<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 재료</h2><p>본 실험에 사용된 배풍등(Solanum lyratum, SL)은 경남 언양의 가지산에서 채집하였고 확증표본은 부산대학교 약학대학 생약표본실에 보관하였다. 음건한 배풍등을 추출 분획하여 각 균주에 대한 항균효과와 암세포주에 대한 암세포 증식억제 효과(cytotoxicity) 및 QR 유도 활성 물질 검색에 사용하였다.</p><p>암세포 증식억제 실험에 사용된 시약 중 NP-40과 mena-dione은 Sigma사(St, Louis. USA) 제품을 사용하였고 flavin adenine dinucleotide (FAD), dicumarol 및 glucose-6-phos-phate dehydrogenase는 Amresco사(USA) 제품을 구입하였으며, minimum essential medium (MEM), Dulbeco's Eagle modified medium (DMEM)과 phosphate buffered saline (PBS) 등은 Gibco-BRL (Grand Island Biologic Co. USA)에서 구입하였으며, 그 외 연구에 사용된 용매 및 시약은 특급을 사용하였다.</p><h2>시료의 추출 및 분획물 제조</h2><p>시료로 사용된 배풍등(SL)은 음건 후 세절하여 메탄올을 첨가한 후 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 진탕한 후 4시간 동안 3회 반복 추출하고 회전식 진공 농축기로 감압 농축시힌 후 동결 건조하여 배풍등의 methanol 추출물(SLM)을 얻고, 이 추출물을 각 용매별로 분획하여 hexane층(SLMH), ethylether층(SLMEE), ethylacetate층(SLMEA), butanol층(SLMB) 및 수층분획물(SLMA)로 각각 분획하고 각 층을 감압 농축 후 동결 건조하여 분말로 만들어 시료로 사용하였다.</p><h2>용매 분획별 항균활성 측정</h2><p>계통분획 추출물의 항균성 검색은 paper disc method를 이용하였으며, Proteus mirabilis, Streptococcus aureus, Serratia marcescens 및 Bacillus substilis 등이 항균활성을 위해 사용 되었다. 각 균의 생육 및 보존을 위해 사용한 배지는 Nutrient agar (Difco), Yeast extract, Malt extract를 사용하였다. 항균성 시험용 평판 배지는 멸균 후 petri dish에 \( 20 \mathrm{ml} \)씩 분주하여 응고시키고 전 배양한 각종 시험균을 무균적으로 첨가하여 기층용 배지 위에 다시 \( 0.1 \mathrm{ml} \) 씩 분주하여 이중의 평판배지를 만들었다. 각 용매 분획별 추출물의 농도를 500 에서 \( 2000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{disc} \) 까지 시료의 농도를 증량시키면서 멸균된 disc (직경 \( 8 \mathrm{mM} \), Toyo Roshi Kaisha, Ltd.)에 흡수, 건조시켜 균주가 도말된 plate 표면에 올려놓은 후 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) in-cubator예서 24 시간 배양하여 disc 주위에 생성된 clear zone의 직경\( (\mathrm{mM}) \)으로부터 각 분획물의 항균활성을 측정하였으며 이 실험을 5회 반복하여 평균치를 나타내었다.</p>
시료의 추출 및 분획물 제조에 관한 설명이다
YES