<h2>DDPE의 농도변화에 따른 tolaasin의 용혈활성</h2><p>DDPE \( 200 \mu \mathrm{M} \)을 tolaasin과 동시에 처리할 경우 tolaasin의 용혈활성을 촉진하였고(Fig. 1), DDPE를 적혈구에 사전 처리하였을 경우에도 tolaasin의 용혈활성은 크게 증가하였다. 그러나 DDPE를 tolaasin과 사전배양을 한 경우에는 tolaasin의 용혈활성이 크게 저해되었다. 이러한 결과는 적혈구 세포막에 결합한 DDPE는 tolaasin의 pore 형성을 촉진하나, 사전배양을 통하여 DDPE와 tolaasin이 결합하면 적혈구 세포막에 미치는 tolaasin의 용혈활성이 감소함을 의미한다. 이를 확인하기 위하여 DDPE 의 농도 변화가 tolaasin의 용혈활성에 미치는 영항을 측정하였다.</p><p>다양한 농도의 DDPE를 tolaasin과 사전 배양 없이 적혈구 용액에 동시 첨가하였을 경우, \( 0.2-1 \mu \mathrm{M} \) 범위에서 용혈활성이 증가하였으나, \( 5 \mu \mathrm{M} \)과 \( 10 \mu \mathrm{M} \) 농도에서는 용혈활성이 감소하였고, 이보다 높은 DDPE 농도에서는 모두 용혈이 크게 증가하였다. 한편, DDPE와 tolaasin을 \( 10 \)분간 사전 배양하여 적혈구에 처리하였을 경우, 용혈활성이 저해되는 DDPE 농도가 약 \( 20 \) 배정도 높아진 \( 100 \mu \mathrm{M} \)과 \( 200 \mu \mathrm{M} \)에서 나타났으나, 이것은 용혈활성 측정이 최종농도가 \( 10 \)배 희석되므로 \( 10-20 \mu \mathrm{M} \)에 해당하여 동시 처리 조건과 크게 다르지 않다(Fig. 6). 이러한 결과로 볼 때, 특정 농도의 DDPE는 오히려 tolaasin에 의한 용혈을 감소시킴을 알 수 있다.</p><p>이상의 결과는 decanoic acid를 함유하는 인지질이 tolaasin의 용혈활성에 미치는 다양한 특성을 조사한 것으로 DDPE에 의해 일어난 빠른 용혈현상은 인지질의 계면활성제 폭성에 의해서 나타날 수도 있겠으나, 실제 DDPE의 계면환성제로서 작용은 크지 않았다. Tolaasin을 제외 하고 DDPE 만을 처리한 경우 적혈구의 용혈은 관측되지 않았으므로(자료 미제시), DDPE의 효과는 인지질 자체가 적혈구에 영항을 미치는 것이 아니라 tolaasin의 이온채널 형성이나 활성을 촉진하는 것으로 판단된다. 물론 tolaasin과 같은 펩티드 독소들도 계면활성제 특성을 가지나, 이것은 높은 농도에서 나타나는 특성으로 본 결과에는 해당하지 않는다.</p><p>이상의 결과들은 tolaasin이 적혈구 세포막에서 형성하는 pore의 길이가 세포막을 관통할 만큼 충분히 길지 않으며, 짧은 길이의 지방산으로 구성된 인지질을 첨가할 때, 인지질 분자들은 tolaasin 분자들에 의해 생성된 pore의 주위에서 막의 두께를 감소시켜 pore 자체를 안정화할 수 있음을 보여준다. 리포솜에서 합성된 이온채널의 길이에 따라 탄소수가 다른 지방산으로 이루어진 인지질이 이온채널의 활성을 최적화함은 제시된 바 있어, tolaasin에 의해 생성된 pore도 주변에 몇 분자의 DDPE 결합에 의해 최적화 될 수 있음을 알 수 있다.</p><p>한편, \(5-10 \mu \mathrm{M} \)의 DDPE는 오히려 용혈을 저해하였으며, 이것은 DDPE와 tolaasin의 사전배양 시에도 유사하게 관측되었다. DDPE가 저해효과를 보이는 것은 이 농도에서 DDPE가 micelle을 형성하고 여기에 tolaasin이 결합하여 안정화된다면, 적혈구막에 결합하는 tolaasin의 유효 농도가 감소하고 이것은 pore 형성을 저해하여 결국 적혈구의 용혈이 감소할 것으로 예측된다. 특히, 짧은 지방산을 구성분으로 하는 인지질은 micelle 형성농도인 cmc는 상대적으로 높은 농도이며, 인지질의 지방산 부위와 전하를 갖는 부위의 특성에 따라 다름이 밝혀져 있어, 본 연구에서 사용한 특정농도의 DDPE가 반응용액 내에서 micelle을 형성하여 tolaasin 분자와 결합함으로써 유효농도를 감소시켜 활성이 감소하는 것으로 예측된다.</p>
tolassin 과 같은 펩티드 독소들은 계면활성제 특성을 가지니?
YES