<h1>재료 및 방법</h1><h2>식물 재료</h2><p>실험 재료는 한국농촌진흥청 작물과학연구원 고령지 농업연구선터내 하우스에서 재배되고 있는 할미 꽃을 이용하였다. 엽조직과 엽병을 채취하여 흐르는 물에서 2 ~ 4 시간 수세 한 다음 \( 1 \% \) sodium hypochlorite 용액 에서 \( 20 \mathrm{~min} \) 표면 살균 하였다. 표면 살균 후 멸균수로 4~ 5회 세척 하였으며 세척 후 식물 재료를 멸균된 여과지에 올려 표면의 물기를 깨끗이 제거하였다. 살균 된 엽조직과 엽병은 \( 0.5 \mathrm{~cm} \times 0.5 \mathrm{~cm} \) 크기로 잘라 MS에 \( 0.8 \% \) agar, \( 3 \% \) sucrose 배지를 기본으로 한 부정아 유도 배지에 치상하였다. 배양 조건은30 40 \( \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}^{-2} \mathrm{~s}^{-1} 16 \mathrm{~h} \) 일장과 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 온도 조건하 에서 부정아 발생을 유도시켰다. 배양 6 주 후 식물체의 부정아 형성 비율을 조사하였으며 획득된 shooting은 발근 배지에 옮겨 발근을 유도시켰다.</p><h2>식물체의 부정아 유도</h2><p>식물 절편체로 부터 고 빈도의 부정아 발생을 유도시키기 위하여 본 실험에서는 MS 기본 배지에 \( 0.5 \sim 3 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) BAP, zeatin, kinetin과 \( 0.05 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) IAA 를 각각 조합하여 첨가하였다. 실험은 세 번 반복으로 수행 되었으며 매 반복 실험에 사용된 절편체 수는 처리 당 60 개이며 절편체는 모두 세 개의 petridish에 나누어 치상 하였다.</p><h2>식물체의 기내 증식</h2><p>식물체의 기내 유지를 위하여 부정아는 여러 개 작은 덩어리로 잘라 \( 0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) 의 BAP와 \( 0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) NAA 가 첨가 된 배지에서 치상하고 2~3주 간격으로 계대 배양을 하였다.</p><h2>재 분화 식물체의 기내 발근</h2><p>할미 꽃의 기내 발근을 위하여 MS배지에 IAA, IBA, NAA등을 고농도, 저농도 별로 처리하 였으며, MS 배지의 성분을 1/2, 1/4, 1/8로 줄인 배지에 NAA, IAA와 IBA를 각각 같은 농도로 첨가하여 발근 유도시켰다.</p>
MS 배지에 할미 꽃의 기내 발근을 위해 처리할때 어떤 차이점을 뒀니?
고농도, 저농도 별로 처리