<h1>재료 및 방법</h1><h2>재료</h2><p>본 실험에 시료로 사용한 비파잎(Eriobotrya~japonica)은 2010년 6월에 전남 완도군에서 재배된 것을 구입하여 사용하였으며, 동결건조기(SFDSHM12, Samwon eng, Korea)를 이용하여 \( -80^{\circ} \mathrm{C} \)에서 동결건조하고 분쇄한 후 시료로 사용하였다.</p><h2>추출 및 분리</h2><p>시료의 추출은 유기용매를 사용하여 극성에 따른 분획을 실시하였다. 즉, 동결건조된 비파잎 \( 100.0 \mathrm{~g} \)을 잘게 분쇄한 후 저극성 용매인 n-hexane으로 먼저 추출하여 여과한 시료를 다시 ethyl acetate (\(\mathrm{EtOAc}\)), methanol (\(\mathrm{MeOH}\))을 이용하여 각각 순차적으로 3회 분획하여 추출하였다. 각 용매 추출분획을 회전감압농축기(Eyela, N-2NW, Japan)로 감압농축하여 건조시킨 후 n-Hexane 추출물 \( (0.92 \mathrm{~g}) \), \(\mathrm{EtOAc}\) 추출물 \( (7.47 \mathrm{~g}) \), \(\mathrm{MeOH}\) 추출물 \( (17.35 \mathrm{~g}) \)을 각각 얻었다. 각 추출물에 대하여 정량적으로 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) 소거활성, superoxide dismutase (SOD) 유사활성을 측정하고, 페놀 화합물과 플라보노이드의 함량을 측정하였으며, 각 용매에 따른 추출물 중 강한 활성을 나타낸 \(\mathrm{EtOAc}\) 추출물과 \(\mathrm{MeOH}\) 추출물에 대하여 column chromatography를 이용하여 활성물질의 분리 정제를 실시하였다.</p><p>\(\mathrm{EtOAc}\) 추출물 \( 7.37 \mathrm{~g} \)과 \(\mathrm{MeOH}\) 추출물 \( 15.92 \mathrm{~g} \)을 n-hexane : methylene chloride : acetone 혼합용매를 용출용매로 사용하여 silica gel (70-230 mesh, \( 5 \mathrm{~cm} \times 60 \mathrm{~cm}) \)을 사용한 column chromatography를 실시하였으며 \(\mathrm{EtOAc}\) 추출물에서 24개의 분획(\(\mathrm{EtOAc}\) F1-F24), \(\mathrm{MeOH}\) 추출물에서 30개의 분획 (\(\mathrm{MeOH}\) F1-F30)으로 나누었다. 각 분획물에 대하여 항산화 활성을 측정한 결과 \(\mathrm{EtOAc}\) F7, \(\mathrm{MeOH}\) F16에서 비교적 강한 활성을 확인하였다. \(\mathrm{EtOAc}\) F7 \( (526.5 \mathrm{mg}) \)과 \(\mathrm{MeOH}\) F16 \((55.5 \mathrm{mg}) \)에 대하여 GC/MS 분석을 실시하였다. GC/MS의 분석은 GC/MS (HP 6890 series GC system \(+\) HP 5973 MSD, Hewlett Packard Co. USA)에서, HP-5 capillary column (\(5 \%\) phenyl methyl siloxane capillary, \( 30.0 \mathrm{~m} \times 250 \mu \mathrm{m} \) i.d., \( 0.25 \mu \mathrm{m} \) film thickness, Hewlett Packard Co. USA), carrier gas는 \(\mathrm{He}\) (32.6 \( \mathrm{ml} / \mathrm{min} \).), Split ratio \(30:1\), oven 온도조건은 initial temp. (time) \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) (5 min.), rate는 \( 10^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \)., final temp. (time) \( 280^{\circ} \mathrm{C} \) (20 min.)이며, injection port temp. \( 250^{\circ} \mathrm{C} \), interface temp. \( 240^{\circ} \mathrm{C} \) 및 \( 70\mathrm{eV} \)의 ionization voltage의 조건으로 분석하였다. 활성 물질의 동정은 mass spectrum을 해석한 결과를 토대로 Willey library (wiley 275L.)를 참고하였다.</p>
본 실험 재료로 사용한 것은 무엇인가?
비파잎