<h1>재료 및 방법</h1><h2>시료제조</h2><p>양강근의 정유성분은 **대 *****과 *******실 *** 교수팀에서 분양받았으며 이는 전주 한약재시장에서 구입한 양강근을 수증기증류(Steam distillation)법으로 추출된 것이다. 길초근의 수증기 증류 추출물은 전남생물산업진흥원에서 오일추출기(Essential oil extractor)를 사용하였으며, 마쇄한 양강근 뿌리를 추출조에 넣고 물을 가열하여 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) 의 수증기를 4시간 동안 공급하였으며 양강근 정유성분은 냉각기를 거쳐 액화되면서 나누어진 물질 중 정유성분으로 구성된 것만을 분리하여 추출하였다.</p><h2>조성 및 함량분석</h2><p>양강근의 수증기 증류 추출법에 따른 정유성분의 조성 및 함량을 확인하기 위해 \( \mathrm{GC}-\mathrm{Mass} \)를 이용하여 성분 조성 및 함량을 분석하였다. 양강근 정유 \( 20 \mu \mathrm{L} \)를 chloroform \( 1 \mathrm{~mL} \) 에 녹여서 \( \mathrm{GC}-M a s s \) 에 주입하였고, 검색된 성분은 library, retention time \( (\min ) \) 과 retention index와 비교하여 성분을 확인하였다.</p><h2>제형화</h2><p>수증기 증류법으로 추출한 양강 추출물 원액을 경북대학교 환경생물화학과의 협조로 유화제(Tergitol) 및 에탄올과 혼합하여 제형화하였고, 제형비는 정유:유화제:에탄올(5:1:4)의 비율이다. 양강근의 주요 성분인 Methyl cinnamate는 Sigma-aldrich (96410)사에서 구입한 것을 동일비율로 제형화하여 사용하였다.</p><h2>시험해충</h2><p>미국선녀벌레 약충은 5월에서 6월 초까지, 성충은 7월 중순부터 8월까지 전북 익산 여산면, 경남 함양 함양읍 일원의 아카시나무 등에서 채집하여 사용하였다. 채집한 시험해충은 국립농업과학원 작물보호과 해충사육실로 가져와 아크릴 사육케이지 \( (\mathrm{W} 45 \times \mathrm{L} 45 \times \mathrm{H} 45 \mathrm{~cm}) \)에 넣어 \( \left(24 \pm 1{ }^{\circ} \mathrm{C}, 60 \pm 5 \%, 16 \mathrm{~L}: 8 \mathrm{D}\right) \) 블루베리를 기주로 접종하여 일주일 이상 안정화시킨 후 실험에 사용하였다.</p><h2>생물활성 검정</h2><p>미국선녀벌레의 생물검정은 분무법(Spray method)을 통해 살충 및 기피활성을 검정하였다. Insect acrylic cage ( W5 \( \times \mathrm{L} 5 \times \mathrm{H} 10 \) \( \mathrm{cm}) \)에 잎이 있는 블루베리 가지를 시들지 않도록 오아시스에 꽂아 양쪽에 배치한 후 미국선녀벌레 약충 및 성충 10개체를 접종하였다. 3일간 안정화 기간을 거친 후 제형화 시료를 각각 100배, 250배의 농도로 희석하여 조제하여 hand-held sprayer \( (30 \times \mathrm{H} 70 \mathrm{~mm}) \) 에 담아 약 \( 20 \mathrm{~cm} \) 거리를 두고 분무하였다. 기피 효과 검정을 위해서 블루베리 가지를 2개중 하나는 조제한 시료에 10초간 침지한 후 30분간 음건하여 표면에 물기를 말린 후 오아시스에 꽂아 케이지 안에 배치하고 다른 블루베리 가지는 처리 없이 배치하였다. 그 후 페트리디시에 시험곤충을 각각 10 개체씩 넣어 두개의 가지 사이에 두었다. 음성대조군으로는 증류수(ditilled water)를 사용하였다. 처리된 insect acrylic cage는 온도 \( 24 \pm 1{ }^{\circ} \mathrm{C} \), 상대습도 \( 60 \pm 5 \% \), 광주기 \( 16 \mathrm{~L}: 8 \mathrm{D} \)의 조건의 항온항습실에 두고 24시간 및 48시간 후 살충 및 기피 효과를 검정하였다. 생물검정은 3반복으로 실시하였으며, 실험용 붓으로 미국선녀벌레 약충 및 성충을 자극하였을 때 움직임이 없는 개체는 사망한 것으로 처리하였다. 기피 활성은 처리 및 무처리 가지에 각각 이동한 개체수를 조사하여 기피효과를 판단하였다.</p><h2>통계분석</h2><p>실험에서 도출된 결과는 통계패키지(SPSS 12.0) 프로그램을 이용하여 평균 \( \pm \) 표준편차로 표기하였고 실험군 간 유의성 비교를 위해 독립표본 T-test를 실시하였다( \( p>.05) \).</p>
양강근의 정유성분은 어떤 방법으로 추출해?
수증기증류