<h2>Cell viability 측정</h2><p>세포가 flask에서 confluence 상태가 되면 96-well plate에 \( 5 \times 10^{4} \) cells/well로 seeding하여 세포를 부착시키기 위해 \( 37{ }^{\circ} \mathrm{C} \)에서 4 시간 배양한 후, \( \mathrm{MeOH} \) 추출물과 \( \mathrm{Hx} \) 분획물은 최종농도가 0.05, 0.25, 0.5,1 \(\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 가 되도록 처리하였고, \( \mathrm{BuOH} \), \( \mathrm{EtOAc}\), MC 분획물은 최종농도가 5, 25, 50, 100 \(\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)가 되도록 처리하여 2 시간 배양하였다. 실험에 사용된 각 시료의 처리농도는 사전 연구를 통해 독성이 없는 농도 범위로 정하였다. \( \mathrm{A}_{25-35}\) \((25 \mu \mathrm{M}) \) 를 처리하여 24시간 배양 후, 각 well에 \( 5 \mathrm{mg} \) / \( \mathrm{mL} \) 의 MTT \( 200 \mu \mathrm{L} \) 씩을 주입하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 4 시간 재배양하였다. 4시간 후 MTT를 제거하고 DMSO \( 200 \mu \mathrm{L} \) 을 각 well에 주입하여 생성된 formazan 결정을 30 분간 빛이 차단된 상태에서 녹여 \( 540 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다.</p><h2>Reactive oxygen species (ROS) 측정</h2><p>세포가 flask에서 confluence 상태가 되면 \( 5 \times 10^{4} \mathrm{cell} / \mathrm{mL} \) 로 96-well black plate에 seeding하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 4 시간 배양하였다. 배양 후 세포가 부착되면 시료를 각 농도 별로 2시간 처리한 후 산화적 스트레스 유발을 위한 \( \mathrm{A}_{25-35}\) \((25 \mu \mathrm {M}) \)를 첨가하여 24 시간 배양하였다. \( 20 \mu \mathrm{M} \)의 DCF-DA용액 \( 200 \mu \mathrm{L} \)를 각 well에 주입하여 30분간 배양 후 FLUO star OPTIMA (BMG labtech, Ortenberg, Germany) excitation-480 nm, emission-535\( \mathrm{nm} \) 를 이용하여 ROS 생성량을 측정하였다.</p><h2>통계 분석</h2><p>대조군과 각 시료의 실험 결과들은 평균 \( \pm \) 표준편차로 나타내었으며, 각 실험 결과로부터 ANOVA (analysis of variance)를 구한 후 Duncan's multiple test \( (p<0.05) \) 를 이용하여 각 군의 평균 값들에 대한 유의성을 검정하였다.</p>
ANOVA를 구한 뒤에 어떤 테스트를 이용해서 평균 값에 대한 유의성을 검사한 거야?
Duncan's multiple test