<h2>활성산소종 제거효소의 활성 측정</h2><ul><li>수퍼옥시드 디스무타아제(SOD)의 활성</li></ul><p>Oyanagui의 방법에 따라 수퍼옥시드 디스무타아제 (superoxide dismutase : SOD)의 활성은 뇌획분을 인산완충용액(\( \mathrm{pH} 8.2 \) )으로 30배로 희석한 용액 \( 0.1 \mathrm{ml} \)에 증류수\( 0.5 \mathrm{ml} \), A시약 \( (52.125 \mathrm{mg} \) of hydroxylamine \( +102.1 \mathrm{mg} \) of hypoxanthine \( 250 \mathrm{ml} \) D.W) \( 0.2 \mathrm{ml}\), B시약 (\( 20 \mu \mathrm{l} \) of xanthine oxidase \( +0.9939 \mathrm{mg} \) ethylene diaminetetraacetic acid \( / 26.7 \mathrm{ml} \) phosphate buffer, \( \mathrm{pH} 8.2 \) \( 0.2 \mathrm{ml} \) 를 첨가·혼합하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C}\) 항온수조에서 40분간 가온한 후 C시약 \( 300\mathrm{mg} \) of sultanilic acid \( +\mathrm{N} \)-1-naphthylethyene diamine acid/ \( 500 \mathrm{ml} \) of \( 16.7 \% \) acetic acid) \( 2.0 \mathrm{ml} \) 를 첨가·혼합하여 실온에서 20분간 방치한 후 분광광도계를 사용, \( 550 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하여 표준검량선에 의해 SOD 활성 (unit/mg protein)을 측정하였다.</p><ul><li>글루타치온 퍼옥시다아제의 활성</li></ul><p>Lawrence와 Burk의 방법에 따라 \( 340 \mathrm{~nm} \)에서 NA-DPH의 감소를 측정하기 위한 방법으로 뇌획분의 cytosol 에서 글루타치온 펴옥시다아제 (GSHPx)의 활성 측정은 인산완충용액 \( (0.3 \mathrm{M} / 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA)으로 10배 희석하여 사용한다. 시험관에 인산완충용액 \( (0.3 \mathrm{M} \) phos-phate buffer with \( 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA, pH 7.2) \( 0.1 \mathrm{ml} \), 증류수 \( 1.295 \mathrm{ml} \),\( 26.56 \mathrm{mM} \) sodium azide 용액 \( \left(86.33 \mathrm{mg}\right. \) of \( \mathrm{NaN}_{3} / 50 \mathrm{ml} \) of D.W) \( 0.5 \mathrm{ml}, 294.37 \mathrm{mM} \) GSH용액(452.34 mg of glutathione \( / 5.0 \mathrm{ml} \) of \( 0.3 \mathrm{M} \) phosphate buffer with 4,0\( \mathrm{mM} \) EDTA) \( 60 \mu 1,8.4 \mathrm{mM} \) NADPH( \( 35.0 \mathrm{mg} \) NADPH/\(5.0 \mathrm{ml} \) of \( 0.3 \mathrm{M} \) phosphate buffer with \( 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA) \( 110 \mu \mathrm{l} \), glutathione reductase \( (5 \mathrm{mg} \) of GSH-Re \( / 1.0 \mathrm{ml} \) of \( 0.3 \mathrm{M} \)phosphate buffer with \( 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA) \( 5 \mathrm{ml}, 1 \mathrm{mM} \) hydroperoxide \( 320 \mu \mathrm{l} \)와 희석된 cytosol \( 30 \mu \mathrm{l} \)를 첨가하여 혼합한 후, 분광광도계를 사용하여 \( 340 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 15초 간격으로 2분간 측정하여 표준검량선에 의해 GSHPx(IU/g protein)활성을 계산하였다.</p><ul><li>분석결과의 통계처리</li></ul><p>본 연구의 모든 실험결과는 통계 처리하여 평균치와 표준편차를 계산하였으며, 각 실험군간의 유의성 검정은 Student's t-test로 실시하였다.</p>
글루타치온 퍼옥시다아제의 활성 측정 과정은 무엇인가?
뇌획분의 cytosol 에서 글루타치온 펴옥시다아제 (GSHPx)의 활성 측정은 인산완충용액 \( (0.3 \mathrm{M} / 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA)으로 10배 희석하여 사용한다. 시험관에 인산완충용액 \( (0.3 \mathrm{M} \) phos-phate buffer with \( 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA, pH 7.2) \( 0.1 \mathrm{ml} \), 증류수 \( 1.295 \mathrm{ml} \),\( 26.56 \mathrm{mM} \) sodium azide 용액 \( \left(86.33 \mathrm{mg}\right. \) of \( \mathrm{NaN}_{3} / 50 \mathrm{ml} \) of D.W) \( 0.5 \mathrm{ml}, 294.37 \mathrm{mM} \) GSH용액(452.34 mg of glutathione \( / 5.0 \mathrm{ml} \) of \( 0.3 \mathrm{M} \) phosphate buffer with 4,0\( \mathrm{mM} \) EDTA) \( 60 \mu 1,8.4 \mathrm{mM} \) NADPH( \( 35.0 \mathrm{mg} \) NADPH/\(5.0 \mathrm{ml} \) of \( 0.3 \mathrm{M} \) phosphate buffer with \( 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA) \( 110 \mu \mathrm{l} \), glutathione reductase \( (5 \mathrm{mg} \) of GSH-Re \( / 1.0 \mathrm{ml} \) of \( 0.3 \mathrm{M} \)phosphate buffer with \( 4.0 \mathrm{mM} \) EDTA) \( 5 \mathrm{ml}, 1 \mathrm{mM} \) hydroperoxide \( 320 \mu \mathrm{l} \)와 희석된 cytosol \( 30 \mu \mathrm{l} \)를 첨가하여 혼합한 후, 분광광도계를 사용하여 \( 340 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 15초 간격으로 2분간 측정