<h2>지방산 분석</h2><p>콩잎의 지방산 함량은 Hwang 등의 연구에 준하여 분석하였다. 각각의 콩잎 분말 \( 1 \mathrm{~g} \)에 \( 0.5 \mathrm{~N} \) 메탄올성 \( \mathrm{NaOH} \) 용액 \( 3 \mathrm{~mL} \)를 가하여 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \(10\)분간 가열하여 지방산과 글리세롤 가수분해하였다. 이어 삼불화붕소 (\( \mathrm{BF_3}\)) \( 2 \mathrm{~mL} \)를 가하여 교반 후 \(30\)분간 다시 가열하여 지방산 메틸에스테르화를 진행하였다. 반응 종료 후 이소옥탄 \( 1 \mathrm{~mL} \)를 첨가하여 격렬히 흔든 후 방치시켜 이소옥탄 층에 녹아 든 유지층만을 회수하여 무수아황산나트륨과 함께 탈수한 뒤 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \)-membrane filter (Dismic-\(25\)CS, Toyoroshikaisha, Ltd., Tokyo, Japan)로 여과하여 GC로 분석하였다. GC는 질소 및 수소 가스와 SP-\(2560\) capillary column (\( 100 \mathrm{mT} \times \mathrm{T} 0.25 \mathrm{~mm} \) i.d., \(0.25\)-\( \mu \mathrm{m} \) film thickness, Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA) 및 flame ion detector (FID)가 장착된 것을 사용하였다. 상세 분석조건으로는 oven 초기 온도 \( 140^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \(5\)분간 유지 후, \( 180{ }^{\circ} \mathrm{C} \)까지 \(1\)분당 \( 20^{\circ} \mathrm{C} \)만큼 상승시켜 \(2\)분간 유지하고 최종 \( 230^{\circ} \mathrm{C} \)까지 분당 \( 5{ }^{\circ} \mathrm{C} \)만큼 상승시켰으며 각각의 시료량은 \( 10 \mu \mathrm{L} \)를 주입하여 \(35\)분간 FID상에서 지방산 함량을 검출하였다.</p><h2>유리아미노산 분석</h2><p>유리아미노산은 Hwang 등의 방법을 약간 변형하여 수행하였다. 각각의 콩잎 시료 \( 0.1 \mathrm{~g} \)을 정확히 칭량하여 시험관에 넣고 여기에 증류수 \( 5 \mathrm{~mL} \)를 가하여 균질화한 후 heating block (HB-\(48\)P, DAIHAN Scientific, Korea)을 사용하여 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \(1\)시간 가수분해하였다. 가수분해 후 \( 10 \% \) 의 \(5\)-sulfosalicylic acid dihydrate \( 1 \mathrm{~mL} \)를 첨가 및 혼합하여 \( 4{ }^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \(2\)시간 방치한 후 \( 15,000 \mathrm{rpm} \)에서 \(3\)분간 원심분리 및 syringe filter로 여과하였다. 이후 여과액은 회전식 감압농축기를 이용하여 \( 50{ }^{\circ} \mathrm{C} \)온도로 감압농축하여 \( \mathrm{pH~} 2.2 \) lithium buffer \( 2 \mathrm{~mL} \)을 가하여 용해시켜 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \)-membrane filter로 여과한 후 아미노산 자동분석기로 정량 분석하였다.</p><h2>무기질</h2><p>무기질 분석은 Kim 등의 무기질 분석법에 준하여 수행하였다. 각각의 콩잎 분말 \( 0.5 \mathrm{~g} \)에 \( 70 \% \) 질산 용액 \( 10 \mathrm{~mL} \)을 첨가하여 microwave로 분해하였다. 분해 이후 멸균증류수로 최종 \(50 \mathrm{~mL} \)가 되도록 정용하여 시험 용액을 제조하였고, 나트륨은 \(550\)-\(600^{\circ} \mathrm{C} \) 회화로에서 회화한 후 \( 3 \% \) 질산 용액으로 최종 \( 30 \mathrm{~mL} \)로 정용하여 시험 용액을 제조한 후 ICP-MS로 분석하였다.</p>
지방산에 삼불화붕소 (\( \mathrm{BF_3}\)) \( 2 \mathrm{~mL} \)를 가하여 교반 후 \(30\)분간 다시 가열하여 무엇을 진행하는가?
지방산 메틸에스테르화