<h2>Pro-adipogenic regulator에 대한 platycodin D의 효과</h2><p>3T3-L1 전지방세포에서 지방세포로의 분화의 조절은 adipogenesis 17 anti-adipogenic regulators 3adipogenesis를 유도하는 pro-adipogenic regulators의 조절에 의해 이루어진다. CHOP (C/EBP homologous protein)이나 C/EBP\( \gamma \)와 같은 anti-adipogenic regulators은 전지방세포에서 높게 발현되어 있다가 분화가 유도되면 급격하게 감소하게 된다. 이와는 달리 C/EBP\( \beta \), C/EBP\( \delta \), KROX20 및 KLF (Kruppel-like factor)15와 같은 pro-adipogenic regulators은 전지방세포에서 억제되어 있다가 분화가 유도되면서 크게 증가하는 양상을 보인다. Platycodin D가 어떤 인자들을 조절하여 PPAR\( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)의 mRNA 발현을 억제하는지 밝히기 위해 두 유전자의 상위에 위치한 조절자들의 mRNA 발현을 살펴보았다. Fig. 4는 PPAR\( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)의 상위에 위치하는 pro-adipogenic regulator들의 mRNA 발현이 지방세포 분화 시 platycodin D의 처리에 의해 어떻게 변화되는지 보여준다. 그 중 C/EBP\( \beta \)와 C/EBP\( \delta \)의 mRNA 발현은 platycodin D에 의해 크게 변하지 않았으나, KROX20과 KLF15의 mRNA 발현은 유의하게 감소되었다.</p><p>초기 분화에서 발현되는 C/EBP\( \beta \)C/EBP\( \delta \)는 C/EBP\( \alpha \)와 PPAR\( \gamma \)의 상위에서 mRNA 발현을 조절하는 것으로 알려져 있다. Tanaka 등은 C/EBP\( \beta \)와 C/EBP\( \delta \)가 제거된 마우스에서 지방세포가 형성되지 않음을 보고함으로써 지방세포의 형성 에서 두 유전자의 중요성을 증명하였다. 그러나 이번 연구 에서 platycodin D의 첨가는 C/EBP\( \beta \)와 C/EBP\( \delta \)의 mRNA 발현에 크게 영향을 주지 못했다. 이러한 결과는 platycodin D에 의한 anti-adipogenesis효과가 C/EBP\( \beta \)와 C/EBP\( \delta \)에 비의존적으로 작용하여 PPAR\( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)의 발현을 조절함을 제시한다.</p><p>KLF family는 세포의 발생, 분화 및 활성을 조절한다고 알려져 있다. KLF family에 속하는 KLF15는 pro-adipogenic regulator로써 지방세포 형성에 깊게 관련되는 것으로 알려져 있다. PPAR\( \gamma \)의 상위 조절자인 KLF15는 후가 분화에서 PPAR\( \gamma \)의 promoter에 결합하여 전사를 조절하는 것으로 알려져 있는데 최근에는 terminal marker인 GLUT4의 발현을 직접 조절한다고 보고되고 있다. 이번 연구에서 KLF15의 mRNA 발현은 분화 전 세포에 비해 4일간 분화 된 세포에서 450배 이상 증가되었다. 그러나 분화 시 증가되는 KLF15의 mRNA 발현은 platycodin D의 처리에 의해 유의적으로 억제 되었다. 이러한 결과는 platycodin D가 분화의 후기에서 KLF15의 mRNA 발현을 조절하여 adipogenesis의 핵심 인자인 PPAR\( \gamma \)의 억제함을 보여준다.</p><p>Zinc finger를 가진 전사 인자, KROX20은 in vivo 상태의 지방 조직에서는 높게 발현되지만 in vitro 상태의 완전히 분화된 3T3-L1 세포에서는 발현되지 않는다. KROX20은 adipo-genesis시 호르몬에 의해 가장 일찍 발현되는 pro-adipogenic factor 중 하나이다. C/EBP\( \beta \)의 상위에 위치한 KROX20은 과다 발현하였을 때 C/EBP\( \beta \)의 발현을 증가시키고 adipogenesis 를 유도하지만 또 한편으로는 C/EBP\( \beta \)에 비의존적으로 adi-pogenesis을 조절한다고 보고하고 있다. 본 연구에서 KROX20의 mRNA 발현은 Fig. 4D에서 분화 초기(2일)에 크게 증가하지만 platycodin D의 첨가에 의해 유의하게 감소됨을 보였다. Fig. 4A에서 C/EBP\( \beta \)가 platycodin D의 첨가에 의해 영향을 받지 않았으므로, platycodin D에 의한 KROX20의 mRNA 발현 감소는 C/EBP\( \beta \)에는 영향을 미치지 않고 C/EBP\( \beta \)에 비의존적인 효과를 보임을 알 수 있다.</p><p>Fig. 4의 결과들은 platycodin D가 유도하는 anti-adipo-genesis의 효과가 PPAR\( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)의 상위에 위치하는 proadipogenic regulator에 의해 조절됨을 제시한다. 또한, 그 중에서도 C/EBP\( \beta \)와 C/EBP\( \delta \) 보다는 KROX20과 KLF15가 platycodin D의 첨가에 의해 각각 분화의 초기와 후기에 억제되어 platycodin D가 유도하는 adipogenesis 억제 효과에 관여하는 것으로 보여진다. 
C/EBPα와 PPARγ의 상위에서 mRNA 발현을 조절하는 것은 무엇인가?
C/EBP\( \beta \)C/EBP\( \delta \)