<p>늑연골이식 9일째의 연골세포들은 활성화된 염색질의 핵을 가진 2-4개의 세포들이 모여 있으며 세포질내에는 종창된 분절성 과립형질내세망과 불규칙한 형태의 소포들이 산재하고 있었다. 세포막의 주위에는 잘 발달된 아교섬유들이 많이 존재하고 있었다. 이식 9일째의 연골세포 중에는 완전히 활성화된 염색질을 가지며 특징적으로 매우 과도하게 확장된 과립형질내세망을 풍부하게 가지고 있는 세포도 관찰 할 수 있었으며 이 세포의 주위에도 아교섬유들이 잘 발달되어 있었다.</p><p>늑연골막 위에 접종한 1일째 연골세포는 군데군데 뭉쳐진 염색질을 가지고 있었으며 세포표면의 돌기는 전혀 없으나 종창된 과립형질내세망이 세포질내 매우 풍부하게 나타났다. 접종 2일째가 되었을 때 이러한 연골세포들은 뚜렷한 핵소체를 가졌으며 완전히 활성화된 염색질을 가진 연골세포가 이웃하는 연골세포쪽으로 소수의 융모상 돌기를 내면서 서로 마주하고 있었다.</p><p>반월판 이식후 3일째 연골세포들은 미성숙한 세포로 활성화된 큰 핵을 가졌으나 세포질내 소수의 종창된 과립형질내세망과 분비과립과 공포들을 볼 수 있었으며 세포표면에는 매우 작은 가시정도의 돌기가 몇 개 관찰되었고 세포 주위에는 잘 발달된 아교섬유들에 의해 둘러싸여 있었다. 이식 16 일째의 연골세포는 어느 정도 성숙한 세포로 크기가 커졌으며 완전히 활성화된 염색질의 핵과 분절성 과립형질내세망 및 소수의 크고 작은 공포와 작은 과립들이 들어 있었다. 세포표면 돌기는 관찰되지 않았으며 체포의 주위에는 매우 잘 발달된 아교섬유를 관찰할 수 있었다.</p><h1>고 찰</h1><p>연골세포 배양의 최적조건은 실험동물의 종에 맞는 혈청을 사용하는 것이 가장 좋다고 알려져 있으며, fetal bovine serum은 연골세포가 collagenase를 분비하는 것을 억제하는 역할을 한다고 하였다. 본 연구에서는 fetal bovine serum에다 ascorbic acid를 첨가한 배지로 배양하였다. 연골세포는 배양 24일째에 수가 증가하고 세포질의 두께가 두끼워지면서 세포들이 부분적으로 모이면서 절(nodules)을 형성하기 시작하였고, 배양 33일째까지 표현형이 유지되면서 잘 배양되었다. 이는 13일 동안 고밀도로 연골세포를 배양하였을 때 ascorbic acid를 첨가한 배지에서는 mRNA가 급격하게 감소되지 않았으며 5-13일째까지 type II collagen의 mRNA가 풍부하게 증가하였다는 보고와 같이 연골세포 배양에서는 ascorbic acid를 첨가하는 것이 더 좋은 결과를 가져 올 수 있다는 것을 의미한다.</p><p>연골세포의 분리는 토끼의 성장판에서는 \( 0.25 \% \) trypsin 용액으로 45 분간, \( 200 \mathrm{U} / \mathrm{m} \ell \) collagenase로 3시간 정도 처리하여 쉽게 분리할 수 있었다. 또한, 사람의 관절연골은 \( 0.25 \% \) trypsin 용액으로 2시간, \( 200 \mathrm{U} / \mathrm{m} \ell \) collagenase로 6시간 정도 처리하면 분리할 수 있었으나 같은 방법으로 토끼의 성장판을 처리하면 대부분의 연골세포들이 파괴되어 자라지 않았다. 그러므로 연골세포를 분리할 때는 연골의 종류와 부위에 따라 다르게 처리하여야 될 것으로 생각되었다.</p>
실험동물의 종에 맞는 혈청을 사용해야 연골세포의 배양이 잘되니?
YES