<h2>결과 및 고찰</h2><h3>화합물 구조결정</h3><p>구조 동정을 위해 \( { }^{1} \mathrm{H},{ }^{13} \mathrm{C} \) NMR 및 \( 2 \mathrm{D} \mathrm{NMR} \) (HMQC, \( \mathrm{HMBC}, \mathrm{COSY})(400 \mathrm{MHz} \) 및 \( 500 \mathrm{MHz}) \) 을 측정하였으며, 분광학적 데이터와 문헌을 비교하여 화합물을 IQC으로 확인하였다.</p><h3>Elastase 저해활성 측정 결과</h3><p>어리연꽃 정제물인 \( \mathrm{IQC} \) 의 elastase 활성 억제 효능을 평가한 결과\( 5,10,50,100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 각각 \( 2.7,11.9,22.3,38.3 \% \) 의 억제 활성을 나타내었으며, 이는 대조군인 epigallocatechin gallate (EGCG)보다는 낮지만 비교적 우수한 억제 활성으로 확인되었다.</p><h3>MTT assay에 의한 세포 독성 측정 결과</h3><p>본 실험에 사용된 \( \mathrm{IQC} \) 의 세포독성 및 실험 농도를 설정하기 위해 MTT assay를 수행하였다. CCD-986sk cell에서 독성 측정을 위해 \( 0.5,1,5,10,20 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도로 처리를 하였고 측정 결과는 Fig. 3과 같다. 세포 생존율은 위의 농도에서 각각 \( 99 ,95,93,85,73 \% \) 의 생존율을 보여주었고 이것을 바탕으로 실험 농도는 \( 0.5,1,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 로 설정하였다.</p><h3>ROS 생성량 측정 결과</h3><p>\( \mathrm{ROS} \) 는 피부내에서 주름과 관련된 전사인자들을 활성화 시킨다.이러한 이유로 \( \mathrm{ROS} \) 를 억제하는 것은 피부노회를 방어하기 위한 주요 방법 중 하나이다. 따라서 \( \mathrm{IQC} \) 의 \( \mathrm{UVB} \) 조사에 따른\( \mathrm{ROS} \) 의 생성량을 측정하였으며 결과는 Fig. 4와 같다. UVB를 처리한 대조군(Cont)은 비처리군(Nor)보다 \( \mathrm{ROS} \) 의 생성양이 증가하였으며, \( \mathrm{IQC} \) 를 \( 0.5,1,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도로 처리한 경우 농도 의존적으로 \( \mathrm{ROS} \) 생성양이 감소되는 것을 확인할 수 있었다.</p><h3>Procollagen 및 MMP-1 분비량 측정 결과</h3><p>UVB에 의한 피부 노화는 procollagen의 생성감소와 collagen 양 감소를 유발하는데, 이에 CCD-986sk cell에서 \( \mathrm{IQC} \) 처리에 의한 propeptide와 MMP-1의 분비량을 측정하였다. 측정은 procollagen type I C-peptide kit와 MMP-1 ELISA kit를 사용하였으며 procollagen은 \( 0.5,1,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도에서 처리군과 비교하였을 때 \( 1,3,10 \% \) 의 생성율 증가를 보여주었고, MMP-1은 동일 농도에서 \( 7,12,27 \% \) 의 감소효과를 나타내었다. 반면 기존에 보고된 연교추출물은 procollagen 합성율이 10 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 에서 약 \( 3 \% \), MMP-1은 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 에서 \( 32.7 \% \) 의 억제활성을 보여 상대적으로 낮은 농도에서 높거나 비슷한 활성을 보인 IQC가 우수함을 확인하였다.</p><h3>세포내 Procollagen 및 MMP-1 단백질 발현량 측정 결과</h3><p>피부 노화의 톡성은 탄력 감소, 주름, 기미 등을 들 수 있고,그 원인은 탄력섬유인 collagen과 elastin, hyaluronic acid의 사슬 절단 및 비정상적인 교차결합이다. 따라서 피부 구성 물질인 collagen, elastin 등의 분해를 유발하는 MMPs의 생합성을 억제하는 것은 중요하다. 이에 procollagen 및 MMP-1의 세포내 protein 발현을 확인하였고 결과는 Fig. 6과 같다. Procollagen의 protein 합성율은 \( 0.5,1,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도에서 처리군과 비교하였을 때 \( 59,62,70 \% \) 의 높은 합성율 증가를 나타내었으며 EGCG \( (20 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) 는 \( 82 \% \) 로 나타났다. MMP-1 protein의 발현 율은 처리군과 비교하여 \( 0.5,1,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 순으로 각각 \( 17,25 ,41 \% \) 억제하였고 positive control인 EGCG \( (20 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) 와 비슷한 활성을 보여주었다. 반면 블랫초크베리 분획물은 MMP-1의 protein 발현이 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 에서 \( 30 \% \) 정도로 나타났고, procollagen 합성율은 동일한 농도에서 \( 70 \% \) 로 확인되었다. 위 결과로 보아 어리연꽃 정제물인 \( \mathrm{IQC} \) 는 우수한 화장품 소재로서 이용 가치가 있다고 사료된다.</p>
피부 구성 물질인 collagen, elastin 등의 분해를 유발하는 MMPs의 생합성을 억제하는 것은 중요해?
YES