<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 재료</h2><p>일본 명성대학 농학부 부속농장(홍적사양토)에 재배하고 있는 마늘(품종 white 6편)을 수확하여 건조망에 넣어 통풍 음건하여 \( 5^{\circ} \mathrm{C} \) 의 냉암 조건하 2 개월간 저장하여 휴면타파하여 공시재료로 사용하였다.</p><h2>실험 방법</h2><p>사용하는 기구 및 도구는 건조살균 및 고압멸균 또는 UV lamp 하에서 1 시간 이상 살균하여 무균상태로 하였다.</p><p>실험재료는 clean bench 내에서 \(70\%\) alcohol에 수초 간, tween 20을 \( 2 \sim 3\) 방울 첨가한 sodium hypochlorite 용액(활성염소 \( 1.0 \%) \) 에 15 분간 침지 소독한 후 멸균수로 수회 수세하였다. 조직의 갈변을 방지하기 위하여 산화방지제(ascorbic acid \( 50 \mathrm{mg} / \mathrm{l}+ \) citric acid \( 50 \mathrm{mg} / \mathrm{l} \) )에 조직을 침지 처리하여 배지에 치상하였다.</p><p>배지는 Table 1의 Takano-Meijo 기본배지(이하 TM 배지)로 배양액 조성은 총이온용량이 \( 30 \mathrm{me} / \mathrm{l} \) 로 하였고 호르몬조성의 영향을 알기위하여 모두 NAA \( 0.02 \mathrm{mg} / \) l과 BAP 0.2, 1.0, 2.0을 각각 첨가한 3종류로 autoclave 후 \( \mathrm{pH}5.7 \) 로 조정하였다.</p><p>재료의 치상부위에 따른 배양효과의 차이를 검토하기 위하여 치상조직을 달리하여 즉, (1)경정조직(경정조직을 포함한 저반부 크기 \( 0.5 \sim 1\mathrm{mm}\)), (2) 보통엽 중하부조직 (직경 \(3 \sim 5 \mathrm{mm} \), 두께 \( 1 \mathrm{~mm} \) 윤절), (3) 저장엽(인편 \( 3 \sim 5 \mathrm{~mm} \) 각절)으로 하여 3종류로 하여 합계 9 처리구(A \(\sim\) 1)로 하였다. 배양은 고체 배지에 치상하여 3 주마다 새로운 배지에 이식하였고 배양조건은 \( 25^{\circ} \mathrm{C}\), \(5000 \mathrm{lux} \) 로 하였다. 신초원기(shoot primordium) 유도를 위하여 A, B, C 구에 phytagel을 제거한 액체배지에 경정조직을 치상하여 같은 조건하에서 1 분간 2 회 정도 회전배양 하였다.</p><p>배양중인 배지의 당 농도가 경정조직의 재분화 및 shoot 형성에 미치는 영향을 알고자 A, B, C구에 배양한 경정조직이 \( 1 \sim 2 \mathrm{~cm} \) 정도로 성장한 조직괴를 \( 3 \mathrm{~mm} \) 전후의 크기로 조정하여 sucrose 농도만을 2배 (\( 40000 \mathrm{mg} / \mathrm{l}) \) 하여 침투압을 높인 배지에 계대배양하여 동일조건하에서 배양하여 shoot 형성율을 조사하였다.</p><p>신초원기 유도를 위한 배양체의 조직학적 관찰을 위하여 배양된 조직을 FAA액에 고정하여 paraffin 절편법에 의한 두께 \( 10 \mu \mathrm{m} \) 의 연속 절편을 만들어 염색은 \( 0.5 \% \) safranin 용액과 \( 0.5 \% \) first-green FCF 용액으로, canada balsam으로 봉입하여 영구포본을 제작하여 광학현미경으로 관찰하였다.</p>
본 실험에서는 재료의 치상부위에 따른 배양효과의 차이를 확인하기 위해 달리한 치상조직 중 세번째 조직은 무엇인가?
저장엽