<h2>\( \mathrm{pH} \) 에 따른 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 와 \( \mathrm{Ni}^{2+} \) 의 톨라신 활성억제 효과</h2><p>톨라신에 의한 용혈활성은 반응용액의 \( \mathrm{pH} \) 변화에 따라 좌우된다. 용액의 \( \mathrm{pH} \) 가 증가할 때 톨라신의 세포독성이 커져 \( \mathrm{T}_{50} \)이 \(15\)분에서 \(10\)분으로 감소함을 확인하였다. 반응용액의 \( \mathrm{pH} \) 변화에 따라 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 와 \( \mathrm{Ni}^{2+} \) 의 톨라신 저해 특성을 알아보기 위하여, \( \mathrm{pH} \) 별 반응용액을 만들어 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 와 \( \mathrm{Ni}^{2+} \) 을 첨가하고 용혈활성 변화를 측정하였다(Fig. 3). 먼저, \( 100 \mu \mathrm{M}\) \(\mathrm{Zn}{ }^{2+} \) 를 처리한 경우에 \( \mathrm{pH} 6 \) 에서는 대조실험에 비하여 톨라신의 용혈에 큰 변화가 없었다(Fig. 3A). \( \mathrm{pH} 7 \)에서는 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 가 용혈작용을 지연시켰으나, \( 30\) 분이내에 용혈이 \( 90 \% \) 이상 완료되었고 \( \mathrm{T}_{50} \) 은 약 \( 5.5 \) 분 증가하여 톨라신의 독성이 저해되었다. 반면, 염기성인 \( \mathrm{pH} 8\) 과 \(9\)에서는 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 에 의해 톨라신의 용혈활성이 각각 \( 40 \% \) 와 \( 90 \% \) 까지 크게 저해되었다. 한편, \( 1 \mathrm{mM}\) \(\mathrm{Ni}{ }^{2+} \) 을 처리한 경우에는 대조구와 비교하여 톨라신 용혈활성의 저해가 \( 10-15 \% \)로 작게 나타났으며 이러한 저해효과가 모든 \( \mathrm{pH} \) 에서 고르게 나타나 \( \mathrm{pH} \) 변화에 의한 효과는 거의 관측되지 않았다(Fig. 3B).</p><p>\( \mathrm{pH} \) 변화에 따른 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 와 \( \mathrm{Ni}^{2+} \) 의 톨라신 용혈활성 저해곡선에서 \( \mathrm{T}_{50} \) 을 측정하여 보면 같은 \( +2 \) 가 전이금속 이온이라도 \( \mathrm{Zn}^{2+} \)와 \( \mathrm{Ni}^{2} \) 의 톨라신 활성저해가 용액의 \( \mathrm{pH} \) 에 따라 뚜렷한 차이를 보였다(Fig. 4). 먼저, \( 1 \mathrm{mM}\) \( \mathrm{Ni}{ }^{2+} \) 을 처리한 실험구에서는 대조구와 비교하여 \( \mathrm{T}_{50} \) 이 모든 \( \mathrm{pH} \) 에서 약 \(1.9-3.1\)분의 차이를 보이며 \(11.9-16.8\)분으로 측정되었다. 이것은 대조실험에 비하여 용혈활성이 약 \( 10-15 \% \) 저해된 것으로, \( \mathrm{Ni}^{2+} \) 의 효과는 \( \mathrm{pH} \) 변화에 좌우되지 않음을 나타낸다. 그러나 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 의 톨라신 용혈활성 저해효과는 알칼리 조건에서 크게 증가하였다. \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 를 첨가한 실험구에서는 \( \mathrm{pH} 6\) 과 \( \mathrm{pH} 7\) 에서는 \( \mathrm{T}_{50} \) 이 대조구와 큰 차이가 없었으나, \( \mathrm{pH} \) 가 증가할수록 \( \mathrm{Zn}^{2+} \) 에 의한 저해정도가 크게 나타났고, 특히 \( \mathrm{pH} 9 \) 에서는 \( \mathrm{T}_{50} \) 이 약 \(80\) 분으로 증가하였다. 같은 전이금속의 \(2\)가 양이온임에도 톨라신의 세포독성 저헤효과는 알칼리 조건에서 매우 큰 차이가 있었다.</p>
용액의 \( \mathrm{pH} \) 가 증가할 때 톨라신의 세포독성이 커져 \( \mathrm{T}_{50} \)이 기존대비 몇 분으로 감소되는가?
용액의 \( \mathrm{pH} \) 가 증가할 때 톨라신의 세포독성이 커져 \( \mathrm{T}_{50} \)이 \(15\)분에서 \(10\)분으로 감소함을 확인하였다.