<p>경골어류의 식도상피는 다른 척추동물과 같이 중층편평상피로 덮여 있으나 상피층내에 점액세포들이 나타나는 점이 다르며 이들 점액세포들은 식도내강에 점액질을 분비하여 음식물이 운반될 때 거친 먹이 조각들로부터 식도의 내면을 보호한다. 특히 경골어류의 식도는 어종에 따라 다양한 점막 주름이 발달되어 있으며 크기가 다른 점액세포들이 출현한다.</p><p>경골어류 식도 점액세포 분비물의 조직화학적 성상은 어종에 따른 차이가 있을 뿐만 아니라 동종내 개체간에도 차이가 있다. 경골어류의 식도는 섭취한 음식물을 인두로부터 위까지 수송하기 위한 도관으로서의 기능이외에 형태적인 복잡성과 점액세포들에서 분비되는 점액질의 성상으로 보아 소화과정에서 어떤 기능을 담당하고 있는 것으로 추정된다.</p><p>Lectin은 당단백질로서 탄수화물의 특정한 당 잔기에 높은 친화성을 가지고 있어 복합당질의 탄수화물 분자의 성상을 조직화학적으로 규명하는데 유용한 도구로 사용된다.</p><p>어류의 점액질은 수용성 당단백질로 중성 pH에서 음전하를 띠게 하는데 관여하는 sialic acid 잔기를 함유하며 또한 mannose, glucose, glucosamine, galactose 및 galactosamine과 같은 당과 serine, threonine과 같은 아미노산을 함유한다. 이들 점액질의 polyanionic mucous layer는 삼투조절, 기계적 손상과 감염에 대한 보호 및 소화작용에 관여한다.</p><p>경골어류 식도 점액세포의 복합당질에 대한 prelectin 연구는 많이 되어 있으나 lectin에 대한 연구는 없었다. 본 연구에서는 경골어류 중 현재까지 연구된 바 없는 조피볼락, 용치놀래기, 송곳니베도라치 및 졸복 식도 점액세포의 복합당질을 lectin 조직화학으로 연구하였다.</p><h1>재료 및 방법</h1><h2>실험동물의 처치 및 고정</h2><p>본 실험에 사용한 경골어류는 횟대목(Scorpaeniformes) 양볼락과(Scorpaenidae)의 조피볼락 Sebastes schlegeli Hilgendorf, 농어목(Percida) 놀래기과(Labridae)의 용치놀래기 Halichoeres poecilopterus (Temminck et Schlegel), 장갱이과(Stichaeidae)의 송곳니베도라치 Bryzoichthys lysimus (Jordan et Snyder) 및 복어목(Tetraodontiformes) 참복과(Tetraodontidae)의 졸복 Takifugu pardalis (Temminck et Schlegel)을 사용하였다.</p><p>실험 동물을 희생시킨후 흉복강을 절개하여 식도의 중간부를 절취한 후 \( 10 \% \) 중성 포르말린용액에 24시간동안 고정한 다음 수세과정을 거친 후 각급 알콜에서 탈수과정, 투명화과정을 거쳐 paraplast (융점 \( 56 \sim 58^{\circ} \mathrm{C} \) )에 포매하여 \( 6 ~\mu \mathrm{M} \) 두께의 연속절편을 만들었다.</p><h2>조직학적 구조</h2><p>식도의 조직학적 구조를 관찰하기 위하여 hematoxylineosin(HE) 염색과 PAS 반응을 실시하였다.</p><h2>복합당질에 대한 lectin의 조직화학</h2><p>식도 점액세포의 복합당질의 당 잔기를 검색하기 위해 탈 파라핀한 조직을 \( 3 \% \) methanolic hydrogen peroxide에 실온에서 30분간 처리하고, PBS (phosphate buffer saline, \( 0.01 \mathrm{~M} \), pH 7.4)로 10분간 3회 세척한 후 비특이성 반응을 없애기 위하여 \( 1 \% \) bovine serum albumin 용액에 실온에서 30분간 두었다가 압지로 부드럽게 용액을 제거시킨 후 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \)에서 습도를 유지하면서 9가지의 biotinylated lectin (Vector Lab., Bur-lingame, C.A., USA) 중 DBA, PNA, BSL-1, sWGA 및 UEA-1은 Hepes buffer (\( 10 \mathrm{~mM} \) Hepes 용액, pH 7.5, \( 0.15 \mathrm{~M} \mathrm{~NaCl} \), \( 0.1 \mathrm{~mM} \mathrm{~Ca}{ }^{2+} \), \( 0.045 \% \) sodium azide)에, LCA와 Con A는 상기 Hepes buffer에 \( 0.01 \mathrm{~mM} \)의 \( \mathrm{Mn}^{2+} \)이 포함된 용액에, RCA-1은 phosphate 용액(\( 10 \mathrm{~mM} \) phosphate buffer, pH 7.5, \( 0.15 \mathrm{~M} \mathrm{~NaCl} \), \( 0.085 \% \) sodium azide)에 Table 1과 같은 농도로 희석하여 24시간 동안 반응시켰다.</p><p>PBS로 세척한 후 ABC kit (avidin-biotin-peroxidase complex, Vector Lab.) 시약에 실온에서 60분간 반응시켰다. 다시 PBS로 세척한 후 TB (Tris buffer, \( 0.05 \mathrm{M} \), pH 7.6에 \( 0.02 \% \) 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (Sigma)와 \( 0.01 \% \) \( \mathrm{H_{2}O_{2}} \)를 혼합한 용액에 실온에서 약 10분간 발색시켰다. TB에 10분간 세척하고 다시 PBS에 10분간 세척한 후 증류수로 세척하여 Mayer's hematoxylin으로 대조 염색한 후 poly-mount (polyscience, USA)로 봉입하였다.</p><p>Lectin의 반응정도는 음성은 0, 흔적적인 반응은 \( \pm \), 약한 반응은 +, 중등도의 반응은 ++, 강한 반응은 +++, 매우 강한 반응은 ++++ 등으로 표시하였다.</p>
어종에 따라 다양한 점막 주름이 발달되어 있는 이것은 무엇인가?
경골어류의 식도