<h1>결과 및 고찰</h1><p>까마중의 각 부위와 전 식물체의 ethyl acetate 추출물 및 환류 추출물에 따른 DPPH free radical 소거활성을 조사한 결과(Table 1), DPPH free radical 소거활성은 뿌리, 줄기, 전부위, 열매 그리고 잎 순으로 높게 나타났으며, 꽃에서는 활성이 없었다. 전 식물체 추출방법간의 DPPH free radical 소거활성은 식물체 전 부위롤 \( 80 \% \) methanol에 3일간 침지하여 추출한 것보다 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 6시간 환류 추출한 것이 높은 활성을 나타내었다. DPPH free radical 소거활성법은 항산화제가 안정한 free radical DPPH와 재반응하고 그것은 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazine로 변환되는 정도를 조사하는 것으로, 이거한 방법은 많은 식물추출물들의 항산화 활성을 탐색하는데 이용되어진다. 본 실험의 \( \mathrm{IC}_{50}(\mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \) 값은 Lee가 본 실험과 동일한 방법으 로 700여종의 식물 추출물 중 102종이 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이하의 활성을 나타내었다는 보고를 미루어 보면, 까마중의 전 식물체 및 부위별 추훌물의 \( \mathrm{IC}_{50} \) 값은 \( 62 \sim 145 \mu \mathrm{g} / \mathrm{m \ell} \) 의 범위로 DPPH free radical 소거활성이 높은 것으로 평가되었다.</p><p>전 식물체의 환류 추출한 ethyl acetate 추출물 분획을 정제하기 위하여 silicagel column chromatography롤 사용한 결과, DPPH free radical 소거활성이 \( 38.7 \mu \mathrm{g} / \mathrm{m} \ell \) 인 높은 항산화 분획을 얻었다. 이분획을 Sephadex LH-20 column를 사용하여 정제 한 결과(Fig. 3), 7개의 소분획을 얻었다. 그 중 4,5,6,7번은 ethyl acetate 분획 추출물보다 각각 2.5배, 3.2배, 6.8배 그리고 3.1배의 높은 활성을 보였다.</p><p>전 식물체롤 \( 80 \% \) methanol로 3 일간 침지한 추출과 \( 80 \% \) methanol로 6시간 환류 추출한 것을 Fig. 1과 같이 분획하여, 주요 항산화 물질들을 비교 조사 해 본 결과(Table 2), 조사된 물질들은 대부분 phenolic 화합물이었다. 침지한 추출물에 비하여 환류 추출에 의한 추출물은 GC/MS에 의하 여 조사된 화합물의 함량이 높았으며, 특히 2[1H] pyridinethione, 2-hydroxy-5-methylbenzaldehyde, 2-phenoxyanilin 및 4-[3-hydroxy- 1-propenyl] -2- metho-phenol 등의 phenolic 화합물이 높았다. 이와 같은 경향은 침지 추출물보다 환류 추출 방법에서 DPPH free radical 소거활성이 높았던(Table. 2)결과와 밀접한 관련이 있는 것으로 사료된다.</p><p>LH-20 column chromatography로 항산화 물질을 정제한 후 항산화 활성이 가장 높았던(Fig. 3) L6추출물을 분석한 결과(Table 3), 3 가지의 단일 물질을 동정하였다. 분획물의 항산화 활성이 column 분획 전인 Ethyl acetate 분획에 비하여 6.5배 높았던 것율 고려한다면, 동정된 2,6-methano-3-benzazocin-11-ol, 2[1H]-pyridinethione 및 2-hydroxy -5-methylbenzaldehyde의 물질들이 주요 항산화 물질이라고 사료된다.</p><p>동정된 phenolic 화합물은 과일이나 채소가 분해될 때 그리고 녹차, 홍차 및 wine에서 보통 발견되는 화합물로서 항균, 항알레르기 예방에 효과가 있는 것으로 보고되어 있으며, 특히 퇴행성질병의 발병빈도를 저하시키고, 실험적 증거에 의하여 인간의 건강증진을 위하여 천연 생리화학적 항산화 물질로서 중요한 역할을 하는 것으로 보고되어 있다.</p><p>까마중의 부위별 항산화 효소 활성을 조사한 결과FFig. 4,(5) POD 활성은 줄기와 뿌리에서 가장 높았으며 꽃, 잎 그리고 열매 순으로 높게 나타났다. 줄기는 뿌리와 비슷한 활성율 나타내었고, 꽃과 잎 그리고 열매에 비하여 3.1배, 3.7배, 그러고 7.3배 각각 녹았다. SOD 활성은 뿌리와 줄기에서 높은 활성율 보였으며, 꽃, 열매, 그리고 잎 순으로 높았다. 본 실험에서 SOD 활성이 높았던 식물체의 뿌리와 줄기에서 비효소적 항산화 방어계인 DPPH free radical 소거활성도 높았다. ascorbic acid 및 catechin, curcumin, lecithin, glutathion과 같은 항산화 물질들이 SOD 유사활성을 나타내며 flavonoid 중에서 quercetin, myricetin, rutin 등도 superoxide anion radical을 저해하는 것으로 알려져 있다.</p><p>까마중의 생육시기별 POD 및 SOD 활성을 조사한 결과 (Fig. 6, 7), 줄기와 뿌리에서의POD 및 SOD 활성은 파종 후 60 일에서 공히 가장 높게 나타났고 엽중의 POD 및 SOD 일정한 경향을 나타내지 않았다. 따라서 줄기와 뿌리의 POD 및 SOD 활성은 식물체 영양생장기 동안에는 증가하였으나, 개화 후기(파종 후 80 일)부터 감소하는 것으로 사료된다.</p><p>까마중의 부위별 POD 및 SOD 동위효소 패턴을 조사한 결과(Fig. 8), POD 동위효소 패턴은 뿌리, 줄기, 잎. 꽃, 열매에서 각각 10개, 6개, 5개 4개 그리고 2개의 동위효소 패턴이 나타났다. 이들 band를 전기이동도에 따라서 POD 1에서 POD 10으로 명명하였다. 활성이 좋은 줄기와 뿌리에서는 POD 5, POD 8, POD 9, POD 10이 강하게 나타났다.</p><p>SOD 동위효소 패턴은 전체적으로 5개에서 3개의 band가 검출되었다. 이들 band들을 전기이동도에 따라 SOD 1에서 SOD 5로 명명하였다. SOD 동위효소 패턴은 잎에서 5개, 줄기와 열매에서 각각 4 개, 뿌리와 꽃에서 각각 3개가 나타났다. 그 중 SOD 활성이 가장 높았던 뿌리는 2개의 band만 검출되었으며, 특히 SOD 4에서 강하게 나타났다. 따라서 SOD 활성과 SOD 동위효소 band의 수와는 관련이 없었고, 어느 특정한 band (SOD 4)에 의하여 그것의 활성을 나타낼 것으로 사료된다.</p>
까마중의 전 식물체 및 부위별 추출물의 \( \mathrm{IC}_{50} \) 값은 DPPH free radical 소거활성이 높은 것에 속해?
YES