<h2>항암성 측정</h2><h3>시료 조제</h3><p>시료는 액체배양물에 1배의 물을 가해 \( 110^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30분 동안 2회 반복 추출하고 원심분리 \( (5,000 \mathrm{rpm}\), 10분) 하여 여액을 얻고 이를 20배 농축 후 freeze-dry하여 사용하였다. 시료는 AB균사체를 항온배양 \( \left(25^{\circ} \mathrm{C}\right. \) 에서 5일간) 한 액체배양물과 변온 배양한 액체배양물이었고, 왕겨첨가 시험에서는 왕겨첨가구 (기본배지+Rice hull+AB), 대조구(기본배지+AB), 및 왕겨구 (Rice hull+AB) 액체배양물이었다.</p><h3>S-180 cell에 대한 독성 실험</h3><p>S-180에 대한 세포독성은 Bahn 등의 방법에 준하여 실시하였다. 시료 \( (10 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 증류수)를 DMEM 배지로 10배 희석하여 사용하였다. Control은 증류수 \( (100 \mu \mathrm{l})+\mathrm{DMEM}(900 \mu \mathrm{ll}) \), 시료처리는 시료 희석액 \( (100 \mu \mathrm{l}\))+\(\mathrm{DMEM}(900 \mu \mathrm{ll}) \) 농도가 되게 구성하였다. 배양된 S-180 cell을 \( 1.5 \times 10^{5} \) cell \( / \mathrm{ml} \) 이 되게 희석하여 \( 3 \mathrm{ml} \) 부피로 처리한 다음 \( \left(5 \times 10^{4} \mathrm{cell} / \mathrm{ml}\) \(\mathrm{ DMEM}\right. \) 으로 희석), 처리된 well plate를 \( 5 \% \mathrm{CO}_{2} \) incubator \( \left(37^{\circ} \mathrm{C}\right) \) 에서 48시간 동안 배양한 후 trypan blue로 염색하여 hemacytometor로 생세포수를 조사하여 \( \mathrm{ED}_{50} \) 값을 구하였다.</p><h3>Mouse 항복수암성</h3><p>Mouse 항복수암 실험은 Bahn 등의 방법에 준하여 실시하였다. Female ICR mouse (6 ~7주령, \(27\sim 28\mathrm{ g}\))를 cage당 5마리씩 분배하고(이때, cage당 평균무게가 같게 임의적으로 넣었다). 온도와 습도가 조절 \( \left(25 \pm 1^{\circ} \mathrm{C},60 \%\right)\) 되는 시설에 물과 음식을 자유롭게 먹도록 하여 1주일 동안 적응시켰다. Female ICR mouse 복강에서 계대 배양된 S-180 cell \( \left(1 \times 10^{7}\right. \) \(\mathrm{cell/ml}\) PBS)을 각 mouse에 \( 0.1 \mathrm{ml} \) 씩 복강에 주사하여 복수암을 유발하였다. 복수암 유발 후 2일마다 시료 \( 0.1 \mathrm{ml}\) \((500 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 을 mouse 복강에 주사하였다. S-180세포 복강 투여 후 42일 동안 생존한 mouse의 수와 생존일수를 기록하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>Data는 \( \operatorname{mean} \pm \mathrm{SD} \) 로 표시하였으며, 유의성은 one-way 분산 분석(ANOVA)을 통하여 분석한 다음 Duncan의 다중검증으로 \( \mathrm{p}<0.05 \) 수준에서 검증하였다.</p>
시료는 무슨 배양물 이야?
액체배양물