<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 재료</h2><p>본 연구에서 사용된 마키베리(Maqui Berry, Chile)는 2016년에 페루에서 재배된 것을 약초판매업체인 두손애약초를 통해 2017년에 동결건조 분말의 형대로 구입하였다. 시료의 효능을 알아보기 위해 한국세포주은행(Korea Cell Line Bank, Seoul, Korea)에서 분양받은 HaCaT cell (keratinocyte)과 B16F10 cell (melanoma cell)을 이용하여 세포실험을 진행하였다. 세포들은 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM; Hyclone \( { }^{TM} \), GE Healthcare Life Sciences, Logan, UT, USA) 배지에 \( 10 \% \) 우태아혈청(FBS, Fetal Bovine Serum, Hyclone \( { }^{TM} \), GE Healthcare Life Sciences)과 \( 1 \% \) 항생제(AB, Antibiotics, Hyclone \( { }^{TM} \), GE Healthcare Life Sciences)를 첨가한 영양배지로 incubator (\( 37^{\circ} \mathrm{C}, 5 \% \mathrm{~CO}_{2} \))에서 배양하였다. 세포 세척에는 Phosphate buffered saline (PBS; Hyclone \( { }^{TM} \), GE Healthcare Life Sciences)가 사용되었다. 시료의 독성을 알아보기 위해서 MTS assay (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt)를 시행하였고 CellTiter \( 96^{Ⓡ} \) AQueous One Solution Cell Proliferation Assay (Promega, Madison, WI, USA)를 통해 진행하였다. 시료의 세포에 대한 안전성을 확인한 후 항산화 실험을 시행하였는데 2',7'-dichloro-fluorescin diacetate (DCFDA) Cellular Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Assay Kit (Abcam, Bristol, UK)로 진행하였다. 양성대조군은 glutathione (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)을 사용하였다. 멜라닌 합성 저해 실험은 \( \alpha \)-MSH (Simga-Aldrich)를 처리하여 진행하였다. 그리고 Arbutin (Simga-Aldrich)을 양성대조군으로 이용하여 효과 정도를 관찰하였다. 항균 실험에 사용된 박테리아에는 Staphylococcus aureus (S. aureus, KCTC 1927; Korean Collection for Type Cultures, Korea), Staphylococcus epidermidis ( S. epidermidis, KCTC 1917; Korean Collection for Type Cultures, Korea), Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa, KCTC 2004; Korean Collection for Type Culture, Korea), Escherichia coli (E. coli, KCTC 2571; Korean Collection for Type Culture, Korea) 등이 있는데 이를 Luria-Bertai (LB) 액체 배지에 접종한 뒤 shaking incubator \( \left(37^{\circ} \mathrm{C}, 200 \mathrm{rpm}\right) \)에서 배양하였다. LB배지의 조성은 \( 1 \mathrm{L} \) 기준으로 증류수 \( 950 \mathrm{~g} \), sodium chloride ( \( NaCl \); Sigma-Aldrich) \( 10 \mathrm{~g} \), tryptone (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) \( 10 \mathrm{~g} \), yeast extract (Duchefa Biochemie, Haarlem, Netherlands) \( 5 \mathrm{~g} \)이다. 그 외 ethanol, ethyl-acetate, chloroform, dimethyl sulfoxide (DMSO), hydrogen peroxide \( \mathrm{H_{2}O_{2}} \) 등은 대정화금의 1급 시약을 사용하였다.</p>
LB배지의 조성은 무엇인가요?
\( 1 \mathrm{L} \) 기준으로 증류수 \( 950 \mathrm{~g} \), sodium chloride ( \( NaCl \); Sigma-Aldrich) \( 10 \mathrm{~g} \), tryptone (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) \( 10 \mathrm{~g} \), yeast extract (Duchefa Biochemie, Haarlem, Netherlands) \( 5 \mathrm{~g} \)