<p>유류와 중금속으로 장기간 오염된 울산 소재 정유공장의 유류 저장 탱크 주변 토양을 사용하였으며, 채취 토양을 2 \( \mathrm{mm} \) 체로 쳐서 돌과 이물질을 제거하였다. 이렇게 전처리한 토양 \( 10 \mathrm{~g} \)에 멸균수 \( 20 \mathrm{~mL} \)을 넣고 \( 200 \mathrm{rpm} \) 교반기에서 30분간 교반 한 후, 실온에서 30분간 정치시켰다. 상등액 \( 10\mathrm{mL} \)를 \( 10,000 \mathrm{~mg} / \mathrm{L} \) 디젤이 첨가된 \( 50 \mathrm{~mL}\) MSM(mineral salt medium)에 접종하여 \( 30^{\circ} \mathrm{C}\), \(250 \mathrm{rpm} \)의 배양기에서 일주일 동안 배양 한 후에 배양액을 멸균수로 희석 \( \left(10^{-5} \sim 10^{-8}\right) \)하였다. 각각의 희석용액을 LB-agar 배지(Difco, USA)에 \( 100 \mu \mathrm{L} \)씩 접종하여 도말 한 후, \( 30^{\circ} \mathrm{C} \)에서 3일간 배양하였다. 배양액을 LB agar plate(Difco, USA)에 도말하여 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \)에서 배양시킨 후, 형성된 colony의 색과 모양을 고려하여 20개의 균주를 선별한 후, \( 10,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)의 디젤이 첨가된 MSM 배지에 접종하여 \( 30^{\circ} \mathrm{C}\), \(250 \mathrm{rpm} \)의 배양기에서 3일간 진탕 배양하였다. 배양액의 잔류디젤농도를 gas chromatography를 이용하여 분석한 뒤 디젤 분해능을 가진 균을 선별하였다. MSM 배지의 조성은 \( \mathrm{MgSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}\) \(0.15 \mathrm{~g}\), \(\mathrm{CaCl}_{2} \) \( 0.01 \mathrm{~g}\), \(\mathrm{KH}_{2} \mathrm{PO}_{4} \) \(1.5 \mathrm{~g}\), \(\mathrm{Na}_{2} \mathrm{HPO}_{4} \cdot 12 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) \(9.0 \mathrm{~g}\),\( \mathrm{NH}_{4} \mathrm{NO} \) \( 3.0 \mathrm{~g}{ }_{3}\), \(\mathrm{FeCl}_{3} \) \(0.01 \mathrm{~g}\)( \(\mathrm{pH} \ 7.0-7.2\) )및 증류수 \( 1 \mathrm{~L} \)이다. 디젤 분해능을 조사한 균주 중에서 디젤 분해능이 가장 우수한 균주를 선별하여 SD8 이라 명명하였다. 이 균주는 16S rDNA 부분 염기서열 분석을 통해 동정하였고, 염기서열 분석은 Koo와 Cho가 이용한 방법을 사용하였다.</p>
본문에 언급된 상등액을 MSM에 접종하여 일주일 동안 배양한 후에 배양액을 어떻게 했어?
멸균수로 희석