<h1>결과 및 고찰</h1><h2>길항세균의 분리</h2><p>잎들깨 시설재배지로부터 균핵병의 병징을 나타내는 식물체를 채취하여 균핵병 발생특징을 보았다. Fig. 1A는 균핵병이 발생한 잎들깨의 전초사진으로 잎은 진한갈색으로 마른 것을 볼 수 있고, 병징이 심한 식물체는 줄기가 말라서 갈라진 것을 확인 할 수 있으며, 줄기 하단부는 초기에 붉은색을 띄다가 갈색으로 변하면서 고사하는 것을 관찰할 수 있었다. Fig. 1B는 줄기를 절개하여 내부를 관찰한 사진으로 검은 갈색의 균핵이 형성되어져 있는 것을 확인할 수 있었다. 균핵병이 발생한 잎들깨 시설재배지에서 잎들깨 뿌리, 줄기, 잎 그리고 시설 재배지 토양으로부터 다수의 균을 분리했다. 분리한 균들을 B. cinerea, S. sclerotiorum, P. ultimum, F. oxy-sporum 및 R. solani에 대해 plate 대치배양법으로 항균력을 조사하여 55 종의 길항세균을 분리하였다. 분리한 균 중에 잎들깨 생육에 피해를 주는 잿빛곰팡이균과 균핵병원균에 길항활성이 뛰어난 균주를 AB02로 명명하고 본 실험에 이용했다. Fig. 2의 경우는 분리한 길항세균들을 이용하여 S. sclerotiorum(A)과 B. cinerea (B)에 대한 항균효과를 나타낸 사진으로, 순수 분리한 균들의 S. sclerotiorum에 대한 항균력을 조사한 것으로서 10시방향의 AK17 균주와 4시 방향(화살표)의 AB02 균주가 항균력이 강한 것을 확인 할 수 있었고, B. ciner-ea에 대한 대치배양으로 두 균의 항균력을 관찰하였다. 그 결과, 균을 접종하지 않은 부분과 균을 접종했더라도 항균활성이 없는 곳과는 달리 AB02 균주와 AK 균주을 접종한 부분에서는 전혀 병원균의 생육이 나타나지 않는 것을 볼 수 있다.</p><h2>길항세균의 항균 스펙트럼</h2><p>토양에서 분리한 길항균 AB02를 들께 주요병원균인 B.cinerea 및 S. sclerotiorum과 기타 병원균인 P. ultimum, F.oxysporum, R. solani을 이용하여 plate 대치배양법으로 항균력을 조사하였다. 그 결과 잎들깨 주요 병원균인 잿빛곰팡이병원균과 균핵병원균에 대해 항균활성이 뛰어났으며, 잿빛곰팡이균에 대해서는 초기생육을 강하게 억제하는 것을 관찰할 수 있었다. 균핵병의 피해를 많이 받는 고추, 상추, 양상추, 양배추 등의 과채류의 균핵병방제를 위해 분리한 AB02 균주를 이용하여 미생물제제를 개발한다면 병 방제에 크게 도움이 되리라 생각된다. 시들음병원균에 대해서도 항균활성을 나타내었고, Bacillus sp.가 잔디 large patch 병원균인 R. solani에도 효과가 있다는 보고가 있어 골프장에 문제가 되는 Rhizoctonia 방제에도 사용할 수 있을 것이다. 잎들깨 뿐만이 아니라 다른 엽채류에도 피해를 주는 병원균에 효과가 탁월하므로 시설하우스재배지의 연작으로 인한 병의 다발을 막을 수 있고, 높은 습도에 의한 특이환경에 따른 병원성 곰팡이의 피해를 줄일 수 있다. 시설재배지 뿐만 아니라 일반 노지에도 AB02 균주를 이용하여 생물학적 방제 시스템을 구축하면 화학농약의 사용을 줄일 수 있고, 병해에 의한 피해를 막을 수 있으며 청정 농산물의 생산이 가능할 것으로 기대된다.</p><p>분리한 길항세균 AB02 균주를 이용한 미생물제제를 개발하기 위한 1차적인 방법으로 생균을 이용하는 방법과 배양여액만을 이용하는 방법으로 검정을 행했다. 생균을 이용한 제제화를 위한 최적조건 확립을 위하여 배양시간에 따른 균에 대한 항균활성을 검토한 결과, 20시간이상 배양한 것을 사용 할 때가 항균활성과 재현성이 가장 뛰어났다. 생균을 제거하고 배양여액만을 희석하여 처리한 경우는 다소 항균활성이 줄어드는 것으로 관찰되었다. 배양여액만을 사용한 경우에는 48시간 정도 배양한 후에 사용하는 것이 좋았고, 배양액을 50배 희석하여 사용하여도 항균활성이 나타났다. 생균으로 사용할 경우는 하루정도 배양한 다음 냉소에 보관하면서 사용하면 항균활성이 유지되었고, 유통을 위해서는 포자를 형성시켜 제제화하는 것이 좋을 것으로 사료된다. AB02 균주를 배양한 다음 배양여액을 유기용매로 추출하고, 추출물을 이용한 항균활성 조사에서도 항균활성이 우수하게 나타나 항균의 주체는 항균물질로 판단되어진다. 그리고 배양여액을 열 처리하여 항균활성을 조사했을 때는 항균활성이 다소 차이가 나는 것을 확인하였는데 이는 효소 및 peptide성 물질도 항균작용에 관여하는 것으로 여겨진다. 이 등도 고추탄저병원균에 대해 항균력을 나타내는 Bacillus sp.를 분리하여 항균 단백질의 항균활성까지 확인하였다. 사멸기 이후의 배양여액 에서의 항균효과 상승은 균이 용해되면서 균체 내에 축적되어진 항균물질의 노출에 의한 것으로 보여진다.</p>
균핵병이 발생한 시설 재배지 토양으로부터 분리한 것으로 옳은 것은 무엇인가?
균