<p>ROS는 체내 정상적인 산화과정 중에 생성되나, 과량 생성 시 높은 반응성을 갖는 성질로 인해 세포의 지질, 단백질, 핵산 등의 손상을 일으킨다. 본 연구에서 DCF-DA assay를 이용하여 산화적 손상이 유도된 C6 glial cell의 ROS 생성량을 측정한 결과(Fig. 2), 60 분 기준으로 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 만을 처리한 control군의 경우 normal군보다 유의적으로 높은 ROS 생성량을 나타내어 세포의 산화적 손상이 유발되었음을 확인하였다. 반면 G. uralensis, G. glabra, SW 등 3가지 감초 추출물을 처리하였을때, control군보다 유의적으로 낮은 ROS 생성량을 나타내었고, 특히 50 과 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 SW 추출물은 다른 감초 추출물에 비해 유의적으로 가장 낮은 ROS 생성량을 확인하였다. 또한, 본 연구에서 5, \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 G. uralensis 추출물은 G. glabra 추출물에 비해 유의적으로 ROS 생성량이 낮았다. 이는 이전 연구에서 G. uralensis 추출물과 G. glabra 추출물의 in vitro ROS 소거능을 측정한 결과, G. uralensis 추출물의 ROS 소거능이 더욱 우수하게 나타나 본 결과와 유사함을 알 수 있었다. 뿐만 아니라 본 연구에서 SW 추출물은 G. uralensis 및 G. glabra 추출물에 비해 유의적으로 낮은 ROS 생성량을 나타내어, ROS 생성 억제 효과를 통한 항산화 활성을 확인할 수 있었다. 감초의 대표적인 활성성분은 glycyrrhizic acid, liquiritin, liquiritigenin, isoliquiritigenin, licochalcone A 등의 생리활성성분을 함유하는 것으로 보고되었다. 이전 연구에 의하면, 감초의 활성성분인 glycyrrhizic acid는 산화적 손상이 유도된 신경세포에서 항산화 효소 활성 증가를 통해 ROS 소거능을 나타내었으며, isoliquiritigenin과 glycyrrhizic acid는 산화적 손상을 유도한 신경교세포에서 ROS 생성 억제 효과를 통해 신경교세포 보호 효과가 보고되었다. 따라서 이들 생리활성 성분들의 작용으로 인해 ROS 소거를 통한 산화적 스트레스 개선 효과를 나타내는 것으로 사료된다.</p><p>세포의 산화적 손상 시, iNOS는 hepatocytes, smooth muscle cells, bone marrow cells, monocytes, macrophages 등 다양한 세포에서 발현되어 다량의 NO를 생성시키고 세포독성, 유전자 변이, 신경손상, 조직손상 등을 일으켜 염증반응을 악화시킨다. COX는 arachidonic acid로부터 prostaglandins (PGs)을 생합성하는 효소로 COX-1과 COX-2 두 가지의 isoform으로 존재한다. COX-1은 체내 대부분의 조직에 항상 발현되어 있어 혈소판 형성, 위장 세포 보호 및 신장 기능 유지 등의 생리적인 역할을 통해 체내 항상성을 조절하는 기능을 하며, COX-2는 손상시 발현된 염증성 cytokine에 유도되어 염증 관련 PGs인 prostglandin E2 를 과량 생성시켜 염증반응을 악화시킨다. 본 연구에서는 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 로 산화적 손상을 유도한 C6 glial cell에 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도로 G. uralensis, G. glabra 및 SW 추출물을 처리하여 염증성 단백질인 iNOS 및 COX-2 단백질 발현을 확인하였다(Fig. 3). Normal군에 비해 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 만을 처리한 control군에서 iNOS, COX-2와 같은 염증성 인자 발현이 유의적으로 증가하여 염증성 자극이 유발되었음을 확인하였다. 그러나, 감초 3종 추출물을 각각 처리한 군의 경우 control군에 비해 유의적으로 낮은 단백질 발현을 나타내어 염증반응에 대한 보호 효과를 확인하였다. iNOS 단백질의 경우 SW 처리군이 가장 낮은 발현을 나타내었으며, COX-2 단백질은 G. uralensis 처리군이 가장 낮은 단백질 발현을 나타내었다. 따라서 G. uralensis, G. glabra 및 SW 등 3가지 감초 추출물은 iNOS 및 COX-2 단백질 발현 조절을 통한 염증반응 개선 효과가 있음을 확인하였다. 이전 연구에 의하면, G. uralensis 및 G. glabra 추출물은 각각 150, 50 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서, LPS로 염증반응이 유도된 Raw264.7 대식세포의 iNOS 및 COX-2 단백질 발현을 유의적으로 억제시켜 염증반응 개선 효과가 보고되었다. 뿐만 아니라, 감초의 대표적인 활성성분인 glycyrrhizic acid, liquiritin, liquiritigenin은 LPS로 신경염증이 유도된 신경교세포에서 iNOS, COX-2와 같은 염증매개인자 발현을 감소시켰으며, TNF-\( \alpha \), IL-1 \( \beta \), IL-6 등의 염증성 cytokines 발현을 유의적으로 감소시켜 신경교세포 보호 효과를 나타냄이 보고되었다. 따라서 본 연구에서 3가지 감초 추출물의 항산화 및 신경교세포 보호 효과는 이들 활성성분의 생리활성 작용으로 인한 것으로 사료된다.</p><p>본 연구에서 G. uralensis, G. glabra 및 SW 등 3가지 감초 추출물의 DPPH, \( \cdot \mathrm{OH}, \mathrm{O}_{2}^{-} \) radical 소거능 측정을 통해 in vitro 항산화 활성을 확인하였고, 특히 SW 추출물은 다른 추출물에 비해 페놀 및 플라보노이드 함량이 높음을 확인하였다. 또한 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 로 산화적 스트레스로가 유도된 C6 glial cell에서 SW 추출물은 다른 감초 추출물에 비해 ROS 생성 억제 및 iNOS 단백질 발현 억제 효과가 높은 것을 알 수 있었다. 따라서 G. uralensis, G. glabra 및 SW 등 감초 추출물은 산화적 스트레스에 대한 신경교세포 보호 효과가 있는 것으로 사료된다.</p>
60 분 기준으로 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 만을 처리한 control군의 경우 normal군보다 유의적으로 높은 ROS 생성량을 나타내어 세포의 무엇이 유발되었음을 확인할 수 있었는가?
산화적 손상