<h1>결과 및 고찰</h1><p>Hwang 등에 의해 보고된 더덕의 최적 추출 조건을 수정하여 \( 50 \% \) EtOH 추출용매를 사용한 초음파추출과 UPLC-QTOF-MS 분석을 통해 국내산 더덕의 대사체 분석을 수행하였다. 본 실험에 사용된 더덕은 국내에서 유통되는 강원 인제, 강원 횡성, 그리고 전북 무주 주산지에서 재배된 더덕시료를 대상으로 하였다.</p><p>Fig. 1은 국내산 더덕시료의 Base peak ion chromatogram을 나타내었으며, 각피크별 얻어진 MS 분석 데이터와 관련된 선행문헌과 비교하여 동정한 \(7\)종[caffeoylquinic acid (\(1\)), tangshenoside II (\(2\)), \(2\)-hexenyl- \( \alpha \)-L-arabinopyranosyl- \( \beta \)-D-gluco-pyranoside (\(5\)), lobetyolin (\(6\)), lancemaside B (\(7\)), lancemaside G(\( 8 \)), lancemaside A(\( 9 \))과 지표화합물을 이용하여 확인된 \(1\)종[tangshenoside I (\(4\))]을 나타내었다(Table \(1\)). Caffeoylquinic acid (CQA)는 \(3\)-, \(4\)-, \(5\)-CQA처럼 천연물에서 여러 이성질체 형태로 관찰되며, 주로 ESI negative mode에서 \( m / z\) \(355 \) \([\mathrm{M-H}]^{-} \)의 값을 보인다. 또한, caffeoyl 기의 \( m / z\) \(162\) \(\left(-\mathrm{C}_{9} \mathrm{H}_{6} \mathrm{O}_{3}\right) \)의 결손으로 인한 quinic acid의 \( m / z \) \(191\)의 분자이온이 관찰되는데 peak \( 1\left(t_{\mathrm{R}}=3.09 \mathrm{min}\right) \)에서 이러한 MS 쪼개짐 패턴을 확인하였다. Peak \( 2\left(\mathrm{t}_{R}=3.18 \mathrm{~min}\right) \)는 formate가 adduct된 주 생성이온 \( [\mathrm{M}+\mathrm{HCOO}]^{-} \)인 \(m / z \) \(417\) 값이 관찰되며, hexose 당의 결손으로 인한 \( m / z\) \(209\) \(\left[\mathrm{M}-\mathrm{H}-\mathrm{C}_{6} \mathrm{H}_{10} \mathrm{O}_{5}\right]^{-} \) 쪼개짐 이온이 검출되는 것을 확인하였다. 더덕의 선행문헌과 비교 분석을 통해 peak \(2\)는 tangshenoside II로 추정하였다. Peak \( 5\left(\mathrm{t}_{R}=4.56 \mathrm{~min}\right) \)는 유사분자이온인 \( m / z\) \(393\) \([\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)와 formate adduct 생성이온인 \( m / z\) \(439\) \([\mathrm{M}+\mathrm{HCOO}]^{-} \)가 관찰되었으며, pentose의 손실로 인한 \( m / z\) \(261\) \(\left[\mathrm{M}-\mathrm{H}_{2} \mathrm{C}_{5} \mathrm{H}_{8} \mathrm{O}_{4}\right]^{-} \) 분자이온을 확인하였다. 더덕의 선행연구결과의 비교를 통해 \(2\)-hexenyl- \( \alpha \)-L-arabinopyranosyl- \( \beta \)-D-glucopyranoside으로 예측하였다. 더덕의 주요성분으로 알려진 lobetyolin은 polyacetylene 화합물로써 더덕의 품질평가를 위해 사용하는 주된 지표물질로 알려져 있다. Peak \(6\) \( \left(\mathrm{t}_{R}=5.92 \mathrm{~min}\right) \)는 precursor 이온인 \( m / z\) \(395\) \([\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)와 \( \mathrm{HCOO} \)가 adduct된 \( m / z\) \(441\) \([\mathrm{M}+\mathrm{HCOO}]^{-} \) 분자이온이 관찰되었으며, \( m / z \) \(215\) [\(\mathrm{M-H-}\) \( \left.\mathrm{C}_{6} \mathrm{H}_{12} \mathrm{O}_{6}\right]^{-} \)와 \( m / z\) \(179\) \(\left[\mathrm{C}_{6} \mathrm{H}_{11} \mathrm{O}_{6}\right]^{-} \)의 생성이온이 검출되었다. 따라서 이러한 분자조개짐패턴과 선행연구결과를 비교했을 때 peak \(6\)은 lobetyolin으로 유추하였다. 천연물의 유용한 생리활성물질 중 하나인 사포닌 성분은 aglycone과 당이 결합된 부분으로 구성되어 양극성 성질을 지니고 있으며 더덕뿌리에서는 lancemaside A로 대표되는 트리테르펜계열의 사포닌들이 다량 함유하고 있는 것으로 알려져 있다. Peak \( 7\left(\mathrm{t}_{R}=7.40 \mathrm{~min}\right) \), peak \( 8\left(\mathrm{t}_{R}=7.47 \mathrm{~min}\right) \), peak \( 9\left(\mathrm{t}_{R}=7.83 \mathrm{~min}\right) \)은 각각 유사 분자 이온형태인 \( m / z\) \(1351\) \([\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)와 \( m / z\) \(1205 \) \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \), 그리고 \( m / z\) 1189\([\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)가 검출되었으며, \( \mathrm{C} \)-\(28\) 위치에 결합된 xylose, rhamnose, arabinose 당들의 결손에 의해 생성된 이온인 \( m / z\) \( 647\) \(\left[\mathrm{M}-\mathrm{H}_{-2} \mathrm{C}_{27} \mathrm{H}_{44} \mathrm{O}_{21}\right]^{-},\left[\mathrm{M}-\mathrm{H}_{-1} \mathrm{C}_{21} \mathrm{H}_{34} \mathrm{O}_{17}\right]^{-} \), \( \left[\mathrm{M}-\mathrm{H}-\mathrm{C}_{21} \mathrm{H}_{34} \mathrm{O}_{16}\right]^{-} \)가 각각 관찰되었다. 따라서, 기존 선행 문헌과 MS 쪼개짐 패턴 비교 분석을 통해 peaks 7-9은 각각 lancemaside B, lancemaside G, 그리고 lancemaside A로 추정하였다. Peak \( 4\left(\mathrm{t}_{R}=4.21 \mathrm{~min}\right) \) 은 \( m / z\) \(677\) \([\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-}, m / z \) \(1355\) \([ \mathrm{2M-H}]^{-}\)의 분자이온이 검출되었으며, \( m / z\) \(261\) \(\left[\mathrm{C}_{11} \mathrm{H}_{17} \mathrm{O}_{7}\right]^{-} \)이 관찰되었다. Peak \(4\)는 더덕으로부터 선행연구된 결과값과 더덕의 주요 지표성분인 tangshenoside I의 머무름시간(retention time), 그리고 MS 스펙트럼의 패턴을 비교하였을 때 phenylpropanoid계열 화합물인 tangshenoside I로 동정하였다. 더덕의 주요피크로 관찰된 peak \(3~(\mathrm{t}_{R}=3.49 \mathrm{~min} \)은 \( m/ z \) \(366\)과 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) \(733\)의 분자이온이 관찰되었으나 기존의 선행연구결과로부터 화합물을 동정하지 못하였으며 이후 후속연구를 통해 더덕의 분리 및 분석 등의 연구를 통해 확인할 필요성이 있다.</p>
국산 더덕의 대사체 분석을 수행할 때 사용된 EtOH 추출용매의 농도는 몇 퍼센트야?
\( 50 \% \)