<h2>불포화 지방산 linoleic acid 산화 실험계를 이용한 항산화활성</h2><p>불포화 지방산인 linoleic acid를 이용한 thiocyanate 방법으로 가시오가피 잎, 뿌리, 줄기 및 열매의 용매별 추출물의 항산화 활성을 측정한 결과는 Fig. 5와 같다. 반응 7일째에 대조구에 대한 상대 활성으로 나타낸 결과는 가시오가피 잎 추출물 \( 1 \% \) 처리 시 메탄올 추출물에서 약 \( 45 \% \) 로 가장 높은 저해율을 보였고, 에탄올, 열수, 온수 추출물 순으로 저해 활성을 보였다. 가시오가피 뿌리 추출물에서는 \( 1 \% \) 처리 시 온수 추출물이 약 \( 52 \% \)로 가장 높은 저해율을 보였고, 에탄올, 메탄올, 열수 추출물 순으로 저해율을 보였다. 나머지 뿌리, 줄기 추출물에 서 \( 1 \% \) 처리 시 에탄올 추출물이 가장 높은 저해율을 보였고, 열수, 온수, 메탄올 추출물 순으로 저해율을 보였다. 이들에 비해 대조구로 사용된 시판 합성 항산화제인 BHT는 약 \( 85 \% \)의 높은 항산화 활성을 보였다.</p><p>불포화 지방산인 linoleic acid를 이용한 TBA법으로 가시오가피 잎, 뿌리, 줄기 및 열매의 용매별 추출물의 항산화 활성을 측정한 결과는 Fig. 6 과 같다. 가시오가피 잎 추출물은 열수 추출물을 제외한 나머지 추출물에서 약 \( 70 \% \) 이상의 높은 저해활성을 보였으며, 가시오가피 뿌리 추출물은 잎 추출물 보다 조금 못한 \( 70 \% \) 이하의 활성을 보였다. 가시오가피 줄기 추출물 중 열수 추출물은 약 \( 70 \% \)의 저해율을 보였지만 나머지 추출물은 약 \( 50 \% \) 이하의 저해율을 보였다. 가시오가피 열매 추출물은 모든 용매에서 약 \( 50 \% \) 이하의 낮은 저해율을 보였다. 이때 대조구로 사용된 시판 합성 항산화제인 BHT는 약 \( 87 \% \)의 높은 항산화 활성을 보였다.</p><h2>Tyrosinase 활성</h2><p>멜라닌은 피부, 머리카락, 눈동자 등 생물체에 널리 분포되어 있는 색소 성분으로 인체 내에서는 표피층의 멜라노사이트라는 색소세포 내의 멜라노좀에서 합성되는데, tyrosine을 시발 물질로 하여 tyrosinase 효소에 의해 DOPA (3,4-dihydroxy-phenylalanine) 또는 DOPA 퀴논으로 산화 및 중합 반응에 의해 멜라닌이 만들어 진다. 이때 생성되는 멜라닌이 자외선과 같은 피부자극에 대해 저항력을 높여주지만, 과도한 멜라닌 생성은 기미, 주근깨, 검버섯과 같은 색소 침착과 피부 손상을 일으키는데, 이때 피부 미백효과를 측정하는 하나의 지표로 tyrosinase 활성을 측정하고 이를 효과적으로 저해하는 생리활성물질을 탐색하는 것은 향장산업에서 매우 중요한 부분이다. 본 연구결과에서 대조구로 사용된 kojic acid 는 \( 87.12 \% \)로 높은 tyrosinase 저해활성을 나타내었다. 가시오가피 잎, 뿌리, 줄기 및 열매에서는 뿌리의 메탄올 추출물이 \( 50.06 \% \)로 비교적 높은 tyrosinase 저해활성을 나타내었고, 나머지 추출물에서는 온수가 \( 28.84 \% \), 열수가 \( 25.25 \% \), 에탄올이 \( 32.84 \% \)로 나타났다. 그 외 잎에서는 열수 추출물이 \(28.17\%\), 줄기에서는 온수 추출물이 \(24.44 \% \), 열매에서는 에탄올 추출물이 \( 41.65 \% \)로 용매별로 골고루 나타났다. 이는 멜라노마세포 증식과 멜라닌 생합성을 억제시키는 대표적인 화합물 중에 페놀성 화합물, flavonoid, albutin, glycolic acid, kojic acid, pentadecenoic acid, ferulic acid, isoflavonoids 등이 제시되고 있는데, 이러한 화합물이 여러 용매에서 다양하게 추출되어 나왔기 때문이라 사료된다.</p><p>이상의 연구에서 가시오가피 잎에서는 총 폴리페놀 화합물 함량과 플라보노이드 함량이 높았고 그에 따라 \( \mathrm{Fe} / \mathrm{Cu} \) reducing power 또한 높았다. 그리고 잎에서 간장 microsome의 지질 과산화 억제활성과 thiocyanate법 및 TBA법에 의한 지질과산화 저해율 정도를 봤을 때 비교적 높은 항산화 활성이 있었다. 뿌리에서는 DPPH free radical scavenging 활성, tyrosinase 저해활성이 높았다. 이상의 실험결과를 바탕으로 가시오가피는 잎을 비롯하여 나머지 뿌리, 줄기 및 열매 모두 비교적 높은 생리활성 물질과 항산화 효과를 나타내어 한방약재나 건강 기능성식품 원료로 모두 사용될 수 있을 것으로 사료되어 진다.</p>
잎에서 지질 과산화 억제 활성을 측정하기 위해 사용한 방법이 뭐야?
thiocyanate법