<h1>결과 및 고찰</h1><h2>채소류 모잘록병균에 길항하는 미생물의 선발</h2><p>채소류 모잘록병균에 길항력을 가지는 미생물을 선발하기 위하여 경상남북도 일원의 균원시료로부터 600여종의 근권미생물을 순수분리하였고, 이들 근권미생물은 모잘록병균인 Pythium ultimum과 Rhizoctonia solani AG-4에 각각 서로 대치배양하여 생육저지대 측정법으로 조사한 후 모잘록병원균에 길항력이 우수한 5종의 세균을 선별하였다(데이타 미제시). 이들 5종의 근권 길항미생물을 다시 2차 선별한 결과 그들 중에서 가장 강한 균사 생장억제 효과를 나타내는 YJ-37 균주를 최종 선발하였다. 선발한 YJ-37 균주는 무, 마늘 등 채소류의 뿌리에서 많이 존재하였다.</p><h2>미생물의 일반적인 동정</h2><p>상기 선발균주 YJ-37은 gram 염색에서 양성이었고, 운동성이 없으며, 전자현미경 관찰하에서는 여러 개의 편모를 가지고, 내생포자를 형성하는 간균이며, Table 1과 같이 배양학적 특성을 조사한 결과, catalase는 음성, 혐기적 조건에서는 생육이 불가능하였으며, Voges-Prostaure test 양성, D-glucose, L-arabinose, D-xylose, D-mannitol에서는 산을 생성하였고, glucose에서 배양할 경우 가스를 생성하였으며, casein, gelatin, starch를 가수분해하며, tyrosine을 분해하지 못하였고, 또한 nitrate reduction과 citrate 이용성 및 indole 생성능은 음성, \( 2 \% \mathrm{~NaCl} \) 이하 농도에서는 생육이 가능하며, \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)까지 생육하는 특성을 가지고 있어 Bergey's Mannual of Systematic Bacteriology에 의거하여 조사한 결과, Bacillus 속으로 확인하였다.</p><h2>Sherolock system에 의한 동정</h2><p>Sherolock system에 의한 갈항균 YJ-37의 세포벽 지방산 분석결과, Table 2에서와 같이 주로 C14:0 iso, C14:0, C15:0 iso, C15:0 anteiso, C15:0, C16:1 w7c alcohol, C16:0 iso, C16:1 w11c, C16:0, C17:1 w10c, C17:0 iso, C17:0 anteiso로 이루어져 있으며, 포화지방산인 C15:0 iso (\( 7.80\% \)), C15:0 anteiso (\( 52.26\% \)) 및 C17:0 iso (\( 3.18\% \))가 많이 포함되어 있었다. 이러한 결과, Bacillus ehimensis는 표준균주와 0.869의 유의성 즉, \( 86.9 \% \)의 유사도을 가지는 것이며, Paenibacillus gordonae는 0.645, Paenibacillus polymyxa는 0.350의 유의성을 가지는 것으로 확인되었다.</p><h2>16S rDNA 염기서열 결정에 의한 동정</h2><p>상기 YJ-37 균주의 16S rDNA sequence는 일반적인 방법으로 염색체 DNA를 분리하고 PCR primer R14와 R15를 이용하여 PCR 산물을 얻고 이를 분석 의뢰하여 부분 염기서열 \( 604 \mathrm{bp} \)를 결정하였다. \( 604 \mathrm{bp} \)의 염기서열은 ribosomal database에서 상동성을 검색한 결과, Fig. 2에서와 같이 분리주 YJ-37은 Bacillus ehimensis의 표준균주와 \( 97.84 \% \)의 높은 유사도를 보였으며, Paenibacillus koreensis와 \( 96.85\% \), Paenibacillus validus와 \( 93.86 \% \), Paenibacillus chibaensis와 \( 92.79 \% \)의 유사도를 나타내었다. 이상의 3가지 동정법에 의해 동정한 결과 근권 길항미생물인 YJ-37 균주는 Bacillus ehimensis로 동정되었기에 Bacillus ehimensis YJ-3이라 명명하였다.</p><p>Bacillus ehimensis를 이용한 생물학적 방제는 Kuroshima등이 chitosanase를 분비하는 고초균으로 토양으로부터 분리◦동정하여 처음 보고하였으며, 1999년 일본에 Akiyama 등이 chitosanase의 정제 및 그 유전자를 cloning하여 발표하였고, 2000년 일본에 Shmosaka 등이 그 유전자의 특성에 관하여 발표하였으나 그 외 연구는 발표된 것이 없는 실정이다.</p><h2>각종 병원성 진균에 대한 항진균성 조사</h2><p>채소류 모잘록병균 Pythium ultimun과 Rhizoctonia solani AG-4 이외에도 길항균 B. ehimensis YJ-37에 의한 다른 식물 병원성 진균의 길항력을 조사한 결과, Fig. 3에서와 같이 B. ehimensis YJ-37이 Alternaria altrata에 대한 생육을 \( 83 \% \)(inhibition percentage, \(\%\)) 억제하였고, Collectotrichum gloeosporioides (\( 45\% \)), Didymella bryoniae (\( 45\% \)), Fusarium moniliforme (\( 55\% \)), F. oxysporum (\( 90\% \)), F. oxysporum сuсumerinum (\( 90\% \)), F. oxysporum niveum (\( 80\% \)), Gloeosporium sp. (\( 72\% \)), Glomerella sp. (\( 90\% \)), G. cingulata (\( 43\% \)), G. lagenaria (\( 45\% \)), Penicillium digitatum (\( 98\% \)), P. italicum (\( 30 \% \)), Phytophthora capsici (\( 45\% \)), Pythium ultimum (\( 99\% \)), Rhizoctonia solani AG-4 (\( 80\% \)), Sclerotinia sclerotiorum (\( 90\% \)), Stemprhylium solani (\( 85\% \))등 대부분의 병원균에 대해서 항진균 활성을 나타내었다. 특히 Alternaria altrata, F. oxysporum cucumerinum, F. moniliforme, F. oxysporum niveum, Penicillium digitatum, Sclerotinia sclerotiorum, Stemprhylium solani 등의 진균에서 채소류 모잘록병균 Pythium ultimum에서의 길항력과 거의 비슷하게 높은 항진균 활성을 가지고 있었다.</p>
본 논문에서 선발한 미생물은 채소류 모잘록병균에 무엇을 가지는가?
길항력