<h3>아미노산 분석</h3><p>세절한 시료 \( 10 \mathrm{~g} \)을 증류수 \( 50 \mathrm{ml} \)와 넣어 균질기 (IKA Works (Asia) Sdn. Bhd. T25-B, Malaysia)로 균질화( \( 14,000 \mathrm{rpm} \), 2 \( \mathrm{min}) \)하여 slurry를 원심분리 \( (4,000 \mathrm{rpm}, 20 \mathrm{~min}) \) 한 후 여과지 (Whtaman No. 2)에 여과시켰다. 여과액에 \( 12 \% \) TCA solution을 동량 \( (50 \mathrm{ml}) \)으로 첨가시킨 다음 냉건소에 1시간 침전 후 원심분리 \( (4,000 \mathrm{rpm}, 20 \mathrm{~min}) \) 한 후 침전물은 버리고 상등액을 취한 후 상등액에 ethyl ether \( 50 \mathrm{ml} \)를 가하여 TCA와 lipid를 제거하였다(3회 반복하여 하층을 회수). 회수 물질을 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) evaporator로 농축한 후, 농축액을 \( 0.2 \mathrm{~N} \) sodium citrate buffer \(\mathrm{pH} 2.2\)로 \(5 \sim 10\mathrm{ml}\)로 희석시킨 후 용액을 menabrane filter로 여과하여 자동아미노산 분석기(Biochrom 20, Pharmocia, Sweden)로 분석하였다.</p><h3>무기물과 유리 양이온의 측정</h3><p>시료 \( 1 \mathrm{~g} \)을 삼각플라스크에 넣은 후 ternary sloution 40\( \mathrm{ml} \)을 가한 후 삼각플라스크를 hot plate \( \left(350^{\circ} \mathrm{C}\right) \)에 올린 후 가열분해시켰다. 가열분해된 시료를 \( 100 \mathrm{ml} \) 플라스크에 넣어 증류수를 첨가하여 \( 100 \mathrm{ml} \)로 맞춘 후 이 혼합액을 ICP 기기(AtomScan-25, Thermo Jarrell Ash Corporation (TJA), USA)에 넣어 무기물과 양이온 함량을 정량하였다.</p><h3>지방산 조성의 분석</h3><p>시료 \( 10 \mathrm{~g} \)에 혼합유기용매 \( 150 \mathrm{ml} \)를 넣고 균질기(\(2,500 \mathrm{rpm}\))로 3분간 마쇄하여 여과(Whatman No.1 \( 185 \mathrm{~mm} \) )한 후 그 잔사에 다시 혼합유기용매 \( 100 \mathrm{ml} \)를 이용하여 마쇄, 용출시켰다. 이 여액에 물을 \(1 / 3\) 정도(총여액의 \(1 / 3\) ) 가하여 원심분리(Union 5KR, Made in KOREA; \(3,000 \mathrm{rpm}\), \(10 \mathrm{min}\))한 후 하층(lipid layer)을 취하여 sodium sulfate anhydrous를 이용하여 남은 수분을 흡착 여과한 후 여액을 evaporator (BUCHI Rotavapor R-200, Swiss; \(55^{\circ} \mathrm{C} \), \(25 \mathrm{min}\))를 이용하여 지질을 추출하였다. 지질 추출후 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 이하에서 질소가스를 주입하면서 농축한 후 \( 1.0 \sim 2.0 \mathrm{mg} \)의 농축 지질에 \( 4 \% \) sulfuric acid \( \left(40 \mathrm{ml} \ \mathrm{H}_{2} \mathrm{SO}_{4} / 1000 \mathrm{ml}\right. \) methanol)용액 \( 3 \mathrm{ml} \)를 가하여 밀봉한 다음 water both \( \left(90^{\circ} \mathrm{C}\right) \)에서 20분간 가열 \( (5 \)분마다 흔들어 줌)하여 실온에서 냉각한 후 다시 증류수 \( 1 \mathrm{ml} \)를 가하여 흔들고 여기에 hexane \( 2 \mathrm{ml} \)를 넣고 흔든 후 하층을 제거하였다. 3회 반복하여 \( 2 \mathrm{ml} \)의 증류수를 넣어 하층을 제거하고 여액에 sodium sulfate anhydrous를 적당량 넣어 흔든 후 상등액 \( 2.5 \sim 3\mu \mathrm{l} \)를 취하여 GLC (HP \(6890^{+}\) GLC)를 이용하여 지방산을 분석하였다. 이때 GLC의 조건은 Table 1과 같다.</p><h3>통계분석</h3><p>실험에서 얻어진 DATA를 SAS program (2003)을 이용하여 분산 분석 및 Duncan (1955)의 다중 검정을 실시하였다.</p>
가열분해된 시료의 무기물과 양이온 함량을 정량하기 위해서 사용한 기기가 뭐야?
ICP 기기