<h1>결과 및 고찰</h1><h2>HDAC 저해제에 의한 U937 세포의 생존율 억제에 미치는 Bcl-2의 영향</h3><p>두 가지 종류의 HDAC 처해제인 TSA와 Na-B의 처리에 의한 U937 세포의 증식억제에 미치는 Bcl-2의 영향을 비교하기 위하여 본 연구에 사용된 U937/Bcl-2 세포주의 Bcl-2 단백질 발현의 정도를 U937/vector 세포주와 먼저 비교하였다. Fig. 1A에 나타낸 Western botting의 결과에서 알 수 있듯이 U937/Bcl-2 세포에서의 Bcl-2 단백질의 발현은 U937/ vector 세포보다 약 3배 이상 과발현되어 있음을 확인하였다. 다음은 이와 같은 Bcl-2 발현의 차이가 있는 두 세포주에서 HDAC 저해제의 세포증식 억제의 정도를 trypan blue 염색 후 hemocytometer counting 방법으로 비교한 결과, U937/ Bcl-2의 성장속도가 U937/vector에 비하여 다소 retardation되는 경향을 나타내긴 했으나 유의성 있는 값을 나타내지는 않았다(Fig. 1B). 따라서 HDAC 저해제에 의한 apoptosis 연구에 U937/vector와 U937/Bcl-2의 세포 성장률이 영향을 미치지 않을 것으로 추정되었기 때문에 U937/vector와 U937/Bcl-2 세포에서 HDAC 저해제인 TSA와 Na-B를 처리하여 세포증식율에 대한 효과를 조사하였다. Fig. 1B에서 보는 바와 같이 \(80\mathrm{nM}\) TSA를 24~72시간 동안 처리한 다음 세포증식율을 측정한 결과, TSA에 의한 세포증식 억제가 U937/BCl-2에서 현저히 회복됨을 알 수 있었다. 그러나 Na-B에 의한 세포증식 억제는 U937/Bcl-2에서도 U937/vector와 유사한 정도의 억제를 나타내고 있어 효과가 없는 것으로 사료된다(data not shown). 한편 U937/vector에서의 TSA 및 Na-B의 감수성은 U937 세포에서 관찰된 선행연구의 결과와도 유사하였다. 아울러 TSA와 Na-B의 처리에 의하여 세포증식의 억제뿐만 아니라 membrane blebbing 및 shrinkage와 같은 형태적 변형을 동반하는 등 세포의 죽음이 일어나는 것으로 관찰됨에 따라 MTT assay에 의한 세포 생존도 비교를 실시하였다. 그 결과, Fig. 1C 및 D에서 나타낸 바와 같이 TSA에 의한 생존도 감소는 Bcl-2의 과발현에 의하여 어느 정도 차단되는 효과가 있었으나, Na-B에 의한 생존도의 경우 U937/vector 및 U937/Bcl-2 세포간의 큰 차이점은 나타나지 않았다. 이는 선행연구에서 관찰된 경우와 매우 유사한 결과들이며, TSA에 의한 세포증식 억제는 Bcl-2의 과발현에 의해 극복되어 질 수 있으나, Na-B에 의한 증식 억제는 Bcl-2와 무관하다는 것을 의미한다.</p>
어떻게 HDAC 저해제에 의한 apoptosis 연구에 U937/vector와 U937/Bcl-2의 세포 성장률이 영향을 미치지 않을 것으로 추정했어?
Bcl-2 발현의 차이가 있는 두 세포주에서 HDAC 저해제의 세포증식 억제의 정도를 trypan blue 염색 후 hemocytometer counting 방법으로 비교한 결과, U937/ Bcl-2의 성장속도가 U937/vector에 비하여 다소 retardation되는 경향을 나타내긴 했으나 유의성 있는 값을 나타내지는 않았다