<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 재료</h2><p>Chlorella sp.와 rotifer (Brachionus plicatilis)는 국립 남해 종묘 배양장에서 분양 받아 실험실에서 3개월간 배양한 젓을 이용하였으며, 치어는 경상남도 통영시에 위치한 성지실업에서 넙치(Paralichthys olivaceus)의 수정란을 분양 받아 부화 후 실험에 사용하였다.</p><h2>배양조</h2><p>Chlorella sp. 배양조는 투명 acryl plate를 이용하여 \( 30 \mathrm{~cm} \) \( \times 30 \mathrm{~cm} \times 30 \mathrm{~cm} \) 인 배양조를 자체 제작하여 사용하였으며, rotifer 배양조는 \( 2 \mathrm{L} \)용량의 삼각 플라스크를 사용하였다. 또 한 넙치 유생용 배양조 또한 투명 acryl plate를 이용하여 \( 10 \mathrm{cm} \times 10 \mathrm{~cm} \times 25 \mathrm{~cm} \)인 배양조를 자체 제작하여 사용하였며, 배양액의 온도조절은 항온수조를 이용하였다.</p><h2>배양배지</h2><p>Rotifer와 넙치 유생의 배양에 사용된 해수는 부산시 광안리 해변에서 채취한 것을 이용하였으며, 사용하기 전 \( 2 \mu \mathrm{m} \) mesh-filter로 여과 멸균하여 이용하였다. 그리고 Chlorella sp. 의 배양을 위한 배지는 현재 종묘 배양장에서 사용하고 있는 것으로 Table 1에 나타내었다.</p><h2>배양조건</h2><p>Chlorella sp.의 경우 항온수조를 이용하여 배양액의 온도를 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)로 유지하였으며, 할로겐 램프를 이용하여 \( 8,000 \sim~ 12,000 \mathrm{~lx} \) 의 조도를 공급하면서 batch culture로 배양하였다. 그리고 배양액의 원활한 순환과 광합성의 산물인 산소의 축적을 방지하기 위하여 여과된 일반 공기를 공급하였으며, 초기접종농도는 \( 3 \times 10^{6}[ \) \( \mathrm{cells/mL}]\)으로 하였다.</p><p>Rotifer의 경우 온도 \( 25{ }^{\circ} \mathrm{C} \) 로 유지하였으며, \( 3,000 \sim 5,000 \) \( \mathrm{lx} \) 의 조도에서 배양하였는데 이는 예비실험결과 rotifer도 빛을 공급할 경우 성장률이 높았기 때문이다. 이때 원활한 배양액의 순환 및 호홉을 위한 산소의 공급을 위하여 일반 공기를 여과시켜 공급하였다. 한편 rotifer의 초기 접종농도는 \( 5 \mathrm {~[rotifers/mL]} \)였으며, rotifer에 공급되는 먹이는 Chlorella sp.를 사용하였다.</p><p>넙치 유생의 경우에도 항온수조를 이용하여 해수의 온도를 \( 19 \pm 0.5^{\circ} \mathrm{C} \) 로 유지하였고, 명(明期) - 암기(暗期)는 각각 11시간 및 13시간으로 조절하였으며, 이때 명기의 조도는 \( 1,000 \mathrm{~lx} \) 로 고정시켰다. 배양조내 넙치 유생의 배양밀도는 \( 15 \mathrm {~[larvae/L]} \)로 유지하였으며, 넙치 유생의 먹이로 rotifer를 공급하였다.</p><h2>Chlorella sp.와 rotifer의 농도 및 넙치유생의 길이 측정</h2><p>Chlorella sp. 의 농도 측정은 매일 일정한 시간에 배양액 표면에서 \( 10 \mathrm{~cm} \) 깊이에서 3회 채취하였으며, 현미경 (Olympus Co. Ltd., CHS)에서 Hemocytometer (Supereor Co. Ltd.)를 이용하여 계수한 후 평균값을 취하였다. Rotifer의 농도 측정도 매일 일정한 시간에 배양액 표면에서 \( 10 \mathrm{~cm} \) 깊이에서 3회 채취하여 현미경세서 Plankton Counting Chamber를 이용하여 계수한 후 평균값을 취하였다. 넙치 유생의 경우 일반 종묘 배양장에서는 배양액을 계속적으로 공급하고 배출시키지만, 본 실험에.서는 하루에 한번 새로운 해수로 배양액의 4/5를 교체하면서 rotifer 소모량을 구하였다. 그리고, 새로운 해수가 공급될 때 rotifer의 농도는 항상 \( 8\sim12 \mathrm {~[cells/mL}] \) 가 되도록 유지하였다.</p><p>넙치 유생의 길이 측정은 매일 일정한 시간에 무작위로 5개체를 3회 채취하여 현미경에서 접안 마이크로미터(Olympus Co. Ltd)를 이용하이 길이를 측정한 후 평균값을 취하였다.</p>
성지실업은 경상남도 통영시에 있어?
YES