<h2>B16F10 세포내 어리연꽃 추출물의 cAMP와 PKA 저해활성 측정</h2><p>\( \alpha\)-MSH 의 작용은 MC1R의 활성화를 통해 이루어지며 그 결과 세포 내 cAMP의 농도가 증가하고 cAMP의 하위 인자인 PKA의 농도도 증가한다. 이어서 melanocyte의 수지상 돌기, tyrosinase활성 및 멜라닌 생성이 증가하게 된다. 따라서 어리연꽃 추출물의 농도에 따른 cAMP 와 PKA의 활성을 측정한 결과를 Fig. 3과 같이 나타내었다. 어리연꽃 추출물 5, 10, 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도를 처리한 결과 농도 의존적으로 cAMP 와 PKA의 활성이 저해 되는 것을 확인하였으며, 특히 PKA의 높은 저해 활성을 확인할 수 있었다.</p><h2>어리연꽃 추출물의 멜라닌 생성 관련 단백질 및 유전자 발현 저해효과</h2><p>멜라닌 생합성 신호전달 체계에는 다양한 신호전달물질이 관여하고 있으며 주요한 세포 내 신호전달 경로는 cAMP/PKA경로로서, cAMP는 PKA, cAMP resposive element binding protein 1을 경유하여 MITF의 발현을 촉진한다. 활성화된 MITF는 멜라닌 생성 과정에서 중요한 전사 조절 인자로 tyrosinase, TRP-1와 TRP-2 전사를 활성화 시키는 것으로 알려져 있다. 이에 어리연꽃 추출물의 멜라닌 생합성 관련 인자 단백질 및 유전자 발현 정도를 측정하였다. 먼저 멜라닌 생합성 관련 단백질 발현의 경우 어리연꽃 추출물이 농도 의존적으로 발현을 저해시켰다. 특히 tyrosinase의 경우 25 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)에서 40\( \% \) 이상의 발현을 저해하여 가장 높은 저해능을 나타내었으며, MITF는 38\(\%\), TRP-1은 33\( \%\), TRP-2는 35\( \% \) 의 발현 저해능을 나타내었다(Fig. 4). 반면에 회화나무 꽃 추출물은 동일한 농도에서 MITF, tyrosinase, TRP-1, TRP-2의 순서로 각각 24.7, 42.6 19.4, 1.8\( \% \) 로 보다 낮은 저해활성을 보여주었다. 또한 어리연꽃 추출물의 tyrosinase, MITF, TRP-1, TRP-2의 유전자발현에 미치는 영향을 확인한 결과 멜라닌 생성 관련 단백질 발현 저해능과 유사한 결과를 나타내었다. 어리연꽃 추출물은 농도 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 에서 대조군과 비교하여 tyrosinase mRNA 의 경우 31\( \% \) 저해능을 MITF mRNA의 경우 50\( \% \) 이상의 저해능을 나타내었으며, TPR-1, TRP-2의 mRNA 발현 저해활성이 낮음을 확인하였다(Fig. 5). 기존에 보고된 청미래 덩굴 뿌리 추출물의 tyrosinase 및 MITF mRNA 저해율은 동일 농도에서 각각 10, 20\( \% \) 로 나타나 낮은 저해활성을 보여주었다.</p><p>이상의 결과를 통해 어리연꽃 추출물이 cAMP/PKA 경로에서 cAMP, PKA의 발현 저해를 통해 멜라닌 생성 관련 인자인 tyrosinase, TRP-1, TRP-2, MITF 단백질 및 유전자들의 발현을 효과적으로 저해하여 멜라닌 생성을 억제하는 것으로 사료된다. 따라서 어리연꽃 추출물은 기능성 미백 소재 개발에 응용할 수 있는 우수한 소재가 될 것이다.</p>
MC1R의 활성화를 통해 cAMP의 농도가 유지되는 것이 옳은가?
NO