<h2>활막 내막층의 세포 정량을 위한 포토샵 분석</h2><p>H\(\&\)E 염색을 통하여 활막 내막층의 세포와 내막층 수의 차이가 보여졌기 때문에 세포 및 층의 계수를 분석하였다. 세포를 효과적으로 계수하기 위한 방법으로 광학 현미경 관찰을 통해 얻어진 활막조직 이미지를 포토샵 반전 기능을 이용하여 흑백의 이미지로 전환 하였다. H\(\&\)E 염색이미지와 비교한 결과 반전된 이미지의 내막층을 따라 배열되는 일정한 크기 이상의 검은 점 하나하나는 세포를 의미한다는 사실을 알 수 있었다. 따라서 400배 관찰로 얻어진 H\(\&\)E 염색 이미지의 세포 수를 계수 할 수 있었고, 연구자의 편견을 없애기 위하여 같은 조직의 다양한 부위에서 얻어진 이미지를 대상으로 복수의 계수자들의 블라인드 테스트로 정량된 결과를 도출하였다. 그 결과, 류마티스 관절염 활막조직의 내막충에 존재하는 대식세포는 평균 96개인 반면, 골관절염 활막조직의 내막층에는 53개의 대식세포가 존재하는 것을 알 수 있었으며, 류마티스 관절염 활막조직에서 약 1.5배 높게 나타났다. 또한 내막층의 수에 대한 계수도 시도하였다. 골관절염 활막 조직의 층은 평균 2.3층으로 이루어져 있었으나, 류마티스 관절염 활막조직은 4.4층으로 두배정도 더 두꺼운 층이 형성되어지고 있음을 알 수 있었다. 그러므로 염증성 질환인 류마티스 관절염은 발병과정에서 대식 세포의 활성화 또는 수적증가에 따른 내막층의 비대가 발생할 수 있다고 추측할 수 있다.</p><h2>내막하층 세포 및 혈관수 분석</h2><p>활막조직의 내막층은 골관절염, 류마티스관절염 모두에서 대식세포들로 이루어진 층의 형태로 나타났지만, 내막하층의 경우에는 많은 기질들로 인해 다양한 형태적인 특징과 세포분포에서 차이가 발생했기 때문에 포토샵 분석으로 내막하층의 세포수 등을 측정하였다. 잍정한 단위면적을 정한후 5군데의 무작위 지역을 계수 함으로써 내막하층의 세포수를 결정하였다. 골관절염 활막조직의 내막하층에서는 단위면적당 평균 9개의 세포가 관찰되었지만, 류마티스 관절염 활막조직의 내막하층은 평균 19개의 세포가 관찰되었다. 이러한 현상은 류마티스 관절염 발병과정에서 염증반응과 관련된 FLS세포들의 침윤현상이 일어나기 때문에 세포의 수가 현저하게 증가한 것으로 보여진다. 한편 활막조직의 내막하층에는 많은 혈관들이 분포하고 있다. 류마티스 관절염은 내막하층의 비대화가 잍어난다고 알려졌는데, 이러한 현상으로 인하여 류마티스 활막조직의 내막하층에 존재하는 혈관의 수는 골관절염과 비교하였을 때 약 2배 가량 줄어든 것을 확인하였다. 또한 류마티스 관절염의 경우 활막의 비후가 심하기 때문에 혈관의 위치가 내막층으로부터 상대적으로 멀리 위치하고 있음을 알 수 있었다. 그러므로 류마티스 관절염 발병과정에서 FLS세포들과 같은 다양한 세포들이 내막하층에서 활성화되기 때문에 골관절염 활막조직에 비하여 류마티스 관절염 활막조직이 더욱더 비대해지는 현상이 발생, 내막하층내의 혈관조직은 퇴화되는 과정이 발생하는 것으로 추정할 수 있다.</p>
효과적인 세포의 계수를 위한 흑백 세포 이미지는 어떻게 얻을 수 있어?
광학 현미경 관찰을 통해 얻어진 활막조직 이미지를 포토샵 반전 기능을 이용하여 흑백의 이미지로 전환