<h1>결과 및 고찰</h1><h2>시료의 여과 및 농축</h2><p>\( 200 \mathrm{~L} \)의 시료를 필터에 흡착여과 하여 강염기 용출액 \( [1.5 \% \) beef extract/\(0.05 \mathrm{M} \) glycine ( \( \mathrm{pH} 9.4 \))]을 사용하여 용출하였다. 바이러스는 강염기 용액에 의하여 실활될 수 있으므로 시간에 따른 수거율과 실활 정도를 조사하였다. 5분, 10분 15분간 용출을 실시하였을 때의 결과를 Table 2에 나타내었다. 바이러스는 5분에서 10분사이에 가장 많은 양을 수거할 수 있었으며 15분 이상 방치했을 경우 수거율이 \( 50 \% \)미만으로 떨어지는 것을 확인하였다. 이는 15분 이상 알카리용출액에 바이러스를 방치하면 바이러스의 활성이 급격히 감소됨을 제시한다.</p><h2>시료의 재농축</h2><p>필터를 통하여 1차 농축과정을 거친 시료를 재농축하였다. 재료 및 방법에 제시된 세가지 방법을 사용하였으며 실험 방법에 따른 수거율을 조사하였다. 사용한 방법에 따라 차이가 있었으며 유기응집법을 통하여 가장 많은 바이러스를 수거 할 수 있었다. 그러나 유기응집법으로 농축을 실시하였을 때에도 바이러스가 산과 염기에 노출되어지는 시간이 클수록 바이러스의 실활율이 높아지는 것을 볼 수 있었다. 또한 유기응집에 의하여 많은 불순물들이 같이 농축되어져서 회수율이 낮아질 수 있으므로 바이러스 정제 과정이 추가로 필요하였다.</p><h2>바이러스의 검출</h2><p>바이러스의 검출은 세포배양을 통한 Plaque assay와 RT-PCR을 병행하여 확인하였다. RT-PCR을 통하여 확인을 할 때에는 감염성이 없는 실활된 바이러스도 검출이 되지만 세포배양과 연계하여 PCR을 실시할 경우(Combined Cell culture-Polymerase Chain Reaction: CC-PCR)에는 감염성이 있는 바이러스만이 검출되는 장점을 가진다. PCR 결과 예상되는 크기의 산물을 얻을 수가 있었다.</p><h2>수계 장바이러스 검사법</h2><p>지금까지의 실험결과를 토대로 하여 하나의 실험방법을 정립하였다. 필터로부터의 용출 시간은 10분으로 정하였으며 이를 농축하는 방법은 유기응집법을 택하였다. 그리고 바이러스를 검출하기 위한 방법으로 세포배양법을 실시하면서 이들에 대한 PCR을 연계하여 실시하였다. 세포배양법만을 실시 할 경우 시간적 손실이나 바이러스의 존재유무를 정확하게 확인할 수 없는 문제점이 있으므로 RT-PCR법을 연계하여 감염성을 가지는 바이러스만을 빠른 시간내에 검출할 수 있다. 이러한 바이러스 검사방법을 환경내의 시료에 적용하여 원수, 정수, 수돗물 등에 분포하고 있는 바이러스에 대한 정기적인 검사를 실시하면 감염성이 있는 바이러스에 의한 불의의 사고를 막고 안전한 물을 보급하는데 큰 기여를 할 것으로 보여진다.</p>
재료 및 방법에 제시된 몇가지 방법을 상용했어?
세가지 방법