<h2>Elastase 저해활성 측정</h2><p>Elastase는 단백질인 엘라스틴을 분해하는 효소로 다른 중요한 기질 단백질인 콜라겐을 분해할 수 있는 비특이적 가수분해 효소이다. 피부의 진피조직 속에는 collagen과 피부의 탄력성에 관련된 elastin이 그물망 구조를 형성하고 있는데, elastin이 elastase에 의해 분해되어 피부의 그물망 구조 결합이 끊어짐으로, elastase가 주름생성의 주원인 효소로 알려져 있다. Elastase 저해제는 피부 주름을 개선하는 작용을 나타내고, ursolic acid 등이 elastase 저해제로 이용되고 있다. 그리고 체내의 elastin을 분해하는 백혈구 과립 효소 중의 하나로 이상조직에서는 효소의 활성이 극히 높아 조직 파괴에 직접적인 원인이 되어 피부의 주름 및 탄력성 소실을 유발한다. 이러한 주름 생성과 관련된 elastase 저해 능을 측정한 결과 Fig. 3과 같이 나타내었다. 밤잎 아세톤 추출물에서는 elastase 저해능이 없었으며, 열수 추출물의 경우 \( 100 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)에서 \( 5 \% \)의 elastase 저해능을 나타내었으나, 에탄올 추출물은 10, 50, 100 \(\mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)에서 각각 \( 20.0 \%\), \(58.0 \%\), \(64.6 \% \)로 대조군으로 사용한 ursolic acid와 유사한 elastase 저해능을 나타내어 우수한 elastase 저해활성을 나타내었다. 이는 Kwak 등은 각종 약용실물로부터 elastase저해활성을 측정한 결과, 대부분이 \( 1,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 농도에서 \( 30.0 \% \) 미만의 저해활성을, Kim등은 홍화씨 추출물에서 \( 500 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)의 농도에서 \( 31.7 \% \)의 저해율을 나타낸다고 보고한 것과 비교 시, 밤잎 에탄올 추출물의 elastase 저해활성이 우수함을 확인할 수 있었다. 따라서 밤잎 추출물은 외용화장품에 적용함으로써 피부의 엘라스틴 분해를 억제하여 진피 내 피부탄력을 유지하는 역할을 수행함으로서 피부탄력을 유지할 수 있어, 피부탄력유지 화장품 소재로서 개발이 가능할 것으로 판단하였다.</p><h2>Collagenase 저해활성 측정</h2><p>콜라겐은 대부분 피부의 진피층에 존재하며, 피부 전체 건조중량의 약 \( 70 \sim 80 \% \)를 차지하고 있어, 세포외 기질의 대부분을 차지하면서 피부를 지지하는 역할을 한다. 그러나 자연 노화에 따른 세포 활성의 감소와 같은 내적 요인에 의해 콜라겐의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해가 가속화되어 피부 기질이 파괴되면서 주름이 생성된다. 이러한 collagen은 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다고 알려져 있다. 또한 collagen은 트립신 등의 단백질 분해효소의 작용을 받지 않으나, collagenase에 의해 분해된다는 보고가 있어 밤잎 추출물의 collagenase 저해 활성을 Fig. 4와 같이 측정하였다.</p><p>밤잎의 각 용매별 1, 50, 100 \(\mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)의 농도로 collagenase 저해활성을 측정한 결과 3가지 추출물은 \( 100 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)에서 열수추출물 \( 18.0 \% \), 아세톤 추출물 \( 14.3 \% \), 에탄올 추출물 \( 5.3 \% \)의 순으로 collagenase 저해활성능을 나타내었다. 이는 Cho등의 지골피 및 빈랑자 에탄올 추출물의 collagenase 저해활성 측정 결과 \( 1,250 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)에서 각각 \( 10 \%\), \(30 \% \)의 저해율을 나타낸다고 보고한 것과 비교시 밤잎 추출물의 elastase 저해활성이 우수함을 확인할 수 있었다. 이러한 결과로 밤잎 추출물이 collagenase 활성을 저해함으로써 collagen의 분해를 막아 피부의 주름을 개선할 것으로 판단되며, 기능성 화장품 소재로서 이용 가능성이 높을 것으로 사료된다.</p>
다른 중요한 기질 단백질인 콜라겐을 분해할 수 있는 비특이적 가수분해 효소는 뭐야 ?
Elastase