<h1>재료 및 방법</h1><h2>재료 및 시약</h2><p>도라지는 2001년 5 월 부산의 엄궁 농산물 시장에서 구입하여 음건한 후 사용하였다.</p><p>DL- \( \alpha \)-dipalmitoylphosphatidylcholine(DPPC)은 Sigma사(St. Louis, Mo, USA) 제품을 구입하여 사용하였으며 그 외 연구에 사용된 용매 및 시약은 특급 또는 일급을 사용하였다.</p><h2>시료의 추출 및 분획</h2><p>시료로 사용된 도라지는 수세, 정선 및 탈수 과정을 거쳐서 잘게 썰은 후 건조시켜 분말화 하였다. 건조 시료를 \(70 \sim 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 methanol로 3회 반복하여 1 회에 4 시간씩 가열 환류하여 추출한 후, 회전식 진공 농축기로 감압 농축하여 methanol을 제거 한 후 동결 건조하여 methanol 추출물 PGM로 실험에 사용하였다.</p><p>이 추출물을 다시 n-hexane (PGMH), methanol (PGMM), ethylacetate (PGMEA), ethylether(PGMEE) 및 n-butanol (PGMB)으로 각 과정을 거쳐 분리하여 각각 분흭 시료로 사용하였다.</p><h2>인지질 liposome 제조</h2><p>생체막의 주 성분인 인지질은 온도 상승에 따라 두 번의 endotherms 즉, pre-transition \( \left(\mathrm{L}_{\beta^{\prime}}-\mathrm{P}_{\beta^{\prime}}\right) \) 과 main transition (\(\mathrm{P}_{\beta^{\prime}}-\mathrm{L}_{\alpha} \) )의 곡선을 나타내며(Fig. 1.), 이는 결정상태(gel state)에서 액상결정상태(liquid-crystallize state)로의 상전이(phase transition temperature, \( \mathrm{T}_\mathrm{m} \) ) 또는 상분리에 의해 일어나는 현상으로서 이에 따라 협동단위(cooperative unit)도 변화하는 등 인지질막을 중심으로 한 열역학적인 변화가 나타난다.</p><p>비교적 안정한 liposome을 만드는 인지질인 DL- \( \alpha \)-dipal-mitoylphosphatidylcholine (DPPC)을 일정량 취한 후 methanol/chloroform (1:1) 혼합 용매를 사용하여 인지질을 용해시킨 후 일정량의 인지질 \( \left(\mathrm{mg} \mathrm{~ml}^{-1}\right) \) 에 각 PG 용매별 분획물을 \( 0.02 \mathrm{mg} \mathrm{~ml}^{-1} \) 에서 \( 0.2 \mathrm{mg} \mathrm{~ml}^{-1} \) 의 범위내에서 농도별로 증량시켜 가한 후 \( \mathrm{N}_{2} \) gas하에서 시험관을 돌려가면서 용매를 날려보내어 얇은 인지질막 필름을 만든다. 이 인지질막 필름을 진공 오븐에 넣어 상전이 온도 이상에서 약 1 시간 동안 잔류용매를 날려 보낸다. 이와같이 만든 인지질 건조 피막에 일정량의 완충용액(phosphate buffer, \( \mathrm{pH} 7.4\) )을 가한 후 상전이 온도 이상의 수조에 넣어 30sec간 방치하고 vortex를 이용하여 30 초간 흔든다. 이 조작을 3 회 반복하여 실시하여 실험에 사용한 다중충 liposome(multilamellar vesicles : MLVs)을 제조하였다.</p><h2>DSC측정</h2><p>DSC 측정은 CSC-5100 nano-differential scanning calorimeter를 사용하였으며 속도는 \( 0.5^{\circ} \mathrm{C} \mathrm{~min}^{-1} \) 에서, 온도 범위는 \( 0^{\circ} \mathrm{C} \sim 60^{\circ} \mathrm{C} \) 로 측정하였다.</p><p>Baseline 은 phosphate buffered saline(PBS, \( \mathrm{pH} 7.4\) ) 완충 용액을 사용하여 측정하였으며 지질의 최종 농도는 \( 1 \mathrm{mg} \) \( \mathrm{ml}^{-1} \) 로 하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>유의성 검증은 Student's t-test로 하였으며, \( p\)값이 \( 0.050 \) 이하일 때 그 유의성을 인정하였다. 모든 측정은 3회 이상 실험하여 측정된 자료를 통계 처리하였다.</p>
pre-transition과 main transition의 곡선은 무엇의 상승에 따라 나타나는 현상이야?
온도