<h2>Polyacrylamide gel 전기영동과 항원-항체 반응에 의한 동위효소의 분석</h2><p>\( \mathrm{A}_{2}\), \(\mathrm{~B}_{2}\), \(\mathrm{AB}_{3} \) 및 \( \mathrm{B}_{4} \) 로 나타나고, \( \mathrm{Ldh} -\mathrm{C}\)가 발현되는 특정 종의 눈 조직과 간 조직에서 다섯 개 동위효소 외에 여러 개의 동위효소가 확인되어 종 특이성과 조직 특이성을 나타냈다. 그러나 본 실험에서 풀망둑의 골격근, 심장, 눈, 뇌 및 간 조직을 전기영동한 결과 동위효소의 수가 적고 조직특이성도 적게 나타났다(Fig. 1A). 동위효소를 확인하기 위해 각 조직에 대해 \( \mathrm{A}_{4}\), \(\mathrm{~B}_{4} \), eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \) 및 liver-specific \( \mathrm{C}_{4} \)에 대한 항혈청을 면역 침강 반응시킨 후 상등액을 전기영동하였다. 골격근과 뇌 조직(Fig. 1B, C)에 \( \mathrm{A}_{4} \)에 대한 항혈청과 eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \)에 대한 항혈청을 \(1:1\)이상 가했을 때 LDH가 나타나지 않으므로 골격근은 \( \mathrm{A}_{4} \), 뇌 조직은 \( \mathrm{A}_{4} \)와 \( \mathrm{A}_{3} \mathrm{C} \) 동위효소로 확인되었고, \( \mathrm{B}_{4} \)에 대한 항혈청을 \( 1: 2 \)로 가했을 때 LDH가 나타나므로 \( \mathrm{A}_{4} \)와 \( \mathrm{C}_{4} \)의 분자구조의 일부가 유사한 것으로 볼 수 있다. 눈 조직(Fig. 1D)은 \( \mathrm{A}_{4} \)에 대한 항혈청과 \(1:1\)로 반응시 \( \mathrm{A}_{4} \) 와 아래 두 밴드가 반응하여 활성이 약해졌고 음극 쪽에 나타난 밴드는 항체와 반응한 용해성 복합체로 볼 수 있으며, \(1:2\)로 반응시 LDH가 모두 나타나지 않았다. 또한 눈 조직에 eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \)에 대한 항혈청을 \(1: 2\)로 반응시 \( \mathrm{A}_{4} \) 활성만 남아 있으므로 양극쪽 밴드는 하부단위체 \( \mathrm{C} \)를 포함한 동위효소이고, \(1:3\)으로 반응시 밴드가 모두 없어지므로 눈 조직의 \( \mathrm{LDH}^{2} \)는 \( \mathrm{A}_{4}\), \(\mathrm{~A}_{3} \mathrm{C}\), \(\mathrm{A}_{2}\), \(\mathrm{C}_{2}\), \(\mathrm{AC}_{3}\), \(\mathrm{C}_{4} \) 동위효소이며, \( \mathrm{B}_{4} \)에 대한 항혈청을 반응시켰을 때 \( \mathrm{A}_{4}\), \(\mathrm{~A}_{3} \mathrm{C} \) 및 \( \mathrm{A}_{2} \mathrm{C}_{2} \)의 활성이 약해지나 \( \mathrm{C}_{4} \) 활성은 남아있으므로 \( \mathrm{A}_{4} \)와 \(\mathrm{B}_{4} \)의 분자구조는 극히 일부가 유사하고 \( \mathrm{A}_{4} \)와 eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \)의 분자구조의 일부는 유사하지만 \( \mathrm{B}_{4} \)와 \( \mathrm{C}_{4} \)는 유사하지 않은 것으로 확인되었다. 따라서 \( L d h-C \) 유전자가 조상형이고 \( L d h-A \)와 \( L d h-B \)를 만들었다는 보고와 일치하였다. 또한 칠성장어 골격근 조직에서 하부단위체 A와 B의 구조가 유사하며 하부단위체 A가 보존적이고, 기질과 조효소가 결합하는 \( \mathrm{A}_{4} \)의 활성부위의 구조가 박테리아로부터 척추동물까지 보존적이라는 결과와도 일치하였다. 심장 조직(Fig. 1E)은 \( A_{4} \)에 대한 항혈청과 반응시 LDH 밴드가 나타나지 않았고, \( \mathrm{B}_{4} \)에 대한 항혈청과 반응시 두 밴드가 남아있어 \( \mathrm{B}_{4} \)와 \( \mathrm{B}_{3} \mathrm{~A} \)이며, 심장의 \( \mathrm{B}_{4} \)도 \( \mathrm{A}_{4} \)와 유사한 것으로 나타났으며 양극 쪽에 보이는 밴드는 실험 과정에서 혈액 밴드로 확인되었다. 간 조직(Fig. 1F)은 \( \mathrm{A}_{4} \)와 음극 쪽 밴드가 나타났고, eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \)에 대한 항혈청 및 liver-specific \( C_{4} \)에 대한 항혈청과의 반응에서 \(1:1\) 로 가한 경우 liver-specific \( \mathrm{C}_{4} \)의 경우가 활성이 더 약하게 확인되었으므로 liver-specific \( C_{4} \)이며, \(1:2\)로 반응시 완전히 없어지므로 liver-specific \( \mathrm{C}_{4} \)와 eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \)가 일부 유사하고 \( \mathrm{A}_{4} \)와도 일부 유사한 것으로 확인되었고, 눈 조직의 eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \)는 활성이 크고 생리학적 기능이 뚜렷한 것으로 보이나 간 조직의 liver-specific \( \mathrm{C}_{4} \) 활성은 아주 약하게 나타났다. 어류에서 조직별 LDH의 발현 양상을 보면 조직의 대사를 알 수 있다고 보고하였다. 본 실험에서 풀망둑의 LDH 동위효소가 하부단위체 A와 B의 구조가 분화되지 않아 유사한 칠성장어보다는 분화된 것으로 보이지만 다른 종의 LDH에 비해 특징적이고 분화가 적게 나타나고 동위효소의 일부 구조가 서로 유사하게 나타난 것은 저 산소 환경에 적응되었기 때문인 것으로 사료된다. 또한 농어목에서 eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \) 동위효소는 음하전을 띠어 양극 쪽에서 나타나고, 잉어목에서 liver-specific \( \mathrm{C}_{4} \) 동위효소는 양하전을 띠어 음극 쪽에서 나타났지만, 풀망둑에서는 눈 조직의 eye-specific \( \mathrm{C}_{4} \)와 간 조직의 liver-specific \( \mathrm{C}_{4} \)가 각각 양극과 음극에 함께 나타나므로 한 종의 두 조직에서 하전이 다르게 나타난다는 보고와 일치하였다.</p>
본 실험에서 C4 동위효소가 음하전을 띄는 종은 어떤 종이니?
농어목