<h1>요 약</h1><p>B. stearothermophilus NO2 의 CGTase 유전자 cgtS 를 구성적 \( \mathrm{P}_{\mathrm{JH}} \) promoter 하류에 subcloning 하여 재조합 plasmid pJH-CGT1 (8.14 kb)을 구축하고 B. subtilis DB431에 형질전환하였다. B. subtilis DB431 / pJH-CGT1 를 5 가지 배지(LB, 2 \( \times \mathrm{LB}, 5 \% \) molassest \(2\%\) CSL, CS, LBG)로 flask 배양하여 균체증식과 CGTase 발현량 및 분비국재성을 조사하여 최적 배지를 결정하였다. 그 중 [5\% molasses+\(2\%\) CSL] 배지에서 9시간에 \( 1.8 \mathrm{unit} / \mathrm{ml} \) 의 CGTase가 발현·생산되었다. 이 결과를 토대로 B. subtilis DB431/pJH-CGT1를 [10\% molasses + \( 5 \% \) corn steep liquor] 배지에서 발효조 회분 배양한 결과, 30 시간 배양시 CGTase의 최대 발현량은 \( 4.2 \mathrm{unit} / \mathrm{ml}, 90 \% \) 의 분비 효율, \( 90 \% \) 이상의 plasmid 안정성을 나타내었다. 저렴한 산업용 molasses 배지로 발효조 회분배양시 플라스크 배양보다 균체증식과 CGTase 발현량이 2 배 이상의 증가된 값을 얻었다.</p>
B. subtilis DB431 / pJH-CGT1 를 활용해 최적 배지를 결정하는 방법은 어떻게 되니?
5 가지 배지(LB, 2 \( \times \mathrm{LB}, 5 \% \) molassest \(2\%\) CSL, CS, LBG)로 flask 배양하여 균체증식과 CGTase 발현량 및 분비국재성을 조사하여 최적 배지를 결정