<h1>재료 및 방법</h1><h2>목초액 특성 분석</h2><p>목초액은 강원목초액(강원도 영월군 북면 강구길 \(50\)-\(23\))을 사용하였으며 상온 보관하였다. 목초액의 pH는 pH meter (Orion)로 측정하였고, 증류 잔사물은 일정량(\(1 \mathrm{~L}\))을 취한 후 감압증류하고 냉동건조하여 남은 무게로 측정하였다. 전 질소함량과 암모늄태 질소 및 질산태 질소는 Kjeldahl법으로 분석하였다. 증류 잔사물은 urease 활성 평가를 위해 \( \mathrm{MeOH} \)에 녹여 농도 \(10,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)로 맞춘 후 냉장 보관하였다.</p><h2>토양의 물리 · 화학적 특성 분석</h2><p>토양은 하우스 내 밭토양(경기도 광주시 오포읍 양벌리 \(64\)-\(1\))에서 표토 \( 1 \mathrm{~cm} \)를 제거한 후 오거를 이용하여 깊이 \( 1\)-\(15 \mathrm{~cm} \)인 층을 채취하였으며 음건한 후 상온 보관하였고 토양 urease 활성 측정 전 수분함량을 \( 20 \%(\mathrm{W} / \mathrm{W}) \)로 맞춘 뒤 \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \(1\)일 동안 배양 후 사용하였다. 토양의 pH와 EC는 토양 \( 10 \mathrm{~g} \)에 증류수 (\(1:5\))를 넣어 \(1\)시간 교반 후 pH meter와 EC meter로 측정하였고, CEC는 ammonium acetate법으로 분석하였다. 유기물 함량은 회화법으로 분석하였으며, 유효인산은 Bray No. \(1\)법으로 분석하였다. 총질소는 Kjeldahl 분해법의 변법으로 salicylic acid-thiosulfate 황산법으로 분해 정량하였고, 암모늄태 질소와 질산태 질소는 \( 2 \mathrm{M}\) \( \mathrm{KCl} \) 추출 후 Kjeldah 증류법으로 분석하였다. CEC 및 \( \mathrm{Ca} \), \( \mathrm{Mg} \), \( \mathrm{K} \), \( \mathrm{Na} \) 함량은 \( 1 \mathrm{~N} \) ammonium acetate로 추출 후 ICP로 분석하였고, 토성분석은 피펫법으로 분석하였다.</p><h2>Jack bean과 Bacillus urease 활성에 미치는 목초액의 영향</h2><p>목초액이 식물 urease와 미생물 urease 활성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 jack bean urease (\(440,000 \mathrm{~unit} / \mathrm{g} \), Sigma)와 Bacillus pasteurii urease (\(220,000 \mathrm{~unit} / \mathrm{g} \), Sigma)를 식물과 미생물의 대표적 urease로 사용하였다. Urease 활성측정은 Tabatabai 와 Bremner(\(1972\)), Mobley와 Hausinger(\(1989\)), Keeney와 Nelson (\(1982\))의 방법을 수정하여 사용하였다. \( 100 \mathrm{~mM} \) phosphate buffer (\( \mathrm{pH~} 7.0\))에 \( 10 \mathrm{~mM} \) EDTA 와 \( 20 \% \) glycerin을 첨가한 phosphate-EDTA buffer (PEB)용액에 요소가수분해효소(Jack bean urease, Bacillus urease)를 \( 30 \mathrm{~unit} / \mathrm{mL} \)가 되도록 각각 녹여 준비하였다. 요소가수분해 후 발생한 암모니아의 농도차이로 활성을 분석하였는데 암모니아의 농도는 indophenol blue법의 변법을 이용하여 분석하였다. 증류수 \( 465 \mu \mathrm{L}, 10 \) 배 희석한 PEB \( 60 \mu \mathrm{L} \), Urease \( 5 \mu \mathrm{L}, 160 \mathrm{~mM} \) urea-N \(40 \mu \mathrm{L} \), 목초희석액을 증류잔사물 기준 농도 별(\(100\), \(1,000\) , \( 10,000 \mathrm{~mg} / \mathrm{L} \))로 \( 30 \mu \mathrm{L} \)를 넣고 \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \(3\)분간 반응시켰다. 이 중 \( 150 \mu \mathrm{L} \) 를 취해 phenol-nitroprusside \( 300 \mu \mathrm{L} \)와 \( \mathrm{NaOH} \)-hypochlorite \( 300 \mu \mathrm{L} \)를 넣은 후 \( 50{ }^{\circ} \mathrm{C} \)수조에서 \(30\)분간 발색시키고 \( 630 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 암모니아 농도는 표준물질과 흡광도의 검량선을 이용하여 환산하였으며, urease 활성 저해도(\(\%\))는 control의 암모니아 농도를 저해도 \( 0 \% \)로 기준하여 그 차이로 계산하였다. Urease를 넣지 않고 반응시킨 측정값을 각 처리별로 제외하여 목초액 내 암모니아 농도의 영향을 배제하였으며, control은 목초액 대신 \( \mathrm{MeOH}\)을 처리하는 것으로 하였다.</p>
토양의 pH와 EC는 무엇으로 측정하였나요?
pH meter와 EC meter