<h1>결과 및 고찰</h1><h2>활성산소의 생성 억제효과</h2><p>강력한 독성산소로 알려진 활성산소(oxygen radicals)는 농약 등 환경호르몬, 합성의약품의 남용, 흡연, UV나 X-선조사 등이나 체내에서 대사중의 효소반응이나 염증반응에 의해서도 생성되는 것으로 밝혀지고 있다. 이들 활성산소는 조직세포를 공격하여 성인병(chronic degenerative disease)을 유발하고 노화(aging)를 촉진하며 치매(seniledementia) 등의 신경정신질환을 유발할 뿐만 아니라 암(cancer)까지도 유발한다는 사실이 밝혀져 있다.</p><p>뇌조직의 활성산소중에서 가장 강력한 히드록시 라디칼\( (\cdot \mathrm{OH}) \)및 수퍼옥시드 라디칼 \( \left(\mathrm{O}_{2}{ }^{\prime}\right) \)의 생성에 미치는 뽕잎추출물(MLE)의 영향을 비교하여 보면 Table 1과 같다.Table 1에서 뇌조직중의 mitochondria 및 microsome획분은 다같이 \( \cdot \mathrm{OH} \) 라디칼의 생성을 매우 효과적으로 억제하고 있었다. Mitochondria 획분에서는 MLE-100 및 MLE-300 투여그룹의 \( \cdot \mathrm{OH} \) 생성이 \( 10.40 \pm 0.84 \) 및 \( 9.47 \pm 0.86 \) \( \mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein/min으로서 대조그룹 \( (12.01 \pm 0.84 \mathrm{nmol} / \)\( \mathrm{mg} \) protein/min : \( 100 \% \) ) 대비 각각 \( 13.4 \% \) 및 \( 21.1 \% \) 의 유의적인 \( \cdot \mathrm{OH} \) 라디칼의 생성 억제효과가 인정되었다.</p><p>그렇지만, mirosome획분에서는 MLE-100 및 MLE-300 투여그룹의 \( \cdot \mathrm{OH} \) 생성이 \( 7.99 \pm 0.66 \) 및 \( 7.86 \pm 0.61 \mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \)\( \operatorname{protein} / \mathrm{min} \)으로서 대조그룹 \( (9.08 \pm 0.94 \mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein/min : 100%) 대비 각각 \( 12.0 \% \) 및 \( 13.4 \% \) 의 \( \cdot \mathrm{OH} \) 라디칼의 생성 억제효과가 인정되었다. 또한 뇌조직의 cytosol 획분의 superoxide radical \( \left(\mathrm{O}_{2}{ }^{\circ}\right) \)의 생성 억제효과는 MLE- 100 투여그룹에서는 거의 유의적인 효과를 기대할 수 없었지만,MLE-300투여그룹에서는\( 12.4 \% \)의 매우 효과적인 \( \mathrm{O}_{2} \) 생성 억제효과가 인정되었다.</p><p>이러한 사실은 뇌조직중에서도 뽕잎 추출물 투여에 의하여 \( \mathrm{O}_{2} \) 라디칼의 생성 뿐만 아니라 \( \cdot \mathrm{OH} \) 라디칼의 생성도 매우 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 사료된다.</p><h2>산화적 스트레스의 평가</h2><p>활성산소의 공격목표는 조직세포중의 지질 성분의 공격에 의한 과산화지질(lipid peroxide : LPO)의 생성, 단백질 성분의 공격에 의한 산화단백질(oxidized protein : OP )의 생성 및 핵산의 공격에 돌연변이의 셍성 등을 들 수 있다.따라서 이들 산화적 스트레스의 평가는 LPO는 말론디알데히드(malondialdehyde : MDA), 산화단백질은 카르보닐그룹 \( (>\mathrm{C}=\mathrm{O}\) \( \mathrm{group}) \) 의 측정 및 핵산의 산화는 8-OHdG의 생성량을 측정하여 평가할 수 있다.</p><ul><li>과산화지질의 생성 억제 효과</li></ul><p>세포막의 지질이 활성산소의 공격을 받아 산화될 때 생성되는 LPO는 강력한 세포독성 때문에 성인병(chronic de -generative disease)과 노화(aging)의 지표물질로 알려져 있다. 뽕잎 추출물의 투여에 의한 뇌조직중의 LPO의 생성에 미치는 영향을 비교하여 보면 Table 2와 같다.</p><p>뇌조직 획분중의 LPO의 생성에 미치는 뽕잎 추출물(MLE) 투여의 영향을 비교하여 보면 하루에 MLE-100 및MLE- \( \ 300\mathrm{mg}/\mathrm{kg} \) BW로써 6주동안 투여한 결과, 뇌조직의 mitochondria획분에서는 MLE-100 및 MLE-300투여그룹은 \( 10.90 \pm 0.77 \) 및 \( 9.75 \pm 0.69 \mathrm{nmol} \mathrm{mg} \) protein로서 대조그룹\( (11.91 \pm 1.38 \mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \%) \) 대비 각각 \( 91.5 \% \) 및 \( 81.9 \% \)로서 용량의존적으로 각각 \( 8.5 \% \) 및 \( 18.1 \% \)의 LPO의 생성 억제효과가 인정되었다.</p><p>또한 microsome획분에서 MLE-100 및 MLE-300투여그룹은 \( 11.31 \pm 0.95 \) 및 \( 10.73 \pm 0.66 \mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein로서 대조그룹 \( (12.24 \pm 1.01 \mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \%) \) 대비 \( 92.4 \% \)및 \( 87.7 \% \)로서, 용량의존적으로 각가 \( 7.6 \% \) 및 \( 12.3 \% \) 의 LPO의 생성 억제효과가 인정되었다. 사실 뇌조직은 산화적 스트레스에 대하여 매우 민감한 조직이란 사실을 감안한다면 뽕잎 추출물의 투여는 뇌조직의 독성물질로서 LPO의 생성을 매우 효과적으로 억제한다는 사실은 항상성 유지를 위해서도 매우 중요한 의미를 갖고 있다고 평가할 수 있다.</p><ul><li>산화 단백질의 생성 억제 효과</li></ul><p>한편 뇌조직 세포의 단백질 성분이 활성산소의 공격을 받아 생성되는 카르보닐 그룹의 생성에 미치는 뼝잎 추출물의 투여효과를 평가하기 위하여 산화단백질(oxidized protein : OP)의 생성량을 평가하여 본 결과는 Table 3과 같다. Mitochondria획분에서 MLE-100 및 MLE-300그룹의 OP의 생성량은\( 12.84 \pm 0.82 \) 및 \( 11.51 \pm 1.01 \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그룹의 OP의 생성량 \( (13.42 \pm 1.28 \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein : \(100 \% \) 대비 \( 95.7 \% \) 및 \( 85.8 \% \)로서, 각각 \( 4.3 \% \) 및 \( 14.2 \% \)의 OP의 생성 억제효과로서 MLE-300 그룹에서만 유의성이 인정되었다. 또한 microsome획분도 mitochondria획분과는 거의 유사한 경향으로서 MLE-100 및 MLE-300 그룹의 OP의 생성량은 \( 12.83 \pm 1.03 \) 및 \( 12.70 \pm 1.07 \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그룹의 OP의 생성량 \( (14.26 \pm 1.13 \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein\( : 100 \% \) ) 대비 \( 90.0 \% \) 및 \( 89.1 \% \)로서, 각각 \( 10.0 \% \) 및 \( 10.9 \% \)의 OP의 생성 억제효과가 나타났지만, MLE-300 그륩에서만 유의성이 인정되었다. 따라서 뽕잎 추출물은 mitochondria나 microsome획분에서 다같이 MLE-300투여그룹에서 유의적으로 단백질의 산화를 억제할 것으로 기대된다.</p><h3>제거효소의 활성 평가</h3><p>뇌획분중에서 활성산소의 제거효소로서 가장 중요한 수퍼옥시드 디스무타아제(SOD) 및 글루타치온 퍼옥시다아제 (GSHPX)의 활성에 미치는 뽕잎 추출물(MLE) 투여의 영향을 분석하여 보면 Table 4 와 같다. 뇌조직의 mitochondria획분중에서 뽕잎 추출물 MLE-100 및 MLE-300 \( \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) BW투여에 의한 \( \mathrm{Mn}-\mathrm{SOD} \) 의 활성은 \( 21.28 \pm 1.77 \) 및 \( 22.23 \)\( \pm 2.02 \) \(\mathrm{unit} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그릅(18.75 \( \pm 1.47 \) \(\mathrm{unit} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \% \) 대비 각가 \( 13.5 \% \) 및 \( 18.6 \% \) 의 유의적인\( \mathrm{Mn}-\mathrm{SOD} \) 활성의 증가효과가 인정되었다. 또한 뇌조직의cytosol획분중에서 뽕잎 추출물 MLE-100 빛 MLE-300 \(\mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) BW 투여에 의한 \( \mathrm{Cu} / \mathrm{Zn}-\mathrm{SOD} \) 의 활성은 \( 24.22 \pm 1.99 \)및 \( 27.36 \pm 2.02 \) \(\mathrm{unit} / \mathrm{mg} \)protein으로서 대조그룹(23.25士\( 2.45 \mathrm{unit} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \% \) ) 대비 각가 \( 4.2 \% \) 및 \( 17.7 \% \) 로서 MLE-300투여그룹에서만 유의적인 \( \mathrm{Cu} / \mathrm{Zn}-\mathrm{SOD} \) 활성의 증가효과가 인정되었다.</p><p>한편 MLE-100 및 MLE-300투여그룹의 GSHPx의 활성은\( 22.63 \pm 2.27 \) 및 23.93ェ2.17 \( \mathrm{IU} / \mathrm{g} \) protein으로서 대조그룹의\( \mathrm{GSHPx} \) 활성 \( (19.31 \pm 2.05 \mathrm{IU} / \mathrm{g} \) protein : \( 100 \%) \) 대비 \( 117.2 \% \)및 \( 123.9 \% \) 로서, 뽕잎 추출물의 투여에 의하여 각각 \( 17.2 \% \)및 \( 23.9 \% \) 의 매우 효과적인 GSHPx활성의 증가효과가 인정되었다. 생체의 방어호소로서 뇌조직중의 SOD 및 GSHPx의 제거호소의 활성은 \( \mathrm{Mn}-\mathrm{SOD} \) 및 \( \mathrm{Cu} / \mathrm{Zn}-\mathrm{SOD} \) 활성은 매우 호과적으로 증가하였지만, GSHPx활성의 증가효과는 거의 인정할 수 없었다는 사실과는 달리 뇌조직인 경우 뽕잎 추출물에 의하여 GSHPx의 활성을 매우 호과적으로 증가하고 있음을 할 수 있었다. 따라서 간장조직에서와 마찬가지로 뇌조직도 뼝잎 추출물의 활성산소 제거효소의 활성에도 선택적으로 작용하고 있음을 알 수 있었다.</p>
환경호르몬, 흡연, 체내 염증반응 등에 의해 생성되는 강력한 독성산소를 무엇이라 하는가?
활성산소