<h2>굴 분획물(\(\mathrm{O}\)) 및 효소별 굴 가수분해물 (\(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)) 의 간세포 독성</h2><p>시료들이 간세포의 손상 및 세포괴사에 대해 보호 효과가 있는지 여부를 관찰하기 위한 실험의 전 단계로의 농도 별 간세포 독성을 관찰하였다. HepG2 세포에 농도 별로 시료를 처리하고 24시간 배양한 다음, MTT assay로 세포 생존율을 측정한 결과, 아무런 처치도 하지 않은 control의 세포 생존율 을 \( 100 \% \)로 보았을 때 시료들을 최고농도 \( 500 \mathrm{\mu g} / \mathrm{ml} \) 첨가 시 세포 생존율이 대조군인 control에 비해 약 \( 90.10 \pm 6.10 \sim 96.89 \pm 6.85 \% \)로 세포 생존율의 감소 현상을 보였지만, \( 250 \mathrm{\mu g} / \)\( \mathrm{ml} \) 이하 농도를 처리한 \(\mathrm{O}\), \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)실험군에서는 세포 생존율이 \( 104.86 \pm 6.10 \sim 122.53 \pm 3.80 \% \)로 \(\mathrm{O}\), \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)에 의한 세포 괴사가 일어나지 않는 것으로 보이며, \( 250 \mathrm{\mu g} / \mathrm{ml} \) 이하의 농도로 \(\mathrm{O}\), \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)을 전 처리하여도 간세포에 유의성 있는 독성을 나타내지 않았다(Fig. 2).</p><h2>HepG2 세포에 대한 타크린의 독성효과</h2><p>타크린은 cholinesterase inhibitor로 알츠하이머 질환자에게 치료제로서 사용되고 있지만 복용한 환자에게서 심각한 간 손상으로 인한 부작용이 종종 보고 되고있다. 타크린에 의한 간 손상의 원인과 기전에 대하여 여러 보고들이 있으며 본 실험에서는 이러한 타크린에 의한 간 손상에 대한 굴 분획물 \(\mathrm{O}\)및 효소별 굴 가수분해물 \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)의 간 보호 효과를 확인하고자 했다. 타크린이 간세포에 미치는 영향을 살펴보기 위하여 HepG2 세포에 타크린을 처리하여 2시간 후 MTT assay로 세포의 생존율을 비교하였다. 아무런 처치를 하지 않은control의 세포 생존율을 \( 100 \% \)로 보았을 때, \( 0.2 \mathrm{mM} \)의 독성이 증가 할 때마다 약 \( 10 \% \) 정도의 세포 생존율이 감소하였다. 이것으로 미루어 볼 때 타크린은 농도 의존적으로 HepG2 세포의 생존율을 억제시키는 것으로 확인되었다(Fig. 3).</p><h2>세포 생존율을 통한 굴 분획물(\(\mathrm{O}\)) 및 효소별 굴 가수분해물 \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)의 간 보호 활성</h2><p>아무런 처치도 하지 않은 control의 세포 생존율을 \( 100 \% \)로 보았을 때, 타크린만을 처리한 negative control에서는 세포 생존율이 \( 51.84 \pm 4.25 \% \)로 현저하게 감소하였다. 반면 굴 분획물 \(\mathrm{O}\) 및 효소별 굴 가수분해물 \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)를 \( 100 \sim 250 \mathrm{\mu g} / \mathrm{ml} \)씩 농도 별로 전 처리한 다음, 타크린을 처리한 실험군에서는 세포 생존율이 대조군인 control 대비 \( 65.45 \pm 3.62 \sim 88.75 \pm 7.56 \% \)의 생존율을 보였으며, 간 보호 효과가 알려진 silymarin인 positive control(PC)의 세포 생존율은 \( 76.54 \pm 3.61 \% \)였다. 굴 분획물 \(\mathrm{O}\)과 효소별 굴 가수분해물 중 \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\)은 \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도 이하에서는 농도와 상관없이 타크린으로 유발한 간세포의 독성에 대해 보호 효과를 나타냈으나, \(\mathrm{P}\)에서는 농도 의존적으로 유의적인 세포 생존율의 증가를 확인할 수 있었는데, \( 200 \mathrm{\mu g} / \mathrm{ml} \)과 \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)에서 각각 \( 83.17 \pm 4.31 \%\), \(88.75 \pm 7.86 \% \)로 PC 보다 높은 세포 생존율을 확인하였다. 같은 \( 250 \mathrm{\mu g} / \mathrm{ml} \)의 굴분획물 \(\mathrm{O}\) 및 효소별 굴 가수분해물 \(\mathrm{N}\), \(\mathrm{F}\), \(\mathrm{P}\)의 농도를 처리하여도 세포 생존율이 각각 달랐는데, 이는 굴 단백질들이 다른 효슨들에 의해 가수분해가 일어나 새로운 oligopeptide가 생성되었기 때문이라고 판단된다. 타크린이 세포 내에서 glutathione과 같은 단백질과 결합하여 대사되는데, glutathione과 같은 저분자 peptide가 함유된 굴 효소 가수분해물과 결합하여 타크린 독성을 감소 시킴으로 간 보호 활성을 나타내는 것이라 생각된다. Protamex로 효소 분해한 가수분해물인 P에서 가장 높은 세포 생존율을 확인하였는데, 이는 Neutrase와 Flavourzyme이 가수분해하지 못했던 단백질을 분해하였기 때문에 세포 생존율의 상승효과가 생긴 것으로 판단되며 아미노산 조성 분석을 통하여 각기 다른 oligopeptide가 생성되었음을 간접적으로 확인하였다(Fig. 4).</p>
알츠하이머 환자에게 사용되는 치료제의 이름은 무엇인가요?
타크린