<h2>미생물의 최소저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC) 측정</h2><p>미생물의 최소저해농도(MIC)는 broth microdilution 방법을 응용하여 다음과 같이 측정하였다. 각각의 시험균을 18시간 배양한 후 세균 배양액을 \( 650 \mathrm{~nm} \)에서 Optical Density (O.D) 값 \( 0.4\left(10^{6} \mathrm{CFU} / \mathrm{ml}\right) \)가 되게 조절한 후 96 well plate (SPL, Korea)에 각 시험균 배양액을 \( 100 \mu \mathrm{m} \) 씩 분주하고, 각 시료를 \( 0,0.10,0.25,0.50,1.00,1.50,2.00 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도로 \( 100 \mu \mathrm{m} \)씩 처리하여 24시간 배양한 후 해홍나물 물 추출물과 메탄올 추출물이 세균의 증식에 미치는 영향은 microplate reader (Bio-Tek Instruments Inc., USA)를 통해 \( 650 \mathrm{~nm} \)에서 측정하여 비교 분석하였다.</p><h2>미생물의 생육저해율 측정</h2><p>해홍나물 부위별 물 추출물과 메탄올 추출물에 대한 미생물의 생육저해율 측정은 각각의 액체 배지 \( 10 \mathrm{ml} \)에 시험균을 18시간 배양 한 후 세균 배양액을 \( 650 \mathrm{~nm} \)에서 O.D 값 \( 0.4\left(10^{6} \mathrm{CFU} / \mathrm{ml}\right) \)가 되게 조절한 후 96 well plate (SPL, Korea)에 분주하고, 각각의 시료를 \( 2 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도로 처리하여 24시간 배양한 후 세균의 증식 저해 정도는 microplate reader (Bio-Tek Instruments Inc., USA)를 통해 \( 650 \mathrm{~nm} \)에서 측정하였다. 생육저해율(\(\%\)) 확인은 다음 식으로 확인하였다. 미생물의 생육저해율은 균의 정지기인 24시간에서 그 값을 측정 하였다.</p><p>Inhibitory effect (\(\%)=\{1 \)-(treatment-treatment blank \( ) / \)(control-control blank) \( \} \times 100 \)</p><h2>B. cereus와 V. parahaemolyticus의 생육곡선 측정</h2><p>해홍나물 부위별 물 추출물과 메탄올 추출물 중 가장 항균활성이 눞게 나타난 뿌리 추출물을 가지고 그람 양성균인 B. cereus와 그람 음성균인 V. parahaemolyticus를 대상으로 추출물 처리 농도에 따른 생육곡선을 측정 비교하였다. B. cereus와 V. parahaemolyticus 생육곡선 측정은 각각의 액체 배지 \( 10 \mathrm{ml} \) 에 시험균을 18시간 배양 한 후 세균 배양액을 \( 650 \mathrm{~nm} \)에서 O.D 값 \( 0.4\left(10^{6} \mathrm{CFU} / \mathrm{ml}\right) \)로 조절한 후 다시 \( 10^{8} \)배 희석하여 96 well plate (SPL, Korea)에 무균적으로 \( 100 \mu \mathrm{l}\) 분주하고, 뿌리 추출물을 well plate (SPL. KOREA)에 \( 0, 0.5, 1.0, 1.5,2.0 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)에 농도로 첨가하고 각각 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \)와 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 24시간 배양하면서 4시간 마다 세균의 증식 정도를 microplate reader (Bio-Tek Instruments Inc., USA)를 통해 \( 650 \mathrm{~nm} \)에서 측정하였다.</p>
각각의 시험균을 몇시간 배양했니?
18시간