<h2>Cyclins 및 Cdks의 발현에 미치는 TSA의 영향</h2><p>진핵세포에서 세포주기의 진행을 위해서는 세포주기 특이적 양성조절인자인 cyclin의 발현 증가가 우선적으로 이루어져야한다. 즉 mid \(\mathrm{G}\)1에서 D-type cyclin (cyclin \(\mathrm{D}1\), \(\mathrm{D}2\) 및 \(\mathrm{D}3\))의 발현을 필요로 하며, late \(\mathrm{G}1\)에서 \(\mathrm{S}\)기로의 진입을 위해서는 cyclin \(\mathrm{E}\)의 발현이 증가되어야한다. 그리고 S기에서 \(\mathrm{G}2\)기로의 진입 및 \(\mathrm{G}2\)기와 \(\mathrm{M}\)기 진행 동안에는 각각 cyclin \(\mathrm{A}\) 및 B-type cyclin (cyclin \(\mathrm{B}1\) 및 \(\mathrm{B}2\))의 발현이 증가되어야한다. 그리고 이들 cyclin들은 특정 Cdks와 특이적인 결합에 의하여 cyclin/Cdk 복합체를 형성하여 세포주기진행을 조절한다. \(\mathrm{G}1\)기에서는 cyclin Ds가 Cdk4/6와 복합체를 이루고, Cdk2는 cyclin \(\mathrm{A}\)와 결합하여 \(\mathrm{S}\)기와 \(\mathrm{G}2\)기 동안 역할을 하는 반면 Cdc2는 cyclin \(\mathrm{B}1\)과 결합하면 핵막의 histone \(\mathrm{H}1\)과 lamin이 인산화에 의해 kinase 활성이 증가하여 핵막의 붕괴 및 염색체의 재배열이 일어나서 \(\mathrm{M}\)기로 진행이 된다. 따라서 A549 폐암세포에서 TSA의 처리에 따른 세포주기 조절관련 기전을 조사하기 위하여 cyclins 및 Cdks의 발현에 미치는 TSA의 영향을 RT-PCR 및 Western immunoblotting 법으로 조사하였다. Cyclins의 경우, Fig. 3A 및 B의 결과에서 알 수 있듯이 조사된 cyclins 단백질의 대부분이 TSA 처리 농도의존적으로 발현이 감소되었음을 알 있었다. 특히 cyclin \(\mathrm{A}\)의 경우 전사 및 번역 수준에서 동시에 감소되었으나, 전사 수준에서 나머지 cyclins의 발현은 큰 변화가 없는 것으로 보아 TSA 처리에 의한 cyclins 단백질의 발현 감소는 전사 수준 보다는 단백질의 half-life의 감소나 번역 수준에서 더 조절되는 것으로 추정되어진다. 이와 같은 cyclins의 발현에 미치는 TSA의 영향 중 cyclin \(\mathrm{A}\)의 선택적 발현 저하 현상은 Moore 등 및 Wharton 등에 의한 결과와 매우 유사한 것이었다. 그리고 Cdks의 발현에 미치는 TSA의 영향을 조사한 결과는 Fig. 4A 및 B에 나타낸 바와 같이, Cdk2의 경우 TSA 처리 농도 의존적으로 강하게 전사 및 번역 수준에서 발현이 모두 감소되었으나, Cdk4는 mRNA 및 단백질 발현 수준에서 모두 큰 변화가 없었다. 한편 Cdc2 및 Cdk6의 경우 TSA 처리에 따라 mRNA 수준에서는 큰 변화가 없었으나, 단백질 발현은 \( 100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) 농도 이상의 처리군에서는 거의 관찰하기 어려웠다. 따라서 TSA 처리에 따른 A549 폐암세포의 증식억제는 세포주기 양성 조절인자인 cyclins 뿐만 아니라 Cdks 발현 감소와도 직접적인 연관이 있음을 알 수 있었다.</p>
조사된 대부분의 cyclins 단백질이 TSA 처리 농도의존적으로 발현이 증가되었는가?
NO