<h2>혈청 중의 GOT, GPT 효소 level 측정</h2><p>혈청 중의 GOT, GPT 의 level은 Fuji dri-chem clinical chemistry analyzer (Fuji dri-chem 3500, Fujifilm, Japan)로 측정하였다.</p><h2>간 조직의 단백질 정량</h2><p>단백질의 정량은 Lowry 등의 방법에 의해서 \( 750 \mathrm{nM} \)에서 흡광도롤 측정하고 표준 단백 시료를 bovine serum albumin (BSA)으로 정량하였다.</p><h2>간 조직 내 mitochondria 분획의 superoxide dismutase (SOD) 효소활성 측정</h2><p>Beauchamp와 Fridovich의 방법에 따라 \( 0.2 \mathrm{M}\) K-phos-phate buffer \( (\mathrm{pH} 7.4) \) 를 \( 672 \mu \mathrm{l}\), \(1 \mathrm{mM} \) xanthine \( 100 \mu \mathrm{l}\), \(1 \% \) sodium deoxychlorate \( 30 \mu \mathrm{l}\), \(1.5 \mathrm{mM} \mathrm{~KCN}\) \(30 \mu \mathrm{l}\), \(0.2 \mathrm{mM} \) cytochrome C \( 150\mu \mathrm{l} \)를 넣은 혼합액에 sample \(8 \mu \mathrm{l} \)를 넣고, xanthine oxidase 원액 \( 10 \mu 1 \) 를 넣은 후 Elisa를 이용하여 550 \( \mathrm{nM} \) 에서의 흡광도 변화를 \( 2 \mathrm{~min} \) 동안 측정하였다. 효소의 활성도는 표준액으로 Sigma사의 superoxide dismutase standard를 사용하여 축정하였다.</p><h2>간 조직 중 catalase (CAT)의 활성 측정</h2><p>Aebi의 방법을 이용하여 phosphate buffer \( (0.05 \mathrm{M}\) \(\mathrm{pH} 7.0\) ) \( 1.9 \mathrm{ml} \) 에 sample (homogenate와 mitochondrial fraction 을 \( 800 \times \mathrm{g} \) 에서 \( 20 \mathrm{~min} \) 원심분리한 상등액 \( 100 \mu 1 \) 를 buffer로 10,20,40,80 배 희석) \( 0.1 \mathrm{ml} \) 와 과산화수소 용액 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 혼합하여 \( 240 \mathrm{nM} \) 에서 \( 90 \mathrm{sec} \) 동안 흡광도 감소를 측정 하였다.</p><h2>간 조직 중 glutathione peroxidase (GPx)의 활성 측정</h2><p>Lawrence등의 방법에 준하여 \( 0.1 \mathrm{M} \) phosphate buffer (\(4 \mathrm{mM}\) EDTA) \( 400 \mu \mathrm{l}\), \(0.01 \mathrm{M} \mathrm{NaN}_{3}\) \(70 \mu \mathrm{l}\), \(0.01 \mathrm{M} \mathrm{GSH}\) \(70 \mu \mathrm{l}\), \(1.5 \mathrm{mM} \) NADPH \( 70 \mu \mathrm{l}\), \(\mathrm{H}_{2} \mathrm{O}\) \(360 \mu \mathrm{l} \), GSSG-reductase (\( 1.8 \mathrm{U} / \mathrm{ml})\) \(20 \mu \mathrm{l}\), sample \( 10 \mu\mathrm{l} \) 를 혼합하여 상온에서 1 분간 방치 한 후 \( 5 \mathrm{mM} \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2}\) \(100 \mu \mathrm{l} \) 를 가해 잘 섞은 후 \( 340 \mathrm{nM} \) 에서 90 \( \mathrm{sec} \) 동안 흡광도 감소 측정을 하였다.</p><h2>통계치리</h2><p>본 실험에 대한 모든 실험 결과는 평균치와 표준편차로 나타내었고, 통계적 유의성은 SPSS를 이용한 ANOVA로 검정하였다.</p>
단백질의 흡광도를 측정한 방법은 무엇인가?
Lowry