<h1>고 찰</h1><p>Dynamin은 endocytosis 과정의 마지막 부분에서 endocytic vesicle을 membrane으로부터 분리하는데 중요한 역할을 하는 단백질이다. Dynamin 단백질의 한 family인 dynamin-2 는 모든 조직에서 광범위하게 발현되며, SH3 domain을 갖는 PLC\(\gamma\), PI3K의 p85 subunit등 여러 종류의 신호 전달단백질들과 binding한다는 것이 알려져 있으며 특히 암의 발생에 중요한 역할을 하는 Ras의 신호 전달 단백질인 Grb2 와의 binding이 알려지면서 새로운 신호 전달 단백질로의 가능성이 제기 되었다.</p><p>Grb2는 ligand에 의해 활성화된 Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR)과 Ras의 activator인 SOS를 연결시켜주는 단백질로 Ras의 활성화에 중요한 역할을 하는 단백질이다. 하지만 현재까지 dynamin과 Grb2 의 결합이 Ras의 신호 전달 과정에서 어떠한 역할을 하는지는 잘 알려져 있지 않다. Grb2 와 상호작용 한다고 알려진 dynamin-2의 Proline Rich Domain (PRD)은 microtubules과도 상호작용 한다는 것이 알려져 있는데 이러한 결과는 세포의 표면에서 ligand의 결합에 의해 시작된 수용체의 신호를 dynamin과 Grb2 와의 결합이 microtubules로 연걸시켜주는 역할을 할 수 있음을 의미한다. 다른 한편으로, 신호 전달 과정에서 endocytosis는 신호 전달의 종결과정에 중요하므로 Grb2 와의 상호작용을 통해 dynamin-2가 Ras의 신호 전달을 종결하기 위해 수용체의 endocytosis를 유도할 수도 있을 것이다.</p><p>Ras는 대표적인 small GTP 결합 단백질이며 세포의 성장과 분화과정에 필수적인 신호전달 물질로서, 특히 암의 발생과 밀접한 관련이 있음은 잘 알려진 사실이다. 이전의 보고에 의하면 Ras가 과발현된 NIH3T3 (Ras) 세포는 암화가 촉진되며, HaCaT 세포의 이동을 촉진시킨다. 암세포들은 정상적인 세포보다 세포 활성이 강하여 형태학적으로 세포성 돌기, 라멜라층판 등이 두드러지게 나타나며, 미세구조적으로도 세포막을 시작으로 endocytosis가 정상직인 세포에 비하여 현저하게 많이 일어난다고 보고되어있다. 이러한 세포학적인 특징으로 미루어볼 때 암세포는 정상세포에 비해 비특이적인 세포 이동의 기회가 많음을 알 수 있다. Dynamin은 이동 중인 세포의 filopodia부위에서 actin과 함께 분포하며, trans-Golgi network에서 vesicle을 이동하는데 관여한다고 보고되었다. Endocytosis 과정에 dynamin이 관여하는 것은 이미 정론화 되어 있지만, dynamin이 단지 endocytosis 기능만을 수행하는 단백질인가에 대해서는 아직 논란의 대상이 되고 있는 실정이다. 이러한 연구 결과들을 종합해 보면 dynamin-2가 NIH3T3 (Ras) 세포에서 증가한다는 본 연구 결과는 dynamin-2가 endocytosis 뿐만 아니라 세포의 다른 활성 (세포이동, vesicle 이동 등)에도 관여할 것임을 예측하게 한다.</p><p>이전의 연구에서 이미 dynamin-2가 Ras에 의해 암화된 NIH3T3 (Ras) 세포에서 Ras 신호 전달 단백질인 Grb2 와의 결합이 확인되었는데, 본 연구에서는 이 두 단백질간의 결합이 각각의 단백질 양의 증가에서 유래하는지 확인하기 위하여 이들의 발현을 비교해 보았다. 그 결과 dynamin-2의 경우 mRNA가 NIH3T3 (Ras) 세포에 비해 NIH3T3 (Ras)세포에서 약 100 배 증가하였음을 확인하였고 단백질 발현 또한 증가하였음을 볼 수 있었으나, Grb2 는 두 세포에서 mRNA와 단백질 발현의 차이를 볼 수 없었다. 또한 NIH3T3 (Ras) 세포에서 dynamin-2의 promoter 분석을 수행하였으며, 그 결과 start codon으로부터 \(200-\mathrm{bp}\)부터 \(300-\mathrm{bp}\) upstream부위가 dynamin-2 의 promoter 활성을 결정하는 부분임을 확인하였다. 현재는 어떠한 전사인자가 dynamin-2의 promoter 활성을 조절하게 되는지 자세히 연구하고 있다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때 NIH3T3 (Ras) 세포에 비해 NIH3T3 (Ras)세포에서 dynamin-2의 발현이 현저히 증가하였음을 볼 수 있었고, 이 증가한 dynamin-2는 Grb2와 결합하므로 Ras 신호 전달 과정에 관여하거나 암세포의 이동 혹은 endocytosis의 증가를 유발할 것으로 예측할 수 있다.</p>
endocytosis 과정의 마지막 부분에서 endocytic vesicle을 membrane으로부터 분리하는데 중요한 역할을 하는 단백질은 뭐야 ?
Dynamin