<h2>효소 생산</h2><p>효소 유도 탄소원인 oat spelt xylan, HBSG I, II 및 AFBSG를 함유한 배지에서 배양기간에 따라 Pseudomonas sp. LG2가 생산하는 세포외 단백질의 FAE와 xylanase의 효소 활성을 조사하여 Fig. 2에 나타냈다. 3종류의 탈 전분된 탄소원과 oat spelt xylan 을 기질로 하여 FAE의 활성을 측정한 결과 HBSGI 의 경우 배양기간이 10 일 경우 최대 활성(\(7.6 \mathrm{mU} / \mathrm{mg} \) )을 보였으며, HBSG II 의 경우 배양 12 일에 최대 활성 \( (12.4 \mathrm{mU} / \mathrm{mg}) \) 보였다. 또한 AFBSG 는 배양 8 일에 최대 활성 \( (15.4 \mathrm{mU} / \mathrm{mg}) \) 을 나타냈다. 그러나 탄소원인 oat spelt xy-lan 경우 FAE의 활성이 배양 8 일에서 최대 활성 \( (4.4 \mathrm{mU} / \mathrm{mg}) \) 을 보였다. Xylanase의 활성 역시 모든 탄소원을 기질로 사용한 배지에서 조사 됐는데, HBSG I, II의 경우 배양 8 일 까지 효소 활성 \( (1.5 \mathrm{U} / \mathrm{mg} \) 및 \( 1.3 \mathrm{U} / \mathrm{mg}) \) 이 각각 증가하다 그 이후부터는 점차 감소하는 경향을 보였으며, AFBSG를 탄소원으로 했을 때도 같은 경향을 보였다(\( 1.7 \mathrm{U} / \mathrm{mg}) \). 그러나 oat spelt xylan의 경우 배양 6 일 \( (5.3 \mathrm{U} / \mathrm{mg}) \) 까지 증가하다 8일 \( (2.1 \mathrm{U} / \mathrm{mg}) \) 이후부터는 급격하게 감소하였다. Ralet 등은 전분을 제거한 wheat bran에는 feruloylated arabinox-ylan들이 함유되어 있어 미생물에 의해 생산된 상업용 복합 효소제인 Celluclast(주로 proteinase, \( \beta \)-glucanase, xylanase 함유)를 wheat bran에 전처리하여 arabinose의 \( \mathrm{C}_{5} \) 에 ferulic acid가 ester 결합된 feruloylated oligosaccharides를 제조하고, 이 Celluclast로 가용화하여 얻은 feruloylated oligo-saccharides를 탄소원으로 사용하여 pergillus niger로부터 FAE 최대 활성 \( (191 \mathrm{mU} / \mathrm{ml}) \) 이 유도되는 것으로 보고했으며, 그때 xylanase의 활성 역시 최대인 것으로 보고했다. 한편 전분을 제거한 sugar-beet pulp에는 feruloylated pectins이 함유되어 있으므로 미생물에 의해 생산된 상업용 복합효소제인 Driselase(arabinase, cellulase, xylanase, polygalacturonase 등과 같은 glycosidase 함유)를 sugar-beet pulp에 전처리하여 arabinose의 \( \mathrm{C}_{2} \) 혹은 galactose의 \( \mathrm{C}_{6} \) 에 ferulic acid가 ester 결합된 feruloylated oligosaccharides를 제조하여 이 Driselase 로 가용화한 feruloylated oligosaccharides를 기질로 사용하여 조사한 결과 FAE 최대 활성이 \( 56.1 \mathrm{mU} / \mathrm{ml} \) 였으며, 그때 xylanase의 활성 역시 최대인 것으로 보고했다. 본 실험의 결과는 MacKenzie와 Ralet 등이 보고한 것과는 많은 차이를 보였는데, 이는 탄소원으로 사용된 원료의 종류 및 귀리, 폐 당밀, 보리, 옥수수 등의 원료 전처리에서 발생되는 lignocellulose의 분해 정도에 기인한 것으로 생각 된다. 그러나 사용된 탄소원의 종류에 따라 xylanase의 활성과 FAE 활성이 성장기간 동안 차이는 있었지만 탄소원을 분해하여 대사물질 또는 에너지원으로 이용하기 위하여 xylanase의 작용과 FAE의 작용이 서로 상호협동 작용이 있는 것으로 생각된다. 한편 Bartolome과 Faulds등은 Aspergillus niger와 Pseudomonas fluoresscens subsp cellulosa를 이용한 feruloy-lated hemicellulose 기질(de-starched wheat bran)의 분해에 관한 연구에서 oligosaccharide chain과 ferulic acid unit 간의 결합 형태에 따른 차이점은 없다고했다.</p>
탄소원은 어디에서 조사 하였는가요?
배지