<h1>재료 및 방법</h1><h2>공시재료</h2><p>제주도에서 사육중인 제주마(천연기념물 347호) 73두로부터 채혈한 혈액을 원심분리한 후 혈청 \( 40 ~ \mu \mathrm{l} \) 와 dithiothreitol (\( 100 ~ \mathrm{mg} / 2.56 ~ \mathrm{ml} \) distilled water) \( 20 ~ \mu \mathrm{l} \), iodoacetoamide (\( 4.6 ~ \mathrm{mg} / 1 ~ \mathrm{ml} \) distilled water) \( 40 ~ \mu \mathrm{l} \) 을 혼합하여 전처리한 후 전기영동에 이용하였다.</p><h2>Esterase의 유전적 다형분석</h2><p>혈청단백질인 esterase의 유전적 다형분석은 Yokohama 와 Mogi 의 등전점 방법을 응용하였다. 겔의 제작은 ACES \( 117.3 ~\mathrm{mg} \), stock sol. (\( 29 \% \) acrylamide \( 57.1 ~ \mathrm{ml} \), \( 0.9 \% \) bis acrylamide \( 97.3 ~ \mathrm{ml} \), saccharose \( 35 ~ \mathrm{g} \), glycerol \( 5 ~ \mathrm{ml} \) 에 distilled water를 가하여 \( 235 ~ \mathrm{ml} \) 제조) \( 13.0 ~\mathrm{ml} \), pharmalyte (\( \mathrm{pH} ~ 4-6.5 \)) \( 0.4 ~ \mathrm{ml} \), servalyte (\( \mathrm{pH} ~ 4-6.5 \)) \( 0.3 ~\mathrm{ml} \) 을 혼합하여 녹인 후 ammonium persulfate \( 0.35 ~ \mathrm{ml} \) 을 혼합하여 겔을 제작하였다.</p><h2>전기영동</h2><p>시료와 영동 buffer anode (\(0.04 ~\mathrm{M} \) DL-glutamic acid) 와 cathode (\(0.2 ~\mathrm{M} \) L-histidine)를 filter paper (TOYO No. 526) 에 묻혀서 겔상에 loading한 후 \( 2.5 ~ \mathrm{W} \) 에서 15 분간 영동하여 시료의 filter paper를 제거한 후 4 시간동안 영동하였다.</p><h2>염색 및 판독</h2><p>염색액은 stock sol .(\( 0.19 ~ \mathrm{M} \) trisaminomethane \( 98.6 ~ \mathrm{g} \), \( 0.05 ~ \mathrm{M} \) citric acid monohydrate \( 60 ~ \mathrm{g} \) 을 distilled water에 녹임) \( 350 ~ \mathrm{ml} \), \( \alpha \)-naphthyl acetate \( 8 ~ \mathrm{ml} \), fast blue B salt \( 30 ~ \mathrm{mg} \) 을 혼합하여 약 2 분간 염색시켜 distilled water로 세척한 다음 건조시킨 후 결과를 판독하였다.</p>
실험에서 채혈한 혈액은 제주마 몇 두로부터 얻은 거야?
73두