<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 재료 및 시료 조제</h2><p>본 실험에서 사용된 곡류(옥수수, 괴구마, 현미, 찹쌀, 엿질금, 건호박)는 눙산물유통공사에서 구입한 것이며, 생약제(백출, 황정, 감초, 윽계, 의이인)는 대기 약령시장에서 구입하여 사용하였다. 곡류 및 생약제를 깨끗한 물로 2번 씻어 낸 다음 \( 60 \sim 65^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 12시간동안 열풍건조 후 분쇄하여 생식 시로로 사용하였으며, 이것을 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30 분동안 볶아서 화식 시료로 사용하였다. 생식 및 화식의 성분은 옥수수 \( 50 \% \), 고구마\( 10 \% \), 현미 \( 10 \% \), 찹쌀\( 10 \% \), 엿질금 \( 5 \% \), 건호박 \( 5 \% \) 이며, 백출, 황정, 감초, 육계, 의이인이 각각 \( 2 \% \) 씩 포함되었다.</p><h2>실험동물 및 식이</h2><p>체중이 \( 100 \sim 120 g \)인 Sprague-Dawely계 흰쥐 수컷을 구입(대한 실험동물 센터)하여 온도 \( 22 \pm 0.5^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 \( 55 \pm 5 \% \), 12시간의 명암 주기를 유지하는 사육실에서 stainlesss steel cage에 1마리씩 분리하여 일주일간 적응시켰다. 본 실험에 들어가기 전에 생식과 화식을 각각 흰쥐 \( (\mathrm{n}=5) \) 에 일주일간 자유급식하여 섭취량을 조사한 결과 화식군의 섭취량이 생식군보다 높게 나타난 것을 근거로 하여 생식군의 평균 섭취량만큼 화식을 급여한 화식제한군(CP group)을 포함하여 실험군을 체중에 따라 4군으로 나누었다. 실험 기간 동안 물과 식이는 자유롭게 섭취케 하였고, 고지혈 유발 식이는 cholesterol \( 0.5 \% \), sodium cholate \( 0.25 \% \) 와 lard \( 9 \% \) 가 포함된 일반사료를 사용하였다.</p><p>처음 2 주 동안은 고지혈증을 유발하기 위해 고지혈증 유발 식이를 먹인후 체중에 따라 4 군으로 나누었으며, 나머지 3주는 생식 또는 화식이 \( 30 \% \) 혼합된 식이를 공급하였다. 실험동물의 체중은 오전의 일정한 시간에 매일 측정 하였으며 식이 섭춰량은 각 실험군별로 체중 측정 직전에 잔량을 수거하여 측정하였다.</p><h2>소화시간 측정</h2><p>소화시간 측정은 실험동물올 16 시간 동안 절식시킨 후 각각의 식이에 camine을 \( 0.3 \% \) 섞어 30 분 동안 공급한 후 변에 camine이 나타나는 시간을 측정하였다.</p><h2>채혈, 혈장 및 장기분리</h2><p>사욕이 끝난 실험동물은 희생시키기 12 시간 전부터 절식시키고 물만 공급하였으펴, ether로 마춰하여 복부대동맥으로부터 주사기로 채혈한 혈액은 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 원심분리 \( (3000 \) \( \mathrm{rpm} / 15 \) 분)하여 혈장으로 사용하였다. 간장, 신장 밎 비장의 무게는 복부 절단한 실험동물로부터 각 장기롤 적출해서 지방 및 기타 결합조직을 제거한 후 생리식염수 \( (0.9 \% \mathrm{NaCl}) \) 로 세척하고 여지로 수분을 제거한 후 무게를 측정하였다.</p><h2>혈장 지질분석</h2><p>혈장 중의 total cholesterol, high-density lipoprotein(HDL) cholesterol, triglyceride 함량은 측정 kit (아산제약)를 이용한 호소법으로 측정하였으며, low-density lipoprotein (LDL) cholesterol 함량은 total cholesterol-HDL cho-lesterol-(triglyceride/5)의 공식을 이용하여 계산하였다. 심혈관계 질환의 위험도 판정에 사용되는 요인인 동맥경화 지수(atherogenic index)와 total cholesterol 중의 HDL cholesterol 농도비는 각각 (total cholesterol-HDL cholesterol)/HDL cholesterol과 HDL cholesterol/total cholesterol의 공식을 이용하여 게산하였다.</p><h2>간장 지질분석</h2><p>간장 중 지질은 Folch법로 추출하였다. 냉동 보관된 간조직에 \( 0.9 \% \mathrm{NaCl} \) 용매를 가하여 homogenizer로 균질화한 후 일정액을 취한 다음 \( \mathrm{CHCl}_{3}-\mathrm{MeOH}(2: 1, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 용매를 가하여 거른 후 \( \mathrm{CaCl}_{2} \) 를 첩가하여 혼합한 다음 2,000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 상층액은 제거하고 하층액을 일정량 취한 후 \( \mathrm{N}_{2} \) gas로 건주시켰다. 건조된 시료를 \( \mathrm{CHCl}_{3} \) 로 용해시키고 triton \( X-100[15] \) 으로 처리한 후 혈장의 경우와 동일한 방법으로 total cholesterol과 triglyceride 함량을 측정하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>본 실험 결과들온 SPSS (statistical package of social science) program을 이용하여 분석, 비교하였다. 각 결과들은 one-way ANOVA분석을 통해 실험군별로 평균(mean)\( \pm \) 표준오차(SE)로 나타내었으며, 각 실혐군간의 평균치의 통계적 유의성은 \( p<0.05 \) 수준에서 Duncan's multiple range test와 Student's \( t \)-test로 검정하였다.</p>
본 실험에서 사용하기 위해 대기 약령시장에서 구입한 생약제에는 어떤 것이 있지?
백출, 황정, 감초, 윽계, 의이인