<h1>재료 밎 방법</h1><h2>공시동물 및 시험사료</h2><p>갓 부화된 육계 수평아리(Ross 종) 40,000 수를 공시동물로 하여 부화 후 7일간 환경에 적응시킨 후 34일간 시험사료를 급여하여 사육하였다(경기도 연천 풀빛 농장). 실험사료는 salinomycin-6, clopidol-25, enramycin-1, BMD-2.5 등의 항생 제가 첨가된 사료(CON, 대조군)와 항생제를 첨가하지 않고 식물추출물 복합제를 첨가한 사료(NP, Natural Plant Extracts)를 제조하여 급여하였다. 사용한 식물 추출물은 인도의 Growell India사에서 시판되고 있는 것으로 항균활성이 높은 Coxynil\(^Ⓡ\)과 Respowell\(^Ⓡ\) 그리고 항산화활성이 높은 Growell\(^Ⓡ\)을 사용하였고, 각각 \( 0.03 \%\), \(0.035 \% \) 그리고 \( 0.03 \% \)의 비율로 사료 내에 혼합하였다. 실험사료의 배합비율은 Table 1에 나타내었다. 입추 후 처음 5일간 엔로플록사신과 대사촉진제는 CON군와 NP군에 모두 급여하였다.</p><h2>사양관리</h2><p>환경적응이 완료된 육계 40,000수를 각각 체중이 유사하도록 10,000수씩 4개의 동에 나누어 넣고 2개 동씩을 각각 대조군(CON)과 처리군(NP)으로 하여 사육하였다. 22일령 부터 전기사료를 중단하고 후기사료로 출하 시까지 급여하였다. 시험 기간 동안 사료와 물은 자유 섭취하도록 하였고, 주간 16시간과 야간 8시간으로 정상적인 점등관리를 실시하였다. CON군은 11일령에 독시싸이클린 클리닝을 하였으며, 25일령에는 암푸롤리움과 설파제로 콕시듐에 대한 클리닝을 실시하였다.</p><h2>증체량, 사료섭취량 및 사료요구율</h2><p>실험개시 후 4주 동안 2주 간격으로 각각의 사육동에서 100수를 선별하여 개체의 체중을 측정하였고, 증체량은 시험 종료 후 출하시의 체중에서 실험 개시 시의 체중을 감한 값을 구하여 나타내었다. 사료 섭취량은 체중 측정 시에 사료 급여량에서 잔량을 감한 값으로 하였고, 사료 섭취량과 실험 종료 시의 증체량을 근거로 사료요구율을 산출하였다.</p><h2>혈액채취 및 혈중 total cholesterol과 HDL-cholesterol의 분석</h2><p>실험 2주차와 사양실험 종료 후에 평균체중에 가까운 개체를 실험 사육동 별로 10수씩 선별하여 익하정맥에서 \( 5 \mathrm{ml} \) 정도를 채혈한 후, \( 3000 \mathrm{~rpm} \)으로 \( 20 \mathrm{~min} \)간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 혈청의 total cholesterol과 HDL-cholesterol은 (주)영동제약의 분석 키트을 이용하여 측정하였다.</p><h2>체액성 면역반응의 조사</h2><p>식물추출물의 첨가가 육계의 체액성 면역반응에 미치는 영향을 조사하기 위하여 백신접종 후에 생성되는 항체량을 분석하였다. 실험에 사용한 백신은 NDV백신과 IBDV백신으로 각각 2회에 걸쳐 음수백신을 실시하였다. 1 차 IBDV 음수백신은 입추 전 부화장에서 실시하였고 15일령에 2차 IBDV 음수백신을 실시하였다. 또 10일령에 1차 NDV음수백신을 실시하였고 21일령에 2차 NDV 음수백신을 실시하였다. 실험 2주차와 종료 시에 실험 사육동 별로 10수씩 선별하여 익하정맥에서 \(5 \mathrm{ml} \) 정도를 채혈한 후 항체 생산량을 조사하였고, NDV와 IBDV 항체가는 영국의 Guildford사의 antibody ELISA kit를 이용하여 분석을 하였다. 모든 kit는 제조회사의 지침서에 설명된 방법으로 실시하였다. 또한 혈청의 IgG는 면역비탁법(TIA; turbidimetric immuno assay)으로 분석하였으며, globulin은 비색법을 이용하여 분석하였다.</p><h2>조직 분석</h2><p>실험 종료 시에 CON군과 NP군에서 각각 4수씩 평균 체중에 가깝고 육안으로 건강해 보이는 개체를 선별하여 각 기관별 조직을 채취한 후 통상적인 처리과정을 거쳐 hematoxylin과 eosin에 염색한 후 상호 비교하였다.</p><h2>통계 처리</h2><p>시험에서 얻어진 자료의 통계 처리는 SAS 9.1 package의 GLM (general linear model) procedure를 이용하여 실시하였으며, Fisher's protected least significant difference (LSD)로 처리하여 평균 간의 유의성을 검정하였다.</p>
갓 부화된 육계 수평아리를 부화 후 며칠 간 환경에 적응시킨 후 사육했어?
7일