Батыс блот
Мембрана ақуызды байланыстыру қабілетіне байланысты таңдалғандықтан және антиденелер де, мақсат та белоктар болғандықтан, мақсатты ақуызды анықтау үшін қолданылатын мембрана мен антидене арасындағы өзара әрекеттесуді болдырмау үшін шаралар қабылдау қажет. Спецификалық емес байланыстыруды блоктау мембрананы сұйылтылған ақуыз ерітіндісіне - әдетте 3-5% бұқа сарысуы альбуминіне (BSA) немесе майсыз құрғақ сүтке (екеуі де арзан) трис - буферлік тұзды ерітіндіге (TBS) немесе I - Block, tween 20 немесе Triton сияқты жуғыш заттың минималды пайызымен (0,1%) орналастыру арқылы жүзеге асырылады X-100. Майсыз сүт ұнтағы қол жетімділігіне байланысты жақсырақ болғанымен, тиісті блоктау шешімі қажет, өйткені сүттегі барлық ақуыздар барлық анықтау диапазондарымен үйлесімді емес. Сұйылтылған ерітіндідегі ақуыз мақсатты ақуыздар бекітілмеген барлық жерлерде мембранаға бекітіледі. Осылайша, антидене қосылған кезде, мембранада белгілі бір мақсатты ақуызды байланыстыратын орындардан басқа оны бекітуге орын жоқ. Бұл Western blot соңғы өніміндегі фонды азайтады, нәтижесінде айқын нәтижелер пайда болады және жалған оң позитивтерді жояды.
Батыс блоттинг кезінде мембранадағы спецификалық емес аймақтар бұғатталуы мүмкін
сұйылтылған ақуыз ерітіндісіне - әдетте 3-5% бұқа сарысуы альбуминіне (BSA) немесе майсыз құрғақ сүтке (екеуі де арзан) трис - буферлік тұзды ерітіндіге (TBS) немесе I - Block, tween 20 немесе Triton сияқты жуғыш заттың минималды пайызымен (0,1%) орналастыру арқылы жүзеге асырылады X-100