<h1>재료 및 방법</h1><h2>시료의 제조</h2><p>본 실험에 사용한 적송잎은 2007년 7월경 지리산에서 채취하여 물로 세척하고 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)에서 열풍 건조한 후 믹서로 분말화하여 추출하였다. 적송잎 열수 추출물은 건조시킨 적송잎 분말 \( 100 \mathrm{~g} \)에 2\( \mathrm{~l} \)를 첨가하여 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \)에서 12시간 동안 정치하여 추출하는 과정을 총 2회 반복하였다. 그 후 추출물은 여과한 후 농축 및 동결 건조하여 제조하였다.</p><h2>실험동물의 사육 및 시료의 채취</h2><p>실험동물은 9주령 된 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐를 (주)오리엔트바이오로부터 구입하여 1주일간 기본식이로 적응시킨 후, 난괴법에 의해 7 마리씩 각각 정상군(NOR), 사염화탄소 투여 대조군(CCL), 적송잎 열수 추출물 투여 후 사염화탄소 투여군(CCL-P) 및 비타민 C 투여 후 사염화탄소 투여군(CCL-V)으로 나눈 후 실험시료는 증류수로 용해하여 매일 \( 200 \mathrm{~mg} / \mathrm{kg} \ bw \) 씩 경구 투여하였으며, 정상군과 대조군은 동일용량의 증류수를 투여하며 6주간 사육하였다. 물과 식이는 자유롭게 공급하였으며, 식이 섭취량은 매일 측정하였고, 몸무게는 격일로 측정하였다. 마지막 경구투여 12시간 후 실험군에는 사염화탄소와 올리브유를 1:1의 비율로 혼합한 용액을 \( 1 \mathrm{ml} / \mathrm{kg} \ / bw / day\) 씩 1 일 간격으로 2회 복강 내로 투여하였고, 정상군에는 동량의 올리브유를 동일한 방법으로 투여하였다. 실험동물은 처치 전 12시간 동안 물만 주고 금식시켰으며, 마지막 사염화탄소 투여 24시간 후 에테르 마취 하에 개복한 후 복부대정맥으로부터 채혈하고 간을 적출하여 생리식염수로 씻은 후 trimming하여 바로 효소 활성을 측정하였으며, 채취한 혈청은 실온에서 30분간 방치한 다음 \( 3,000 \mathrm{~rpm} \)에서 10분간 원심 분리하여 혈청을 분리하였다.</p><h2>혈청 중의 GOT 및 GPT 활성 측정</h2><p>원심분리 하여 얻은 혈청은 자동혈액생화학분석기인 DryChem 3500i (Fuji, Japan)를 이용하여 Glutamic oxaloacetictransaminase (GOT)와 Glutamic pyruvic transaminase(GPT)를 측정하였다.</p><h2>간 조직 중의 단백질 정량</h2><p>단백질의 정량은 Lowry 등의 방법에 의해서 \( 750 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하고 표준단백시료를 bovine serum albumin(BSA)으로 정량하였다.</p><h2>간 조직 중의 항산화 효소원 조제 및 활성 측정</h2><p>적출된 간 \( 0.5 \mathrm{~g} \)에 3배의 \( 5 \% \) sulfosalicylic acid solution을 가하여 균질화 시킨 후 1차 원심분리( \( 600 \times g, 10 \mathrm{~min}) \)하여 상등액을 얻고, 이 상등액을 2차 원심분리 \( (10,000 \times g, 20 \mathrm{~min}) \)하여 얻은 cytosol fraction을 superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPX) 및 catalase (CAT) 활성 측정에 사용하였다. Catalase의 활성은 기질인 hydrogen peroxide가 분해되는 정도를 측정하는 Aebi의 방법에 준하였고, glutathione peroxidase의 활성은 효소에 의해 생성된 산화형 glutathione을 glutathione reductase의 존재 하에서 NADPH로 환원시킬 때 소모되는 NADPH를 측정하는 Pagila와 Valentine의 방법에 따랐으며, superoxide dismutase 활성도는 McCord의 방법에 준하여 실험하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>실험결과는 평균과 표준오차(mean \( \pm \) SE)로 표시하였으며, 각 군간의 통계적 유의성에 대한 검증은 Student's t-test를 이용하였다.</p>
본 실험에 사용한 적송잎은 어디서 채취되었어?
지리산