<h1>재료 및 방법</h1><h2>시료</h2><p>실험에 사용된 미더덕류, 미더덕(Styela clava) 및 횐멍게(Styela plicata), 는 경남 마산시 진동면 고현리에 소재한 미더덕영어조합에서 구입하여, 실험실로 운반한 다음 이물질 제거 후 세척하여 사용하였다. 다음으로 생시료와 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 10분간 가열 조리한 시료를 각각 진공 동결건조(Vacuum freeze dryer, Ilsin engineering Co. Seoul) 하여 분말화 하였다. 이때 가열조리한 경우는 시료에 3배량의 물을 넣고 끊인 것을 시료로 하였다. 다음으로 시료중량의 5배 메탄올로 하룻밤 동안 교반-추출한 다음, 여과(whatman No.2)한 후 회전식 진공증발기(Eyela, N-INW, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Japan)로 농축시켜 DMSO (Dimethyl sulfoxide, Kanto, Japan)에 녹인 다음 냉동고\( \left(-26^{\circ} \mathrm{C}\right) \)에 보관하면서 검색용 시료로 사용하였다. 혈전용해활성 시험의 경우 가열조리한 미더덕류는 3배량의 물과 함께 꼲여 그 여액을 검색용 시료로 사용하였다.</p><h2>항산화성 측정</h2><p>항산화성 시험은 식품영양실험핸드북의 방법에 준하여 DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, Aldrich Co., USA)활성을 측정하여 DPPH에 대한 전자공여능(Electron donat-ing ability, EDA (\(\%\)))과 free radical inhibition의 \( 50 \% \) 억제농도인 \( \operatorname{EDA}_{50}(\mathrm{mg} / \mathrm{ml})\)을 구하여 비교하였다. 이때 대조구로서 합성항산화제인 BHA, BHT와 천연항산화제인 \( \alpha \)-toco-pherol을 사용하여 같은 방법으로 측정하였다.</p><h2>항균성 측정</h2><p>항균성 시험에 사용한 균주는 식중독 및 병원성균으로 그람 양성균 4종, Bacillus subtilis (KCTC 1021), Bacillus cereus (KCTC 1012), Staphylococcus aureus (KCTC 1916), Listeria monocytogenes (KCTC 3710) 및 그람 음성균 2종, Escherichia. coli (KCTC 1924), Salmonella typhimurium (KCTC 2515)을 선택하여 사용하였다. 미생물 배양에 사용된 배지는 모두 Difco Co. (USA) 제품을 사용하였으며, 항균력 측정용 배지로는 Mueller-Hinton agar를 사용하였다. 항균력 시험은 전보에서와 같이 paper disk법을 사용하였다.</p><h2>항고혈압성 측정</h2><p>항고혈압성 측정은 Angiotensin- I converting enzyme (ACE) 저해능으로 실험하였는데 ACE 조효소액 조제는 Cushman과 Cheung의 방법에 따라 제조하였으며, ACE 저해활성측정은 Trinitrobenzene Sulfonate (TNBS)를 이용한 색도계 측정 방법에 따라 측정하였다. 이때 효소저해 활성은 \( \mathrm{IC}_{50} \)으로 나타내었다.</p><h2>혈전용해활성 측정</h2><p>Astrupt의 방법을 변형하여 \( 67 \mathrm{~mM} \) 인산완충용액 (\(\mathrm{pH} \) 7.4)으로 fibrinogen을 최종농도가 \( 0.5 \% \)가 되도록 완전히 용해시킨 용액 \( 5 \mathrm{ml} \)에 동량의 \( 1 \% \) agarose \( 5 \mathrm{ml} \)를 첨가하여 혼합하였다. 혼합한 용액에 thrombin ( \( 50 \mathrm{unit} / \mathrm{ml}) 0.2 \mathrm{~ml} \)를 첨가하여 충분히 혼합한 후 즉시 petri dish에 붓고 고화시켜 fibrin plate를 제조하였다.</p><p>고화된 fibrin plate에 pasteur pippet으로 지름 \( 5 \mathrm{~mm} \)의 구멍을 만들어 착즙한 각 시료 \( 20 \mu \mathrm{l} \) 를 주입하고 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 13시간 반응시킨 다음, 이때 생성된 투명환의 면적을 계산하였으며 대조구로는 정제된 혈전용해효소인 plasmin (\(1.0 \mathrm{~unit} / \mathrm{ml}\))을 사용하여 대조구의 용해면적에 대한 시료의 용해면적의 상대적인 비율로 환산하였다.</p>
진공 동결건조를 영어로 어떻게 쓰니?
Vacuum freeze dryer