<h1>요 약</h1><p>Chaperone 분자는 세포 내에서 새로 합성된 polypeptides의 misfolding을 보호하는 역할을 가진다. 이런 chaperone 분자와의 공발현은 활성형 재조합 단백질의 생산을 증가를 기대할 수 있다. 본 연구에서는 E. coli에서 B. macerans 유래 cyclodextrin glucanotransferase (CGTase)의 활성형 생산에 GroEL/ES chaperone과의 공발현의 효과에 대해 조사하였다. cgt와 groEL/ES 유전자를 발현하는 pTCGT1과 pGro7은 각각 T7 promoter와 araB promoter에 의해 조절되고 이들을 E. coli cell에 co-transformation 시켰다. 재조합 E. coli에서 IPTG와 L-arabinose의 최적 농도를 결정하기 위해 행한 결과 \( 1 \mathrm{mM} \) IPTG, \( 0.3 \mathrm{mg} \) L-arabinose\(/\mathrm{ml} \)에서 가장 높은 CGTase 활성을 나타내었다. 그리고 tube에서는 L-arabinose와 IPTG를 각각 \( 0.4 \sim 0.5 \mathrm{OD}_{600} \)과 \( 0.8 \sim 1.0 \mathrm{OD}_{600} \)에서 첨가하였을 때 활성형 CGTase의 생산이 증가되었다.</p><p>GroEL/ES 공발현 조건에서는 가용성 CGTase 활성이 \( 0.7 \sim 0.73 \mathrm{unit} / \mathrm{ml} \)로 단독 발현의 \( 0.36 \sim 0.56 \mathrm{unit} / \mathrm{ml} \)에 비해 약 1.5배 정도 증가함을 알 수 있었다. SDS-PAGE 분석에서는 GroEL/ES 공발현 조건에서 총 CGTase의 \( 33.6 \% \) 정도가 가용성 형태로 생산됨을 알 수 있었다.</p>
세포 내에서 새로 합성된 polypeptides의 misfolding을 보호하는 역할을 가지는 분자는 뭐야?
Chaperone 분자