<h1>재료 및 방법</h1><h2>재료</h2><p>탈지 참깨박은 (주)청양식품(안성, 대한민국)에서 참기름 제조 후 부산물로 얻어지는 것을 이용하였으며, 단백질 분해효소인 Alcalase, Neutrase, Protamex, Flavourzyme은 Novozyme사 (Bagsvaerd, Denmark), 세포벽 분해효소인 Tunicase는 Daiwa Kasei사(Osaka, Japan)로부터 구입하였다.</p><h2>탈지 참깨박 열처리</h2><p>입도 \( 200-300 \mu \mathrm{m} \)의 탈지 참깨박 분말을 증류수에 \( 10 \% (\mathrm{w} / \mathrm{w}) \)로 현탁시킨 후 고압멸균기에서 \( 90,100,110,120^{\circ} \mathrm{C} \)로 각각 \( 10 \)분간 열처리하였다. 열처리 후 실온에서 충분히 냉각시킨 다음 효소처리 시료를 사용하였다.</p><h2>단백질 분해효소 선별</h2><p>탈지 참깨박 분말(입도 \( 200-300 \mu \mathrm{~m}) \)을 증류수에 \( 10 \%(\mathrm{w} / \mathrm{w}) \)로 현탁시킨 후 \( 0.1 \mathrm{~N} ~ \mathrm{NaOH} \) 혹은 \( \mathrm{HCl} \)로 각각의 효소 반응 최적 \( \mathrm{pH} \)로 조절한 다음 효소를 참깨박 중량의 \( 1 \%(\mathrm{w} / \mathrm{w}) \)로 가하고 효소 반응 최적 온도에서 \( 3 \)시간 동안 진탕하였다. 반응 종료 후 끓는 물에 \( 5 \)분간 열처리하고 원심분리 \( \left(3,000 \times \mathrm{g}, 10 \mathrm{~min}, 4^{\circ} \mathrm{C}\right) \) 하여 상등액을 분석 시료로 활용하였다.</p><h2>탈지 참깨박 효소처리</h2><p>탈지 참깨박의 효소처리는 단백질 분해효소와 세포벽 분해효소에 대하여 각 효소의 단독 처리(\( 1 \)단 반응)와 순차적 처리(\( 2 \)단반응)의 두 가지 방법으로 실시하였다.</p<h2>[1단 반응]</h2><p>열처리 후 냉각시킨 탈지 참깨박 현탁액의 \( \mathrm{pH} \) 를 \( 0.1 \mathrm{~N} ~\mathrm{HCl} \) 또는 \( \mathrm{NaOH} \) 로 효소 반응의 최적 조건(Protamex \( \mathrm{pH} 6.0 \), Tunicase \( \mathrm{pH} 8.0 \)) 으로 조절하고 효소를 참깨박 중량의 \( 1 \% (\mathrm{w} / \mathrm{w}) \) 첨가한 후 효소 반응 최적 온도(Protamex \( 50^{\circ} \mathrm{C} \), Tunicase \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) )에서 \( 3 \)시간 동안 진탕하였다. 진탕 후 열처리로 반응을 종료시킨 후 원심분리 \( \left(3,000 \times \mathrm{g}, 10 \mathrm{~min}, 4^{\circ} \mathrm{C}\right) \)하여 고형분을 제거하고 상등액을 분석 시료로 활용하였다.</p><h2>[2 단 반응]</h2><p>열처리한 탈지 참깨박 현탁액에 대하여 Protamex를 먼저 처리 후 Tunicase를 사용하는 것과 그 역으로 처리하는 두 가지 조건으로 실시하였다. 열처리 한 참깨박 현탁액의 \( \mathrm{pH} \) 를 \( \mathrm{pH} 6.0 \) 으로 맞추고 Protamex를 참깨박의 \( 1 \% \) 로 첨가한 다음 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \( 3 \)시간 반응시킨 후 Tunicase의 최적 반응 조건 \( \left(\mathrm{pH} 8.0,40^{\circ} \mathrm{C}\right) \) 에서 Tunicase를 \( 1 \% \) 첨가하여 \( 3 \)시간 추가로 반응시켰다. 두 효소의 처리 순서를 반대로 \( 2 \)단 반응도 각 효소의 반응조건에 따라 실시하였다.</p><h2>단백질 및 고형분 함량</h2><p>효소처리 후 원심분리로 얻은 상등액의 단백질 함량은 bovine serum albumin을 표준물질로하여 Lowry법으로 분석하였다. 또한 상등액의 고형분 함량은 refractometer (PR-\( 32 \alpha \), Atago사,Tokyo, Japan)로 측정하였다.</p><h2>통계분석</h2><p>결과는 SPSS Statistics (Statistical Package for Social Science, SPSS Inc., Chicago, IL, USA, version \( 23.0 \))를 이용하여 t-검정으로 시료간 유의성을 조사하였다(유의수준 \( p<0.05) \).</p>
탈지 참깨박 열처리를 위해 어떠한 장비를 사용하였는가?
고압멸균기