<h1>고 찰</h1><p>중간엽줄기세포는 1976년 Fridenstein등에 의하여 골수에서 처음 발견되었으며, 골수에서 존재하는 조혈모세포와 다른 표면항원의 발현을 나타내고 비교적 용이하게 실험실 조건에서 증식이 가능하다. 이들 세포는 자가복제 능 뿐만 아니라 중배엽성조직인 골, 연골, 지방, 근육 및 내피세포로 분화가 가능하고 신경세포와 같은 외배엽성세포로도 분화가 가능한 것으로 알려져 있어 재생의학에서 이용되는 줄기세포의 중요한 공급원으로 간주되고 있다. 최근 이러한 중간엽 줄기세포는 골수 뿐만 아니라 지방, 제대혈 등에 존재하는 것으로 보고되었다. 인체지방조직은 쉽게 접근이 가능하고 대량으로 존재하며 골수에 비하여 중간엽줄기세포의 밀도가 상대적으로 높아 대량의 세포가 필요한 세포치료제의 임상적용의 측면에서 보다 짧은 시간에 세포를 확보할 수 있는 이상적인 중간엽줄기세포의 공급원의 하나이다. 지방 유래 중간엽줄기세포는 급성 중추신경손상, 하지허혈 및 심근경색, 조혈모세포의 골수 안착, 골 및 연골재생, 창상치유 및 성형외과적 재건등에 효과를 나타내는 것으로 보고되었다. 일반적으로 중간엽줄기세포를 이용하여 실험동물의 생체효능시험 시 소 태아혈청에서 배양한 세포를 사용한다. 그러나, 소 태아혈청으로 인간중간엽줄기세포를 배양 시에 소 태아혈청 단백질이 세포 내로 흡수 되어 간단한 세척에 의해서는 제거되지 않는다고 보고되어 있다. 이처럼 상당량의 소 태아혈청이 세포 내 잔류하여 강력한 이종항원으로 작용하여 과민반응을 유도할 수 있고 바이러스 및 박테리아 감염, Creutzfeldt-Jakob질병을 일으키는 프리온 등 소의 질환의 인체감염 가능성, 혈청의 단백질 오염으로 인한 면역 및 염증반응을 일으킬 수 있기 때문에 임상적용을 위해서는 이를 극복 하는 방법을 개발하는 것이 필수적이다. 본 연구에서는 소 태아혈청을 대신하여 인체 혈청으로 인체 지방줄기세포를 장기적으로 배양하여 이들의 증식 능, 분화 능, 표면항원, 핵형, 유전자 발현을 비교 분석하였다. 인체혈청 및 소 태아혈청으로 배양한 인체 지방줄기세포는 증식 능, 지방 및 골 분화 능에서 유의한 차이를 보이지 않았고, 이식 시 면역거부반응에 중요한 역할을 하는 MHC-class Ⅱ antigen인 HLA-DR, 중간엽줄기세포의 marker인 CD44와 CD29, 조혈모세포(haemopoietic progenitors) 의 marker인 CD117 (c-kit) 표면 항원으로 발현 변화를 유 세포 분석을 통하여 확인한 결과 유의한 차이를 나타내지 않았으며 연속 계대배양 시도 그 발현의 유의한 차이가 나타나지 않았다. 또한, 줄기세포의 증식 능을 반영하는 CFU의 생성 능력도 소 태아혈청에서 배양한 세포와 인체혈청에서 배양한 세포사이에 유의한 차이가 나타나지 않았다. 이러한 결과는 소 태아혈청의 사용 없이도 인체혈청을 이용하여 세포치료제로 이용 가능한 중간엽줄기세포를 지방조직에서 배양하는 것이 가능함을 나타낸다.</p><p>그러나 microarray를 이용한 유전자 분석에서 인체혈청 및 소 태아혈청으로 배양한 인체 지방줄기세포 간의 유전자발현을 비교 분석한 결과 인체혈청 하에서 배양된 인체 지방줄기세포의 유전자 발현형태와 소 태아혈청 하에서 배양된 세포의 유전자 발현형태 간에는 상당한 차이를 보였다. 그중 소 태아혈청에서 배양한 세포에 비해 인체혈청에서 배양한 세포에서 cell proliferation, cell signaling pathway, cell growth, cell surface receptor, cell cycle, cell adhesion, cell development cell communication, protein modification, apoptosis, Protein phosphorylation, cell motility and immune response등에 관련한 유전자 1,604개의 유전자 발현이 증가하고 980개의 유전자 발현이 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 인체혈청 및 소 태아혈청으로 배양한 인간지방줄기세포간의 상당한 유전자 발현차이는 본 실험에서 측정한 증식 능, 분화 능, 표면항원발현에서는 유의한 차이는 보이지 않았지만, 소 태아혈청을 이용하여 배양한 세포의 생체효능이 인체혈청을 이용하여 배양한 세포와 다르게 나타날 가능성을 배제할 수 없다. 세포치료제의 개발에 있어 실험동물을 이용한 전임상 효능시험의 성적이 임상시험 전 단계의 치료제의 효능으로 인정됨에 비추어 전 임상시험단계부터 인체 혈청으로 배양한 세포를 이용하여 실험을 수행 함으로서 보다 신뢰성 있는 효능시험자료를 얻는 것이 필요함을 제시한다.</p>
골은 중배엽성조직의 하나인가?
YES