<h2>면역원성 확인</h2><p>항원인 H. pylori의 WC, OMP, crude urease를 SDS-PAGE로 분자량 측정결과 각각 12 개, 7 개, 3 개의 주요 단백질 band 를 확인할 수 있었다(Fig. 7). 각 항원단백질에 대한 면역원성을 알아보기 위하여 생산된 각 항혈청으로 Western blotting 을 실시하였다. 그 결과 각 항체에 대한 항원성 물질은 WC 항원 10종류, OMP 항원 6종류, crude urease 항원 3종류의 단백질이 면역원성이 있는 것으로 확인되었다(Fig. 4).</p><p>툭히, H. pylori urease는 subunit A 와 B로 나누어지며, 각 각 \( 30.5 \mathrm{kDa} \) 과 \( 62.5 \mathrm{kDa} \) 의 분자량을 나타내는 것으로 알려져 있다. H. pylori 단클론(monoclonal) 항체에서 면역성이 urease B 는 약하나, urease A 는 강한작용을 하는 것으로 보고되고 있다. 본 실험방법에 의해 분리된 crude urease는 \( 25, 36,64 \mathrm{kDa} \) 의 분자량을 가진 단백질 모두가 면역원성을 가지는 것을 볼 수 있었다. 그리고 \( 36, 64 \mathrm{kDa} \) 분자량을 가진 단백질 band가 urease A, B subunit인 젓으로 사료된다.</p><h2>항균활성</h2><h3>Anti-H. pylori 항체에 의한 H. pylori 응집반응</h3><p>특이 항혈청에 의한 박테리아의 응집은 미생물의 세포표면, 협막 또는 편모 항원에 의해 유래된 항혈청의 유무에 의해 기인된다. 응집반응은 박테리아 항원성 조성, 감염성질병의 진단을 위한 임상실험, 박테리아 분류를 위한 분류학상으로 기본연구를 위한 연구실험으로 사용된다. 응집반응은 항체를 첨가하여 특정 항원(세균)을 응집시키는 것을 뜻한다. 육안 또는 현미경으로 관찰할 수 있으며, 항원 또는 항체 측정에도 사용된다. 현재는 세포나 입자 표면에 항원기만 있으면 대부분의 항체는 응집을 일으키는 것으로 알려져 있다. H. pylori 백신으로 미리 면역된 mouse에서 질병예방 효과는 나타나지 않았으나, 세균의 양을 줄일 수 있으며, 위염 염증과 관련된 균체의 colonization의 감소와 제거현상이 나타나는 것으로 보고되고 있다.</p><p>본 실험에서는 H. pylori에서 분리된 각 항원으로 생성된 항혈청의 H. pylori에 대한 응집정도를 알아보기 위해 광학현미경으로 관찰하였다(Fig. 5). 각 항혈청을 단계별로 희석하<p>여 H. pylori과 반응시켜 광학현미경으로 관찰하였을 때 절반 이상 응집반응을 나타내는 희석배수를 응집가로 결정 하였다. 따라서 면역되지 않은 항혈청에서는 응집반응이 일어나지 않았으나, WC, OMP, crude urease에 의해 생성된 항혈청에 대해 모두 높은 응집가를 나타내었다. 그리고 응집가 이상의 항혈청 희석에서도 응집정도는 약했으나 균의 활동성이 현저히 저하되는 것을 관찰할 수 있었다. 항체의 H. pylori에 대한 응집정도를 나타내는 응집가(Agglutination value)는 anti-WC (H), anti-WC (L), anti-OMP, anti-urease 항혈청에서 각각 \( 2^{5}, 2^{5}, 2^{6}, 2^{7} \) 으로 나타났으며, 상대적으로 anti-urease 항혈청이 높은 응집가를 나타내었다(Table 2).</p>
항혈청에 의한 박테리아의 응집은 무엇에 의해 기인되는가?
미생물의 세포표면, 협막 또는 편모 항원에 의해 유래된 항혈청의 유무에 의해 기인