<h1>결과 및 고찰</h1><p>Mesangial 세포는 kidney glomerulus의 모세혈관주위에 존재하는 특수화된 세포이다. Fenestrate의 glomerular fil-tration 조절, extracellular matrix, phagocyte의 기능을 담당한다. 그리고 distal convoluted tubule의 macula densa와 juxtaglomerular apparatus 만들어 kidney의 혈류를 조절 (renin-angiotensin-aldosterone system)기능도 가진다. 이와 같이 kidney가 정상적인 kidney의 기능을 가지기 위해서는 건강한 mesangial 세포가 존재하는 것이 가장 중요하다.</p><p>Megsin이 과발현하는 transgenic mice는 심각한 glomerular abnormality를 보인다. 특히 glomerulus가 정상보다 커지는 것과 함께 mesangial cell에서 megsin이 강한 발현을 보인다. 환자의 신자에서는 정상인의 신장에 비하여 megsin이 약 \( 30 \% \)정도 과발현된다. Mesangial cell을 ER stress inducible 상태 (당쇄저해, 칼슘교란, NO donor, oxidative stress, 과포도당)를 만든 결과 ER chaperone이 정상에 비하여 높은 발현을 보였다. 이런 세포반응을 UPR (unfolded protein response)라고 라며 전형적인 ER stress 상태를 보인다. Anti-megsin antibody를 사용한 immunoelectron micro-scopy의 관찰 결과 megsin이 electron-dense inclusion bodies에 집중되었다. IgA 신증환자의 mesangial 세포는 serpin의 변성구조로 인한 세포내 retention과 inclusion body가 나타나는 것이 특징인 serinopathy와 변성단백질이 소포체내의 ER chaperone에 retention되는 ERSD의 공통적인 세포병리현상을 보인다. 그런 의미에서 IgA 신증환자에서 특이적으로 발현하는 megsin 단백질의 연구는 학문적으로 단백질 conformation의 변화에 의해서 유발되는 serinopathy ERSD이 공통된 분자메카니즘을 가진다는 것을 증명할 수 있다고 생각된다.</p><p>Megsin의 생물학적 기능을 이해하기위하여 Drosophila Gal4-UAS system을 이용하였다. 그 이유는 동물의 kidney에서 mesangium 세포를 순수하게 분리할 수 없으며, 계속적인 계대배양도 곤란한 상태이다. 전체대사와 밀접한 관계를 거지는 kidney 연구를 위하여서는 세포수준의 실험에서 많은 장애가 있다. 그래서 Drosophila Gal4-UAS system을 이용하여 megsin이 overexpression 하는 유전자 변형 Drosophila를 만드는 것이 필요하다. 인간형 megsin이 과발현하는 transgenic Drosophila (actin-gal4>UAS-Megsin fly) 를 만들었다. 이 형질전환체의 유전적 표현형은 melanin defi-ciency-abdomen을 보였다, 후세대에서 형질전환체를 고르기 위하여 육안 표식으로도 사용된다. 인간형 megsin이 도입된 형질전환체에서 발현하는 megsin의 mRNA를 RT-PCR방법으로 확인하였다. 비록 유전자가 도입되어있어도 actin-gal4로 induction 시키지 않으면 Fig. 3의 lane 2와 같이 아주 약한 존재가 확인될 뿐이지만 actin-gal4로 induction되면 Fig. 3의 lane 3과 같이 강한 발현이 확인되었다. 이처럼 발현된 인간현 megsin 유전자가 Drosophila 체내에서 정상적으로 translation되어 단백질로 만들어지는 지를 Western Blotting으로 확인하였다. Fig. 3에서와 같이 actin-gal4로 induction된 형질전환체에서 megsin밴드가 확인되었다.</p><p>앞에서 설명한 것과 같이 IgA 신증환자의 mesangial 세포에 megsin의 강한 발현과 inclusion이 관찰되는 것으로 보아</p><p>megsin 단백이 병태생리학적으로 관여하고 있다는 것을 시사한다. 그래서 megsin 단백은 IgA 신중환자의 치료를 위한 신약개발의 중요한 target이 되는 분자로 생각되어 아주 흥미를 모으고 있다. 본 연구자 역시 megsin이 신장질환 치료약의 신약개발의 중심에 있다는 것에 주목하여 megsin의 유전자활성/억제 혹은 단백질활성/억제를 조절할 수 있는 단백질을 탐색하려고 한다. 연구시설과 인력 등을 고려하여 대규모의 단백저해화합물질을 screening 하는 것은 어려운 상태라서, 우선 작은 실험실에서 할 수 있는 접근방법으로 Drosophila Gal4-UAS system을 사용하기로 하였다. 특히 megsin 유전자는 WT Drosophila가 가지고 있지 않으며 transgenic Drosophila는 눈으로 식별할 수 있는 phenotype을 나타내는 장점을 가지고 있어 사람 megsin의 분자생물학적 접근이 아주 용이하다. 결국 사람 megsin 유전자 산물과 interaction 하는 인자를 screening하여 mesangial 세포내에서 직접 그 작용을 이해함으로서 megsin을 통한 IgA 신증환자를 위한 신약으로 사용 할 수 있을 것이다.</p>
Mesangial 세포는 어디에 위치할까?
kidney glomerulus의 모세혈관주위