<h1>고 찰</h1><p>본 연구에서는 넙치의 미이용 폐기물을 이용하여 유방암 세포주에 대한 세포독성 효과와 in vitro SV40 DNA 복제계를 이용하여 DNA 복제 억제 활성 유무를 시험하였다. 넙치 미이용 폐기물의 가수분해 산물 중 RM60, RM60(fr. 164-178), RM60(fr. 179-202)의 DNA 복제계에 대한 영향은 in vitro SV40 DNA 복제계를 이용하여 조사하였다. 바이러스에 의해 기호화된 T-Ag 이외의 SV40 DNA 복제는 전적으로 숙주세포의 효소계에 의존한다. 본 연구에서는 RM60, RM60 (fr. 164-178)은 in vitro SV40 DNA 복제를 강하게 억제하였고 특히 DNA 복제의 개시 단계를 현저히 억제하였다.</p><p>SV40 DNA 복제에서 SV40 T-Ag, RPA, pol \( \alpha \)-primase 복합체는 DNA 복제 개시에 있어서 필수적이다. Topoisomerase 존재 하에서 T-Ag은 DNA 가닥을 풀어서 풀린 DNA를 형성한다. 이 세가지 요소와 topoisomerase에 의한 DNA 합성은 광범위하게 일어날 수 있다. 본 연구에서는 RM60 분획이 DNA 복제의 개시 동안 복제가지를 형성하는 데 필수적인 몇몇 단백질을 억제하리라는 가정을 할 수 있었다. 이러한 가정을 시험하기 위해 RM60의 분획물들의 topoisomerase I 과 DNA pol \( \alpha \)-primase 복합체에 대한 영향을 조사하였다. Topoisomerase inhibitor는 현재 중요한 항암제로 사용되고 있는데 camptothecin 및 그 유도체가 topoisomerase I 을 목적으로 한 항암제로 알려져 있다. RM60, RM60(fr. 178-202)에서 topoisomerase I 에 의한 DNA 절단이 억제되었으며 RM 60(fr. 164-178)에서는 거의 관찰되지 않았다. DNA pol \( \alpha \)-primase activity 연구에서는 RM60, RM60(fr. 164-178), RM60(fr. 179-202)는 저농도에서는 DNA pol a-primase activity를 증가시켰으나 고농도에서는 활성을 억제하였다. RM60 시리즈 물질이 첨가되지 않은 ' 0 '에서 dTMP 혼입이 약 \( 14 \mathrm{pmol} \)이었다. 그러나 \( 20 \mu \mathrm{g} \) 정도 낮은 농도로 첨가하였을 경우 dTMP 혼입을 증가시켰다. 즉 이러한 결과는 pol \( \alpha \)-primase의 활성을 증가시켰다는 것을 의미한다. 그러나 \( 60_{\mu} \mathrm{g} \) 의 농도에서는 억제되는 경향으로 보아 bi-phase 양상을 보이는 것으로 사료된다. 본 실험은 2회에 걸쳐 반복하였으나 동일한 결과를 보였기 때문에 이에 대한 자세한 연구가 필요하다고 사료된다. 앞의 결과에서 볼 수 있듯이 RM60 및 RM60 (fr. 164-178)은 ATP와 DNA 존재 하에서 preincubation 전에 반응물에 첨가하였을 경우, preincubation 이후에 첨가되었을 때보다 훨씬 강력하게 엊제한다는 것을 알 수 있다. RM60 (fr. 179-202)는 topoisomerase I 의 활성을 RM60 (fr. 164-178)에 비해 더욱 강력히 억제한다는 것을 알 수 있었으며 또한 DNA pol \( \alpha \)-primase 활성 억제 시험에서도 RM60 및 RM60 (fr. 164-178)에 비해 억제 작용이 늪게 나타났다. 그러나 RM60 (fr. 179-202)는 SV40 DNA 복제계에서 RM60 (fr. 164-178)에 비해 DNA 복제 억제 작용이 낮게 나타났으며 이는 이들 RM 시리즈들이 특정한 한 효소를 억제한다기보다 DNA 복제가지에 필수적인 효소 중 몇 가지 분자를 억제한다는 것울 의미한다. 그러므로, RM 시리즈들은 DNA-단백질 복합체를 우선적으로 억제하는 것으로 생각된다.</p>
본 논문에서는 DNA 복제 억제 활성에 대한 유무만을 알아보기 위한 시험인가?
NO