<h1>재료 및 방법</h1><h2>동충하초 균사체 액체배양액 제조</h2><p>시료로 사용된 동충하초(C. militaris) 균사체 액체배양액은 케이비에프(주, 김해시 소재)에서 제조한 것으로 동충하초 균사체 \( 200 \mathrm{ml} \) 를 potato dextrose broth (PDB)에서 \(25 { }^{\circ} \mathrm{C} \) 로 조절하여 4 일간 액체배양하고, 전체 배양액을 본 배양 배지인 potato glucose broth (PGB)에서 3일간 액체배양 하였다. 균사체 배양액을 거즈로 여과하여, 여과액을 \(105 { }^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 90 분간 감압멸균하여 시료로 사용하였다. 시료보관은 \( -20^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 냉동보관 하였다.</p><h2>실험동물의 식이 및 사육</h2><p>실험동물은 본 대학 사육실에서 번식시켜 고형사료(삼양유지사료)로 사육한 생후 30 주령의 Sprague-Dawley계 암쥐를 대상으로 하고, 1 주간 표준식이로 적응기간을 거친 후 평균 체중 \( 297.0 \pm 30.2 \mathrm{~g} \) 의 동물을 각 군에 6 마리씩 5 군으로 나누었다. 실험군은 정상식이군(\(5\%\) 옥수수유), 고지방식이군(\(5\%\) 옥수수유 \( +15 \% \) 돈지 \( +1 \% \) 콜레스테롤), 고지방식이에 동충하초 균사체 액체배양액을 \( 10 \%\), \(20 \% \) 및 \( 30 \% \) 수준으로 음료수에 혼합하여 급여한 군 \( (10 \%\), \(20 \% \) 및 \( 30 \% \) LCM군) 등 5 군으로 나누어 해당 식이와 실험음료로 5 주간 사육하였다. 실험 식이의 조성은 Table 1 과 같다. 동물사육실의 사육조건은 온도 \( 22 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 \( 50 \sim 60 \% \) 로 유지시키고, 명암은 12 시간(7:00-19:00)을 주기로 자동조절 되었으며, 실험음료와 식이는 자유 급식하였다.</p><h2>식이섭취량, 식이효율 및 체중측정</h2><p>실험기간동안의 식이는 매일 오후 4 시에 급여하고 식이 섭취량을 조사하였다. 식이섭취량의 오차를 최소화하고자 손실량을 측정하여 보정하였다. 체중은 1 주에 한번씩 일정한 시간에 측정하였다. 식이효율은 실험 전기간의 체중중가량을 같은 기간동안에 섭취한 식이량으로 나누어 다음과 같이 산출하였다. 식이효율(food efficiency ratio; FER \( )= \) 체중증가량 \( (\mathrm{g}) / \) 식이섭취량 \( (\mathrm{g}) \times 100 \).</p><h2>시료수집 및 분석</h2><p>채혈 및 장기 무게 측정은 실험종료 후 16 시간 절식시킨 다음 ethyl ether로 마취하여 개복 후 심장에서 채혈하였고, 혈액은 실온에서 30 분간 두었다가 \( 3,000 \mathrm{rpm} \) 에서 20 분간 원심 분리한 혈청을 혈액분석에 사용하였다. 간, 신장 및 대퇴골은 복부를 개복 한 다음 즉시 떼어 생리식염수로 씻고 여과지로 습기를 제거한 후 무게를 측정하고 분석시료로 사용하였다. 분의 수집은 실험종료전 4 일간 분을 모아서 1 일간 풍건 후, \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2 시간 건조하여 분석시료로 사용하였다.</p><p>혈청의 중성지질, 인지질, 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤, 혈당, 단백질, 알부민 및 glutamic pyruvic transaminase, glutamic oxaloacetic transaminase, \( \gamma \)-glutamyltrans-peptidase, lactic dehydrogenase, alkaline phosphatase의 활성은 자동생화학분석기(Autohumalyzer 900S, Germany)로 측정하였다. LDL 콜레스테롤 농도는 혈청의 중성지질 농도가 \( 300 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) 미만이면 Fridwald 공식이 적합하다고 하여 Fridwald 등[6]에 의한 계산법 즉 LDL-cholesterol \( = \) total-cholesterol \( -\)HDL-cholesterol \( + \) triglyceride \( \div 5) \) 식으로 산출하였고, 동맥 경화지수(atherogenic index: Al) 는 Haglund 등의 방법에 따라서 AI\(=\) (total cholesterol\( -\)HDL-cholesterol)/HDL- cholesterol 식으로 계산하였다. 간과 분의 지질은 Folch 법으로 추출하여 지질측정용으로 사용하였다. 간과 분의 총 지질은 phospho-vanillin 법, 중성지질 및 총 콜레스테롤 농도는 각각의 kit (영연화학, Japan) 시약으로 측정하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>본 연구의 실헙결과는 평균치와 표준편차로 나타내었고, SPSS를 이용하여 실험 군간의 유의성 검정은 \( \mathrm{p}<0.05 \) 수준에서 Duncan's multiple range test로 하였다.</p>
본 실험에서는 시료를 냉장보관했어?
NO