‬ 3 ) ‫مليلتر‬ ‫في‬ ‫أنفراد‬ ‫على‬ ‫كل‬ ‫نمو‬ ‫غرام‬ ‫لصبغة‬ ‫الموجبة‬ ‫البكتريا‬ ‫من‬ ‫عزلتين‬ ‫هما‬ Bacillus subtilis ‫و‬ aureus Staphylococcus ‫البكتريا‬ ‫المزروع‬ ‫من‬ ‫مستعمرة‬ ‫بنقل‬ ‫عزلة‬ ‫لكل‬ ‫البكتيري‬ ‫ا‬ ‫لنقي‬ ‫تحد‬ ‫او‬ ‫تثبط‬ ‫التي‬ ‫الفعالة‬ ‫المركبات‬ ‫من‬ ‫العديد‬ ‫م‬ ‫فعالي‬ ‫ن‬ ‫األحياء‬ ‫ة‬ ‫غرام‬ ‫لصبغة‬ ‫والموجبة‬ ‫السالبة‬ ‫البكتريا‬ ‫تجاه‬ ‫القرنفل‬ ‫لنبات‬ ‫على‬ ‫تأثيرها‬ ‫خالل‬ ‫من‬ ‫للبكتريا‬ ‫مضادة‬ ‫فعالية‬ ‫يمتلك‬ ‫الذي‬ ‫وثالثة‬ ‫غرام‬ ‫لصبغة‬ ‫السالبة‬ ‫البكتريا‬ ‫من‬ ‫عزالت‬ ‫هي‬ Escherichia coli ، Pseudomonase aeruginosa ، ‫على‬ ‫حاوية‬ ‫أنابيب‬ ‫الى‬ ‫المغذي‬ ‫األكار‬ ‫الوسط‬ ‫على‬ ‫المنمى‬ ‫المجهرية‬ ‫الدراسة‬ ‫استهدفت‬ ‫لذا‬ ‫األغذية‬ ‫في‬ ‫معرفة‬ ‫التأثير‬ ‫الم‬ ‫ل‬ ‫للغذاء‬ ‫وثة‬ . ‫المستخلص‬ ‫تأثير‬ ‫الدراسة‬ ‫نتائج‬ ‫أظهرت‬ ‫النووي‬ ‫الحامض‬ ‫تضاعف‬ DNA ‫دراسة‬ ‫بينت‬ ‫فقد‬ (21) ‫أن‬ Salmonella typhimurium ‫الحفر‬ ‫وبطريقة‬ ‫في‬ ، ‫األكار‬ ‫حيث‬ ‫النباتي‬ ‫للمستخلص‬ ‫االدنى‬ ‫المثبط‬ ‫التركيز‬ ‫قياس‬ ‫عن‬ ً ‫فضال‬ ‫ال‬ ‫أظهرت‬ ‫جيد‬ ‫بشكل‬ ‫الرج‬ ‫مع‬ ‫الفسلجي‬ ‫الملح‬ ‫محلول‬ ‫العكورة‬ ‫ومقارنة‬ ‫ال‬ ‫للمستخلص‬ ‫التثبيطي‬ ‫فينولي‬ . ‫عن‬ ‫النوعي‬ ‫الكشف‬ ‫نتائج‬ ‫بينت‬ ‫الملوثة‬ ‫البكتيرية‬ ‫األنواع‬ ‫نمو‬ ‫في‬ ‫القرنفل‬ ‫لنبات‬ ‫الفينولي‬ ‫البكتريا‬ ‫نمو‬ ‫تثبيط‬ ‫على‬ ‫يعمل‬ ‫الالجيك‬ ‫حامض‬ E. coli ‫من‬ ‫فعالية‬ ‫نتائج‬ ‫عالية‬ ‫تثبيطية‬ ‫تجاه‬ ‫و‬ ‫التراكيز‬ ‫بأختالف‬ ‫وتنوعت‬ ‫البحث‬ ‫قيد‬ ‫البكترية‬ ‫العزالت‬ ‫جميع‬ ‫المختبرة‬ ‫البكتريا‬ . ‫زجاجي‬ ‫دورق‬ ‫في‬ 100 ‫اليه‬ ‫وأضيف‬ ‫مل‬ 40 ‫مل‬ ‫حامﺽ‬ ‫من‬ ( ‫الخليك‬ 2 % ‫ج‬ ‫و‬ ) ‫ـ‬ ‫عملي‬ ‫رت‬ ‫ـ‬ ‫االس‬ ‫ة‬ ‫ـ‬ ‫بواسطة‬ ‫تخالﺹ‬ ‫المكثف‬ ‫العاكس‬ ‫حرارة‬ ‫بدرجة‬ ‫مائي‬ ‫حمام‬ ‫باستخدام‬ 80 ‫م‬ ͦ ‫ولمدة‬ 8 ‫ترشيح‬ ‫بورق‬ ‫رشح‬ ‫ثم‬ ‫ليبرد‬ ‫المحلول‬ ‫ترك‬ ‫ذلك‬ ‫بعد‬ ‫ساعات‬ ‫المحلول‬ ‫واشبع‬ ‫البروبانول‬ ‫من‬ ‫مناسب‬ ‫حجم‬ ‫اليه‬ ‫أضيف‬ ‫بعده‬ ‫كمية‬ ‫باضافة‬ ‫جيد‬ ‫بشكل‬ ‫المحلول‬ ‫رج‬ ‫الصوديوم‬ ‫كلوريد‬ ‫من‬ ‫ماكفرالند‬ ‫لمحلول‬ ‫القياسية‬ ‫العكورة‬ ‫مع‬ ‫األنابيب‬ ‫في‬ ‫الحاصلة‬ ‫يعطي‬ ‫الذي‬ ‫الفعالة‬ ‫المركبات‬ ‫بعض‬ ‫طري‬ ‫بأستعمال‬ ‫لالغذية‬ ‫وأيجا‬ ‫المتسلسلة‬ ‫المضاعفة‬ ‫التخفيف‬ ‫قة‬ ‫د‬ ‫شريط‬ ‫تخليق‬ ‫لعملية‬ ‫أيقافه‬ ‫خالل‬ DNA ‫فعالية‬ ‫بتثبيط‬ ‫وذلك‬ ‫هذه‬ ‫عن‬ ‫للكشف‬ ‫طرائق‬ ‫عدة‬ ‫بأستخدام‬ 8 10 Х 1.5 ‫خلية‬ / ‫مليلتر‬ . ‫نشر‬ ‫تم‬ 0.1 ( ‫المركبات‬ ‫جدول‬ ، 1 ‫المستخلص‬ ‫أحتواء‬ ) ‫على‬ ‫الكحولي‬ ‫العدي‬ ‫د‬ ‫األدنى‬ ‫المثبط‬ ‫التركيز‬ MIC) ) ( ‫جدول‬ ، (4 ‫تركيز‬ ‫أن‬ ، 2.5 ‫أنزيم‬ DNA gyrase ‫الل‬ ‫عملية‬ ‫يثبط‬ ‫مما‬ ‫لشريطي‬ ‫الفائق‬ ‫ف‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ ‫هنتون‬ ‫مولر‬ ‫اكار‬ ‫وسط‬ ‫على‬ ‫البكتيري‬ ‫العالق‬ (Mueller Hinton agar) ‫ثقوب‬ ‫وعملت‬ ‫ملغم‬ / ‫لبكتريا‬ ‫األدنى‬ ‫المثبط‬ ‫التركيز‬ ‫هو‬ ‫مليلتر‬ subtilis B ‫،أما‬ DNA ‫مجموعة‬ ‫مضادات‬ ‫عمله‬ ‫في‬ ‫يشابه‬ ‫بذلك‬ ‫وهو‬ ‫للبكتريا‬ ‫والفينوالت‬ ‫والصابونينات‬ ‫القلويدات‬ ‫وهي‬ ‫الفعالة‬ ‫المجاميع‬ ‫من‬ ‫والتربنينات‬ ‫والفالفونيدات‬ ‫والتانينات‬ ‫والكاليكوسيدات‬ ‫التركيز‬ 5 ‫ملغم‬ / ‫لبكتريا‬ ‫األدنى‬ ‫االمثبط‬ ‫التركيز‬ ‫هو‬ ‫فكان‬ ‫مليلتر‬ ‫الكونولون‬ Quinolones ‫الطيف‬ ‫واسعة‬ . ‫امتالكه‬ ‫عن‬ ً ‫فضال‬ ‫بأستخدام‬ ‫الزرعي‬ ‫الوسط‬ ‫في‬ ‫قطره‬ ‫المعقم‬ ‫الفلين‬ ‫ثاقب‬ 5 ‫حفرة‬ ‫كل‬ ‫الى‬ ‫اضيف‬ ‫ملم‬ ‫به‬ ‫جاء‬ ‫لما‬ ‫مشابهة‬ ‫النتائج‬ ‫هذه‬ ‫وجاءت‬ (15) . Staph. aureus ‫التركيز‬ ‫كان‬ ‫حين‬ ‫في‬ 20 ‫ملغم‬ / ‫هو‬ ‫مليلتر‬ ‫السكرايد‬ ‫متعدد‬ ‫مع‬ ‫معقدات‬ ‫وتكوين‬ ‫األنزيمات‬ ‫تثبيط‬ ‫في‬ ‫فعالية‬ (0.05) ‫الكروموتوكرف‬ ‫تقنية‬ ‫بأستخدام‬ ‫الكشف‬ ‫نتائج‬ ‫أظهرت‬ ‫الدراسة‬ ‫قيد‬ ‫البكتيرية‬ ‫األنواع‬ ‫لجميع‬ ‫األدنى‬ ‫المثبط‬ ‫التركيز‬ ‫الشحمي‬ LPS) ) (22) . ‫الفينولي‬ ‫المستخلص‬ ‫ويحتوي‬ ‫كما‬ ‫كل‬ ‫وسط‬ ‫حفرة‬ ‫عمل‬ ‫الى‬ ‫اضافة‬ ‫النباتي،‬ ‫المستخلص‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ ‫لها‬ ‫اضيف‬ ‫طبق‬ (0.05) ‫محلول‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ 10 % ‫األداء‬ ‫عالي‬ ‫السائل‬ HPLC) ‫األحتجاز‬ ‫زمن‬ ‫أن‬ ) ‫لكل‬ ‫القياسي‬ ‫األخرى‬ ( ‫ملحق‬ ، (2 ( ‫بين‬ ‫حيث‬ ، 19 ‫المستخلص‬ ‫فعالية‬ ) ‫مركب‬ ‫على‬ Kfaempferol ، Caffeic acid ‫يمتلك‬ ‫الذي‬ DMSO ‫كسيطرة‬ ‫المستخلص‬ ‫اذابة‬ ‫في‬ ‫المستخدم‬ . ‫تأثير‬ ‫درس‬ ‫بتراكيز‬ ‫النباتي‬ ‫المستخلص‬ ( 0.039 ‫و‬ 0.0781 ‫و‬ 0.156 0.312 ‫و‬ 0.625 ‫و‬ 1.21 ‫و‬ 2.5 ‫و‬ 5 ‫و‬ 10 ‫و‬ ( 20 ‫ملغم‬ / ‫مليلتر‬ Chlorogenic acid ، Borneal ( ‫كان‬ ) 2.16 ‫و‬ 3.07 ‫فعالية‬ ‫تمتلك‬ ‫والتي‬ ‫والفالفونويدات‬ ‫الفينولية‬ ‫بالمركبات‬ ‫غني‬ ‫و‬ ( ‫مركب‬ Eugenol ، Caffeic acid ، ‫بكتريا‬ ‫من‬ ‫كل‬ ‫تجاه‬ ‫الكحولي‬ E. cloi ‫وبكتريا‬ B. subtilis ‫للبكتريا‬ ‫مضادة‬ ‫فعالية‬ 23) ‫و‬ 24 ) . ‫فلم‬ ‫الخلوية‬ ‫السمية‬ ‫أما‬ Kaempferol ، Vallinic acid ، Ferulic acid ، Ellagic acid ، . ‫لكونه‬ ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫بذور‬ ‫مستخلص‬ ‫فعالية‬ ‫في‬ ‫السبب‬ ‫يعود‬ ً ‫دمويا‬ ً ‫تحلال‬ ‫اي‬ ‫المستخدمة‬ ‫التراكيز‬ ‫جميع‬ ‫تظهر‬ .
	‫على‬ ‫تحتوي‬ ‫التي‬ ‫العليا‬ ‫الطبقة‬ ‫عزلت‬ ‫طبقتان،‬ ‫فتكونت‬ ‫ال‬ ‫بالمبخر‬ ‫وجففت‬ ‫الفصل‬ ‫قمع‬ ‫بأستخدام‬ ‫الفينولية‬ ‫مركبات‬ ‫االستعمال‬ ‫لحين‬ ‫الثالجة‬ ‫في‬ ‫وحفظت‬ ‫الدوار‬ . ‫تم‬ ‫عن‬ ‫الكشف‬ ‫النبات‬ ‫في‬ ‫الموجودة‬ ‫الفعالة‬ ‫والمجاميع‬ ‫المركبات‬ ‫للتحري‬ ‫عن‬ ‫و‬ 3.09 ‫و‬ 4.99 ‫و‬ 5.99 ‫و‬ 6.91 ‫و‬ 7.81 ‫و‬ (9.16 ‫على‬ ‫دقيقة‬ ‫التوالي‬ ( ‫جدول‬ ، 2 ) . ‫من‬ ‫ويتضح‬ ( ‫الشكل‬ ، (1 ‫الكلية‬ ‫المكونات‬ ‫كل‬ ‫على‬ ‫احتوائه‬ ‫يظهر‬ ‫الذي‬ ‫الخام‬ ‫الفينوالت‬ ‫لمستخلص‬ ‫من(‬ Eugenol ، Caffeic acid ، ‫النبات‬ Kaempferol ‫الكاليكوسيدات‬ ‫القلويدات‬ Syzygium	‫الفالفونات‬	‫بدرجة‬ ‫األطباق‬ ‫وحضنت‬ ‫بالملمتر‬ ‫حفرة‬ ‫كل‬ ‫حول‬ ‫التثبيط‬ ‫منطقة‬ 37 ‫لمدة‬ ‫م‬ 24 . ‫اجري‬ ‫األدنى‬ ‫المثبط‬ ‫التركيز‬ ‫قياس‬ ‫قيلس‬ ‫بعدها‬ ‫تم‬ ‫ساعة،‬ MIC ‫للمستخلص‬ ‫النباتي‬ ‫باستعمال‬ ‫المتسلسلة‬ ‫المضاعفة‬ ‫التخفيف‬ ‫طريقة‬ Tow ‫جدول‬ ، 1 ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫بذور‬ ‫الفعالة‬ ‫المركبات‬ ‫الفينوالت‬ ‫الراتنجات‬ ‫الصابونيات‬ ‫التانينات‬
	، + ‫الصابونيات‬ Ferulic acid ‫،القل‬ ‫،الكاليكوسيدات‬ ، Ellagic acid ‫ويدات‬ ، aromaticum	‫الراتنج‬ ، Vallinic acid ‫ات‬ ، ‫التانينات‬ ، +		+	‫األدنى‬ ‫المثبط‬ ‫التركيز‬ ‫لحساب‬ ) + + +	fold dilution method ) +
	‫في‬ ‫ورد‬ ‫ما‬ ‫حسب‬ ، Borneal ) ‫المركبات‬ ‫مع‬ ‫مقارنة‬ 8) ) .	‫،الفينوالت‬ Chlorogenic acid ‫و‬ ‫الفالفونات‬		(Minimum Inhibitory Concentration MIC)
	‫المتحرك‬ ‫الطور‬ ‫محلول‬ 2 ، ) ‫في‬ ‫موضح‬ ‫كما‬ ‫متفاوتة‬ ‫وبنسب‬ ‫تغذية‬ ‫في‬ ( ‫جدول‬	‫استعمل‬ ‫القياسية‬ ( ‫شكل‬		‫حضرت‬ ‫اذ‬	( 11 ،)	‫في‬ ‫ورد‬ ‫ما‬ ‫على‬ ً ‫اعتمادا‬ ‫النباتي‬ ‫للمستخلص‬
	‫الكروموتوكراف‬ ‫المتكون‬ ‫المحلول‬ ‫أستعمل‬ ‫فقد‬ ‫النباتي‬ ‫المستخلص‬ ‫في‬ ‫الفينولية‬ ‫المركبات‬ ‫جميع‬ ‫لتقدير‬ ‫االداء‬ ‫عالي‬ ‫السائل‬ ‫من‬ ‫من‬ ‫خال‬ ‫تقطيره‬ ‫معاد‬ ‫مقطر‬ ‫:ماء‬ ‫الخليك‬ ‫حامض‬ : ‫ميثانول‬ ( ‫وبالنسبة‬ ‫األيونات‬ 60:0.01:40 ‫بالمازج‬ ً ‫جيدا‬ ‫مزجت‬ ) ، 3 ) . ‫حيث‬ ( ‫أكد‬ 4 ‫من‬ ‫كل‬ ‫على‬ ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫أحتواء‬ ) ( Eugenol ، Vanillic acid ، Kaempferol ) . Retention time (minute) (0.039-20) ‫بين‬ ‫العالق‬ ‫من‬ ‫مايكروليتر‬ ‫تراوحت‬ ‫متضاعفة‬ ‫متسلسلة‬ ‫تراكيز‬ ‫ملغم‬ / ‫للمستخلص‬ ‫مليلتر‬ . ‫سحب‬ 10 ‫بوساطة‬ ‫البكتيرية‬ ‫العزالت‬ ‫ولجميع‬ ً ‫مسبقا‬ ‫المحضر‬ ‫البكتيري‬ ‫به‬ ‫ولقح‬ ‫دقيقة‬ ‫ماصة‬ ‫على‬ ‫الحاوية‬ ‫األنابيب‬ ‫السائل‬ ‫الوسط‬ Area of sample Compound ‫وكانت‬ ‫لليوجينول‬ ‫تعود‬ ‫نسبة‬ ‫اعلى‬ 16.18% ‫وبتركيز‬ 36705 2.16 Eugenol 35694.94 ‫مايكروغرام/مليلتر‬ 49652 3.07 Caffeic acid ‫للمعادلة‬ ً ‫وفقا‬ ‫التركيز‬ ‫حساب‬ ‫تم‬ ‫حيث‬ 54382 3.90 Kaempferol
	vortex Concentration of sample (µg/ml) = Area of ‫لل‬ ‫لالستعمال‬ ‫جاهزة‬ ‫لتصبح‬ ‫الهوائية‬ ‫الفقاعات‬ ‫تخلص‬ Vanillic acid		4.99	‫المستخلص‬ ‫من‬ ‫مختلفة‬ ‫تراكيز‬ ‫على‬ ‫الحاوي‬ ‫هنتون‬ ‫لمولر‬ 52977
	. ID) ‫العمود‬ ‫بأستخدام‬ ‫الفصل‬ ‫عملية‬ ‫اجريت‬ (50× ‫جريان‬ ‫،معدل‬ Flow rate C-18 1.4 ‫الموجي‬ ‫،الطول‬ 264 ‫حقن‬ ، ‫نانوميتر‬ 20 ‫من‬ ‫مايكروليتر‬ 4.6 mm ‫دقيقة‬ ‫مل/‬ ‫ال‬ ‫في‬ ‫الكلية‬ ‫الفينوالت‬ ‫مستخلص‬ ‫ج‬ ‫االحتجاز‬ ‫زمن‬ ‫وقورن‬ ‫هاز‬ sample/ Area of standard ×Concentration of Ferulic acid standard × Dilution factor Elagic acid ( ‫به‬ ‫جاء‬ ‫ما‬ ‫مع‬ ‫يتفق‬ ‫هذا‬ 16 ) Chlorogenic acid ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫احتواء‬ ‫أكد‬ ‫حيث‬ ‫اليوجينول،‬ ‫مركب‬ ‫من‬ ‫عالية‬ ‫نسبة‬ ‫على‬ ‫حامض‬ ‫يليه‬ borneol		5.99 6.91 7.81 9.16	‫حرارة‬ ‫بدرجة‬ ‫األنابيب‬ ‫،وحضنت‬ 37 55533 ‫ال‬ ‫ألنابيب‬ ‫األمتصاﺹ‬ ‫طيف‬ ‫قيس‬ 52811 ‫طول‬ ‫عند‬ ‫البكتيري‬ ‫عالق‬ ‫ولمدة‬ ‫م‬ 24 ‫ثم‬ ‫ساعة،‬ ‫موجي‬ 620 ‫نانومتر‬ . ‫حساب‬ ‫تم‬ MIC) ‫تركيز‬ ‫اقل‬ ‫انه‬ ‫على‬ ) ‫للبكتريا‬ ‫واضح‬ ‫نمو‬ ‫ظهور‬ ‫يمنع‬ ‫النباتي‬ ‫المستخلص‬ ‫من‬ . 41635 38627
	‫الموج‬ ‫للمواد‬ ‫الكلوروجنك‬ ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫لبذور‬ ‫الفينولي‬ ‫المستخلص‬ ‫في‬ ‫المركبات‬ ‫ونسب‬ ‫تراكيز‬ : ‫طريقة‬ ‫حسب‬ ‫للمستخلص‬ ‫الخلوية‬ ‫السمية‬ ‫تحديد‬ ‫تم‬ (12) ‫أذ‬ ، 3 Syzygium aromaticum ‫القياسي(‬ ‫المركب‬ ‫احتجاز‬ ‫زمن‬ ‫مع‬ ‫ودة‬ 9 ) . ‫وحامض‬ ‫الالجيك‬ ‫بنسبة‬ 12.56) %	‫جدول‬
	‫اجري‬ ‫الملوثة‬ ‫البكتريا‬ ‫تجاه‬ ‫القرنفل‬ ‫لنبات‬ ‫الكحولي‬ ‫للمستخلص‬ ‫التثبيطي‬ ‫التأثير‬ ‫أختبار‬ ‫لألغذية‬ ‫تم‬ ‫حيث‬ ‫تحض‬ ‫المحلول‬ ‫ير‬ ‫للمستخلص‬ ‫الخزين‬ ‫ال‬ ‫فينولي‬ ‫اختبار‬ ‫المراد‬ ‫القرنفل‬ ‫لنبات‬ ‫و‬ (12.8 ‫وبالتراكيز‬ ( 33059.33 ‫و‬ 22883.37 ) ‫مايكروغرام‬ / ‫مليلتر‬ ‫التوالي‬ ‫على‬ ‫وحامض‬ ‫الفانيل‬ ‫حامض‬ ‫جاء‬ ‫فيما‬ ‫الك‬ concentration ( µg/ml) Ringer solution ‫من‬ ‫المعقم‬ 0.092) ‫الفسيولوجي‬ ‫رنكر‬ ‫محلول‬ ‫حضر‬ ‫أذبة‬ 0.9) ‫غم‬ ) NaCl ، ) KCl ، 0.024) ‫غم‬ ) CaCl ، 0.03) ‫غم‬ ) NaHCO ، 0.0200) ‫غم‬ ) glucose Percentage % Compound ‫فائيك‬ ‫نسبة‬ ‫بأقل‬ ) % .55 6 ‫و‬ 6.94 ‫وبالتراكيز‬ ) 16.18% 35694.94 Eugenol 6.94% 1398.49 Caffeic acid ‫شكل‬ ، 1 ‫تقنية‬ ‫بأستخدام‬
	‫تجاه‬ ‫التثبيطي‬ ‫تأثيره‬ ( 12931.50 ‫و‬ 1398.49 ‫البكتريا‬ ) ‫مايكروغرام‬ ‫المعزولة‬ ‫ا‬ ‫الجسم‬ ‫خارج‬ / ‫مليلتر‬ ‫التوالي‬ ‫على‬ ‫لحي‬ (in . Kaempferol	‫محلول‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ ) 17324.03	18)	‫مقطر‬ ‫ماء‬ ‫مل‬ . 8.37% ‫اضيف‬ ‫ثم‬	100	‫في‬
	vitro) ‫في‬ ‫المستخلص‬ ‫بتركيز‬ Dimethysulfoxide DMSO) 50 ‫بأذابة‬ ‫وذلك‬ ‫/مل‬ ‫ملغم‬ 100 ‫محلول‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ ) . ‫المستخلصات‬ ‫رشحت‬ 5 ‫غم‬ ‫من‬ %(10) ‫في‬ ‫الموضحة‬ ‫الدراسة‬ ‫نتائج‬ ‫تبين‬ ( ‫شكل‬ ، 2 ‫التثبيطيبة‬ ‫الفعالية‬ ) Vanillic acid ‫تجاه‬ ‫المدروسة‬ ‫البكتيرية‬ ‫األنواع‬ ‫كافة‬ ‫يظهر‬ ‫فلم‬ Ferulic acid ، Ellagic acid ‫التراكيز‬ ‫عند‬ ‫القرنفل‬ ‫لنبات‬ ‫القينولي‬ ‫المستخلص‬ ( 0.039 ‫و‬ 1.25 ) Chlorogenic acid ‫البكتيرية‬ ‫العزالت‬ ‫نمو‬ ‫في‬ ً ‫تأثيرا‬ ‫/مليلتر‬ ‫ملغم‬ Borneol	‫أخذ‬ ‫أذ‬ ‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫رنكر‬ ‫الى‬ 2 ‫حضرت‬ ‫األنسان‬ ‫من‬ ‫المسحوب‬ ‫الدم‬ ‫من‬ ‫مليلتر‬ 10 ‫من‬ ‫غم‬ ‫وضع‬ ‫الجاف‬ ‫النباتي‬ ‫المسحوق‬ 6.55% 12931.50 ‫الكحولي‬ ‫للمستخلص‬ ‫التخافيف‬ ‫من‬ ‫سلسلة‬ Phosphate buffer ( 1:1 ، 1:10 ، 1:100 ، 1:1000 ‫لكل‬ ‫استخدم‬ ) ‫على‬ ‫تحتوي‬ ‫سالبة‬ ‫سيطرة‬ ‫معامل‬ ‫مستخلص‬ Normal 9.96% 20665.44 12.80% 22883.37 12.56% 33059.33 8.26% 23437.62
							59 60 61

‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫لبذور‬ ‫الكلية‬ ‫الفينوالت‬ ‫مستخلص‬ ‫مكونات‬ ‫عن‬ ‫الكشف‬ ‫كروماتوكراف‬ : HPLC ‫الموجي‬ ‫الطول‬ ‫عند‬ 264 ‫نانوميتر‬ .

  

	‫لبذور‬ ‫الفينولي‬ ‫المستخلص‬					، 4 :	‫جدول‬
	‫المستخلص‬ ‫تراكيز‬					‫البكتيرية‬ ‫العزلة‬ ‫نوع‬
	‫(ملغم/مل)‬	Staph.	E.			B.	S.	Ps.
		aureus	coli		subtilis	typhimurium	aeruginosa
		‫المعياري‬ ‫الخطأ‬	±	‫نانوميتر‬	260	‫الموجي‬ ‫الطول‬ ‫عند‬ ‫األمتصاص‬ ‫طيف‬
	‫السيطرة‬ ‫معامل‬	a0.671±	b0.593±	d0.518±	bc0.566±	cd0.520±
		0.049	0.023			0.012	0.044	0.047
	0.039	a0.656±	b0.573±	d0.410±	c0.501±	c0.503±
		0.05	0.046			0.024	0.056	0.053
	0.0781	bc0.498±	a0.505±	d0.394±	c0.465±	bc0.490±
		0.027	0.034			0.023	0.041	0.038
	0.156	bc 0.388±	a0.496±	c0.314±	ab0.475±	b0.402±
		0.016	0.012			0.016	0.033	0.029
	0.312	b0.298±	a0.412±	b0.290±	a0.412±	ab0.398±
		0.011	0.012			0.021	0.037	0.036
	0.625	c0.201±	a0.389±	c0.210±	b0.304±	ab0.363±
		0.014	0.023			0.032	0.024	0.038
	1.25	b0.152±	a0.298±	c0.119±	a0.255±	ab0.289±
		0.014	0.021			0.016	0.031	0.022
	2.5	cd0.032±	bc0.201±	d0.012±	a0.212±	b0.212±
		0.013	0.026			0.010	0.016	0.021
	5	0.000±	bc0.112±	0.000±	a0.143±	c0.098±
		0	0.011			0	0.013	0.025
	10	0.000±	cb0.018±	0.000±	a0.011±	c0.012±
		0	0.012			0	0.012	0.010
	20	0.000±	0.000±	0.000±	0.000±	0.000±
		0	0				0	0	0

‫من‬ ‫المختلفة‬ ‫التراكيز‬ ‫عند‬ ‫البكتريا‬ ‫لنمو‬ ‫األمتصاص‬ ‫طيف‬ ‫معدالت‬ ‫القرنفل‬

  

	.	-4 6	2 :) 85	73 (	‫العراقية،‬ ‫البيطرية‬ ‫لطبية‬	‫ا‬ ‫المجلة‬

Appreciation quantitative chemical compounds phenolic extract of the seeds of

Syzgium aromaticum and study its inhibitory effect in some food-born pathogenic bacteria S.T. Hashim 1 ; I. Sh. Hamza 2 and M. A. Hassan 2 1. College of Science, Al-Mustanserya University, 2. Department of Environment and Water, Ministry of Science and Technology, Baghdad, Iraq Summary Qualitative and quantitative detection of the active compounds in the phenolic extract of Syzygium aromaticum seeds was conducted by using HPLC. Results showed it contains all of the following compound )Eugenol, Caffeic acid, Kaempferol,Vallinic acid, Ferulic acid, Ellagic acid, Chlorogenic acid and Borneal(.Inhibitory effectiveness was evaluated for different concentration of phenolic extract of seeds inlclude (0.039, 0.0781, o.156,0.312, 0.625,1.25,2.5,5,10 and 20) mg/ml separately against gram positive bacteria Bacillus subltilis and Staphylococcus aureus and three isolates of gram negative bacteria E.coli , Pseudomonas aeruginosa and Salmonella typhimurium by Agar well diffusion method. The results showed high inhibition effect aganist all bacterial isolates with the effect of concentration and genus of bacteria. Keywords:Antibacterial, Phenolic extract, Syzygium aromaticum seeds, HPLC.
‫القرنفل‬ ‫نبات‬ ‫لبذور‬ ‫الفينولي‬ ‫المستخلص‬ ‫لمركبات‬ ‫الكمي‬ ‫الكيميائي‬ ‫التقدير‬ Syzygium aromaticum ‫لألغذية‬ ‫الملوثة‬ ‫البكتيرية‬ ‫العزالت‬ ‫بعض‬ ‫في‬ ‫له‬ ‫التثبيطي‬ ‫التأثير‬ ‫وتقييم‬ ‫هاشم‬ ‫طالب‬ ‫صبا‬