<h2>\( \mathrm{PGE}_{2} \) 생성 억제 활성</h2><p>\( \mathrm{PGE}_{2} \)는 체내 면역반응의 조절자로서의 대식세포에서 TNF-\( \alpha\), IL- \( 1 \beta \), IL-\( 8 \), IL-\( 12 \) 등의 염증성 사이토카인의 생성을 억제하고, IL-\( 10 \)과 같은 항염증성 사이토카인의 생성을 촉진하는 등 면역반응에 중요한 역할을 수행한다[29]. 그러나 체내 염증과정에서 COX-\( 2 \)에 의해 과잉 생산되는 \( \mathrm{PGE}_{2} \)는 혈관 확장, 부종, 발열, 통증 등을 매개 함으로써 염증의 심화에 관여하는 것으로 보고되었으며, angiogenesis를 촉진하는 등 암 발생에도 깊이 관여하는 것으로도 알려져 있다, 이에 본 실험은 LPS 자극에 의해 유도된 RAW \( 264.7 \) 세포에서 DLB가 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성에 미치는 영향을 조사하기 위해 수행되었다. 실험 결과, DLB는 LPS 단독 처리군 대비 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성을 \( 27.1 \pm 3.7,43.4 \pm 0.9,55.3 \pm 0.7 \% \)억제하였으며, DL을 처리한 RAW264.7에서는 유의한 감소경향이 관찰되지 않았다. 따라서 DLB는 biorenovation 과정을 통해 기존의 추출물 대비 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 생성 억제 효능이 향상되었으며, \( \mathrm{PGE}_{2} \) 생성 억제를 통한 염증 반응의 개선에 기여할 수 있을 것으로 사료된다.</p><h2>iNOS 및 COX-\( 2 \) 발현 억제</h2><p>염증 유도 유전자인 iNOS 및 COX-2는 염증과 같은 병적인 환경에서 대식세포 등 면역 관련 세포의 활성을 유도하여 염증반응을 일으키는 원인 물질로 알려져 있다. 그 중 \( \mathrm{NO} \)는 고 반응성의 생체 생성 radical의 일종으로, 대표적인 염증 반응의 지표로서 알려져 있는데, 염증 반응에서 생성되는 \( \mathrm{NO} \)는 대부분 iNOS의 작용에 의해 L-arginine과 \( \mathrm{O}_{2} \)로부터 합성된다고 보고되었으며, 이는 iNOS의 발현이 \( \mathrm{NO} \)의 생성과 밀접한 연관이 있음을 시사한다. 또한 COX-2는 염증반응에 관여하는 중요 인자 중 하나인 COX의 inducible isoform으로, 병리학적 염증반응에서 급성적으로 발현되어 통증, 발열에 관여하는 염증 매개체인 \( \mathrm{PGE}_{2} \)를 합성함으로써 염증반응에 관여하고 다양한 난치성 질환을 유발하는 것으로 알려져 있다. 따라서 iNOS 및 COX-\( 2 \) 유전자 발현은 \( \mathrm{NO} \) 및 \( \mathrm{PGE}_{2} \)에 의해 염증성 매개물들이 과잉 생성되는 중요한 메커니즘이며, 만성적인 염증 반응을 예방하기 위해 정확하게 제어 되어야 한다. 이에 본 실험에서는 \( \mathrm{NO} \)와 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성에 관여하는 iNOS및 COX-2 단백질의 발현에 DLB가 미치는 영향과 이들의 상관관계를 조사하고자 western blot assay를 수행하였다. LPS \( (1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \)로 자극한 RAW \( 264.7 \) 세포에 DL및 DLB를 \( 6.25,12.5,25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도로 처리하여 \( 24 \)시간 염증을 유도한 후 iNOS 및 COX-\( 2 \)의 발현을 확인한 결과, DL을 처리한 RAW \( 264.7 \)세포에서는 LPS 단독 처리군 대비 유의적인 감소 활성이 확인되지 않은 반면 DLB를 처리한 RAW 264.7세포에서는 iNOS의 발현이 유의하게 감소하는 것을 확인 하였다. 또한 DLB에 의한 iNOS의 발현 감소와 \( \mathrm{NO} \) 억제 경향이 유사한 것으로 보아 \( \mathrm {NO} \)감소활성이 iNOS의 발현과 밀접한 관련이 있음을 확인 하였다. 마찬가지로 DLB를 처리한 RAW \( 264.7 \)세포에서 COX-\( 2 \)의 발현을 유의하게 억제되었으며, 그 경향이 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 감소 경향과 유사함을 확인하였다. 이와 같은 결과를 바탕으로 DLB의 \( \mathrm{NO} \) 및 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 억제 활성은 iNOS와 COX-\( 2 \)의 유전자 발현감소로부터 기인한 것이며, 이들의 작용 기전을 표적으로 하는 효과적인 항염증 소재라 사료된다.</p><h2>전염증성 사이토카인 생성 억제</h2><p>염증매개인자에 의해 활성화된 대식세포가 생성 및 분비하는 전염증성 사이토카인은 다른 cytokines의 생성을 유도함으로써 초기 염증 반응에 중요한 역할을 한다. 그 중 TNF-\( \alpha\), IL-\( 6 \), IL- \( 1 \beta \)가 대표적인 전염증성 사이토카인으로, 전신적 염증 반응 시 증가하여 전사 인자인 NF-\( \kappa \)B를 활성화 시키고, 결과적으로 \( \mathrm{NO} \), \( \mathrm{PGE}_{2} \)를 비롯한 다른 사이토카인의 생성을 증가 시켜 염증반응을 지속시키는 것으로 알려져 있다. 이에 본 실험에서는 LPS 자극에 의해 유도된 RAW \( 264.7 \) 세포에서 증가한 전염증성 사이토카인 생성에 DLB가 미치는 영향을 조사하였다. LPS \( (1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \)로 유도된 RAW \( 264.7 \) 세포에 DL과 DLB를 \(6.25, 12.5,25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도로 처리한 결과, DL추출물은 전염성 사이토카인에 대한 억제 활성을 보이지 않은 반면 DLB 처리군은 LPS 처리군 대비 TNF-\(\alpha \)를 \( 18.3 \pm 6.2,27.0 \pm 2.6,37.9 \pm 3.1 \% \),IL-\(6 \)를 \( 37.8 \pm 1.2, 50.2 \pm 2.4, 63.8 \pm 1.3 \%\), IL- \( 1 \beta \)를 \( 15.5 \pm 2.2 \, 32.2 \pm 2.6, 47.4 \pm 1.5 \% \)로 유의한 억제 활성을 나타내었다. DLB는 DL에 비해 항상된 억제 활성을 보였으며, IL-\(6 \)를 가장 효과적으로 억제하는 항염증 활성을 나타냄을 확인하였다.</p>
DLB를 처리하는 것은 iNOS 발현에 도움을 줘?
NO