<h2>항균물질의 분자량 측정</h2><p>정제한 항균물질의 분자량을 측정하기 위해 Tricine SDS-PAGE를 실시하였고, 항균물질 유무를 확인하기 위해 direct detection 방법을 수행하였다. 정제된 항균물질의 전기영동과 direct detection을 한 결과로 밴드가 하나이고 그 위치에 투명환이 형성됨을 확인하였다. 또한 marker와 시료의 이동성을 비교하여 항균물질의 분자량이 약 \( 3,500 \mathrm{Da} \)임을 예측하였다.</p><p>B. subtilis가 생산하면서 항균물질 중 약 \( 3,500 \mathrm{Da} \) 분자량을 가지는 것은 lantibiotic 에 속하는 subtilin, subtilosin A, sublancin 168, ericin S 등이 있다. Subtilin은 pentacyclic peptide 형태로 \(3,319 \mathrm{Da} \)이고, ericin S는 \(3,442 \mathrm{Da} \)이며 subtilin과 4개의 아미노산 잔기만 다르고 매우 유사한 특성을 가진 물질이다. subtilosin은 \(3,399 \mathrm{Da} \)으로 post-translational modification을 통해 macrocyclic 형태가 되며, sublancin 168은 \( 3,877 \mathrm{Da} \)이고 두개의 이황화 결합으로 연결된 lanthionine이 포함되어 있는 형태로 알려져 있다.</p><p>본 연구의 항균물질의 정확한 구조를 파악하기 위해 아미노산 서열을 분석 방법인 Edman 법을 시행하였다. 그러나 N-terminal이 block되어 아미노산 서열을 분석하지 못하였고, 따라서 추후의 본 연구의 항균물질의 자세한 구조 분석이 필요한 것으로 판단되었다.</p><h2>항균 spectrum</h2><p>B. subtilis HH28이 생성하는 항균물질의 병원성 세균 및 곰팡이, 효모에 대한 항균효과는 Table 2에 요약되어 있다. Paper disk method를 통하여 항균 활성을 측정한 결과, 그람 양성균인 B. cereus KCCM 12667, KCCM 11204, KCCM 40168, KCCM 40935, B. licheniformis KCCM 11237, B. subtilis KCCM 11314, Listeria monocytogenes KCCM 40307에 대한 저해 활성을 나타내었으며, 특히 B. cereus와 L. monocytogenes의 활성이 큰 것을 확인할 수 있다. 그람 음성균에서는 Shigella boydii KCCM 41649에 약한 저해 활성을 나타내었고, Vibrio parahaemolyticus KCCM 11965 에서 큰 저해 활성을 나타내었다. 그리고 곰팡이와 효모에서는 활성이 없었다.</p><p>대부분의 Bacillus spp.가 생산하는 bacteriocin은 그람 음성균을 억제하지 못하고 그람 양성균 만을 억제하였다. 예를 들어 청국장에서 분리한 B. subtilis W42의 경우도 B.cereus와 L. monocytogenes에 큰 항균활성을 나타내지만 그람 음성균에는 활성을 없었다. 그러나 본 연구의 항균물질은 그람 음성균의 V. parahaemolyticus에 높은 활성을 보였는데 이 균은 해산물에 의한 식중독을 일으키는 균으로 잘 알려져 있으며, 중국 전통 콩 발효 식품에서 분리한 B. subtilis NT-6가 이에 대한 항균활성이 있음을 보고한 바 있다. 또한 그람 양성균 중 장류의 식중독균인 B. cereus와 샐러드와 같은 최소 가공처리를 한 채소에서 식중독을 일으키는 L. monocytogenes에 대한 항균활성이 매우 우수하여 천연 식품 보존제로 사용할 경우 큰 효과를 나타낼 것으로 사료되었다. 그러나 장류 발효 시 유용하게 작용하는 B. subtilis 와 B. licheniformis에 대한 항균활성을 가지고 있지만 그 활성이 매우 작아 큰 영향을 미치지 못할 것으로 사료되었다.</p>
섭틸린은 형태가 어떻게 돼?
pentacyclic peptide