<p>또한 PMA를 처리한 배지에서도 대조구는 저 농도 \( (0.5 \mu \mathrm { M } ) \)에서부터 황변이 시작되는 반면, 형질전환 계통의 경우 최고 \( 10 \mu \mathrm { M } \) 까지 저항성을 나타내었는데 (Fig. 5), Arabidopsis 에 merB 유전자를 도입한 경우에도 비슷한 결과를 나타낸다는 보고가 있다 (Bizily et al. 1999).</p> <h2>형질전환 까미중의 종자형성과 유전자 분리비 조사</h2> <p>형질전환된 계통을 선발한 후 유전자의 후대 안정성 검정 등- 지속적인 환경위해성 평가 연구를 위하여 \( \operatorname { merB } \) 유전자가 발현되고 수은저항성을 나타내는 merBl, merB4 식물체들 온실에서 3개월 동안 생육 시키며 종자 형성 특징을 대조구와 비교하였다. 그 결과 화서 당 맺힌 열매수와 1 개 열매 속에 생성된 종자의 개수는 대조구와 차이가 없었으나 건조종자 100 개의 무-게는 대조구가 약간 무거웠는데 이는 기내 배양한 식물의 순화적응에 따른 차이로 생각되며 형실전환 과정을 통하여 완전히 불임인 개체가 되는 등의 특이점은 없었다 (Table 1). Schuh 등 (1993)은 벼의 형질전환체의 세대간 형태적인 차이가 크게 나타나지 않는다고 보고하였으며,형질전환 까마중의 세대간 형태적 변이 등에 대해서는 보고된바 없다.</p> <p>형질전환 과정을 통하여 삽입된 \( \operatorname { merB } \) 유전자가 후대로 안정적으로 유전되는지를 확인하기 위하여 멘델의 유전법칙에 근거하여 삽입 유전자의 분리비를 조사하였다. 유전자 분리비는 항생제 저항성을 이용하였는데 형질전환시 항생제인 hygromycin 저항성 유전자와 merB 유전자를 함께 삽입하였으므로 형질전환된 까마중은 \( \operatorname { merB } \) 의 유전에 따라 항생제 저항성도 함께 나타나게 된다. 형질전환 까마중 종자는 hygromycin \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 농도가 첨가된 발아배지에서 저항성을 띄며 잘 자라는 종자와 생장하지 못하고 고사하는 감수성 종자로 그 표현형이 나눠진다. 소독한 200 개의 \( \mathrm { T } _ { 1 } \) 종자는 hygromycin \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 농도가 첨가된 종자 발아배지에 치상하고 10 일 후에 저항성과 감수성을 나타내는 종자의 수를 세어서 분리 비를 산출한 결과는 Table 2 와 같다.</p> <p>MerBl 종자의 \( 3: 1 \) 분리비 검정은 기댓값이 \( 147.8: 49.3 \) 이었고, 카이제곱 값은 \( 28.2( \mathrm { P } =0.0001) \) 로 카이제곱의 동계적 유의차를 검정한 \( 5 \% \) 유의수준인 \( 3.84( \mathrm { P= } =0.05) \) 보다 높은 값을 나타내어 통계적 유의차가 있었다. 반면 15:1 분리비 검정은 기댓값이 \( 184.7: 12.3 \) 이었고 카이제곱의 통계적 유의차를 검정한 결과는 \( 5 \% \) 유의수준에서 관찰값과 기대값이 일치하였다. 따라서 merB1 종자는 15:1로 유전적 분리가 되었음을 알 수 있었다. merB4 종자의 \( 3: 1 \) 분리비 검정은 기댓값이 147.8:49.3이었고 카이재곱 값은 \( 0.3 \) 으로 \( 5 \% \) 유의수즌에서 관찰값과 기댓값이 일치하였으므로 merB4 종자는 \( 3: 1 \)로 유전적 분리가 나타났다. 이들 \( \mathrm { T } _ { 1 } \) 종자는 후대번식을 통하여 \( \operatorname { merB } \) 유전자 형질이 고정된 계통을 확보할 것이다.</p> <table border><caption>Table 1 The characterization of the first generation's seeds of transgenic Solanum nigrum</caption> <tbody><tr><td>Lines</td><td>No. of fruits/lnflorescence</td><td>No. of seeds/fruits</td><td>Fresh weight \( ( \mathrm { mg } / 100 \) seeds)</td></tr><tr><td>Control</td><td>\( 7.0 \pm 0.9 \) *</td><td>\( 39.4 \pm 10.8 \)</td><td>\( 77.8 \pm 1.3 \)</td></tr><tr><td>merB1</td><td>\( 8.0 \pm 1.4 \)</td><td>\( 47.1 \pm 8.2 \)</td><td>\( 73.3 \pm 1.0 \)</td></tr><tr><td>merB4</td><td>\( 6.9 \pm 0.8 \)</td><td>\( 46.3 \pm 7.5 \)</td><td>\( 73.2 \pm 0.9 \)</td></tr><table border><caption>Table 2 Segregation pattern of transformant on the medium containing hygromycin</caption> <tbody><tr><td rowspan ='2'>Lines</td><td colspan ='2'>Observed</td><td rowspan ='2'>Expected</td><td rowspan ='2'>Expected segregation ratio</td><td rowspan ='2'>\( x ^ { 2 } \)-value</td><td rowspan ='2'>P-value</td></tr><tr><td>\( \mathrm { Hyg } ^ {\mathrm { R } } \).</td><td>\( \mathrm { Hyg } ^ {\mathrm { 5 } } \).</td></tr><tr><td>control</td><td></td><td>198</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td rowspan ='2'>merB1</td><td rowspan ='2'>180</td><td rowspan ='2'>17</td><td>184.7:12.3</td><td>15:1</td><td>1.9</td><td>0.1677</td></tr><tr><td>147.8:49.3</td><td>3:1</td><td>28:2</td><td>0.0001</td></tr><tr><td rowspan ='2'>merB4</td><td rowspan ='2'>151</td><td rowspan ='2'>46</td><td>184.7:12.3</td><td>15:1</td><td>98.3</td><td>0.0001</td></tr><tr><td>147.8:49.3</td><td>3:1</td><td>0.3</td><td>0.5928</td></tr></tbody></table>
표1에서, merB1의 열매수는 얼마인가?
\( 8.0 \pm 1.4 \)