<h1>재료 및 방법</h1><h2>DMPT 조제</h2><p>DMPT (dimethyl- \( \beta \)-propiothetin)의 합성은 DMS (dimethyl sulfide)와 3-bromopropionic acid를 등량의 mol로 하여 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \)에서 12시간 환류하여 합성시켰다. 그리고 냉각된 ether로 수세하여 정제하고 methanol에서 결정화시켰다. DMPT의 정량은 \( 10 \mathrm{m \ell} \) vial에 표준품을 넣고 포화 NaOH를 \( 5 \mathrm{m \ell} \)를 첨가하여 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)에서 3분간 가온해서 headspace gas를 gas tight syringe로 GC에 주입하여 분석하였다. Data system으로 CLASS-GC10 (Shimadzu, Kyoto, Japan)을 이용하여 DMPT로부터 분해되어 발생한 DMS의 양에 2.1을 곱해서 검량선을 작성하였다. 합성하여 얻어진 결정을 같은 방법으로 분석한 결과 순도는 \( 99 \% \) 였다.</p><h2>실험 사료 제조</h2><p>본 연구에서 사용한 실험 사료는 Table 1과 같이 제조하였다. 즉, 실험 사료 1은 실험용 배합사료에 DMPT를 무첨가한 대조구와 실험 사료 2, 3, 4, 5는 각각 DMPT를 \( 3 \mathrm{mM}\), \(5 \mathrm{mM}\), \(7 \mathrm{mM}, 10 \mathrm{mM} \)씩 첨가하였다. 실험용 배합사료의 단백질원으로서는 어분을, 지질원으로는 대구간유를, 탄수화물원으로는 덱스트린을 사용하였다. 혼합 원료들을 잘 혼합한 후 원료 \( 100 \mathrm{~g} \)당 물 \( 40 \% \)를 첨가하여 모이스트펠렛 제조기로 실험 사료를 압출 성형하였으며 제조된 실험 사료는 \( -30^{\circ} \mathrm{C} \)에 보관하면서 사용하였다. 제조된 총 5 가지 실험 사료의 조단백질 함량은 \( 50.7 \% \), 조지방은 \( 6.6 \% \) 및 조회분은 \( 13.2 \% \) 였다.</p><h2>실험어 및 사육관리</h2><p>실험에 사용한 조피볼락은 전라남도 수산시험연구소 수산종합관 종묘배양장에서 생산된 것을 시판배합사료로 4주간 예비사육을 시킨 다음 주 사육 실험전 실험사료의 적응을 위해 2주간 실험사료를 급여하였다. 실험사료의 적응이 끝난 후 주 사육 실험을 위해 전일 절식시킨 후 어체를 측정하고 \( 100 \ell \) 수조에 30마리씩 5개 수조에 수용하여 1998년 9월 11일부터 11월 6일까지 8주간 사육 실험을 하였다.</p><p>평균체중 \( 5.5 \mathrm{~g} \) 내외로 먹이는 1일 2회(오전 9시, 오후 5시)에 만복에 가깝게 급여하였으며, 사육수는 여과 해수를 사용하여 유수량은 \( 5 \ell / \mathrm{min} \)로 조절하였고 적절한 산소 공급을 위해 각 실험수조에 에어스톤을 설치하였다. 사육기간 중의 수온은 \( 19.5^{\circ} \mathrm{C} \sim 24.5^{\circ} \mathrm{C} \)였으며, 비중은 1.024~1.026 범위였다.</p><h2>실험어 성장 측정</h2><p>실험어의 체장과 체중은 사육개시전과 사육 2주, 4주, 6주 및 8주 후에 미리 24시간 절식시킨 후 무작위적으로 10마리를 취하여 MS-222(3-Aminobenzoic acid ethyl ester) \( 100 \mathrm{~ppm} \)으로 마취시켜 스트레스를 최소화하여 측정하였다.</p>
지문에서 언급한 무엇을 통해 수세하여 정제했어?
냉각된 ether