<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 재료</h2><p>본 연구의 재료인 코스모스(Cosmos bipinnatus Cav.)꽃은 \(9\)월에 부산시 사상구 낙동강변의 삼락공원에 서식하는 것을 채집하였다. 코스모스 중에서도 횐색, 분홍색, 자주색의 \(3\)가지 꽃을 채취하여 깨끗하게 세척한 후 그늘에서 말려서 실험을 진행하였다. 코스모스꽃의 항균 활성을 알아보기 위해 \(4\)가지 박테리아를 사용하였다. 그람양성균으로는 황색포도상구균(S. aureus, KCTC \(1927\); Korean Collection for Type Cultures, Korea), 표피포도상구균(S. epidermidis, KCTC \(1917\); Korean Collection for Type Cultures, Korea)을 그람음성균으로는 녹농균 \( (P \). aeruginosa, KCTC \(2004\); Korean Collection for Type Culture, Korea), 대장균(E. coli, KCTC \(2571\); Korean Collection for Type Culture, Korea)이 사용되었다. 박테리아들은Luria-Bertai (LB) 액체 배지에 접종된 뒤에 shaking incubator \( \left(37^{\circ} \mathrm{C}, 200\right. \)\( \mathrm{rpm}) \) 안에서 배양되었다. LB 배지(\(1\mathrm{L}\) 기준)는 증류수 \(950 \mathrm{g} \)에 tryptone (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) \( 10 \mathrm{g} \)과 sodium chloride (\( \mathrm{NaCl} \); Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) \( 10 \mathrm{g} \), yeast extract (Duchefa Biochemie, Haarlem, Netherlands) \( 5 \mathrm{g} \)으로 제조하였다.</p><p>Silica gel column chromatography는 silica gel \(60\) (\(230400\) mesh; Merck KGaA, Darmstadt, Hessen, Germany)으로 실험을 진행하였다. 또한, High-Pressure Liquid Chromatography (HPLC) 분석에는 methanol, water 등의 용매를 사용하였고 이는 Fisher Scientific (Pittsburgh, Pennsylvania, USA)에서 구입하였다.</p><p>그 외 chloroform, ethanol, ethyl-acetate, dimethyl sulfoxide (DMSO) 등은 대정화금의 \(1\)급 시약을 사용하였다.</p><h2>기기</h2><p>본 연구 가운데 항균 활성에 관한 실험에 사용된 기기에는 auto clave (Dae Han Bio Link Co., Ltd., Eumseong, Korea), rotary evaporator (Rotavapor R-\(114\); Büchi AG, Flawil, Switzerland), shaker (BF-\(350\)SK; BioFree, Seoul, Korea), shaking incubator (VS-\(8480\)SF; Vision Scientific Co., Ltd., Daejeon, Korea), micro high speed centrifuge (Micro \(17\)TR; Hanil Science Industrial Co., Ltd., Gimpo, Korea), centrifuge (Union \(32\)R; Hanil Science Industrial Co., Ltd.), microplate reader (Synergy HT; BioTek Instruments, Winooski, VT, USA) 등이 있다. 성분 분석과 관련하여 NMR 측정과 HPLC 측정을 진행하였다. NMR 측정은 Unity Inova \(500\) (Agilent technologies, Santa Clara, CA, USA)을 이용하였고 HPLC 측정에는 iLC\(3300\) (LABOGENE, Eresing, Bavaria, Germany)을 사용하여 측정하였다.</p><h2>시료의 추출</h2><p>본 연구에서 사용된 코스모스꽃은 채취 후 그늘에서 말려 세절해서 사용하였다. 코스모스 \( 100 \mathrm{g} \)에 \( 85 \% \) 에탄올을 처리한 후 빛을 차단한 채로 \( 24 \mathrm{h} \) 동안 보관였다. 이후 감압 여과와 농축의 과정을 통해서 시료 추출물을 얻었다. 이런 과정을 \(3\)회 반복하여 모은 \(1\)차 추출물에 클로로포름\( \left(\mathrm{CHCl}_{3}\right) \)과 증류수(DW)를 첨가하여 분획하여 \( \mathrm{CHCl}_{3} \)층을 분리하고 DW층에 에틸아세테이트(EtOAc)를 더하여 DW층과 EtOAc층을 얻었다. 이 \(3\)가지 분획물들을 농축하여 \(1\)차 항균 실험을 진행하였다.</p>
본 연구의 재료는 무엇인가요?
코스모스(Cosmos bipinnatus Cav.)꽃