<h2>Aminopropyl SPE 정제조건 설정</h2><p>2,4,6 -TCP 분해 밎 분배액에 잔존한 분석 방해물질 제거를 위해 \( \mathrm{NH}_{2} \mathrm{SPE} \) (solid phase extraction) cartridge을 활용한 추가 정제 조건을 검토하였으며, 고기류에 한해 조건을 확립하였다. \( \mathrm{NH}_{2} \mathrm{SPE} \) cartridge \( (1 \mathrm{~g}\) , \(6 \mathrm{cc}) \) 는 dichloromethane \( 10 \mathrm{~mL} \) 로 활성화시킨 후 2,4,6 -TCP 표준용액 \( 1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}\), \(1 \mathrm{~mL} \) 를 질소 건고한 다음 dichloromethane \( 5 \mathrm{~mL} \) 로 재용해한 용액을 카트리지에 첨가하였다. 최적의 용출조건을 확립하기 위해 methanol/ dichloromethane 혼합액, acetone, methanol, n-hexane 밎 \( 1 \% \) formic acid를 함유한 methanol으로 용출시켜 회수율을 확인하였다.</p><h2>분석정량현계 및 회수율 확인</h2><p>Prochloraz 분석을 위한 각 세부 전처리법을 확정한 후 ILOQ, 시료채취량, 시험용액 부피, 분석조작에 따른 희석 또는 농축배수를 고려하여 전체 분석법의 분석정량한계(Method limit of quantitation, MLOQ를 산출하였다. 확정된 전처리 방법 밎 기기분석법에 따른 prochloraz 잔류분석의 정확성과 정밀성을 확인하기 위해 회수율 실험을 실시하였다. 표준용액 첨가법에 따라 처리수순이 MLOQ 및 MLOQ의 10배가 되도록 prochloraz 표준용액을 소고기, 돼지고기, 닭고기, 우유 및 계란 \( 10 \mathrm{~g} \) 에 첨가하였다. 고기류의 경우 acetone \( 100 \mathrm{~mL} \) 를 첨가 후 \( 200 \mathrm{rpm} \) 에서 30 분간 진탕 추출한 후 filter paper가 깔려있는 뷰흐너 깔때기로 감압여과한 다음 잔사를 acetone \( 50 \mathrm{~mL} \) 로 세척하였다. 추출액에 \( 2 \% \) diethylene glycol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) 을 첨가하고 감압 농축한 후 acetonitrile에 포화된 \( n \)-hexane \( 50 \mathrm{~mL} \) 로 재 용해하여 \( n \) -hexane에 포화시킨 \( 1 \% \) formic acid 함유된 acetonitrile \( 50 \mathrm{~mL} \) 를 이용해 2번 분배 후 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 수욕상에서 감압 농축하였다. 우유 및 계란의 경우 추출용매 acetone \( 20 \mathrm{~mL} \) 첨가 후 \( 200 \mathrm{rpm} \) 에서 30 분간 진탕 추출하고, \( 3500 \mathrm{rpm} \) 에서 5 분간 원심분리한 후 상등액을 분액여두로 옮겨 증류수 \( 250 \mathrm{~mL} \) 와 포화식염수 50 \( \mathrm{mL} \) 를 넣고 dichloromethane \( 50 \mathrm{~mL} \) 로 두 번 분배하였다. 분배액을 sodium sulfate, anhydrous을 통과시켜 탈수한 후 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 수욕상에서 감압 농축하였다. 감압농축 후 잔사 고형물을 dichloromethane \( 10 \mathrm{~mL} \) 로 재용해한 후 그 중 \( 1 \mathrm{~mL} \) 를 분해용 vial에 옮기고 \( 2 \% \) diethylene glycol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) 첨가한 후 질소 농축하였다. 분해용 vial에 pyridine hydrochloride \( 5 \mathrm{~g} \) 을 첨가하고 \( 220^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 1 시간 분해 후 상온에서 방치한 다음 \( 0.2 \mathrm{M} \) \( \mathrm{HCl} \) 수용액 \( 20 \mathrm{~mL} \) 재 용해하고 분액여두로 옮겼다. 증류수 \(100\) \( \mathrm{mL} \) 와 포화식염수 \( 50 \mathrm{~mL} \) 를 첨가하고 dichloromethane \( 50 \mathrm{~mL} \) 으로 \(2\) 번 분배한 후 sodium sulfate, anhydrous을 통과시켜 탈수하고 \( 2 \% \) diethylene glycol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) 를 첨가한 다음 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 수욕상에서 감압 농축하고 ethyl acetate \( 2 \mathrm{~mL} \) 로 잔사 고형분을 재 용해하여 기기 분석하였다. 닭고기의 경우 추가정제가 필요하여 위의 잔사를 dichloromethane \( 5 \mathrm{~mL} \) 에 재용해하여 dichloromethane \( 10 \mathrm{~mL} \) 로 활성화시킨 \( \mathrm{NH}_{2} \) cartridge \( (1 \mathrm{~g}\) ,\( 6 \mathrm{cc}) \) 에 loading하였다. Methanol \( 10 \mathrm{~mL} \) 를 흘려 세척하여 버린 후 \( 1 \% \) formic acid를 함유한 methanol을 \( 10 \mathrm{~mL} \) 용출하여 받아 질소 농축하여 ethyl acetate \( 2 \mathrm{~mL} \) 로 재용해하여 기기 분석하였다. 이 과정을 3번 반복 실험하여 축산물별 처리수준별 회수율을 산출하였다.</p>
본 실험에서 무엇을 이용하여 2,4,6 -TCP를 분해하고 분배액에 잔존한 분석 방해물질을 제거하였는가?
\( \mathrm{NH}_{2} \mathrm{SPE} \) (solid phase extraction) cartridge