<h1>결과 및 고찰</h1><p>산사자를 메탄올 및 증류수로 추출한 각각의 추출물의 항혈전 활성을 측정하였다. 먼저 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) 및 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 물 추출물의 경우, 추출 효율은 각각 \( 48.1 \% \) 및 \( 36.7 \% \)로 산사자가 많은 수용성 물질을 포함함을 알 수 있었으며, 각각의 추출물의 농도 증가에 따른 TT와 aPTT의 증가가 비례적으로 나타나지는 않았다. 그러나 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도의 \( 10^{\circ} \mathrm{C} \) 및 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 물 추출물에서 각각 \( 136 \% \), \( 149 \% \)의 TT 증가 및 \( 123\% \), \( 164\% \)의 aPTT 증가를 나타내었다. 한편 메탄올 추출물의 경우에는 농도의존적인 트롬빈 저해 활성과 aPTT 증가를 나타내었으며, \( 2.5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서 \( 164\% \)의 TT 증가, \( 164\% \)의 aPTT 증가를 나타내었고, \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서는 각각 \( 1,390\% \) 및 \( 450\% \) 이상의 증가가 확인되었다. 이는 항혈전제로 이용되는 아스피린이 \( 1.25 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서 \( 287\% \)의 TT 증가를 나타냄을 고려할 때 산사자의 항혈전 활성이 매우 강력함을 의미하며, 일반적으로 항혈전 활성이 우수한 것으로 보고 된 우산나물, 참나물, 붉나무 잎 등의 약용 및 식용 산채류 추출물보다도 강력한 활성을 나타내었다.</p><p>메탄올 추출물의 순차적 유기용매 분획물의 항혈전 활성은 Table 2에 나타내었다. Hexane, ethylacetate, butanol 각 분획물의 회수율은 각각 \( 1.0\% \), \( 5.1\% \), \( 20.9\% \)이었으며, 물 잔류물이 \( 72.2\% \)를 차지하여 대부분이 수용성 물질로 확인하였다. 각 분획물의 농도별 활성 측정 결과 대부분의 활성은 butanol 분획에서 나타났으며, \( 1.25 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)의 농도에서 \( 835\% \)의 TT 증가, \( 315\% \)의 aPTT 증가를 보여 아스피린보다 훨씬 강력한 항혈전 활성을 나타내었다. 한편 ethylacetate 분획에서는 \( 2.5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 고농도에서 \( 625 \% \) 의 TT 증가 및 \( 210 \% \) 의 aPTT 증가를 나타내어 butanol 분획보다 상대적으로 미약한 활성을 나타내어, 산사자 추출물의 항혈전 활성물질이 ethylacetate 분획 및 butanol 분획에 다양하게 존재하며, 특히 butanol 분획물이 주요 활성물질을 포함하고 있음을 의미한다.이러한 결과는, 최근 항트롬빈 활성이 보고된 메밀종자 주정 추출물의 활성물질이 ethylacetate 및 butanol 분획물에서 나타나며, 특히 butanol 분획물에서 강력한 활성이 나타나는 것과 그 특성이 유사하였다.</p><p>산사자의 메탄올 추출물과 각각의 분획물의 총 플라보노이드, 폴리페놀 및 총당을 분석한 결과, 분석 물질들과 트롬빈 저해 활성의 특이한 상관관계는 나타나지 않았다. Ethylacetate 분획에서는 높은 총 플라보노이드 함량 및 폴리페놀 함량, 총당 함량을 나타내었으며, butanol 분획에서는 ethylacetate 분획 다음으로 높은 폴리페놀 및 총당량을 나타내었으며, 총 플라보노이드 함량은 \( 1.3 \mu \mathrm{g} / \mathrm{g} \)의 매우 낮은 수치를 나타내었다. 또한 butanol 분획은 강한 anthrone 반응과 약한 ninhydrin반응을 나타내어, 그 주성분이 당 함유 고분자 물질로 추측되었다. 이미 보고한 메밀종자 추출물의 butanol 분획물의 활성 성분은 \( 30 \mathrm{kD} \) 이상의 고분자 다당체로 확인되었으나, 환원당은 거의 검출되지 않았다. 그러나 산사자의 butanol 분획물은 ethylacetate 분획물보다 환원당 함량은 낮았으나, 여전히 높은 \( 169 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) 의 환원당 함량을 나타내어 다당류보다는 당이 결합된 고분자 구조로 추측되며, 이러한 결과는 실제 항혈액 응고 의약품으로 사용되고 있는 헤파린이 뮤코다당체임을 고려할 때, 산사자의 butanol 분획물의 활성물질이 헤파린과 유사한 구조 및 유사한 항응고 작용기작을 나타내리라 추측된다. 또한 이러한 결과는 산사자의 주요 활성물질로 보고된 quercetin, myricetin 등이 산사자의 항트롬빈 활성에 관여하지 않음을 제시하며, 실제 butanol 분획물의 항트롬빈 활성을 측정 결과, 기존의 보고된 quercetin, kaempferol, myricetin 및 rutin 등의 혈관계 질환의 예방효과가 보고된 물질들과는 트롬빈 저해활성에서 다른 양상을 나타내었다. 또한 TLC에 의한 분석 결과 butanol 분획에서 다양한 물질들이 검출되었으나, quercetin, kaempferol, myricetin 및 rutin은 거의 검출되지 않아, 산사자의 항혈전 활성이 기존의 산사자 및 산사잎에서 보고된 물질에 의해 나타나지 않음을 확인하였다.</p><p>산사자의 항혈전 활성성분의 식품가공 적성 평가를 위해 butanol 분획물의 산 안정성과 열 안정성을 검토한 결과, \( 100^{\circ} \mathrm{C}\), 30분 열처리에도 \( 85\% \) 이상의 활성소실이 나타난 반면, \( 0.5 \mathrm{~N} \mathrm{HCl} \) 처리에는 120분 이상 안정한 것으로 나타났다. 항혈전제로 사용되고 있는 아스피린이 뛰어난 산안정성 및 열 안정성을 나타냄을 고려할 때, 산사자를 이용한 기능성 식품 제조에는 비가열처리가 필수적인 젓으로 판단되며, 고온 추출은 부적합할 것으로 판단된다. 실제 산사자와 유사하게 강력한 항트롬빈 저해 활성을 나타내는 메밀 종자 추출물의 butanol 분획물의 경우, \( 0.5 \mathrm{~N} \mathrm{HCl} \) 1시간 처리 및 \( 100^{\circ} \mathrm{C}\), 30분의 열처리시 급격히 항트롬빈 활성을 소실하여, 식품가공 공정 개발의 어려움이 있었으나, 산사자의 경우 우수한 내산성이 있어, 소화 흡수에 용이하리라 생각되며, 산사 발효주와 같은 효모 발효식품에 첨가 시에 우수한 활성을 유지할 수 있으리라 추측된다. 현재 산사자 추출물의 butanol 분획 활성성분의 정제와, 비열 처리의 산사자 가공공정 및 식품형태 개발이 진행되고 있다.</p>
메밀 종자 추출물에 비해 산사자가 식품가공 공정 개발에서 가지는 이점이 뭐야?
산사자의 경우 우수한 내산성이 있어, 소화 흡수에 용이하리라 생각되며, 산사 발효주와 같은 효모 발효식품에 첨가 시에 우수한 활성을 유지할 수 있으리라 추측된다.