<h1>결과 및 고찰</h1><h2>박테리오표지에 대한 항체 생산</h2><p>항체의 생산은 고농도의 파지액과 항원보조제(Freund's adjuvant)의 혼합액을 토끼의 근육 및 피하에 주입하여 이루어젔다. 다 클론항체의 역가는 토끼에 파지항원액을 \( 1 \)차 주사하여 면역화하였을 때, \( 10^{4} \mathrm{Ab} / \mathrm{mL} \) 이상으로 증가하였고, \( 2 \)차 주사하였을때에는 \( 10^{5} \mathrm{Ab} / \mathrm{mL} \) 이상 증가하였다. 최종적으로 항체는 \( 3 \)차 주사를 통하여 \( 10^{7} \mathrm{Ab} / \mathrm{mL} \) 이상 증가하였을 때, 채혈하여 얻었다. 항원으로 사용한 파지는 숙주균의 소그룹에 따라 \( \mathrm{P} 1 \alpha \) 그룹의 \( \phi 6264 \) 와 \( \phi \mathrm{HK} 2\), \(\mathrm{P} 1 \beta \) 소그룹의 \( \phi \mathrm{HK} 19\), \(\mathrm{P} 1 \gamma \) 소그룹의 \( \phi \mathrm{HK} 23 \)이 선발되었다. 최종적으로 얻은 항체들 중 \( \phi 6264 \)에 대한 항체 \( \mathrm{Ab} \phi 6264 \)는 \( 2.0 \times 10^{7} \mathrm{Ab} / \mathrm{mL} \)이상, \( \phi \mathrm{HK} 19 \)에 대한 항체 \( \mathrm{Ab} \phi \mathrm{HK} 19 \) 와 \( \phi \mathrm{HK} 23 \) 에 대한 항체 \( \mathrm{Ab} \phi \mathrm{HK} 23 \) 은 \( 1.0 \times 10^{7} \) \( \mathrm{Ab} / \mathrm{mL} \) 이상의 활성으로 수확하였으나, \( \phi \mathrm{HK} 2 \)에 대한 항체 \( \mathrm{Ab} \phi \mathrm{HK} 2 \) 는 다른 다클론항체와 비교하여 낮은 \( 1.0 \times 10^{6} \mathrm{Ab} / \mathrm{mL} \)이상으로 수확하였다. 수확한 다클론항체는 해당 파지에 매우 특이적으로 작용하였고, 파지는 항체와의 결합시 갈반병균에 대한 공격력을 완전하게 잃어버렸다.</p><h2>Pitting test에서의 항체에 의한 파지 억제 효과</h2><p>다클론항체는 항체 생산에 사용한 파지와 강하게 항원-항체 반응을 하여 파지를 불활성화하였다. 갈반병 원인균주 P tolaasii \( 6264\), P tolaasii HK\( 2 \), P tolaasii HK\( 23 \)은 버섯표면에 접종시 갈반을 심하게 형성하였으나, 각 균주에 특이적인 파지를 처리 한 경우에는 이들 균주에 의한 갈반형성이 완전히 억제되었다. 또한, 갈반병 원인균주와 특이적인 파지, 그리고 해당 파지의 항체를 처리한 경우에는 항체에 의해 파지가 불활성화됨으로써 병원균에 의한 병발생을 억제하지 못하여 갈반이 형성되었다. 이러한 결과를 통해, 항체가 존재할 경우에는 파지-항체 반응에 의한 파지의 불활성화로 병원균에 의한 갈반 형성은 저해되지 않았다. 반면, 각 병원균주와 다클론항체를 동시에 처리한 경우에는 갈반형성이 관측되어 파지의 항체는 갈반병 균주와 상호작용하지 않음을 확인하였다. 이러한 결과는 소그룹별 파지 항체를 이용한 모든 실험에서 동일하게 나타났다. 이는 버섯표면에서 파지의 항체가 숙주균의 존재와 관계없이 특이적인 파지와 항원-항체 반응을 일으키며, 다클론항체가 버섯재배 환경에서도 특이적으로 해당 파지를 저해할 수 있음을 보였다.</p>
어떤 동물에게 고농도의 파지액과 항원보조제의 혼압액을 주입하였나요?
토끼