<h1>결과 및 고찰</h1><h2>B16F10세포내 어리연꽃 추출물의 생존율 평가</h2><p>어리연꽃 추출물의 세포독성을 평가하기 위해 MTT assay를 평가한 결과 Fig. 1과 같이 나타내었다. 추출물의 농도를 5, 10, 25, 50, 75, 100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 로 처리 후 세포 독성을 측정한 결과 5 ,10, 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도까지 90 \( \% \) 이상의 세포 생존율을 나타내었으며 50, 75, 100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서는 80 \( \% \) 미만의 낮은 세포 생존율을 나타내었다. 따라서 본 연구에서 B16F10세포를 이용한 tyrosinase, 멜라닌 생합성, 미백관련 신호전달 단백질 및 \( \mathrm{mRNA} \) 발현 실험은 어리연꽃 추출물 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 이하의 농도에서 실험을 진행하였다.</p><h2>어리연꽃 추출물의 Tyrosinase 및 멜라닌 생합성 저해활성</h2><p>Tyrosinase 저해제는 미백화장품의 주요 기능성 성분으로 임상적으로 피부암과 과색소 침착에 관련되는 피부병 치료에 유효한 것으로 알려져 있다. 따라서 본 연구에서는 먼저 버섯 유래의 tyrosinase를 사용하여 5, 10, 50, 100, 500, 1,000\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 어리연꽃 추출물을 처리하여 효소활성을 측정한 결과 1,000 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 \( 52 \% \) 의 저해능을 나타내었다. 반면 만형자 열수추출물은 동일한 농도에서 46.67 \( \% \)로 다소 낮은 저해효과를 보여주었다. 또한, B16F10 세포에서의 cellular tyrosinase 활성을 억제하는 알아보기 위하여 B16F10세포에 어리연꽃 추출물 5, 10, 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도로 처리한 결과 각각 10, 18, 35\( \% \) 로 농도 의존적 저해능을 나타내었다. 이에 반해 싸리꽃 에탄올 추출물은 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 16.2 \( \% \), 여정자 추출물은 동일 농도에서 26.2 \( \% \)로 다소 낮은 저해활성을 보여주었다. 멜라닌 생합성 저해능을 측정한 결과 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 에서 \( 33 \% \) 의 저해능을 나타내었다(Fig. 2). 반면 연잎 에탄올 추출물의 경우 동일한 농도에서 19.8 \( \% \) (Chang 등, 2007)의 저해활성을 보여주었다. 이러한 결과로 보아 어리연꽃 추출물은 B16F10 세포내에서의 tyrosinase 활성을 저해시킴으로써 멜라닌 생합성 저해에 효능이 있음을 확인 할 수 있었다. 이 3가지의 결과에서 어리연꽃 추출물은 세포내에서 tyrosinase가 작용하는 상위단계 과정에 영항을 미쳐 활성을 억제한 것이라 추정되어 cAMP/PKA 경로의 인자들의 단백질 및 유전자 발현 저해능을 측정하였다.</p>
Tyrosinase 저해제는 어떤 치료에 유효한가?
피부암과 과색소 침착에 관련되는 피부병 치료