<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험재료</h2><p>본 실험에 사용한 가시오가피(Acanthopanax senticosus)는 2010년 11월에 강원도 양구군 고지대에서 재배해 잎, 뿌리, 줄기 및 열매 부분으로 나누어 건조시켜 판매하고 있는 것을 직접 구입하여 분쇄 후 시료로 사용하였다.</p><h2>시료의 추출조건 및 수율</h2><p>수용성 추출은 가시오가피 잎, 뿌리, 줄기와 열매의 건조분말 \( 100 \mathrm{g} \)을 각각 취해 10배의 정제수로 온수 추출물과 \( 90^{\circ} \mathrm{C} \) 열수 추출물을 얻었다. 유기용매 추출은 10배의 \( 95 \% \) 에탄올과 \( 95 \% \) 메탄올을 사용하여 상온에서 3시간씩 3회 환류 추출하여 Whatman No. 1 여과지(Toyo 2A; Toyo Roshi, Tokyo, Japan)로 여과한 다음, 회전진공농축기(Buchi Rotavapor R-215, Flawil, Switzerland)로 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 농축하여 유기용매를 완전히 제거한 조추출물을 얻었다. 물 추출물과 유기용매 조추출물은 동결건조기(Eyela FUD-2100, Tokyo Rikakikai Co., Tokyo, Japan)로 동결 건조시켜 추출 수율(%)을 구하고 분석 시료로 사용하였다.</p><h2>페놀성 화합물 함량 측정</h2><p>페놀성 화합물의 함량은 Folin-ciocalteu's phenol reagent를 이용한 Folin-Denis법으로 비색시켜 spectropho-tometer (Hitachi U-2900, Tokyo, Japan)의 \( 760 \mathrm{nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 함량은 tannic acid를 일정 농도(\( 0-500\mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \)로 하여 시료와 동일한 방법으로 측정한 표준곡선으로부터 계산하였다.</p><h2>Flavonoid 함량 측정</h2><p>Flavonoid 함량은 Jia 등의 방법에 따라 각 시료의 추출 용매별 농도에 정제수와 \( 5 \% \mathrm{~NaNO}_{2} \) 용액 및 \( 10 \% \mathrm{~AlCl}_{3} \cdot 6 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)를 잘 혼합하여 반응시킨 용액을 spectrophotometer (Hitachi U-2900)의 \( 510 \mathrm{nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 함량은 표준 물질로서 (\(+)-catechin hydrate을 일정 농도(\(20- 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) )로 시료와 동일한 방법으로 측정하여 작성한 표준곡선으로부터 계산하였다.</p><h2>DPPH에 의한 항산화 활성 측정</h2><p>항산화 활성 측정은 Blois 방법에 따라 각 용매 추출물 분말을 \( 0.01,0.05,0.1,0.5 \) 및 \( 1 \% \) 농도로 만든 시료 용액에서 \( \alpha \), \( \alpha \)'-diphenyl-\( \beta\)-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging 활성을 spectrophotometer (Hitachi U-2900)의 \( 528 \mathrm{nm} \)에서 흡광도를 측정하여 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도차를 백분율 (\( \% \))로 표시하였다. 이때 활성 비교는 합성 항산화제 butylated hydroxytoluene BHT를 \( 0.05 \% \) 농도로 첨가하여 시료와 동일한 방법으로 흡광도를 측정하였다.</p><p>\( \text{DPPH radical scavenging activity} (\%)=[1 -(\text{sample absorbance}~ 528 \mathrm{nm} ) / \text{control absorbance} ~528 \mathrm{nm}]\times 100\)</p>
물 추출물과 유기용매 조추출물은 어떤 방법을 이용하여 시료로 사용하였어?
동결 건조