<h1>재료 및 방법</h1><h2>농약 및 시약</h2><p>시험에 사용된 triazole계 살균제 \( 6 \)종 fluqinconazole, hexaconazole, metconazole, myclobutanil, tebuconazole 및 tetraconazole 표준품의 순도는 \( 98.7-99.0\% \)로 Dr. Ehrenstorfer GmbH (Augsbug, Germeny)사의 것을 구매하여 사용하였다. 포장시험 중 들깻잎에 살포한 농약 제품은 파리사드(Fluquinconazole \( 10 \% \) SC, Bayer Crop Science, Seoul, Korea), 한빛(Hexaconazole \( 5\% \), SC, 경농, Seoul, Korea), 살림꾼(Metconazole \( 20 \% \) SC, 동방아그로, Seoul, Korea), 시스텐(Myclobutanil \( 6\% \) WP, 경농, Seoul, Korea), 호리쿠어(Tebuconazole \( 25\% \) EC, 팜한농, Seoul, Korea), 및 에머넌트(Tetraconazole \( 12.5 \% \) EW, Bayer Crop Science, Seoul, Korea)이었다. 농약 잔류분석에 사용된 용매 acetone, acetonitrile, dichloromethane, n-hexane 및 water는 Burdick & Jackson(Muskegon, MI, USA)사의 제품이었다. 시료의 정제에 사용된 흡착제 florisil은 Sigma-Aldrich Chemical Co. (MI, USA)사의 \( 60-100 \)mesh 제품을 \( 120^{\circ} \mathrm{C} \)의 건조기에서 \( 8 \)시간 이상 활성화 시킨 후 시용하였다.</p><h2>시험 포장 및 약제 살포</h2><p>들깻잎의 시험 포장은 경상남조 밀양시 상남면에 위치한 비닐 하우스 재배 포장을 임대하여 실험 하였으며, 품종은 남천이었다. 구획 및 배치는 \( 1.4 \mathrm{~m} \times 7.2 \mathrm{~m} \) 크기로 구획하여 \( 1 \mathrm{~m} \)의 완충구를 두고 \( 3 \)반복으로 배치하였으며 재식 밀도는 \( 7 \mathrm{~cm} \times 13 \mathrm{~cm} \) 로 파종하여 재배하였다. 시험기간은 \( 2015 \)년 \( 4\)월부터 \( 2018 \)년 \( 4 \)월까지 \( 4 \)년에 걸처 수행하였으며, hexaconazole, metconazole, myclobutanil 및 fluquinconazole (\( 2016 \)년), tetraconazole (\( 2017 \)년), tebuconazole (\( 2018 \)년)을 경엽살포 하였다. 약제살포는 fluqinconazole \( 1,000 \)배, hexaconazole \( 5,000 \)배, metconazole \( 3,000 \)배, myclobutanil \( 1,500 \)배, tebuconazole \( 2,000 \)배 및 tetraconazole \( 1,000 \)배로 각각 희석하여 \( 200 \mathrm{~L} / 10 \mathrm{a} \) 의 살포량으로 배부식 분무기를 사용허여 살포하였다. 살포 시기 및 횟수는 \( 7 \)일 간격으로 \( 3 \)회 처리하였으며, 수확 시기는 최종 약제 산포 \( 2 \)시간 후 수확한 \( 0 \)일차 시료를 포함하여, \( 1,3,5 \) 및 \(7\)일차로 연속 수확하였다.</p><h2>들깻잎 중 잔류농약분석법</h2><p>들깻잎 중 \( 6 \)종 농약의 잔류농약분석 방법은 식품공전 잔류농약 분석법을 참조 및 변형하여 적용 하였다. 들깻잎 시료 \( 10 \mathrm{~g} \)에 \( 80 \mathrm{~mL} \) acetone 및 acetonitrile을 첨가하여 homogenizer에서 \( 3 \)분간 \( 12,000 \mathrm{rpm} \) 으로 고속마쇄 추출하였으며, 추출액은 Celite \(545\)로 흡인여과한 후 dichloromethane으로 \( 2 \)회 액액분배하였다. 액액분배된 추출액은 감압농축한 후 hexane으로 재용해하여 정제과정에 사용하였다.</p><p>\(6\)종의 농약 중 \( 5 \)종(tebuconazole, fluquinconazole, metconazole, hexaconazole 및 myclobutanil)의 정제과정은 glass column (\( 16 \mathrm{mm} \), I.D.)에 활성화 시킨 \( 10 \mathrm{~g} \) 의 florisil과 sodium sulfate anhydrous \( (1 \mathrm{~cm} \) 높이)를 hexane으로 습식 충전한 것을 사용하였다. Tebuconazole, fluquinconazole 및 metconazole의 경우 \( 100 \mathrm{~mL} \) hexane/acetone \( (90 / 10, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 으로 \( 1 \)차 용출시켜 그 용출액을 흘려버린 후, \( 70 \mathrm{~mL} \) hexane/acetone \( (80 / 20, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)으로 \( 2 \)차 용출시켜 그 용출액을 분취하여 감압농축하였으며, hexaconazole 시료의 정제는 \( 90 \mathrm{~mL} \) hexane/ethyl acetate \( (70 / 30, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 으로 \( 1 \)차 용출시켜 그 용출액을 흘려버린 후, \( 80 \mathrm{~mL} \) hexane/ethyl acetate \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 으로 \( 2 \)차 용출시켜 그 용출액을 분취하여 농축하였다. Myclobutanil 시료의 정제는 \( 70 \mathrm{~mL} \) hexane/acetone \( (90 / 10, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 으로 \( 1 \)차 용출시켜 그 용출액을 흘려버린 후, \( 70 \mathrm{mL} \) hexane/acetone \( (70 / 30, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)으로 \( 2 \)차 용출시켜 그 용출액을 분취하여 농축하였다. 상기의 \( 5 \)종 농약 중 fluquinconazole, metconazole 및 tebuconazole은 농축 직후 잔사를 acetonitrile \( 2 \) 및 \( 4 \mathrm{~mL} \) 에 재용해한 뒤 \( 20.0 \mu \mathrm{L} \) 씩 HPLC-UVD에 주입하여 Table \( 2 \)와 같은 조건으로 분석하였다. 해당 분석 조건으로 나타난 chromatogram상의 peak area를 표준검량선과 비교하여 잔류량을 산출하였다.</p><h2>생물학적 반감기 산출 및 통계처리</h2><p>들깻잎 중 농약 \( 6 \)종의 생물학적 반감기 \( (T) \) 는 first-order kinetics model을 적용하여 아래의 식에 따라 산출하였다.</p><p>\( C_{t}=C_{0} e^{-k t} \)</p><p>\( \frac{1}{2} C_{0}=C_{0} e^{-k t} \)</p><p>\( T=\frac{\ln (2)}{k} \)</p><p>위 식에서 \( C_{0} \)는 농약의 초기 잔류량 \( (\mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \), \( t \)는 경과일자, \( k \)는 감소상수를 나타내며 \( C_{i} \) 는 \( t \)시간 경과 후 농약의 잔류량 \( (\mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \)을 나타낸다.</p><p>상기의 식으로 산출된 들깻잎 중 농약의 생물학적 반감기와 각 농약의 물리화학적 특성과의 관계를 확인하고자 통계분석을 하였다. 통계분석은 SPSS \( 18.0 \) ver (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) 통계프로그램을 이용하여, 주성분 분석 및 이변량 상관계수로 통계처리 하였다. 총 \( 8 \)개의 변수를 설정하여 평가하였으며, 그 중 종속변수는 초기잔류량(initial concentration, IC) 및 농약의 생물학적 반감기(half of residue level, \( \mathrm{RL}_{50} \) ), 독립변수는 \( 5 \)항목의 물리화학적 특성 및 농약 살포액의 약량(active ingredient, Al으로 총 \( 7 \)개의 변수를 설정하였다. \( 5 \)항목의 물리 화학적 특성은 분자량(molecular weight, MW), Log P, 물에 대한 용해도(solubility in water, \( \mathrm{S}_{\mathrm{W}} \) ), 증기압(vapor pressure, \( \mathrm{Pv} \) ), 및 산해리상수 지수(dissociation constant, \( \mathrm{pKa} \) )로 설정하였으며, 그 값은 University of Hertfordshire의 pesticide properties database (PPDB)의 자료를 인용하여 Table \( 1 \)과 같이 확인 되었다.</p>
\( T=\frac{\ln (2)}{k} \)를 산출하는데 어떤 모델이 적용되었나요?
first-order kinetics model