<h1>결 과</h1><h2>pRset 발현 vector에 SPTLC1 및 SPTLC2 유전자의 재조합</h2><p>Human embryo kidney cell인 HEK293로부터 사람의 SPT 유전자인 SPTLC1 및 SPTLC2를 얻어 대장균 발현 vector인 pRset vector에 재조합시킨 과정은 Fig. 1과 같았다. pGEM-T/SPTLC1 및 pRset B/SPTLC1는 BgⅢ로, pGEMT/SPTLC2 및 pRSET A/SPTLC2는 Xhol으로 가수분해하여 전기영동한 결과는 Fig. 2와 같았다. pGEM-T easy vector 및 pRset vector의 크기는 각각 \( 3016 \mathrm{~bp} \) 및 \( 2897 \mathrm{~kb} \) 이며 SPTLC1 및 SPTLC2는 각각 \( 1422 \mathrm{~bp} \) 및 \( 1689 \mathrm{~bp} \)이다. DNA ladder와 비교했을 때 SPTLC1은 \( 1.5 \mathrm{~kb} \)보다 약간 아래, SPTLC2는 \( 1.5 \mathrm{~kb} \)보다 약간 위에 보이므로 확인할 수 있었다. 제대로 삽입되었다고 생각되는 clone들을 선택하여 DNA를 정제하고 DNA sequencing을 행하므로서 염기서열을 확인하였다. 염기서열로부터 유추한 아미노산 서열을 확인한 결과 (His \( )_{6} \)-tag, Xpress epitope, SPTLC1 및 SPTLC1가 fusion된 단백질로 발현될 수 있게 재조합되어 있음을 확인할 수 있었다.</p><h2>재조합 SPTLC1 및 SPTLC2의 발현</h2><p>pRset B/SPTLC1과 pRset A/SPTLC2가 들어있는 재조합 BL21 균을 LB 액체배지에 배양하고 \( 1 \mathrm{mM} \) IPTG를 첨가하므로서 SPTLC1 및 SPTLC2를 발현시켰다. SDS가 함유된 \( 10 \% \) acrylamide gel 상에서 전기영동을 행하여 단백질을 분리한 뒤 western blotting을 행한 결과는 Fig. 3과 같았다. \( 62 \mathrm{kDa} \)의 \( 72 \mathrm{kDa} \)의 크기를 가진 (His \( )_{6} \)-tag fusion SPTLC1 및 SPTLC2를 확인할 수 있었으며 SPTLC1의 경우 \( 62 \mathrm{kDA} \)보다 작은 크기의 band도 있었으며 IPTG로 유도하지 않았을 때에는 발현되지 않았으나 SPTLC2의 경우에는 IPTG로 유도하지 않아도 약간의 발현을 보였다.</p>
본 실험에서 HEK293로부터 사람의 어떤 유전자를 얻었나?
SPTLC1 및 SPTLC2