<h2>발효공정</h2><p>울금 발효를 위해 유산균 L. johnsonii IDCC 9203을 사용하였다. 유산균 발효는 총 3단계 배양을 통해 진행되었다. 우선 MRS broth를 이용해서 전배양과 중간배양을 진행하였고 배양액에 포함되어 있는 유산균이 대수증식기에 이르렀을 때 본배양 배지에 접종하여 최종 발효하였다. 울금 본배양 배지는 유산균이 울금을 최대한 이용하도록 유도하기 위해 \( 1 \% \) glucose와 \( 0.5 \% \) Bacto peptone이 포함된 최소배지에 울금 분말을 \( 3 \% \) 첨가하여 제조하였으며 배양액의 \(\mathrm{pH}\)는 보정하지 않았다. 대수증식기에 이른 중간배양액을 본배양 배지가 들어있는 \( 5 \mathrm{~L} \) jar fermentor에 \( 5 \% \) 접종 후 \(50\mathrm{rpm}\)의 속도로 교반하면서 21시간 동안 배양하였다.</p><h2>유산균을 이용한 발효 울금 원료의 제조</h2><p>울금 발효 종료 후 배양액을 이용해서 발효 울금 원료를 제조하였다. 울금 배양액에서 유효성분만 따로 추출하여 보관 및 사용이 편리한 발효 울금 원료를 제조 후 실험에 사용하였다. 발효 울금 원료 제조공정은 Fig. 1과 같다. 대조군으로 사용한 비발효 울금은 울금 발효를 위한 본배양 배지를 열수추출 후 Fig. 1과 동일한 공정으로 제조하였다.</p><h2>Mite extract로 유도된 아토피 피부염의 저해효과</h2><p>발효 울금 원료의 아토피 피부염 저해 및 예방효과를 확인하기 위해서 NC/Nga 마우스(중앙실험동물)를 이용해서 동물실험을 진행하였다. 5주령 자성 NC/Nga 마우스는 1주일 계류 후 각 시료를 1주일 동안 전투여하였다. 실험동물은 비유발군, PBS를 경구투여한 vehicle군, \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)의 dexamethasone을 경구투여한 양성 대조군, \( 340 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)의 발효 울금 원료를 경구투여한 시료 투여군으로 나누어 총 4개의 실험군을 설정하였다. 전투여가 종료된 후 5주 동안 주 5회 시료투여를 지속하면서 마리당 \( 100 \mathrm{mg} \)의 mite extract ointment(AD Biostir)로 아토피 피부염을 유발하였다. 아토피 피부염의 유발은 주 2회로 총 3주 동안 실시하였다. 전투여 기간을 포함해서 총 6주의 실험기간 중 8회에 걸쳐 증상을 기록했는데, 아토피 피부염 유발 전 최초 1회 증상을 기록하였고 4번째 유발 뒤부터 7회에 걸쳐 증상 변화를 기록하였다. 증상의 점수는 홍반/출혈, 건조/상처, 부종, 짓무름/찰과상, 태선화로 구분하여 각 평가항목에 \(0 \sim 3\)점의 점수를 부과하여 채점하였다.</p><p>마우스의 혈청 내에 IgE 변화를 측정하기 위해 아토피 피부염 유발 종료 시점에서 안와채혈을 실시하였다. 회수한 혈액은 원심분리하여 혈청을 분리하고 IgE ELISA kit(Shibayagi)를 이용해서 혈중 IgE의 농도를 정량 하였다.</p>
무엇을 발효하기 위해 유산균 L. johnsonii IDCC 9203를 사용했지?
울금