<h1>결과 및 고찰</h1><h2>Human keratinocyte (HaCaT)의 생존율 확인</h2><p>HaCaT 세포를 이용하여 복분자 씨앗 추출물에 대한 세포생존율을 확인하고자 MTT assay를 수행하였다. 복분자 씨앗 추출물을 농도별 5, 10, 25, 50, 100 \( (\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) 로 처리한 결과 추출물에서 5, 10, 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 처리 시 HaCaT 세포의 생존율에 큰 영향을 나타내지 않았지만, 50, 100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도 별 처리 시에는 세포의 생존율이 72.3,65.3\( \% \) 로 감소되는 것을 확인 할 수 있어 복분자 씨앗 추출물의 고농도로 처리 시 세포의 viability를 저해하는 것을 확인 할 수 있었다(Fig. 1).</p><h2>ROS 생성 억제 효과</h2><p>피부에 UV-B의 노출은 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)생성을 야기시키며, 이때 생성되어지는 ROS는 피부세포 내에서의 mitogen-activated protein kinase 신호전달 과정화에 영향을 미쳐 피부손상과 관련된 전사인자들을 활성 시킨다. 이러한 피부 세포 손상의 원인이 되는 ROS의 발현억제율을 살펴보고자 HaCat 세포내 UVB 와 IFN-\( \gamma\) /TNF-\(\alpha \) 를 조사하여 ROS를 유도한 뒤 복분자 씨앗 추출물을 처리하여 항산화능을 측정하였다. 대조군은 UVB 와IFN-\( \gamma\) /TNF-\(\alpha \)를 처리하지 않은 그룹에 비해 ROS 생성량이 1.7배 증가되었으며, 복분자 씨앗 추출물의 경우 농도 의존적으로 ROS 생성량이 감소되는것을 확인 할 수 있었다. 특히 25\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서는 25\( \% \) 감소율을 나타내었으며 정상군과 비슷한 ROS 발현율임을 확인할 수 있었다(Fig. 2). 이처럼 복분자 씨앗 추출물은 자외선으로 유도한 ROS의 생성을 세포 독성없이 각질형성세포내에서의 효과적으로 감소시킴으로 ROS로 인하여 활성화 되는 피부 손상인자들의 활성화 억제에 영향을 미쳐 피부 염증에도 효과가 있을 것이라 판단된다.</p><h2>\( \mathrm{PGE}_{2} \) 생성 억제 효과</h2><p>체내 염증과정에서는 과량의 \( \mathrm{NO} \) 및 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 등의 염증인자가 iNOS 및 COX-2에 의해 형성된다. 이 중 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 는 염증반응, 면역반응, 그리고 angiogenesis를 촉진하는 등 암 발생에도 깊이 관여하고 있는 것으로 알려져 있다. HaCaT 세포에서 UV-B와 IFN-\( \gamma\) /TNF-\(\alpha \) 를 처리한 후 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 억제효과를 ELISA kit로 측정하였다. HaCaT세포에 UV-B 와 IFN-\( \gamma\) /TNF-\(\alpha \)를 처리하여 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 의 생성을 유도한 후 복분자 씨앗 추출물 \( 5,10,25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도로 처리하여 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 생성억제를 측정한 결과 Fig. 3과 같이 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 15\( \%\), 25 \(\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 30 \( \% \) 에 가까운 높은 억제 효과를 나타내었다. 이는 복분자 씨앗 추출물이 UV-B와 IFN-\( \gamma\) /TNF-\(\alpha \)에 의해 발현되는 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 발현 억제 조절을 통해 항염증 효과를 나타낼 수 있다는 것을 보여주며, 염증매개물질인 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 분비량 조절 효과를 통하여 각질형성세포 내에서의 피부 염증 완화에 중요한 영향을 주는 것을 의미한다.</p>
UV-B에 의해 생긴 ROS 는 피부세포의 어디에 영향을 미치나요?
mitogen-activated protein kinase 신호전달 과정화