<h1>재료 및 방법</h1><h2>추출물의 제조</h2><p>본 실험에 사용한 적송잎은 2007년 7월경 지리산에서 채취하여 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)에서 열풍건조한 후 믹서로 분말화시켰다. 열수 추출물은 적송잎 분말 \( 743 \mathrm{~g} \)에 물 \(4,500 \mathrm{ml}\)을 첨가하여 \( 121^{\circ} \mathrm{C} \)에서 15분간 추출한 후 여과한 액을 동결전조하여 제조하였다. 아임계(Sub-supercritical) 추출물은 적송잎분말 \( 232 \mathrm{~g} \)에 \( 60 \mathrm{kgf} / \mathrm{cm}^{3} \)의 \( \mathrm{CO}_{2} \) 가스를 이용하여 separator1 은 \( 120^{\circ} \mathrm{C} \)로, separator 2는 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \)로 설정하여 210분간 추출을 행한 후 여과한 액을 동결건조하여 제조하였다. 적송잎 추출물의 효율적인 추출공정을 확립하기 위하여 아임계 추출을 행한 추출물을 다시 열수를 이용하여 추출하는 방법으로 2가지의 추출물을 제조하였다. 아임계 열수추출물의 제조는 다음과 같이 행하였다. 적송잎 분말 \( 518 \mathrm{~g} \)에 \( 60 \mathrm{kgf} / \)\( \mathrm{cm}^{3} \)의 \(\mathrm{CO}_{2} \) 가스를 이용하여 separator 1은 \( 120^{\circ} \mathrm{C} \)로, separator 2는 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \)로 설정하여 180분간 추출을 행하였고, 추출물에 물 \( 4,000 \mathrm{ml} \)를 첨가하여 \( 121^{\circ}\mathrm{C} \)에서 60분간 추출을 행하였다. 추출물에 \( 99 \% \) 에탄올을 최종농도 \( 70 \% \)가 되도록 첨가하고 이에 따른 침전물을 Whatman 1 여과지로 여과하여 제거한 액을 Rotary Evaporator (Eyler Co. LTD., Japan)로 농축한 후 원심분리(\(5,000\times g\), 20 분)를 행하고 상층액과 침전물을 각각 따로 동결건조하여 아임계 열수추출 상층액(SSHS)과 아임계 열수추출 침전물(SSHP)을 제조하였다.</p><h2>총 폴리페놀성 성분의 농도 측정</h2><p>총 폴리페놀성 성분의 농도는 Folin-Ciocalteu법에 의해 비색정량 하였다. 각 추출물을 \( 70 \% \) 아세톤 용액으로 10배 희석한 후, 희석시료 \( 50 \mu \mathrm{l} \)와 \( 0.25 \mathrm{~N} \) Folin-ciocalteu's phenol reagent (Sigma, St. Louis, MO, USA) \( 0.475 \mathrm{ml} \)를 혼합하여 실온에서 3분 동안 반응시켰다. 여기에 \( 1 \mathrm{M} \mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} \)를 \( 0.475 \mathrm{ml} \) 첨가하고 실온에서 60분간 반응시킨 후 \( 724 \mathrm{~nm} \)에서 홉광도를 측정하였다. 포준물질로 catechin (Sigma)을 사용하여 농도를 계산하였다.</p>
실험에 사용할 적송잎 분말화 과정 중 열풍건조 시 적절한 온도는 얼마인가?
\( 60^{\circ} \mathrm{C} \)