<h2>항관절염 효과 측정</h2><p>Xanthine oxidase (XOase) 활성저해 측정법은 Stirpe와 Crote의 방법에 준하여 측정하였다. 즉, 반응구는 \( 0.1 \mathrm{M} \) potassium phosphate buffer \( (\mathrm{pH} 7.5)\) 에 xanthine \( 2 \mathrm{mM} \)을 녹인 기질액 \( 3 \mathrm{ml} \)에 효소액 \( 0.1 \mathrm{ml} \)와 시료 추출액 \( 0.3 \mathrm{ml} \)를 넣고 대조구에는 추출액 대신 증류수를 \( 0.3 \mathrm{ml} \) 첨가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간 반응시키고 \( 20 \% \) TCA \( 1 \mathrm{ml} \) 를 가하여 반응을 종료시킨 다음 \( 3,500 \mathrm{rpm} \)에서 15분간 원심분리하여 단백질을 제거한 후 반응액 중에 생성된 요산(uric acid)의 함량을 \( 292 \mathrm{~nm} \)에서 측정하여 다음 식으로 저해율을 구하였다. 저해율(\(\%\))은 1-(반응구의 uric acid 생성량/대조구의 uric acid 생성량) \( \times 100 \)으로 나타내었다.</p><h2>항균활성 측정</h2><p>항균활성 측정실험에 사용한 균주는 Staphylococcus epi-dermidis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus mutans, Helicolacter pylori를 사용하였다. S. epidermidis, S. aur-euss, E. coli 배양에는 nutrient medium (Difco. USA)을 사용하였으며, agar plate 상으로 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 의 incubator에서 24~48시간 동안 실시하였다. Streptococcus mutans 배양에는 brain heart medium을 Helicobacter pylori의 배양에는 최적배지 (special pepton \( 0.5 \mathrm{~g} \), agar \( 0.75 \mathrm{~g}\), \(\mathrm{NaCl}\) \(0.25 \mathrm{~g} \), yeast extract \( 0.25 \mathrm{~g} \), beef extract \( 0.2 \mathrm{~g} \) 및 pyruvic acid \( 0.025 \mathrm{~g} / 50 \mathrm{ml} \)를 사용하여 미호기성 조건을 유지시켜주기 위해서 \( 10 \%\) \(\mathrm{CO}_{2}\) incubator를 이용하였으며, incubator의 습도는 항상 \( 95 \% \)이상으로 유지하였고, agar plate상에서 배양은 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)로 48~72시간동안 실시하였다. 항균활성은 배양 후 생성된 clear zone의 크기 \( (\mathrm{mm}) \)로 항균활성을 나타내었다.</p><h2>미백효과 측정</h2><p>Tyrosinase 저해활성 측정은 반응구는 \( 0.175 \mathrm{M} \) sodium phosphate buffer\( (\mathrm{pH} 6.8) \) \( 0.5 \mathrm{ml} \) 에 \( 10 \mathrm{mM} \) L-DOPA를 녹인 기질액 \( 0.2 \mathrm{ml} \) 및 시료용액 \( 0.1 \mathrm{ml} \)의 혼합액에 mushroom tyrosinase\( (110 \mathrm{U} / \mathrm{ml}) \) \( 0.2 \mathrm{ml} \) 를 첨가하여 Yagi 등의 방법에 따라 측정하였으며, 저해율(\(\%\))은 1-(반응구의 흡광도/대조구의 흡광도 \( ) \times 100 \)으로 나타내었다.</p><h2>주름개선 효과 측정</h2><p>Porcine pancreatic elastase 저해활성 측정은 기질로서 N-succinyl-(L-Ala) \( )_{3} \)-p-nitroanilide를 사용하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 20분간 p-nitroanilide의 생성량을 \( 405 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였으며, 저해율(\(\%\))은 1-(시료첨가군의 흡광도/대조구의 흡광도)\( \times 100 \)으로 나타내었다.</p><h2>Anti-inflammation 효과 측정</h2><p>Hyaluronidase (HAase) 저해활성 측정은 sodium-hyalur-onic acid (HA)로부터 형성된N-acetylglucosamine-을 glucox-azoline 유도체로 변형시킨 후 p-dimethylaminobenzalde-hyde (DMAB)로 발색시켜 흡광도를 측정하여 효소 활성을 측정하였다. 저해율(\(\%\))은 1-(시료첨가군의 흡광도/대조구의 흡광도)\( \times 100 \)으로 나타내었다.</p>
\( 0.1 \mathrm{M} \) potassium phosphate buffer \( (\mathrm{pH} 7.5)\)에 xanthine 몇 \(\mathrm{mM} \)을 녹였는가?
\( 2 \mathrm{mM} \)