<h2>세포 보호효과 관련 유전체 발현 분석</h2><p>금은화의 주요 생리활성인 염증반응 억제와 독소의 중화반응 등은 금은화의 항산화 물질에 기인하며, 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획이 Raw 264.7 세포에서 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 에 의한 ROS의 세포보호 효과가 있음으로, 항산화와 염증 관련 유전체 발현 양상을 조사 분석하였다. \( \mathrm{IC}_{50}(50 \mu \mathrm{M}) \) 의 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 독성에 대한 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획의 Raw 264.7 세포보호 효과에 관련된 유전체 발현의 패턴은 합성 항산화제인 BHA와 유사하게 나타났으나, 발현 차이는 BHA가 처리된 세포에서 더 높게 나타났다. 항산화 효과 관련 유전자를 NCBI 및 GenCards 데이터베이스에서 추출하고, 에틸 아세테이트 분획 및 BHA 의 처리에서 영향을 받은 유전자(2-fold changed genes)로부터 재 추출 하였다. 31 개 유전자는 2 배 이상 발현 차이가 있으면서 항산화 효과에 관여하는 유전자 군이다. 이들 유전자들은 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획과 BHA 처리에서 유사한 발현을 보였다. 그러나 세포 내 주요 항산화 효소를 만드는 유전자 중 하나인 heme oxygenase 1 (Hmox1) 유전자의 발현 정도는 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획과 BHA 간에 상이했으며, 특히 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획 처리군에서 4 배 이상 증가한 것으로 나타났다. 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획의 항염증 반응에 대한 작용점 확인을 염증 관련 유전자와 비교 분석하였다. 29개 유전자가 에틸 아세테이트 분획 및 BHA 처리에 의해 영향을 받은 것으로 확인되었으며, 항산화 효과 관련 유전자 비교분석 결과와 같이 에틸 아세테이트 분획과 BHA 처리에서 매우 유사한 발현 양상을 보였다. 그러나 T-box transcription factor (Tbx21) 의 발현 양상은 상이하였다. BHA 처리군에서는 2 배 감소하였으나 에틸 아세테이트 분획의 처리군에서는 오히려 약 2 배 증가하였다. 이는 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획에 의해 Tbx21 유전자가 발현되어 항염증 반응에 관여함을 알 수 있다. 전사인자 Tbx21는 T-box 계열의 Th1 특이성 전사인자로 IFN-४를 생성하는 Th1 세포에만 발현되어 있고 Th2 세포에는 존재하지 않는다. Tbx21 유전자는 T 세포에서 IFN-४의 생성을 유도하고, IL-4와 IL-5의 생성을 억제하여 naïve T 세포가 Th1 세포로 분화하도록 하여 Th1 세포 반응을 더욱 증진시키는 것으로 알려져 있다.</p><p>항산화 효소를 합성하는 Hmox1 유전자는 산화적 스트레스에 반응하여 항염증 작용에 관여하는 유전자이기도 하다. 따라서 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 에 의해 유도된 ROS의 활성을 Hmox1 에 의해 억제시킬 가능성이 있음으로, 산화적 스트레스 및 염증반응에 대한 구체적이고 직접적인 분자기전을 규명하기 위해서는 추가적인 연구수행이 요구된다. 본 연구에서는 금은화 추출 에틸 아세테이트 분획에 의한 항산화 및 항염증 반응의 작용점에 있는 후보 유전자로 Hmox1과 Tbx21을 선정할 수 있었으며, 향후 금은화의 추출물로부터 항산화 활성 및 항염증 반응에 의한 세포보호 효과에 관련된 단일물질의 분리, 정제 및 이의 생리활성 평가에서 Hmox1과 Tbx21 유전자를 바이오마커(bio-marker)로 활용하고자 한다.</p>
금은화의 항산화 물질에 의한 반응으로 염증과 관련된 것은 뭐야?
염증반응 억제