<h1>결과 및 고찰</h1><h2>신장암 Caki 세포주에서 actinomycin D에 의한 STAT3의 인산화 조절</h2><p>Actinomycin D에 의한 신장암세포주에서 STAT3의 인산화를 확인하기 위하여 Caki 세포주에 actinomycin D를 농도별, 시간 별로 처리하고 STAT3의 인산화를 확인하였다. Actinomycin D를 농도별로 \( 1,3,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 을 4 시간 동안 처리한 후 Western Blotting 으로 STAT3의 Tyr705과 Ser727의 인산화를 확인하였다. 그 결과 actinomycin D를 농도별로 처리 했을 때, STAT3 의 Tyr705의 인산화가 유도되는 것을 확인하였다(Fig. 1A). Actinomycin D를 \( 5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 을 시간별로 1,2,4 시간 동안 처리한 후 Western Blotting으로 STAT3의 Tyr705과 Ser727의 인산화를 확인한 결과, 시간별로 STAT3의 Tyr705 인산화가 유도되는 것을 확인하였다(Fig. 1B).</p><h2>Actinomycin D에 의한 STAT1의 인산화 조절 여부</h2><p>Actinomycin D가 STAT family 중 STAT1의 인산화에 미치는 영향을 조사하기 위하여 actinomycin D를 농도별로 \( 1,3,5 \mathrm{\mu g} / \mathrm{ml} \) 을 4 시간 동안 처리한 후, Western Blotting으로 확인하였다. IFN- \( \gamma \) 를 STAT1의 활성화에 대한 positive control로 사용하였다. Actinomycin D에 의해 Tyr701 잔기의 인산화가 유도되지 않았지만 positive control인 IFN- \( \gamma \) 에 의한 인산화는 확인 하였다. STAT1의 Ser727의 인산화는 basal level에서 인산화를 확인 하였으나 actinomycin D 농도별 처리에 따른 인산화 증가를 확인 할 수가 없었다. 하지만 IFN- \( \gamma \) 처리 시 STAT1의 Ser727 잔기의 인산화 정도가 더욱 증가함을 확인하였다(Fig. 2). IFN- \( \gamma \) 를 astrocyte 세포에 처리 시 STAT1과 STAT3의 인산화를 유도한다. 따라서 이상의 결과는 acti-nomycin D에 의한 STAT의 인산화 유도가 STAT3의 Tyr705 잔기 특이적으로 유도되고 IFN- \( \gamma \) 와 다른 양상의 STAT 인산화 과정을 보여준다.</p>
STAT3의 인산화를 확인하기 위하여 농도와 어떤 요소별로 처리했는가?
시간