<h1>결 과</h1><h2>균사의 생장</h2><p>배지별 균사생장속도는 Yamanaka배지가 균총의 직경이 \( 54.3 \pm 3.6 \mathrm{~mm} \) 로 가장 양호했으며, PDA백지도 \( 52.8 \pm 3.3 \mathrm{~mm} \) 로 거의 동일한 수준으로 양호하였다. MEA배지와 GPB배지는 \( 29.3 \pm 2.6 \mathrm{~mm} \) 과 \( 30.3 \pm 2.1 \mathrm{~mm} \) 으로 비교적 저조하였으며 YM 배지의 경우는 \( 8.3 \pm 1.7 \mathrm{~mm} \) 으로 거의 성장하지 못하였다. \( \mathrm{pH} \) 별 균사생장속도는 \( \mathrm{pH } 6 \) 의 경우가 고체배지에서 균총직경 \( 69.5 \pm 1.7 \mathrm{~mm} \), 액체 배지에서 균사건중량 \( 39 \mathrm{mg} \) 으로 가장 양호하였으며 \( \mathrm{pH} 7,8 \)의 경우 고체배지에서 \( 65.8\pm 3.3 \mathrm{~mm} \), 액체배지에서 \( 31 \mathrm{mg} \) 과 고체배지에서 \( 47.0 \pm 6.9 \mathrm{~mm} \), 액체배지에서 \( 16 \mathrm{mg} \) 으로 \( \mathrm{pH} 6 \) 에 비하여 조금 둔화된 생장을 보였다. \( \mathrm{pH} 5 \) 에서는 고체배지에서 \( 41.8 \pm 0.9 \mathrm{~mm} \), 액체배지에서 \( 26 \mathrm{mg} \) 으로 \( \mathrm{pH} 8 \) 과 비슷하였으나, \( \mathrm{pH} 4 \) 의 경우는 전혀 생장하지 못하였다. 탄소원의 변화에 따른 균사의 생장 속도는 다당류인 starch를 탄소원으로 첨가한 배지가 고체 배지의 경우 균총의 직경이 \( 46.8 \pm 1.7 \mathrm{~mm} \), 액체배지의 경우 균사의 건중량이 \( 65 \mathrm{mg} \) 로 가장 양호하였고, 그 다음은 이당류인 sucrose를 탄소원으로 첨가한 배지가 \( 39.3 \pm 2.8 \mathrm{~mm} \), \( 42 \mathrm{mg} \) 이었으며, 단당류인 glucose의 경우 \( 19.9 \pm 2.2 \mathrm{~mm} \), \( 23 \mathrm{mg} \) 으로 생장이 저조하였다. 질소원의 변화에 따른 균사 생장속도는 유기태질소원인 yeast extract와 복합질소원인 peptone을 질소원으로 첨가한 배지가 고체배지에서의 균총의 직경이 \( 31.0 \pm 3.2 \mathrm{~mm} \), 액체 배지에서의 균사의 건중량 \( 43 \mathrm{mg} \) 과 균총직경 \( 24.5 \pm 1.7 \mathrm{~mm} \), 균사건중량 \( 32 \mathrm{mg} \) 으로 양호하였고, 무기태질소원 중 암모늄태인 ammonium tartrate 를 질소원으로 첨가한 배지에서는 균총직경 \( 18.8 \pm 1.7 \mathrm{~mm} \), 균사건중량 \( 8 \mathrm{mg} \) 으로 생장이 저조하였다.</p><h2>DNA의 RAPD pattern</h2><p>민자주방망이버섯의 경우는 Primer OPA-02, 03, 04, 07, 08, 09, 10 에서 2\(\sim\)5개의 밴드를 나타내었으며 증폭된 단편의 크기는 \( 450 \sim 2500 \mathrm{bp} \) 이었고 OPA-05, 06, 12에서는 증폭된 밴드를 나타내지 않았다.</p><p>비교종인 느타리버섯의 경우는 Primer OPA-04, 05, 07, 08, 09, 10, 12 에서 2\(\sim\)6개의 밴드를 나타내었으며, 증폭된 단편의 크기는 \( 450 \sim 2000 \mathrm{bp} \) 였으며, OPA-02, 03, 06에서는 증폭된 밴드가 관찰되지 않았다.</p><h1>고 찰</h1><p>배지에 따른 균사의 생장속도비교실험 결과, Yamanaka 배지에서 가장 좋은 성장을 보였는데, 이 배지는 여러 가지 미량원소들을 함유하고 있어서, 균근성버섯에 대한 적정배지로 보고되고 있으므로 낙엽분해성 또는 일부수종에서 균근성으로 보고된 민자주방망이버섯의 균사배지로 적합한 것으로 보인다. \( \mathrm{pH} \) 에 따른 균사의 생장속도 비교 실험 결과 \( \mathrm{pH} 6\) 에서 가장 양호한 생장을 보여 주었는데, 이는 같은 속의 Lepista sordida가 \( \mathrm{pH} 6 \) 에서 균사생장이 가장 양호하다는 보고와 일치된 결과를 보여주고 있다. 그러나 \( \mathrm{pH} 7 \) 과 8 에서의 생장도 비교적 양호하고 배양초기 부터 균사가 특유의 연보라색을 띠고 있어 민자주방망이버섯은 초기 \( \mathrm{pH} \) 가 중성과 약알칼리에서도 생장이 가능한 사실과, 초기 \( \mathrm{pH} \)가 높을수록 균사의 색깔이 일찍 발현되는 현상이 관찰되었다. 질소원에 따른 균사생장속도비교실험의 결과, yeast extract에서 가장 좋은 생장을 보이고 ammonium tartrate에서 가장 저조한 생장을 보였는데, 이로 미루어 볼 때 민자주방당이버섯의 경우는 무기태질소원보다 유기태질소원의 이용이 용이한 것으로 보여진다. 이는 같은 과에 속하는 송이버섯의 균사생육에 yeast extract가 가장 양호한 결과를 나타내었다는 보고와 일치한 결과를 보인다. 탄소원과 질소원의 배지내 적정비율에 대한 실험은 실시하지 못하였는데, 이 또한 균사의 생장에 중요한 변수 중의 하나이므로 이에 대한 실험을 보강하여야 할 것으로 사료된다.</p><p>RAPD의 결과, 느타리버섯속과 자주방망이버섯속을 유전적다형성에 의한 분류에서 유사군으로 분류한 보고와는 달리 primer에 따른 밴드패턴이 상이한 점을 발견하였는데, 이는 본 실험에서 사용한 primer의 수가 적어서 확인에 어려움이 있으므로, 가능한 한 많은 수의 primer와 sample을 이용한 RAPD 분석을 실시하여 유사도지수분석을 통해 확인을 해야 할 것으로 생각된다. 또한 실험에 사용한 민자주방망이버섯은 채집한 균주이므로 공시균주와의 RAPD를 통한 PCR band pattern 비교분석과, 차후 자실체와 균사의 DNA를 PCR-RAPD band pattern의 비교분석을 통하여 확인해 볼 필요가 있다.</p><h1>요 약</h1><p>민자수방망이버섯 균사의 배양특성을 알아보기 위하여 PDA, YM, MEA, GPB, Yamanaka의 5종의 배지를 사용하여 배양한 결과, 균근성버섯의 적정배지로 보고된 바 있는 Yamanaka배지에서 가장 양호한 성장을 보여 주었다. \( \mathrm{pH} \) 별 균사생장속도를 알아보기 위하여 \( \mathrm{pH} 4,5,6,7,8 \) 의 조건으로 배양실험을 실시한 결과 \( \mathrm{pH} 6\) 이 가장 양호하였으며, 적정탄소원에 대한 실험에서는 glucose, sucrose, starch 중 starch를 탄소원으로 첨가한 배지에서 가장 왕성한 성장을 보여 주었다. 적정질소원에 대한 실험에서는 ammonium tartrate, yeast extract, peptone, asparagine 중 yeast extract와 peptone을 첨가한 배지에서 성장이 활발하므로 유기태질소원의 이용이 용이한 것으로 보인다. 유전적특성을 조사하기 위하여 RAPD분석을 시행한 결과, 느타리버섯속과 자주방망이버섯속의 비교에서 primer에 따른 밴드 패턴의 상이한 점을 발견하였다.</p>
배지별 균사생장속도가 가장 양호한 배지는 무엇인가요?
Yamanaka배지