<p>저장 및 포장조건. 대조구와 단순 물 세척, 최적 조건으로 선정된 병합 세척 처리 시료는 low density polyethylene bag (\(25 \times 30 \mathrm{~cm}\), \(60 ~\mu \mathrm{m}\) thickness, \( 4,100 \mathrm{~mL}\) \(\mathrm{O}_{2} / \mathrm{m}^{2} \cdot 24 \mathrm{~h} \cdot \) atm at \( 24^{\circ} \mathrm{C} \))에 포장한 후 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) cold chamber에서 \(12 \)일 동안 저장하며 미생물 수 및 품질변화를 측정하였다</p><p>미생물 수 측정. 시금치 시료 \( 10 \mathrm{~g} \)과 멸균 펩톤수 \( 90 \mathrm{~mL} \)을 멸균 bag에 넣고 \(3 \)분 동안 stomacher를 이용하여 균질화 하였다. 균질화 된 시료를 멸균 펩톤수로 \(10 \)배 연속 희석한 후 각 배지에 분주하였고, 총 호기성 균은 plate count agar (Difco Laboratories), E. coli O\(157\):H\(7\)은 sorbitol MacConkey (Difco Laboratories), L. monocytogenes는 Oxford medium base (Difco Laboratories)를 사용하였다. \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \(48\)시간 배양한 후 형성된 colony를 계수하여 \( \mathrm{g} \) 당 colony forming unit (CFU)로 나타내었다. 색도 측정. 시금치의 색도는 색차계(CR-\(400\) Minolta Chroma Meter, Konica Minolta Sensing Inc., Tokyo, Japan)를 사용하여 측정하였는데, 사용된 표준 백판의 \( \mathrm{L}\), \(\mathrm{a}, \(\mathrm{b} \) 값은 각각 \( \mathrm{L}=97.36\), \(\mathrm{a}=-0.07\), \(\mathrm{~b}=2.03 \)이었다.</p><p>비타민 C 함량 측정. 시금치의 비타민 C 함량 분석은 HPLC (Waters, Milford, MA, USA)를 이용하여 측정하였다. 시료는 mixer를 이용하여 마쇄한 후 동결건조하여 준비하였다. 동결건조한 시료 \( 2 \mathrm{~g} \)에 \( 10 \% \) 메타인산용액 \( 2 \mathrm{~mL} \)을 가하여 \(10 \)분간 현탁시킨 후, 다시 \( 5 \% \) 메타인산 용액 \( 25 \mathrm{~mL} \)을 넣어 \(30 \)분간 균질화 하였다. 균질화된 시료를 \( 1,590 \times \mathrm{g} \)에서 \(15 \)분간 원심분리를 하여 상등액 만을 취하고, 상등액 \( 1 \mathrm{~mL} \)에 \( 5 \% \) 메타인산 용액 \(3 \mathrm{~mL} \) 을가하여 희석시킨 후 \( 0.2 \mu \mathrm{m} \) polyvinylidiene fluoride filter로 여과한 뒤 \( 10 \mu \mathrm{L} \)씩 주입하여 분석하였다. 사용된 칼럼은 Kinetex \( 5 \mu\) EVO C\(18\) \(100\)A (\(250 \times 4.6 \mathrm{~mm} \), Phenomenex Inc., Torrance, CA, USA)였다. 이동상은 \( 0.05 \mathrm{M}\) \(\mathrm{KH}_{2} \mathrm{PO}_{4} / \)acetonitrile (\( 60: 40, \mathrm{v}: \mathrm{v} \))을 \( 1 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \)으로 흘려주었으며 UV detector를 사용하여 \( 254 \mathrm{~nm} \)에서 검출하였다. 표준물질로 ascorbic acid를 사용해 비타민 C 함량을 산출하여 \( \mathrm{mg} \) ascorbic acid equivalent \( / 100 \mathrm{~g} \)으로 표시하였다.</p><p>통계분석. 실험결과의 통계 분석은 SAS (Statistical Analysis System program version \(9.4\), SAS Institute Inc, Cary, NC, USA) 프로그램을 이용하였으며, 유의수준 \( p<0.05 \)에서 Duncan's multiple range test 방법을 사용하였다. 실험 결과는 최소 \(3\)회 이상 반복실험 하여 평균 \( \pm \) 표준편차로 나타내었다.</p>
균질화된 시료를 멸균 펩톤 수로 몇 배 희석하여 배지에 분주하였는가?
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