<h1>연구 대상 및 방법</h1><h2>대상자</h2><p>소음성 난청환자는 근로자 특수건강진단에서 소음성 난청으로 의심되어 정밀검사를 받기 위해 내원한 환자 중 순음청력검사, 음차검사, 언어청력역치검사, 이경검사를 실시하여 \( 500,1000,2000 \mathrm{~Hz} \) 의 평균청력손실이 \( 30 \mathrm{~dB} \) 이상이고 \( 4000 \mathrm{Hz} \) 에서 \( 40 \mathrm{~dB} \) 이상의 청력손실을 보이며 이비인후과적 질병이나 대사성질환, 이독성을 나타내는 약물의 복용, 그리고 가족성 난청의 경험이 없는 감각신경성난청 102명을 소음성 감각신경성난청 환자군으로 선정하였다. 소음에 대한 노출력과 이비인후과적 질병력이 없고 순음청력검사상 청력손실의 소견이 없는 정상인 214명을 대조군으로 하였다. 양성대조군은 이비인후과에서 원인을 알 수 없는 감각신경성난청으로 진단된 환자 28명으로 하였다. 대상자의 평균연령은 대조군 42.3세(범위: 28-67세), 감각신경성난청 환자군 40.6세 (범위: 18-59세), 소음성 감각신경성난청 환자군 44.7세(범위: 30-56세)였다.</p><h2>DNA 추출</h2><p>DNA 추출을 위해 Wizard Genomic DNA Purification Kit (Promega Co., U.S.A)를 사용하여 다음과 같이 행하였다. \( 1.5 \mathrm{~ml} \) tube에 전혈 \( 300 \mu \mathrm{l} \) 를 분주하고 \( 900 \mu \mathrm{l} \) 의 Cell Lysis Solution \( 900 \mu \mathrm{l} \) 를 첨가한 후 5-6번 천천히 섞었다. 실온에서 \( 10 \mathrm{~min} \) 간 방치한 후 \( 13,000 \mathrm{~rpm} \) 에서 \( 20 \mathrm{~sec} \) 간 원심분리 하였다. 상층액의 잔여물이 \( 10 - 20 \mu \mathrm{l} \) 정도만 남도록 한 후 \( 10-15\mathrm{sec} \) 간 섞었다. Nuclei Lysis Solution을 \( 300 \mu \mathrm{l} \) 첨가하고 5-6번 pipetting하여 잘 섞어 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 \( 1-2 \mathrm{~min} \) 간 방치하였다. RNase Solution을 \( 1.5 \mu \mathrm{l} \) 첨가하고 2-5번 섞은 후 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 \( 15 \mathrm{~min} \) 간 방치하였다. Protein Precipitation Solution을 \( 100 \mu \mathrm{l} \) 첨가 한 후 \( 10-20 \mathrm{~sec} \)간 섞었다. \( 13,000 \mathrm{~rpm} \) 에서 \( 3 \mathrm{~min} \) 간 원심분리 한 후 상층액을 새로운 tube에 옮겼다. Isopropanol을 \( 300 \mu \mathrm{l} \) 첨가하여 천천히 섞으면서 DNA가 응집되는 것을 확인하였다. \( 13,000 \mathrm{~rpm} \) 에서 \( 1 \mathrm{~min} \) 간 원심분리한 후 상층액을 제거하였다. \( 70 \% ~ \mathrm{EtOH} ~ 900 \mu \mathrm{l} \) 를 첨가하여 천천히 섞으면서 DNA를 씻었다. \( 13,000 \mathrm{~rpm} \) 에서 \( 1 \mathrm{~min} \) 간 원심분리 한 후 상층액을 전액 제거하였다. 이때 tube 내의 DNA의 존재여부를 확인하였다. 실온에서 완전 건조시킨 후 DNA Rehydration Solution을 \( 100 \mu \mathrm{l} \) 첨가하고 \( 65^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 \( 1 \mathrm{~hr} \) 동안 방치하였다. 그리고 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 밤새 방치시켰다. 이렇게 추출된 DNA는 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 저장하였다.</p>
소음성 난청으로 의심되서 실시하는 검사는 뭐가 있어?
순음청력검사, 음차검사, 언어청력역치검사, 이경검사