<h1>결과 및 고찰</h1><h2>생화학적 특성 검사에 의한 시험균주 선정</h2><p>Histamine 분해능을 가진 세균을 분리하기 위해 hista-mine 제한배지를 제조하여 이 평판배지에 자라는 균을 순수 분리하여 36균주를 1차 분리하였다. 분리한 36균주를 FDA, Bergey's manual 및 Yoguchi 등을 참고로 하여 형태 및 생화학적 시험을 통해 유사균주를 정리하고 최종 시험균주 10균주를 선별하였다.</p><p>황과 김이 자반고등어에서 분리한 균주는 10종 중 1종만이 Gram 양성이었는데 과메기에서 분리한 균주는 10종 중 7종이 Gram 음성균, 3종은 Gram 양성균으로 나타났고, Indole 생성능은 분리된 모든 균주가 음성으로 나타났다. 그리고 자반고등어에서 분리된 모든 균주는 catalase 양성반응을 보였는데 과메기에서 분리된 균주는 8종이 양성반응을 보였고, oxidase는 동일하게 2균주가 음성반응을 나타내었다.</p><p>당 이용능은 자반고등어에서 분리된 균주에서는 당 비발효균이 6종, glucose 만을 발효하는 균이 4종으로 확인되었고, 과메기에서 분리된 균주는 당 비발효균이 6종, glucose만을 발효하면서 gas를 생성하는 균이 1종, glucose 외에 sucrose 또는 lactose를 발효하는 균이 3종으로 확인되었다.</p><p>\( 25^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \( \mathrm{NaCl} \)농도에 따른 성장 정도를 확인한 결과, 1, 3, 5, 6, 7, 8, 9, 10번 균주는 \( 0 \% \sim 7 \% \)의 염도에서 전반적으로 잘 자랐고, 2번 균주는 \( 0 \% \)와 \( 1 \% \)에서는 자랐지만 그 이상에서는 자라지 않았으며, 3번 균주는 \( 0 \% \)에서 자라지 않는 것을 확인할 수 있었다. 또한 자반고등어에서 분리한 균주는 \(3\%\)의 염도에서 10종 모두 자랐고, \( 5 \% \)에서는 8종이, \( 7 \% \)에서는 4종이 자랐는데, 과메기에서 분리한 균주는 \( 3 \%, 5 \%, 7 \% \)의 염도에서 각각 9종이 자라는 것을 확인할 수 있었으며 비교적 높은 식염 농도에서 자라는 균은 저염 젓갈 등에 활용가능성이 있다고 사료된다.</p><h2>16S rDNA 염기서열 비교에 의한 동정 및 계통발생학적 위치</h2><p>자반고등어와 젓갈 등의 숙성에 관여하는 세균의 분리, 동정에 생화학적 방법이 사용되었으나 연구자에 따라 차이가 많고, 재현성이 약해서 16S rDNA의 염기서열 비교에 의한 동정법을 선택하였다.</p><p>10 종의 시험균주를 16S rDNA 염기서열 비교에 의한 동정 결과, 10종 중 7종이 Genbank에 등록된 균종과 같은 것으로 확인되었고 3종은 동정할 수 없었다.</p><p>1번 시험균주는 Genbank에 등록된 E. americana B791과 \( 99 \% \)의 상동성을 보였는데 이 종은 Grimont 등에 의해 1983년 미국의 임상 실험 원료에서 발견된 것으로 Enterobacter-iaceae의 새로운 균종으로 명명되었다. 이 종은 가래, 상처부위, 혈액 등에서 종종 발견되는데 병원성은 명백하게 밝혀지지 않았으나 류 등이 이 종으로 인한 폐렴 감염을 보고한 바가 있어 병원성이 의심되므로 안전성에 대한 연구가 요구된다. 2번 시험균주는 Genbank에 등록된 Arthrobacter sp. R45S와 \( 95 \% \)의 상동성을 보였는데 Arthrobacter 속은 광범위하게 분포되어 있지만 원래는 토양에서 분리된다. 3번 시험 균주는 Genbank에 등록된 H. marisflava와 \( 98 \% \)의 상동성을 보였다. Halomonas 속은 남극대륙의 Saline 강 주변의 천일염 제조시설에서 처음 분리되었고, 뉴햄프셔의 큰 강어귀에서도 분리되는 균인데, 윤 등은 다상성 분류학(polyphasic taxonomic)연구를 목적으로 황해에서 채취한 시료로부터 이 종을 분리하였다. 4번 시험균주는 Genbank에 등록된 Psychrobacter sp. 9B-7과 \(99\%\)의 상동성을 보였다. Psychrobacter 속은 Juni, Heym에 의해 1986년 발견된 것으로 생선, 가금류, 육류제품을 포함한 다양한 원료와 임상원료, 해수와 복합배지의 오염물질에서도 분리되는 균이다. 5번 시험균주는 Genbank에 등록된 Bacillus sp. LMG 21002와 \(99\%\)의 상동성을 보였다. 6번 시험균주는 Genbank에 등록된 P. cibar-ius JG-220과 \( 99 \% \)의 상동성을 보였는데 이 종은 정 등이 젓갈에서 분리한 것으로 새로운 Psychrobacter 속의 16S rRNA sequence 분석을 통한 Psychrobacter 계열의 계통발생학적 분류 연구에서 발견된 것이다. 7번 시험균주는 Genbank에 등록된 B. megaterium strain KL-197과 \(98\%\)의 상동성을 보였다. 이 종은 토양에서 쉽게 관찰되며 사막과 같은 건조한 토양에서도 쉽게 확인할수 있는 균인데, Nekolny 등은 고염의 환경에서 단백질 대사에 관여하는 세포내질의 proteinase에 대한 이 종의 긍정적인 역할에 대한 보고를 하였다. 나머지 3종은 16S rDNA 염기서열로 동정할 수 없었다. 분리된 세균의 동정법은 기존에 알려진 방법들이 모두 문제점을 갖고 있으므로 동정법에 대한 보다 명확한 연구가 요구된다.</p>
어떤 종류의 세균을 분리하기 위해 hista-mine 제한배지를 제조하여 실험했어?
Histamine 분해능을 가진 세균