<h2>총균수</h2><p>총균수는 마쇄한 갓김치를 멸균거즈로 여과하여 \( 1 \mathrm{~mL} \)을 취하여 \( 0.85 \% \) 생리식염수로 단계적으로 희석한 뒤 희석액 \( 100 \mu \mathrm{L} \)를 취해 TGY(Tryptone-Glucose-Yeast extract) 고체배지에 도말하여 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \)에서 48시간 배양한 후 standard plate count 방법으로 균 수를 측정하여 \( \mathrm{CFU}/ \mathrm{mL} \)로 표시하였다.</p><h2>항산화활성 측정</h2><p>항산화활성은 각 시료의 \( \alpha, \alpha^{\prime} \)-diphenyl- \( \beta \)-picrylhydrazyl (DPPH) radical에 대한 소거효과를 측정하였으며 Blois의 방법을 변형하여 측정하였다. DPPH \( 16 \mathrm{mg} \) 을 \( 100 \mathrm{~mL} \) 에탄올에 용해한 후 여기에 증류수 \( 100 \mathrm{~mL} \)를 혼합하여 Whatman filter paper No.2로 여과하였다. 이 여과액 5 \( \mathrm{mL} \)에 갓김치 시료 용액 \( 1 \mathrm{~mL} \)를 가하여 혼합한 후 실온에서 30분간 방치하여 \( 528 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도의 감소치를 측정하였다. 이때 항산화활성은 아래와 같은 식으로 구하였으며 3회 반복 실험하여 얻은 결과를 평균한 값으로 나타내었다.</p><p>항산화활성 \( (\%)=\left[1-\frac{\text { 시료 첨가구의 흡광도 }}{\text { 비 첨가구의 흡광도 }}\right] \times 100 \)</p><h2>ACE 저해활성 측정</h2><p>ACE 저해활성의 측정은 Cushman과 Cheung의 방법을 변형하여 측정하였다. ACE(Angiotensin Converting Enzyme, peptidyldipeptide hydrolase, EC 3.4.15.1) \( 0.38\mathrm{mg} \)을 \( 0.1 \mathrm{M} \) sodium borate buffer \( (\mathrm{pH} 8.3) \) \( 10 \mathrm{~mL} \)에 용해 시켰으며 기질인 Hippuryl-His-Leu(HHL)은 \( 0.1 \mathrm{M} \) sodium borate buffer \( (\mathrm{pH} 8.3)\)에 용해시켜 \( 25 \mathrm{mM} \)의 HHL 기질용액을 만들었다. 갓김치 시료 \( 50 \mu \mathrm{L} \)에 HHL용액 \( 100 \mu \mathrm{L} \)을 첨가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 10 분간 pre-incubation 시켰다. 반응액에 ACE 용액 \( 150 \mu \mathrm{L} \) 가하고 다시 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 1시간 반응시겼다. 반응이 끝나면 \( 0.5 \mathrm{N} \) \( \mathrm{HCl} \) \( 250 \mu \mathrm{L} \)를 첨가하여 반응을 정지시키고 ethyl acetate \( 1.5 \mathrm{~mL} \)를 가하여 15초간 균질화하여 hippuric acid를 추출한 후 \( 2500 \mathrm{~rpm} \)에서 10분간 원심분리 시켜 상징액 \( 0.5 \mathrm{~mL} \)를 취하였다. 이 상징액을 \( 140^{\circ} \mathrm{C} \)에서 10분간 건조 후 \( 1 \mathrm{M}\) \( \mathrm{NaCl}\) \( 3 \mathrm{~mL} \)을 가해 용해시켜 \( 228 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정한 후 아래의 계산식에 따라 ACE 저해율을 나타내었다.</p><p>Inhibitory ratio\( (\%)=\frac{A-B}{A-C} \times 100 \)</p><p>(A: Sample 대신 증류수를 넣은 군의 흡광도, B: Sample의 흡광도, C:\( \mathrm{HCl} \)에 의한 반응 정지 후 효소를 넣은 군의 흡광도)</p>
흡광도의 감소피를 측정하기 위해 필요한 여과액을 만들기 위한 과정을 어떻게 돼?
DPPH \( 16 \mathrm{mg} \) 을 \( 100 \mathrm{~mL} \) 에탄올에 용해한 후 여기에 증류수 \( 100 \mathrm{~mL} \)를 혼합하여 Whatman filter paper No.2로 여과하였다.