<h1>결 과</h1><h2>RM 시리즈에 의한 SV40 DNA 복제 및 신장 억제 연구</h2><p>DNA 복제에 대한 RM 시리즈 물질인 RM60, RM60 (fr.164-178), RM60 (fr.179-202)의 영향을 SV40 DNA 복제계를 이용하여 조사하였다. RM 시리즈 물질의 양을 증가시키면서 HeLa 세포실 추출물을 이용한 SV40 DNA 복제의 억제 유무를 조사한 결과 RM60 (fr. 164-178)과 RM60 (fr. 179-202)에 비해 RM60의 경우 아주 강하게 농도 의존적으로 억제함을 알 수 있었다.</p><p>Replication 억제 작용 기전을 연구하기 위해 개시(initiation)와 신장(elongation) 단계에 대한 억제 유무를 조사하였다. 실제 DNA-단백질 복합체 형성은 SV40 DNA의 개시를 위한 필수적인 단계이다. 이 복합체는 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 dNTPs 없이 형성되며 replication origin, SV40 T-Ag, ATP, host proteins 등에 의존한다. 단약 dNTPs가 존재할 경우 당연히 DNA의 합성이 일어나게 된다.</p><p>이러한 복제 활성은 ATP 존재 하에 preincubation 전에 RM60과 RM60 (fr. 164-178) 물질을 첨가할 경우 강하게 억제되었다. Preincubation 후에 RM60와 RM60(fr. 164-178) 물질을 첨가할 경우 약하게 억제되었다.</p><h2>RM 시리즈에 의한 pol \( \alpha \)-primase 활성 억제 연구</h2><p>RM60, RM60 (fr. 164-178), RM60 (fr. 179-202) 물질을 대상으로 pol \( \alpha \)-primase의 활성에 미치는 영향을 조사하였다. 이때 RM 60 시리즈 물질이 첨가되지 않은 '0'에서 dTMP 혼입이 약 \( 14 \mathrm{pmol} \)이었다. 그러나 \( 20 \mu \mathrm{g} \) 정도 낮은 농도로 첨가하였을 경우 dTMP 혼입을 증가시켰다. 즉 이러한 결과는 pol \( \alpha \)-primase의 활성을 증가시켰다는을 의미한다. 그러나 \( 60 \mu \mathrm{g} \)의 농도에서는 억제되는 경향으로 보아 bi-phase 양상을 보이는 것으로 사료된다. 본 실험은 3회에 걸쳐 반복하였으나 동일한 결과를 보였기 때문에 이에 대한 자세한 연구가 펄요하다고 사료된다.</p><h2>RM 시리즈에 의한 topoisomerase I 활성 억제 연구</h2><p>세포 독성 실험에 사용하였던 시료들에 대하여 topoisomerase I 호소의 활성에 대한 효과를 검색한 결과, 세포 독성 실험 결과와 유사하게 시료들 중 RM60과 이들의 분획물들에서 topoisomerase I 의 작용을 저해하는 활성이 관찰되었으며, RM60의 분획물 들 중 fr. 179-202의 경우가 fr. 164-178의 경우보다 약간 더 강한 활성이 나타났다.</p>
DNA 복제에 대한 RM 시리즈 물질인 RM60, RM60 (fr.164-178), RM60 (fr.179-202)의 영향을 무엇을 이용하여 조사하였나요?
SV40 DNA 복제계