<h1>결과 및 고찰</h1><p>시퀀스데이터의 표준화를 위해 각 샘플에서 \(10,000\) read를 임의적으로 sub-sampling하여 Rarefaction 그래프와 coverage plot (Coverage \(<99 \% \) )을 통해 본 연구 결과에서 사용한 모든 샘플에 대한 시퀀스데이터는 각 샘플의 장내미생물생태를 설명할 수 있음을 확인하였다. 장내미생물의 종 다양성(Richness)을 나타내는 Chao와 종 균등성(Evenness)을 나타내는 Shannon 지표를 통하여 확인한 결과, 일반사료를 섭취한 그릅(CTL)의 절식 전후의 Chao 및 Shannon 지표의 유의적인 변화가 없었으나, 고지방사료를 섭취한 그룹HF 은 절식 이후 Chao 및 Shannon 지표가 유의적으로 감소하는 것을 확인할 수 있었다 \( (p<0.05) \). 그러나 두 그릅간 미생물생태 차이를 보여주는 NMDS 결과에서는 유의적인 차이가 없었으며, 고지방사료를 섭취한 그릅에서 절식 후 유의적으로 감소한 종 다양성과 균등성이 정상범위 내의 변화로서 장내미생물생태에서는 큰 영향을 끼치지 않음을 알 수 있었다. 또한 각 샘플에 대한 장내미생물 생태간 거리 차이의 비교를 통해 나타낸 Tree 분석에서는 일반 사료를 섭취한 그룹은 절식 전후 장내미생물생태간 차이를 보이지 않았으나, 고지방사료를 섭취한 그룹 중 마우스 HF\(2\_) 및 HF \(4\) 가 절식으로 인해 장내미생물생태의 변화가 발생하였음을 확인하였다. 일반사료 및 고지방사료를 섭취한 마우스의 분변에서 나타난 장내미생물들의 relative abundance를 OTU 및 Taxonomy 수준(Phylum, Family, Genus)으로 분석을 진행하였다. 일반사료를 섭취한 그릅의 절식 전후의 장내미생물의 경우 각 Phylum, Family, Genus 수준에서의 relative abundance 분석결과, Phylum 수준에서는 Bacteroidetes와 Firmicutes가 전체 \( 90 \% \) 이상을 차지하는 것을 확인하여 이 두 종의 Phylum이 주를 이룸을 확인하였으며, Family 수준에서는 S\(23-7\), Ruminococcaceae, Clostridiales_unclassified, Bacteroidacea가 주를 이룸을 확인하였다. 또한 일반사료를 섭취한 그룹의 절식 전후 abundance의 차이를 확인하기 위한 LEfSe 분석결과에서는 Phylum 수준에서 유의적인 차이는 나타나지 않았지만, Family 및 Genus 수준에서는 Bacteroidaceae (Bacteroides) 가 절식 후 유의적으로 증가하였다 \( (p<0.05) \). 고지방사료를 섭취한 마우스의 절식 전후 장내미생물 또한 일반 사료 섭취군과 마찬가지로 Bacteroidetes와 Firmicutes가 전체 \( 90 \% \) 이상 차지하였고, 절식 전과 후의 Phylum 수준에서 abundance의 유의적인 차이는 나타나지 않았다. Family 수준에서의 abundance분석은 Bacteroidaceae와 S\(24-7\)가 전체 abundance의 \(30-60\%\)를 차지했으며, LEfSe 결과에서 해당 미생물에 대한 절식 전과 후의 장내미생물생태 변화간 유의적인 차이가 없었다. 그러나 minor하게 존재했던 Lachnospiraceae (unclassified, coprococcus)가 고지방사료의 절식 후 유의적으로 감소하는 것으로 확인되었고, Ruminococcaceae unclassified는 절식 후 증가하는 것으로 확인되었다. STAMP software를 이용한 OTU수준에서의 Differential abundance 비교분석 결과, 일반사료를 섭취한 마우스의 경우 유의적으로 \(2\)OTUs가 증가하는 것을 확인하였는데, 그 중 S\(24-7\)_unclassified 로 분류되는 Otu\(063\)는 가장 많이 증가하는 것으로 확인되었다. 또한, \(4\) OTUs가 유의적으로 감소하는 것으로 확인하였는데 Ruminococcaceae_unclassified로 분류되는 Otu\(064\)가 가장 많이 감소하는 것으로 확인되었다. 고지방사료를 섭취한 마우스의 경우, 절식 후 일반사료에 비해 많은 수의 OTUs가 유의적인 차이를 보였으며, \(3\) OTUs가 증가하고 \(10\) OTUs가 감소하는 것을 확인했다. 그 중 Clostridiales_unclassified, Oscillospira로 분류되는 Otu\(051\), Otu\(069\)는 절식 후 가장 많이 감소하였는데, Oscillospira는 비만환자의 장내보다 건강한 사람의 장내에서 많이 관찰되는 미생물로 알려져 있다. 반면에 Ruminococcaeae_unclassified로 분류되는 Otu\(081\)가 가장 많이 증가함을 확인하였다. 일반사료 및 고지방사료를 섭취한 그룹의 절식 전후에 Bacteroides가 Genus 수준에서 많이 나타났지만, 일반사료를 섭취한 그룹의 경우에만 절식 후 Bacteroides가 유의적으로 증가했다 \( (p<0.05) \). 그러나 고지방사료를 섭취한 그릅의 절식 전후에서는 Bacteroides가 증가하는 양상이 보였지만 유의적인 차이는 없었다 \( (p>0.05) \). 일반사료를 섭취한 그룹에서 절식 후 증가한 Bacteroides 는 세포가 지방을 과다흡수 하는 것을 억제하는 역할을 함으로써 체내 지방량 조절 및 비만 억제/예방 효과를 갖는 것으로 알려져 있는 short-chain fatty acids중 하나인 propionate를 succinate pathway를 통해 생성한다고 보고되어 있으며, 또한 고지방 사료를 섭취한 그릅에서 절식 후 감소한 Ruminococcus는 장 건강 유지에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 butyrate를 생산하는 미생물로 알려져 있다. 본 연구를 통해 일반사료 및 고지방사료를 절식 후 유의적으로 감소한 OTUs모두 Firmicutes 에 속한 OTU로 확인하였으며, 일반사료를 절식한 마우스보다 고지방사료를 섭취한 마우스에서 절식에 의해 장내미생물생태의 변화가 많이 일어났음을 확인할 수 있었다.</p>
일반 사료 섭취 그룹이 절식을 했을 때 장내미생물 생태가 차이가 발생해?
NO