b'\n_START_ARTICLE_\nSpektroskopia UV-VIS\n_START_PARAGRAPH_\nSpektroskopia UV-VIS \xe2\x80\x93 rodzaj spektroskopii \xc5\x9bwietlnej, w kt\xc3\xb3rym wykorzystuje si\xc4\x99 promieniowanie elektromagnetyczne le\xc5\xbc\xc4\x85ce w zakresie \xc5\x9bwiat\xc5\x82a widzialnego ("VIS") oraz bliskiego ultrafioletu ("UV") i bliskiej podczerwieni (d\xc5\x82ugo\xc5\x9b\xc4\x87 fali od 200\xc2\xa0nm do 1100\xc2\xa0nm). Urz\xc4\x85dzeniem s\xc5\x82u\xc5\xbc\xc4\x85cym do bada\xc5\x84 za pomoc\xc4\x85 tej techniki jest spektrofotometr UV-VIS._NEWLINE_Spektroskopia UV-VIS odnosi si\xc4\x99 do spektroskopii absorpcyjnej lub spektroskopii odbicia w zakresie widmowym widocznym w ultrafiolecie. Absorpcja lub odbicie w zakresie widzialnym wp\xc5\x82ywa bezpo\xc5\x9brednio na postrzegany kolor badanych preparat\xc3\xb3w. W tym obszarze widma elektromagnetycznego w atomach i cz\xc4\x85steczkach wyst\xc4\x99puj\xc4\x85 przej\xc5\x9bcia elektronowe. Spektroskopia absorpcyjna jest komplementarna do spektroskopii fluorescencyjnej, w kt\xc3\xb3rej fluorescencja wyst\xc4\x99puje w wyniku przej\xc5\x9bcia ze stanu wzbudzonego do podstawowego, podczas gdy pomiary absorpcji pozwalaj\xc4\x85 na obserwacje przej\xc5\x9b\xc4\x87 ze stanu podstawowego do wzbudzonego.\n_START_SECTION_\nZastosowania\n_START_PARAGRAPH_\nSpektroskopia UV\xe2\x80\x93VIS jest rutynowo stosowana w chemii analitycznej do ilo\xc5\x9bciowego oznaczania r\xc3\xb3\xc5\xbcnych zwi\xc4\x85zk\xc3\xb3w, takich jak jony metali przej\xc5\x9bciowych, silnie sprz\xc4\x99\xc5\xbcone zwi\xc4\x85zki organiczne i makromoleku\xc5\x82y biologiczne. Analiza spektroskopowa jest zwykle przeprowadzana w roztworach, ale mo\xc5\xbcna r\xc3\xb3wnie\xc5\xbc bada\xc4\x87 cia\xc5\x82a sta\xc5\x82e i gazy._NEWLINE_Przy pomiarach widm UV-VIS stosuje si\xc4\x99 r\xc3\xb3\xc5\xbcne rozpuszczalniki, kt\xc3\xb3re nie powinny absorbowa\xc4\x87 promieniowania w obszarze badanym. Takimi rozpuszczalnikami s\xc4\x85 m.in. w\xc4\x99glowodory nasycone, woda i proste alkohole. To, w jaki spos\xc3\xb3b rozpuszczalnik wp\xc5\x82ywa na widmo UV, zale\xc5\xbcy od jego w\xc5\x82a\xc5\x9bciwo\xc5\x9bci \xe2\x80\x93 g\xc5\x82\xc3\xb3wnie od polarno\xc5\x9bci._NEWLINE_W przypadku niepolarnych substancji rozpuszczonych w rozpuszczalniku niepolarnym, widmo zwi\xc4\x85zku w roztworze zbli\xc5\xbcone jest do jego widma w fazie gazowej, natomiast uk\xc5\x82ady polarne powoduj\xc4\x85 przesuni\xc4\x99cie maksimum absorpcji. Najwi\xc4\x99ksze przesuni\xc4\x99cia maksim\xc3\xb3w obserwuje si\xc4\x99 w przypadku polarnej substancji rozpuszczonej w polarnym rozpuszczalniku._NEWLINE_Roztwory jon\xc3\xb3w metali przej\xc5\x9bciowych mog\xc4\x85 by\xc4\x87 zabarwione (to znaczy absorbuj\xc4\x85 \xc5\x9bwiat\xc5\x82o widzialne), poniewa\xc5\xbc elektrony z podpow\xc5\x82oki d w atomach metali mog\xc4\x85 by\xc4\x87 \xc5\x82atwo wzbudzane z jednego stanu elektronowego do innego. Na kolor roztwor\xc3\xb3w jon\xc3\xb3w metali silnie wp\xc5\x82ywa obecno\xc5\x9b\xc4\x87 innych dodatk\xc3\xb3w, takich jak niekt\xc3\xb3re aniony lub ligandy. Na przyk\xc5\x82ad kolor rozcie\xc5\x84czonego roztworu siarczanu miedzi(II) jest bardzo jasnoniebieski; dodanie amoniaku intensyfikuje kolor i zmienia d\xc5\x82ugo\xc5\x9b\xc4\x87 fali dla maksymalnej absorpcji._NEWLINE_Polaryzacja i pH rozpuszczalnika mog\xc4\x85 wp\xc5\x82ywa\xc4\x87 na widmo absorpcji zwi\xc4\x85zku organicznego. Takim przyk\xc5\x82adem jest tyrozyna, kt\xc3\xb3ra zwi\xc4\x99ksza maksima absorpcji i molowy wsp\xc3\xb3\xc5\x82czynnik ekstynkcji, gdy pH wzrasta od 6 do 13 lub gdy spada polarno\xc5\x9b\xc4\x87 rozpuszczalnika._NEWLINE_Podczas gdy kompleksy transferu \xc5\x82adunku r\xc3\xb3wnie\xc5\xbc powoduj\xc4\x85 powstawanie kolor\xc3\xb3w, s\xc4\x85 one cz\xc4\x99sto zbyt intensywne, aby mo\xc5\xbcna je by\xc5\x82o zastosowa\xc4\x87 do pomiaru ilo\xc5\x9bciowego.'