<h2>분석법 유효성 검증</h2><p>유효성분 화합물로 선정된 [6]-gingerol의 직선성 검증을 위한 표준시료 농도 범위는 \( 0-100 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) 이었으며, 8개 농도로 희석하여 표준용액을 UPLC-PDA를 이용하여 [6]-gingerol 최대흡광도 부근의 UV \( 230 \mathrm{~nm} \) 에서 3반복 분석하였다. [6]-gingerol 검량곡선의 직선성에 대한 회귀방정식은 \( \mathrm{y}=12535 \mathrm{x}+6639.4 \) 이었고 결정계수 \( \left(\mathrm{R}^{2}\right) \) 는 \( 0.9917 \) 로 해당 분석조건 하에서 높은 직선성을 나타내었다. 직선성을 나타내는 범위 내에서 [6]-gingerol의 LOD 값과 LOQ값은 각각 \( 0.90 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) 과 \( 2.73 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) 이었다.(Table 2). 그리하여, 타겟 판별 화합물 [6]-gingerol 분석법은 유효성검증을 통하여 직선성 및 정밀도, 반복성, 재현성을 지닌 것으로 확인되었다.</p><h2>UPLC-PDA 분석을 통한 타겟 판별 화합물 정량 및 크로마토그램 비교분석</h2><p>한국산 반하(5종)와 중국산 반하(8종)을 각각 \( 94 \% \) 에탄올로 추출하였고, fingerprint 분석방법을 통해 한국산 판별 화합물을 확인하기 위해 UPLC-PDA (UV \( 230 \mathrm{~nm} \) )에서 시료당 13분 동안 분석을 실시하였다. 한국산과 중국산 반하 추출물의 크로마토그램을 overlay하여 비교한 결과, retention time 4.45분에 나타난 메인 화합물 [6]-gingerol의 피크가 한국산 반하에서 중국산 반하에 비해 특이적으로 큰 피크 면적을 나타내었다(Fig. 3). 한국산과 중국산 반하의 타겟 판별 화합물 [6]-gingerol 함량 비교를 위해 검량곡선 회귀방정식을 이용하여 각 시료 별로 그 함량을 구하였다. UPLC-PDA 크로마토그램(UV \( 230 \mathrm{~nm} \) )에서 타겟 판별 화합물의 피크 적분값을 검량식에 대입하여 함량을 구하였고, 시료 별로 [6]-gingerol의 함량을 평균값과 표준편차로 나타내었다(Table 3).</p><p>한국산과 중국산 반하의 타겟 판별 화합물 [6]-gingerol 함량비교를 위해 검랑곡선 회귀방정식을 이용하여 각 시료 별로 그 함량을 구하였다. UPLC-PDA 크로마토그램(UV \( 230 \mathrm{~nm} \) )에서 타겟 판별 화합물의 피크 적분값을 검량식에 대입하여 함량을 구하였고, 시료 별로 [6]-gingerol의 함량을 평균값과 표준편차로 나타내었다(Table 3).</p><p>한국산과 중국산 반하의 [6]-gingerol의 함량을 분석한 결과, 한국산은 5 종 중에서 제주도에서 재배된 반하 2종(KPT-1, KPT-2)과 서산에서 재배된 반하(KPT-4)에서 각각 \( 0.58 \pm 0.05,0.60 \pm 0.07 \), \( 0.31 \pm 0.03 \mathrm{~g} / 100 \mathrm{~g} \) 의 함량을 나타내었다. 대부분의 중국산의 경우, [6]-gingerol의 함량이 미비하지만 8종 중에 3종(CPT-1, CPT-2, CPT-8)에서 정량한계 범위 내에서 타겟 판별 화합물의 함량을 구할 수 있었으며, 이들은 각각 \( 0.03 \pm 0.01,0.07 \pm 0.02 \), \( 0.08 \pm 0.02 \mathrm{~g} / 100 \mathrm{~g} \) 의 함량을 나타내었다. 한국산 중 제주도 및 서산 지역의 반하와 [6]-gingero이 검출된 중국산 반하의 [6]-gingerol 대사체의 함량을 비교한 결과, 한국의 제주도 및 서산에서 재배된 반하가 [6]-gingerol이 확인된 중국산에 비해 함량이 12 배 높은 것을 확인하였다. 그러므로 반하의 미백 바이오 마커인 [6]-gingerol은 함유량이 높게 나타난 한국 제주도 및 서산 지역의 반하가 수입된 중국산 반하보다 미백 기능성화장품 소재로 적합성 나타내었다.</p><p>결론적으로 일부 한국산 반하에 대한 미백 바이오 판별 마커로 선정된 [6]-gingerol은 추출물 및 칼럼분획물에서 가장 많은 양으로 함유된 단일성분으로 확인되었고, 유효성이 검증된 UPLC-PDA 크로마토그램을 통해 한국산과 중국산 반하를 비교 한 결과, retention time \( 4.45 \) 분에 나타난 메인 화합물 [6]-gingerol의 피크 면적이 한국의 제주도 및 서산 지역의 반하에서 대부분의 중국산 반하에 비해 특이적으로 큰 피크 면적을 나타냄을 확인하였다. 따라서, [6]-gingerol은 한국산 판별 마커 및 QC (quality control)를 위한 활용 가능성이 있음을 확인하였고, fingerprint 분석방법을 이용한 유효성분 비교 결과에서도 melanin 저해활성과 판별 대사체 활용 가능성을 동시에 만족시키는 중요한 미백 바이오 판별 마커로 확인되었다. 특히, 한국의 제주도와 서산에서 재배된 반하의 경우, [6]-gingerol의 함량이 일반적인 중국산에 비해 12 배 높은 함량을 나타냄을 최종 확인하였다. 그러므로 [6]-gingerol의 함량이 높은 한국산 지역의 반하를 기능성 미백 화장품 소재 원료로 개발하는 것이 더욱 합리적일 것으로 생각된다.</p>
유효성분 화합물로 선정된 [6]-gingerol의 직선성 검증을 위한 표준시료 농도 범위는 무엇인가요?
\( 0-100 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)