<h1>결 과</h1><h2>인체혈청과 소태아 혈청에서의 지방기질줄기세포의 증식</h2><p>인체지방기질줄기세포를 6 well 플레이트에 \( 2000 / \mathrm{cm}^{2} \)의 밀도로 세포를 깔아 10\( \% \) 소 태아혈청 또는 인체혈청을 포함하는 DMEM-LG/F-12 배지에서 3일 간격으로 계대배양 하였다. 각 계대배양 시기마다 현미경에서 haematometer를 사용하여 현미경하에서 세포 수를 측정하였다. 소 태아혈청을 10\( \% \) 인체혈청으로 대체한 경우 DMEM-LG/F-12 배지에서 성장 능의 유의한 차이가 확인되지 않았으며 (Figure 1), 또한 이들 세포는 장기 계대배양 하더라도 CFU 생성 능에 유의한 차이가 관찰되지 않았다(Table 1).</p><h2>세포표면항원의 발현</h2><p>인체혈청 및 소 태아혈청에서 장기 배양한 인체지방기질줄기세포에서 표면항원의 발현이 변화하는지를 확인하기 위하여 이식 시 면역거부반응에 중요한 역할을 하는 MHC-class Ⅱ antigen인 HLA-DR, 중간엽줄기세포의 marker인 CD44와 CD29, 조혈모세포(haemopoietic progenitors)의 marker인 CD117(c-kit)의 발현변화를 유 세포 분석을 통하여 확인하였다. 그 결과 인체혈청으로 배양한 지방기질줄기세포에서 표면항원의 발현은 소 태아혈청 존재 하에서 배양한 지방기질줄기세포와 유의한 차이를 나타내지 않았으며 연속적인 계대배양시도 표면형의 발현이 안정적으로 유지됨을 나타내었다(Table 1).</p><h2>인체혈청과 소 태아혈청에서의 지방기질줄기세포의 분화</h2><p>인체혈청 및 소 태아혈청에서 배양한 인체지방기질줄기세포가 분화 능을 유지하는 지를 밝히기 위하여 각 배양조건에서 증식한 지방기질줄기세포를 골세포 및 지방세포로 분화를 유도 하였다. 분화 후 그 정도를 정량분석 한 결과 유의한 분화 능의 차이가 관찰되지 않았다(Figure 2).</p><h2>인체혈청과 소 태아혈청에서의 유전자 분석</h2><p>인체혈청 및 소 태아혈청에서 배양한 인체지방기질줄기세포에서 발현하는 유전자 발현을 확인하기 위해서 Affymetrix사의 인간 유전자 14,500의 probe를 포함하는 chip array를 이용하여 유전자 발현들을 분석하였다. 그 결과 인체혈청 및 소 태아혈청에서 배양한 인체지방기질줄기세포 간의 유전자를 비교하였을 때 2,585개의 유전자 발현 차이를 보이고, 그중 소 태아혈청에서 배양한 세포에 비해 인체 혈청에서 배양한 세포에서 1,604개의 유전자 발현이 증가하고 980개의 유전자 발현이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 표2, 3에서는 2배 이상 발현이 차이 나는 유전자들을 부분적으로 나열하고, signal pathway 별로 발현이 차이 나는 유전자수를 분석하였다(Table 4, 5).</p>
인체혈청 및 소 태아혈청에서 배양한 인체지방기질줄기세포가 분화 능을 유지하는지 알기 위해서 어떻게 했어?
각 배양조건에서 증식한 지방기질줄기세포를 골세포 및 지방세포로 분화를 유도