<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험재료</h2><p>실험재료의 부추씨는 1999년 11월 경남 진주시 부근의 농가에서 채취하여 음지에서 충분히 말린 후 \( 70^{\circ} \mathrm{C} \)에서 하룻밤 건조시켜 분말화 시켜 \( -20^{\circ} \mathrm{C} \)에서 보관하면서 시험에 사용하였다.</p><h2>일반성분 분석</h2><p>부추씨의 수분, 조단백질, 조지방 및 조회분 등의 일반성분은 A.O.A.C. 방법으로 정량하였다. 분쇄한 부추씨는 \( 105^{\circ} \mathrm{C} \)에서 건조시켜 수분함량을 구하였다. 조단백질은 micro Kjeldahal 법으로 전질소 함량을 구한 후 질소 환산계수 6.25를 곱하여 산출하였다. 조지방은 Soxhlet법으로 추출한 다음 정량 하였으며, 조회분은 회화법으로 정량하였다.</p><h2>아미노산 분석</h2><p>분쇄한 부추씨 \( 100 \mathrm{~mg} \)을 가수분해용 시험관에 취하여 \(6 \mathrm{N} \mathrm{~HCl} ~3 \mathrm{~m} \ell \)를 가하여 탈기시킨 후 질소가스를 충진하여 밀봉한 후 \( 110^{\circ} \mathrm{C} \)에서 24시간 가수분해 시켰다. 가수분해된 시료를 개관하여 염소를 제거하고, \( 0.2 \mathrm{~N} \) sodium citrate buffer (\( \mathrm{pH}\ 2.2 \))에 용해시켜 \( 0.2 ~\mu \mathrm{m} \) membrane filter로 여과하여 아미노산 자동분석기(Biochrome 20, Pharmacia Biotech. Co., U.S.A.)로 분석하였다.</p><h2>무기질 분석</h2><p>우 등의 방법에 따라 분쇄하지 않은 부추씨를 전처리한 후 원자흡수 분광분석기(Perkin Elmer AAnalyst 300, U.S.A.)로 측정하였다.</p><h2>지방산 분석</h2><p>분쇄한 부추씨로부터 총지질은 Folch 등의 방법에 따라 chloroform : methanol 2:1 혼합액으로 추출하였다. 분리된 지방에 methanol: \( \mathrm{HCl}(5: 1, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)용액을 가하여 \( 70^{\circ} \mathrm{C} \)에서 3시간 methylation시킨 후 hexane으로 추출하여, omega wax capillary column \( (30 \mathrm{~m} \times 0.25 \mathrm{~mm} \), Supelco, U.S.A.)을 사용하여 가스크로마토그래피(GC-17A, Shimadzu, Kyoto, Japan)로 분석하였다. FID형 검출기, 캐리어가스는 헬륨을 사용하였으며, column, injector 및 detector 온도는 \( 180^{\circ} \mathrm{C}\), \(250^{\circ} \mathrm{C} \) 및 \( 250^{\circ} \mathrm{C} \)에서 분석하였다. 지방산 표준품은 Sigma Chemical Co.의 지방산 methylester를 사용하였으며, GC에서 분리된 각 지방산 methylester의 면적과 총 면적에 대한 각 peak 면적(\( \% \))을 계산하여 각 지방산의 조성비로 하였다.</p><h2>폴리페놀 화합물의 측정</h2><p>폴리페놀 화합물의 함량은 페놀성 물질이 phosphomolybdate와 반응하여 청색을 나타내는 현상을 이용한 Folin Denis 법을 약간 변형시켜 측정하였다. 이때 분말화한 부추씨로부터 폴리페놀 화합물의 추출 수율을 높이기 위하여, 폴리페놀과 반응하여 갈변을 일으키는 갈변효소 poly phenol oxidase를 불활성화시켜 폴리페놀의 손실을 방지하기 위한 수단으로 \( 20^{\circ} \mathrm{C}\), \(40^{\circ} \mathrm{C} \) 및 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)에서 각각 20분간 열을 가한 후 \( 3,000 \mathrm{~rpm} \)에서 원심분리하여 상층액을 취하여 동결건조 시킨 수용성 추출물을 사용하여 폴리페놀 화합물 함량을 측정하였다. 즉, 부추씨의 수용성 추출물을 \(1 \mathrm{mg} / 1 \mathrm{~m} \ell \) 증류수에 녹인 다음 \( 0.2 \mathrm{~m} \ell \)를 취하여 증류수를 가하여 \( 2 \mathrm{m \ell} \)로 만든 후, 여기에 \( 0.2 \mathrm{~m} \ell \) Folin-ciocalteu's phenolreagent를 첨가하여 잘 혼합하고 3분간 실온에서 방치하였다. 정확히 3분 반응시킨 후 \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} \) 포화용액 \( 0.4 \mathrm{m}\ell \)를 가하여 혼합하고 증류수를 첨가하여 \( 4 \mathrm{~m} \ell \)로 만든 후, 실온에서 1시간 방치하여 상층액을 \( 725 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 이때 탄닌산(tannic acid) \( 1 \mathrm{~g} \)을 \( 50 \% \) 메탄올 용액 \(1\mathrm{m \ell} \)에 녹이고 최종농도가 \(0\), \(0.1\), \(0.3\), \(0.5\) 및 \( 1.0 \mathrm{~mg} / \mathrm{m \ell} \) 용액이 되도록 취하여 위에서와 같은 방법으로 \( 725 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하여 작성한 tannic acid 표준곡선으로부터 부추씨의 폴리페놀 화합물 함량을 구하였다.</p><h2>항산화력 측정</h2><p>부추씨 수용성 추출물의 항산화력은 DPPH를 환원시키는 능력으로 조사하였다. DPPH 용액은 \( 100 \mathrm{m \ell} \) 에탄올에 DPPH \( 16 \mathrm{mg} \)을 녹인 후 증류수 \( 100 \mathrm{m \ell} \)를 혼합하여 Whatman filter paper No. 2에 여과시켜 만들었다. 이 용액 \(5\mathrm{m \ell} \)에 일정농도(\( 0.05\), \(0.1 \% \))의 시료용액 \( 1 \mathrm{m \ell} \)를 혼합한 후 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간 반응시킨 후 \( 528 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도의 감소로 측정하였다. 이때 대조구인 BHT는 \( 0.05\% \) 농도로 첨가하여 위에서와 동일한 방법으로 흡광도 감소를 측정하였다. DPPH를 이용한 전자공여능(electron donating ability;EDA)은 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도차를 백분율(\(\% \))로 표시하였다.</p><p>\( EDA=시료무첨가구 흡광도 - 시료첨가구 흡광도/시료무첨가구 흡광도 \times 100 \)</p>
부추씨의 수분함량을 구할때 몇\( ^{\circ} \mathrm{C} \)도에서 건조 시켰어 ?
\( 105^{\circ} \mathrm{C} \)