<h2>즉각형 과민반응의 억제 및 예방효과</h2><p>발효 울금 원료의 즉각형 과민반응에 대한 억제 및 예방효과를 확인하기 위해서 PCA (Passive cutaneous anaphylaxis) 모델을 확립하였다. 실험을 위해 5주령 자성 ICR 마우스를 중앙실험동물로부터 구입하였고 1주일 동안 계류하였다. 실험동물은 PCA를 유발하지 않은 PCA 음성군, PBS를 경구투여한 vehicle군, \( 340 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)의 양으로 비발효 울금 원료를 경구투여한 대조 실험군, \( 340 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 의 발효 울금 원료를 경구투여한 실험군 등 총 4군으로 구성하였다. 계류 후 2주일 동안 시료를 전투여했고, 전투여 종료일에 PCA를 유발시켰다. 유발 1일차에는 유발군 마우스의 양쪽 귀에 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)의 anti-dinitrophenyl(DNP)-IgE를 \( 20 \mu \mathrm{L} \) 씩 피내 투여하였고, 24시간 후 DNP-human serum albumin(HSA)과 \( 1 \% \) evans blue를 동량으로 혼합한 항원용액 \( 200 \mu \mathrm{L} \)를 마우스의 정맥에 투여하여 PCA를 유발시켰다. 항원 투입 30분 후 마우스를 치사하여 귀를 적출하고, 1 N KOH를 이용해 적출한 귀 조직으로부터 evans blue를 침출시킨 후 \(620 \mathrm{nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 정량은 evans blue 표준곡선을 이용하였다.</p><h2>커큐민 및 유도체의 함량분석</h2><p>발효 울금 원료에 함유된 커큐민과 그 유도체인 디메톡시커큐민, 비스디메톡시커큐민의 함량을 측정하기 위해 정량분석을 실시하였다. 커큐민을 추출하기 위해서 발효 및 비발효 울금원료 \( 2 \mathrm{~g} \)을 \( 10 \mathrm{~mL} \)의 DW에 현탁한 후 \( 2.5 \)배의 ethyl acetate로 3회 추출하였다. 그 후 감압농축기로 ethyl acetate를 제거한 뒤 methanol에 \( 1,000 \mathrm{ppm} \)의 농도로 용해시켜 HPLC 분석을 진행하였다. 분석기기는 Thermo Separation Product HPLC system을 사용하였으며 HPLC 조건으로 column은 ODS-H80( \( 150 \times 4.6 \mathrm{~mm}, 4 \mathrm{um}) \)를 사용하였고, \( 100 \% \) acetonitrile을 이동상으로 하여 \( 1 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \) 유속으로 분석하였다. 분석 시료는 \( 10 \mu \mathrm{L} \)를 injection하였고 UV \( 450 \mathrm{~nm} \)파장에서 분석하였다. 정량에 사용한 커큐민 표준품은 Sigma에서 구입하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>실험으로부터 얻은 모든 결과는 mean \( \pm\) SEM으로 나타내었고 independent t-test를 이용하여 통계처리 한 후 \( p< \) \( 0.05 \) 이하에서 각 시료간의 유의적인 차이를 검증하였다.</p>
발효 울금 원료의 즉각형 과민반응에 대한 억제 및 예방효과를 확인하기 위해 어떤 모델을 확립했어?
PCA