<h2>정수공정별 바이러스 제거율 조사</h2><p>실험은 3차 증류수 \( 30\mathrm{l} \)에 \( 2.5 \times 10^{8} \ PFU \)의 에코바이러스, \( 3.5 \times 10^{7} \ PFU \)의 콕사키바이러스, \( 3 \times 10^{7} \ PFU \)의 폴리오바이러스를 각각 첨가시켜 혼합한 후, 정량펌프를 이용하여 \( 3 \mathrm{ml} / \mathrm{min} \)의 속도로 원수 유입조에 주입하였다. 시료 채수는 미국 EPA의 ICR 및 환경부에서 권장하는 표준필터장치를 조합하여 사용하였으며, 시료 채수는 1-MDS filter를 이용하여 원수◦전오존은 \( 200~300\mathrm{l} \)를 침전◦여과◦후오존◦BAC 여과 그리고 정수는 \( 1,600 \mathrm{l} \) 이상을 여과하였다. 채수한 시료의 전처리는 미국EPA의 ICR 방법 및 환경부에서 정한 표준시험방법에 준하여수행하였다. 멸균 튜브가 장착된 연동펌프(peristalticpump)를 사용하여 \( 50 \mathrm{mM} \ glycine \)이 함유된 \( 1.5 \% \) Beef extract 완충액 \( (\mathrm{pH} \) 9.5)을 여과지가 장착된 Housing filter내로 밀어 넣어 1분간 정체시킨 후 3회 반복하여 용출시켰다. 먼저 탈리된 용출액의 \( \mathrm{pH} \)를 \( 7.0 \sim 7.5 \)로 조정하고 \( 1 \mathrm{~M} \mathrm{~HCl} \)로 \( 3.5 \pm 0.1 \)로 조절한 후 실온에서 30분간 교반시켜 침전물의 생성 유무를 확인하였다. 탈리액을 \( 2,500 \times \mathrm{g}, 4^{\circ} \mathrm{C} \)에서 15분간 원심분리하고 상등액을 제거한 후 \( 0.15 \mathrm{M} \) PBS (Phosphate Bufferd Saline, \( \mathrm{pH} 9.4\)) \( 30 \mathrm{ml} \)를 첨가한 후 완전히 용해시켰다. 용해된 침전물을 \( 7,000 \times \mathrm{g} \)로 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \)에서 10분간 원심분리 한 후, 상등액만 취하여 \( 1 \mathrm{~M} \mathrm{~HCl} \)로 \( \mathrm{pH} 7.0 \sim 7.5 \)로 조정하였다. 미생물 오염을 제거하기 위해 구경 \( 0.22 \mu \mathrm{m} \) 멸균 필터를 이용하여 상등액을 여과하였다. 여과시킨 상등액을 3~6일간 배양된 세포배양 플라스크 \( \left(25 \mathrm{~cm}^{2})\right. \)의 BGM (Buffalo greenmonkey kidney) 세포주, VERO (African green monkey kidney, adult)세포주, Hep-2 (Human larynx epidermoid) 세포주, Hela (Human cervix epitheroid carcinoma) 세포주, MDCK (Bovine kidney) 세포주, RD (Human embryonal rhabdomyosarcoma) 세포주에 각각의 시료를 접종하였다. 음성대조구 및 양성대조구는 각각 \( 0.15 \mathrm{~M} \mathrm{~Na}_{2} \mathrm{HPO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} (\mathrm{pH} \) 7.4) 용액과 순화된 3종의 바이러스를 \( 0.15 \mathrm{~M} \)\( \mathrm{~Na}_{2} \mathrm{HPO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 용액으로 희석하여 시료 접종량과 동일하게 접종하였다. 배양기에서 각세포주에 시료를 흡착시켜 15분 간격으로 배양용기를 좌우로 가볍게 기울여 접종된 시료가 골고루 세포에 흡착되도록 하였다. 접종 80~120분 후 세포 배양플라스크에 \( 2\% \) Fetal Bovine Serum (FBS)가 함유된 각 세포주의 배지를 분주한 후 14일간 배양하며 세포병변현상을 관찰하였다. 원수 ◦ 전오존수는 \( 100\mathrm{~l} \), 침전수는 \( 300\mathrm{~l} \), 여과수 ◦ 후오존수 ◦ BAC 처리수 그리고 정수는 \( 1000\mathrm{~l} \)를 기준으로 환산하였으며 3회 반복 실험하였다.</p>
멸균 튜브가 장착된 연동펌프를 이용해 Beef extract 완충액을 어떻게 용출시켰어?
\( 50 \mathrm{mM} \ glycine \)이 함유된 \( 1.5 \% \) Beef extract 완충액 \( (\mathrm{pH} \) 9.5)을 여과지가 장착된 Housing filter내로 밀어 넣어 1분간 정체시킨 후 3회 반복하여 용출