<h1>2. 재료 및 방법</h1><h2>2.1 바이오매스</h2><p>본 연구에서는 국립산림과학원에서 제공받은 백합나무 (Liriodendron tulipifera) 칩을 20-80 mesh로 분쇄하여 공시재료로 사용하였다. 초기 구성성분은 글루칸 \( 41.33 \pm \) \( 0.34 \% \), 자일란 \( 16.28 \pm 0.14 \% \), 총 리그닌 \( 24.36 \pm 0.07 \% \), 회분 \( 0.68 \pm 0.05 \% \), 아세틸기 \( 4.10 \pm 0.10 \% \) 였다.</p><h2>2.2 옥살산 전처리</h2><p>옥살산 전처리는 반응기(Model EMV-HT/HP\(600\), E.M.S. Korea)에 전건시료 25 \( \mathrm{g} \) 과 200 \( \mathrm{mL} \) 산 촉매 용액을 \( 1: 8(\mathrm{w} / \mathrm{w}) \)의 비율로 투입하여 160\( ^{\circ} \mathrm{C} \) 의 고정된 반응온도에서 150 \( \mathrm{rpm} \)의 교반속도로 수행하였다. 반응온도 및 바이오매스/산 촉매 용액 비율은 선행연구 결과를 적용하였다. 전처리 정도는 반응시간과 반응온도, pH(옥살산 농도)의 영향을 통합하여 단일변수로 나타낼 수 있는 combined severity factor(CSF)를 적용하였으며 본 연구에서는 반응온도를 고정하였으며 반응시간 및 산농도를 변수로하여 CSF로 나타냈다(Table 1). 전처리 후 반응기를 10 분 동안 냉각하고 생성된 반응물은 고형바이오매스와 액상가수분해산물로 여과하여 분리하였다.</p><h2>2.3 액상가수분해산물 발효</h2><p>액상가수분해산물의 에탄올 발효는 5탄당과 6탄당을 동시에 발효가능한 Pichia stipitis CBS 6054를 공시균주로 사용하여 수행하였다. P. stipitis는 YPD(yeast extract 10 \( \mathrm{g} / \mathrm{L} \), peptone 20 \( \mathrm{g} / \mathrm{L} \), Dextrose Agar 20 \( \mathrm{g} / \mathrm{L}) \) 배지에 배양한 후 액체배지(yeast extract 10 \( \mathrm{g} / \mathrm{L} \), peptone 20 \( \mathrm{g} / \mathrm{L} \), glucose 20 \( \mathrm{g} / \mathrm{L}) \)에 접종하여 30\( ^{\circ} \mathrm{C} \), 150 \( \mathrm{rpm} \) 조건에서 24 시간 동안 선 배양한 후 발효에 사용하였다. 액상가수분해산물의 pH는 NaOH를 이용하여 pH 5.5로 조절한 후, \( \mathrm{KH}_{2} \mathrm{PO}_{4} \) 1 \( \mathrm{g} / \mathrm{L} \), \( \mathrm{MgSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}\) 0.5 \(\mathrm{g} / \mathrm{L} \), yeast extract 5 \( \mathrm{g} / \mathrm{L} \), urea 5 \( \mathrm{g} / \mathrm{L} \)를 각각 첨가하여, 121\( ^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 15 분간 멸균하였다. 배양된 \( P \). stipitis \( 2 \mathrm{~g}(\mathrm{dry} \) cell weight)/L를 멸균된 액상가수분해산물에 첨가하여 30\( ^{\circ} \mathrm{C} \), 150 \( \mathrm{rpm} \) 조건에서 96시간 동안 발효를 수행하였다.</p>
옥살산을 전처리할 때 교반 속도는 어떻게 되나요?
150 \( \mathrm{rpm} \)