<h1>재료 및 방법</h1><h2>식물재료</h2><p>편백 기내배양을 위한 재료는 수원시 권선구 주민거주시설 내에 생육하고 있는 35년생 편백에서 5월초 종자를 채취하여 사용하였다. 종자는 흐르는 물에 1시간 동안 침지 처리 후, \( 70 \%\) EtOH에서 1분, \( 2 \% \mathrm{NaClO} \) 로 20분간 소독 후 멸균수로 3회 세척하여 물기를 제거 후 발아배지에 치상하였다. 발아배지는 \( 1/2 \)LM(Litvay ct al. 1985)배지에 \( 2 \% \) sucrose 및 \( 0.3 \% \) gelritc를 첨가하였고, 페트리디쉬 당 각 5개의 종자를 파종하여 발아를 유도하였다. 모든 배양조건은 1일 16시간 광조명(40 \( \mu \mathrm{mol} ~ \mathrm{m}^{-2} \cdot \mathrm{s}^{-1} \) 백색 형광등), \( 25 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \) 로 유지되는 배양실에서 실시하였다.</p><h2>식물생장조절물질 종류 및 농도에 따른 다신초 유도 효과</h2><p>종자는 발아배지에 접종 10일 이후부터 발아되기 시작하였고 발아된 소식물체는 다신초 유도를 위한 재료로 사용하였다. 배양을 위한 절편체는 정아가 포함된 \( 1 \mathrm{~cm} \) 의 길이로 조제하여 배지에 치상하였다. 다신초 유도배지는 \( 1/2 \)LM배지에 6-benzylamino purine (BAP), Zeatin, Kinetin, \( \mathrm{N}^{6} \)-(2-Isopentenyl) adenine(2-iP), Thidiazuron (TDZ) 등 5종류의싸이토키닌류 호르몬의 \( 0.1,0.2 \) 및 \( 0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) 의 농도로 각각 첨가하였고, 탄소원으로 \( 3 \% \) sucrose와 경화제로는 \( 0.3 \% \) gelrite를 각가 첨가하였다. 유리배양병 당 5 개씩의 절편체를 배양하였고 5 반복실험을 수행하였으며, 배양 6 주 후 식물생장조절물질 종류 및 첨가농도에 따른 다신초 유도율, 유도수 및 신초길이를 조사하였다.</p><h2>식물생장조절물질의 고농도 \( \rightarrow \) 저농도 순차적 처리에 따른 다신초 유도 효과</h2><p>다신초 유도율을 향상시키기 위해 싸이토키닌 종류별로 고농도로 첨가된 배지에서 3 주 배양 후 저농도 첨가 배지로 옮겨 총 7 주간 다신초를 유도하였다. 자세히는 배지는 \( 1/2 \)LM 기본배지를 사용하였고, BAP, Zeatin, Kinetin, 2-iP 및 TDZ를 각각 1.0,2.0, 및 \( 5.0 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) 의 농도로 첨가하여 고농도 조건에서 3 주간, 그리고 같은 호르몬 농도를 \( 1 / 10 \) 로 줄인 농도로 각각 0.1,0.2 및 \( 0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) 가 첨가된 배지에서 8주간 배양하였다. 탄소원으로 \( 3 \% \) sucrose와 경화제 \( 0.3 \% \) gelrite를 첨가 하였고, 유리배양용기에 \( 80 \mathrm{ml} \) 의 배지를 첨가 후 5 개씩 절편체를 배양하였다. 배양 10 주 후 싸이토키닌 종류 및 농도에 따른 다 신초 유도율, 유도수를 조사하였다.</p>
종자는 70% EtOH에서 1분간 소독하는 절차를 거친다.
YES