<p>위 결과를 바탕으로 본 연구자들은 CP\(1\)에 포함된 luteolin과 apigenin의 배당체를 deglycosylation 시킬 경우, 추출물의 AGI 활성이 증가할 것임을 가정하였고, 이를 증명하기위해 \( \mathrm{CP} 1 \)에 보유중인 해양미생물을 이용하여 생물전환을 실시하였으나 당의 가수분해 산물을 확인하지는 못하였고(data not shown) 추가적으로 염산( \( \mathrm{HCl}) \)을 처리하여 산가수분해를 진행하였다. 탈당화(deglycosylation)에 따른 활성 변화를 조사한 결과, CP\(1\) \( 0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}(61.61 \pm 2.53 \%) \)에 비해 \( 0.5 \mathrm{M} \mathrm{HCl} \)을 통해 탈당화 시료 \( (\mathrm{CP} 1-0.5 \mathrm{M} \mathrm{AH}) \)는 \(93.16\) \( \pm 1.21 \% \)로 \( \mathrm{AGI} \) 활성이 약 \( 32 \% \) 증가하였으며, \( 1 \mathrm{M} \mathrm{HCl} \)을 통해 탈당화 시료(CP\(1\)-\(1\)M AG)는 \( 100.65 \pm 2.24 \% \) 로 약 \( 39 \% \) 증가하였다(Fig. \(4\)).</p><p>또한, 가수분해 반응시료를 HPLC를 통해 분석한 결과, CP\(1\) 내에 존재하던 \( \mathrm{L} 7 \mathrm{AG} \) 및 \( \mathrm{A} 7 \mathrm{AG} \)가 \( \mathrm{L} 7 \mathrm{G} \)와 \( \mathrm{A} 7 \mathrm{G} \)로 탈당화된 것을 확인하였다(Fig. \(5\)). 위의 결과를 통해 탈당화에 의해 \( \alpha \)-glucosidase inhibition 활성이 증가한다는 것을 확인하였다.</p><h1>고 찰</h1><p>본 연구에서 활용한 Sepbox 시스템은 천연물을 거의 순수한 화합물이나 몇 가지 물질의 혼합물로 신속하게 분리하는 시스템이며, \(4\)개의 HPLC 컬럼, \(12\)개의 SPE용 컬럼, 광 산란 검출기 및 \( \mathrm{UV} \) 검출기가 결합되어 있다. 이러한 \( \mathrm{HPLC} / \mathrm{SPE} / \mathrm{HPLC} \) coupling system을 통해 \(20\)시간 이내에 \(288\)개의 \( \mathrm{CP} 1 \) 소분획물을 획득할 수 있었으며, UHPLC-HRMS를 통해 luteolin과 apigenin의 배당체인 \( \mathrm{L} 7 \mathrm{G}, \mathrm{L} 7 \mathrm{AG}, \mathrm{L} 7 \mathrm{AMG} \) 와 \( \mathrm{A} 7 \mathrm{G}, \mathrm{A} 7 \mathrm{AG} \),\( \mathrm{A} 7 \mathrm{AMG} \) 등을 확인하였다. \( \mathrm{CP} 1 \) 은 지표물질이 뚜렷하여 상대적으로 함유량이 낮은 물질을 분석하기가 어려우나, Sepbox system을 이용하여 미량물질들을 빠르고 효과적으로 분리 및 분석할 수 있었다. 이와 같은 Sepbox system은 천연물 분리 연구에 적용되어 높은 활용성을 나타낼 것이라 사료된다.</p>
Sepbox 시스템에는 몇 개의 HPLC 컬럼이 존재하는가?
\(4\)개