<h2>Ginsenoside 함량 분석</h2><p>진세노사이드 분석은 Jin 등의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 건조 분말 시료 1\( \mathrm{~g} \) 에 50\( \% \) HPLC methanol 20\( \mathrm{~mL} \) 를 가하여 항온수조 (70\( ^{\circ} \mathrm{C}) \) 에서 1 시간 추출하고 이를 원심분리하고 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) membrane filter로 여과하는 과정을 2회 반복하여 추출물 40\( \mathrm{~mL} \) 을 얻는다. 추출 시료는 60\( ^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 감압 농축 후 최종 HPLC water 2\( \mathrm{mL} \) 로 용해하여 0.45\( \mu \mathrm{m} \) membrane filter로 여과하여 분석에 사용하였다. 시료 주입량은 10\( \mu \mathrm{L} \), 유속은 1.0\( \mathrm{mL} / \mathrm{min} \) 을 유지하였고 HPLC 칼럼은 TSKgel ODS-100Z (\( 4.6 \times 250 \mathrm{nm}\), 5\( \mu \mathrm{m} \), Tosoh Corp., Tokyo, Japan)를 사용하였으며 203\( \mathrm{nm} \) 파장에서 분석을 진행하였다. 이동상 용매는 HPLC water와 HPLC acetonitrile를 각각 용매 \( \mathrm{A} \) 와 용매 \( \mathrm{B} \) 로 사용하였으며 분석조건은 용매 \( \mathrm{B} \) 를 기준으로 10 min-19\( \% \), 15 min-20\( \% \), 40 min-23\( \% \), 75min-35\( \% \), 90 min-90\( \% \), 105min-19\(\%\)로 분석하였다.</p><h2>항산화 능력 측정</h2><p>DPPH, ABTS 및 hydroxyl 라디칼 소거활성은 Hwang 등 및 Ahn 등의 방법에 따라 측정하였다. DPPH 용액 0.8\( \mathrm{mL} \) 를 시험관에 분주하고 50 베 희석한 시료 0.2\( \mathrm{~mL} \) 를 가하여 잘 혼합한 후 실온 암실에서 30분간 반응시킨 후 분광 광도계를 이용하여 파장 525\( \mathrm{nm} \) 에서 측정하였다. ABTS 라디칼 소거 활성은 7\( \mathrm{mM} \) ABTS 용액과 \( 2.45 \mathrm{mM} \) potassium persulfate 용액을 \(1:1\)로 섞어 실온 암실에서 12-16시간 반응하여 \( \mathrm{ABTS}^{+} \) 이온을 형성시킨 후 732\( \mathrm{nm} \) 에서 흡광도 값이 \( 0.7 \pm 0.02 \) 가 되도록 추출 용매(메탄올)로 희석한 ABTS 라디칼 생성 용액 0.9\( \mathrm{mL} \) 과 100 배 희석된 시료 0.1\( \mathrm{mL} \) 를 시험관에 분주하여 적당히 교반한 후 3분 후에 측정하였다. Hydroxyl 라디칼 소거활성은 10\( \mathrm{mM} \) \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \), 10\( \mathrm{mM} \) \( \mathrm{FeSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)-EDTA 및 10\( \mathrm{mM} \) 2-deoxyribose 0.2\( \mathrm{~mL} \) 를 시험관에 분주하고 희석된 시료 1.4\( \mathrm{~mL} \) 를 가하여 충분히 교반 후 37\( ^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 4시간 동안 반응시켰다. 이 후 1\( \% \) TBA와 2.8\( \% \) TCA를 각각 1\( \mathrm{mL} \) 를 분주하고 100\( ^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 20 분 동안 발색한 후 520\( \mathrm{~nm} \) 의 파장에서 측정하였다. 음성대조구는 시료 대신 추출 용매(\( 50 \% \) 발효 주정)를 사용하였고 DPPH, ABTS 및 hydroxyl 라디칼 소거활성은 시료 첨가구와 무첨가구(음성대조구) 사이의 차이를 백분율(%)로 나타냈었다.</p><p>Ferric reducing/antioxidant power (FRAP) 측정은 Hwang 등의 방법을 조금 변형하여 측정하였다. \( \mathrm{pH} 3.6 \) 의 \( 30 \mathrm{mM} \) acetate buffer, \( 10 \mathrm{mM} \) TPTZ 시약(in 40 \( \mathrm{mM} \mathrm{HCl} \) )및 20\( \mathrm{mM} \mathrm{FeCl}_{3} \) 용액을 \( 10: 1: 1(\mathrm{v} / \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 의 비율로 혼합 후 37\( ^{\circ} \mathrm{C} \) 항온 수조에서 15분 예비 반응하여 FRAP 측정을 준비하였다. 20배 희석한 추출 시료 0.05 \( \mathrm{mL} \) 과 예비 반응시킨 FRAP 시약 0.95\( \mathrm{mL} \) 를 시험관에 분주하여 37\( ^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 15분 반응시키고 593 \( \mathrm{nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다.</p>
건조 분말 시료 1\( \mathrm{g} \)에 50\( \% \) HPLC methanol을 얼마나 넣었나요?
20\( \mathrm{~mL} \)