<h1>재료 및 방법</h1><h2>가시상추 및 생리활성물질 추출</h2><p>실험에 사용한 가시상추(prickly lettuce : Lactuca serriola)는 2006년 5~6월 경북 경산시 자인면에서 채집하여 음지에서 건조한 후 분말로 하여 연구에 사용하였다. 분말 \( 600 \mathrm{~g} \) 을 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 4 시간씩 3회 추출하여 \( \mathrm{MeOH} \) 조추출물을 얻었다. \( \mathrm{MeOH} \) 조추출물을 10% \(\mathrm{MeOH} \) 에 현탁시켜 용매의 극성을 증 가시키는 용매분획법에 의해 n-hexane 분획, \( \mathrm{CHCl}_{3} \) 분획,\( \mathrm{EtOAC} \) 분획, \( \mathrm{n}-\mathrm{BuOH} \) 분획, \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 분획을 얻었다.</p><p>항산화 활성이 우수하게 나타난 EtOAc 분획에 대하여 column chromatography를 수행하였다. \( 30 \mathrm{~mm} \) 유리제 column 에 시료 30 배의 silica gel을 n-hexane으로 충진하고 시료 2 \( \mathrm{g} \) 을 흡착시킨 후 EtOAc, EtOAc:MeOH (3:1), EtOAc:MeOH (1:1), EtOAc: \( \mathrm{MeOH} \) (1:3), \( \mathrm{MeOH} \) 순으로 순차적으로 \( 100 \mathrm{ml} \) 씩 내려 5 개의 소 분획으로 나누어 subfraction 1, subfraction 2, subfraction 3, subfraction 4, subfraction 5 로 명명하였다. 가시상추로부터 생리활성 물질의 분리 및 정제과정을 요약하면 Fig. 1과 같다.</p><h2>일반성분 분석</h2><p>가시상추의 수분, 회분, 조지방, 조단백질, 비타민 등 일반성 분은 식품공전 일반시험법에 따라 정량하였다. 즉, 수분함량은 상압가열건조법, 회분은 회화법, 조지방은 Soxhlet 추출법, 조단백질은 단백질 자동분석기법을 이용하여 분석하였으며, 값은 백분율로 나타내었다. 탄수화물 함량은 100 에서 수분, 조단백질, 조지방, 회분함량을 제한 값으로 하였다. 비타민은 HPLC 법으로 분석하였다.</p><h2>Phenol성 화합물 함량 측정</h2><p>Phenol성 물질 분석은 Dewanto 등의 방법에 따라 수행 하였다. 시료 \( 1 \mathrm{ml} \) 에 2% sodium carbonate \( 2 \mathrm{ml} \) 를 가하여 3 분간 반응시킨 후 50% Folin-Ciocalteu reagent \( 0.1 \mathrm{ml} \) 를 가하여 3분간 반응 후 반응액의 흡광도를 \( 720 \mathrm{~nm} \) 에서 측정하였다. 표준물질로 gallic acid를 사용하였고 \( 10,30,50 \mathrm{ppm} \) 농도의 검량선을 작성하여 함량을 계산하였다.</p><h2>Flavonoid 함량 측정</h2><p>Flavonoid 분석은 Moreno 등의 방법에 따라 수행하였 다. 시료 \( 0.1 \mathrm{ml} \) 에 \( 80 \% \mathrm{EtOH} 0.9 \mathrm{ml} \) 를 혼합하고, \( 10 \% \) alumium nitrate \( 0.1 \mathrm{ml}, 1 \mathrm{M} \) potassium acetate \( 0.1 \mathrm{ml} \) 및 EtOH \( 4.3 \mathrm{ml} \) 를 각각 첨가하여 상온에서 40 분간 반응한 후 \( 415 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 quercetin을 사용하였 고 \( 50,100,150 \mathrm{ppm} \) 농도의 검량선을 작성하여 함량을 계산 하였다.</p><h2>아질산염 제거 활성 측정</h2><p>아질산염 제거 활성은 Gray 및 Dugan의 방법에 의하여 측정하였다. \( 1 \mathrm{mM} \) sodium nitrate 용액 \( 1 \mathrm{ml} \) 에 분획별 추출물 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 가하고 \( 0.1 \mathrm{~N} \mathrm{HCl} \) 을 사용하여 반응 용액의 \( \mathrm{pH} \) 를 1.2 로 조정한 다음 증류수로 총량을 \( 10 \mathrm{ml} \) 로 하였다. 이 용액을 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 1 시간 반응 시킨 후 각 반응액을 \( 1 \mathrm{ml} \) 씩 취하여 2% acetic acid용액 \( 5 \mathrm{ml} \), Griess 시약(A:B=1:1, A: 1% silfanilic acid in 30% acetic acid, B:1% naphthylamine in 30% acetic acid) \( 0.4 \) \( \mathrm{ml} \) 를 첨가하여 잘 혼합하여 실온에서 15 분간 방치시킨 후 520 \( \mathrm{nm} \) 에서 흡광도를 측정하여 아질산염 제거능을 측정하였다.</p>
가시상추 분말 실험을 통해 무엇을 얻었는가?
\( \mathrm{MeOH} \) 조추출물