<h1>결과 및 고찰</h1><h2>Adipogenesis terminal marker에 대한 platycodin D의 효과</h2><p>비만 및 지방세포 형성의 In vitro 실험에서 널리 사용되는 3T3-L1세포는 마우스 배아에서 유래된 세포이며 IDX (insulin, dexamethasone 및 IBMX (isobutylmethylxanthine))와 FES (fetal bovine serum) 등의 분화유도 물질이 첨가되면 전지방 세포에서 지방세포로 분화가 유도되는 특성을 가지고 있다. 3T3-L1 세포의 분화가 진행되는 과정은 다양한 pro-adi-pogenic factors 및 anti-adipogenic factors이 PPAR\( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)를 중심으로 조절되는 복잡한 과정이다. Adipogenesis가 충분히 진행되면 PPAR\( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)의 조절에 의해 여러 terminal marker들의 발현이 크게 증가된다. 그 중, 지방세포가 완전히 분화되었을 때 높게 발현되는 ADIPOQ는 ADIPOQ 수 용체(AdipoR)에 결합하여 에너지 대사와 인슐린 신호경로 (insulin pathway)를 조절한다고 알려져 있다. Platycodin D가 terminal marker인 ADIPOQ의 mRNA 발현에 어떤 영향을 주는지 살펴보기 위해, platycodin D를 배지에 첨가 혹은 첨가하지 않고 3T3-L1 세포를 7일 간 분화한 후 세포로부터 total RNA를 정제하여 real-time PCR을 진행하였다. 그 결과, 분화된 세포에서 ADIPOQ 의 mRNA 발현이 전지방세포에 비해 28,000 여 배 이상 증가하였고 platycodin D의 첨가에 의해 크게 감소하였다. 또한, 인슐린에 의해 조절되는 당 수송(glucose transport) 등의 에너지 대사에서 중요한 기능을 하는 것으로 알려져 있는 또 다른 terminal marker인 GLUT4의 mRNA 발현의 변화도 본 연구에서 측정되었다. Fig. 2B의 결과는 7일간 분화시킨 지방세포에서 GLUT4의 mRNA 발현 이 분화 전 세포에 비해 300배 이상 크게 증가하고 platycodin D의 처리에 의해 유의하게 감소함을 보여준다. 이러한 ADIPOQ와 GLUT4와 같은 terminal marker의 발현에 대한 platycodin D의 억제 결과는 platycodin D가 지방세포 형성을 저해한다는 본 연구진의 선행연구결과를 뒷받침한다.</p><h2>Adipogenesis의 핵심전사인자인 C/EBP\( \alpha \)와 PPAR\( \gamma \)에 대한 platycodin D의 효과</h2><p>ADIPOQ, GLUT4와 같은 terminal marker의 발현은 adi-pogenesis의 핵심전사인자(central transcription factor)인 C/EBP\( \alpha \)와 PPAR\( \gamma \)에 의해 조절된다. Nuclear hormone receptor superfamily에 속하는 PPAR\( \gamma \)는 심장 질환과 제 2 당뇨 등을 포함한 질병과 관련된 많은 유전자들의 발현을 조절을 통해 인체에서 매우 중요한 기능을 하고 있다. PPAR\( \gamma \)는 지방세포의 분화 및 지방조직 형성에도 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있는데, Tontonoz 등은 마우스의 섬유 아세포에 PPAR\( \gamma \)를 과다 발현하여 in titro 상에서 PPAR\( \gamma \) 만의 작용에 의해 완전한 지방세포의 분화가 유도되는 것을 확인하였다. 또한 Zhang 등과 Medina-Gomez 등은 각각 다른 논문을 통해 PPAR\( \gamma \)가 결핍된 마우스에서 정상적인 adipo-genesis가 일어나지 않거나 인슐린 저항성이 나타나는 것을 in vivo 상에서 증명하였다. PPAR\( \gamma \)와 상호작용하는 C/EBP\( \alpha\) 역시 adipogenesis에서 중요한 기능을 한다. 다양한 섬유아세포에서 과다 발현된 C/EBP\( \alpha\)는 adipogenesis를 유도 한다고 보고하고 있고, C/EBP\( \alpha\)가 결핍된 마우스의 경우 포도당의 대사 장애로 인하여 사망하는 것으로 보고된 바 있다. Fig. 3은 platycodin D의 처리가 분화 유도 시, PPAR\( \gamma\)와 C/EBP\( \alpha\)의 mRNA 발현에 어떤 영향을 주는지 보여준다. 분화가 진행되면서 크게 증가하였던 PPAR\( \gamma\)와 C/EBP\( \alpha\)의 mRNA 발현은 platycodin D의 처리에 의해 유의하게 감소하였다. 이 러한 PPAR\( \gamma\)와 C/EBP\( \alpha\)에 대한 platycodin D의 억제 효과는 전사(transcription)의 감소를 통하여 ADIPOQ와 GLUT4의 mRNA 발현량의 감소를 일으킨다.</p>
분화된 세포에서 ADIPOQ 의 mRNA 발현이 전지방세포에 비해 8,000 여 배 이상 증가했어?
NO