<h1>재료 및 방법</h1><h2>보리 어린 순 재배</h2><p>보리 어린 순 재배에는 큰알보리 \(1\)호(국내산, Yeong-Kwang,Republic of Korea)를 사용하였으며, 분석법 확보를 위한 보리 어린 순 시료는 경상대학교 교내 부설 농장의 비닐하우스에서 \(5\)월에 토경 재배하였으며, 2엽기에 초엽의 길이가 평균 약 \(20\) \( \mathrm{cm} \) 일 때 수확한 것을 \( 45^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 24시간 건조한 후 믹서로 분쇄하고 \( -20^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 보관하며 분석법 연구에 사용하였다. 또한, 인공광 효과시험에는 보리 종자 \( 50 \mathrm{~g} \) 을 흐르는 물에 24시간 동안 priming하고, 수도용 상토가 올려진 \( 350 \times 200 \mathrm{~mm} \) tray에 priming된 보리 종자를 뿌린 후 각각의 인공광 조건에서 재배하였다. 재배사의 실내 온도는 \( 20-23^{\circ} \mathrm{C} \) 항온 조건을 유지하였다.</p><h2>표준품 및 시약</h2><p>실험에 사용된 saponarin 분석용 표준품과 trifluoroacetic acid는 Sigma-Aldrich (St Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였고, 추출 및 분석에 사용한 용매인 acetonitrile (ACN), methanol (MeOH), ethanol (EtOH), water는 Burdick & Jackson \( ^{\mathrm{TM}} \)(Honeywell International Inc, Morris Plains, NJ, USA)의 high-performance liquid chromatography (HPLC) grade를 사용하였다.</p><h2>Saponarin 정량 분석</h2><p>건조 보리 어린 순 시료 \( 1.0 \mathrm{~g} \) 에 methanol 등 추출용매 \( 30 \mathrm{~mL} \)를 첨가하여 24 시간 동안 진탕 추출하고, \( 4,000 \mathrm{rpm} \) 으로 10 분간 원심분리 한 후 상등액을 methano로 검량선 범위로 희석한 후 \( 0.2 \mu \mathrm{m} \) PTFE syringe filter (Biofact Co., Ltd., Daejeon, Korea)로 여과하였다. 이 후 HPLC-DAD (Agilent Technologies 1200 series, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 \( 325 \mathrm{~nm} \) 에서 saponarin 함량을 측정하였다. 상세한 HPLC 분석조건은 Table 1 에 나타내었다. 정량을 위한 표준 검량선은 saponarin 표준품을 사용하여 \( 0.5-50 \mathrm{mg} \mathrm{L}^{-1} \) 농도로 제조하여 사용하였다.</p><h2>색소함량 측정</h2><p>Chlorophyll 둥 보리 어린 순에서 추출된 색소는 각 극성용매 농도별 추출에 의해 제조된 시료를 분광광도계(Genesys 20 spectrophotometer, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA)를 이용하여 \( 670 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하는 방법으로 수행하였다.</p><h2>Saponarin 최적 추출 조건</h2><p>보리 어린 순의 saponarin 최적 추출 조건을 설정하고자 중심 합성계획법을 이용하여 반응표면분석을 진행하였다. 용매는 분석에 많이 사용되는 methanol, ethanol, acetonitrile, water를 사용하였으며, 각 유기용매의 농도 \( (0-100 \%) \)와 추출시간 \( (1-24\))h을 다르게 하여 실험을 수행하고, 실험 범위를 설정하여 각각을 \(3\)단계 \( (-1,0,1) \) 로 부호화하여 Table \(2\)와 같이 중심합성계획의 조건을 설정하였다. 또한, 임의의 \(11\)구를 설정하여 Table \(2\)와 같이 추출 실험을 하였다.</p><h2>인공 광에 의한 보리 어린 순 재배</h2><p>광 처리에 따른 saponarin 함량 및 생육량 변화를 알아보기 위해 \( 20-23{ }^{\circ} \mathrm{C} \) 의 항온조건과 \( 60-70 \% \) 상대습도가 유지되는 완전 (LG Innotek, Seoul, Korea) 조건을 달리 설정하여 재배하였다. 항온시설 내에 설치된 재배사 \( (\mathrm{L} 2000 \times \mathrm{W} 800 \times \mathrm{H} 600 \mathrm{~mm}) \) 는 상단에 LED 광원을 설치하고 벽면은 광반사 단열 필름을 부착 하였다. 보리 어린 순의 saponarin 고함량 인공광 처리 최적 조 건을 설정하기 위해 하에 광주기, 광량, 광질을 달리하여 재배 실험을 진행하였다. 광 주기에 의한 보리 어린 순의 생장과 saponarin 함량의 변화는 24시간을 기준으로 광 조사시간을 연 속 \(8\)시간과 \(16\)시간으로 구분하여 수행하였다. 광량에 관한 시 구분하여 재배시험을 진행하였다. 광질은 조사 LED 의 광온도 를 \( 3000 \mathrm{~K} \) 와 \( 6500 \mathrm{~K} \) 로 구분하고, 각 광 온도에서 부족한 파장대 의 광을 보광하는 방법으로 ' \( 3000 \mathrm{~K}+ \) 청색광'과 ' \( 6500 \mathrm{~K}+ \) 적색광' 의 조건을 추가하여 수행하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>실험 데이터는 평균 및 표준편차 \( (\)mean \( \pm \) SD) 로 표현하였으며 3 반복 실험을 하였다. 반응표면분석 및 통계분석은 Minitab (Version 18, Minitab Inc., State college, PA, USA)을 이용하여 각 시료별 간의 통계적 유의성 검정은 One-way ANOVA test를 실시하였으며, 사후분석은 Tukey법으로 검정하였다 \( (p<0.05) \).</p>
인공광 효과시험을 위해서 보리 종자 \( 50 \mathrm{~g} \) 을 흐르는 물에 1시간 동안 priming해야 하는가?
NO