<h1>서 론</h1><p>1927년 Dodge에 의해 최초로 균사형 진균류인 Neurospora의 유전학적 연구에 관한 보고서가 발표된 이래, Beadle과 Tatum은 X선에 의한 N.crassa의 돌연변이를 연구하여 하나의 유전자가 하나의 효소를 생산한다는 One gene-One enzyme 설을 발표하였으며 이 발견으로 인해 노벨상을 수상하였다. 이 후 N.crassa는 진균류의 유전학적 혹은 생화학적 연구뿐 만 아니라 생명과학 전체에서 대표되는 생명체로서 연구가 되어왔다. 특히 최근 분자 생물학의 발달로 인하여 과거 고전 유전학적 방법들에 의해 발견되고 고찰되었던, 수많은 Neurospora의 생명 현상들이 분자 수준에서 재조명되어 가는 중이다. 특히 최근에는 N.crassa OR74 A 균주를 이용한 genome project가 완료되어 유전자 전체 서열의 이용이 가능하게 되었다. 따라서 그동안 축적된 N.crassa의 유전학적, 생리학적 특성을 이용하여, 이질단백질의 발현 등 N.crassa의 산업적인 응용이 시도되고 있다.</p><p>황 (\(\mathrm{S}\))은 아미노산의 구성 성분으로, 생명체의 가능에 절대적으로 필요한 필수원소로서 황의 대사 과정은 매우 세밀하게 조절되고 있다. N.crassa에서 황의 대사에 매우 중요한 위치를 차지하는 arylsulfatase (arylsulfate sulfohydrolase; EC 3.1.6.1)는 균사를 비롯하여, 무성 생식포자인 conidia에도 존재하며, 세포내외 및 표면에도 모두 존재하는 것으로 알려졌다. ars-1 유전자의 발현은 배지내의 황의 농도에 따라서 조절되는데, 황의 결핍 시에는 발현을 derepression시키는 것으로 보고가 되어졌으며, 유사한 기작이 Aspergillus nidulans 에서도 관찰되었다. CYC3 및 SCON 단백질들이 각각 N.crassa ars-1 유전자의 positive regulator 및 negative regulator로 참여하는 것으로 알려졌으나, 이들이 인식하는 프로모터의 cis-acting DNA 서열에 대해서는 자세한 연구가 수행된 바가 없다. cis-acting 서열의 연구를 위해서는 쉽게 프로모터의 발현율을 측정하는 방법을 확보하는 것이 선행되어야 하며, 그 방법들 중의 하나가, 보고유전자 (reporter gene)로 가장 많이 이용하는 Escherichia coli의 lacZ 유전자를 연결하여 발현율을 조사하는 것이다. 본 논문은 N.crassa의 arylsulfatase를 암호화하는 ars- 1 유전자 프로모터의 발현율 조사에 관한 보고로서, 보고유전자인 lacZ를 보유한 pDE3에 ars-1 프로모터를 연결한 후에, 황의 농도를 변화시킨 성장 배지 내에서의 발현율의 변화를 측정한 것이다.</p>
cis-acting 서열의 연구를 위해서는 쉽게 프로모터의 발현율을 측정하는 방법을 확보하는 것이 선행되어야하는데 방법들 중 보고유전자로 가장 많이 이용하는 방법이 어떻게 되는거야?
Escherichia coli의 lacZ 유전자를 연결하여 발현율을 조사