<h1>결과 및 고찰</h1><h2>사이퍼메트린(cypermethrin)의 생물학적 분해를 위한 미생물의 분리.</h2><p>부산 인근의 경작지 토양 및 연안 퇴적물로부터 샘플을 채취하였다. 샘플을 사이퍼메트린(cypermethrin)이 함유된 MSM 배지에서 순차적으로 배양한 후, 고체 배지에서 콜로니를 도출하였다. 도출된 콜로니들 중 재차 사이퍼메트린(cypermethrin)이 \( 50 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)로 포함된 MSM 배지에서 5 일간 배양 후 배양액 속에 잔류 사이퍼메트린(cypermethrin)의 농도를 측정하여 초기 첨가한 농도에 비하여 감소된 경향을 나타내는 콜로니들 중에서 강한 활성을 나타내는 콜로니를 선정하여 AP01이라고 병명하였다.</p><h2>16S rDNA 염기서열을 활용한 분리 균주 동정.</h2><p>분리 균주 AP01 의 16S rDNA 를 알려진 대장균의 16S rDNA 염기서열을 바탕으로 제작한 프라이머를 활용하여 PCR을 통하여 증폭하였다. 얻어진 16S rDNA 염기서열을 GenBank의 기존에 보고된 16S rDNA 들과 비교하고, 유전학적 유연관계를 ClustalX program을 활용하여 phylogenetic tree로 나타내었다. AP01 균주의 16S rDNA 서열은 Bacillus amyloliquefaciens (AF489591)와 \( 99 \% \) (1514/1526)의 상동성, B. vallismortis (AB021198)와 \( 99 \% \) (1525 / 1530)의 상동성, B. subtilis (X60646)와 \( 99 \% \) (1413/1430), (AB042061)와 \( 99 \% \) (1535/ 1544) 그리고 (AB110598)와 \( 99 \%\) (1534 / 1542) 의 상동성, B . mojavensis (AB021191)와 \( 99 \% \) (1515/1526), B. atrophaeus (AB021181)와 \( 99 \%\) 1504 / 1515의 상동성, B. licheniformis (X68416)와 \( 98\%\) (1517/1545)의 상동성과 B. pumilus (X60637)와 \( 94 \%\)(1352 / 1432) 의 상동성을 각각 나타내는 것을 확인 할 수 있었다. 이러한 분석들로 미루어 보아 분리균주 AP01은 Bacillus amyloliquefaciens에 속하는 것을 확인 할 수 있었으며, 분리 균주를 Bacillus amyloliquefaciens AP01이라고 명명하였다.</p><h2>탄소원이 분리 균주 AP01이 사이퍼메트린(cypermethrin)의 생물학적 분해에 미치는 영향.</h2><p>다른 모든 실험 조건은 동일하지만 하나의 인자만 변화를 주어서 실힘하는 one factor at a time (OFAT)법을 활용하여 분리 균주 AP01이 사이퍼메트린 (cypermethrin)의 생물학적 분해에 영향을 미치는 탄소원에 대한 실험을 수행하였다. 탄소원의 종류로는 maltose, galactose, glucose, sucrose, lactose, carboxy methyl cellulose (CMC), soluble starch와 colloidal chitin을 각각 사용하었으며, 다른 인자들은 상기 실험조건과 동일하며, 선별된 탄소원들만 최종 \( 2 \% \)가 되게 배지에 첨가하였다. \( 30^{\circ} \mathrm{C}\) , \(180 \mathrm{rpm} \) 에서 5 일 동안 배양 한 후, 사이퍼메트린(cypermethrin) 분해율을 조사하였다. Glucose를 탄소원으로 이용하였을 때 \( 60.25 \% \) 의 분해율을 나타내었으며, sucrose는 \( 58.73 \% \), maltose는 \( 55.33 \% \) 의 분해울을 나타내었다. 기타 다른 탄소원을 사용하였을 때는 \( 45 \% \) 전후의 사이퍼메트린(cypermethrin) 분해 활성을 나타내는 것을 확인 할 수 있었다. 이러한 결과는 분리 균주 AP01의 경우, 사이퍼메트린(cyperemthrin)의 생물학적 분해를 위하여 사이퍼메트린(cyperemthrin)과 더불어 glucose를 추가하였을 때 보다 항상된 분해율을 나타내는 것으로 판단된다. 유사한 결과는 Cycon 등과 Chen 등에 의해서 보고 되었다.</p><h2>질소원이 분리 균주 AP01이 사이퍼메트린(cypermethrin)의 생물학적 분해에 미치는 영향.</h2><p>다른 모든 실힘 조건은 상기 분석방법과 동일하지만 질소원의 종류만 변화를 주어서 분리 균주 AP01이 사이퍼레트린(cypermethrin)의 생물학적 분해에 영향을 미치는 질소원에 대한 실험을 수행하였다. 질소원의 종류로는 ammonium nitrate, casamino acid, casein, peptone, skim milk, tryptone, urea와 yeast extract를 각각 최종 \( 0.5 \% \) 가 되게 첨가하였다. \( 30^{\circ} \mathrm{C}\) ,\( 180 \mathrm{rpm} \) 에서 5 일 동안 배양한 후, 사이퍼메트린(cypermethrin) 분해율을 조사하였다. 분석에 사용되어진 다양한 질소원들의 경우, 대체로 \( 45 \% \) 전후의 분해율을 나타내었다. 이러한 결과로 보아 분리 균주 AP01이 사이퍼메트린 (cypermethrin)의 생물학적 분해 활성에 뚜렷한 영향을 미치지는 못하는 것으로 판단된다.</p><p>상기의 실험 결과들을 종합해 보면 분리 균주 Bacillus amyloliquefaciens AP01는 피레스로이드(pyrethroid) 계열 살충제 중의 하나인 사이퍼메트린(cypemethrin)의 생물학적 분해를 위한 대표 미생물로 그 가능성을 확인 하였으며, 토양 및 농산물에 존재하는 잔류 농약 감소를 비롯하여 안전한 먹거리 확보에 크게 기여 할 것으로 판단된다.</p>
분리 균주 AP01이 사이퍼메트린 (cypermethrin)의 생물학적 분해에 영향을 미치는 탄소원에 대한 실험에서 배양 온도는 얼마인가?
\( 30^{\circ} \mathrm{C}\)