<h2>종양억제 유전자 p53 및 Cdk inhibitors의 발현에 미치는 TSA의 영향</h2><p>Cdk inhibitors는 cyclin/Cdk 복합체와 결합하여 그 활성을 억제하는 것으로 알려져 있는데, 특히 CIP/ KIP군에 속하는 p21은 종양 억제유전자인 p53에 의하여 활성화되어 \(\mathrm{G}1\)기 뿐만 아니라 \(\mathrm{G2}/\mathrm{M}\)기를 포함한 전체 세포주기의 진행을 억제하는 주요한 조절인자이다. Cdk inhibitor p21의 전사활성에는 p53이 관여하는 것이 일반적이지만 암세포의 종류나 항암제 및 후보물질의 종류에 따라서 p53 비의존적인 경로를 통하여 p21이 활성화된다고도 알려져 있다. 그러나 p16의 경우 일반적으로 \(\mathrm{G}1\)기 arrest에만 관여하는 것으로 알려져 있으며, p27 역시 \(\mathrm{G}1\)기 arrest에 중요하지만 부분적으로 \(\mathrm{G}2/\mathrm{M}\)기 arrest에도 관여할 수 있는 것으로 보고되어지고 있다. 따라서 본 연구에서는 TSA의 처리에 의한 인체 폐암세포의 증식억제가 종양 억제유전자인 p53 및 p21 그리고 p27 과 같은 Cdk inhibitors들의 관련 여부를 조사하였다. Fig. 5A및 B의 결과에서 알 수 있듯이 종양 억제유전자인 p53의 경우 전사수준에서의 큰 변화 없이 \( 50 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 및 \( 100 \mathrm{ng} / \mathrm{mlM} \) 처리군에서 부분직인 단백질의 축적 현상을 관찰할 수 있었으나 TSA 처리 농도 의존적으로 발현 자체가 증가하는 것은 아닌 것으로 판단된다. 조사된 Cdk inhibitor 중에서 CIP/KIP 군에 속하는 p27 및 p21의 경우 TSA가 처리된 배지에서 배양된 세포에서 전체적으로 처리 농도 의존적으로 높게 나타났다. 특히 TSA에 의한 p21의 전사 및 번역 수준에서의 발현 증가 현상은 다양한 인체 암세포주롤 대상으로 한 선행 연구의 결과와도 유사한 결과였으며, 전사 수준에 관한 연구의 결과들에서 아마도 p21의 promoter 영역 중 전사조절인자 Sp-1의 결합부위가 중요한 조절영역으로 추정되어진다. 아울러 다양한 유전자의 promoter에 존재하는 Sp-1 결합부위의 활성은 세포주기 교란뿐만 아니라 apoptosis 유발에도 중요한 영향을 줄 것으로 추정 되어진다. 또한 A549 폐암세포에서 TSA 처리에 의한 p27의 발현 증가 역시 간암세포 등에서 관찰된 것과 유사한 결과였다. 본 연구에 사용된 A549 폐암세포주는 Cdk inhibitor의 INK4 군에서 가장 중요한 p16 유전자가 결손된 세포주이므로 TSA에 의한 p16의 발현변화를 조사할 수는 없었지만 대장암세포를 대상으로 한 연구에서 TSA의 처리에 의한 \(\mathrm{G}1\) arrest 유발과정에 p16의 발현이 매우 유의적으로 증가되었으며, INK4 군에 속하는 Cdk inhibitor 중의 하나인 p15 유전자는 p21이 결손된 암세포주에서 TSA에 의한 대장암 증식억제에 중요한 역할을 한다는 점 등을 고려할 때, TSA 처리에 의한 인체암세포의 증식 억제는 세포주기 전반에 걸쳐 세포증식에 관여하는 유전자들의 발현을 억제시키면서 Cdk inhibitors와 같은 세포 증식 억제 유전자들의 발현 증가를 통하여 암세포의 증식 억제를 유도하는 것으로 생각된다.</p>
p16은 어느 기간에만 관여하는 것으로 알려져 있어?
\(\mathrm{G}1\)기 arrest