<h1>재료 및 방법</h1><h2>양돈장 및 시료채취</h2><p>농림수산식폼부에서 수행한 2007년 돼지 소모성질환 컨설팅사업에 참여한 전국의 양돈장 300개 충 159개(6월 82 개, 10월 77개) 농장을 대상으로 농장별로 모돈(경산돈 위주 10두)과자돈(일령별로 30, 60, 90, 120 및 150일령의 돼지 각 4두씩 20두) 30 두를 임의로 선발하였고, 선발된 돼지의 경정맥에서 혈액을 채취하여 응고시킨 후 분리된 혈청을 신험신로 송부하여 항체검사를 실시하였다.</p><h2>항체검사</h2><p>PEDV에 대한 항체는 이전의 연구자들이 실시한 일반적인 방법에 준하여 혈청중화시헙을 실시하여 검사하였다. 즉, \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30 분간 비동화처리한 검사혈청 \( 50 \mu \mathrm{l} \) 를 96-well mi-croplate에서 2배수 계단희석한 다음, \( 200 \mathrm{TCID}_{510} \) 역가의 KPEDV를 동량 첨가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 1시간 반응하였다. 사전에 세포베양 microplate에 배양하여 단층이 형성된 vero 세포(ATCC CCL-81)를 PBS (\( \mathrm{pH} 7.2\))로 3회 세척한 다음, 반응이 끝난 혈청-바이러스 혼합액을 \( 100 \mu \mathrm{l} \) 씩 첨가한 다음, \( 37^{\circ} \mathrm{C} \), \( \mathrm{CO}_{2} \) 배양기에서 1시간 감염시켰다. 감염이 끝난 혈청-바이러스 혼합액을 버리고, PBS로 3회 세척한 다음, 트립신( \( 2 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)) 함유 alpha-MEM 배지를 첨가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C}\), \(\mathrm{CO}_{2} \) 배양기에서 3일간 배양한 다음, 세포변성효과를 관칠하여 판독하였다. 검사 혈청의 중화항체가는 세포변성효과가 억제되는 well에 해당하는 혈청희석배수를 역으로 계산하였다.</p><h2>혈청검사결과의 역학적 분석</h2><p>혈청학적 검사걸과에 근거하여 유병율, 면역수준 변화 및 농장별 감염유형 등을 분석하였다. 농장별 감염유형은 PEDV 에 대한 모돈군의 면역수준과 자돈군에서 감염으로 추정되는 항체가 상승의 여부를 고려하여 분류하였다. 모돈군의 면역 수준 평가는 전체 모돈군이 항체 양성인 경우 전체면역 (whole group immunized; W)으로 판정하였으며, 모돈군에 항체 음성 및 양성 모돈이 혼재해 있을 경우에는 부분면역 (partially group immunized; P)으로 판정하였다. 자돈군의 경우 PEDV 감염 1~2주 후에 출현한 중화항체가 4~5주경에 최고역가에 도달한다는 연구결과를 고려하여, 30일령 이후 자돈군 전 구간에 걸쳐 항체가의 상승이 없는 경우에 비감염(not infected; N)으로 판정하었고, 30일령 이후 평균항체가가 상승하는 경우에는 해당시기 이전에 PEDV가 감염된 것(infected; I)으로 판단하였다. 즉, 60, 90, 120 및 150 일령에서 항체가 상승은 각각 이유기(40일령 전후), 육성초기(70일경 전후), 육성후기(100일령 전후) 및 비육기(130일령 전후)에 감염된 것으로 추정하였다. 각 양돈장의 최종 감염양상은 모돈군의 면역수준과 자돈군의 감염 여부를 조합하여 WN (모돈군의 완전면여 및 자돈군의 비감엄), WI (모돈군의 완전면역 및 자돈군의 감염), PN (모돈군의 부분면역 및 자돈군의 비감염) 및 PI (모돈군의 부분면역 및 자돈군의 감염) 유형으로 분류하였다(Table 1).</p><h2>통계처리</h2><p>중화항체 역가는 대수변환된 자료를 사용하여 기하평균(geometric mean)과 \( 95 \% \) 신뢰구간으로 제시하였다. 감염 유형별 평균 항체역가는 대수변환된 자료에 대하여 Student's t 검정으로 평가하였다. 자돈의 일령이 증가함에 따라 증화항체 유병율이 증가하는지를 평가하기 위하여 Cochran-Armitage 카이제곱 추세분석을 사용하였다. 검정결과 \( \mathrm{p}<0.05 \) 일 때 통계적 유의성이 있는 것으로 판단하였으며, 자료 분석은 SAS패키지 version 9.1 (SAS Institute, Cary, NC)을 사용하였다.</p>
임의로 선발된 모돈 10두, 과자돈 30두의 혈액은 어디에서 채취해?
경정맥