<h2>SRB assay를 이용한 암세포 증식 억제 효과</h2><p>암세포 증식 억제 효과에 사용된 암세포를 이용하여 메주 메탄올 추출물 및 그 분획물들에 대해 SRB assay를 행하였다. SRB asaay는 미국 국립 암 연구소에서 많이 사용되고 있는 실험 방법으로 특히 항암제를 대량적으로 그리고 신속하게 검토할 수 있는 장점을 지니고 있어 단시간 내에 1000개 이상의 항암제를 가지고 60종류의 인체 암세포에 대한 효과를 알아보는데 사용될 수 있으며 세포 수와 직선관계이며 주위 환경의 변경에 덜 민감하고 중간 대사물에 영향을 받지 않는 안정한 end point를 제공해 주는 것으로 알려져 있다. Fig. 4는 인체 위암세포인 AGS를 이용하여 메주 메탄올 추출물 및 그 분획물의 저해효과를 보여주고 있다. 메주의 메탄올 추출물은 첨가농도 \( 2 \mathrm{mg} / \mathrm{assay}\)에서 \( 39 \% \)의 억제효과를 가졌고 메주 메탄올 추출물의 분획물 중 에틸아세테이트층의 저해 효과가 가장 높았는데 동일농도에서 \( 64 \% \)의 위암 세포 성장을 저해시키는 효과를 나타냄을 관찰할 수 있었고 다른 분획물의 경우 다소 낮았다. Hep 3B 인체 간암세포의 경우, 메주 메탄올 추출물을 \( 2 \mathrm{mg} / \mathrm{assay}\) 투여했을 때 \( 50 \% \)의 저해효과를 나타내었으며 여가에서도 분획물 중에서 에틸아세테이토 분획물이 \( 71 \% \)로 가장 높은 저해효과를 보였고, 그 다음으로 헥산 및 디클로로메탄 분획물로 각각 \( 68 \% \) 및 \( 64 \% \)의 저해효과를 나타내었다. 암세포 증식억제 실험과 SRB assay에 의한 저해효과 실험에서 메주의 분흭물들 중에서 에틸아세테이트 분획물의 억제효과가 가장 큰 것으로 나 타남을 알 수 있었으므로 이 분획물 속에 활성 물질이 존재할 것으로 추정되어진다. 또한 Lim 등의 연구결과에서도 된장 분획물들 중 에틸아세테이트 분획물의 억제효과가 가장 컸고 다음으로 디클로로메탄 분흭물의 억제효과가 높았으므로 된장과 메주의 생리활성물질이 매우 연관성이 높다고 사료되어진다.</p><p>이상의 결과로부터 메주 분획물들 중 에틸아세테이트과 디클로로메탄 분획물은 in vitro SOS chromotest에서 비교적 높은 돌연변이 유발 억제 작용을 나타냈음을 확인 할 수가 있었다. 이러한 결과는 된장 메탄올 추출물과 그 분획물의 결과와 유사한 경향을 보였으므로 메주와 된장이 여러 종류의 미생물, 곰팡이류와 세균류들에 의해 발효과정을 거치는 동안 원재료인 콩에서는 없었던 혹은 함량이 적은 성분들이 생성되거나 증가되어 항암효과를 나타내는 것으로 추정되어 진다. 본 연구의 결과들로부터 메주가 나타내는 항돌연변이 및 암세포 증식 억제 활성 물질은 에틸아세테이트 분획물에 함유되어져 있는 것으로 추정되어지며 특히 콩과 비교했을 때 메주 및 된장 숙성 과정동안 더욱 다량 생성될 수 있는 genistein이 그 활성물질로서 가능성이 있으나 이에 관하여 극성이 다른 용매 추출법, silica gel 및 thin layer chromatogrphy 등을 이용한 된장 메탄올 추출물의 정제에 대한 연구가 필요하며 현재 연구 진행 중이다.</p>
암세포 증식 억제 효과를 알아보고자 한 실험에서 메주 메탄올에서 나온 성분과 분획물을 어떤 방법으로 조사했나요?
SRB assay