<h1>서 론</h1><p>고려인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 두릅나무과에(Araliaceae) 속하는 다년생 초본이며, 한방에서는 강장제, 피로회복제, 육체 활력을 유지하는데 도움을 주는 약용작물로서 한국과 중국에서 오랫동안 사용되어 왔다. 보고된 활성으로는 면역, 항 암, 항고혈압, 항산화, 항당뇨 등에 대한 효능이 보고되어 있다. 고려인삼의 ginsenosides는 그 화학구조에 따라 크게 protopanaxadiol (PPD), protopanaxtriol 계열 등으로 분류하며, 지금까지 수십 여종이 분리 보고되어 있다. 그 중 malonyl ginsenoside는 aglycone에 malonyl acid 한 분자가 ester결합 된 구조로 산성 사포닌의 일종이다. 다른 ginsenoside 보다 수용성이 강하며, malonyl 기가 불안정하여 열이나 알카리에 의해 쉽게 떨어진다고 보고되어 있다.</p><p>인삼 뿌리로부터 malonyl ginsenoside-Rb1, -Rb2, -Rc, -Rd 가 최초로 분리 및 보고된 이후, 뿌리뿐만 아니라 인삼 꽃봉오 리에서 신규 malonyl ginsenoside가 분리 보고되었다. Malonyl ginsenoside는 주로 수삼과 백삼에 많이 존재한다고 알려졌으나 추출 용매 및 방법에 따라 그 함량 변화가 일어나기 때문에 총 ginsenoside 함량을 분석하거나, 인삼의 품질 검사를 위한 항목에서 제외되었다. 최근 연구에서는 수삼의 malonyl ginsenoside -Rb1, -Rb2, -Rc, -Rd의 함량이 ginsenoside-Rb1, -Rb2, -Rc, -Rd의 함량의 2 배 이상이며, 총 ginsenoside 함량의 \( 45 \% \) 를 함유하고[10], 백삼에서는 앞서 언급된 4 종을 포함한 총 10 종의 malonyl ginsenoside 함량이 총 ginsenoside 함량의 \( 36 \% \) 를 함유하고 있다고 보고되어 있다. 또한, Kitagawa 등은 백삼보다 홍삼에서 ginsenoside Rb1, Rb2, Rc 및 Rd의 함량이 증가된다고 최초 보고하였으며, 이러한 결과는 malonyl 기가 수삼(백삼)을 증숙하는 과정에서 가열처리에 의해 탈 malonyl화 되어 각각 ginsenoside Rb1, Rb2, Rc및 Rd로 전환되었기 때문이다. 이처럼 백삼과 수삼에서 높은 비율을 차지 하는데도 불구하고, 아직까지 함량에 대한 기준이 제시되지 않고 있다.</p><p>본 연구에서는 고려 인삼(백삼)으로부터 저온 추출 등을 이용하여 malonyl ginsenoside를 안정하게 분리하였으며 순도 높은 표준품을 확보하고, 최신 NMR data (\( 600 \mathrm{MHz} \)) 값 및 질량값을 이용하여 구조 동정을 하였다. 또한 홍삼으로 많이 사용되고 있는 5 년근 및 6 년근의 인삼(동체)에 함유 되어있는 4종의 malonyl ginsenoside 함랑을 분석하였으며 HepG2로 유발된 간암세포로부터 malonyl ginsenoside의 간 기능 개선의 활성여부를 확인하고자 연구를 진행하였다.</p><h1>재료 및 방법</h1><h2>실험재료</h2><p>정량분석에 사용된 5년 및 6년근의 수삼은 풍기인삼시험장의 시험포장에서 재배된 것을 제공받아 분석했다. 표본시료 NIHHS 201711는 국립원예득작과학원 인삼득작부에 보관되어있다.</p><h2>시약 및 기기</h2><p>Column chromatography (c. c.) 용 silica gel (\( \mathrm{SiO}_{2} \)) resin은 Kieselgel 60 (Merck, Darmstadt, Germany)을 octadecyl \( \mathrm{SiO}_{2} \) (ODS) 은 Lichroprep RP-18 (\(40-60 \mu \mathrm{M} \), Merck)을 사용하였다. Thinlayer chromatography (TLC) 는 Kiesel gel 60 F254와 RP-18 F254s (Merck)을 사용하였다. 물질 정제에 사용된 기기는 YMC LC-Forte/R (YMC Co., LTD. Kyoto, Japan)를 사용하였다. Nuclear magnetic resonance (NMR) 스펙트럼은 \( 600 \mathrm{MHz} \) FT-NMR spectrometer (Varian Inova AS-600, Palo Alto, CA, USA)를 사용하였고, infrared (IR) spectrum은 Perkin model 599B (Perkin-Elmer, Waltham, MA, USA)로 측정하였다. 고분해능 질량값의 측정은 UPLC (Waters ACQUTTY I-Class, Waters Corp. Milford, MA, USA)가 부착된 Q-TOF MS (WatersXevo G2-S QTOF MS, Waters Corp.)를 사용하였으며, 정량분석에는 3200 QTRAP mass spectrometer (AB SCIEX, Framingham, MA, USA)를 사용하였다. 분석을 위한 증류수, methanol (\( \mathrm{MeOH} \)) 및 acetonitrile (\( \mathrm{MeCN} \)) 은 HPLC급(Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)을 사용하였으며, 분석 용매에 첨가한 formic acid는 \( 99.0 \% \) 의 Optima \( { }^{\mathrm{TM}} \) LC/MS (Fisher Scientific) 급을 사용하였다. 그 외의 시약 및 용매는 모두 일급 이상의 시악을 구입하여 사용하였다. 세포 생존율 시험에서 사용한 DMEM 배지는 Lonza (Basel, Switzerland)에서 구입하였고, fetal Bovine Serum (FBS)은 Hyclone (Logan, UT, USA )에서 구입하였다. MTT (3-[4,5-dimetylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide)와 DMSO 는 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA )에서 구입하여 사용하였다.</p>
두릅나무과에 속하는 고려인삼은 한 종으로 이루어져있어?
NO