<h1>결과 및 고찰</h1><h2>균주의 분리 및 동정</h2><p>Pectinase를 생산하는 균주를 탐색하기 위하여 토양 현탁액을 LB고체배지에서 3단 희석하여 \( 0.5 \% \) 의 polygalacturonic acid가 함유된 LBP배지에 도말한 후 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 배양한 결과 halo zone을 형성하는 6균주를 1차 선별하였다. 선별된 6균주를 LBP 액체배지에서 36시간 배양한 후 효소활성을 측정하였다. 이 중에서 활성이 가장 높은 균주를 선택하여 형태학적 및 생리학적 특성을 조사한 결과, 본 균주는 내열성 포자를 형성하는 그램 양성균으로 활발한 운동성을 가지며 단간균이고 호기성 균주로 확인되었으며, catalase시험과 oxidase시험에서 모두 양성반응을 나타내었다. 최종적으로 Bergey's manual에 준하여 동정한 결과, Bacillus sp.으로 판명되어 Bacillus sp. BS-214로 명명하였다(Table 1).</p><h2>Pectinase 생산을 위한 배양조건</h2><p>Pectinase생산을 위한 최적온도를 조사하기 위하여 Bacillus sp. BS-214 균주를 효소생산용 배지에 접종하여 \( 20^{\circ} \mathrm{C} \), \( 30^{\circ} \mathrm{C} \), \( 40^{\circ} \mathrm{C} \), \( 45^{\circ} \mathrm{C} \), \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 36시간 진탕 배양한 후 균의 생육도와 효소활성을 측정한 결과, \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 가장 높은 효소 활성을 나타내어 (Table 2), \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 가장 높은 pectinase 활성을 나타낸 Bacillus sp. PN33 보다는 높은 배양온도에서 최대의 pectinase를 생산한다는 것을 알 수 있었다. 균주의 생육도와 pectinase 생산에 미치는 배지의 초기 pH의 영향을 검토하기 위하여 효소 생산용 배지에 \( 0.1 \mathrm{M} \) \( \mathrm{NaOH} \) 와 \( 0.1 \mathrm{M} \) \( \mathrm{HCl} \)로서 pH를 5, 6, 7, 8, 8.5, 9로 조절한 후 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 36시간 배양한 결과, \( \mathrm{pH} 8.5 \) 에서 가장 높은 효소활성을 나타내어 (Table 3), \( \mathrm{pH} 7.0 \) 에서 가장 높은 pectinase활성을 나타낸 Bacillus sp. PN33 보다는 알칼리 조건에서 최대의 pectinase를 생산한다는 것을 알 수 있었다.</p><h2>균의 생육에 따른 효소생산</h2><p>Bacillus sp. BS-214 균주의 생육에 따른 pectinase의 생산량을 조사하기 위하여 효소 생산배지와 효소생산 최적조건에서 배양하면서 4시간 또는 8시간 간격으로 측정한 결과, Fig. 1에서 나타낸 봐와 같이 균 생육도는 30시간만에 최대에 도달하여 그 후로는 감소하는 경향을 나타내었고, 효소 생산량은 대수증식기에서 증가하기 시작하여 36시간만에 최대에 도달하였으며 그 후로는 급격히 감소하였다. 한편, 배지의 \( \mathrm{pH} \)는 시간 경과와 함께 약간 증가하는 경향을 보였다. 이러한 결과는 균 생육의 정지기에서 최대의 효소생산량을 나타내는 Bacillus sp. PN33 과 비슷한 경향을 나타낸다는 것을 알 수 있었다.</p>
본 논문에서는 무엇을 LB고체배지에서 농도를 묽게 하여 \( 0.5 \% \)의 polygalacturonic 산이 들어 있는 LBP배지에 도말했는가?
토양 현탁액