<h1>재료 및 방법</h1><h2>재료 및 시료의 조제</h2><p>본 실험에 사용한 17 종류의 식물은 경북 경주시 월성 한약품에서 판매되고 있는 제품으로 전문기관에 감정을 의뢰 한 후 \( 200 \mathrm{~g} \) 을 분쇄가로 마쇄한 다음 \( 70 \% \) 메탄올 \( 1,500 \mathrm{~mL} \)을 가하여 상온에서 48 시간 추출하였다. 이 추출물을 여과한 후 증발 농축한 다음 동결 건조기로 24 시간 동안 진공 건조하였다. 양성자 빔 조사를 위해 두께 \( 0.2 \mathrm{~mm} \) polypropylene tube에 추출 엑기스 \( 1 \mathrm{~g} \) 씩 채취하여 양성자 빔 조사 시료로 사용하였다. 양성자 빔 조사 후 시료는 대조구와 함께 \( -78^{\circ} \mathrm{C} \)에서 냉장 보관하여 항산화 활성 실험의 시료로 사용하였다.</p><h2>양성자 빔 조사조건</h2><p>양성자 빔 조사 조건은 빔 에너지 \( 45 \mathrm{MeV} \), 빔 전류 10 \( \mathrm{nA} \), Dose rate[Gy/sec] \( 1.91 \) 그리고 LET[KeV/\( \mu \mathrm{m}] \) 1.6의 저선량 양성자 빔을 실온에서 각각 1,000,5,000 및 10,000 Gray의 총 흡수선량을 시료에 조사 하였으며, 총 흡수선량의 오차범위는 \( \pm 0.2 \mathrm{KGy} \) 였다.</p><h2>DPPH radical 소거활성검색</h2><p>비교적 안정한 free radical인 DPPH radical 소거활성은 Brand-Willams의 방법을 변형하여 측정하였다. 즉, 96 well plate에 DPPH solution \( \left(1.5 \times 10^{-4} \mathrm{M}\right. \), Ethanol) \( 90 \mu \) 와 시료 \( 10 \mu 1 \) 을 가한 후 실온에서 10 분간 반응시킨 후 각 반응 액의 흡광도를 \( 517 \mathrm{~nm} \) 에서 측정하였다. DPPH radical 소거활성은 다음 식에 의하여 구하였다.</p><p>Scavenged DPPH\( (\%)=\left(1-\mathrm{A}_{\text {test }} / \mathrm{A}_{\text {control }}\right) \times 100 \)</p><p>여기서, \( \mathrm{A}_{\text {test }} \) 는 시료와 반응한 10 분후의 광흡수도이며, \( \mathrm{A}_{\text {controlo }} \) 시료 대신 \( \mathrm{MeOH} \) 를 첨가한 대조구의 광흡수도이다. DPPH radical을 \( 50 \% \) 소거하는 시료의 농도를 \( \mathrm{IC}_{50} \) 으로 나타내었다. 각 시료의 활성은 대표적인 합성 항산화제인 BHA, BHT 및 ascorbic acid을 사용하여 항산화 효과를 비교하였다.</p><h2>\( \mathrm{ABTS}^{+} \)cation radical 소거활성</h2><p>\( \mathrm{ABTS}^{+} \)cation radical 소거활성은 radical 소거활성이 있는 항산화제에 의해 정량적으로 무색으로 변색되므로 항산화 활성을 쉽게 측정할 수 있다. 이 radical에 대한 소거활성은 여러 항산화 활성과 상관관계를 보이므로 항산화제 검색에 널리 사용되고 있다.</p><p>즉 \( 14 \mathrm{mM} \) 2,2'-azinobis(3-ethylbenzothialozinesulfonic acid) cation \( \left(\mathrm{ABTS}^{+}\right) \)용액과 \( 4.9 \mathrm{mM} \) potassium persulfate를 암 조건하에서 24 시간 반응시킨 후 96 well plate에 \( 50 \mu \) l의 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}, 140 \mu \mathrm{l} \) 의 \( \mathrm{ABTS}^{+} \)cation radical \( \left(\mathrm{A}_{73 \mathrm{4nm}}=0.7\right), 10 \mu \mathrm{l} \) 시료를 혼합하여 실온에서 7분간 반응시킨 다음 흡광도 \( 734 \mathrm{~nm} \) 에서 ELISA reader로 측정하였다.</p>
위 실험에서 양성자 빔에 조사된 시료의 보관은 상온에서 이루어졌는가?
NO