<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험재료</h2><p>본 연구에 사용한 와송(Orostachys japonicus)은 2015년 경북 김천소재의 외송 재배농장에서 구입하여 전초를 천일건조시킨 후, 40 mesh로 분쇄하여 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 저온저장하며 사용하였다.</p><h2>추출물의 제조</h2><p>시료 추출은 열수 추출물의 경우 와송 분말 \( 1 \mathrm{g} \) 에 증류수 \(200 \mathrm{mL} \) 를 가하고 용매가 \( 100 \mathrm{~mL} \) 가 될 때까지 가열하여 냉각시킨 후 24 시간 동안 상온에서 교반하여 추출하였으며, methanol, acetone, butanol 및 ethanol 추출물은 와송 분말 \( 1 \mathrm{g} \) 에 \(100 \mathrm{mL} \) 의 각 용매를 가한 후 침지시켜 24 시간 동안 상온에서 교반하여 추출하였다. 추출물은 Whatman No. 1 filter paper (Whatman, Maidstone, UK)로 여과하여 필요에 따라 rotary vacuum evaporator (Eyela NE, Tokyo, Japan)에서 농축하여 시료의 총 phenolics 농도 구간을 조절하여 사용하였다.</p><h2>총 phenol성 화합물 정량</h2><p>총 phenolics 함량은 Folin과 Denis(1912)의 방법에 준하여 측 정하였으며, 시료 추출물 \( 1 \mathrm{~mL} \) 에 \( 95 \% \) ethanol \( 1 \mathrm{mL} \) 와 증류수 \( 5 \mathrm{mL} \) 를 첨가하고 \( 1 \mathrm{N} \) Folin-Ciocalteu reagent (Junsei, Tokyo, Japan) \( 0.5 \mathrm{mL} \) 를 넣어 잘 섞은 후 5분 뒤 \( 5 \%\) \(\mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3}\) \(1 \mathrm{mL} \) 를 첨가하고 1 시간 동안 암실에서 반응시킨 후 UV-visible spectrophotometer (Optizen 3220UV Mecasys, Daejeon, Korea)로 \( 725 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하여 gallic acid를 이용한 표준곡 선으로부터 양을 환산하였다.</p><h2>항산화 효과 측정</h2><p>1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical에 대한 소거활성은 Blois(1958)의 방법에 준하여 측정하였으며, 저해율(\(\%\))은 \( (\text{1반응구의 흡광도}/ \text{대조구의 흡광도} ) \times 100 \) 으로 나타내었다. 2,2'Azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical cation decolorization (ABTS) 측정은 Pellegrin 등(1998)의 방법에 준하여 저해율(\(\%\))는 \((\text{1-반응구의 흡광도}/\text{대조구의 흡광도}) \times 100 \) 으로 나타내었다. Antioxidant protection factor (PF) 측정은 Andarwulan과 Shetty (1999)의 방법으로 반응구의 흡광도/대조구의 비로 나타내었다. Thiobarbituric acid reactive substance (TBARs) 저해측정은 Buege와 Aust(1978)의 방법에 준하여 측정하였으며, 저해율(\(\%\))은 \((\text{1-반응구의 흡광도}/\text{대조구의 흡광도}) \times 100 \) 으로 나타내었다.</p><h2>Angiotensin converting enzyme (ACE) 저해효과 측정</h2><p>ACE 저해효과 측정은 Cushman과 Cheung(1971)의 방법에 준하여 측정하였다. 반응구는 \( 0.3 \mathrm{M}\) \(\mathrm{NaCl} \) 을 함유한 \( 0.1 \mathrm{M} \) potassium phosphate buffer (\( \mathrm{pH} 8.3\))에 녹인 기질액 \( 2.5 \mathrm{mM} \) hippuryl-L-histidyl-L-leucine (HHL, Sigma-Aldrich Co., Louis, MO, USA) \( 0.15 \mathrm{~mL} \) 와 \( 0.25 \mathrm{unit} / \mathrm{mL} \) ACE (Sigma-Aldrich Co., Louis, MO, USA) \( 0.1 \mathrm{~mL} \) 와 시료 \( 0.1 \mathrm{~mL} \) 을 넣어 혼합하였으며, 대조구에는 시료 대신 증류수를 \( 0.1 \mathrm{~mL} \) 를 첨가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30 분간 반응시키고, 종료시약 \( 1 \mathrm{~N}\) \(\mathrm{HCl}\) \(0.25 \mathrm{mL} \) 를 첨가한 후 ethyl acetate \( 3 \mathrm{mL} \) 을 추가하였다. 이후 Ethylacetate층만 분취하여 용매를 증류 건조시켜 hippuric acid를 추출하고, 추출된 hippuric acid를 \( 2 \mathrm{mL} \) 의 증류수를 사용하여 재용해시켜 \( 280 \mathrm{nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. ACE 저해율(\(\%\))은 \((\text{1-시료의 Hippuric acid 함량}/\text{대조구의 Hippuric acid 함량} ) \times 100 \) 으로 계산하였다.</p>
2015년 경북 김천소재의 외송 재배농장에서 구입하여 전초를 천일건조시킨 것은 무엇인가?
와송