<h1>요 약</h1><p>본 연구에서는 S. cerevisiae와 P. pastoris에서 bovine pancreatic (bp-) DNase I의 과발현과 재조합 DNase I의 특성을 조사하였다. bp-DNase I 유전자는 GAL10 promoter, \( \mathrm{MF} \alpha\), GAL7 terminator 사이에 삽입하여 재조합 plasmid인 pGAL-MF \( \alpha \)-DNaseI \( (6.4 \mathrm{~kb}) \) 를 구축하였다. 그리고 bp-DNase I 유전자를 AOX1 promoter, \( \mathrm{MF} \alpha\), AOXI terminator에 삽입하여 재조합 plasmid인 pPEXI \( (8.8 \mathrm{~kb}) \)를 구축하였다. 재조합 plasmid인 pGAL-MF \( \alpha \)-DNaseI과 pPEXI를 각각 S. cerevisiae와 P. pastoris 숙주세포에 형질전환시켰다. 형질전환된 효모세포들을 galactose와 methanol 배지에서 \( 30^{\circ} \mathrm{C},\) 48시간 배양하면 bp-DNase I은 대부분이 배양 상등액으로 과발현되었다. P. pastoris 형질전환체는 배양 상등액에서 \( 45.5 \mathrm{unit} / \mathrm{mL} \) 의 DNase I 활성을 보였으며, 반면에 S. cerevisiae 형질전환체는 \( 37.7 \mathrm{unit} / \mathrm{mL} \) 의 DNase I 활성을 보였다. 또한 DNA 분해 특성을 조사한 결과, P. pastoris 재조합 DNase I으로 기질 DNA(calf thymus)를 처리하였을 때 1분 이내 DNA가 분해되는 것을 확인할 수 있었으며 이는 상업용 bp-DNase I과 S. cerevisiae 재조합 DNase I으로 처리했을 때보다 빠른 분해 패턴을 보였다.</p>
갈락토오스 메탄올 배지에서 배양할 경우 bp-DNase I은 어떻게 되니?
배양 상등액으로 과발현