<h1>3. 결과 및 고찰</h1><h2>3.1 스텝 모터 펌프의 RPM에 따른 유량</h2><p>제작한 스텝 모터 펌프의 \(\mathrm{RPM}\)을 변화하면서 유량 변화를 측정하였다. 기존 세포 배양액의 수동 교체는 2일주기로 \( 4 \mathrm{ml} \) 의 양이 교체되기 때문에 목표한 유량은 \( 0.0833 \mathrm{ml} / \mathrm{hour}\)로 설정하였다. \(\mathrm{RPM}\)은 1에서 시작하여 0.5,0.25,0.125 순으로 줄이면서 미세 유량 변화를 측정하였다. Fig. 4는 스텝 모터 펌프의 \(\mathrm{RPM}\)에 따른 유량 변화를 나타낸다. \(\mathrm{RPM}\)이 감소할수록 유량은 선형으로 감소하며 \( 0.152 \mathrm{RPM}\)에서 \( 0.0849 \mathrm{ml} / \mathrm{hour} \)의 근사값을 측정하였다. 스텝 모터를 통해 세포 배양액을 지속적으로 공급 및 교체하였고 수동 배양액 교체 심근세포와 심장 박동수 변화를 비교하였다.</p><h2>3.2 배양액 상태에 따른 심근세포의 성숙</h2><p>세포배양액의 상태에 따른 심근세포의 sarcomere 길이는 형광염색을 통해 측정되었다. Well plate에 배양된 심근세포의 sarcomere 길이는 \( 1.8 \pm 0.02 \mu \mathrm{m} \) 로 측정되었다. 2일주기로 수동으로 배양액을 교체한 심근세포는 \( 1.83 \pm 0.015 \mu \mathrm{m} \), 배양액을 자동으로 교체한 심근세포는 \( 1.84 \pm 0.01 \mu \mathrm{m} \) 의 sarcomere 길이를 측정되었다. 수동 배양액 교체 세포의 배양액은 세포 활동에 의해 \( \mathrm{CO}_{2} \) 농도가 변화하고 자동 배양액 교체 세포는 \( \mathrm{pH} \) 가 유지되기 때문에 대조군에 비해 더 긴 sarcomere 길이를 측정되었다.</p><h2>3.3 수축특성 변화</h2><p>심근세포의 심장 박동수를 측정하기 위해 well plate에 세포 배양 후 5 ~ 10일까지의 심장박동을 도립현미경을 사용하여 2분간 녹화하였고 ImageJ 프로그램을 이용하여 심장 박동수를 측정하였다. 수동 배양액 교체 심근세포는 배양액 교체전후 두 번 측정하였고 자동으로 배양액이 교체되는 심근세포는 교체 중 한 번을 측정하였다. Fig. 5는 배양액 상태에 따른 심근세포의 심장 박동수를 나타낸다. 수동 배양액 세포는 배양액 교체 직후 심장 박동수가 감소하였고 불규칙적인 심장 박동수를 보였다. 반면 자동으로 세포 배양액이 교체되는 심근세포는 대조군에 비해 조금 느리지만 일정한 심장 박동수를 측정하였다. 자동 배양액 교체 세포는 배양액의 \( \mathrm{pH} \) 및 온도에 의한 심근세포의 shock이 대조군에 비해 적게 측정되었다.</p><p>Table 2는 제작된 스텝모터 펌프를 사용하여 배양액을 지속적으로 공급 및 교체한 심근세포의 배양 후 7 ~ 10차 현미경 이미지를 나타낸다. 심근세포는 배양 후 7일차 세포 면적이 \( 29.43 \% \), 8일차 \( 46.49 \%\), 9일차 \( 50.49 \%\), 10일차 \( 64.63 \% \)까지 증가하였다. 심근세포는 날짜가 지남에 따라 성장하였고 인접 세포와의 상호연결이 증가하였으며 10일차에서는 완벽히 동기화 되어 같은 주기로 수축 이완하는 것을 측정하였다.</p>
기존 세포 배양액의 수동 교체 주기는 얼마인가요?
2일