<h1>결과</h1><p>C2C12 myotube에서 IGF-I이 SOCS-3 유전자의 단백질 발현에 미치는 영향을 형태적으로 살펴보기 위하여 \( 10,50,100 \) \( \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 의 \( \mathrm{IGF}-\mathrm{I} \) 을 각각 24 시간 동안 처라하여 immuno-fluroscent staining을 통한 형광현미경 관찰을 실시하였다. 그 결과 Fig. 1 에 제시된 바와 같이 IGF-I을 처리하지 않은 \( \mathrm{my} \) -otube 와 비교하였을 때, 24 시간 동안 다양한 농도 별로 \( \mathrm{IGF}-\mathrm{I} \) 을 처리한 Fig. \( 1 \mathrm{~B}(10 \mathrm{ng} / \mathrm{ml}), 1 \mathrm{C}(50 \mathrm{ng} / \mathrm{ml}), 1 \mathrm{D} \) \( (100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml}) \) myotube에서는 IGF-I 농도 의존적으로 SOCS-3 단벽질 발현이 현저하게 증가되었음을 관찰 할 수 있었다.</p><p>IGF-I이 SOCS-3 유전자의 단백질 발현에 미치는 영향을 알아보기 위하여 96 시간 동안 분화시킨 C2C12 myotube에 200 \( \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 의 IGF-I을 각각 \( 24,48,72 \) 시간 동안 처리하여 Western blot 분석을 실시하였다. 그 결과 Fig. \( 2 \mathrm{~A} \) 에 제시된 바와 같이 IGF-I을 24 시간 동안 처리하자 통제군에 비해 SOCS-3 단백질 발현이 약 \( 66 \% \) 유의하게 증가하였으며, Fig. \( 2 \mathrm{~B} \) 에 나타난 바와 같이 48 시간 동안 IGF-I을 처리하자 봉제군과 비교하였을 때 SOCS-3의 단백질 발현이 약 \( 82 \% \) 유의하게 증가하였다. 또한 IGF-I을 72 시간 동안 처리하자 SOCS-3 단백질 발현이 통제군과 비교하였을 때 약 \( 127 \% \) 유의하게 증가하였음을 알 수 있었다.</p><p>IGF-I이 SOCS-3 mRNA 발현에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위해 \( \mathrm{C} 2 \mathrm{C} 12 \) myotube에 \( 10,50,100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 의 IGF-I 을 시간 별로 처리하여 real-time \( \mathrm{PCR} \) 분석을 실시하였다. 그 결과 \( \mathrm{IGF}-\mathrm{I} \) 을 3 시간 동안 처리하자 가장 낮은 농도인\( 10 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서 약 \( 120 \%, 50 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서 \( 162 \% \) 정도로 \( 50 C S-3 \)\( \mathrm{mRNA} \) 발현이 농도 의존적으로 유의하게 증가하였다. 그러나 가장 높은 농도인 \( 100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서는 야 \( 74 \% \) 정도로 발현이 증가하였으나 통계적으로 유의하지는 않았으며, 상대적으로 낮은 농도인 \( 10,50 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서의 결과와 비교하였을 때 SOCS-3 mRNA 발현의 증가 정도가 보다 적었음을 알 수 있었다. 반면에 Fig. 3B에 제시된 바와 같이 \( 50,100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 의 IGF-I을 24 시간 동안 처리하자 C2C12 myotube에서의 SOCS-3 mRNA 발현은 \( 50 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서 29\%, \( 100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서 \( 44 \% \) 유의하게 감소하였다. 더 나아가 IGF-I을 48 시간 동안 처리하자 SOCS-3 mRNA 발현이 각각 \( 10 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서 \( 39 \% \), \( 50 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서 \( 47 \%, 100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 에서 \( 52 \% \) 정도로 현저히 감소하였음을 확인 할 수 있었다. 종합하여 보면 IGF-I 처리에 따른 시간별 SOCS-3 mRNA 발현의 변화 양상은 3시간에서 농도 의존적으로 증가하였고, 24,48 시간 동안 IGF-I 을 처리한 그룹에서는 SOCS-3 mRNA 발현이 감소하였음을 알 수 있었다.</p>
본 논문에서는 무엇에서 IGF-I이 SOCS-3 유전자의 단백질 발현에 영향을 끼치는지 살폈는가?
C2C12 myotube