<h2>표준 유효분획물의 지표성분 MS 분석</h2><p>선행문헌에 황금추출물을 이용한 LC-UV/MS분석에서 다양한 성분들에 대한 분석법과 성분들에 대한 분광학적인 정보를 토대로 표준 유효분획물내에 성분 profile하기 위해 UPLC-QTof-MS 분석하여 15분안에 검출되는 유효/지표성분 8종을 확인하였다(Fig. 4). Peak들은 \( [\mathrm{M}+\mathrm{H}]^{+} \)의 positive 모드에서 이온형태로 301,285,284,315,375,285,287,345의 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) (mass-to-charge ratio) 값을 확인하였다. Table 2를 보면 UVvis 최대 흡광도, 머무름시간 (\( t_{\mathrm{R}} \)), 분자식, 예상화합물명을 확인할 수 있다. 분석된 peak 8개는 peak 1 (5,7,2'-trihydroxy-8-methoxyflavone, \( t_{R}=5.25 \mathrm{~min}\), \( \mathrm{C}_{16} \mathrm{H}_{12} \mathrm{O}_{6} \) ), peak 2 (wogonin, \( t_{R}=6.94 \mathrm{~min} \), \( \mathrm{C}_{16} \mathrm{H}_{12} \mathrm{O}_{5} \) ), peak 3 (5,7-dihydroxyflavone, \( t_{R}=7.09 \mathrm{~min}\), \(\mathrm{C}_{15} \mathrm{H}_{10} \mathrm{O}_{4} \) ), peak 4 (5,7-dihydroxy-6,8-dimethoxyflavone, \( t_{R}=7.12 \mathrm{~min}\), \(\mathrm{C}_{17} \mathrm{H}_{14} \mathrm{O}_{6} \) ), peak 5 (skullcapflavone Ⅱ, \( t_{R}=7.27 \mathrm{~min}\), \(\mathrm{C}_{19} \mathrm{H}_{18} \mathrm{O}_{8} \) ), peak 6 (oroxylin A, \( t_{R}=7.38 \mathrm{~min}\), \(\mathrm{C}_{16} \mathrm{H}_{12} \mathrm{O}_{5} \) ), peak 7 (dihydrooroxylin A, \( t_{R}=7.49 \mathrm{~min}\), \( \mathrm{C}_{16} \mathrm{H}_{14} \mathrm{O}_{5} \), peak \( 8 \left(5,2^{2}\right. \)-dihydroxy-6,7,8-trimethoxyflavone, \( t_{R}=7.80 \mathrm{~min}\), \(\mathrm{C}_{18} \mathrm{H}_{16} \mathrm{O}_{7} \) )로 Reaxys와 NMR 구조동정된 성분라이브러리 그리고 온라인 데이터베이스 PubChem, ChemSpider로 예상화합물들 정보를 비교 확인하였다. 특히 peak 3은 표준 유효분획물에서 분리된 함량이 낮아 NMR 정보 확인이 어려워 기존문헌 MS 결과 비교로 예상가능한 화합물 dihydrooroxylin A 로 확인하였다.</p><p>결론적으로 최근까지 크로마토그래픽 기술 발달로 천연물소재를 이용한 분석에서 분취로 효과적인 스케일 업 방법이 많이 보고되었지만 황금소재를 이용한MG53-IRS-1 결합 억제 활성 윤도분획법(bioassay-guided fractionation)을 통해 HPLC분석에서 MPLC, 개방형칼럼 분취 스케일 업 연구를 통해 표준 유효분획물을 쉽게 대량으로 제조할 수 있는 조건 및 제조공정에 대한 표준절차방법을 처음 확립하였다. 또한 유효성이 검정된 TLC, HPLC, UPLC-QTof-MS 크로마토그렘을 통해 fingerprint 및 profile을 비교하여 각각의 분취된 표준 유효분획물들은 8개의 flavone 지표성분을 함유하는 동등한 분획물들임을 확인하였다. 이로부터 분리된 개의 지표성분은 NMR 구조동정 및 MS 분석을 통해 분광학직 정보를 셍산하여 구축하였고, 추후 MG53-IRS-1 결합 억제 활성 검정, 메커니즘 규명, in vivo 연구 용도로 적극 활용할 수 있을 것으로 예상된다.</p>
황금추출물의 성분을 분석하기 위해 사용할 수 있는 분석법은 뭐야?
LC-UV/MS분석