<h2>Thiocyanate법에 의한 항산화 활성 측정</h2><p>한약재 조성물의 항산화 활성은 Osawa와 Kim 등의 방법에 따라 thiocyanate법으로 측정하였다. 시료 \( 1 \mathrm{~mL} \)에 linoleic acid emulsion 및 \( 0.2 \mathrm{M} \) phosphate buffer \( (\mathrm{pH} 7.0) \) 각 \( 2 \mathrm{~mL} \)를 혼합하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 저장하면서 3일 및 5일째에 각 \( 0.1 \mathrm{~mL} \)를 취하여 \( 75 \% \) 에탄올 \( 4.7 \mathrm{~mL}\), \(30 \% \) ammonium thiocyanate \( 0.1 \mathrm{~mL} \)를 첨가한 후 1분간 실온에 정치시킨 후 \( 500 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 시료 대신에 linoleic acid emulsion을 첨가하였으며, 항산화 활성은 시료 첨가 전 · 후의 흡광도 비로 나타내었다.</p><h2>아질산염 소거작용 측정</h2><p>아질산염 소거작용 측정은 Kato 등과 Kim 등의 방법에 따라 \( 1 \mathrm{mM} \) \( \mathrm{NaNO} \) 용액 \( 1 \mathrm{~mL} \)에 각 시료 \( 1 \mathrm{~mL} \)를 가하고 \( 0.1 \mathrm{~N} \) \(\mathrm{HCl} \)과 \( 0.2 \mathrm{M} \) 구연산 완충액으로 \( \mathrm{pH} 2.5 \)로 보정한 후 완충액으로 총 부피를 \( 10 \mathrm{~mL} \)로 하였다. 이를 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 1시간 반응시킨 후 각 반응액 \( 1 \mathrm{~mL} \)를 취하여 \( 2 \% \) 초산용액 3\( \mathrm{mL} \)와 \( 30 \% \) 초산용액으로 용해한 Griess reagent(\(1\%\) sulfanilic acid \(:\) \( 1 \% \) naphthylamine \( =1: 1)\) \(0.4 \mathrm{~mL} \)를 차례로 가한 후 진탕 혼합하여 실온에서 15분간 정치한 후 \( 520 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 Griess reagent 대신 증류수를 가하였으며, 아질산염 소거능은 \( 100- \) [(시료 첨가구의 흡광도/무첨가구의 흡광도)\(\times 100\)] 으로 나타내었다.</p><h2>통계처리</h2><p>각 실험은 5회 이상 반복실험을 통하여 결과를 얻어 SPSS 12.0을 사용하여 통계처리 하였으며, 각각의 시료에 대해 평균 \( \pm \) 표준편차로 나타내었다. 각 시료군에 대한 유의차 검정은 분산분석을 한 후 \( \mathrm{p}<0.05 \) 수준에서 Duncan's multiple test에 따라 분석하였다.</p>
본 실험에서 한약재 조성물의 항산화 활성을 측정하기 위해 이용된 방법인 thiocyanate법은 어떻게 진행되는가?
시료 \( 1 \mathrm{~mL} \)에 linoleic acid emulsion 및 \( 0.2 \mathrm{M} \) phosphate buffer \( (\mathrm{pH} 7.0) \) 각 \( 2 \mathrm{~mL} \)를 혼합하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 저장하면서 3일 및 5일째에 각 \( 0.1 \mathrm{~mL} \)를 취하여 \( 75 \% \) 에탄올 \( 4.7 \mathrm{~mL}\), \(30 \% \) ammonium thiocyanate \( 0.1 \mathrm{~mL} \)를 첨가한 후 1분간 실온에 정치시킨 후 \( 500 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정