<h1>재료 및 방법</h1><h2>공시식물</h2><p>강낭콩(Phaseolus vulgaris L.) 종자를 1 일간 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 의 광 상태에서 발아시킨 후, \( 1 \mathrm{~kg} \) 의 배양상토 (\( \mathrm{N}: \mathrm{P}_{2} \mathrm{O}_{5}: \mathrm{K}_{2} \mathrm{O}= 0.21: 0.41: 0.38\)) 를 담은 플라스틱 포트에 1 개체씩 파종하여 인공기상실에서 생육시켰다. 인공기상실 내의 온도는 낮(7시~18시)이 \( 28^{\circ} \mathrm{C} \), 밤(18시~7시)이 \( 20^{\circ} \mathrm{C} \) 였으며, 습도는 주 야간 공히 \( 70 \pm 5 \% \)를 유지하였다.</p><h2>UV-B 조사</h2><p>UV-B 조사는 Kim 등에 의해 고안된 자외선 조사 장치를 사용하였다. UV-B 조사장치는 각 처리구 당 8 개의 자외선램프(Toshiba sunlamp, FL 20 SE, Japan)로 구성되어 있다. 자외선램프는 UV-B (\( 280 \sim 320 \mathrm{~nm} \)) 영역뿐만 아니라 UV-C (\( 200 \sim 280 \mathrm{~nm} \))영역의 광도 포함하고 있기 때문에 무처리구에는 \( 0.13 \mathrm{~mm} \) 두께의 Mylar D 필름(DuPont Co., Wilmington, DE, USA)을 램프에 감아 \( 313 \mathrm{~nm} \) 이하의 자외선을 제거하였으며, UV-B 처리구에는 \( 0.13 \mathrm{~mm} \) 두께의 cel-lulose diacetate 필름(Cadillac Plastics Co., Baltimore, MD, USA)을 램프에 감아 \( 290 \mathrm{~nm} \) 이하의 자외선을 제거하였다. 필름은 1주에 1회 교환하였으며 파종 7일후부터 1 일 6시간(10시 ~16시) 씩 3 주간 UV-B 조사 실험을 수행하였다. 자외선 램프와 식물체와의 간격은 식물 생장에 맞추어 \( 40 \mathrm{~cm} \) 를 유지시켰다. UV-B의 강도는 분광방사계(MSR-7000, OptResearch Co., Tokyo, Japan)로 측정하여, Caldwell에 의해 제시된 UV-B 의 생물학적 영향량(UV- \( \mathrm{B}_{\mathrm{BE}} \), biologically effective UV-B)으로 환산하여 나타내었다.</p><h2>생장측정</h2><p>3 주간의 UV-B 처리 후 각 처리별 6개체를 수확하여 초장, 건물중 및 엽면적을 조사하였다.</p><h2>Malondialdehyde (MDA) 함량 측정</h2><p>MDA 함량은 Heath와 Packer의 방법에 따라 \( 1 \mathrm{~g} \) 의 제 3 본엽을 채취하여 \( 6 \mathrm{ml} \) 의 증류수를 넣어 마쇄한 후, \( 20 \% \) tri-chloroacetic acid와 \( 0.5 \% \) thiobarbituric acid로 반응시킨 후, \( 532 \mathrm{~nm} \) 와 \( 600 \mathrm{~nm} \) 에서의 흡광도를 조사하여 그 함량을 측정하였다.</p><h2>Ascorbic acid 및 glutathione 함량 측정</h2><p>약 \( 10 \mathrm{~cm}^{2} \) 의 제 3본엽을 채취하여 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 methaphos-phoric acid 용액으로 추출하여 Bolin과 Book의 방법에 의해 환원형인 ascorbic acid (AsA)와 산화형인 dehy-droascorbic acid (DHA)의 함량을 측정하였다. Glutathione 함량은 Law 등의 방법에 따라 환원형 gluta-thione (GSH) 및 산화형 glutathione (GSSG)의 함량을 측정하였다.</p><h2>Polyamine 분석</h2><p>Polyamine 함량은 \( 1 \mathrm{~g} \) 의 제 3본엽을 채취하여 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 \( 0.5 \mathrm{M}\) \(\mathrm{HClO}_{4} \) 를 넣어 추출한 후, Flores와 Galston의 방법에 따라 HPLC(Shimadzu LC-6A)를 이용하여 분석하였다.</p><h2>Fatty acid 분석</h2><p>약 \( 1 \mathrm{~g} \) 의 건조 시료를 \( 40 \mathrm{ml} \) 의 ethyl ether와 표준물질로서 \( 10 \mathrm{mg} \) 의 tridecanoic acid (\( \mathrm{C}_{13.0} \)) 를 넣고 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 5시간 동안 진탕한 후, \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 감압 농축하였다. 농축된 시료를 Metcalfe 등의 방법에 따라 메틸화시킨 후 GC (Shimadzu GC-9A)를 이용하여 분석하였다.</p>
농축된 시료를 Metcalfe 등의 방법에 따라 메틸화시킨 후 무엇을 이용하여 분석하였는가?
GC (Shimadzu GC-9A)