<h2>HDAC 저해제에 의한 U937 세포의 apoptosis 조절인자들 변화에 미치는 Bcl-2의 영향</h2><p>이상의 결과에서 U937 세포의 Bcl-2 과발현이 HDAC 저해제 중, Na-B 보다는 TSA 처리에 의한 증식억제 및 세포교란 유도와 연관된 apoptosis 차단 효과가 더욱 높게 나타났으므로, TSA 처리군을 대상으로 apoptosis 조절에 중요한 유전자들의 발현 및 활성의 정도를 U937/vector 및 U937/Bcl-2 세포에서 비교하였다. 이를 위하여 먼저 조사된 유전자는 Bcl-2 family에 속하는 몇 가지 유전자 산물로서 Western blotting 분석에 의한 결과를 Fig. 4에 나타내었다. 결과에서 알 수 있듯이 apoptosis 억제에 관여하는 유전자 중 Bcl-xL의 발현은 두 세포주 모두에서 TSA의 처리에 따른 큰 차이점은 관찰되지 않았다. Bcl-2의 경우는 U937/vector 세포에서 \(50\mathrm{nM}\) 이상 처리군에서 대조군에 비하여 매우 감소되었음을 알 수 있었으나, U937/Bcl-2 세포에서는 \(100\mathrm{nM}\) 처리군에서 다소 감소되는 경향성을 보여 주었다. Apoptosis를 유발하는데 관여하는 Bcl-2 family 중 Bax는 TSA의 처리 유무에 따라 차이점은 없었으나, Bad의 경우 고농도 처리군에서 U937/vector 세포에서만 다소 발현이 증가되었다. 그리고 Bid의 경우 총 단백질 수준에서의 발현 차이도 없었으며, mitochondria로 이동되어 apoptosis 유도에 관여될 것으로 추정되는 tBid의 발현온 두 세포주에서 모두 발현이 되지 않았다. 따라서 Bcl-2 family 중 TSA 처리에 의하여 U937/vector 세포에서 관찰된 Bad 및 Bcl-2의 발현 변화가 U937/Bcl-2 세포에서는 크게 나타나지 않아 TSA에 대한 apoptosis 유발 감수성에 다소 관여되었던 것으로 추정된다.</p><p>다음은 apoptosis 유발의 초기 및 효과기 모두에서 중요한 역할을 하는 caspase의 발현 및 활성에 미치는 TSA의 영향을 U937/vector 및 U937/Bcl-2 세포에서 비교하였으며, Fig. 5A에 제시한 것과 같이 조사된 3가지 procaspase의 발현이 U937/Bcl-2에서 보다 U937/vector 세포에서 TSA 처리에 의하여 현저하게 감소되었음을 알 수 있었다. 따라서 TSA 처리에 의한 이들 caspase의 활성화 정도를 in vitro 활성 조사법으로 비교한 결과, Fig. 5B에 나타낸 바와 같이 caspase-3, -8및 -9의 활성이 \(100\mathrm{nM}\) TSA가 함유된 배지에서 48시간 배양된 U937/vector 세포에서 각각 4.3배, 3.2배 및 5.6배 증가되었음을 알 수 있었으나, U937/Bcl-2 세포에서는 각각 1.23배, 1,98배 및 2.4배 정도로 증가되어 Western blotting에 의한 단백질 발현의 결과에서처럼 TSA에 의하여 U937/Bcl-2 세포에서 크게 활성화 되지 않았음을 알 수 있었다.</p>
Na-B와 TSA는 무엇의 억제제야?
HDAC