<h1>재료 및 방법</h1><h2>시료제조 방법</h2><p>본 실험에 사용된 시료는 중국 사천지역에서 재배되어 수입된 황련(Coptis chinensis Franch.)의 근경으로서 동국대학교 부속한방병원에서 구입하여 정선한 뒤 흐르는 물에 세정한 다음, 일정한 크기로 자른 후 그늘에서 건조시킨 후 분쇄하여 \( -30^{\circ} \mathrm{C} \) 의 냉동고에 보관하였다. 건조된 시료 \( 200 \mathrm{~g} \) 을 이온교환수지를 통과시킨 3 차 증류수 \( 2 \ell \) 와 함께 중탕 플라스크에 넣고 120 분간 가열하여 열수추출한 다음 여과한 여액을 rotary vacuum evaporator롤 이용하여 농축한 다음 \( -30^{\circ} \mathrm{C} \) 에 냉동 보관하여 사용하였다.</p><h2>실험재료</h2><p>이 실험에 사용된 모든 화학물질은 상업적으로 이용이 가능한 것이다. Linoleic acid는 Fruka Chemie AG (Swit-zerland)에서 구입한 것으로 함유된 성분의 비율은 linoleic acid \( 55 \% \), oleic acid \( 35 \% \), 기타 \( 10 \% \) 이다. 황련의 항산화 활성과의 비교를 위한 기존의 항산화제로는 BHT,\( \alpha \)-tocopherol, ascorbic acid를 사용하였다. BHT (buthylated hyd-roxytoluene)는 Ueno Co.(Japan)에서 구입한 순도 \( 99 \% \) 의 것을 사용하였고, \( \alpha \)-tocopherol은 Roche Co.(Switzerland) 에서 구입한 순도 \( 95 \% \) 의 것을 사용하였으며, ascorbic acid 는 Dakeda Co. (Japan)에서 구입한 순도 \( 99 \% \) 을 사용하여 각각 \( 1 \% \) 농도로 조제하여 사용하였다. 황련의 금속이온 봉쇄효과를 측정하기 위하여 사용된 \( \mathrm{Fe}^{3+} \) 빛 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) ion은 농도 \( 1000 \mathrm{ppm} \) 의 \( \mathrm{FeCl}_{3} \) 및 \( \mathrm{ZnCl}_{2} \) 표준용액을 사용하였다.</p><h2>Peroxide value (POV)의 측정방법</h2><p>Hayase 등의 방법에 따라 과산화물가(Peroxide value, POV) 를 측정하여 항산화성의 지표로 하였다. 즉 \( 250 \mathrm{ml} \) 용 삼각플라스크에 linoleic acid \( 1 \mathrm{~g} \) 과 에탄올 \( 20 \mathrm{~m} \ell \) 및 \( 5, 10,25 \mathrm{mg} \) 의 시료를 첨가 후 \( 0.2 \mathrm{M} \) 인산 완충액( \(\mathrm{pH} 7.0)\) \(2.5 \mathrm{m \ell} \)를 주입하여 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 의 배양기에 48 시간 저장 후 분액 깔대기에 옮겨 chloroform \( 25 \mathrm{m\ell} \) 를 가한 뒤에 하층부만 취하였다. 이 용액에 빙초산 \( 25 \mathrm{m\ell} \) 와 포화 \( \mathrm{KI} \) 용액 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 주입후 5분간 방치시켜 증류수 \( 50 \mathrm{m\ell} \) 를 가한 다음 전분 용액 \( 1 \mathrm{m\ell} \) 를 가하여 \( 1 / 100 \mathrm{~N}\) \(\mathrm{Na} \mathrm{S}_{2} \mathrm{O}_{3} \) 용액으로 적정하여 아래 식에 의거 POV 를 산출하였으며, 또한 대조구로서 기존 항산화제를 시료 대신 첨가하여 동일한 방법으로 항산화성을 측정하였다.</p><p>POV \( (\mathrm{meq} / \mathrm{kg})=\frac{S \times \mathrm{F} \times \mathrm{N} \times 1000}{\text { linoleic acid }(\mathrm{g})} \)</p><p>\( \mathrm{S}: 1 / 100 \mathrm{~N}\) \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{S}_{2} \mathrm{O}_{3} \) 용액의 소비량</p><p>\( \mathrm{F}: 1 / 100 \mathrm{~N}\) \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{S}_{2} \mathrm{O}_{3} \) 용액의 factor</p><p>\( \mathrm{N}: \mathrm{Na}_{2} \mathrm{S}_{2} \mathrm{O}_{3} \) 용액의 노르말 농도</p>
본 실험에서 시료를 \( -30^{\circ} \mathrm{C} \) 도의 온도로 보관했어?
YES