<h1>재료 및 방법</h1><h2>시료</h2><p>2010년 경상남도 함양군에서 생산된 여주를 함양군영농조합법인(Hamyang, Korea)에서 제공받아 사용하였다. 동결건조시킨 여주\( (1 \mathrm{~kg}) \)를 methanol로 12시간 동안 3회 반복 추출하여 methanol 추출물\( (305.5 \mathrm{~g}) \)을 얻었으며, 용매분획을 실시하여 얻어진 BuOH 분획물 \( (9.2 \mathrm{~g}) \)을 얻어 실험에 사용하였다.</p><h2>시약 및 기기</h2><p>\( A \beta_{25-35} \), malondialdehyde (MDA), griess reagent, \( \mathrm{NaNO}_{2} \)는 Sigma Aldrich (St Louis, MO, USA)에서 구입하였다. Thiobarbituric acid (TBA)는 Lancaster Synthesis (Ward Hill, NY, USA)에서, phosphoric acid와 1-butanol은 Samchun Pure Chemical, Co (Gyeonggi, Pyeongtaek, Korea)에서 구입하였다. 흡광도는 microplate reader (BioRad, Hercules, CA, USA) 기기를 사용하여 측정하였다.</p><h2>실험동물 및 실험군의 배치</h2><p>5주령의 ICR 마우스(\(25-28 ~\mathrm{g}\), 수컷, 계통: CrljOri:CDI) 28마리를 (주)오리엔트바이오(Gyeonggi-do, Korea)에서 구입하여 1주일간 사육 환경에 적응시킨 뒤 실험에 사용하였다. 사육실의 온도 및 습도는 각각 \( 20 \pm 2^{\circ} \mathrm{C}, 50 \pm 10 \% \)를 유지하였고, 명암은 12시간 간격으로 light-dark cycle을 유지하였다. 실험동물은 퓨리나(조단백질 단백질 \( 21.1 \% \), 조지방 \( 3.5 \% \), 조섬유 \( 5.0 \% \), 조회분 \( 8.0 \% \), 칼슘 \( 0.6 \% \), 인 \( 0.6 \% \)) 고형사료와 음용수를 정수한 물을 자유롭게 공급하였다. 실험동물은 정상군(normal군), \( \mathrm{A} \beta_{25-35} \)를 처리하여 인지능 손상을 유도한 군(control군), \( \mathrm{A} \beta_{25-35} \) 처리 후 여주 BuOH 분획물 \( 100 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 혹은 \( 200 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 위내투여군으로 총 4군으로 나누어 실험을 진행하였으며, 각 군당 7마리씩 배치하였다. 실험 종료 전 14일간 normal군과 control군은 음용수를, 여주 BuOH 분획물군은 음용수에 녹인 여주 BuOH 분획물을 각각 \( 100 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} / \mathrm{day} \) 또는 \( 200 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} / \mathrm{day} \)의 농도로 존대와 주사기를 이용하여 일정한 시간에 위내투여하였다. 모든 실험은 부산대학교 동물실험윤리위원회의 승인(승인번호: PNU-2010-000142 ) 하에 수행되었다.</p><h2>실험동물의 인지능 손상 유도</h2><p>인지능 손상을 유도하기 위해 사용된 \( A \beta_{25-35} \)는 실험 직전 생리 식염수에 \( 5 \mathrm{nM} \)의 농도로 희석한 뒤, \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 72시간 동안 응집시켜 실험에 사용하였다. Laursen과 Belknap 방법(1986)에 따라 ICR 마우스에 \( \mathrm{A} \beta_{25-35} \)를 주입하여 AD 동물 모델을 유도하였다. 26-Gauge needle이 달려있는 \( 10 \mu \mathrm{L} \) Hamilton microliter syringe로 각 실험동물의 정수리[bregma (두개골 계측점)에서 caudal (꼬리쪽) 방향으로 \( 0.5 \mathrm{~mm} \), midine (정준선)에서 오른쪽으로 \( 1.0 \mathrm{~mm} \)에 \( 2.2 \mathrm{~mm} \) 깊이로 \( \mathrm{A} \beta_{25-35}~ 5 \mu \mathrm{L} \)의 양을 약 30초 동안 주입하여 인지능 손상을 유발하였다. Normal군의 경우 동일한 방법으로 생리식염수를 주입하였다.</p>
본문에서 사용된 여주의 제공자는 누구였는가?
함양군영농조합법인