<h1>재료 및 방법</h1><h2>함박잎새버섯분말의 재배, 분말조제 및 성분</h2><p>함박잎새버섯의 재배는 찹나무톱밥, 건비지와 밀기울을 혼합한 배지율 이용하여 실내온도 \( 18^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 35일 동안 배양하였다. 자실체를 수확하여 동결건조방법을 통해 분말로 만들었으며 영양소의 분말조성 성분은 Table 1 과 같다.</p><h2>당뇨 유발 및 고지방식이 투여</h2><p>실험동물은 4주령의 Sprague-Dawley종 수컷 흰쥐\( (120 \pm 10 \mathrm{~g}) \)를 구입하여 표준사료를 이용하여 1주간 적응시켰다. 당뇨 유발은 조 등의 방법을 참조하여 체중이 \( 290 \pm 10 \mathrm{~g} \)인 실험동물을 12시간 동안 금식시킨 후 streptozotocin(STZ, Sigma Chem. Co. MO, USA)을 \( 0.1M\) citrate buffer( \( \mathrm{pH} \) 4.3)에 \( 55 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)의 농도로 대퇴부 근육에 주사하여 이루어졌다. 당뇨 유발 확인을 위해 STZ 투여 48시간 후 꼬리정맥으로부터 취한 혈액의 공복시 혈당농도를 통해 이루어졌다. 혈당농도가 \( 300 \mathrm{mg} / \mathrm{dl} \) 이상인 동물을 실험에 이용하였다. 당뇨 유발이 확인된 실험쥐를 이용하여 Table 2에서처럼 정상군(NC: normal group), 고지방식이군(HF: high fat-treated group), 고지방식이와 더불어 당뇨유발 대조군(HFDM: STZ-induced diabetic and high fat-treated group), 고지방식이와 당뇨 유발과 더불어 \( 1 \% \) 함박잎새버섯분말 식이군(DAI: \( 1 \% \) hambag mush-room powder- and high fat-treated group after STZ-induced diabetic), 고지방식이와 당뇨 유발과 더불어 \( 2 \% \) 합박잎새버섯분말 식이군(DAII: \( 2 \% \) hambag mushroom powder- and high fat-treated group after STZ-induced diabetic) 등 군 당 6-8마리씩 5군으로 나누어 6주간 사육하였다. 고지방 식이는 Table 2 에서처럼 당뇨가 확인된 실헙쥐에 \( 10 \% \) 돈지(Lard)와 \( 0.25 \% \) sodium cholate를 함유한 식이사료(PMI Nutrition International, LLC, Brentwood, Newhampshire, USA)을 통해 이루어졌다. 동물실헙실의 온도는 \( 20 \pm 5 \mathrm{C} \), 습도는 \( 55 \sim 60 \% \) 로 하였으며 12시간 light-dark cycle로 조정하였다.</p><h2>체중증가량, 식이 섭취량, 물 섭취량 및 식이효율</h2><p>체중, 식이 및 물 섭취량은 전 실험 기간을 통하여 매일 일정한 시간에 측정하였다. 식이효율(feed efficiency ratio, FER)은 같은 기간 동안의 체중증가랑을 동일 기간의 식이 섭취량으로 나눈 값으로 하였다.</p><h2>혈당의 분석</h2><p>혈당은 16시간 절식시킨 후 꼬리부위 혈관에서 란셋으로 채혈하여 Gluco-Tester(Life Scan Inc., USA)로 1주마다 측정하였다.</p><h2>혈청지질 측정</h2><p>중성지질, 총콜레스테롤, HDL 콜레스테롤 함량의 함량은 kit 시약(AM 157S-K, AM 202-K, AM 203-K, Asanpharm Co., Hwasung, Korea)으로 Fridwald 등의 방법을 참조하여 측정하였다. 중성지질의 함량은 혈청 \( 0.02 \mathrm{ml} \) 에 효소용액 \( 3.0 \mathrm{ml} \) 를 가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 10 분간 반응시킨 후 \( 550 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. 총콜레스테롤함량은 중성지질의 경우와 동일한 용량비로 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 5분간 반응, \( 500 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하여 계산식인 \( \mathrm{mg} / \mathrm{dl}=( \) 표준용액의 흡광도/검액의 흡광도) \( \times 300 \)을 이용하여 산출하였다. HDL-콜레스테롤함량은 혈청 \( 0.1 \mathrm{ml} \) 에 호소용액 \( 3.0 \mathrm{ml} \) 을 가하여 \( 37 \mathrm{C} \)에서 5분간 반응시킨 후 \( 500 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하여 계산식인 \( \mathrm{mg} / \mathrm{dl}=( \) 표준용액의 흡광도/검체용액의 흡광도 \( ) \times \)100 을 통해 산출하였다. LDL-콜레스테를함량은 Friedewald 등의 방법에 따라 계산식인 총콜레스테롤 - (HDL-콜레스테롤량 \( +( \) 중성지진/5)}에 의하여 산출되었다.</p><h2>췌장 조직의 현미경 관찰</h2><p>췌장조직은 Degertekin 등의 방법을 참조하여 6주 동안 사육된 실험흰쥐의을 분리하여 \( 10 \% \) 중성 포르말린에 고정 및 파라핀 포매시켰다. 두께 \( 4 \mu \mathrm{m} \) 크기로 절단하여 hema-toxylin-eosin (HE) 염색을 통해 광학현미경으로 관찰 촬영하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>모든 실험결과는 실험동물 6-8마리의 평균치와 표준편차로 나타내었으며, 유의성 검증은 SPSS(Statistical Package for Social Sciences, SPSS Inc., Chicago, IL, USA) software package program을 이용하여 Duncan's multiple range test 를 행하였다.</p>
함박잎새버섯의 재배에 이용한 것은 뭐야?
찹나무톱밥, 건비지와 밀기울을 혼합한 배지율