<h1>재료 및 방법</h1><h2>재료</h2><p>대두(Glycine var Merrill)를 수세하고 선별 한 후 \( 105^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 20분간 증자 한 후 Bacillus sp.BH-99를 접종한 다음 \( 38^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 3일간 배양한 후 동결 건조한 후 분말로 만들어 저온에 보관하였다. 이때 사용한 배지조성은 \( 0.5 \% \) glu-cose, \( 0.5 \% \) polypeptone, \( 0.5 \% \) yeast extract, \( 0.02 \% \mathrm{~K}_{2} \mathrm{HPO}_{4} \), \( 0.002 \% \mathrm{MgSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}\), \(0.001 \% \mathrm{FeSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}\) \(0.001 \%\) \(\mathrm{MnSO}_{4} \cdot 5 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 를 증류수에 녹여 멸균한 후 사용하였다. 시료분말을 \( 80 \% \) 메탄올로 추출한 후 여과한 다음 농축하여 시료로 사용하였다.</p><p>Catechin 및 quercetin은 Aldlich Co.에서 구입하여 사용하였다.</p><h2>실험 동물 및 사료 조성</h2><p>본 실험에 사용된 Sprague-Dawley(SD)계 수컷 rat는 화학 연구소에서 분양받아 2주 이상 실험 사육장의 환경에 적응시킨 후 7마리씩 4군으로 나누어 삼양 유지의 기본사료(control group)로써 사육하면서 데두 발효식품 농축액을 SD계 rat에 하루 200 및 \( 500 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 씩 각각 사료에 첨가하여 사육하였다. SD 수컷 rat는 몸무게 \( 200 \sim 220 \mathrm{g} \)의 암컷, 8주령 되는 것을 사용하였고, 동물 사육실은 항온 항습 \( \left(22 \pm 2^{\circ} \mathrm{C}, 65 \pm 2 \% \mathrm{RH}\right) \) 하에서 삼양유지의 마우스용 pellets 사료를 주었으며, 물은 자유롭게 먹게 하고, 12시간 cycle의 조건하에서 실험하였다.</p><h2>Superoxide dismutase(SOD) 활성 측정</h2><p>SOD의 활성 측정은 Fridovich 방법에 준해서 측정하였다. Xanthine/xanthine oxidase 반응으로 생성된 sup-eroxide anion에 의해 cytochrome c가 환원되는 것을 측정하였고, SOD에 의하여 superoxide anion의 양이 감소하여 cytochrome c의 변화속도가 감소하는 것으로 SOD 활성을 측정하였다.</p><p>Cyochrome c, \( 38 \mathrm{mg}\), \(2 \mu \mathrm{M} \) xanthine \( 10 \mathrm{~mL}(0.001 \mathrm{~N} \mathrm{NaOH})\), \(50 \mathrm{mM} \) sodium phosphate buffer \( (\mathrm{pH} 7.8,0.1 \mathrm{mM} \) EDTA) \( 100 \mathrm{~mL} \) 를 혼합한 기질액 \( 2 \mathrm{~mL} \) 에 희석한 시료를 넣고 2분간 안정화 시킨 후 xanthine oxidase \( (0.2 \mathrm{unit} / \mathrm{mL} \), \( 0.1 \mathrm{mM} \) EDTA) \( 50 \mu \mathrm{L} \) 를 cuvette에 넣고 혼합하여 spec-trophotometer(UV-2100, Shimazu cO. Japan)를 이용하여 \( 550 \mathrm{~nm} \) 에서 2분간 흡광도를 측정하였다.</p><h2>Peroxide value(POV) 측정</h2><p>시료의 지질 과산화물 생성 억제 효과를 linoleic acid를 기질로 사용하여 Nose의 방법에 따라 POV를 측정하였다. Linoleic acid \( 100 \mu \mathrm{L} \) 와 각 시료 \( (5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) 10 \mu \mathrm{L} \)를 \( 1.6 \mathrm{~cm} \times 6 \mathrm{~cm} \) 의 시험관에 넣어 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 항온기에서 24시간 저장하여 산화를 촉진시킨 후 chloroform/acetic acid(2:3, \( \mathrm{v} / \mathrm{v}) 35 \mathrm{~mL} \) 를 첨가하고 1분간 격렬하게 혼합한 후 암소에서 5분간 방치시키고, 여기에 증류수 \( 75 \mathrm{~mL} \) 와 전분 시액 1 \( \mathrm{mL} \) 를 첨가하고, \( 0.01 \mathrm{~N} \) sodium thiosulfate 용액으로 요오드를 역적정하여 POV를 측정하였다.</p>
실험에 사용된 SD 수컷 rat의 몸무게 조건은 얼마인가요?
\( 200 \sim 220 \mathrm{g} \)