<h1>재료 및 방법</h1><h2>공시재료</h2><p>국제동물유전학회에서 주관한 2004년 고양이 비교동정 험 시료 20 두(8두의 친자확인과 12 두의 개체확인 시료)를 대상으로 하였다. 재료는 구강에서 채취한 buccal swab로부터 추출한 DNA를 사용하였다.</p><h2>DNA marker 선정 및 PCR</h2><p>고양이의 genotyping을 위한 microsatellite marker는 국제동물유전학회 개(고양이 포함) 분과위원회에서 권고하는 marker 중에서 비교적 PCR과 genotyping이 용이한 marker 를 선택하였다. PCR은 총 \( 25 \mathrm{ul}(40 \mathrm{ng} \) 의 genomic DNA \(2 \mathrm{ul}\), \( 1.5 \) pmolol primer mix \( 1 \mathrm{ul} \), ABgene PCR reaction buffer \( 12.5 \mathrm{ul}, \mathrm{D} . \mathrm{W} 9.5 \mathrm{ul}) \) 의 량으로 조정하여 \( 95^{\circ} \mathrm{C} \) 에 서 5분간 가열하여 변성을 유도하고 \( 95^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 1 분 간 denaturation, \( 58^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30초 간의 annealing, 그리고 \( 72^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30 초간의 extension의 3 단계로 총 35회 반복한 후 \( 72^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30분간 extension을 실시하였다. PCR 증폭산물은 \( 2.5 \% \) agarose gel을 이용하여 확인하였다.</p><h2>Microsatellite marker의 DNA형 및 통계분석</h2><p>증폭된 DNA는 유전자형 자동분석기(ABI Prism 3100 Genetic Analyzer, USA)에 의해 전기영동하고 검출된 각 유전자좌위의 대립유전자는 GeneScan Ver.3.7과 Genotyper Ver.3.7을 이용하여 각 marker별 대립유전자의 크기 \( (\mathrm{bp}) \) 를 결정하였다.</p><p>또한 microsatellite DNA 다형 좌위의 대립유전자 출현빈도를 추정하고 이를 토대로 heterozygosity (Het), polymorphic information contents (PIC) 그라고 exclusion probability (PE)를 CERVUS Ver.2.0 program을 이용하여 산 출하였다.</p><h2>Microsatellite DNA형에 의한 친자확인</h2><p>8두의 고양이를 대상으로 10개의 microsatellite DNA다형 좌위에 대해서 친자판정을 실시하였다.</p>
고양이의 무엇을 위해 microsatellite marker는 국제동물유전학회 개(고양이 포함) 분과위원회에서 권고하는 marker 중에서 비교적 용이한 marker를 선택헸니요?
genotyping