<h1>서 론</h1><p>미생물의 항생제 내성 및 약제 내성의 출현과 이와 관련된 심각한 감염성 질환의 출현은 지난 수십년간 급격한 증가 추세에 있다. 항생제로 치료가 가능하였거나 완전히 치료가 가능하다고 믿었던 많은 종류의 세균성 질환들이 또 다시 임상 현장에 빈번히 출현하고 있으며, 더욱이 그 치료는 점점 어려워지고 있다. 미생물들은 오랜 기간 동안 외부로부터 들어오는 항생제 및 여러 독성 약제에 대해 내성을 보이는 방법을 개발해 왔다. 세균들의 염색체 및 plasmid에는 많은 수의 약제 내성 유전자가 존재하고 있으며, 이러한 내성 유전자들은 여러 가지 기작의 약제 내성 패턴을 나타낸다. 약제 배출 펌프단백질, 약제의 불활성화, 약제 표적단백질의 변화 및 세포막 투과성 감소 등이 그 대표적인 기작이다. 이러한 여러 가지 기작 중에서 다제배출 폄프단백질은, 하나의 단백질이 구조적으로 유사하지 않은 여러 가지 약제에 대해 한꺼번에 내성을 보임으로써 미생물의 다제 내성에 주요한 원인기작으로 지목되고 있다.</p><p>증가 일변도에 있는 약제 내성 및 다제 내성 미생물에 의한 감염성 질환을 극복하기 위해서는 미생물의 항생제 내성의 분자생물학적 메커니즘에 대한 광범위한 이해가 필수적이다. 그러므로 세균의 다제배출 펌프단백질의 유전학적 및 분자생물학적인 이해는 대단히 중요하다. 해당 유전자의 클로닝, 원인 단백질의 발현, 그리고 생화학적인 분석 등은 다제배출 펌프단백질의 기작을 이해하는데 중요한 접근방법 이라고 할 수 있다.</p><p>장구균, enterococci는 편성 혐기성의 그람 양성균으로, 보통 인간 및 대부분의 동물의 내장에서 발견 된다. Enterococcus faecalis 및 E. faecium 등 장구균에 의한 감염증에는 요로감염, 창상감염, 균혈증 그리고 심내막염 등이 있다. 대부분의 장구균은 \( \beta \)-lactam제, fluoroquinolone제, aminoglycoside 및 glycopeptide 등 다양한 항생제 및 항미생물 약제에 대해 자연 내성을 가지고 있다. 지난 20여년간 장구균은 병원 내 감염의 주요한 원인균으로 그 출현빈도가 증가하여 왔으며, 이는 장구균 감염증 치료에 주로 사용되는 약제에 대한 내성균의 출현빈도 중가 추세와 일치한다. 실제로 장구균은 수술실 내 감염 원인균의 수위를 점하고 있으며, 그 결과 현재 장구균은 높은 사망률의 감염질환을 일으키는 병원 내 감염 원인균으로서 큰 위협이 되고있다. 이처럼 장구균의 항생제 내성의 급격한 증가는 장구균을 주요한 병원 내 감염 원인균으로 만들고, 장구균은 이제 가장 치료하기 힘든 감염균 중의 하나로 지목되고있는 실정이다.</p><p>견고한 외막이라는 방어막으로 둘러싸인 그람 음성균과는 달리, 장구균을 포함한 그람 양성균에 있어서는 외부로부터 끊임없이 들어오는 약제에 대한 내성을 발휘하기 위해서는 약제를 배출하는 기작이 가장 효율적이다. 본 연구에서는 장구균으로부터 분리된 다제배출 펌프단백질인 EmeA의 특성을 파악하고, 에너지 의존적인 약제 배출활성을 형광기 질인 ethidium bromide와 acriflavine을 이용하여 측정하였 으며, 약제배출 단백질의 저해제로 알려진 reserpine의 EmeA에 대한 저해활성을 측정하였다.</p>
장구균을 포함한 그람 양성균은 어떻게 외부로부터 끊임없이 들어오는 약제에 대한 내성을 효율적으로 발휘해?
약제를 배출하는 기작