<h1>재료 밎 방법</h1><h2>한방초콩환의 제조 및 조성</h2><p>본 실험에서 사용한 서목태는 영주시 문수면의 우가네농장에서 재배한 것을 직접 구입하여 15일 동안 현미식초에 절여 초콩을 제조한 후 건조, 분말화 하였다. 한방초콩환의 배합비율은 Table 1 과 같으며 한약재는 Kim 등이 비만치료 및 예방을 위하여 사용한 처방에서 사용한 한약재 중, 예비실험을 통하여 항산화능과 항암 활성이 우수한 5종류(감초, 산조인, 백출, 황기, 산수유)를 선정한 후, 경북 영천시의 한 약재 건재상에서 구입하여 사용하였다.</p><p>한방초콩환의 제조는 초콩 분말에 5 종류의 약재 분말을 각각 \( 2 \% \) 씩 첨가하여 현미식초로 반죽하여 건조 시킨 분말을 실험동물 사육을 위한 식이에 첨가하였으며, Park 등에 의한 일반 성분 분석 결과는 수분함량 \( 11.8 \% \), 조단백질 함량 \( 30.13 \% \), 조지방 함량 \( 18.55 \% \), 조회분은 \( 7.49 \% \), 탄수화물은 \( 32.03 \% \) 로 구성되었다.</p><h2>실험동물</h2><p>본 실험에서 사용한 동물은 대한실험동물센터에서 5주령 된 \( 180 \sim 200 \mathrm{~g} \) 의 수컷 흰쥐(Sprague-Dawley계)를 분양받아 온도 \( 22 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 \( 53 \pm 3 \% \) 및 밤낮을 12 시간씩 조절하고 물과 일반식이(삼양 유지사료(주))를 충분히 공급하면서 1주간 실험실에 적응시킨 다음 체중이 비슷한 개체만을 선정하여 실험에 사용하였다.</p><h2>실험동물 식이 조제 및 식이방법</h2><p>실험동물을 위한 식이조제는 정상식이의 경우 AIN-76 diet 조성(corn oil \( 5 \% \mathrm{w} / \mathrm{w} \) )에 준하여 조제되었고 고지방식이의 지질급원은 lard \( (10 \% \mathrm{w} / \mathrm{w}) \) 와 corn oil \( (5 \% \mathrm{w} / \mathrm{w}) \) 을 사용하였으며 시료군의 조성은 한방초콩환(HCKP)의 성분분석에 따라 Lee 등의 방법을 변형하여 시료를 각각 \( 1 \%, 5 \% \) 씩 첨가하여 조제하였다.</p><p>식이방법에 따라 실험동물을 정상식이 급여군(정상군), 고지방식이군 (HF 군), 고지방식이에 한방초콩환(HCKP)을 \( 1 \% \) 첨가하여 급여한 시료군(T1군), 고지방식이에 한방초콩환 HCKP을 \( 5 \% \) 첨가하여 급여한 시료군(T5군)으로 나누어 7마리씩 배정하였다. 각각의 실험군은 위의 조성에 의하여 조제한 식이를 매일 오후 \( 4 \sim 5 \)시 사이에 물과 함께 충분히 공급하면서 9주간 사육하였다.</p><h2>채혈 및 효소활성도 측정</h2><p>각 군의 실험동물을 희생 전 15 시간 절식시킨 후 \( \mathrm{CO}_{2} \) 로 가볍게 마취한 다음, 복부 대정맥에서 혈액을 채취하였다. 채취한 혈액은 test tube에 넣고 상온에서 1 시간 방치한 다음 \( 4^{\circ} \mathrm{C}, 3,500 \mathrm{rpm} \) 에서 15 분간 원심분리 하여 혈청을 분리하고, 분석할 때까지 \( -80^{\circ} \mathrm{C} \) 에 보관하였다. 혈청 중 glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) 및 glutamic pyruvic transaminase (GPI) 활성도는 enzymatic colorimetry법으로 생화학분석기(Hitachi 7180, Japan)로 측정하였다.</p><h2>간조직의 채취 및 전자현미경 관찰</h2><p>투과전자현미경(TEM: Transmission electron microscope)의 표본 제작은 Kim 등의 방법에 따라 쥐의 간 조직을 1 \( \mathrm{mm}^{3} \) 의 크기로 잘라 \( 0.1 \mathrm{M} \) phosphate buffer (\(\mathrm{pH} 7.2\))로 완충시킨 \( 2.5 \% \) glutaraldehyde용액으로 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 \( 2 \sim 4 \) 시간 동안 전 고정 하였다. 그리고 \( 1 \% \) osmium tetroxide \( \left(\mathrm{OsO}_{4}\right) \) 로 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2시간 동안 후 고정 하였으며, 고정이 끝난 재료는 \( 0.1 \mathrm{M} \) phosphate buffer로 세척하고 ethanol을 이용하여 실온에서 15 분 간격으로 \( 30 \% \) 에서 \( 10 \% \) 씩 농도를 증가시켜 \( 100 \% \) 까지 단계별 탈수하여 epon 812에 포매 하였다. 포매된 조직은 두께 \( 900 \sim 1,000 \mathrm{~nm} \) 의 ultrathin section을 하였으며 ultrathin section은 copper grid (200 mesh)에 올려 uranyl acetate와 lead citrte 용액으로 이중 염색하여 투과전자현미경(TEM, Hitachi H-7600, Japan)으로 관찰하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>실험결과의 통계 처리는 SPSS pakage를 이용하였으며, 모든 측정값은 Mean\(\pm\)SEM로 포시하였고 분석에 대한 유의성은 one-way-ANOVA를 실시, 분석결과에 대한 \( \mathrm{p}<0.05 \) 의 수준에서 LSD 다중검정법으로 사후검정을 실시하여 각 처리구간의 평균치에 대한 유의성을 분석하었다.</p>
실험에서 사용한 서목태는 어디서 재배한 것을 직접 구입한 거야?
우가네농장