<h1>결과 및 고찰</h1><h3>푸른곰팡이 염기서열 분석에 의한 동정</h3><p>표고버섯에 피해를 입히는 다양한 푸른곰팡이는 버섯 종균 생산농가나 표고버섯 재배농가에서 병이 발생하여 폐기된 톱밥배지를 수거하여 분리하였다. 대상지는 본 연구를 수행한 충북 청주시 문의면 품곡리 버섯재배사, 문의면 둘모리 버섯재배사, 남일면 이원농산 재배사, 보은의 속리산농원 재배사, 충남 청양의 대박농산 재배사 등이다. 푸른곰팡이병에 걸린 톱밥배지로부터 얻은 시료 중 총 15개의 시료에서 푸른곰팡이를 확인하였다.</p><p>곰팡이의 동정은 Internal transcribed spacer 염기서열 분석을 통하여 이루어졌으며, 이를 통하여 15개의 시료는 Trichoderma harziamum 9 종 Trichoderma atroviride 3종, Penicillium brevicompacum 3종으로 동정되었고, 이들 중 T. harziamum에 속하는 변종은 phylogenetic 분석 결과에 따라 분류되었다. 각각의 동정은 eztaxon을 이용하였으며, 모두 \( 98 \% \) 이상의 염기 상동성을 보였다. 특히, T. harziamum 푸른곰팡이 균주는 수집한 병원성 균주의 절반 이상을 차지하였고 발견 지역도 다양하였다. 이를 통해 T. harziamum이 충북지역의 표고버섯 재배농가에 널리 분포되어 많은 피해를 주는 원인균임을 확인하였다. T. harziamum에 의한 피해사례는 양송이, 느타리, 표고버섯 모두에 걸친 여러 연구에서 보고되었다.</p><h3>푸른곰팡이 생육 억제 효과</h3><p>항진균 펩티드에 의한 항진균 활성은 앞서 동정한 다른 곰팡이에서도 나타났지만, 가장 빈번하게 발생하는 T. harziamm을 이용하여 실험을 수행하였다. 농도를 0.2-0.5배로 희석한 PDA 배지에서 푸른곰팡이 T. harziamm H1을 배양하며, 항진균성 펩티드를 생산하는 20 균주의 항곰팡이 효과를 측정하였다. 항진균성 펩티드를 생산하여 갈반병을 유발하는 Pseudomonas tolaasii 균주는 유전자 분석과 병리학직 및 생화학적 특성에 따라 P1\(\alpha\), P1\(\beta\), P1\(\gamma \) 그룹으로 분류하였고, P1\(\alpha\) 그룹은 6264 균주를 포함하여 6 균주, P1\( \beta \) 그룹과 P1\( \gamma\) 그룹은 각각 13 균주와 1 균주를 포함한다. P1\(\alpha\) 그룹에 속하는 p. tolaasii 6264, HK2, HK4균주의 배양액을 분리·농축하여 PDA 배지상에서 푸른곰팡이 T. harziamum H1 균주와 대치 배양하였을 때, 처리한 배양 농축액 주위에는 곰팡이의 균사 성장이 완전히 억제되는 것을 확인하였다. P. tolaasii 6264 균주를 포함한 HK1부터 HK23 균주들을 T. harziamum H1 균주와 대치 배양하며 푸른곰팡이 H1 균주의 생육 억제 효과를 측정하여 Table 1에 정리하였다.</p><p>총 20 종의 Pseudomonas tolaasii 균주 모두 푸른곰팡이를 억제하는 효과를 보였지만, 그 중 가장 강력한 항진균 활성은 P.tolaasii 6264, HK2, HK4 등 주로 P1\(\alpha \) 그룹의 균주에서 얻어졌다. 일부 P1\(\beta\) 그룹 균주들은 적혈구를 이용햔 용혈활성을 보이지 않아, 세포독성 측정에 어려움이 많으므로 실제 사용은 제한적이었다. 대치 배양 실험에서 항진균 효과가 우수한 균주는 6264 , HK2, HK3, HK4, HK5, HK11, HK12, HK16 균주들로 8 균주가 확인되었다. 항진균 효과가 비교적 좋은 균으로 HK14 등 5 균주, 항진균 효과가 약한 균주로는 HK1 등 7 균주가 확인되었다.</p>
표고버섯에 피해를 입히는 다양한 푸른곰팡이는 무엇에서 수거하여 분리해?
폐기된 톱밥배지