<h2>Collagenase 저해 효과 측정</h2><p>Elastin과 마찬가지로 피부 구조를 이루고 있는 collagen을 분해하여 주름을 유발하는 효소인 collagenase 저해 효과를 측정하기 위해 Wunsch와 Heidrich의 방법에 준하여 실험하였다. \( 0.1 \mathrm{M} \) Tris-\( \mathrm{HCl} \) buffer (\(\mathrm{pH} ~7.5\))에 \( 4 \mathrm{mM} \mathrm{CaCl}_{2} \)를 첨가하여 제조한 용액과 주름조개풀 추출물 \( 0.1 \mathrm{~mL}\), \(4 \)-phenylazobenzyl oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly- Pro-D-Arg \( (0.3 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) 농도의 기질 용액 \( 0.25 \mathrm{~mL} \)을 혼합한 후 \( 0.2 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) collagenase (SigmaAldrich Co., Louis, MO, USA) 농도의 효소 용액 \( 0.15 \mathrm{~mL} \)를 첨가하였다. 시약 반응은 실온에서 \(20\)분간 반응시킨 후 \( 0.5 \mathrm{~mL} \)의 \( 6 \% \) citric acid 종료시약을 넣어 반응을 정지시키고 ethyl acetate \( 2 \mathrm{~mL} \)을 첨가하여 \( 320 \mathrm{~nm} \)의 파장에서 흡광도를 측정하였다.</p><h2>Hyaluronidase (HAase) 억제 효과 측정</h2><p>Hyaluronic acid (HA)의 분해를 촉매하는 효소인 HAase 저해 효과를 측정하기 위해 Dorfman와 Ott의 방법에 준하여 실험하였다. 주름조개풀 추출물 \( 0.5 \mathrm{~mL} \)와 \( 20 \mathrm{mM} \) sodium phosphate buffer \( (\mathrm{pH} ~6.9) \)에 녹인 HAase (\(1,000 \mathrm{U} / \mathrm{mL}\)) \(0.5 \) \( \mathrm{mL} \)를 넣고 \( 38^{\circ} \mathrm{C} \)의 water bath에서 \(5 \)분간 preincubation시킨다. \( 0.3 \mathrm{M} \) phosphate buffer (\(\mathrm{pH} ~5.3\))에 녹인 기질 용액 \( (4 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) \( 0.5 \mathrm{~mL} \)를 첨가하고 다시 \(45 \)분간 water bath에서 reaction시킨 후 \( 5 \mathrm{~mL} \)의 알부민용액을 첨가하여 \(5 \)분간 반웅시키고 \( 600 \mathrm{~nm} \)의 파장에서 투과율을 측정하여 대조구의 투과율과 비교하여 계산하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>모든 실험결과는 평균 \( \pm \) 표준편차(mean \( \pm \) standard deviation)로 표현하였다. 통계 분석은 최소 \(6\)개의 기술 복제물에 대한 실험을 위해 SPSS \(25\) (Statistical Package for Social Science, Chicago, IL, USA)의 Duncan's multiple range test one way ANOVA를 사용하여 수행되었다. \( p<0.05 \)는 통계적으로 유의하다고 간주되었다.</p>
콜라겐을 분해해서 피부에 주름을 유발하는 효소의 이름은?
collagenase