<h1>결과 및 고찰</h1><h2>적정배지 선정</h2><p>배지 시험결과 잎의 상태, 생장, 발근을 고려해 볼 때 MS와 DKW 배지에서 기내생장이 비교적 양호하게 나타났으며, 최종적으로 MS 배지를 덩굴용담의 기내배양 적정배지로 선정하였다. 생장과정에서 관찰되는 특징으로는 어느 배지에서나 발근이 이루어지고 뿌리의 형태는 세근이 없는 직근 형태로만 자라는 것이다. 한편, 어느 배지에서나 잎의 황화 현상이 나타났는데 이러한 현상은 잎의 선단부터 생기며 특히 SH 배지에서는 얼룩덜룩한 모자이크 상태로 황화가 관찰되었다. 줄기의 생장과 발근에 있어서도 배지에 따른 특징이 나타났다. MS 배지에서는 다른 배지보다 절간생장이 좋고 연녹색의 비교적 작은 잎으로 생장하였고, 특히 발근이 잘되는 것으로 나타났다. DKW 배지에서는 연녹색의 큰 잎이 달리고 줄기가 굵게 생장하였다. WPM 배지에서는 줄기의 생장이 MS 배지와 비슷하나 잎이 비교적 작고 줄기의 생장이 다소 저조하게 나타났다. GD 배지에서는 잎의 황화가 심하게 나타나고 생장이 대체로 저조하여 덩굴용담의 기내 생장이 가장 저조한 것으로 관찰되었다. SH 배지에서는 줄기의 상태는 GD 배지보다 양호하나 잎의 황화가 많이 나타나 정상적인 줄기 생장이 어려운 것으로 나타났다. 황화가 나타나는 빈도는 GD>SH>WPM >1/2MS>DKW>MS 배지의 순으로 나타났다. 따라서 줄기, 잎 그리고 발근의 상태를 고려하여 MS 배지를 덩굴용담 기내배양에 적합한 배지로 선정할 수 있었다. MS 배지는 기내배양시 가장 일반적으로 사용하는 배지 인데 식물종이나 배양목적에 따라 다양한 형태의 배지 혹은 수정된 배지가 사용될 수 있다 (George 2003). 한편 목본류의 액아배양에서는 WPM 배지가 일반적으로 쓰이고 있고 (George 2003), DKW 배지는 호두나무의 배양을 목적으로 개발된 배지(Driver and Kuniyuki 1984)로 활엽수종의 기내배양에서 다양하게 사용되고 있다.</p><h2>증식에 미치는 생장조절제 효과</h2><p>배지의 시험결과 덩굴용담의 기내배양은 MS \(+3 \% \) sucrose, \(0.3 \% \) gelrite 배지를 기본배지로 선정할 수 있었다. 따라서 이하의 실험에서는 MS 배지를 기본으로 BA, Kinetin 및 TDZ의 처리효과를 비교하고, 줄기의 생장촉진을 위해 \( \mathrm{GA}_{3} \) 의 농도별 효과를 시험하였다.</p><p>줄기증식에 미치는 BA의 효과는 Table 2와 같다. 생장조절제 무처리인 대조구에서는 대부분 정아우세 현상이 강하게 나타나 우세줄기가 1개로 자랐고, 기부에서는 1-2 개 액아가 줄기로 유도되어 자랐다. BA 농도 증가에 따라 다경유도 효과가 다소 있으나 유의성은 없었다. 줄기생장은 BA의 농도에 따른 확연한 차이는 없었고, 발근율은 처리농도에 따라 감소되는 경향을 보였다. 뿌리는 기본배지에서 왕성하게 유도되고, BA 처리시 2개 정도 뿌리가 유도되었다. 잎은 연녹색을 띠며 발근시 기부에 캘러스가 형성되지 않았다. BA 처리 하에서도 자발적인 발근이 이루어지는 것을 볼 때 덩굴용담은 내생 오옥신의 함량이 높은 수종으로 추정되었다.</p><p>Kinetin의 처리는 BA 보다 증식효과가 적은 것으로 나타났다. 증식효과는 고농도인 \(3.0-5.0 \mathrm{mg} / \mathrm{L}\) 수준에서 관찰되었다. 절편에 따라 생장이나 다경유도에 다른 차이가 관찰되었는데 줄기의 유도와 생장은 정아가 있는 절편에서 다소 양호하게 나타나고, 반면 발근은 전반적으로 액아유래의 줄기에서 다소 양호하게 나타났다. 줄기의 생장 및 발근은 기본배지에서 가장 좋아서 kinetin 처리가 오히려 줄기생장 및 발근을 억제하는 것으로 나타났다. 절편에 따라서는 액아에서 줄기가 전혀 안나오는 것도 있으며, 일부의 절편은 잎이 황화되고 위조가 나타났으나 전반적으로 줄기의 생장은 가능하였다. 발근은 줄기의 기부에서 직접내리는 뿌리형태이고 곧게 자라며 세근은 형성되지 않았다.</p><p>TDZ은 처리 농도가 증가함에 따라 신초의 수가 증가되는 경향이지만 절편에 따라 차이가 크게 나타났다. 절편의 기부는 캘러스의 형성 없이 약간 부풀어 오르는 형태를 보였고, 발근은 TDZ에 의해 억제되었다. 그러나 절편에 따라서 일부 발근이 이루어지는 것이 관찰되었고, 발생 된 뿌리는 BA 처리구와 마찬가지로 직근 형태였으며 세근 발달은 없었다. 처리농도가 다르기 때문에 BA 혹은 kinetin과의 직접적인 비교는 어려우나 전반적으로 TDZ의 처리는 덩굴용담의 줄기증식에 효과적이지 못한 것으로 나타났다. 한편 큰용담의 절편에 따른 기내증식 시험 (Cho et al. 1992)에서는 MS 배지에 BA와 NAA의 공조처리로 절간마디로부터 가장 좋은 생장걸과를 얻었는데, 본 실험에서는 싸이토키닌의 단독처리로 농도별 증식효과를 조사하였기 때문에 두 가지 생장조절제의 공조처리효과는 차후 검토가 필요하다.</p><h2>줄기신장</h2><p>다경으로 유도된 줄기를 신장시키기 위해 GA3의 처리효과를 시험하였다. GA3의 농도에 따라 줄기의 증식에는 큰 차이가 없었으나, 고농도 \( (7.0 \) 및 \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{L}) \)에서는 증식효과도 있고 줄기의 신장도 이루어져 절간 마디를 이용할 경우 단마디 배양을 통해 연속적인 증식이 가능한 것으로 나타났다. 줄기는 다소 가늘고 연녹색의 잎으로 자랐다. 발근율은 처리농도에 따라 차이가 있으나 농도별 경향은 없고, 뿌리 수에 있어서도 차이를 보이지 않았다. 발근은 절단부에 캘러스 형성 없이 바로 직근이 발생하였다.</p><h2>발근유도</h2><p>이상의 줄기증식 시험에서 관찰된 것처럼 덩굴용담의 발근은 생장조절제 무첨가배지에서 혹은 저농도의 싸이토키닌 처리 하에서 가능한 것으로 나타났다. 이와 같이 덩굴용담의 발근이 매우 용이한 것으로 밝혀져 본 시험에서는 배양과정의 단순화를 꾀하기위해 기내발근 과정을 생략하고 증식된 줄기를 기외삽목하여 기외발근을 유도하였다. 기외삽목은 줄기길이 \( 3 \sim 5 \mathrm{cm} \)으로 생장된 기내줄기를 택하여 줄기의 기부에 \( 100 \mathrm{ppm} \) IBA를 탈크(Talc)에 섞어 반죽한 다음 기부에 처리하였다. 기외삽목 4주 후 총 140개체 중 126개체에서 발근이 확인되어 \( 90 \% \) 의 발근율을 보였다. 기외삽목은 기내에서 발근이 어렵거나 (Liesebach and Naujoks 2004; Sanjaya et al. 2006), 혹은 발근이 매우 용이한 경우 발근과 순화 과정을 동시에 함으로서 배양기간 단축을 할 수 있는 유용한 방법이다. 덩굴용담은 후자에 속하는데 본 시험에서 순화과정과 동시에 기외발근을 유도함으로서 배양기간과 단계를 단축 할 수 있었다. 순화 된 덩굴용담은 온실의 상토에 이식하여 1 년 후 개화하고 정상적으로 열매를 맺는 것을 관찰하였다.</p>
본 논문의 배지 실험결과에서 기내생장이 양호한 배지는 어디야?
MS와 DKW 배지