<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>고추탄저균의 성장을 저해하는 점액세균의 선별</h2> <p>고추탄저균의 생육을 억제하는 점액세균을 탐색하기 위해 먼저 점액세균을 PDCY 한천배지 위에 도말하여 4일간 배양하였다. 그리고 배지 상의 점액세균을 긁어서 대부분의 균체를 제거한 후, 배지의 중앙에 고추탄저균인 C. acutatum ACYSJ001을 접종하여 7일간 배양하면서 고추탄저균 균사체의 성장을 관찰하였다. 모두 93개 점액세균 균주에 대해 이와 같은 실험을 실시하였는뎨, 이중 69 개 점액세균 균주가 자랐던 배지에서는 고추탄저균 균사체가 대조군과 비교해서 큰 차이 없이 성장하는 것으로 관찰되어 이들 균주들은 고추탄저균의 성장에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다(Fig. 1A). 그런데 Fig. 1C에서 보인 바와 같이, 10 개 점액세균 균주가 성장하였던 배지에서는 고추탄저균의 균사체가 거의 성장하지 못하는 것으로 나타나 이들 점액세균 균주들은 고추탄저균의 성장을 강하게 저해하는 것으로 나타났다. 한편, 나머지 15 개 점액세균 균주들이 자랐던 배지에서는 균사체의 성장이 약하게 저해 받은 것으로 나타났다(Fig. 1B).</p> <p>본 실험에 사용한 93개 점액세균들은 모두 다른 미생물들을 분해하여 영양분을 섭취할 수 있는 용균성 점액세균들로 이중 59개 균주들은 Myxococcus 속에 속하는 균주들이었으며, 나머지 35개 균주들은 Corallococucs 속에 속하는 균주들이었다. 그런대 강한 저해 활성을 보인 10 개 균주들은 모두 Myxococcus 속에 속하는 균주들인 반면에 Corallococcus 속에 속하는 균주들은 강한 저해활성을 전혀 보이지 않았고, 단지 한 균주만이 약한 저해활성을 보였다(Table 1). 이러한 결과는 비록 Myxococcus 속과 Corallococcus 속 균주들이 계통적으로 매우 가까운 관계이기는 하지만 C. acutatum ACYSJ001에 대한 성장 저해 활성은 매우 다름을 보여주는 것이다. 보고에 의하면 항진균물질을 포함한 다양한 생리활성물질들이 Myxococcus 속 계열 균주들에서 발견된 반면 Corallococcus 속 계열 균주들에서는 소수의 생리 활성물질만이 발견된 것으로 알려져 있다.</p> <table border><caption>Table 1. Screening of wild myxobacteria isolates that inhibit the growth of C.acutatum.</caption> <tbody><tr><td rowspan='2'>Genus</td><td colspan='3'>Number of strains inhibiting the growth of C.acutatum ACYSJ001</td></tr><tr><td>+++</td><td>+</td><td>-</td><td>Total</td></tr><tr><td>Myxococcus</td><td>10</td><td>14</td><td>35</td><td>59</td></tr><tr><td>Corallococcus</td><td>0</td><td>1</td><td>34</td><td>35</td></tr></tbody></table> <h2>선별된 균주의 동정</h2> <p>본 연구에 사용된 균주들은 분리 시 자실체 형태에 따라 속이 분류된 균주들이지만 종 수준까지는 아직 동정되지 않은 균주들이다. 따라서 본 연구에서는 고추 탄저균인 C. acutatum에 대해 활성이 높게 나타나는 10개 균주들에 대해 형태적 특성과 \( 16 \mathrm{~S} \mathrm{rRNA} \) 염기서열 분석을 통해 속을 확인하고 종을 결정하고자 하였다. 10 균주들의 \( 16 \mathrm{~s} \) rRNA 염기서열 분석은 먼저 유전체 DNA 상의 \( 16 \mathrm{~S} \mathrm{rRNA} \) 유전자를 PCR로 증폭한 후 염기서열을 결정하고 분석하는 방식으로 이루어졌는데, 분석 결과 10개 균주들은 모두 자실체 형태 관찰에 의해 분류된 바와 같이 Myxococcus 속에 속하는 것으로 확인되었다(Fig. 2).</p> <p>Myxococcus 속에 속하는 점액세균들의 종 분류는 \( 16 \mathrm{~S} \) rRNA 서열 분석 결과보다는 자실체의 형태와 색, 그리고 포자의 형태와 크기가 중요한 기준이 되는데, KYC1105는 자실체가 오렌지색의 구형이며, 포자가 Myxococcus 속중에서 가장 큰 1.9 2.4 \( \mu \mathrm{m} \)인 까닭에 M. virescens로 판단되며, \( \mathrm{KYC} 1101 \) 과 KYC1154는 포자가 타원형이므로. \( M \). stipitatus로 판단된다. 그리고 \( \mathrm{KYC1136} \)과 \( \mathrm{KYC1198} \)은 회색 또는 노란색의 짧은 자루가 있는 구형의 자실체를 형성하며 작은 포자를 갖는 까닭에 M. fulvus인 것으로 판단된다(Fig. 3). 또한, \( \mathrm{KYCl} 190 \)와 \( \mathrm{KYCl} 200 \)는 중간 크기의 포자를 갖으며 진한 오렌지색의 구형, 반구형의 자실체를 형성하므로 M. xanthus로 판단된다(Fig. 3). 한편, \( \mathrm{KYC1013} \) 와 \( \mathrm{KYC1183} \)은 M. xanthus인 것으로 추정되나 자실체의 색이 노란색이므로 분류를 보류하였으며, \( \mathrm{KYC1} 126 \)은 형태적인 특성에서는 M. xanthus로 분류되나 \( 16 \mathrm{~S} \) rRNA 염기서열이 \( M \). fulvus와 유사하므로 분류를 보류하였다.</p> <p>Myxococcus 속에는 M. virescens, M. stipitatus, M. fulvus, M. xanthus의 4개 주요 종이 있는데, 이상의 동정 결과에 의하면 고추탄저균에 성장저해활성을 보이는 균주가 최소한 \( M \). virescens 1 균주, \( M \). stipitatus 2균주, M. fulvus 2 균주, M. xanthus 2 균주이므로 4개의 종이 골고루 있는 것으로 나타났다. 따라서 Myxococcus 속에 속하는 점액세균들은 종의 구별 없이 고르게 고추탄저균의 성장을 억제하는 균주들이 존재하는 것으로 보인다.</p>
표에서 본 실험에 사용한 점액 세균은 모두 몇개인가?
93개