<h2>DPPH에 의한 항산화 활성 측정</h2><p>항산화 활성은 Leong의 방법에 따라 DPPH(1.1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) \( 20 \mathrm{mg} \) 을 EtOH \( 100 \mathrm{ml} \) 에 용 해한 후 증류수 \( 100 \mathrm{ml} \) 를 첨가한 후 여과지로 여과하였다. DPPH 용액은 대조구의 흡광도가 1.0 정도가 되도록 EtOH로 희석하여 사용하였다. 시료 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 시험관에 가하고 DPPH 용액 \( 4 \mathrm{ml} \) 를 혼합하여 10 분간 반응시킨 후 Spectrophotometer (Evolution 300, Thermo Electronic Co., England)로 \( 517 \mathrm{~nm} \) 에 서 흡광도를 측정하여 DPPH radical 제거활성을 계산하였다.</p><h2>화합물의 성분 확인 및 정량</h2><p>EtOAc 분획을 column chromatography에 걸어 얻은 분획 중 항균작용과 항산화작용이 우수하게 나타난 subfraction 2 에 대하여 GC와 GC-MS 를 이용하여 성분 분석을 하였다. GC(HP 6890, USA)의 분석조건은 SPB-5 (capillary, \( 0.53 \) \( \mathrm{mm} \times 30 \mathrm{~mm} \) ) column, oven 온도는 \( 120^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 3 분 유지 후 \( 250^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 분당 \( 6^{\circ} \mathrm{C} \) 로 승온하였고, injector 온도는 \( 230^{\circ} \mathrm{C} \), detector 온도는 \( 260^{\circ} \mathrm{C} \), carrier gas는 질소, detector는 FID, 시료 주입량은\( 2 \mu l \) 로 하였다. GC 분석을 위한 시료는 N, O-bis (trimethylsilyl) -acetamide (BSA)와 \( \mathrm{CH}_{3} \mathrm{CN} \) (1:4) 시약으로 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 10 분간 반응시켜 TMS화 시킨 후 사용하였다. GC-MS (HP 6890, USA)의 분석조건의 mode는 scan, electron energy 는 \( 70 \mathrm{eV} \), column은 HP-5 MS (capillary, \( 0.25 \mathrm{~mm} \times 30 \) \( \mathrm{m} \) ), oven 온도 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2분 유지한 후 \( 290^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 분당 \( 10^{\circ} \mathrm{C} \) 로 승온하였고, injector 온도 \( 250^{\circ} \mathrm{C} \), carrier gas는 He, 1.0 \) \( \mathrm{ml} / \mathrm{min} \) 으로 하였다.</p><h2>식중독균에 대한 항균 활성 시험</h2><p>항균력 측정에 사용한 식중독 균주와 배지는 Table 1 과 같 으며, Escherichia coli 외 6균주는 한국유전자은행(KCTC)에서 분양받아 사용하였다. 항균성 시험은 paper disc \( (8 \mathrm{~mm}) \) 를 이용한 agar diffusion법으로 실험하였다. 선택 배지에 배양한 각 균주를 백금이를 이용하여 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 Mueller-Hinton broth 에 접종하고, \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 18~24시간 계대 배양한 후, 이 균액을 McFarland nephelometer에 0.5가 되도록 멸균생리식염수 로 희석하여 멸균 면봉으로 Muller - Hinton agar 평판에 고르게 바른 다음, paper disc에 dimethyl sulfoxide (DMSO)에 녹인 각 추출물 \( 50 \mu l \) 를 흡수시켜 plate 표면에 얹고, \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 18 시간 배양 후 디스크 주변의 발육억제대(inhibition zone)를 측정하였다.</p>
누구의 방법에 따라 항산화 할성을 진행하였는가?
Leong